JPH01275532A - レトロウイルス感染の治療のためのポリ硫酸化ヘパリンの組合せ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 マウス、牛、鳥、猿及びヒトにおける多くの悪性リンパ
性白血病新生物はレトロウィルスによりひき起こされる
。特にヒトにおける後天性免疫欠如（ＡＩＤＳ　）は、
レトロウィルスであるＨＩＶ　（ヒト免疫欠如ウィルス
）によりひき起こされる。

ヒト及び他の哺乳動物における前記のウィルス感染の予
防及び治療上の化学療法のためのスタートは、逆転写酵
素の抑制物質、レトロウィルスの宿主細胞との結合抑制
物質、ウィルス生合成抑制物質、抗ウイルスリンホカイ
ン及びレチノイド（Ｒｅｔｉｎｏｉｄｅ　）によりウィ
ルスの増殖を抑制することである。

ドイツ特許出願３７４４１１９号には、レトロウィルス
による病気の予防及び治療のためのポリ硫酸化ヘパリン
の使用が記載されている。

本発明の対象は、ポリ硫酸化ヘパリンと逆転写酵素抑制
物質との、及び／又はレトロウィルスの宿主細胞への結
合抑制物質との、及び／、７゜はウィルス生合成抑制物
質との、及び／又は抗ウィルス作用を有するリンホカイ
ンとの、及び／又はレチノイドとの組合せである。

さらに本発明の対象は、ポリ硫酸化ヘパリンと逆転写酵
素抑制物質との、及び／又はレトロウィルスの宿主細胞
への結合抑制物質との、及び／又はウィルス生合成抑制
物質との、及び／又は抗ウィルス作用を有するリンホカ
インとの、及び／又はレチノイドとの組合せを、レトロ
ウィルスにより生じる病気の予防又は治療用医薬を製造
するために使用する方法である。

本発明の組合せのための好ましい成分の例を下記に示す
。

逆転写酵素抑制物質の例は次のものである。

３′−アジド−２’、６’−ジデオキシチミジン°、２
’、　３’−ジデオキシシチジン　２／、　３／−ジデ
オキシチミジン、τ、６′−ジデオキシイノシン　２／
、３／−ジデオキシシチジン類、τ、３′−ジデオキシ
アデノシン、３′−アジド−２’、　３’−ジデオキシ
アデノシン、３′−アジド−τ、３′−ジデオキシウリ
ジン及びホ５ｉｅｎｃｅ、　Ｖｏｌ、　８　　（１９８
７）　　３３９’〜３４５　；　Ｊ、Ｍｅｄ。

Ｃｈｅｍ、　３０　（１９８７）　１２７０〜１２７８
及びそこに引用の文献参照）。

レトロウィルスの宿主細胞への結合抑制物質の例は、ジ
フェニルヒダントイン及び（４，４’−ジヒドロキシジ
フェニル）−ヒダントイン（ＥＰ−Ｏ８２３６９５１）
、ペプチドＴ　（ＥＰ−Ｏ３２４９３９０）及びＴ４−
受容体に対するモノクローナル抗体例えば０ＫＴ４（Ｎ
ａｔｕｒｅ　３２５（１９８７）７７３〜７７８）であ
る。

ウィルス生合成抑制物質の例は、アバロール（Ａｖａｒ
Ｏｌ　）及′びアバロン（ＡＶａｒＯｎ　）である（　
Ｊ、Ｎａｔｌ、Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔ、　７８（１９
８７）６６３〜６６６）。

抗ウイルス性リンホカインの例は、インターフェロンα
、インターフェロンβ、インターフェロン１　（Ａｎｔ
ｉｖｉｒａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　６　（１９８６）　
１〜１７）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）及びリンホト
キシン（ＴＮＦβ）（Ｎａｔｕｒｅ３２３（１９８６）
８１９〜８２２）である。

レチノイドの例は、オール−トランス−レチン酸、１６
−シス−レチン酸、レチノール、エトレチネート、４−
ヒドロキシフェニルレチンアミド、テラロート類、アン
トレチン、オール−トランス−３，７，１１，１５−テ
トラメチル−２，４゜６．１０．１４−ヘキサデカペン
タエン酸、１．２，３．４−テトラヒドロ−１，１，４
，４−テトラメチル−６−〔１−メチル−２−（４−ヒ
ドロキシ−フェニル）〕−エチニルナフタリン及ヒ１，
２，３．４−テトラヒドロ−１，１，４，４−テトラメ
チル−６−〔１−メチル−２−（４−エチルスルホニル
フェニル−１））−エテニルナフタリンテアル。

ポリ硫酸化ヘパリンとの組合せのために特に好適なもの
は、３′−アジド−２’、　３’−ジデオキシチミジン
、２’、　３’−ジデオキシシチジン、ホスカルネット
、ジフェニルヒダントイン、（４，４’−ジヒドロキシ
ジフェニル）−ヒダントイン、ＯＫＴ、　、アバロール
、アバロン、インターフェロンβ、腫瘍壊死因子α及び
β、レチノール、オール−トランス−レチン酸、１３−
シス−レチン酸、アシレチン及び４−ヒドロキシフェニ
ルレチンアミドである。

