JPH01308299A - Ｈｉｖ―１感染の診断及び治療に有用な組成物 - Google Patents
Ｈｉｖ―１感染の診断及び治療に有用な組成物Info
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- JPH01308299A JPH01308299A JP1043384A JP4338489A JPH01308299A JP H01308299 A JPH01308299 A JP H01308299A JP 1043384 A JP1043384 A JP 1043384A JP 4338489 A JP4338489 A JP 4338489A JP H01308299 A JPH01308299 A JP H01308299A
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- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
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- A61P31/12—Antivirals
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
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- C07K16/08—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—RNA viruses
- C07K16/112—Retroviridae (F), e.g. leukemia viruses
- C07K16/114—Lentivirus (G), e.g. human immunodeficiency virus [HIV], feline immunodeficiency virus [FIV] or simian immunodeficiency virus [SIV]
- C07K16/1143—Gag-pol proteins, e.g. p17or p24
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の分野］
本発明は、−船釣にウィルス感染の診断及び治療に関し
、そしてより詳しくは、ヒト免疫欠損ウィルス（ＩＩＴ
Ｖ−１）の感染の診断及びその感染に対する免疫化のた
めに有用な組成物の調製に関する。
、そしてより詳しくは、ヒト免疫欠損ウィルス（ＩＩＴ
Ｖ−１）の感染の診断及びその感染に対する免疫化のた
めに有用な組成物の調製に関する。
これまでＩＩＴＬＶ−１１１及びリンパ節腫瘍関連ウィ
ルス（ＬＡＶ）として呼ばれているヒト免疫欠損ウィル
ス（ＩｉＴＶ−１）は、後天性免疫不全症候群（ΔＩＤ
５）の原因である病因物質として現在同定されている。
ルス（ＬＡＶ）として呼ばれているヒト免疫欠損ウィル
ス（ＩｉＴＶ−１）は、後天性免疫不全症候群（ΔＩＤ
５）の原因である病因物質として現在同定されている。
ＡＩＤＳの広がりは２０世紀の最っとも致命的な感染に
成る恐れがあるので、旧Ｖ−１感染の診断及びそれに対
する免疫化のための方法がますます重要に成って来てい
る。
成る恐れがあるので、旧Ｖ−１感染の診断及びそれに対
する免疫化のための方法がますます重要に成って来てい
る。
１１１Ｖ暑検出及び免疫化の両者における特定の問題は
、ウィルスの相当の遺伝的変異性であった。
、ウィルスの相当の遺伝的変異性であった。
＋＋１Ｖ−１は、８０個ものヌクレオチド及び１０００
個又はそれ以上のヌクレオチドにより異なる種々の変り 異体を含んで成る。ＩＩＩＶ−１ゲノムは、９５００塩
基対を含有するので、種々の株の抗原特性に、おいて相
当の変化が存在するであろうことが予測される。
個又はそれ以上のヌクレオチドにより異なる種々の変り 異体を含んで成る。ＩＩＩＶ−１ゲノムは、９５００塩
基対を含有するので、種々の株の抗原特性に、おいて相
当の変化が存在するであろうことが予測される。
種々の株の抗原特性におけるそのような変化は、効果的
な診断及び治療組成物を供給する作業をより困難なもの
にする。
な診断及び治療組成物を供給する作業をより困難なもの
にする。
１１１Ｖ−１診断及びワクチンの供給のための１つの有
望なアプローチは、種々の株のゲノム間の保存された又
は不変領域を同定することであった。ウィルスのコアー
及びエンベロープ上の免疫学的に認識できる抗原をコー
ドするそのような保存領域は、広範囲の又は好ましくは
すべてのＩＩＩＶ−１株と交差反応する免疫学的試薬を
調製するための主成分として理想的には作用するであろ
う。
望なアプローチは、種々の株のゲノム間の保存された又
は不変領域を同定することであった。ウィルスのコアー
及びエンベロープ上の免疫学的に認識できる抗原をコー
ドするそのような保存領域は、広範囲の又は好ましくは
すべてのＩＩＩＶ−１株と交差反応する免疫学的試薬を
調製するための主成分として理想的には作用するであろ
う。
不運なことには、ＩＩＩＶ−１ゲノム内の保存領域に対
応する多くのペプチドが同定されているけれども、完全
に確かな診断試薬はまた供給されていない。さらに、ワ
クチン又は他の治療組成物を供給することにおいて完全
に効果的であることが半明している保存ペプチドは存在
しない。
応する多くのペプチドが同定されているけれども、完全
に確かな診断試薬はまた供給されていない。さらに、ワ
クチン又は他の治療組成物を供給することにおいて完全
に効果的であることが半明している保存ペプチドは存在
しない。
これらの理由のために、多くの数の、好ましくはすべて
のＨＩＶ−１株に対して免疫学的に反応するウィルス抗
原をコードする、ＩＩＩＬＩゲノム内の追加の保存領域
を同定することが所望される。他方、保存された又は保
存されていないペプチドのグループの個々のペプチドが
組合して使用される場合、患者のサンプルにおける旧Ｖ
−１に対する＋１ＴＶ−１抗体の存在を検出することに
試薬として使用され得る前記グループを同定することが
所望される。典型的にはサブユニットワクチンとに言及
されているワクチン（該ワクチンは、ワクチンとして個
人に投与される場合、多くの数の旧Ｖ−１株と反応する
ことができる血清中和抗体を誘発するために使用される
）に、そのような保存されたペプチド又はペブヂドグル
ープが効果的に使用され得ることが特に所望される。
のＨＩＶ−１株に対して免疫学的に反応するウィルス抗
原をコードする、ＩＩＩＬＩゲノム内の追加の保存領域
を同定することが所望される。他方、保存された又は保
存されていないペプチドのグループの個々のペプチドが
組合して使用される場合、患者のサンプルにおける旧Ｖ
−１に対する＋１ＴＶ−１抗体の存在を検出することに
試薬として使用され得る前記グループを同定することが
所望される。典型的にはサブユニットワクチンとに言及
されているワクチン（該ワクチンは、ワクチンとして個
人に投与される場合、多くの数の旧Ｖ−１株と反応する
ことができる血清中和抗体を誘発するために使用される
）に、そのような保存されたペプチド又はペブヂドグル
ープが効果的に使用され得ることが特に所望される。
＋１ＴＶ−１ペプチドの調製法は、いくつかの文献に記
載されている。ｇｐ４１によりコードされる配列に対応
する２１個のアミノ酸のペプチドは、ヨーロッ、バ特許
出願第８６／３０３２２４．９号、Ｗａｎｄなど、（１
，９８７）ＡＣＰＲ２１：３４及びＰｒｏｃ、Ｎａｔｌ
、八ｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ ８３：６１５９〜６１
６３に記載されている。Ｋｅｎｎｅｄｙなど、（１９８
６）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３１：１５５６〜１５５９は、
ｇｐ１６０ 、ずなわちｇｐ２０及びｇｐ４１への前駆
体によりコードされる配列に相当する１８個のアミノ酸
のペプチドを記載する。
