JPH0122905B2 - - Google Patents
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- JPH0122905B2 JPH0122905B2 JP56015013A JP1501381A JPH0122905B2 JP H0122905 B2 JPH0122905 B2 JP H0122905B2 JP 56015013 A JP56015013 A JP 56015013A JP 1501381 A JP1501381 A JP 1501381A JP H0122905 B2 JPH0122905 B2 JP H0122905B2
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- Japan
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- antibody
- enzyme
- immunoglobulin
- column
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
- G01N33/537—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
- G01N33/538—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody by sorbent column, particles or resin strip, i.e. sorbent materials
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- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は抗原を速かにかつ精度良く測定する方
法に関するものである。
法に関するものである。
更に詳しくは抗原を定量するに際して、定量す
べき抗原と酵素標識抗原とを該抗原に対する抗体
イムノグロブリンに対して競争的あるいは拮抗的
に反応させ、得られた反応液を、第二抗体不溶化
担体に接触せしめ、反応によつて生成した酵素標
識抗原と抗体イムノグロブリンの結合物を第二抗
体不溶化担体に吸着せしめ、第二抗体不溶化担体
に吸着されずに液相に残存する遊離の酵素標識抗
原を定量することによつて、抗原を速かにかつ精
度良く測定することを基本的技術思想とする抗原
の定量法に関するものである。
べき抗原と酵素標識抗原とを該抗原に対する抗体
イムノグロブリンに対して競争的あるいは拮抗的
に反応させ、得られた反応液を、第二抗体不溶化
担体に接触せしめ、反応によつて生成した酵素標
識抗原と抗体イムノグロブリンの結合物を第二抗
体不溶化担体に吸着せしめ、第二抗体不溶化担体
に吸着されずに液相に残存する遊離の酵素標識抗
原を定量することによつて、抗原を速かにかつ精
度良く測定することを基本的技術思想とする抗原
の定量法に関するものである。
本発明において定量される抗原としては種々の
生体成分あるいは薬剤があるが、特に臨床的には
生体体液中に含まれる種々のホルモン類、蛋白質
が重要である。具体的にはペプチドホルモン類、
ステロイドホルモン類、サイロキシン（T4）、ト
リヨードチロニン（T3）等の甲状線ホルモンあ
るいはイムノグロブリン、α−フエトプロテイン
（AFP）、癌胎児性抗原（CEA）等がある。
生体成分あるいは薬剤があるが、特に臨床的には
生体体液中に含まれる種々のホルモン類、蛋白質
が重要である。具体的にはペプチドホルモン類、
ステロイドホルモン類、サイロキシン（T4）、ト
リヨードチロニン（T3）等の甲状線ホルモンあ
るいはイムノグロブリン、α−フエトプロテイン
（AFP）、癌胎児性抗原（CEA）等がある。
一般に免疫測定法は測定感度あるいは特異性に
おいて優れており生体体液中の微量物質の定量に
広く用いられる方法であつて、この方法には標識
物質の種類によりラジオイムノアツセイ（RIA）、
蛍光免疫測定法（FIA）、酵素免疫測定法（EIA）
等に分類される。
おいて優れており生体体液中の微量物質の定量に
広く用いられる方法であつて、この方法には標識
物質の種類によりラジオイムノアツセイ（RIA）、