ポリ硫酸化ヘパリンは、任意の遊離の水酸基及びアミノ
基において追加的に硫酸化されたヘパリンであり、硫黄
含量は少なくとも１３％である。本発明に用いられるポ
リ硫酸化ヘパリンは、好ましくは１３〜１６％の硫黄含
量を有する。硫黄含量が１６％以上のポリ硫酸化ヘパリ
ンは、実際上製造できない。

ポリ硫酸化ヘパリンはそれ自体として、又は生理的に容
認される塩基とのその塩の形で用いることができる。塩
としては、特にＮａ塩、Ｃａ塩及びＭｇ塩があげられる
。有機塩基例えばジエチルアミン、トリエチルアミン又
はトリエタノールアミンとの塩も用いられる。本明細書
において用いられる「ポリ硫酸化ヘパリン」の表現は、
塩をも包含する。

ポリ硫酸化されたヘパリンは、ｉ　ｏｏｏｏ〜４０００
０ダルトンの範囲の分子量を有する天然産のヘパリンで
あってよい。天然産のヘパリンを亜硝酸塩により（Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　１５　（１９７６）３９３２）
又は硫酸とクロルスルホン酸の混合物により（ＦＲ−Ｐ
Ｓ　２５３８４０４　）処理することによって、より低
分子量のヘパリンが得られる。分子量が１０００以下の
ポリ硫酸化ヘパリンは、レトロウィルスの駆除のために
はあまり適しない。分子量が約２０００〜２０００００
のポリ硫酸化ヘパリンが最適である。そのほか分子量が
２０００〜９０００のポリ硫酸化ヘパリンは、経口投与
できるという利点を有する。

本発明の組合せに用いられるポリ硫酸化ヘパリンは、１
３．０〜１６．０％好ましくは１３〜１５％の硫黄含量
及び２０００〜４００００好ましくは３０００〜１４０
０００分子量を有する。

ポリ硫酸化ヘパリンは逆転写酵素を抑制し、そしてレト
ロウィルス特にＨＩＶ　−Ｉ−ウィルスの複製を抑制す
る。

ポリ硫酸化ヘパリンと逆転写酵素抑制物質との、及び／
又はレトロウィルスの宿主への結合抑制物質との、及び
／又はウィルス生合成抑制物質との、及び／又は抗ウィ
ルス作用を有するリンホカインとの、及び／又はレチノ
イドとの組合せにより、ウィルスの複製は相乗的に増強
される。

この作用の増強は、ポリ硫酸化ヘパリン１部（重量部）
を、 ６′−アジド−τ、６′−ジデオキシチミジン０６２・
１０−３〜２・１０−３部、 グ、６′−ジデオキシシチジン４・１０−３〜４・１０
−２部、ジフェニルヒダントイン１〜２０部、 アバロール０．１〜２部、 アバロン０．１〜２部、 オール−トランス−レチン酸又は他のレチノイド０．０
５〜５部、 腫瘍壊死因子α０，０５〜２部、　　　−リンホトキシ
ン０．０１〜１部、 インターフェロンγ０．０５〜５部、ならびに○ＫＴ、
　１〜１００部 と組合せることにより得ることができる。

本発明の結合は、常法により経口的に又は非経口的に（
皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内）投与できる。投与は蒸
気又はスプレーを用いて鼻咽腔を通して行うこともでき
る。

投与量は、患者の年令、状態及び体重ならびに適用法に
依存する。通常は１日当りの有効物質の用量は、非経口
的゛投与で約０．１〜’２ｍｇ／に９体重、経口的投与
で約１〜１０ｍ９／に’ｉ１体重である。普通の場合は
経口的に３ｍ９／−ｋｌｉ’、非経口的に０．５■／ｋ
ｇの１日当りの用量で満足すべき結果が得られる。

新規な結合は、普通のガレスス適用形で固体又は液体と
して、例えば錠剤、フィルム錠剤、カプセル、散剤、顆
粒、糖衣錠、半割、溶液、軟膏、クリーム又はスプレー
として使用できる。

これらは常法により製造される。その際有効物質は、普
通のガレヌス補助剤例えば錠剤結合剤、充填剤、保存剤
、錠剤崩壊剤、流動調節剤、軟化剤、湿潤剤、分散剤、
乳化剤、溶剤、遅延剤、抗酸化剤及び／又は噴射ガスを
用いて加工できる（　Ｈ，５ｕｃｋｅｒ　ｅｔ　ａＣＰ
ｈａｒｍａｚｅｕｔｉｓｃｈｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅ
、　１９７８参照）。こうして得られる適用形は、有効
物質を普通は０．１〜９９ＭＮ％の量で含有する。

実施例１Ａ ポリ硫酸化ヘパリンの製造 分別されていないヘパリン１０ｇ又は脱型台された低分
子量ヘパリン１０ｙを、水１００！ｎｌに溶解し、カチ
オン交換体（例えばダウエックスＭＳＣ−１）　５０　
ｍｌを入れたカラム上に乗せ、水で溶離する。溶離液中
には対応する遊離ヘパリン酸が生成する。次いでこのも
のをピリジン約５ＱｍｌでｐＨ７に中和したのち、親油
性化する。