載されている。ｇｐ４１によりコードされる配列に対応
する２１個のアミノ酸のペプチドは、ヨーロッ、バ特許
出願第８６／３０３２２４．９号、Ｗａｎｄなど、（１
，９８７）ＡＣＰＲ２１：３４及びＰｒｏｃ、Ｎａｔｌ
、八ｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ ８３：６１５９〜６１
６３に記載されている。Ｋｅｎｎｅｄｙなど、（１９８
６）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３１：１５５６〜１５５９は、
ｇｐ１６０ 、ずなわちｇｐ２０及びｇｐ４１への前駆
体によりコードされる配列に相当する１８個のアミノ酸
のペプチドを記載する。
Ｒｏｓｅｎなど、（１９８７） ｉｎ ：
”ｃｌｉｎｉｃａｌＬａｂ。
”ｃｌｉｎｉｃａｌＬａｂ。
ｒａｔｏ、ｒｙ Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ Ａｎａｌｙｓｉ
ｓ ： Ｆｕｔｕ、ｒｅ Ｄｉｒｅ−ｃｔｉ。
ｓ ： Ｆｕｔｕ、ｒｅ Ｄｉｒｅ−ｃｔｉ。
ｎｓ” 、２２９〜２３６ページ及びＳｍ ｉ ｔｈな
ど（１９８７）−Ｊ、Ｃｌ１ｎ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、
２５ ： １４９８〜１５０４は、４１１及びｅｎｖ
遺伝遺伝子種々の領域によりコードされる種々のペプチ
ドの調製を記載する。アメリカ特許出願第７７９．４３
１号（ＮＴＩＳから入手できる）においてＷｏｎｇ−５
ｔａａｌ など（１９８６）は、ＩＩＩＶ−１と反応、
する１４及び１７個のアミノ酸のペプチドを記載する。
ど（１９８７）−Ｊ、Ｃｌ１ｎ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、
２５ ： １４９８〜１５０４は、４１１及びｅｎｖ
遺伝遺伝子種々の領域によりコードされる種々のペプチ
ドの調製を記載する。アメリカ特許出願第７７９．４３
１号（ＮＴＩＳから入手できる）においてＷｏｎｇ−５
ｔａａｌ など（１９８６）は、ＩＩＩＶ−１と反応、
する１４及び１７個のアミノ酸のペプチドを記載する。
アメリカ特許第４，６２９，７８３号は、ＨＩＶ−１と
反応するｇｐｌｌｏ及びｇｐ２５上の配列に対応する多
くのペプチドを記載する。Ｓｈｏｅｍａｎなど、（１９
８７） Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ。
反応するｇｐｌｌｏ及びｇｐ２５上の配列に対応する多
くのペプチドを記載する。Ｓｈｏｅｍａｎなど、（１９
８７） Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ。
１６１： ３７０〜３７９は、旧Ｖ−１と反応する釘υ
及び！■遺伝子の一部によりコーｌ−されるいくつかの
ペプチドを記載する。
及び！■遺伝子の一部によりコーｌ−されるいくつかの
ペプチドを記載する。
１１ｒＶ−１ケノムによりコードされるエピトープ又は
抗原決定部位に実質的に対応するペプチドは、診断用、
治療用及びワクチン組成物を配合することにおいて有用
である。そのペプチドは、種々の１１ＴＶ−１株内に高
く保存され、又は制限された数（すなわち、すべてより
も少ない）の旧Ｖ−１株との交差反応性を用いることが
所望される場合、はとん゛ど保存されないペプチドであ
ることができる。
抗原決定部位に実質的に対応するペプチドは、診断用、
治療用及びワクチン組成物を配合することにおいて有用
である。そのペプチドは、種々の１１ＴＶ−１株内に高
く保存され、又は制限された数（すなわち、すべてより
も少ない）の旧Ｖ−１株との交差反応性を用いることが
所望される場合、はとん゛ど保存されないペプチドであ
ることができる。
そのほとんど保存されないペプチドはまた、ペプチドの
組合せがほとんどの又はすべての旧Ｖ−１株と交差反応
する場合、多かれ少なかれ他の保存されたペプチドと一
緒に使用され得る。好ましくは、そのペプチド又はペプ
チドのグループは、正常な又はＨＩＶ−１感染性個人に
投与される場合、血清中和性免疫応答を誘発することが
できるであろう。
組合せがほとんどの又はすべての旧Ｖ−１株と交差反応
する場合、多かれ少なかれ他の保存されたペプチドと一
緒に使用され得る。好ましくは、そのペプチド又はペプ
チドのグループは、正常な又はＨＩＶ−１感染性個人に
投与される場合、血清中和性免疫応答を誘発することが
できるであろう。
さらに、そのペプチド又はペプチドのグループに対して
調製された抗体は、診断用及び治療用組成物の配合に有
用であり、そしてポリクロナール血清から単一特異性抗
体をアフィニティー精製するために使用され得る。
調製された抗体は、診断用及び治療用組成物の配合に有
用であり、そしてポリクロナール血清から単一特異性抗
体をアフィニティー精製するために使用され得る。
本発明の好ましい観点においては、ペプチドは、約６〜
５０個の範囲、普通約８〜２５個の範囲の長さのアミノ
酸を有する合成的に産生された線状フラグメントである
。そのような合成フラグメントの使用は、多量のペプチ
ドがＨＩＶ−１源からの精製なしに産生され得ることに
おいて好都合である。
５０個の範囲、普通約８〜２５個の範囲の長さのアミノ
酸を有する合成的に産生された線状フラグメントである
。そのような合成フラグメントの使用は、多量のペプチ
ドがＨＩＶ−１源からの精製なしに産生され得ることに
おいて好都合である。
さらに、その合成ペプチドは、組換え的に産生されたペ
プチドに通常存在する細菌及び酵母成分を含まない。驚
いたことには、異なった地理的位置に由来する高い割合
のＩＩＩＶ−１株と交差反応する多くの線状フラグメン
トが同定された。これらの線状フラグメントは、従来の
イムノアッセイ、特にＥＬＩＳＡ及びトン１〜プロツト
を用いてｎ＋ｖ−１感染血清を同定するために、組め合
わして使用され得る。
プチドに通常存在する細菌及び酵母成分を含まない。驚
いたことには、異なった地理的位置に由来する高い割合
のＩＩＩＶ−１株と交差反応する多くの線状フラグメン
トが同定された。これらの線状フラグメントは、従来の
イムノアッセイ、特にＥＬＩＳＡ及びトン１〜プロツト
を用いてｎ＋ｖ−１感染血清を同定するために、組め合
わして使用され得る。
通常、少なくとも２種、より普通には少なくとも４種、
及び時々８種又はそれ以上の免疫学的に別々のペプチド
がアッセイ方法に使用されるであろう。そのようなアッ
セイは、ＩＩＴＶ−１以外の病原体、たとえばウィルス
及び細菌病原体のためにも使用され得る。
及び時々８種又はそれ以上の免疫学的に別々のペプチド
がアッセイ方法に使用されるであろう。そのようなアッ
セイは、ＩＩＴＶ−１以外の病原体、たとえばウィルス
及び細菌病原体のためにも使用され得る。
本発明の第２の゛好ましい観点においては、ＩＩＩＶ−
１ゲノムの調節領域によりコードされる保存されたペプ
チドが調製され、そして旧Ｖ−”１惑染血清をスクリー
ンするために使用された。血清における調節タンパク質
に対する抗体の検出は、＋＋Ｉ’ｖ−１感染の高い診断
であるように思われ、そして疾病状態との相互関係を示
すことができる。ｔａｕ 、 ３’ｏｒｆ。
１ゲノムの調節領域によりコードされる保存されたペプ
チドが調製され、そして旧Ｖ−”１惑染血清をスクリー
ンするために使用された。血清における調節タンパク質
に対する抗体の検出は、＋＋Ｉ’ｖ−１感染の高い診断
であるように思われ、そして疾病状態との相互関係を示
すことができる。ｔａｕ 、 ３’ｏｒｆ。
Ｒμｍｆ 、 Ｕ ｏｒｆ ’、勺１／現」及び工領域
によりコードされる特定のペプチドが同定された。
によりコードされる特定のペプチドが同定された。
（特定の態様の記載〕
本発明によれば、新規組成物及び方法が、ＩＩＩＶ−１
感染を検出し、阻害し、そして中和するために提供され
る。その組成物は、ＨＩＶ暑ゲノムの種々の保存された
及び保存されていない領域によりコードされるアミノ酸
配列と実質的に同じ配列を有するペプチドを含む。その
組成物はまた、ＩＩＴＶ−１調節タンパク質上の免疫学
