JPH01211487A - サイレージ調製用乳酸菌スターター - Google Patents

サイレージ調製用乳酸菌スターター

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JPH01211487A
JPH01211487A JP63033961A JP3396188A JPH01211487A JP H01211487 A JPH01211487 A JP H01211487A JP 63033961 A JP63033961 A JP 63033961A JP 3396188 A JP3396188 A JP 3396188A JP H01211487 A JPH01211487 A JP H01211487A
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lactobacillus casei
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稔 柴田
Hiroshi Kubozono
久保園 弘
Shoji Kawabe
川辺 昭司
Takefumi Iwanami
岩波 健文
Kiyoshi Maruta
喜義 丸田
Kazuya Murota
室田 一也
Hiroshi Miyazaki
博 宮崎
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Asahi Soft Drinks Co Ltd
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ZENKOKU RAKUNOUGIYOU KYODO KUMIAI RENGOKAI
Calpis Food Industry Co Ltd
Calpis Shokuhin Kogyo KK
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 倉lよ夏■里分塁 本発明はサイレージ調製用乳酸菌スターターに関するも
のである。
更に詳細には1本発明のラクトバチルス・カゼイC−1
631単独か、あるいはストレプトコッカス・ラクチス
C−6513を併用するサイレージ調製用乳酸菌スター
ターに関するものである。
本発明の乳酸菌スターターをサイレージ調製時に適用す
れば、牛が好んで食する、香味良好で均質なサイレージ
を得ることができるので、酪農界に益するところ大なる
ものがある。
瑛米挟生 良質のサイレージを調製するには、初期段階で乳酸発酵
を十分に行なわせてpHを速やかに低下させることが肝
要である。しかし、実際にはサイレージにする植物の種
類、その水分含量、温度などによっては、必ずしも十分
な発酵がおこるとは限らない、このために、植物に付着
してくる乳酸菌だけには頼らず、サイレージ発酵に適し
た乳酸菌生菌体を人為的に加えることにより、安定した
乳酸発酵を行なわせることが推奨され、このために数々
の乳酸菌生菌体が検討され、ある程度の効果はみられて
いるが未だ十分な乳酸菌スターターはみられない。
■が解 しようとする課 牛が好んで食するのは香味豊かなサイレージであり、こ
の香味豊かなサイレージを調製することが酪農家の目標
となるが、同時にこの香味豊かなサイレージを均質な状
態で調製しなければならない。
を  するための 本発明者らは、香味豊かなサイレージを均質な状態で調
製するのに必要な乳酸菌を選別し、鋭意研究したところ
、新たに分離されたラクトバチルス・カゼイC−163
1(Lactobacillus casei C−1
631)単独か、あるいはストレプトコッカス・ラクチ
スC−6513(Streptococcus 1ac
tis C−6513)の2菌株を同時に使用すれば著
しるしく香味豊かなサイレージを均質な状態で調製でき
ることを知った。
本発明は、ラクトバチルス・カゼイC−1631単独、
又は、及びストレプトコッカス・ラクチスC−6513
を有効菌とするサイレージ調製用乳酸菌スターターに関
するものである。
本発明はラクトバチルス・カゼイC−1631(Lac
tobacillus casai C−1631)生
菌剤単独か。
あるいはストレプトコッカス・ラクチスC−6513(
Streptococcus 1actis C−65
13)生菌剤を併用してサイレージ調製時に添加するこ
とにより、安定して良質なサイレージを調製することを
可能とする生菌剤を提供することを目的としている。
本発明の有効菌の2菌株は1本発明者らが自然界から新
たに分離したラクトバチルス・カゼイC−1631とス
トレプトコッカス・ラクチスC−6513である。
ラクトバチルス・カゼイC−1631は工業技術院微生
物工業技術研究所に微工研菌寄第9809号として寄託
されているが、本菌の菌学的性質は次の通りである。