ヘパリン−ピリジニウム塩が約１１，９得られる。

前記方法により製造された種々のヘパリンのピリジニウ
ム塩は、ポリ硫酸化のために用いられる出発材料である
。その際硫酸化度は、用いられるクロルスルホン酸の量
に依存する。下記指示により種々のポリ硫酸化ヘパリン
の製造について詳細に説明する。

ヘパリン−ピリジニウム塩１０．９を、窒累な導入しな
からピリジン５Ｑｍｌ中に攪拌混合し、５０℃に加温し
た。別にクロルスルホン酸２０ｍ１　（２ｍｌｌ　＆ヘ
パリンーピリジニウム塩）を、攪拌しながらピリジン３
００ｍ１中に滴加した。

この反応混合物の温度は９０°Ｃであった。短時間攪拌
したのち、ピリジン−クロルスルホン酸混合物を、用意
したヘパリン懸濁液中に激しく攪拌しながら加えた。次
いで５０℃でさらに６０分間攪拌し、室温に冷却した。

粒状沈殿を戸別し、メタノールで洗浄し、０゜５％Ｎａ
Ｃ１溶液１００ｍ１中に溶解し、エタノール６００ｍＪ
で沈殿させた。得られた沈殿を水に溶解し、このピリジ
ン−ヘパリンをカチオン交換体ダウエックスＭＳＣ−１
の８０ｍ１を通して再び遊離ヘパリン酸に変えた。次い
でこのものを１０　Ｎ　−ＮａＯＨでｐＨ７となし、６
倍容量のエタノールで沈殿させた。この沈降物を水１０
０ｍ／に溶解し、濾過して凍結乾燥した。収量は１０゜
８ｇで、得られた生成物（Ａ）は１４２０００ダルトン
の分子量（ロ）及び１４．８％の硫黄含量を有していた
。

同様にして、下記の特性を有する生成物が製造された。

１Ｂ、（篇）＝８２００、硫黄含量１４．９％（分子量
７７００ダルトンのヘパリンから）１Ｃ０（西）＝５６
００、硫黄含量１４．１％（分子量５１００ダルトンの
ヘパリンカラ）１Ｄ、（庶）＝４ｉ０、硫黄含量１３．
６％（分子量３８００ダルトンのヘパリンから）１Ｅ、
（西）＝２８００、硫黄含量１４，７％（分子量２５０
０ダルトンのヘパリンから）実施例２ 錠剤製造機を用い、常法により下記組成の錠剤を製造す
る。

１００ｍ９　実施例１人の物質 ５０ｍ１　　３’−アジド−２’、　３’−ジデスオキ
シチミジン １２０７ｆｉ９　　とうもろこし殿粉 １３．５■　ゼラチン ４５ｍ９　　乳　　糖 ２．２５ｍ９　　アエロジル（化学的に純粋な超顕微鏡
的微細分散の珪酸） ６．７５Ｔｎ９　　ばれいしょ殿粉（６％糊として）実
施例６ 糖衣錠の製造 常法により下記組成の糖衣錠を製造する。

１５０ｒｎｇ　　実施例１Ｄの物質 ５０ｍ９　　アバロール ６０■　心物質 ６０ｍ９　　糖衣物質 心物質は、とうもろこし殿粉９部、乳糖３部及ヒルビス
コールＶＡ６４（ビニルピロリドン−ビニルアセテート
−共重合体６０：４０、Ｐｈａｒｍ。

Ｉｎｄ、１９６２．５８６参照）１部からなる。糖衣物
質は、蔗糖５部、とうもろこし殿粉２部、炭酸カルシウ
ム２部及びメルク１部からなる。こうして製造された糖
衣錠に、続いて耐胃液性の被膜を施す。

実施例４ 溶液の製造 実施例１Ｂの物質７ｇ及びＴＮＦα６ｇを水５０００　
ｍｌＫ　ＮａＣ１を添加して溶解し、０．ｌＮ−ＮａＯ
ＨでｐＨ６，０にす乞と血液等張溶液が生成し、こｔを
無菌濾過する。この溶液を各５　ｍｌずつアンプルに充
填する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ポリ硫酸化ヘパリンと逆転写酵素抑制物質との、及
   び／又はレトロウイルスの宿主細胞への結合抑制物質と
   の、及び／又はウィルス生合成抑制物質との、及び／又
   は抗ウィルス作用を有するリンホカインとの、及び／又
   はレチノイドとの組合せ。 ２、ポリ硫酸化ヘパリンと逆転写酵素抑制物質との、及
   び／又はレトロウイルスの宿主細胞への結合抑制物質と
   の、及び／又はウィルス生合成抑制物質との、及び／又
   は抗ウィルス作用を有するリンホカインとの、及び／又
   はレチノイドとの組合せを、レトロウイルスにより生じ
   る病気の予防又は治療用医薬を製造するために使用する
   方法。