的に別々の領域に対応するペプチドのグループも含んで
成る。その個々のペプチドは、そのグループがほとんど
の及び好ましくはすべての旧Ｖ−１株と免疫学的に交差
反応するように選択される。そのペプチド及びペプチｌ
−のグループは、ＩＩＩＶ−１粒子上の免疫学的反応性
部位に対応し、そして好ましくはウィルス上の中和領域
を模倣する。本発明の組成物はまた、そのペプチドに対
して生ぜしめられた抗体も含む。
感染を検出し、阻害し、そして中和するために提供され
る。その組成物は、ＨＩＶ暑ゲノムの種々の保存された
及び保存されていない領域によりコードされるアミノ酸
配列と実質的に同じ配列を有するペプチドを含む。その
組成物はまた、ＩＩＴＶ−１調節タンパク質上の免疫学
的に別々の領域に対応するペプチドのグループも含んで
成る。その個々のペプチドは、そのグループがほとんど
の及び好ましくはすべての旧Ｖ−１株と免疫学的に交差
反応するように選択される。そのペプチド及びペプチｌ
−のグループは、ＩＩＩＶ−１粒子上の免疫学的反応性
部位に対応し、そして好ましくはウィルス上の中和領域
を模倣する。本発明の組成物はまた、そのペプチドに対
して生ぜしめられた抗体も含む。
ＨＩＶ−１はレトロウィルスとして分類され、そして脂
質含有エンベロープにより囲まれるリボ核タンパク質コ
アーを含む。ＩＩＴＶ−１のゲノムは、最っとも知られ
ている他のレトロウィルスよりも複雑であり、そしてプ
ロウィルスの個々の末端は、転写を調節する長い末端反
復体を含む。少なくとも７個の遺伝子、たとえばコアー
タンパク質、逆転写酵素及びエンヘロープタンパク質を
それぞれコードするｖ期１％壮及びμ■遺伝子が、ゲノ
ムによりコードされる。コアータンパク質はｇ１８を含
み、そしてエンヘロープタンパク質は、前駆体ｇｐ１．
６０に由来するｇｐ４１及びｇｐ１２０を含む。調節タ
ンパク質をコート′する遺伝子はセ刺、 ｏｒｆ 、
ｔ＋下／倶」及びつ ｓｏｒを含む。お匹遺伝子は、ｍＲＮＡの転写及びたぶ
ん翻訳を調節するように思える。復１遺伝子は、種々の
ｍＲＮＡ形の分布に影舌を及ぼし、そして構造的なタン
パク質合成を促進するように思える。ｍｌ及び工遺伝子
の役割は知られていない。
質含有エンベロープにより囲まれるリボ核タンパク質コ
アーを含む。ＩＩＴＶ−１のゲノムは、最っとも知られ
ている他のレトロウィルスよりも複雑であり、そしてプ
ロウィルスの個々の末端は、転写を調節する長い末端反
復体を含む。少なくとも７個の遺伝子、たとえばコアー
タンパク質、逆転写酵素及びエンヘロープタンパク質を
それぞれコードするｖ期１％壮及びμ■遺伝子が、ゲノ
ムによりコードされる。コアータンパク質はｇ１８を含
み、そしてエンヘロープタンパク質は、前駆体ｇｐ１．
６０に由来するｇｐ４１及びｇｐ１２０を含む。調節タ
ンパク質をコート′する遺伝子はセ刺、 ｏｒｆ 、
ｔ＋下／倶」及びつ ｓｏｒを含む。お匹遺伝子は、ｍＲＮＡの転写及びたぶ
ん翻訳を調節するように思える。復１遺伝子は、種々の
ｍＲＮＡ形の分布に影舌を及ぼし、そして構造的なタン
パク質合成を促進するように思える。ｍｌ及び工遺伝子
の役割は知られていない。
用語“中和領域°”とは、ヒト宿主においてＩＩ Ｉ
Ｖ −１感染を中和することができる抗体と反応性のエ
ピトープをコードするＩＩＩＶ−１ゲノムの部分を言及
する。中和のだめの適切なアンセイは良く知られていて
、そしてＴ−細胞系におけるＩＩＩＶ−１感染の緩和、
＋ｕｖＬ１のエンベロープ又はコアー糖タンパク質を担
持するＩＩＩＶ−１の擬似タイプのプラーク形成単位（
ｐｆｕ）の減少、シンシチウム阻害試験及びピリオン−
受容体結合試験に基づかれ得る。他方、中和活性は、免
疫化学試験、たとえば免疫螢光、イムノブロンｈ及びラ
ジオイムノ沈殿アッセイにおける抗体活性に比較され得
る。
Ｖ −１感染を中和することができる抗体と反応性のエ
ピトープをコードするＩＩＩＶ−１ゲノムの部分を言及
する。中和のだめの適切なアンセイは良く知られていて
、そしてＴ−細胞系におけるＩＩＩＶ−１感染の緩和、
＋ｕｖＬ１のエンベロープ又はコアー糖タンパク質を担
持するＩＩＩＶ−１の擬似タイプのプラーク形成単位（
ｐｆｕ）の減少、シンシチウム阻害試験及びピリオン−
受容体結合試験に基づかれ得る。他方、中和活性は、免
疫化学試験、たとえば免疫螢光、イムノブロンｈ及びラ
ジオイムノ沈殿アッセイにおける抗体活性に比較され得
る。
対照のペプチドは、ＩＩＩＶ−１ケノムのＳ範、 Ｈ−
ａＥ−。
ａＥ−。
正迂、七匹、免」、お１／現」及び工領域によりコード
されるあるアミノ酸配列に相当する。より詳しくは、そ
のペプチドは、ｅｎｖ遺伝子によりコートされるｇｐ１
２０及びｇｐ４１ 、 瓜３伝子によりコードされるｐ
ｌＢ及びｐ２４ 、 ｐｏｌ遺伝子によりコードされる
ｐ３２及び七匹、 ｏｒｆ 、還至／現１及びと匹遺伝
子によりコードされる調節タンパク質のフラグメントで
ある。特定のペプチドのための遺伝子内の配列及び位置
が、第１表に示される。
されるあるアミノ酸配列に相当する。より詳しくは、そ
のペプチドは、ｅｎｖ遺伝子によりコートされるｇｐ１
２０及びｇｐ４１ 、 瓜３伝子によりコードされるｐ
ｌＢ及びｐ２４ 、 ｐｏｌ遺伝子によりコードされる
ｐ３２及び七匹、 ｏｒｆ 、還至／現１及びと匹遺伝
子によりコードされる調節タンパク質のフラグメントで
ある。特定のペプチドのための遺伝子内の配列及び位置
が、第１表に示される。
芽 １ 表
座 ｐｌＢ １−１５ ！４ＧΔ、ｊ、１．
５ｊ尤ＳＧＧεＬ、ＤＰ４Ｆ、Ｅｌ、ｐ１８１１−２５
ＧＥＬＯＲＩＪＥＫＩ［≧、ＬＪ≧＋ｐｃｃ５呂ｐ１８
２１−３５ ＬＲＰＧＧＫｉＧＣ”ｚ”ＫＬＩ
ＧＩＩＶ７ 慝 ｐｌＢ ６１−５５
ＬＥＲＦＡ’、ｑ！ＰＧＬＬＥＴＳＥ９ｇ郵 ｐｌＢ
６１−７５ ＬＣ；ＱＬＱＰＳＬＱ’１Ｃ５
ｌｉＥＩ−１０鹿 １’１１８ ７１−８５
ＧＳＥＥＬＲ９ＬＴＮＴＶＡＴＬ１１ｆＡＢ ｐｌ
Ｂ ８１−９５ ＴＶＡＴＬＹＣＶＨＱＲＩＥ
ＩＫ１２ 悪 ｐｌＢ ９１−１０５
ＲＩＥＩにＤＴ）ＣＥＡＬＤＫＩＥ蕗−」−一表（続
き） ２１ ｇｇ４ ｐ２４ ２２１−２３５’
ＧＰＩＡＰＧＱ？１ＲＥＰＲＧＳＤ２４
慝’ｐ２４ ２３１−２４５ ＰＲＧＳ
ＤＩＡ、ＧＴＴＳＴＬＱＥ２５ １４凸ノ
３ ｐ２１１． ２４１−２５５
．５ＴＬＱＥＱ工ＧｔＪＭＴＮＮＰＰ２６肥ｇｐ２
４２５１−２６５ ＴＮＮＰＰＩＰＶＧＥＩＴ
ＫＲ〜Ｊ２８ 謀 ｐ２４ ２６１−２
７５ 工ＹＫＲ（ＪＩＩＬＧひＩＫＩ■３６
ｋ迅ｐ２４ ３５１−３６５ＱＧＶＧＧ［’
にＨＬ’ＪＲＶＬＡＥ３７ ４アｐ２４ ３６
１−３７５ ＲＶＬＡＥＡｊτ５ＱＶＴＮＴＡ
Ｔ１８０ ｇ、ｇ、 ｐ１５ ３９８
’−４１２ＥＧＨＴＡＰＮＣＲ，ＡＰＲＪＪＣ０１８１
座 ｐ１５’ ４０８−４２２ Ｐ慾ｃｃ悪
ＣＧＫＥＣＨＱ１８２ 謀 ｐ１
５ ４１８−４３２ ＫＥＧ）Ｉ
ＱＩ（ｌＫ［）ＣＴＥＲＱ＾ｊ４１８４ ｋ４
ｐ１５ ４３８−４５２ υＰＳＹＫＧＲＰ
ＧごＩＰＬＱｓＲ１８９壓咀 ｐ１５ ４８８−
５０２ ＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＴＳＬＲ１番
０１ｊ：□ｎｖｇｐ１２０１１−２５１ＪＲＬＩＣＩ凪
ソＧＴｉ丁ＬＬＧｉＩＩＬ４２ 、 ｃｎｖ
ｇｐ１２０ ３１−４５ ＴＥＫＩＪ
ｔＪＴＶＹＹＣ’ＪＰｖＬＪ４３ ｅｎ
ｖ ｇｐＬ２０ １１１−５５
ＧＶＰＶ’、ｊＫＧＡＴＴＴＬＦＣＡ５０
’ ”ｅｎｖ ｇｐ１２０ １１０−１２
５ ＬｔＪＤＱＳＬＫＰＣＷＬＴＦ’Ｌ５１
ａｎｖ ｇｐ１２０ １２１−１３５
’ ＫＬＴＰＬＣＶＳＬＫＣＴＤＬＫ５２
ｅｎｖ ｇｐ１２０ １３１−１６５
ＣＴＤ［−ＫａＮＤＴＮＴＮＳＳＳＧ５５
ｅｎｖ ｇｐ１２０ １６１４７
５ ｌ５ＴＳＩＲＧＫＶＱＫＥＹＡＦ６
１’ ｅｎｖ’ ｇｐ１２０ ２３１−２１
ｔ５” ’ＫＴＦ＋’ＩＣＴＣ：Ｐ’ＣＴすＩＩ／！
１ＴＶ６２ ｅｎｖ ｇｐ１２０ ２４
１−２５５ ＮＶＳＴＶＱＣＴ）ＩＧＩＰ、ｐ
ｗ６３ 、 ｅｎｖ ｇｐ１２０ ２５１
−２６５ ＩＰ、ＰＷＳＴＱＬＬＬＮＣ５Ｌ６
８ μ！ ｇｐ１２０ ３０１−３１５
ＮＮＴ眩５ＩＰｔＩＱＰ、ＣＰＧＲ８２ｅｎｖ
