JPH01105163A - 尿中の塩基性胎児蛋白の測定による癌の検出法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は尿中の塩基性胎児蛋白の測定方法及びそれに用
いる測定キットに関する。

［従来技術］ 塩基性胎児蛋白（Ｂａ５ｉｃ　Ｆｅｔｏｐｒｏｔｅｉｎ
：ＢＦＰと略記）は本発明者の中の一人がヒト胎児の血
清、腸および脳組織中に見出したものであって、侵記の
文献等で既に公知の塩基性蛋白である。既知の胎児蛋白
が酸性蛋白であるのと対照的に、この蛋白は塩基性であ
るところから、特に塩基性胎児蛋白１と呼称される。さ
らに本発明者の中の一人は当該蛋白についてのラジオイ
ムノアッセイ（ＲＩＡと略記）を確立し、血清中におけ
る当該蛋白の測定が癌の診断およびその病状経過、治療
効果の判定に役立つことを知見した。とりわけ当該蛋白
はα−フェトプロティン（ＡＦＰと略記）のように特定
臓器の癌診断しか役立たないものではなく、非癌と癌と
の鑑別診断、すなわち担癌の有無の診断に役立つことが
判明した。

上記従来知見については、下記の列挙する文献（１）〜
（７）を参照されたい。

（１）　　６井　勝ほか：　Ｆｅｔｏ−Ｎｅｏｐｌａｓ
ｔｉｃ　Ａｎｔｉｇｅｎに関する研究。第３４回日本節
学会総会記事、ｐ、１７３　（１９７５）。

（２）　　６井　勝：諸種悪性腫瘍に存在覆る新胎児蛋
白ｂａｓｉｃ　ｆｃｔｏｐｒｏｔｅｉｎに関する研究。

医学のあゆみ、１００（３）、　３４４−３４６　（１
９７７）。

（３）　　６井　勝：ペイシックフェトプロティン（塩
基性胎児蛋白）。医学のあゆみ、１０６（５）。

２７３−２８１　（１９７８）。

（４）　　　ｌ５ｈｉｉ、　Ｈ，：　　Ａ　ｎｅｗ　ｃ
ａｒｃｉｎｏｅｉｂｒｙｏｎｉｃｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｈ
ａｒａｃｔｅｒ＋ｚｅｃ＋　ｂｙ　ｂａｓｉｃ　ｐｒｏ
ｐｅｒｔｙ。

５ｃａｎｄ、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、、　８（Ｓｕｐ
ｐｌ、８）、　６１１−６２０（１９７８）。

（５）　　　ｌ５ｈｉｉ、　Ｈ，：　Ｃｈａｒａｃｔｅ
ｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂａｓｉｃｆｅｔｏｐｒｏｔ
ｅｉｎ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｕｓｅｆｕｌｎｅ
ｓｓ　ｏｆＢＦＰ　ｆｏｒ　ｉｍｎ＋ｕｎｏｄｉａｇｎ
ｏｓｉｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｃａｎｃｅｒ。

Ｃａｒｃｉｎｏ−Ｅｍｂｒｙｏｎｔｃ　Ｐｒｏｔｅｉｎ
ｓ、　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ。

Ｂｉｏｌｏｇｙ、　Ｃｌ１ｎｉｃａｌ　Ａｐｐｌｉｃａ
ｔｉｏｎｓ、　Ｖａｔ、　１゜Ｌｃｈｍａｎｎ、　　Ｆ
、−Ｇ、　（ｅｄ、）、　　Ｅｌｓｃｖｉｅｒ／Ｎｏｒ
ｔｈ−１１ｏ１１ａｎｄ　Ｂｉｏｎ＋ｅｄｉｃａｌ　Ｐ
ｒｅｓｓ、　Ａｎ＋ｓｔｅｒｄａｍ、　３３３−３４０
　　（１９７９）　　。

