JPH0129362B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、アミノ酸及びアミノ酸重合体の結合
した多糖複合体の製造方法に関するものである。 多糖、アミノ酸及びアミノ酸重合体は、生物の
体を構成する物質であり、生体との親和性が良好
であり、また場合によつては、生体内吸収分解性
を有する。また、多糖とアミノ酸との複合体は、
生体成分（酵素、抗体、ホルモン等）と特異的な
相互作用が期待され、免疫吸着剤、酵素精製用ク
ロマト担体等に応用できる。 本発明者らは、アミノ酸及びアミノ酸重合体と
多糖との複合体の調製に鋭意努力した結果、Ｎ−
カルボキシアミノ酸無水物とアミノ基を有する多
糖とを用いることによつて、アミノ酸及びアミノ
酸重合体をペプチド結合を通して多糖に結合した
複合体の合成に到達し、本発明をなすに至つた。
この複合体においてアミノ酸及びアミノ酸重合体
の種類とアミノ酸の結合量を変化させることによ
つて生体内吸収分解性あるいは、酵素の吸着性を
制御することができる。多糖、それ自体では発現
できないような、特異的吸着現象が可能となる。 本発明の多糖複合体に結合するアミノ酸重合体
を例示すれば、例えば、Ｌ−グルタミン酸ベンジ
ル、Ｌ−アスパラギン酸ベンジル、Ｎ−ベンジル
オキシカルボニル−Ｌ−リジン、Ｌ−メチオニ
ン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−フエニルアラニン、Ｌ−
バリン、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−オ
ルニチン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−グルタミン
酸、Ｎ−ヒドロキシエチル−Ｌ−グルタミン、Ｎ
−ヒドロキシプロピル−Ｌ−グルタミン、DL−
アラニン、DL−ロイシン、DL−メチオニン等の
単独重合体、またはそれらの２種以上が混合した
共重合体である。もう一方の成分であるアミノ基
を有する多糖は、部分的脱アセチル化キチン、キ
トサン、アミノエチルアガロース、グリシルスタ
ーチ等である。溶媒としては、ジメチルスルホキ
シド、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムア
ミド等のアミノ酸重合体を溶解させ同時に、多糖
を膨潤させるものを用いる。アミノ基を有する多
糖とアミノ酸重合体の構成比は、多糖が10〜90重
量％である。 本発明の複合体の製造は以下のように行う。例
えば部分的脱アセチル化キチンをジメチルアセト
アミド、メチルピロリドン、塩化リチウム（10：
10：１重量比）の混合溶媒に溶解し、Ｎ−カルボ
キシアミノ酸無水物を加えて、攪拌溶解させ、キ
チンのアミノ基にアミノ酸を順次結合させてい
く。 Ｎ−カルボキシアミノ酸無水物は、アミノ酸と
ホスゲンを反応させることによつて、合成され
る。 この反応を（）式で示す。ここでアミノ酸を
NH₂CHRCOOHで表わし、Ｒはアミノ酸残基の
側鎖である。 得られたＮ−カルボキシアミノ酸無水物は、ア
ミノ基と室温で容易に反応し、アミノ酸を結合し
た多糖になる。部分的脱アセチル化キチンは、Ｎ
−アセチルグルコサミンとグルコサミンの共重合
体であるので、この反応は（）式のようにな
る。 Ｎ−カルボキシアミノ酸無水物が多糖のアミノ
基に対して過剰量存在すれば、最初に結合したア
ミノ酸のアミノ基に更に、Ｎ−カルボキシアミノ
酸無水物が反応する。これを（）式で示す。 ここでｘは１から100くらいが望ましい。 また均一溶液系でなくとも、アミノ基を有する
多糖に、アミノ酸重合体を結合させることができ
る。キトサンの粉末をジメチルスルホキシドにケ
ンダクさせ、これに、Ｎ−カルボキシアミノ酸無
水物を加え、攪拌することにより、アミノ酸重合
体を結合したキトサン粉末を得ることができる。
この場合も反応は前式と同じである。 多糖の濃度は0.1〜30重量％、Ｎ−カルボキシ
アミノ酸無水物の濃度は0.1〜20重量％が適当で
あり、多糖とＮ−カルボキシアミノ酸無水物との
比は20〜0.05が適当である。 次に本発明を実施例に基づき、さらに詳細に説
明する。 実施例 １ カニガラより製造されたキチン粉末3.0ｇを40
％水酸化ナトリウム水溶液に浸漬し、室温で３時
間放置した。これに氷225ｇを加え攪拌し、均一
なアルカリキチン溶液とし、44時間室温で放置し
た。これを５℃に保ちながら濃塩酸60mlを攪拌し
ながら滴下し、更に２規定塩酸40mlを滴下し、PH
７にした。このとき溶液は白濁し、キチンの沈澱
が生じた。これを遠心分離し、沈澱を水で洗浄す
ることと遠心分離を４回おこない、上澄に塩素イ
オンのないことを硝酸銀によつて確めた。更に、
この沈澱に29％アンモニア水を加え、遠心分離
し、次に、水による洗浄と遠心分離を４回行い、
最後に沈澱を乾燥させ、部分的脱アセチル化キチ
ン1.87ｇを得た。別にＬ−グルタミン酸ベンジル
7.65ｇをジオキサン100mlにケンダクさせ、トリ
クロロメチルクロロホーメイト3.0mlを活性炭上
に滴下させて発生させたホスゲンガスを、それに
導入し、50℃で２時間反応させ、その後、窒素ガ
スを１時間通した。ジオキサンを減圧下で蒸留し
て除去し、Ｎ−カルボキシ−Ｌ−グルタミン酸ベ
ンジル無水物7.95ｇを得た。部分的脱アセチル化
キチン0.5ｇをジメチルスルホキシド40mlにゲン
ダクさせ、Ｎ−カルボキシ−Ｌ−グルタミン酸ベ
ンジル無水物2.82ｇを加え、室温で１週間攪拌し
た。沈澱を遠心分離し、ジメチルスルホキシドで
２回洗浄と遠心分離を行つた。次にジオキサンで
同様に３回処理した。得られた沈澱を乾燥した。 このようにして製造した複合体の収率は1.35ｇ
で重量増加率は171％であつた。 部分的脱アセチル化キチンと得られた複合体の
赤外線吸収スペクトルの特性吸収ピークを第１表
に示す。カツコ内のＳ、Ｍ、Ｗは吸収の強さ、つ
まり強い、中位、弱いをそれぞれ示す。 アミノ酸重合体が結合していることを示す赤外
線吸収が、3290、1735、750、700cm^-1に現われて
いた。

【表】 実施例 ２ アルカリキチンの放置時間を163時間にしたこ
とを除いて実施例１と同様に処理して得た、部分
的脱アセチル化キチン0.36ｇをジメチルスルホキ
シド70mlにケンダクさせ、実施例１と同様にし
て、DL−アラニンから合成したＮ−カルボキシ
−DL−アラニン無水物1.61ｇを加え、１週間攪
拌した。水による洗浄と遠心分離を数回繰り返
し、最後にアセトンを加え、沈澱を濾過し、複合
体0.669ｇを得た。重量増加率86％であつた。得
られた複合体と163時間処理した部分的脱アセチ
ル化キチンの赤外線吸収スペクトルの特性吸収ピ
ークを第２表に示す。カツコ内のＳ、Ｍ、Ｗは実
施例１と同じである。

【表】

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ アミノ基を有する多糖にＮ−カルボキシアミ
   ノ酸無水物を反応させることを特徴とするアミノ
   酸又はその重合体の結合した多糖複合体の製法。