蛍光免疫測定法（FIA）、酵素免疫測定法（EIA）
等に分類される。
このうち、ラジオイムノアツセイは自動測定機
器が開発され広く普及しているが、特殊な施設と
技術者あるいは管理者を必要とし、また標識物質
として放射性同位元素を用いるため測定廃棄物の
処理に厳重な注意を要する等の問題がある。
器が開発され広く普及しているが、特殊な施設と
技術者あるいは管理者を必要とし、また標識物質
として放射性同位元素を用いるため測定廃棄物の
処理に厳重な注意を要する等の問題がある。
一方、酵素免疫測定法においては、これらの問
題点は解決されるが、いわゆる固相法においては
不溶性担体上に結合した酵素活性を測定するた
め、固相（不溶性担体）の洗浄等煩雑な操作を必
要とし、自動測定系への導入も難しく、また生体
体液成分による干渉を受けて測定精度が低いとい
う欠点がある。
題点は解決されるが、いわゆる固相法においては
不溶性担体上に結合した酵素活性を測定するた
め、固相（不溶性担体）の洗浄等煩雑な操作を必
要とし、自動測定系への導入も難しく、また生体
体液成分による干渉を受けて測定精度が低いとい
う欠点がある。
本発明者等は、以上の点を解決すべく鋭意検討
した結果、第二抗体不溶化担体のカラムを用いて
遊離の酵素標識抗原を定量することにより速かに
かつ精度良く抗原を測定でき、しかも自動測定系
への導入が極めて容易であるところの抗原の定量
法を確立したのである。
した結果、第二抗体不溶化担体のカラムを用いて
遊離の酵素標識抗原を定量することにより速かに
かつ精度良く抗原を測定でき、しかも自動測定系
への導入が極めて容易であるところの抗原の定量
法を確立したのである。
即ち、本発明は、定量すべき抗原と酵素標識抗
原を該抗原に対する抗体イムノグロブリンに競争
的に反応させ、得られた反応液を第二抗体不溶化
担体のカラムに流し、反応によつて生成した酵素
標識抗原と抗体イムノグロブリンの結合物を該反
応液より除いた後、液相（カラムからの流下液）
の残存する遊離の酵素標識抗原量を、酵素活性を
測定することによつて求め、その測定値より抗原
を定量する方法であり、しかも上記工程における
抗イムノグロブリン抗体と不溶性担体との結合
は、Ｓ−Ｓ結合を介して行い、使用後、該不溶性
担体を還元剤にて洗浄し、再び抗イムノグロブリ
ン抗体をＳ−Ｓ結合を介して結合せしめ、くり返
し測定に使用するものであり、且つ測定系には、
ゼラチンと塩類とを共存させて、生体体液中に含
まれる干渉物質の影響を抑制しつつ定量する方法
である。
原を該抗原に対する抗体イムノグロブリンに競争
的に反応させ、得られた反応液を第二抗体不溶化
担体のカラムに流し、反応によつて生成した酵素
標識抗原と抗体イムノグロブリンの結合物を該反
応液より除いた後、液相（カラムからの流下液）
の残存する遊離の酵素標識抗原量を、酵素活性を
測定することによつて求め、その測定値より抗原
を定量する方法であり、しかも上記工程における
抗イムノグロブリン抗体と不溶性担体との結合
は、Ｓ−Ｓ結合を介して行い、使用後、該不溶性
担体を還元剤にて洗浄し、再び抗イムノグロブリ
ン抗体をＳ−Ｓ結合を介して結合せしめ、くり返
し測定に使用するものであり、且つ測定系には、
ゼラチンと塩類とを共存させて、生体体液中に含
まれる干渉物質の影響を抑制しつつ定量する方法
である。
本発明に使用される標識用酵素としてはβ−ガ
ラクトシダーゼ、アルカリホスフアターゼ等EIA
において通常用いられる酵素であればいずれでも
よい。
ラクトシダーゼ、アルカリホスフアターゼ等EIA
において通常用いられる酵素であればいずれでも
よい。
酵素標識抗原の作製に際してはグルタルアルデ
ヒド、カルボジイミド、Ｎ，Ｎ−ｏ−フエニレン
ジマレイミド、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−
ハイドロキシサクシンイミドエステル（ｍ−
Maleimidobenzoyl−Ｎ−Hydroxysuccinimide
Ester）等の二官能性試薬が用いられる。
ヒド、カルボジイミド、Ｎ，Ｎ−ｏ−フエニレン
ジマレイミド、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−
ハイドロキシサクシンイミドエステル（ｍ−
Maleimidobenzoyl−Ｎ−Hydroxysuccinimide