（６）　　　ｌ５ｈｉｉ、Ｈ，、ＮｉｓｈＮ１５ｈｉ、
に、、　　Ｈａｔｔｏｒｉ、　　＋４．。

Ｋａｎｄａ、Ｙ、　ａｎｄ　Ｔｓｈｉｈａｒａ、Ａ、　
：　Ｐｏ５ｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｓｕｒｖｅｉｌｌａｎ
ｃｅ　　ｉｎ　　ｐａｔｉｅｎｔｓ　　ｗｉｔｈ　　ｓ
ｔｏｍａｃｈｃａｎｃｅｒ　　ａｎｄ　　ｍｏｎｉｔｏ
ｒｉｎｇ　　ｏｒ　　ｉｍｍｕｎｏ−ａｎｄｐｏｌｙｃ
ｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　　ｉｎ　　ｐａｔｉｅｎｔｓ
　　ｗｉｔｈｌｅｕｋｅｍｉａ　ｂｙ　ｂａｓｉｃ　　
ｆｅｔｏｐｒｏｔｅｉｎ、　　Ｃａｒｃｉｎｏ−［ｍｂ
ｒｙｏｎｉｃ　　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ、　　Ｃｈｅｍｉｓ
ｔｒｙ、　　Ｂｉｏｌｏｇｙ。

Ｃｌ１ｎｉｃａｌ　　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、　　
Ｖｏｌ、　　２　　Ｌｃｌｖａｎｎ。

Ｆ、−Ｇ、　　（ｅｄ、）、　　Ｅｌｓｅｖｉｅｒ／Ｎ
ｏ’ｒｔｈ−ｆｌａｔ！ａｎｄＢｉｏｍｅｄｉｃａｌ　
　Ｐｒｅｓｓ、　　＾ｌｌｓｔｅｒｄａｍ、　　６０３
−６０６（１９７９）。

（７）　　　ｌ５ｈｉｉ、Ｈ，：　Ｃｌ１ｎｉｃａｌ　
ｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓ　ｏｆ　ｂａｓｉｃｆｅｔｏｐｒ
ｏｔｃｉｎ　ｆｏｒ　ｉｎｕａｕｎｏｄｉａｇｎｏｓｉ
ｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒ、　　Ｃｏｎ＋ｐｃ
ｎｄｉｕｍ　ｏｆ　　Ａｓ５ａｙ　　ｆｏｒＩｍｍｕｎ
ｏｄｉａｇｎｏｓｉｓ　　ｏｒ　　ｆｌｕｍａｎ　　Ｃ
ａｎｃｅｒ。

口ｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　　ｉｎ　　Ｃｅｎｃｅｒ　　
Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、Ｈｅｒｂｅｒｍａｎ。

Ｒ，Ｂ、　　（ｅｄ、）、　　Ｖａｔ、　　１．　　Ｅ
ｌｓｅｖｉｅｒ／Ｎｏｒｔｈ−Ｈｏｌｌａｎｄ　　Ｂｉ
ｏｍｅｄｉｃａｌ　　Ｐｒｅｓｓ、　　Ｎｅｗ　　Ｙｏ
ｒｋ、　　４５−５０　　（１９７９）　　。

（８）　　第６回腫瘍マーカー研究会（昭和６１年１０
月２０日、札幌）プログラム・抄録集１１１頁（９）　
　第６回腫瘍マーカー研究会（昭和６１年１０月２０日
、札幌）記録２４８〜２５０頁 さて、癌患者血清中のＲＦＰはその存在岳が微量である
ために、その定頃のためには高感度測定法の確立が必要
であり、主としてＲＩＡ法およびＥＩＡ法（酵素免疫測
定法）が開発されてきた。

