JPH0120382B2 - - Google Patents
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- JPH0120382B2 JPH0120382B2 JP62061072A JP6107287A JPH0120382B2 JP H0120382 B2 JPH0120382 B2 JP H0120382B2 JP 62061072 A JP62061072 A JP 62061072A JP 6107287 A JP6107287 A JP 6107287A JP H0120382 B2 JPH0120382 B2 JP H0120382B2
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- JP
- Japan
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- solid phase
- antigen
- antibody
- reaction
- enzyme
- Prior art date
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- Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は自動的に酵素免疫を測定する測定方法
に関するものであり、特に、反応によつて結合し
た物質(Bound)と結合していない物質(Free)
の分離(B―F分離)が可能な酵素免疫自動測定
方法に関するものである。
に関するものであり、特に、反応によつて結合し
た物質(Bound)と結合していない物質(Free)
の分離(B―F分離)が可能な酵素免疫自動測定
方法に関するものである。
従来、酵素免疫測定は複雑な測定法であり、最
終段階の酵素活性測定は簡単に自動測定を行うこ
とができるにもかかわらず、B―F分離を行う操
作段階において、B―F分離が容易でない所から
全過程を自動化することが困難であつた。また、
生化学自動分析機は通常測定終了後の洗浄装置を
装備しているが、分析途中で洗浄するような装置
を備えたものは殆どない。従つて酵素免疫測定に
おいても、分析途中の洗浄は用手法で行わなけれ
ばならなかつた。
終段階の酵素活性測定は簡単に自動測定を行うこ
とができるにもかかわらず、B―F分離を行う操
作段階において、B―F分離が容易でない所から
全過程を自動化することが困難であつた。また、
生化学自動分析機は通常測定終了後の洗浄装置を
装備しているが、分析途中で洗浄するような装置
を備えたものは殆どない。従つて酵素免疫測定に
おいても、分析途中の洗浄は用手法で行わなけれ
ばならなかつた。
さらに酵素免疫測定を行うに当たつては、固相
とサンプルおよび酵素標識試薬との抗原抗体反応
時間をサンプル中の測定すべき物質の種類や使用
する酵素標識試薬の種類に応じて最適な時間に設
定する必要があるが、1台の測定機によつては1
つの項目だけを測定できるようにすると測定機の
稼動率が悪くなるとともに複数の測定機を設置し
運用するのに多額の経費が嵩むとともに設置のた
めのスペースも多く必要となる。
とサンプルおよび酵素標識試薬との抗原抗体反応
時間をサンプル中の測定すべき物質の種類や使用
する酵素標識試薬の種類に応じて最適な時間に設
定する必要があるが、1台の測定機によつては1
つの項目だけを測定できるようにすると測定機の
稼動率が悪くなるとともに複数の測定機を設置し
運用するのに多額の経費が嵩むとともに設置のた
めのスペースも多く必要となる。
本発明の目的は、分析途中のB―F分離を洗浄
により自動的に行うことができ、しかも抗原抗体
反応時間を任意に設定することができる酵素免疫
自動測定方法を提供しようとするものである。
により自動的に行うことができ、しかも抗原抗体
反応時間を任意に設定することができる酵素免疫
自動測定方法を提供しようとするものである。
本発明の酵素免疫自動測定方法は、標識物質と
して酵素を用い、抗原抗体反応によりサンプル中
の特定物質を測定するに当たり、抗原または抗体
を固定化した固相を入れた反応容器を反応ライン
に沿つて搬送し、分注装置により反応容器にサン
プルあるいは酵素標識試薬を分注するタイミング
から、反応ラインに沿つて配置された洗浄装置に
より反応容器に固相を残したままで固相および反
応容器を洗浄することによつてB―F分離を行う
洗浄タイミングまでの間の時間として規定される
抗原抗体反応時間を洗浄装置の配置位置を変更す
ることによつて設定変更することを特徴とするも
のである。
して酵素を用い、抗原抗体反応によりサンプル中
の特定物質を測定するに当たり、抗原または抗体
を固定化した固相を入れた反応容器を反応ライン
に沿つて搬送し、分注装置により反応容器にサン
プルあるいは酵素標識試薬を分注するタイミング