ｇｐ１２０ ｔ＋４ｌ−ｂ５５ｃＱｒｐ、ｓｃ
ｃ、：ζＩＴＧＬＬＬＴ８４ ｅｎｖ
ｇｐ１２０ ／１６１−４７５ ＳＮ？’＋
ＥＳＥＩＦＲＰＧＧＧＤＭ８７ ｅｎｖ
ｇｐ１２０ ４９１−５０５ 、
ＩＥＰＬＣＶＡＰＴＫＡＫＲＲＶ８８ｅｎｖ３
ｐ１２０５Ｃ１１−５１５＃、Ｘ）ＪＷＱＲＥ＋ＣＰ−
ＡＶＧＩ庇−二り一表−（続き） ８９ ｅｎｖ ｇｐ４１
．５１１−５２５ ＲＡＶＣ；ＩＧへ
ＬＦＬにＦＬＧＡ９０ ｅｎｖ ｇｐ４１
５２１−５３５ ＧＦＬ、ＧＡ−ＡＧＳＴＨＧＡ
、ＡＳｉ４９１ ｅｎｖ ｇｐ４１’−５３
１−５４５Ｇ６１ＡＳＭＴＬＴＶＱＡＲＱＬＬ９２
、、 ｅｎｖ ｇｐ４１ ．５４１−５５５
、ＡＲＱＬＬＳＧＩＶＱＱＱＮＮＬ９３ ｅ
ｎｖ ｇｐ４１ ５５１−５６５ ＱＱＮ？
１ＬＬＲＡＩＥＡ、ＱＱＨＩ−９４＝ｑｖ ｇｐ４
１ ５６１−５７５ ＡＱＱＨＬＬＱＬＴ四にＩ
ＫＱ９９ 史正 ｇｐ４１ ５９１−６０５
ＱＬＬＧＩＩＪＧＣ！１ｉｃＫｃＩｃＴ１００
ｅｎｖ ｇｐ４１ ６０１−６１５
ＫＬＩＣＴＴＡＶＰＩＪＮＡＳ５１ｓ１０１ 皐
ｔｖ ｇｐ４１ ６１１−６２５ ＮＡＳＩ
ＪＳＮＫＳＬＥＱＩ宙４Ｎ１０２ 三正 ｇｐ
４１ ６２１−６’１５ ＱＩＩＪＮＮＭＴＩＪ
Ｉ氾すＤＰ、Ｅｕ２Ｏ３二空 ｇｐ４１６３１−６４
５ １ＪＤＲＥＩＮ闘ｒｓｔ、ＩＨｓＬ１１２
ｅｎｖ ｇｐ４１ ７２１−７３５
、ＬＰＩＰＲＣＰＤＲＰＥＧＩεＥ１２２ ｅｎｖ
ｇｐ４Ｌ ８２１−８３５ ＡＶＡＥＧＴＤ
ＲＶＩＥＶＶＱＧ狙−上一夫山さ、） １３０ 画 ｐ３２ 、６２５−６３９
ＶＴＮＫＧＲＱＫＶＶＰＬＴＮＴ１３１ 凪
ｐ３２ ６３５−６４９ ＰＬＴＮＴＴＮ
ＱＫＴＥＩ−９Ａ１１３２ 凪ｐ３２ ６４５
−６５９ Ｅｌ−ＱＡＩＹＬ’、ＬＱＤｓＧ［−
Ｅ１３９ 丁り２１ユ ｐ３２
７１５−７２９ ＶＤＫＬＶ
ＳＡＧＩ艮ＫＩＬＦＬ１１Ｉ３ 正１ｐ３２
７５５−７６９ ＬＰＰＷ隷ＥＩＶＡＳＣＤ
Ｋ］ｌ１４正壮 ｐ３２ ７６５−７７９
ＡＳＣＤＫＣＱＬにＧＥＡ、ｌ［）ＩＧ１１Ｉ７
Ｐ９↓ ｐ３２ ７９５’４
０９ ＬＥにＩＣＶＩＬ’／Ａ、ＶＨ１
，’ＡＳＧ１５５ ｍ１ｐ３２ ８７５−８
８９ ＱＧＶＶＥＳ）ＩＮＫＥＬＫＫＩ１１５
６ ｐｏｌ ｐ３２
８８５−８９９ 、 ＬＫＸＩＩＧＱＶＲ
ＤＱＡＥＨＬ１６７ 庄壮ｐ３２ ９９５−１
００９ ＩＲＤＶＣＩＫＱｉ［へＣ：ＤＤＣＶＡ
ｌ、６８ Ｐざ打ｌ ｐ３２
１０００−１０１５ ＱｉＬＩＶにＤ
ＤＣＶＡＳＲＱＤＥＤ１６９ ９些ｐ
、 １−１５ ＭＥＰＶＤＰＲＬＥＰｔＪＫ
−１（ＰＣ３８３ｕ−ｏｒｆ’ ｐ２７
１−１．５ １１ＱＰＩＱ工ＡＩ
ＶＡＬＩＡＩＡＩ３８４ｕ−ｏｒｆ ｐ２７ １
．１−２５ ＬＷＡＩＩＩＡＩＶＶ’１ＪＳＩ
Ｖ３８８ ｕ−ｏ工ｆ ｐ２７
３１−１番５ にＩＬＲ
ＱＰＪＣ丁ＤＲＬＩＤＲＬ３８９ ｕ−ｏｒｆ
ｐ２７ １１１−５５ ＬＩＤＲＬ工
ＥＰ、ＡＥＤｓＧ＞１Ｅ３９３ ｒ−ｏ
ｒｆ ｐ １−１５
ＭＥＱＡＰＥＤＱＧＰＱＲＥＰＨ３９４ｒ−ｏ
ｒｆｐｌｌ−２５ＱＲＥＰＨＮε１．ＩＴＬＥＬＬＥＥ
３９７ ｒ−ｏｒｆ 、ｐ−ろ１−５
５ ＧＬＧＱＨＩＹＥＴ’ＹＧＤＴｔＪ
へ狼−土一表（続き） ４０３ ｈｒｓ／ａｒ＝ ｐ ２ｌ−
３５ＦＬＹＱＳＮＰＰＰＮＰＥＧＴＲ４０６虫ム匹ｐ５
１−６５ ＱＩＨ５ＩＳＥＲ１，ＬにＴ孔Ｇ４
０９ ｅｒｓ／ａｒｔ ｐ ８Ｌ＝９
５ ＬＴＬＤＣＮＥＤ（：ＧＴＳＧＴＱ４２０
１孔５λλ二 ｐ２３
７１−８５” ＧＬＨＴＧＥＲＤＷ’ＨＬＧＱＣヘ
ノ４２１ 工 ｐ２３ ８１−９５
ＬＣＱＧＶＳＩＥ哩附（ＲＹＳ４２２
ｓｏｒ ｐ２３ ９１−１０５ Ｋ
ＫＲＹＳＴＱＶＤＰＥＬＡＤＱ４２３ 三
ｐ２３ １０１−１１．５ ＥＵ、ＤＱＬ
ＩＨＬＹＹＦＤＧＦ４２７ 三猛 ｐ２３
１４１−１５５ ＫＶＧＳＬＱ…能品ＬＩ
Ｔ４２８ 坏扛 ｐ２３ １５１−１
６５ ’ ＡＡＬ工ＴＰはＩＫＰＰＬＰＳ４２９
、 ｓｏｒ ｐ２３ １６１−１７
５ ＰＰＬＰＳＶＴＫＬＴＥＤＲ１ｊＮ＊：ヌク
レオチ１及びアミノ酸配列の番号付けは、ＨＢＸ ２及
びＢ Ｉ＋ １０ 、ｌ；＋、の太めの発表された配列
に基づかれろ［ｌｌｕｍａｎ Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ
ａｎｄ ＡＩＤＳ、Ｍｙｅｒｓなど。
５ｊ尤ＳＧＧεＬ、ＤＰ４Ｆ、Ｅｌ、ｐ１８１１−２５
ＧＥＬＯＲＩＪＥＫＩ［≧、ＬＪ≧＋ｐｃｃ５呂ｐ１８
２１−３５ ＬＲＰＧＧＫｉＧＣ”ｚ”ＫＬＩ
ＧＩＩＶ７ 慝 ｐｌＢ ６１−５５
ＬＥＲＦＡ’、ｑ！ＰＧＬＬＥＴＳＥ９ｇ郵 ｐｌＢ
６１−７５ ＬＣ；ＱＬＱＰＳＬＱ’１Ｃ５
ｌｉＥＩ−１０鹿 １’１１８ ７１−８５
ＧＳＥＥＬＲ９ＬＴＮＴＶＡＴＬ１１ｆＡＢ ｐｌ
Ｂ ８１−９５ ＴＶＡＴＬＹＣＶＨＱＲＩＥ
ＩＫ１２ 悪 ｐｌＢ ９１−１０５
ＲＩＥＩにＤＴ）ＣＥＡＬＤＫＩＥ蕗−」−一表（続
き） ２１ ｇｇ４ ｐ２４ ２２１−２３５’
ＧＰＩＡＰＧＱ？１ＲＥＰＲＧＳＤ２４
慝’ｐ２４ ２３１−２４５ ＰＲＧＳ
ＤＩＡ、ＧＴＴＳＴＬＱＥ２５ １４凸ノ
３ ｐ２１１． ２４１−２５５
．５ＴＬＱＥＱ工ＧｔＪＭＴＮＮＰＰ２６肥ｇｐ２
４２５１−２６５ ＴＮＮＰＰＩＰＶＧＥＩＴ
ＫＲ〜Ｊ２８ 謀 ｐ２４ ２６１−２
７５ 工ＹＫＲ（ＪＩＩＬＧひＩＫＩ■３６
ｋ迅ｐ２４ ３５１−３６５ＱＧＶＧＧ［’
にＨＬ’ＪＲＶＬＡＥ３７ ４アｐ２４ ３６
１−３７５ ＲＶＬＡＥＡｊτ５ＱＶＴＮＴＡ
Ｔ１８０ ｇ、ｇ、 ｐ１５ ３９８
’−４１２ＥＧＨＴＡＰＮＣＲ，ＡＰＲＪＪＣ０１８１
座 ｐ１５’ ４０８−４２２ Ｐ慾ｃｃ悪
ＣＧＫＥＣＨＱ１８２ 謀 ｐ１
５ ４１８−４３２ ＫＥＧ）Ｉ
ＱＩ（ｌＫ［）ＣＴＥＲＱ＾ｊ４１８４ ｋ４
ｐ１５ ４３８−４５２ υＰＳＹＫＧＲＰ
ＧごＩＰＬＱｓＲ１８９壓咀 ｐ１５ ４８８−
５０２ ＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＴＳＬＲ１番
０１ｊ：□ｎｖｇｐ１２０１１−２５１ＪＲＬＩＣＩ凪
ソＧＴｉ丁ＬＬＧｉＩＩＬ４２ 、 ｃｎｖ
ｇｐ１２０ ３１−４５ ＴＥＫＩＪ
ｔＪＴＶＹＹＣ’ＪＰｖＬＪ４３ ｅｎ
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ＧＶＰＶ’、ｊＫＧＡＴＴＴＬＦＣＡ５０
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５ ＬｔＪＤＱＳＬＫＰＣＷＬＴＦ’Ｌ５１
ａｎｖ ｇｐ１２０ １２１−１３５
’ ＫＬＴＰＬＣＶＳＬＫＣＴＤＬＫ５２
ｅｎｖ ｇｐ１２０ １３１−１６５
ＣＴＤ［−ＫａＮＤＴＮＴＮＳＳＳＧ５５
ｅｎｖ ｇｐ１２０ １６１４７
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１’ ｅｎｖ’ ｇｐ１２０ ２３１−２１
ｔ５” ’ＫＴＦ＋’ＩＣＴＣ：Ｐ’ＣＴすＩＩ／！
１ＴＶ６２ ｅｎｖ ｇｐ１２０ ２４
１−２５５ ＮＶＳＴＶＱＣＴ）ＩＧＩＰ、ｐ
ｗ６３ 、 ｅｎｖ ｇｐ１２０ ２５１
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８ μ！ ｇｐ１２０ ３０１−３１５
ＮＮＴ眩５ＩＰｔＩＱＰ、ＣＰＧＲ８２ｅｎｖ
ｇｐ１２０ ｔ＋４ｌ−ｂ５５ｃＱｒｐ、ｓｃ
ｃ、：ζＩＴＧＬＬＬＴ８４ ｅｎｖ
ｇｐ１２０ ／１６１−４７５ ＳＮ？’＋
ＥＳＥＩＦＲＰＧＧＧＤＭ８７ ｅｎｖ
ｇｐ１２０ ４９１−５０５ 、
ＩＥＰＬＣＶＡＰＴＫＡＫＲＲＶ８８ｅｎｖ３
ｐ１２０５Ｃ１１−５１５＃、Ｘ）ＪＷＱＲＥ＋ＣＰ−
ＡＶＧＩ庇−二り一表−（続き） ８９ ｅｎｖ ｇｐ４１
．５１１−５２５ ＲＡＶＣ；ＩＧへ
ＬＦＬにＦＬＧＡ９０ ｅｎｖ ｇｐ４１
５２１−５３５ ＧＦＬ、ＧＡ−ＡＧＳＴＨＧＡ
、ＡＳｉ４９１ ｅｎｖ ｇｐ４１’−５３
１−５４５Ｇ６１ＡＳＭＴＬＴＶＱＡＲＱＬＬ９２
、、 ｅｎｖ ｇｐ４１ ．５４１−５５５
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１ＬＬＲＡＩＥＡ、ＱＱＨＩ−９４＝ｑｖ ｇｐ４