ＲＩＡ法の詳細については上記文献（３）〜（７）を、
また、ＥＩＡ法の詳細については下記文献（１０）〜（
１１）を参照されたい。

（１０）６井　勝ほか：　Ｂａ５ｉｃ　ｒｅｔｏｐｒｏ
ｔｅ＋ｎ、現代臨床機能検査−その実際と解釈。日本臨
床３７：１５３６〜１５３９．、１９７９゜ （１１）石井　勝：塩基性フェトプロティン（Ｂａｓｉ
ｃＦｅｔｏｐｒｏｔｅｉｎ）。臨床検査２４　（８）：
　９３１〜９３６゜１９８０゜ その後、本発明者はモノクローナル抗塩基性胎児蛋白抗
体を得ることに成功した。当該モノクローナル抗体の作
製並びに成績については下記文献（１２）を参照された
い。

（１２）石井　勝ほか：　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ
　ＨｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉ−Ｂａｓｉｃ　Ｆｅｔ
ｏｐｒｏｔｅｉｎ　（ＢＦＰ）　ａｎｄ　Ｕｓｅｆｕｌ
−ｎｅｓｓ　ｏｆ　Ｈｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ＡｎローＢ
ＦＰ　ｆｏｒ　　Ｉｎ＋ｍｕｎｏ−ｄｉａｇｎｏｓｉｓ
　ｏｆ　Ｈｕｍａｎ　Ｃａｎｃｅｒ、Ｔｕｌｏｒ　Ｒｅ
５ｅａｒｃｈＶｏ１．１８　（Ｓｐｅｃｉａｌ　ｌ５ｓ
ｕｅ）、　１９８３．　　ｐ７５〜８６゜さて、上記モ
ノクローナル抗体のＢＦＰに対する反応特異性について
ＥＩＡ法およびＭＯ法を用いて検討すると、ＲＦＰの分
子上には少なくとも３種のそれぞれ異なる抗原決定基が
存在しており、各抗原決定基に対応してモノクローナル
抗体は３種類に分類されることが判明した。３種の抗原
決定基をＡ、Ｂ、Ｃとし、各抗原決定基に対応するモノ
クローナル抗体を列記すれば、例えば以下のごとくなる
。

抗原決定基　　　モノクローナル抗体 Ａ　　　　　５Ｃ４，５Ｃ５，５Ｃ６，７０１，、に１
３　　　　５８３、５Ｃ２ Ｃ５Ａ２．　５八３．　７０３．　８Ａ２．　７８４゜
５０６−２．　８八１．　７Ａ５．　８Ａ５．　７８６
以上の知見に基づき、本発明者は、これらモノクローナ
ル抗体を使用したサンドイッチ法により、血清中のＢＦ
Ｐを精度よく測定する方法を確立するに至った（特開昭
６０−８０７６８号公報参照）。

［発明が解決しようとする問題点］ しかしながら、以上に紹介した測定は、全て血清中のＢ
ＦＰに関してなされたものである。一方、ＢＦＰが健常
人及び各種疾患患者の尿中で検出されたという証拠はこ
れまでない。

また、従来から知られている腫瘍マーカー、例えば癌胎
児性抗原（ＣＥＡと略記）及びＡＦＰ等は、それらの尿
中の測定値に関して健常人と癌患者の間で有意な差が認
められず、特に泌尿器癌の診断に於いて有効とされる腫
瘍マーカーはこれまでの処知られてない。

本発明者は、健常人及び各種疾患患者の尿中にもＢＦＰ
が存在することを発見し、当該蛋白の腫瘍マーカーとし
ての有用性について種々の検討を行なった結果、本発明
に至ったものである。

［問題点を解決するための手段］ 即ち、本発明の目的は、各種層、特に泌尿器癌の診断及
び治療の経過観察などに極めて有用な測定方法を提供す
るものであり、該測定方法は尿中のＢＦＰを検出するこ
とを特徴とするものである。