から、反応ラインに沿つて配置された洗浄装置に
より反応容器に固相を残したままで固相および反
応容器を洗浄することによつてB―F分離を行う
洗浄タイミングまでの間の時間として規定される
抗原抗体反応時間を洗浄装置の配置位置を変更す
ることによつて設定変更することを特徴とするも
のである。
次に、図面につき本発明を詳細に説明する。
第1図は酵素免疫反応の概略図である。1は、
ポリスチレンボールまたはガラスビーズ等の固相
に抗体(あるいは抗原)2aを固定した固定化固
相である(A)。この固定化固相1に抗体(ある
いは抗原)2aに対する抗原(あるいは抗体)2
bを含む血清あるいはこれに相応する試料を加え
て反応させる(B)。すると、抗原(あるいは抗
体)2bは固定化固相1上の抗体(あるいは抗
原)2aと反応し、抗原(抗体)―抗体(抗原)
複合物固定化固相3を生成する(C)。この複合
物固定化固相3に、固定化固相1に固定化した抗
体(あるいは抗原)2aと同一の抗体(あるいは
抗原)に酵素を標識付けした酵素標識抗体(ある
いは抗原)4を加えて反応させる(D)。これに
より、酵素標識抗体(あるいは抗原)4と複合物
固定化固相3の複合物である酵素標識抗体(抗
原)―抗原(抗体)―抗体(抗原)複合物固定化
固相5を生成する(E)。過剰の酵素標識抗体
(あるいは抗原)4を除去し、前記固定化固相5
上の酵素活性を測定する。これによつて試料中の
抗原(あるいは抗体)の含有量を知ることができ
る。
ポリスチレンボールまたはガラスビーズ等の固相
に抗体(あるいは抗原)2aを固定した固定化固
相である(A)。この固定化固相1に抗体(ある
いは抗原)2aに対する抗原(あるいは抗体)2
bを含む血清あるいはこれに相応する試料を加え
て反応させる(B)。すると、抗原(あるいは抗
体)2bは固定化固相1上の抗体(あるいは抗
原)2aと反応し、抗原(抗体)―抗体(抗原)
複合物固定化固相3を生成する(C)。この複合
物固定化固相3に、固定化固相1に固定化した抗
体(あるいは抗原)2aと同一の抗体(あるいは
抗原)に酵素を標識付けした酵素標識抗体(ある
いは抗原)4を加えて反応させる(D)。これに
より、酵素標識抗体(あるいは抗原)4と複合物
固定化固相3の複合物である酵素標識抗体(抗
原)―抗原(抗体)―抗体(抗原)複合物固定化
固相5を生成する(E)。過剰の酵素標識抗体
(あるいは抗原)4を除去し、前記固定化固相5
上の酵素活性を測定する。これによつて試料中の
抗原(あるいは抗体)の含有量を知ることができ
る。
本発明においては、上述の抗原(抗体)―抗体
(抗原)複合物固定化固相3および酵素標識抗体
(抗原)―抗原(抗体)―抗体(抗原)複合物固
定化固相5を生成後、固相を反応管に残したまま
で固相と反応管を洗浄することによつて、B―F
分離を自動的に行うことができるようにする。
(抗原)複合物固定化固相3および酵素標識抗体
(抗原)―抗原(抗体)―抗体(抗原)複合物固
定化固相5を生成後、固相を反応管に残したまま
で固相と反応管を洗浄することによつて、B―F
分離を自動的に行うことができるようにする。
また、固相を入れた反応管に試料を分注して抗
原抗体反応を開始させるタイミング(G)と、洗
浄によるB―F分離を行うタイミング(I)との
間の時間によつて規定される抗原抗体反応時間
や、反応管に酵素標識試薬を分注するタイミング
(J)と洗浄によるB―F分離を行うタイミング
(L)との間の時間で規定される抗原抗体反応時
間を、測定項目に応じて最適の時間となるように
B―F分離のための洗浄タイミングを変更できる
ようにする。
原抗体反応を開始させるタイミング(G)と、洗
浄によるB―F分離を行うタイミング(I)との
間の時間によつて規定される抗原抗体反応時間
や、反応管に酵素標識試薬を分注するタイミング
(J)と洗浄によるB―F分離を行うタイミング
(L)との間の時間で規定される抗原抗体反応時
間を、測定項目に応じて最適の時間となるように
B―F分離のための洗浄タイミングを変更できる
ようにする。
第2図は本発明の自動測定方法を実施する測定
機の一例を示す部分図である。
機の一例を示す部分図である。
大口部6aおよび小口部6bを備えたU字管6
に、大口部6aから自由に出し入れでき、小口部
6bに入らない固定化固相1を用意する。U字管
6の大口部6aより固定化固相1と試薬あるいは
緩衝液を加える(F)。次にサンプル分注器7に
より測定対象のサンプルを一定量加え(G)、小
口部6bから空気を吹込み撹拌を行い上述の固定
化固相3を生成させる(H)。この後、大口部6
aに洗浄液供給装置8、小口部6bに洗浄液吸引
装置9を適用させ前記固定化固相3およびU字管
6の洗浄を行う(I)。次に上述の酵素標識抗体
(あるいは抗原)、すなわち酵素標識試薬4を分注
器10により、U字管6の大口部6aより加え