A、形態的性状 (1)幅0.3〜0.6μ園、長さ1.5〜2.5μ■
の桿菌(2)グラム陽性 (3)芽胞の形成:なし く4)運動性:なし く5)通性嫌気性 B、各種培地での生育状態 (1) APT液体培地(Difco) :非常に良く
生育する。
(2) BL寒天培地(30℃、3日間、嫌気培養)で
のコロ:−形状: 中央部がオレンジ色、周囲が黄緑が
かった灰色のラフなコロ:− C0生理的性質 (1)グルコースからのC02産生:−(2)カタラー
ゼの産生:− (3)硝酸塩の還元性:− (4)ゼラチンの液化:− (s) )I、Sの産生:− (6)インドールの産生:− (7)好気的発育:+ (8) 15℃での発育:+ (9) 45℃での発育:+ (10)乳酸の旋光性:L(+) (11)糖の発酵性 アラビノース二一 キシロース:一 ラムノース:一 グルコース:+ マンノース:+ フラクトース:+ ガラクトース:+ シュークロース:+ マルトース:+ セロビオース:+ ラクトース:− トレハロース:+ メリビオース二一 ラフィノース:一 スターチ:一 マンニトール:+ ソルビトール:+ エスクリン:+ サリシン:+ また、ストレプトコッカス・ラクチスC−6513は工
業技術院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第9810
号として寄託されているが、本菌の菌学的性質は次の通
りである。
A、形態的性状 (1)直径1.0〜1.5μ−の球菌 (2)グラム陽性 (3)芽胞の形成:なし く4)運動性:なし く5)通性嫌気性 B、各種培地での生育状態 (1) Trypticase Say液体培地(BB
L) :非常に良く生育する。   。
(2) BL寒天培地(30℃、3日間、嫌気培養)で
のコロ:−形状:灰色のスムースなコロ:− C0生理的性質 (1)グルコースからのC02産生:−(2)カタラー
ゼの産生:− (3) 0.1%メチレンブルーミルクでの生育:+(
4) 6.5%NaClでの発育:−(5) 40%胆
汁での発育:+ (6) p)19.6での発育:− (7) 60℃、30分処理での生残性:−(8)馬血
液の溶血性:− (9)ゼラチンの液化:− (10)でんぷんの加水分解:− (11)馬尿酸ナトリウムの分解:− (12)エスクリンの加水分解:− (13)アルギニンからのNH2生成:+(14) 1
0℃での発育:+ (15) 45℃での発育:− (16)糖の発酵性 アラビノース:+ キシロース:+ ラムノース:− グルコース:+ マンノース:+ フラクトース:+ ガラクトース:+ シュークロース:+ マルトース:+ セロビオース:+ ラクトース:+ トレハロース:+ メリビオース:− ラフィノース:一 マンニトール:+ ソルビトール:一 サリシン:+ 次に本発明の有効菌であるラクトバチルス・カゼイC−
1631及びストレプトコッカス・ラクチスC−651
2培養方法を説明する。
培地としては炭素源、窒素源、無機物、ビタミン、アミ
ノ酸などを含む、微生物の培養に通常用いられる培地が
広く使用される。炭素源としては同化可能な炭素化合物
であればよく1例えばグルコース、シュークロース、マ
ルトースなどが使用される。
窒素源としては利用可能な窒素化合物であればよく、例
えばペプトン、肉エキス、カゼイン酸加水分解物などが
使用される。その他リン酸塩、マグネシウム、ナトリウ
ム、カリウム、カルシウム、鉄、マンガン等の塩類、ビ
タミン、アミノ酸、消泡剤、界面活性剤が必要に応じて
使用される。
培地は液体培地、固体培地のいずれも使用できる。培地
の初発pHはp)15〜8.好ましくはpH6〜8であ
り、培養温度は20〜42℃、好ましくは25〜40℃
であり、培養時間は12時間〜3日、好ましくは15〜
24時間である。
これらの培養は、それぞれの菌株単独に行なってもよい
し、両菌株を混合して同時に行なってもよい。
このようにして得られた培養物は、そのままもしくは洗
浄した分離菌体として使用することができる。また、培
養物や分離菌体を、そのままもしくは添加物を加えて乾
燥したり、製剤化した後月いることもできる5本発明の
生菌剤ラクトバチルス・カゼイC−1631およびスト
レプトコッカス・ラクチスC−6513は、各々サイレ
ージ用植物1g当たり102〜101個、望ましくは1
04〜107個になるように添加すればよい。
次に本発明の製造例及び実施例を示す。
製造例1 脱塩水lOQにカゼインペプトン200g、酵母エキス
30g、リン酸2カリ20g、グルコース50gを溶解
させ、IN水酸化ナトリウム液によりpHを7.5に調
整した培地をジャーファーメンタ−に入れ、121”C
115分間殺菌後冷却し、予め前培養しておいたラクト
バチルス・カゼイC−1631、FERM P−980
9の培養液を接種し、35℃、20時間静置培養した。