本発明の測定方法は免疫学的測定法例えばＥＩＡ法及び
ＲＩＡ法等のいずれも利用できるが、安全性・測定感度
等の点からＥＩＡ法が好ましい。

更に、本発明のより好適な具体例として、第一抗体及び
第二抗体にモノクローナル抗体を使用するサンドイツチ
法によるＥＩＡ法を挙げることができる。

以下、本発明を、好適具体例である前記モノクローナル
抗体を用いるＥＩＡ法（サンドイッチ法）に基づいて詳
細に説明する。

本発明によって測定されるＢ　Ｆ　Ｉ）は臓器特異性の
低いｌ１ｆＩｉ瘍マーカーであることは前記したとおり
である。

本発明に係る抗塩基性胎児蛋白モノクローナル抗体は例
えば次のようにして作製すればよい。まずＢＦＰを感作
ＶしめたＢＡＬＢ／ｃマウスから抗体産生ｌｌｌｌ１１
を用意し、ミエローマ細胞としてＰ３−Ｘ６３−Ａ（１
１８−１１を用いて、これとの間にｌｌｃｒｚｃｎｂｅ
ｒｇらの変法により細胞融合する。次にＨＡＴ培地によ
り選択した融合細胞からの抗体価を　　Ｉ標識したＢＦ
Ｐを用いるプレートパインディングアッセイにより測定
する一り高抗体価を示し、かつ細胞増殖のよい融合細胞
を限界希釈法によりクローニングし、高抗体価を産生す
る細胞株を数種類収得する。

最後に各細胞株をマウス腹腔内に移植し、得られた腹水
を硫安塩析し、透析侵、ＤＥＡＥ−ｃｅｌ　１ｕｌｏｓ
ｅにかけてＩｇＧ成分を集めれば、本発明に係る数種類
のモノクローナル抗体を収得することができる。

得られたモノクローナル抗体をＢＦＰの異なる抗原決定
基に対応して分類するためには下記に示すＭＯ法および
ＥＩＡ法を実施すればよい。

ＭＯ法 二種類のモノクローナル抗体を１＝１の比率をもって混
合したものを全てのモノクローナル抗体の組合せについ
て用意し、ＭＯ法によりこれら混合物とＲＦＰとの間に
おける沈降線の生成並びに融合の有無を観察する。明瞭
な沈降線が観察される場合は組合せに係るモノクローナ
ル抗体はそれぞれ異なる抗原決定基に反応するグループ
に属し、反対に沈降線がまったく観察されない場合は同
じ抗原決定基に反応するグループに属するッまた沈降線
の生成が不明瞭であり、判定が不確実であるときは、次
のＥＩＡ法によって判定する。

ＥＩＡ法 実施例１記載においてに１及び５Ｃ２の代りに任意に選
択した二種類のモノクローナル抗体を使用する点を除い
て実施例１と同様に実施して調製した測定試薬を全ての
モノクローナル抗体の組合せについて用意する。ＥＩＡ
操作をおこない発色値の吸光度を読む。発色がある場合
は組合せに係るモノクローナル抗体はそれぞれ異なる抗
原決定基に反応するグループに属し、反対に発色がない
場合は同じ抗原決定基に反応するグループに属する。

以上のどと＜ＭＯ法およびＪＥＩＡ法によりグループ分
けをおこなうと前記したごと＜ＢＦＰには三種の異なる
抗原決定基があり、モノクローナル抗体はそれぞれに反
応する三つのグループに分類される。

測定系全体の構成要素は固相、固相コート用抗体（第一
抗体’）　、ＢＦＰ　（標準抗原および被検尿）、標識
用抗体（第二抗体）、酵素および基質である。固相とし
てはエンザイムイムノアッセイ用のマイクロタイタープ
レートのウェル又はプラスチックビーズを用いればよい
。測定に先立ち固相コート用抗体（第一抗体）として本
発明に係るモノクローナル抗体の一種を任意に選択し、
蛋白濃度としてのＯＤ　　　　が０．０５０となるよう
に０８０ｒｖ 、１Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液（ｐｔ１９．ｏ）に溶解し
、例えばポリスチロール性エンザイムイムノアッセイ用
ウェル又はプラスデックビーズに入れ、４℃で一夜放置
すれば、固相表面は第一抗体によってコートされる。標
準抗原は肝癌患者から得た腹水を精製処理して精製ＢＦ
Ｐを用意し、標準抗原希釈液を用いて所定の濃度に調製
したものを使用した。