(J)、小口部6bより空気を吹込み撹拌を行い、
上述の固定化固相5を生成させる(K)。この後、
洗浄液供給装置8および洗浄液吸引装置9によつ
て、前記固定化固相5およびU字管6の洗浄を行
う(L)。次に固定化固相5を含むU字管6内に、
固定化固相5上の酵素活性を測定するための試薬
を、試薬分注器11によつて加える(M)。この
後小口部6bより空気を吹込み撹拌を行い、反応
を行つた後(N)、吸引チユーブ12によつて反
応溶液をフローセル13内に移送する(O)。こ
の反応溶液の吸光度を測定し、固定化固相5上の
酵素活性を求める。これにより、試料中の抗原
(あるいは抗体)2aの含有量を知ることができ
る。また、吸光度測定後、U字管6内に残つた固
定化固相5は大口部6aに設けた固定化固相吸引
装置14によつて除去し、小口部6bに設けた洗
浄液供給装置15により洗浄液をU字管6内に供
給し、洗浄後、吸引装置14により除去する。
に、大口部6aから自由に出し入れでき、小口部
6bに入らない固定化固相1を用意する。U字管
6の大口部6aより固定化固相1と試薬あるいは
緩衝液を加える(F)。次にサンプル分注器7に
より測定対象のサンプルを一定量加え(G)、小
口部6bから空気を吹込み撹拌を行い上述の固定
化固相3を生成させる(H)。この後、大口部6
aに洗浄液供給装置8、小口部6bに洗浄液吸引
装置9を適用させ前記固定化固相3およびU字管
6の洗浄を行う(I)。次に上述の酵素標識抗体
(あるいは抗原)、すなわち酵素標識試薬4を分注
器10により、U字管6の大口部6aより加え
(J)、小口部6bより空気を吹込み撹拌を行い、
上述の固定化固相5を生成させる(K)。この後、
洗浄液供給装置8および洗浄液吸引装置9によつ
て、前記固定化固相5およびU字管6の洗浄を行
う(L)。次に固定化固相5を含むU字管6内に、
固定化固相5上の酵素活性を測定するための試薬
を、試薬分注器11によつて加える(M)。この
後小口部6bより空気を吹込み撹拌を行い、反応
を行つた後(N)、吸引チユーブ12によつて反
応溶液をフローセル13内に移送する(O)。こ
の反応溶液の吸光度を測定し、固定化固相5上の
酵素活性を求める。これにより、試料中の抗原
(あるいは抗体)2aの含有量を知ることができ
る。また、吸光度測定後、U字管6内に残つた固
定化固相5は大口部6aに設けた固定化固相吸引
装置14によつて除去し、小口部6bに設けた洗
浄液供給装置15により洗浄液をU字管6内に供
給し、洗浄後、吸引装置14により除去する。
第3図は、第2図をさらに詳細に説明するた
め、本発明による自動測定方法を実施する装置を
示す全体図である。
め、本発明による自動測定方法を実施する装置を
示す全体図である。
第3図は、大口部6aおよび小口部6bを備え
た複数のU字管を保持する恒温槽を上から見た図
である。恒温槽の上面には反応管を移動させる反
応管ターレツト16が設けてあり、このターレツ
ト16は矢印の方向に所定ピツチで回動するリン
グ状円板である。一定量の固相を固定化固相供給
装置17から大口部6aに供給する。次に、ター
レツト16が回動し、サンプル分注器7によりサ
ンプルを一定量加える。このサンプル分注器7
は、矢印の方向に所定ピツチで回動するサンプラ
18のサンプルカツプ19からサンプルを、シリ
ンジ20の上下動およびプローブ21の回動と上
下動によりU字管の大口部6aに分注する。この
サンプルの分注と同時に又はその前後において適
当な試薬又は緩衝液を分注するように構成するこ
ともできる。22はU字管の小口部6bに空気を
送るエアポンプである。小口部6bから空気を吹
込み、固定化固相とサンプルを撹拌し完全に反応
させる。次に小口部6bから液排出ポンプ23に
より、未反応の液を排出する。同時に洗浄用ポン
プ24により大口部6aから洗浄液を供給し、固
相を残したまま固相とU字管の洗浄を行なつてB
―F分離を行う。洗浄液は液排出ポンプ23によ
り排出する。小口部6bの上面には上下動する円
板(図示外)を設け、小口部6bを介して空気お
よび液を給排する際にこの円板が下降して給排チ
ユーブが小口部6bと連結されるようにし、ター
レツト16の回動時には上昇するように配置す
る。したがつて、この上下動する円板に対する給
排チヤーブの取付け位置を変えることによりB―
F分離のための洗浄位置、すなわちB―F分離の
タイミングを変更することができる。
た複数のU字管を保持する恒温槽を上から見た図
である。恒温槽の上面には反応管を移動させる反
応管ターレツト16が設けてあり、このターレツ
ト16は矢印の方向に所定ピツチで回動するリン
グ状円板である。一定量の固相を固定化固相供給
装置17から大口部6aに供給する。次に、ター
レツト16が回動し、サンプル分注器7によりサ
ンプルを一定量加える。このサンプル分注器7
は、矢印の方向に所定ピツチで回動するサンプラ