１ ５６１−５７５ ＡＱＱＨＬＬＱＬＴ四にＩ
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ＫＬＩＣＴＴＡＶＰＩＪＮＡＳ５１ｓ１０１ 皐
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４１ ６２１−６’１５ ＱＩＩＪＮＮＭＴＩＪ
Ｉ氾すＤＰ、Ｅｕ２Ｏ３二空 ｇｐ４１６３１−６４
５ １ＪＤＲＥＩＮ闘ｒｓｔ、ＩＨｓＬ１１２
ｅｎｖ ｇｐ４１ ７２１−７３５
、ＬＰＩＰＲＣＰＤＲＰＥＧＩεＥ１２２ ｅｎｖ
ｇｐ４Ｌ ８２１−８３５ ＡＶＡＥＧＴＤ
ＲＶＩＥＶＶＱＧ狙−上一夫山さ、） １３０ 画 ｐ３２ 、６２５−６３９
ＶＴＮＫＧＲＱＫＶＶＰＬＴＮＴ１３１ 凪
ｐ３２ ６３５−６４９ ＰＬＴＮＴＴＮ
ＱＫＴＥＩ−９Ａ１１３２ 凪ｐ３２ ６４５
−６５９ Ｅｌ−ＱＡＩＹＬ’、ＬＱＤｓＧ［−
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７１５−７２９ ＶＤＫＬＶ
ＳＡＧＩ艮ＫＩＬＦＬ１１Ｉ３ 正１ｐ３２
７５５−７６９ ＬＰＰＷ隷ＥＩＶＡＳＣＤ
Ｋ］ｌ１４正壮 ｐ３２ ７６５−７７９
ＡＳＣＤＫＣＱＬにＧＥＡ、ｌ［）ＩＧ１１Ｉ７
Ｐ９↓ ｐ３２ ７９５’４
０９ ＬＥにＩＣＶＩＬ’／Ａ、ＶＨ１
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８８５−８９９ 、 ＬＫＸＩＩＧＱＶＲ
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００９ ＩＲＤＶＣＩＫＱｉ［へＣ：ＤＤＣＶＡ
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１０００−１０１５ ＱｉＬＩＶにＤ
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、 １−１５ ＭＥＰＶＤＰＲＬＥＰｔＪＫ
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１−６５ ＱＩＨ５ＩＳＥＲ１，ＬにＴ孔Ｇ４
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ノ４２１ 工 ｐ２３ ８１−９５
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ｓｏｒ ｐ２３ ９１−１０５ Ｋ
ＫＲＹＳＴＱＶＤＰＥＬＡＤＱ４２３ 三
ｐ２３ １０１−１１．５ ＥＵ、ＤＱＬ
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１４１−１５５ ＫＶＧＳＬＱ…能品ＬＩ
Ｔ４２８ 坏扛 ｐ２３ １５１−１
６５ ’ ＡＡＬ工ＴＰはＩＫＰＰＬＰＳ４２９
、 ｓｏｒ ｐ２３ １６１−１７
５ ＰＰＬＰＳＶＴＫＬＴＥＤＲ１ｊＮ＊：ヌク
レオチ１及びアミノ酸配列の番号付けは、ＨＢＸ ２及
びＢ Ｉ＋ １０ 、ｌ；＋、の太めの発表された配列
に基づかれろ［ｌｌｕｍａｎ Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ
ａｎｄ ＡＩＤＳ、Ｍｙｅｒｓなど。
ｅｄｓ、、Ｌｏｓ 八ｌａｍｏｓ Ｎａｔｉｏｎａ
ｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｌｏｓ八ｌへｍ’ｏｓ、
Ｎｅ＋ｙ Ｍｅｘｉｃｏ ８７５４’５ ’（１９
８７）］ 。
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Ｎｅ＋ｙ Ｍｅｘｉｃｏ ８７５４’５ ’（１９
８７）］ 。
木発明のペプチドのアミノ酸配列は、上記表に示される
配列に正確には対応する必要はない。むしろ、そのベプ
チ１−は、その列挙された配列と免疫学的に交差反応す
る少なくとも１種のエピト−プ又は抗原決定基を定義す
ることが、単に不可欠である。従って、本発明のペプチ
ドは、列挙されたアミノ酸配列の一部のみを含むが、し
かしそのいづれか１つの配列の少なくとも６個の隣接す
るアミノ酸、普通少なくとも９個のアミノ酸及び典型的
には少なくとも１２個又はそれ以」二のアミノ酸を含む
べきである。
配列に正確には対応する必要はない。むしろ、そのベプ
チ１−は、その列挙された配列と免疫学的に交差反応す
る少なくとも１種のエピト−プ又は抗原決定基を定義す
ることが、単に不可欠である。従って、本発明のペプチ
ドは、列挙されたアミノ酸配列の一部のみを含むが、し
かしそのいづれか１つの配列の少なくとも６個の隣接す
るアミノ酸、普通少なくとも９個のアミノ酸及び典型的
には少なくとも１２個又はそれ以」二のアミノ酸を含む
べきである。
本発明のペプチドはまた、上記表に列挙された配列に対
応しない追加のアミノ酸配列も含むことができる。その
ような追加の配列は、Ｃ−末端、Ｎ−末端又は両末端の
いづれかで存在することができ、そして列挙された配列
と同時に合成され得、又は良く知られた技法によりその
配列に接合又は結合され得る。普通、そのような追加の
配列は、ある既知の方法でそれらの使用を促進するペプ
チドの分離、接合又は他の操作に有用である。特に、そ
のペプチドは、追加のアミノ酸を含み、又は固相又は他
のタンパク質へのペプチドの結合又は接合を可能にする
ためにＣ−末端又はＮ−末端で変性され得る。たとえば
、ｇｉｙ−ｇｌｙ−ｃｙｓ配列が、キャリヤーへの結合
を促進するためにいづれかの末端に付加され得る。疎水
性残、基又は脂質含有成分が、リポソーム又は膜結合を
促進するために付加され得る。本発明のペプチドのサイ
ズには理論的上限はないが、１００個以上の長さのアミ
ノ酸を有するペプチドを調製する理由はめったに存在せ
ず、そしてそのペプチドは普通、７５個よりも短いアミ
ノ酸であろう。
応しない追加のアミノ酸配列も含むことができる。その
ような追加の配列は、Ｃ−末端、Ｎ−末端又は両末端の
いづれかで存在することができ、そして列挙された配列
と同時に合成され得、又は良く知られた技法によりその
配列に接合又は結合され得る。普通、そのような追加の
配列は、ある既知の方法でそれらの使用を促進するペプ
チドの分離、接合又は他の操作に有用である。特に、そ
のペプチドは、追加のアミノ酸を含み、又は固相又は他
のタンパク質へのペプチドの結合又は接合を可能にする
ためにＣ−末端又はＮ−末端で変性され得る。たとえば
、ｇｉｙ−ｇｌｙ−ｃｙｓ配列が、キャリヤーへの結合
を促進するためにいづれかの末端に付加され得る。疎水
性残、基又は脂質含有成分が、リポソーム又は膜結合を
促進するために付加され得る。本発明のペプチドのサイ
ズには理論的上限はないが、１００個以上の長さのアミ
ノ酸を有するペプチドを調製する理由はめったに存在せ
ず、そしてそのペプチドは普通、７５個よりも短いアミ
ノ酸であろう。
本発明のペプチドはまた、普通たった６個のアミノ酸の
短いペプチドにおいては置換は存在しないが、特定のア
ミノ酸の置換が存在し得る。通常、６〜約１０個のアミ
ノ酸には多くて１個の置換が存在し、そして約１０〜２
０個のアミノ酸の長さを有する配列においｔは多くて２
個の置換が存在する。
短いペプチドにおいては置換は存在しないが、特定のア
ミノ酸の置換が存在し得る。通常、６〜約１０個のアミ
ノ酸には多くて１個の置換が存在し、そして約１０〜２
０個のアミノ酸の長さを有する配列においｔは多くて２
個の置換が存在する。
もちろん、置換は、逆の態様でペプチドの免疫学的性質
を実質的に変えるべきでなく、そして増強された結合又
は抗原特性をもたらすことができる。
を実質的に変えるべきでなく、そして増強された結合又
は抗原特性をもたらすことができる。
特定のエピ１−一部又は抗原決定基との交差反応性は、
実質的に減しられるべきでない。
実質的に減しられるべきでない。
その長さ及び位置に依存して、本発明のペプチドは、実
質的に折りだためを含まず、天然の遺伝子生成物の特性
を示さない折りたたみを示すことができ、又は天然の又
は実質的に天然の折りたたみを示すことができる。普通
