JPH0365499B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は自動的に酵素免疫を測定する測定機に
関するものであり、特に、反応によつて結合した
物質（Bound）と結合していない物質（Free）
の分離（Ｂ−Ｆ分離）が可能な酵素免疫自動測定
機に関するものである。

従来、酵素免疫測定は複雑な測定法であり、最
終段階の酵素活性測定は簡単に自動測定を行うこ
とができるにもかかわらず、Ｂ−Ｆ分離を行う操
作段階において、Ｂ−Ｆ分離が容易でない所から
全過程を自動化することが困難であつた。

本発明は、酵素免疫測定においてＢ−Ｆ分離を
含む分析過程を自動的に実施する酵素免疫自動測
定機を提供することを目的とする。

本発明は、標識物質として酵素を用い抗原抗体
反応によりサンプル中の測定対象物質を測定する
装置において、抗原あるいは抗原体の特異親和性
物質を固定化した固相を収容する反応容器を反応
ラインに沿つて搬送する反応容器搬送装置と、複
数のサンプルを収容しサンプル吸引位置まで所望
のサンプルを搬送するサンプル搬送装置と、サン
プル吸引位置にあるサンプルを反応容器に分注す
るサンプル分注装置と、所望の反応容器に酵素標
識試薬または酵素活性測定用試薬等の試薬を分注
する試薬分注装置と、固相を反応容器内に残した
ままで固相および反応容器を洗浄し未結合物質を
除去する洗浄装置と、反応後の酵素活性を測定す
る測光装置とを備えた酵素免疫自動測定機に関す
る。

第１図は酵素免疫反応の概略図である。１は、
ポリスチレンボールまたはガラスビーズ等の固相
に抗体（あるいは抗原）２ａを固定した固定化固
相である(A)。この固定化固相１に抗体（あるいは
抗原）２ａに対する抗原（あるいは抗体）２ｂを
含む血清あるいはこれに相応する試料を加えて反
応させる(B)。すると、抗原（あるいは抗体）２ｂ
は固定化固相上１の抗体（あるいは抗原）２ａと
反応し、抗原（抗体）−抗体（抗原）複合物固定
化固相３を生成する(C)。この複合物固定化固相３
に、固定化固相１に固定化した抗体（あるいは抗
原）２ａと同一の抗体（あるいは抗原）に酵素を
標識付けした酵素標識抗体（あるいは抗原）４を
加えて反応させる(D)。これにより、酵素標識抗体
（あるいは抗原）４と複合物固定化固相３の複合
物である酵素標識抗体（抗原）−抗原（抗体）−抗
体（抗原）複合物固定化固相５を生成する(E)。過
剰の酵素標識抗体（あるいは抗原）４を除去し、
前記固定化固相５上の酵素活性を測定する。これ
によつて試料中の抗原（あるいは抗体）の含有量
を知ることができる。

第２図はこの自動測定機の一実施例を示す部分
図である。

大口部６ａおよび小口部６ｂを備えたＵ字管６
に、大口部６ａから自由に出し入れでき、小口部
６ｂに入らない固定化固相１を用意する。Ｕ字管
６の大口部６ａより固定化固相１と試薬あるいは
緩衝液を加える(F)。次にサンプル分注器７により
測定対象のサンプルを一定量加え(G)、小口部６ｂ
から空気を吹込み撹拌を行い上述の固定化固相３
を生成させる(P)。この後、大口部６ａに洗浄液供
給装置８、小口部６ｂに洗浄液吸引装置９を適用
させ前記固定化固相３およびＵ字管６の洗浄を行
う(I)）。次に上述の酵素標識抗体（あるいは抗原）
４を分注器１０により、Ｕ字管６の大口部６ａよ
り加え(J)、小口部６ｂより空気を吹込み撹拌を行
い、上述の固定化固相５を生成させる(K)。この
後、洗浄液供給装置８および洗浄液吸引装置９に
よつて、前記固定化固相５およびＵ字管６の洗浄
を行う(L)。次に固定化固相５を含むＵ字管６内
に、固定化固相５上の酵素活性を測定するための
試薬を、試薬分注器１１によつて加える（Ｍ）。
この後小口部６ｂより空気を吹込み撹拌を行い、
反応を行つた後（Ｎ）、吸引チユーブ１２によつ
て反応溶液をフローセル１３内に移送する（Ｏ）。
この反応溶液の吸光度を測定し、固定化固相５上
の酵素活性を求める。これにより、サンプル中の
抗原（あるいは抗体）２の含有量を知ることがで
きる。また、吸光度測定後、Ｕ字管６内に残つた
固定化固相５は大口部６ａに設けた固定化固相吸
引装置１４によつて除去し、小口部６ｂに設けた
洗浄液供給装置１５により洗浄液をＵ字管６内に
供給し、洗浄後、吸引装置１４により除去する。