標識用抗体（第二抗体）としては第一抗体が反応する抗
原決定基と異なる抗原決定基と反応する本発明に係るモ
ノクローナル抗体を選択する。また酵素としては例えば
アルカリホスファターゼ。

グルコースオキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、ベータガ
ラクトシダーゼ等を使用することができる。

測定に先立ちゲルタールアルデヒドのごとき結合剤をも
って標識用抗体に酵素を結合せしめて酵素標識抗体とし
、本発明測定方法の実施のための試薬の一部としてあら
かじめ準備しておくことができる。基質は選択した酵素
に応じて適宜使用すればよい。例えば酵素としてアルカ
リホスファターゼを選択した場合においてはｐ−ニトロ
フェニルホスフェート等を使用すればよい。

測定はＥＩＡ法における通常の手順に従って実施すれば
よい。従って後記実施例において示されるごとく、第一
抗体をコートしたウェルに標準抗原または被検尿を加え
てインキュベートし、続いて酵素標識抗体、例えば第二
抗体−アルカリホスファターゼ標識抗体を加えてインキ
ュベートし、最後に基質、例えばｐ−ニトロフェニルホ
スフェートを加えてインキュベートし、基質の分解量を
分光光度計を用いて測定すればよい。

なお、固相にコートすべき第一抗体は単一種のモノクロ
ーナル抗体であってもよいが、複数種のモノクローナル
抗体を混合した物であってもよい。

要は第一抗体と第二抗体とがそれぞれ別個の抗原決定基
と反応する物であればよく、各抗体が単一種のモノクロ
ーナル抗体より構成されるか、あるいは複数種のモノク
ローナル抗体より構成されるかは本発明において特に限
定すべき要件ではない。

以上、モノクローナル抗体を用いる場合について説明し
てきたが、本発明においては、抗体はモノクローナル抗
体に限られず、従来のポリクローナル抗体を用いること
もできる。

従って、本発明のもう一つの目的は、尿中ＢＦＰを測定
するために用いる測定キットを提供することである。該
キットは、第一抗体、標識第二抗体、固相及び標準塩基
性胎児蛋白抗原を含む。

以下に記載する実施例をもって本発明をさらに具体的に
説明する。

実施例 ＢＦＰの異なる抗原決定基にそれぞれ反応する二種類の
モノクローナル抗体に１および５．Ｃ２を含有するマウ
ス腹水各５ａｄ！に飽和硫安（４，０５Ｍ）を最終１１
１ｍＦ　１．８Ｍになるように加え、室温で２時間攪拌
する。内容物を１２，０００　ｒｐＨｌで２０分間遠心
して沈漬と上清を分離する。沈渣を溶解した緩衝液で透
析する。次にＤＥＡＥ−ｃｅｌｌｕｌｏｓｅカラムにか
け、０．１Ｍリン酸緩衝液−（以下ＰＢと略記＞　（１
）ＩＩ　８．０）でＩｇＧ成分を溶出させる。溶出Ｉａ
Ｇ成分をコロジオンバック（Ｍ　Ｗ　１２００Ｇ）で濃
縮し、Ｋ１および５Ｃ２を用意する。に１を０．１Ｍ炭
酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９，０）に蛋白濃度としての
０Ｄ２８０ｒｖが０．０５となるように溶解し、エンザ
イムイムノアツセイ用マイクロタイタープレートのウェ
ルに注入し、−夜放置後排液し、０．１Ｍ炭酸ナトリウ
ム緩衝液（Ｄ１１９．０）で洗浄し、ウェル乾燥機にて
乾燥し、固相化第一抗体とする。