このようにして得られた培養液を遠心分離して菌体を集
め、予め殺菌した10%脱脂乳・1%グルタミン酸ソー
ダ溶液を分散媒として凍結乾燥し。
ラクトバチルス・カゼイC−1631生菌剤450gを
得た。この生菌剤に含まれる生菌数は1. X 10”
個/gであった。
製造例2 製造例1と同様に培地を用意し、予め前培養しておいて
ストレプトコッカス・ラクチスC−6513、FERM
 P−9810の培養液を接種し、30℃、18時間静
置培養した。
このようにして得られた培養液を遠心分離して菌体を集
め、10%脱脂乳を分散媒として凍結乾燥し、ストレプ
トコッカス・ラクチスC−6513生菌剤410gを得
た。この生菌剤に含まれる生菌数はlXl0”個/gで
あった。
製造例3 製造例1と同様に培地を用意し、予め前培養しておいて
ラクトバチルス・カゼイC−1631,FERNP−9
809とストレプトコッカス・ラクチスC−6513、
FERM P−9810の培養液を接種し、30℃、1
8時間静置混合培養した。
このようにして得られた培養液を遠心分離して菌体を集
め、10%脱脂乳・1%グルタミン酸ソーダ溶液を分散
媒として凍結乾燥し、ラクトバチルス・カゼイC−16
31とストレプトコッカス・ラクチスC−6513との
混合生菌剤490gを得た。この生菌剤に含まれる生菌
数はラクトバチルス・カゼイC−1631が1×101
″個/g、ストレプトコッカス・ラクチスC−6513
が6X10’個/gであった。
製造例4 製造例1で得られた乾燥菌体1部に対して、9部のふす
まを加えてよく混合して生菌剤を得た。
この生菌剤に含まれる生菌数は8X10’個/gであっ
た。
製造例5 製造例2で得られた乾燥菌体1部に対して、9部の炭酸
カルシウムを加えてよく混合して生菌剤を得た。この生
菌剤に含まれる生菌数は7XIO”個/gであった。
製造例6 製造例3で得られた乾燥菌体1部に対して、9部のコー
ンスターチを加えてよく混合して生菌剤を得た。この生
菌剤に含まれる生菌数はラクトバチルス・カゼイC−1
631が8X10’個/g、ストレプトコッカス・ラク
チスC−6513が5XIO”個/gであった。
実施例1 刈り取った牧草(オーチャド、リードカナリー、イタリ
アン、アルファルファ)を半日間天日で乾燥した後、細
断・混合し、併用区としては、その700gに製造例4
および製造例5で得られた生菌剤を0.5gづつ添加し
、蓋付のポリ容器に押圧して詰込み30℃で22日間熟
成させてサイレージを調製し、引き続き30℃で22日
間熟成させた後、更に37℃で10日間熟成させた。な
お、同様の割合で製造例4で得られたラクトバチルス・
カゼイC−1631生菌剤を単独で添加した区を単独区
、生菌剤を全く添加しないものを対照区とした。
結果を表1に示す。
なお、pHは細断したサイレージの10%(v/v%)
抽出液(5℃、24hr、)の濾液を試料とした。有機
酸は上記試料をガスクロマトグラフ分析して定量した。
30℃22日   単独区   4.4   3.1 
   0更に37℃、10日 単独区   4.4  
 2.9    0.1表1から明らかなように、30
℃、22日熟成ではP)l値、乳酸量とも生菌剤添加区
が優れていた。また、生菌剤添加区のなかではラクトバ
チルス・カゼイC−1631添加の単独区より、更にス
トレプトコッカス・ラクチスC−6513を添加した併
用区の方が優れていた。更に37℃、10日熟成では対
照区にかなりの劣化が認められるのに対して、単独区。
併用区ではほとんど認められなかった。単独区、併用区
のなかでは、単独区には新たに少量の酪酸産生が認めら
れるのに対して、併用区ではほとんど劣化しておらず、
気温が高い時期においても良質のサイレージを調製する
ことが出来ることがわかる。また、4名のパネル員での
官能検査に於て、いずれの熟成条件でも、香味・色調に
おいて単独区、併用区が優れていた。また、単独区、併
用区のなかでは併用区が一番優れていた。このように両
熟成条件共に、優れた品質のサイレージを調製すること
が出来た。
実施例2 刈り取ったオーチャードグラスを半日間天日で乾燥した
後細断し、併用区として、その1.5kgに製造例4お
よび製造例5で得られた生菌剤をそれぞれ0.75gず
つ添加し、厚手のポリエチレン袋に押圧して詰込み25
℃で23日間熟成させてサイレージを調製し、更に37
℃で14日間熟成させた。単独区として、製造例4で得
られた生菌剤を0.75g添加し、併用区と同様に熟成
させた。なお、生菌剤を全く添加しないものを対照区と
した。
結果を表2に示す。
なお、試料の調製および分析方法は、実施例1と同様で
ある。
25℃23日   単独区   5.2更に37℃、1
4日 単独区   5.0表2から明らかなように、2
つの熟成条件とも生菌剤添加区の方がP)I値が低く、