18のサンプルカツプ19からサンプルを、シリ
ンジ20の上下動およびプローブ21の回動と上
下動によりU字管の大口部6aに分注する。この
サンプルの分注と同時に又はその前後において適
当な試薬又は緩衝液を分注するように構成するこ
ともできる。22はU字管の小口部6bに空気を
送るエアポンプである。小口部6bから空気を吹
込み、固定化固相とサンプルを撹拌し完全に反応
させる。次に小口部6bから液排出ポンプ23に
より、未反応の液を排出する。同時に洗浄用ポン
プ24により大口部6aから洗浄液を供給し、固
相を残したまま固相とU字管の洗浄を行なつてB
―F分離を行う。洗浄液は液排出ポンプ23によ
り排出する。小口部6bの上面には上下動する円
板(図示外)を設け、小口部6bを介して空気お
よび液を給排する際にこの円板が下降して給排チ
ユーブが小口部6bと連結されるようにし、ター
レツト16の回動時には上昇するように配置す
る。したがつて、この上下動する円板に対する給
排チヤーブの取付け位置を変えることによりB―
F分離のための洗浄位置、すなわちB―F分離の
タイミングを変更することができる。
次に、酵素標識抗体を分注器10により、大口
部6aから分注する。上に述べたと同様にエアポ
ンプ22から小口部6bに空気を吹込み撹拌し、
液排出ポンプ23により液を排出する。洗浄用ポ
ンプ24により大口部6aから洗浄液を供給し、
固相を残したまま固相とU字管を洗浄後、洗浄液
を液排出ポンプ23により排出する。
部6aから分注する。上に述べたと同様にエアポ
ンプ22から小口部6bに空気を吹込み撹拌し、
液排出ポンプ23により液を排出する。洗浄用ポ
ンプ24により大口部6aから洗浄液を供給し、
固相を残したまま固相とU字管を洗浄後、洗浄液
を液排出ポンプ23により排出する。
次に、試薬分注器11によつて、大口部6aか
ら酵素活性を測定するための試薬を加え、エアポ
ンプ22から小口部6bに空気を吹込み撹拌す
る。次いで、小口部6bから減圧ポンプ25によ
り反応溶液をフローセル26に移送する。このフ
ローセル26で吸光度を測定する。27は光源、
28はフイルタ、29は受光素子である。
ら酵素活性を測定するための試薬を加え、エアポ
ンプ22から小口部6bに空気を吹込み撹拌す
る。次いで、小口部6bから減圧ポンプ25によ
り反応溶液をフローセル26に移送する。このフ
ローセル26で吸光度を測定する。27は光源、
28はフイルタ、29は受光素子である。
測定後、大口部6aに密閉連結し得る吸引装置
14によりU字管の内容物を排出し、小口部6b
に取付けた洗浄液供給装置15により洗浄液を供
給しU字管を洗浄後、洗浄液を吸引装置14によ
り除去する。
14によりU字管の内容物を排出し、小口部6b
に取付けた洗浄液供給装置15により洗浄液を供
給しU字管を洗浄後、洗浄液を吸引装置14によ
り除去する。
上記実施例においてU字管を使用して酵素免疫
反応を行わせたが、U字管に限られるものではな
く、固相がB―F分離のための洗浄時の洗浄液の
除去によつて反応容器から吸引排出されないよう
な形状、例えば濾斗状、管内に網状のしきり部を
設けたもの等を使用することができる。
反応を行わせたが、U字管に限られるものではな
く、固相がB―F分離のための洗浄時の洗浄液の
除去によつて反応容器から吸引排出されないよう
な形状、例えば濾斗状、管内に網状のしきり部を
設けたもの等を使用することができる。
以上述べたように本発明の酵素免疫自動測定方
法では、分析途中で、固相を反応容器内に残した
ままで洗浄を行つてB―F分離を自動的に行うこ
とができる洗浄装置を設けたので、容易に反応物
と未反応物の分離を行うことができ、全過程を自
動的に操作することができる。また、この洗浄装
置は、簡単な構造なので、サンプル分注から最終
的な比色定量その他の光学的測定までの反応段階
において、任意の位置に選択的に設置することが
でき、且つ脱着可能である。すなわち、洗浄によ
るB―F分離を行うタイミングを変更することに
よつて測定項目に応じた最適の抗原抗体反応時間
を設定することができ、一台の測定機を能率良く
使用することができるとともに経済的にも有利と
なる。
法では、分析途中で、固相を反応容器内に残した
ままで洗浄を行つてB―F分離を自動的に行うこ
とができる洗浄装置を設けたので、容易に反応物
と未反応物の分離を行うことができ、全過程を自
動的に操作することができる。また、この洗浄装
置は、簡単な構造なので、サンプル分注から最終
的な比色定量その他の光学的測定までの反応段階
において、任意の位置に選択的に設置することが
でき、且つ脱着可能である。すなわち、洗浄によ
るB―F分離を行うタイミングを変更することに
よつて測定項目に応じた最適の抗原抗体反応時間
を設定することができ、一台の測定機を能率良く
使用することができるとともに経済的にも有利と
なる。
第1図は酵素免疫反応の概略図、第2図は本発