Ester）等の二官能性試薬が用いられる。
不溶性担体としてはアガロース、デキストラ
ン、セルロースなどの多糖類、ポリエチレン等の
合成樹脂あるいはガラス、ポリアクリルアミド等
が用いられ、形態としてはビーズ状、繊維状であ
ることが好ましい。
ン、セルロースなどの多糖類、ポリエチレン等の
合成樹脂あるいはガラス、ポリアクリルアミド等
が用いられ、形態としてはビーズ状、繊維状であ
ることが好ましい。
抗イムノグロブリン抗体と不溶性担体との結合
は、Ｓ−Ｓ結合を利用して行い、例えば抗イムノ
グロブリン抗体の分子に存在するＳ−Ｓ結合を還
元し、あるいはＳ−アセチルメルカプト無水コハ
ク酸等の試薬を用いてSH基を導入し、これとSH
基を有する不溶性担体とを接触せしめてＳ−Ｓ結
合によつて不溶化せしめる。この場合、測定に使
用した不溶性担体をジチオスレイトールの如き還
元剤で洗浄し、不溶性担体上のＳ−Ｓ結合を切断
してSH基とし、再びSH基を付与せしめた抗イム
ノグロブリンを結合させ、くり返し測定に使用す
る。
は、Ｓ−Ｓ結合を利用して行い、例えば抗イムノ
グロブリン抗体の分子に存在するＳ−Ｓ結合を還
元し、あるいはＳ−アセチルメルカプト無水コハ
ク酸等の試薬を用いてSH基を導入し、これとSH
基を有する不溶性担体とを接触せしめてＳ−Ｓ結
合によつて不溶化せしめる。この場合、測定に使
用した不溶性担体をジチオスレイトールの如き還
元剤で洗浄し、不溶性担体上のＳ−Ｓ結合を切断
してSH基とし、再びSH基を付与せしめた抗イム
ノグロブリンを結合させ、くり返し測定に使用す
る。
ここで使用される抗イムノグロブリン抗体は、
イムノグロブリンそのものでもよいが、ペプシ
ン、パパインなどのプロテアーゼで処理して抗原
結合部位のみを分離したもの（即ちFab′部分、
Ｆ（ab′）2部分など）であつてもよい。
イムノグロブリンそのものでもよいが、ペプシ
ン、パパインなどのプロテアーゼで処理して抗原
結合部位のみを分離したもの（即ちFab′部分、
Ｆ（ab′）2部分など）であつてもよい。
上のような試薬を用いることにより抗原の定量
を行なうことができるが、生体体液中の微量成分
を測定するような場合には、生体体液成分による
干渉作用により測定精度が著しく悪くなることが
あるので、測定系にゼラチンと塩類を共存させる
ことにより、干渉物質による影響を抑制あるいは
除去する。塩類としては食塩等が用いられる。
を行なうことができるが、生体体液中の微量成分
を測定するような場合には、生体体液成分による
干渉作用により測定精度が著しく悪くなることが
あるので、測定系にゼラチンと塩類を共存させる
ことにより、干渉物質による影響を抑制あるいは
除去する。塩類としては食塩等が用いられる。
本発明によればこのように、簡単な操作で精度
良く抗原を測定することができ、また酵素活性を
測定する試料が溶液であるため自動測定系への応
用が可能となるのである。
良く抗原を測定することができ、また酵素活性を
測定する試料が溶液であるため自動測定系への応
用が可能となるのである。
次に本発明の実施例を示す。
実施例 １
サイロキシン（T4）の定量
(1) ヤギ（抗ウサギIgG）IgGの調製（IgG＝イ
ムノグロブリンＧ） 加藤らの方法（Journal of Biochemistry
81巻、1557ページ、1977年）に従い、ヤギの抗
ウサギIgG血清より硫安分画、DEAE−セルロ
ースクロマトグラフイによつて調製した。
ムノグロブリンＧ） 加藤らの方法（Journal of Biochemistry
81巻、1557ページ、1977年）に従い、ヤギの抗
ウサギIgG血清より硫安分画、DEAE−セルロ
ースクロマトグラフイによつて調製した。
(2) 再生可能な（抗ウサギIgG）IgG不溶化セフ
アロースの調製 (1)で調製した（抗ウサギIgG）IgG溶液を
0.1M酢酸緩衝液（PH５）に対して透析し、つ
いで75ｍＭの２−メルカプトエチルアミンにて
37℃で90分間還元した。得られた還元IgGは１
分子当り６〜７個のSH基を持つていた。次に
0.1M酢酸緩衝液（PH５）で平衡化したセフア
デツクスＧ−25のカラムで２−メルカプトエチ
ルアミンを除き、同じ緩衝液で平衡化したセフ
アロース−（グルタチオン−２−ピリジルジス
ルフイド）のカラムにこの還元IgGを流し、
IgGをＳ−Ｓ結合を介してセフアロースに不溶