第３図は、第２図をさらに詳細に説明するた
め、本発明による自動測定機の一実施例を示す全
体図である。

第３図は、大口部６ａおよび小口部６ｂを備え
た複数のＵ字管を保持する恒温槽を上から見た図
である。恒温槽の上面には反応管を移動させる反
応管ターレツト１６が設けてあり、このターレツ
ト１６は矢印の方向に所定ピツチで回動するリン
グ状円板である。一定量の固相を固定化固相供給
装置１７から大口部６ａに供給する。次に、ター
レツト１６が回動し、サンプル分注器７によりサ
ンプルを一定量加える。このサンプル分注器７
は、矢印の方向に所定ピツチで回動するサンプラ
１８のサンプルカツプ１９からサンプルを、シリ
ンダ２０の上下動およびプローブ２１の回動と上
下動によりＵ字管の大口部６ａに分注する。この
サンプルの分注と同時に又はその前後において適
当な試薬又は緩衝液を分注するように構成するこ
ともできる。２２はＵ字管の小口部６ｂに空気を
送るエアポンプである。小口部６ｂから空気を吹
込み、固定化固相とサンプルを撹拌し完全に反応
させる。次に小口部６ｂから液排出ポンプ２３に
より未反応の液を排出する。同時に洗浄用ポンプ
２４により大口部６ａから洗浄液を供給し、固相
とＵ字管の洗浄を行う。洗浄液は液排出ポンプ２
３により排出する。小口部６ｂの上面には上下動
する円板（図示外）を設け、小口部６ｂを介して
空気および液を給排する際にこの円板が下降して
給排チユーブが小口部６ｂと連結されるように
し、ターレツト１６の回動時には上昇するように
配置する。

次に酵素標識抗体を分注器１０により、大口部
６ａから分注する。上に述べたと同様にエアポン
プ２２から小口部６ｂに空気を吹込み撹拌し、液
排出ポンプ２３により液を排出する。洗浄用ポン
プ２４により大口部６ａから洗浄液を供給し、固
相とＵ字管を洗浄後、洗浄液を液排出ポンプ２３
により排出する。

次に、試薬分注器１１によつて、大口部６ａか
ら試薬を加え、エアポンプ２２から小口部６ｂに
空気を吹込み撹拌する。次いで、小口部６ｂから
減圧ポンプ２５により反応溶液をフローセル２６
に移送する。このフローセル２６で吸光度を測定
する。２７は光源、２８はフイルタ、２９は受光
素子である。

測定後、大口部６ａに密封連結し得る吸引装置
１４によりＵ字管の内容物を排出し、小口部６ｂ
に取付けた洗浄液供給装置１５により洗浄液を供
給しＵ字管を洗浄後、洗浄液を吸引装置１４によ
り除去する。

上記実施例においてＵ字管を使用して酵素免疫
反応を行わせたが、Ｕ字管に限られるものではな
く、固相が洗浄時の洗浄液の除去によつて反応容
器から吸引排出されないような形状、例えば濾斗
状、管内に網状のしきり部を設けたもの等を使用
することができる。

以上述べたように本発明によれば、反応容器に
固相を収容した状態で、反応容器を変えることな
く、サンプル分析に必要な、全ての反応、固相に
未結合の物質の除去などの一連の操作を実施する
ことが可能となり、分析に必要な反応容器の数を
少なくすることができ、これにより、酵素免疫自
動測定機の小型化、容器から容器への繁雑な固相
の移し変え操作を省くことができる。さらに、本
発明では、複数のサンプルを収容し、サンプル吸
引位置まで所望のサンプルを搬送するサンプル搬
送装置を有し、複数のサンプルを連続的の反応容
器に分注できるから、複数のサンプルを連続的に
分析できる。

【図面の簡単な説明】

第１図は酵素免疫反応の概略図、第２図は本発
明による自動測定機における順次の工程を示す線
図、第３図は第２図に示す自動測定機の構成をさ
らに詳細に示した図である。 １……固定化固相、２……抗原（抗体）、３…
…抗原抗体複合物固定化固相、４……酵素標識抗
体、５……酵素標識抗体−抗原−抗体複合物固定
化固相、６……Ｕ字管、７……試料分注器、８…
…洗浄水供給装置、９……洗浄水吸引装置、１０
……分注器、１１……試薬分注器、１２……吸引
チユーブ、１３……フローセル、１４……固定化
固相吸引装置、１５……小口部用洗浄水供給装
置、１６……反応管ターレツト、２２……エアポ
ンプ、２３……液排出ポンプ、２４……洗浄用ポ
ンプ。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 標識物質として酵素を用い抗原抗体反応によ
   りサンプル中の測定対象物質を測定する装置にお
   いて、抗原あるいは抗体等の特異親和性物質を固
   定化した固相を収容する反応容器を反応ラインに
   沿つて搬送する反応容器搬送装置と、複数のサン
   プルを収容しサンプル吸引位置まで所望のサンプ
   ルを搬送するサンプル搬送装置と、サンプル吸引
   位置にあるサンプルを反応容器に分注するサンプ
   ル分注装置と、所望の反応容器に酵素標識試薬ま
   たは酵素活性測定用試薬等の試薬を分注する試薬
   分注装置と、固相を反応容器内に残したままで固
   相および反応容器を洗浄し未結合物質を除去する
   洗浄装置と、反応後の酵素活性を測定する測光装
   置とを具備することを特徴とする酵素免疫自動測
   定機。