明による自動測定方法における順次の工程を示す
線図、第3図は第2図に示す自動測定方法を実施
する測定機の構成をさらに詳細に示した図であ
る。 1…固定化固相、2…抗原(抗体)、3…抗原
―抗体複合物固定化固相、4…酵素標識抗体、5
…酵素標識抗体―抗原―抗体複合物固定化固相、
6…U字管、7…試料分注器、8…洗浄水供給装
置、9…洗浄水吸引装置、10…分注器、11…
試薬分注器、12…吸引チユーブ、13…フロー
セル、14…固定化固相吸引装置、15…小口部
用洗浄水供給装置、16…反応管ターレツト、2
2…エアポンプ、23…液排出ポンプ、24…洗
浄用ポンプ。
明による自動測定方法における順次の工程を示す
線図、第3図は第2図に示す自動測定方法を実施
する測定機の構成をさらに詳細に示した図であ
る。 1…固定化固相、2…抗原(抗体)、3…抗原
―抗体複合物固定化固相、4…酵素標識抗体、5
…酵素標識抗体―抗原―抗体複合物固定化固相、
6…U字管、7…試料分注器、8…洗浄水供給装
置、9…洗浄水吸引装置、10…分注器、11…
試薬分注器、12…吸引チユーブ、13…フロー
セル、14…固定化固相吸引装置、15…小口部
用洗浄水供給装置、16…反応管ターレツト、2
2…エアポンプ、23…液排出ポンプ、24…洗
浄用ポンプ。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 標識物質として酵素を用い、抗原抗体反応に
よりサンプル中の特定物質を測定するに当たり、 抗原または抗体を固定化した固相を入れた反応
容器を反応ラインに沿つて搬送し、分注装置によ
り反応容器にサンプルあるいは酵素標識試薬を分
注するタイミングから、反応ラインに沿つて配置
された洗浄装置により反応容器に固相を残したま
まで固相および反応容器を洗浄することによつて
B―F分離を行う洗浄タイミングまでの間の時間
として規定される抗原抗体反応時間を洗浄装置の
配置位置を変更することによつて設定変更するこ
とを特徴とする酵素免疫自動測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6107287A JPS6324160A (ja) | 1987-03-18 | 1987-03-18 | 酵素免疫自動測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6107287A JPS6324160A (ja) | 1987-03-18 | 1987-03-18 | 酵素免疫自動測定方法 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4914080A Division JPS56147067A (en) | 1980-04-16 | 1980-04-16 | Automatic measuring instrument for enzyme immunity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6324160A JPS6324160A (ja) | 1988-02-01 |
| JPH0120382B2 true JPH0120382B2 (ja) | 1989-04-17 |
Family
ID=13160567
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6107287A Granted JPS6324160A (ja) | 1987-03-18 | 1987-03-18 | 酵素免疫自動測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6324160A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997041437A1 (en) * | 1996-05-01 | 1997-11-06 | Sanko Junyaku Co., Ltd. | Automatic immunoassay method and apparatus |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0690211B2 (ja) * | 1984-09-21 | 1994-11-14 | オリンパス光学工業株式会社 | 免疫学的分析装置およびその方法 |
-
1987
- 1987-03-18 JP JP6107287A patent/JPS6324160A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6324160A (ja) | 1988-02-01 |
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