化した。（抗ウサギIgG）IgG不溶化セフアロー
スは0.3M KClと１ｍＭエチレンジアミン４酢
酸を含む0.1Mトリス塩酸緩衝液（PH7.5）で洗
浄後４℃で保存した。
アロースの調製 (1)で調製した（抗ウサギIgG）IgG溶液を
0.1M酢酸緩衝液（PH５）に対して透析し、つ
いで75ｍＭの２−メルカプトエチルアミンにて
37℃で90分間還元した。得られた還元IgGは１
分子当り６〜７個のSH基を持つていた。次に
0.1M酢酸緩衝液（PH５）で平衡化したセフア
デツクスＧ−25のカラムで２−メルカプトエチ
ルアミンを除き、同じ緩衝液で平衡化したセフ
アロース−（グルタチオン−２−ピリジルジス
ルフイド）のカラムにこの還元IgGを流し、
IgGをＳ−Ｓ結合を介してセフアロースに不溶
化した。（抗ウサギIgG）IgG不溶化セフアロー
スは0.3M KClと１ｍＭエチレンジアミン４酢
酸を含む0.1Mトリス塩酸緩衝液（PH7.5）で洗
浄後４℃で保存した。
(3) β−ガラクトシーゼ標識サイロキシンの調製
サイロキシンと４−（マレイミドメチル）シ
クロヘキサン−１−カルボキシリツクアシツド
サクシンイミドエステル（４−
（Maleimidomethyl）cyclohexane−１−
carboxylic acid，succinimide ester、
MCAE、ジーベンケミカル社、東京）を各々
別にジメチルホルムアミドに溶解し、0.1Mリ
ン酸緩衝液（PH７）に加えて混合し、30℃で90
分反応させた。反応は1Mグリシン溶液を加え
ることによつて停止した。次にこの反応液に
0.1Mリン酸緩衝液（PH７）に溶解したβ−ガ
ラクトシダーゼを加え、30℃で30分間反応させ
た後、0.1Mメルカプトエチルアミンを加えて
反応を停止し、この反応液を0.1Mリン酸緩衝
液（PH７）で平衡化したセフアクリルＳ−300
（フアルマシア社）のカラムに流し、活性ピー
クの部分を集めた。得られたβ−ガラクトシダ
ーゼ標識サイロキシンは、塩化マグネシウムと
牛血清アルブミンを加えて４℃で保存した。
クロヘキサン−１−カルボキシリツクアシツド
サクシンイミドエステル（４−
（Maleimidomethyl）cyclohexane−１−
carboxylic acid，succinimide ester、
MCAE、ジーベンケミカル社、東京）を各々
別にジメチルホルムアミドに溶解し、0.1Mリ
ン酸緩衝液（PH７）に加えて混合し、30℃で90
分反応させた。反応は1Mグリシン溶液を加え
ることによつて停止した。次にこの反応液に
0.1Mリン酸緩衝液（PH７）に溶解したβ−ガ
ラクトシダーゼを加え、30℃で30分間反応させ
た後、0.1Mメルカプトエチルアミンを加えて
反応を停止し、この反応液を0.1Mリン酸緩衝
液（PH７）で平衡化したセフアクリルＳ−300
（フアルマシア社）のカラムに流し、活性ピー
クの部分を集めた。得られたβ−ガラクトシダ
ーゼ標識サイロキシンは、塩化マグネシウムと
牛血清アルブミンを加えて４℃で保存した。
(4) β−ガラクトシターゼ活性の測定
酵素液（PH７）１mlにｏ−ニトロフエニル−
β−Ｄ−ガラクトピラノシド溶液（4.5mg／ml）
0.25mlを加え、37℃で反応させた液、1M炭酸
ナトリウム溶液0.25mlを加えて反応を停止し、
420nｍの吸光度を測定した。
β−Ｄ−ガラクトピラノシド溶液（4.5mg／ml）
0.25mlを加え、37℃で反応させた液、1M炭酸
ナトリウム溶液0.25mlを加えて反応を停止し、
420nｍの吸光度を測定した。
(5) 測定
標準サイロキシン溶液を緩衝液Ｇ（0.3M
NaCl、１ｍＭ MgCl2、0.5％ゼラチン、0.1％
牛血清アルブミン、0.1％NaN3 ２ｍＭ Ｎ−
エチルマレイミドを含むPH７の10ｍＭリン酸緩
衝液）にて希釈した各検体0.1ml（サイロキシ
ン変量０、0.1、0.3、1.0、3.0、10、30nｇ／0.1
ml）、緩衝液Ｇで100倍に希釈した抗サイロキシ
ン血清（ウサギ）0.1mlを混合し、更にβ−ガ
ラクトシダーゼ標識サイロキシンを含む緩衝液
G0.3mlを加え、30℃で１時間反応させた。こ
の反応液を緩衝液Ｇで平衡化した（抗ウサギ
IgG）IgG不溶化セフアロースのカラム（0.1
ml）に流した後、カラムを２mlの緩衝液Ｇで洗
浄した。カラムより流下した液を集め、その酵