また香味・色調においても生菌剤添加区の方が優れてい
た。また。
生菌剤添加区のなかではラクトバチルス・カゼイC−1
631単独添加区より、更にストレプトコッカス・ラク
チスC−6513を添加した併用区の方が、pH値が0
.1低く、また香味・色調においてもやや優れていた。
実施例3 刈り取ったアルファルファを半日間天日で乾燥した後細
断し、生菌剤単独添加区として、その115kgに製造
例4で得られた生菌剤を57.5g添加した後、200
Q容密閉型ドラム缶に押圧して詰込み28日間熟成させ
てサイレージを調製した。また、併用区として生菌剤単
独添加区に更に製造例5で得られた生菌剤を57.5g
添加して、同様に調製した。
詰込んだアルファルファの水分含量は74.9%、熟成
期間中の平均気温は約20℃であった。なお、生菌剤を
全く添加しないものを対照区とした。
結果を表3に示す。
なお、試料の調製および分析方法は、実施例1と同様で
ある。また、牧草サイレージの評価は、官能検査40点
満点、pH60点、有機酸100点(フリーグの評点法
に準拠)、合計200点満点上して行なった・ 表3から明らかなように、生菌剤添加区の方が優れた品
質のサイレージを調製することが出来た。また、生菌剤
添加区のなかでは、ラクトバチルス・カゼイC−163
1添加の単独区より、更にストレプトコッカス・ラクチ
スC−6513を添加した併用区の方が優れていた。
代理人 弁理士 戸 1)親 男

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1、下記の菌学的性質を有するラクトバチルス・カゼイ
    C−1631を有効菌とするサイレージ調製用乳酸菌ス
    ターター。 (A)ラクトバチルス・カゼイC−1631の菌学的性
    質。 (1)グラム陽性 (2)芽胞の形成:− (3)桿菌 (4)グルコースからのCO_2産生:− (5)カタラーゼの産生:− (6)硝酸塩の還元性:− (7)ゼラチンの液化:− (8)H_2Sの産生:− (9)インドールの産生:− (10)好気的発育:+ (11)15℃での発育:+ (12)45℃での発育:+ (13)乳酸の旋光性:L(+) (14)糖の発酵性 アラビノース:− キシロース:− ラムノース:− グルコース:+ マンノース:+ フラクトース:+ ガラクトース:+ シュークロース:+ マルトース:+ セロビオース:+ ラクトース:− トレハロース:+ メリビオース:− ラフィノース:− スターチ:− マンニトール:+ ソルビトール:+ エスクリン:+ サリシン:+ 2、下記の菌学的性質を有するラクトバチルス・カゼイ
    C−1631及びストレフトコッカス・ラクチスC−6
    513を有効菌とするサイレージ調製用乳酸菌スタータ
    ー。 (A)ラクトバチルス・カゼイC−1631の菌学的性
    質。 (1)グラム陽性 (2)芽胞の形成:− (3)桿菌 (4)グルコースからのCO_2産生:− (5)カタラーゼの産生:− (6)硝酸塩の還元性:− (7)ゼラチンの液化:− (8)H_2Sの産生:− (9)インドールの産生:− (10)好気的発育:+ (11)15℃での発育:+ (12)45℃での発育:+ (13)乳酸の旋光性:L(+) (14)糖の発酵性 アラビノース:− キシロース:− ラムノース:− グルコース:+ マンノース:+ フラクトース:+ ガラクトース:+ シュークロース:+ マルトース:+ セロビオース:+ ラクトース:− トレハロース:+ メリビオース:− ラフィノース:− スターチ:− マンニトール:+ ソルビトール:+ エスクリン:+ サリシン:+ (B)ストレフトコッカス・ラクチスC−6513の菌
    学的性質。 (1)グラム陽性 (2)芽胞の形成:− (3)球菌 (4)グルコースからのCO_2産生:− (5)カタラーゼの産生:− (6)0.1%メチレンブルーミルクでの生育:+ (7)6.5%NaClでの発育:− (8)40%胆汁での発育:+ (9)pH9.6での発育:− (10)60℃、30分処理での生残性:− (11)馬血液の溶血性:− (12)ゼラチンの液化:− (13)でんぷんの加水分解:− (14)馬尿酸ナトリウムの分解:− (15)エスクリンの加水分解:− (16)アルギニンからのNH_2生成:+ (17)10℃での発育:+ (18)45℃での発育:− (19)糖の発酵性 アラビノース:+ キシロース:+ ラムノース:− グルコース:+ マンノース:+ フラクトース:+ ガラクトース:+ シュークロース:+ マルトース:+ セロビオース:+ ラクトース:+ トレハロース:+ メリビオース:− ラフィノース:− マンニトール:+ ソルビトール:− サリシン:+
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