、２５個及びそれ以下の短いフラグメントは最小の又は
非天然の折りたためを示し、そしてそれよりも長いフラ
グノン１〜は、天然の生成物に類似する折りだためを示
す傾向がある。
質的に折りだためを含まず、天然の遺伝子生成物の特性
を示さない折りたたみを示すことができ、又は天然の又
は実質的に天然の折りたたみを示すことができる。普通
、２５個及びそれ以下の短いフラグメントは最小の又は
非天然の折りたためを示し、そしてそれよりも長いフラ
グノン１〜は、天然の生成物に類似する折りだためを示
す傾向がある。
本発明のペプチドはまた、ＩＩＩシー１感染の予防及び
／又は治療処置のために組成物に導入され得る。
／又は治療処置のために組成物に導入され得る。
治療的適用Ｇこおいては、その組成物は、感染及びその
合（］症を治し又は少なくとも一部阻害するのに十分な
量、すでにＩＩＩＬ］により感染された患者に投与され
る。これを達成するための適切な量は、治療的有効量と
して定義される。そのような投与量の正確な決定は、感
染の重症度及び患者自身の免疫システムの一般的状態に
依存するが、しかし−船釣にはｋｇ体重当りペプチド約
１〜２００ ｍｇの範囲であり、典型的にはｋｇ体重当
り約５〜２５ｍｇの範囲である。
合（］症を治し又は少なくとも一部阻害するのに十分な
量、すでにＩＩＩＬ］により感染された患者に投与され
る。これを達成するための適切な量は、治療的有効量と
して定義される。そのような投与量の正確な決定は、感
染の重症度及び患者自身の免疫システムの一般的状態に
依存するが、しかし−船釣にはｋｇ体重当りペプチド約
１〜２００ ｍｇの範囲であり、典型的にはｋｇ体重当
り約５〜２５ｍｇの範囲である。
予防的適用においては、本発明のペプチドは、１１１Ｖ
−１により感染されていないが、しかし普通ウィルスへ
の暴露の危険性を有するであろう個人に投与される。そ
のような予防的適用においては、ペプチドは保護免疫応
答を誘発するであろうワクチン組成物に配合されるであ
ろう。そのワクチン組成物は、患者の健康状態及び免疫
性の一般しヘルに再び依存するであろう、予防的有効量
を含むであろう。普通、その用量は、治療的適用のため
によりもいく分生なく、典型的にはｋｇ体重当り約０．
１ｍｇ〜２５ｍｇの範囲で存在し、普通ｋｇ体重当り約
０．５’ｍｇ〜２．５ ｍｇの範囲で存在するであろう
。
−１により感染されていないが、しかし普通ウィルスへ
の暴露の危険性を有するであろう個人に投与される。そ
のような予防的適用においては、ペプチドは保護免疫応
答を誘発するであろうワクチン組成物に配合されるであ
ろう。そのワクチン組成物は、患者の健康状態及び免疫
性の一般しヘルに再び依存するであろう、予防的有効量
を含むであろう。普通、その用量は、治療的適用のため
によりもいく分生なく、典型的にはｋｇ体重当り約０．
１ｍｇ〜２５ｍｇの範囲で存在し、普通ｋｇ体重当り約
０．５’ｍｇ〜２．５ ｍｇの範囲で存在するであろう
。
本発明のペプチド組成物の多数の投与のうちの１回の投
与は、治療する医者により選択される正確な投与量レベ
ル及び投与のパターンにより行なわれ得る。
与は、治療する医者により選択される正確な投与量レベ
ル及び投与のパターンにより行なわれ得る。
本発明のペプチドは、生理学的に許容されるキャリヤー
に導入され、そして静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内又は
同様のようにして注射されるであろう。適切なキャリヤ
ーとして、リン酸緩衝溶液、生理的食塩水、水、塩化カ
リウム、乳酸ナトリ“ラム及び同様のものを挙げること
ができる。キャリヤー中のペプチドの濃度は、基本的な
使用、活性及び投与方法に依存して変化するであろう。
に導入され、そして静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内又は
同様のようにして注射されるであろう。適切なキャリヤ
ーとして、リン酸緩衝溶液、生理的食塩水、水、塩化カ
リウム、乳酸ナトリ“ラム及び同様のものを挙げること
ができる。キャリヤー中のペプチドの濃度は、基本的な
使用、活性及び投与方法に依存して変化するであろう。
本発明のペプチドは、天然のフラグメント、すなわちＩ
ＩＩＶ−１から単離されたタンパク質のフラグメントで
あるが、しかしより普通には合成フラグメン１−であろ
う。天然のタンパク質は、従来の技法、たとえば高性能
液体クロマトグラフィー（ＩＩＰＬＣ）及びアフィニテ
ィークロマトグラフィーにより＋１１Ｖ−１から単離さ
れるが、しかし損なわれでいない旧Ｖ−１又は感染物質
が単離された組成物に残存しないように注意が払われる
べきである。便利には、本発明に従って（下記に記載さ
れるように）得られたポリクローナル又はモノクローナ
ル抗体が、良く知られた技法により゛適切斤アフィニテ
ィーカラムを用意するために使用され得る。そのような
技法は、たとえば１ｌｕｄｓｏｎ ａｎｄ １ｌａｙ
：’ＰｒａｃＬｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｚ 、 Ｂ
ｌａｃｋｗｅｌｌ ５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂ’１
ｉｃａｔｉｏｎｓ。
ＩＩＶ−１から単離されたタンパク質のフラグメントで
あるが、しかしより普通には合成フラグメン１−であろ
う。天然のタンパク質は、従来の技法、たとえば高性能
液体クロマトグラフィー（ＩＩＰＬＣ）及びアフィニテ
ィークロマトグラフィーにより＋１１Ｖ−１から単離さ
れるが、しかし損なわれでいない旧Ｖ−１又は感染物質
が単離された組成物に残存しないように注意が払われる
べきである。便利には、本発明に従って（下記に記載さ
れるように）得られたポリクローナル又はモノクローナ
ル抗体が、良く知られた技法により゛適切斤アフィニテ
ィーカラムを用意するために使用され得る。そのような
技法は、たとえば１ｌｕｄｓｏｎ ａｎｄ １ｌａｙ
：’ＰｒａｃＬｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｚ 、 Ｂ
ｌａｃｋｗｅｌｌ ５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂ’１
ｉｃａｔｉｏｎｓ。
Ｏｘｆｏｒｄ 、 Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ、１
９８０ 、チャプタ−８に教授される。次に、そのペプ
チドは、損なわれていないタンパク質の化学的又は酵素
的切断により得られる。
９８０ 、チャプタ−８に教授される。次に、そのペプ
チドは、損なわれていないタンパク質の化学的又は酵素
的切断により得られる。
しかしながら、旧Ｖ−１から本発明のペプチドを単離す
ることの困難さ及び危険性のために、上記に示されたよ
うに旧ソ−１アミノ酸配列に基づく合成フラグメントを
産生することが好ましい。天然のＩＩＩＶ−１タンパク
質と免疫学的に交差反応する合成ポリペプチドは、２種
の一般的アプローチにより産生され得る。第１に、約１
００個よりも少ないアミノ酸、普通には約５０個よりも
少ないアミノ酸及びより普通には２５個又はそれ以下の
アミノ酸を有するポリペプチドが、アミノ酸が成長鎖に
連続的に付加される、良く知られたＭｅｒｒｉｆ １ｅ
ｌｄの固相化学合成方法により合成され得る［Ｍｅｒｒ
ｉ目ｅｌｄ（１９６３）Ｊ、Ａｍ、（、ｈｅｍ’、Ｓｏ
ｃ’、８５’ ： ２１４９〜２１５６］ 、特定の合
成技法が下記に記載される。
ることの困難さ及び危険性のために、上記に示されたよ
うに旧ソ−１アミノ酸配列に基づく合成フラグメントを
産生することが好ましい。天然のＩＩＩＶ−１タンパク
質と免疫学的に交差反応する合成ポリペプチドは、２種
の一般的アプローチにより産生され得る。第１に、約１
００個よりも少ないアミノ酸、普通には約５０個よりも
少ないアミノ酸及びより普通には２５個又はそれ以下の
アミノ酸を有するポリペプチドが、アミノ酸が成長鎖に
連続的に付加される、良く知られたＭｅｒｒｉｆ １ｅ