素活性を測定してサイロキシン検量線を得た。
なお、免疫反応において標準サイロキシンと抗
サイロキシン血清を１時間反応させた後、β−
ガラクトシターゼ標準サイロキシンを加え更に
１時間反応させた場合も同じ検量線が得られ
た。また１時間の反応は少なくとも15分まで短
縮しても測定に支障はなかつた。
NaCl、１ｍＭ MgCl2、0.5％ゼラチン、0.1％
牛血清アルブミン、0.1％NaN3 ２ｍＭ Ｎ−
エチルマレイミドを含むPH７の10ｍＭリン酸緩
衝液）にて希釈した各検体0.1ml（サイロキシ
ン変量０、0.1、0.3、1.0、3.0、10、30nｇ／0.1
ml）、緩衝液Ｇで100倍に希釈した抗サイロキシ
ン血清（ウサギ）0.1mlを混合し、更にβ−ガ
ラクトシダーゼ標識サイロキシンを含む緩衝液
G0.3mlを加え、30℃で１時間反応させた。こ
の反応液を緩衝液Ｇで平衡化した（抗ウサギ
IgG）IgG不溶化セフアロースのカラム（0.1
ml）に流した後、カラムを２mlの緩衝液Ｇで洗
浄した。カラムより流下した液を集め、その酵
素活性を測定してサイロキシン検量線を得た。
なお、免疫反応において標準サイロキシンと抗
サイロキシン血清を１時間反応させた後、β−
ガラクトシターゼ標準サイロキシンを加え更に
１時間反応させた場合も同じ検量線が得られ
た。また１時間の反応は少なくとも15分まで短
縮しても測定に支障はなかつた。
実施例 ２
不溶性担体の再生
実施例１において使用した（抗ウサギIgG）
IgG不溶化セフアロースを再生した。
IgG不溶化セフアロースを再生した。
測定に使用したカラム（0.1ml）を0.3M KClと
１ｍＭエチレンジアミン４酢酸を含むPH7.5の
0.1Mトリス塩酸緩衝液で洗浄し、次に30ｍＭの
ジチオスレイトールを含む同じ緩衝液を流し、更
にカラムを洗浄後、２−2′−ジチオジピリジンを
含む緩衝液を流してＳ−Ｓ結合を形成させた。こ
のカラムに実施例１と同様の方法で（抗ウサギ
IgG）IgGを結合させた。
１ｍＭエチレンジアミン４酢酸を含むPH7.5の
0.1Mトリス塩酸緩衝液で洗浄し、次に30ｍＭの
ジチオスレイトールを含む同じ緩衝液を流し、更
にカラムを洗浄後、２−2′−ジチオジピリジンを
含む緩衝液を流してＳ−Ｓ結合を形成させた。こ
のカラムに実施例１と同様の方法で（抗ウサギ
IgG）IgGを結合させた。
再生したカラムを用いてサイロキシンを定量し
たところ実施例１の場合と同じ検量線が得られ
た。
たところ実施例１の場合と同じ検量線が得られ
た。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 定量すべき抗原と酵素で標識された抗原（酵
素標識抗原）とを該抗原に対する抗体イムノグロ
ブリンに競争的に反応させ； 得られた反応液を、抗イムノグロブリン抗体を
結合せしめた不溶性担体（第二抗体不溶化担体）
のカラムに流し、該反応液中の酵素標識抗原と抗
体イムノグロブリンの結合物を該カラムに吸着せ
しめ； しかも、上記工程における抗イムノグロブリン
抗体と不溶性担体との結合はＳ−Ｓ結合を介して
行い、使用後、該不溶性担体を還元剤にて洗浄
し、再び抗イムノグロブリン抗体をＳ−Ｓ結合を
介して結合せしめ、くり返し測定に使用するもの
であり； 且つ測定系には、ゼラチンと塩類とを共存させ
て、生体体液中に含まれる干渉物質の影響を抑制
せしめ； 上記吸着工程後、該カラムに吸着されずに流下
する遊離の酵素標識抗原を定量すること； を特徴とする酵素標識抗原と第二抗体不溶化担体
を用いる抗原の定量法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1501381A JPS57131062A (en) | 1981-02-05 | 1981-02-05 | Quantitative determination of antigen using enzyme- labelled antigen and second antibody insolubilizing carrier |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1501381A JPS57131062A (en) | 1981-02-05 | 1981-02-05 | Quantitative determination of antigen using enzyme- labelled antigen and second antibody insolubilizing carrier |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS57131062A JPS57131062A (en) | 1982-08-13 |