他方、酵素標識抗体の作製は下記によって行った。ゲル
タールアルデヒドを１．２５％含む０．１Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ６，８）にワサビペルオキシダーゼを溶解し、
室温にて２０時間反応させた侵、生食水にて透析する。

この溶液とあらしめ生食水にて透析したモノクローナル
抗塩基性胎児蛋白抗体、５Ｃ２溶液を等釘混和し、これ
に１Ｍ炭酸緩衝液（ｐＨ９，５）を５％の割合になるよ
うに添加し、４℃、２４時間静置する。次いで、０．２
Ｍリジン溶液を５％の割合で加え、室温２時間放置後生
食水にて透析する。その後、０．０５Ｍリン酸緩衝液（
ｐＨ７，４）にて透析し、ワサビペルオキシダーゼＩＩ
Ａ識抗塩旦性胎児蛋白抗体を作製した。

別に反応希釈液２発色液９反応停止液および標準抗原希
釈液を以下のように調製する。

反応希釈液は正常仔牛血清、正常マウス血清（非動化処
理５６℃２３０分間）　、　ＥＤＴ＾３Ｎａ、塩化ナト
リウム、アジ化ナトリウムを０．０５Ｍトリス塩酸緩衝
液（ｐ１１８．ｏ＞中に各々１１．８％、２％、　１０
ｍＭ。

０．１５Ｍ、　　０．１％となるように含有「しめて調
製する。

発色液は２，２゛−アジノビス（３−エチルベンゾチア
ゾリン−６−スルホン酸）ニアンモニウム（八ＢＴＳ）
を０．１Ｍクエン酸緩衝液（ｐＨ４，０）中に３１１ｇ
／ｄとなるように含有せしめ、さらに過酸化水素を０，
０２％の割合になるように加えて調製する。

反応停止液としては０．０１％のアジ化ナトリウムを含
む０．１Ｍクエン酸リす酸ＷＪｒ液（ｐＨ４，０）を用
いる。

標準抗原希釈液は正常仔牛血漬（非動化処理５６℃、３
０分間）　、　ＥＤＴ＾３Ｎａ、塩化ナトリウム、アジ
化ナトリウムを０．０５Ｍ　トリス塩酸緩衝液（ｐＨ８
，０）中に各々１８．１％、　１０ｍＨ，０，１％とな
るように含有せしめて調製する。

まず検体および取卸濃度の標準抗原を反応希釈液によっ
て１１倍希釈し、あらかじめ洗浄したウェルに１００ρ
ずつ注入し、３７℃で１時間インキュベーションした。

生食水で洗浄し、次に至適濃度の酵素標識抗体１００成
を加え、３１℃で１時間インキュベーションした。再び
生食水で洗浄し、発色液１００成を加え、３７℃で１時
間インキュベーションした。０，０１％アジ化ナトリウ
ム液１００屑を加えて反応を停止させｏＤ　　　吸光値
を測定し、ＢＦ２０ｎｍ Ｐ値を算出した。

検体の内訳は健常人２６例、良性泌尿器疾患症例４５例
、その他の良性疾患症例２７例９Ｍ３尿器癌症例２７例
、その他の病症例６例、泌尿器癌術後再発例１１例の計
１４２例である。尿は随時法を採取し、アジ化ナトリウ
ム添加にて４℃保存した検体を使用し、血清は採尿と同
時に採血した同一症例の検体を使用した。

健常人２６例における尿中ＢＦＰ平均値は２．６　ｎｇ
／ｄで平均値＋２８０は７．３　ｎｇ／−であった。良
性疾患と癌症例の測定成績からｃｕｔ−ｏｆｆ値を２０
　ｎｇ／−とした。一方、血清ＢＦＰのｃｕｔ−ｏｆｆ
値は７５ｎｇ／−とした。