ｌｄの固相化学合成方法により合成され得る［Ｍｅｒｒ
ｉ目ｅｌｄ（１９６３）Ｊ、Ａｍ、（、ｈｅｍ’、Ｓｏ
ｃ’、８５’ ： ２１４９〜２１５６］ 、特定の合
成技法が下記に記載される。
線・状ペプチドは、手動的に又は市販の合成装置により
自動的に化学合成され得る。ポリエチレンペング上での
手動合成ペプチドのためのシステムば、Ｃａｍｂｒｉｄ
ｇｅ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓか
ら入手できる。ペプチドを調製するための典型的な手動
技法は、この後、実験部分に詳細に説明される。
自動的に化学合成され得る。ポリエチレンペング上での
手動合成ペプチドのためのシステムば、Ｃａｍｂｒｉｄ
ｇｅ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓか
ら入手できる。ペプチドを調製するための典型的な手動
技法は、この後、実験部分に詳細に説明される。
自動ペプチド合成装置は、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙ
ｓｔｅｍｓ。
ｓｔｅｍｓ。
Ｉｎｃ、、Ｆｏｓｔｅｒ Ｃ１ｔｙ、Ｃａ１ｉｆｏｒｎ
ｉａ、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅ−ｎｔｓ、Ｉ
ｎｃ、、Ｗａｌｄｗｉｃｋ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ及び
旧ｏｓｅａｒｃｈ。
ｉａ、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅ−ｎｔｓ、Ｉ
ｎｃ、、Ｗａｌｄｗｉｃｋ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ及び
旧ｏｓｅａｒｃｈ。
Ｉｎｃ、、Ｓａｎ Ｒａｆａｅｌ、Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉ
ａから入手できる。製造業者の指示に従って、そのよう
な自動合成機を用いて、ペプチドを、本発明に使用する
ためにｇ量で産生ずることができる。
ａから入手できる。製造業者の指示に従って、そのよう
な自動合成機を用いて、ペプチドを、本発明に使用する
ためにｇ量で産生ずることができる。
比較的短い線状ペプチドフラグメントの使用が、本発明
の方法を行なうことにおいて多くの利点を有する。その
ペプチドは、大量に産生され、そして組換え的に産生さ
れたペプチドに見出される汚染物質を含まない。さらに
、ＩＩＩＶ−１自体からペプチドを得ることに関連する
危険性が、完全に避けられる。短い線状ペプチドば、少
なくとも２種、時々４種、及びしばしば８種又はそれ以
上のグループで使用される場合、特に効果的である。Ｉ
ＩＩＶ−１ゲノムの種々の保存された及び保存されてい
ない領域からペプチドを正しく選択することによって、
はとんどの及び好ましくはすべての旧Ｖ−’１株による
感染を検出することができるアッセイが発明され得る。
の方法を行なうことにおいて多くの利点を有する。その
ペプチドは、大量に産生され、そして組換え的に産生さ
れたペプチドに見出される汚染物質を含まない。さらに
、ＩＩＩＶ−１自体からペプチドを得ることに関連する
危険性が、完全に避けられる。短い線状ペプチドば、少
なくとも２種、時々４種、及びしばしば８種又はそれ以
上のグループで使用される場合、特に効果的である。Ｉ
ＩＩＶ−１ゲノムの種々の保存された及び保存されてい
ない領域からペプチドを正しく選択することによって、
はとんどの及び好ましくはすべての旧Ｖ−’１株による
感染を検出することができるアッセイが発明され得る。
線状ペプチドフラグメン１〜のグループを利用する特定
のアッセイ法が、この後、より詳細に説明される。
のアッセイ法が、この後、より詳細に説明される。
本発明のペプチドを合成するだめの第二の一般的アプロ
ーチは、旧Ｖ−１のは戊、１期又は店壮遺伝子の所望す
る部分をコードする組換えＤＮＡ分子の培養細胞におけ
る発現を含む。ＩＩＩＶ−１遺伝子はそれ自体、天然又
は合成であり得る。便利には、ポリヌクレオチドは、良
く知られた技法により合成され得る。たとえば、短い一
本鎖ＤＮＡフラグメントは、Ｂｅａｕｃａｇｅ ａｎｄ
Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓ（１９８１） Ｔｅｔｌ。
ーチは、旧Ｖ−１のは戊、１期又は店壮遺伝子の所望す
る部分をコードする組換えＤＮＡ分子の培養細胞におけ
る発現を含む。ＩＩＩＶ−１遺伝子はそれ自体、天然又
は合成であり得る。便利には、ポリヌクレオチドは、良
く知られた技法により合成され得る。たとえば、短い一
本鎖ＤＮＡフラグメントは、Ｂｅａｕｃａｇｅ ａｎｄ
Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓ（１９８１） Ｔｅｔｌ。
Ｌｅｔｔｅｒｓ ２２ ： １８５９〜１８６２により
記載されるホスホラミデート法により調製され得る。次
に、二本鎖フラグメントは、相補的鎖を合成し、そして
適切な条件下で一緒にその鎖をアニーリングし、又は適
切なプライマー配列と共に、ＤＮＡポリマラーゼを用い
て相補的鎖を付加することによって得られる。
記載されるホスホラミデート法により調製され得る。次
に、二本鎖フラグメントは、相補的鎖を合成し、そして
適切な条件下で一緒にその鎖をアニーリングし、又は適
切なプライマー配列と共に、ＤＮＡポリマラーゼを用い
て相補的鎖を付加することによって得られる。
所望するＩＩＩＶ−１フラグメントをコードする天然又
は合成りＮＡフラグメントは、不ノ ビトロ細胞培養に
導入でき、そしてそこで発現できるＤＮＡ構造体に組込
まれるであろう。普通、そのＩ）ＮＡ構造体は、単細胞
宿主、たとえば酵母又は細菌における複製のために適切
であり、そしてまた培養された咄乳類又は他の真核細胞
系のゲノム内への導入及び組込みに向けられ得る。細菌
又は酵母中への導入のために調製されたＤＮＡ構造体は
、宿主により認識される複製システム、所望するポリペ
プチド生成物をコードするＩＩＩＶ−Ｉ ＤＮ八へラ
グメント、ＩＩＩＶ−Ｉ ＤＮＡ配列の５′末端に連
結される転写及び翻訳開始調節配列及び）ＩＩＶ−１配
列の３′末端に連結される転写及び翻訳終結調節配列を
含むであろう。その転写調節配列は、宿主によって認識
される異種プロモーターを含むであろ・う。便利には、
複製システム及び転写及び翻訳調節配列並びにＩＩＴＶ
−１のＤＮＡ配列のための挿入部位を含む利用可能な発
現ベクターが使用され得る。
は合成りＮＡフラグメントは、不ノ ビトロ細胞培養に
導入でき、そしてそこで発現できるＤＮＡ構造体に組込
まれるであろう。普通、そのＩ）ＮＡ構造体は、単細胞
宿主、たとえば酵母又は細菌における複製のために適切
であり、そしてまた培養された咄乳類又は他の真核細胞
系のゲノム内への導入及び組込みに向けられ得る。細菌
又は酵母中への導入のために調製されたＤＮＡ構造体は
、宿主により認識される複製システム、所望するポリペ
プチド生成物をコードするＩＩＩＶ−Ｉ ＤＮ八へラ
グメント、ＩＩＩＶ−Ｉ ＤＮＡ配列の５′末端に連
結される転写及び翻訳開始調節配列及び）ＩＩＶ−１配
列の３′末端に連結される転写及び翻訳終結調節配列を
含むであろう。その転写調節配列は、宿主によって認識
される異種プロモーターを含むであろ・う。便利には、
複製システム及び転写及び翻訳調節配列並びにＩＩＴＶ
−１のＤＮＡ配列のための挿入部位を含む利用可能な発
現ベクターが使用され得る。
本発明の検出方法及び免疫化方法において有用であるた
めには、ペプチドは、実質的に純粋な形、すなわち典型
的には約５０％ｗ ／ ｗ又はそれ以上の粋度で（実質
的には妨害タンパン質及び汚染物を含まない）得られる
。好ましくは、ＩＩＴＶ−１ペプチドは、少なくとも約
８０％ｗ ／ ｗの純度で、より好ましくは少なくとも
約９５％ｗ ／ ｗの純度で単離され又は合成される。
めには、ペプチドは、実質的に純粋な形、すなわち典型