| JPH0122905B2 true JPH0122905B2 (ja) | 1989-04-28 |
Family
ID=11876988
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1501381A Granted JPS57131062A (en) | 1981-02-05 | 1981-02-05 | Quantitative determination of antigen using enzyme- labelled antigen and second antibody insolubilizing carrier |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS57131062A (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3617763A1 (de) * | 1985-05-28 | 1986-12-04 | Olympus Optical Co., Ltd., Tokio/Tokyo | Verfahren zur durchfuehrung immunologischer bestimmungen und dafuer geeignete vorrichtung |
| US4810638A (en) * | 1986-07-24 | 1989-03-07 | Miles Inc. | Enzyme-labeled antibody reagent with polyalkyleneglycol linking group |
| JP2638521B2 (ja) * | 1994-11-24 | 1997-08-06 | 有限会社ビー・エス・アール | Ｅｌｉｓａによる血清中胆汁酸類の測定による肝疾患決定法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1036935A (en) * | 1973-03-19 | 1978-08-22 | Lavell R. Johnson | Method and apparatus for radioimmunoassay with regeneration of immunadsorbent |
| ZA761751B (en) * | 1975-04-07 | 1977-03-30 | Summa Corp | Immobilized immunoadsorbent |
| US4128628A (en) * | 1976-03-12 | 1978-12-05 | University Of Virginia Alumni Patents Foundation | Automated immunoassay |
| US4104026A (en) * | 1976-03-12 | 1978-08-01 | University Of Virginia | Immunoassay separation technique |
| JPS5925184B2 (ja) * | 1978-12-22 | 1984-06-15 | 天野製薬株式会社 | 免疫測定法における非特異的阻害作用の除去法 |
| JPS55136261A (en) * | 1979-04-12 | 1980-10-23 | Toyo Jozo Co Ltd | Novel compound and kit comprising it |
-
1981
- 1981-02-05 JP JP1501381A patent/JPS57131062A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS57131062A (en) | 1982-08-13 |
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