尿ＢＦＰおよび血清ＢＦＰの陽性率はそれぞれ、良性泌
尿器疾患で１１％、０％、その他の良性疾患で０％、　
１８．５％、泌尿器癌で４８％、３３％、その他の癌疾
患で１７％、３３％、泌尿器癌術後再発例で２７％、２
５％であった。尿ＢＦＰの泌尿器癌における陽性率の内
訳は、膀胱癌１０％（７／１０）、尿管癌１００％（２
／２）　、前立腺癌２５％（２／８）　、胃癌３３％（
２／６）、率丸癌Ｏ％（０／１）であり、特に膀胱癌及
び尿管癌の尿路路に於いて、血清ＢＦＰと較べてその陽
性率が著しく高いことが判る。以上の結果を第１図及び
第２図に示した。図中、Ｕ及びＳは夫々尿ＢＦＰ値及び
血清ＢＦＰ値を示す。

尿ＢＦＰ値と血清ＢＦＰ値は全く相関が認められなかっ
た。尿ＢＦＰと血清ＢＦＰの両者のＣｏｍｂｉｎａｔｉ
ｏｎ　ａｓｓａｙによる陽性率は泌尿器癌において７０
％に向上した。その内訳をみると、腎癌は８３％（５／
６）　、前立腺癌は５０％（４／８）　、率丸癌は１０
０％（１／１）に向上した。

また、ＢＦＰ値への血尿の影響を検討したが、尿沈渣に
おける赤血球数と尿ＢＦＰ値との間には相関はなかった
。溶血床は膀胱炎、前立腺肥大症の２症例にみられたが
、尿ＢＦＰ値はそれぞれ１６４．７　ｎｇ／ｍ、　１４
．９　ｎｖ／ｄであった。

［効　　果］ このように、尿ＢＦＰは泌尿器癌で高い陽性率を示し、
とりわけ膀胱癌、尿管癌に特異性の高い１１２瘍マーカ
ーと考えられる。さらに本発明方法と血清ＢＦＰとのＣ
ｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ａｓｓａｙ　ニ、に　リａ癌、
前立腺における陽性率が著しく向上し、泌尿器の診断に
おける高い有用性が示された。

以上の記載から明らかなように、本発明の測定方法は、
癌、特に泌尿器癌のスクリーニング、診断及び治療の経
過観察に於いて極めて有用なデータを提供し得るもので
ある。

【図面の簡単な説明】

第１図は健常人と良性泌尿器疾患における尿及び血清Ｂ
ＦＰの測定結果を示す゛。 第２図は泌尿器癌における尿及び血清ＢＦＰの測定結果
を示す。 第２図

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. （１）抗塩基性胎児蛋白抗体を使用する抗原抗体反応に
   基づく尿中の塩基性胎児蛋白の測定方法。
2. （２）前記抗原又は抗体が酵素標識されていることを特
   徴とする請求項１に記載の測定方法。
3. （３）前記抗塩基性胎児蛋白抗体を使用する抗原抗体反
   応をサンドイッチ法で行なうことを特徴とする請求項１
   又は２に記載の測定方法。
4. （４）前記抗塩基性胎児蛋白抗体が夫々特異性の異なる
   第一モノクローナル抗体および第二モノクローナル抗体
   から成ることを特徴とする請求項３に記載の測定方法。
5. （５）請求項１の測定方法を実施するために用いる測定
   キットであつて、第一抗塩基性胎児蛋白抗体、標識第二
   抗塩基性胎児蛋白抗体、固相及び標準塩基性胎児蛋白抗
   原を含み、第一抗体及び第二抗体の反応する抗原決定基
   が異なるものであることを特徴とする前記測定キット。
6. （６）第一抗体及び第二抗体がモノクローナル抗体であ
   ることを特徴とする請求項５に記載のキット。
7. （７）標識物質が酵素であることを特徴とする請求項５
   又は６に記載のキット。