的には約５０％ｗ ／ ｗ又はそれ以上の粋度で（実質
的には妨害タンパン質及び汚染物を含まない）得られる
。好ましくは、ＩＩＴＶ−１ペプチドは、少なくとも約
８０％ｗ ／ ｗの純度で、より好ましくは少なくとも
約９５％ｗ ／ ｗの純度で単離され又は合成される。
従来の精製技法を用いて、少なくとも９９％Ｗ ／ Ｗ
の均質ペプチドが得られる。たとえば、ペプチドは、逆
相高性能液体クロマトグラフィーの使用により精製され
得る。
の均質ペプチドが得られる。たとえば、ペプチドは、逆
相高性能液体クロマトグラフィーの使用により精製され
得る。
しかしながら、普通、診断アッセイにおいて結合試薬と
してペプチドを用いる場合、高い純度のペプチドを得る
ことは、必須ではない。
してペプチドを用いる場合、高い純度のペプチドを得る
ことは、必須ではない。
＋１１Ｖ−１ペプチドに対する抗体は、従来の技法に従
って、広範囲の種類のを推動物中に精製されたペプチド
を注射することによって得られる。適切なを椎動物は、
マウス、ラット、羊、及びヤギを含み、そして特にマウ
スが好ましい。普通、動物は、改良された力価及び特異
性を有する連続的な採血により定期的に採血される。抗
原は、筋肉内、腹腔内、皮下又は同様にして注射され得
る。普通、ビヒクル、たとえば完全又は不完全フロイン
（・アジュバントが使用される。所望により、モノクロ
・−ナル抗体が調製され得る。他方、ペプチドは、天然
源、すなわちＩＩＴＶ−１により感染された個人の血清
から単一特異性抗体を単離するために使用され得る。モ
ノクローナル抗体を得るために、免疫化されたを推動物
からの牌臓細胞が不滅化される。不滅化の態様は臨界で
はない。現在、最っとも一般的な方法は、骨髄腫融合パ
ートナ−との融合である。他の技法は、ＥＢＶ形質転換
、ヘアーＤＮＡ、たとえば腫瘍遺伝子、レトロウィルス
、等による形質転換又は細胞系の安定した維持及びモノ
クローナル抗体の産生を提供するいずれか他の方法を含
む。ヒＩ・モノクローナル抗体は、適切なし１〜融合パ
ートナ−と１１１１！臓細胞との融合により得られる。
って、広範囲の種類のを推動物中に精製されたペプチド
を注射することによって得られる。適切なを椎動物は、
マウス、ラット、羊、及びヤギを含み、そして特にマウ
スが好ましい。普通、動物は、改良された力価及び特異
性を有する連続的な採血により定期的に採血される。抗
原は、筋肉内、腹腔内、皮下又は同様にして注射され得
る。普通、ビヒクル、たとえば完全又は不完全フロイン
（・アジュバントが使用される。所望により、モノクロ
・−ナル抗体が調製され得る。他方、ペプチドは、天然
源、すなわちＩＩＴＶ−１により感染された個人の血清
から単一特異性抗体を単離するために使用され得る。モ
ノクローナル抗体を得るために、免疫化されたを推動物
からの牌臓細胞が不滅化される。不滅化の態様は臨界で
はない。現在、最っとも一般的な方法は、骨髄腫融合パ
ートナ−との融合である。他の技法は、ＥＢＶ形質転換
、ヘアーＤＮＡ、たとえば腫瘍遺伝子、レトロウィルス
、等による形質転換又は細胞系の安定した維持及びモノ
クローナル抗体の産生を提供するいずれか他の方法を含
む。ヒＩ・モノクローナル抗体は、適切なし１〜融合パ
ートナ−と１１１１！臓細胞との融合により得られる。
マウス×マウスモノクローナル抗体を産生ずるための詳
細な技法は、Ｏｉ ａｎｄ Ｈｅｒｚｅｎｂｅｒｇ。
細な技法は、Ｏｉ ａｎｄ Ｈｅｒｚｅｎｂｅｒｇ。
”５ｅｌｅｃｔｅｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｃｅ１
ｌｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、”Ｍｉｓｈｅｌ
ｌ ａｎｄ Ｓｈｉｉｇｉ（ｅｄｓ、）、Ｗ、Ｉｌ、
Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏ、＋Ｓａｎ Ｆｒａｎｃ
ｉｓｃｏ（１９８０）、 ３５１〜３７２ページにより
教授される。本発明の抗体は、いずれかの免疫グロブリ
ンクラス、すなわちＩｇＧ、たとえばＩｇＧ１ 。
ｌｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、”Ｍｉｓｈｅｌ
ｌ ａｎｄ Ｓｈｉｉｇｉ（ｅｄｓ、）、Ｗ、Ｉｌ、
Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏ、＋Ｓａｎ Ｆｒａｎｃ
ｉｓｃｏ（１９８０）、 ３５１〜３７２ページにより
教授される。本発明の抗体は、いずれかの免疫グロブリ
ンクラス、すなわちＩｇＧ、たとえばＩｇＧ１ 。
１’ｇＧ２八、及びＩｇＧ２Ｂ 、 Ｉｇ八、 １．０
． ＴｇＥ及びＩｇＭである。
． ＴｇＥ及びＩｇＭである。
適切な特異性を有する抗体が調製された後、広範囲の種
類の免疫学的アッセイ法が、生物学的サンプルにおける
ＩＩＩＶ−１を検出するために利用できる。多くの競争
及び非競争タンパク質結合アッセイは、科学文献及び特
許文献に記載されていて、そしてそのようなアッセイの
多くは、市販されている。
類の免疫学的アッセイ法が、生物学的サンプルにおける
ＩＩＩＶ−１を検出するために利用できる。多くの競争
及び非競争タンパク質結合アッセイは、科学文献及び特
許文献に記載されていて、そしてそのようなアッセイの
多くは、市販されている。
本発明のイムノアッセイを実施することにおいては、同
じ手段で生物学的サンプルを前処理すること、が通常、
必要であろう。サンプルの調製は、生物学的サンプルの
源に依存して変化するであろう。血清サンプルは、典型
的には、良く知られた方法に従って完全な血液を凝集せ
しめ、そして上清液を単離することによって調製される
であろう。
じ手段で生物学的サンプルを前処理すること、が通常、
必要であろう。サンプルの調製は、生物学的サンプルの
源に依存して変化するであろう。血清サンプルは、典型
的には、良く知られた方法に従って完全な血液を凝集せ
しめ、そして上清液を単離することによって調製される
であろう。
他の生物学的流体、たとえば精液、唾液及び尿もまた、
従来の方法により調製され得る。固形腫瘍及び他の組織
サンプルは、普通、細胞を分解し、そして対象の細胞成
分を溶解することによって調製されるであろう。
従来の方法により調製され得る。固形腫瘍及び他の組織
サンプルは、普通、細胞を分解し、そして対象の細胞成
分を溶解することによって調製されるであろう。
本発明のペプチドは、患者サンプルにおける抗体が固相
に結合されるペプチドにより固定される固相結合アッセ
イにおいて試薬として特に有用である。患者からのサン
プルが単一ペプチドに対してスクリーンされるが、グル
ープにおける個々のペプチドが結合する旧Ｖ−１抗体の
可能性を最大にするために選択される、ペプチドのグル
ープ又はパネルを用いることが通常好ましいであろう。
に結合されるペプチドにより固定される固相結合アッセ
イにおいて試薬として特に有用である。患者からのサン
プルが単一ペプチドに対してスクリーンされるが、グル
ープにおける個々のペプチドが結合する旧Ｖ−１抗体の
可能性を最大にするために選択される、ペプチドのグル
ープ又はパネルを用いることが通常好ましいであろう。
＋１１Ｖ−１株の異質性及び個人の免疫応答における変
動のために（すなわち、ある個人患者は、ウィルス粒子
上の特定のエピトープに対して検出可能なレベルの抗体
を産生ずることができない）、単一ペプチドとの抗体の
反応性に基づかれる検出は一般的に不適当であろう。
動のために（すなわち、ある個人患者は、ウィルス粒子
上の特定のエピトープに対して検出可能なレベルの抗体
を産生ずることができない）、単一ペプチドとの抗体の
反応性に基づかれる検出は一般的に不適当であろう。
そのようなグループにおける個々のペプチドはまた、旧
ｖ−１以外のウィルス、たとえばＩＩＩＶ−２との交差
反応性を避けるために選択されるであろう。
ｖ−１以外のウィルス、たとえばＩＩＩＶ−２との交差
反応性を避けるために選択されるであろう。
そのような交差反応性の回避は、誤った陽性試験結果を
避けることにおいてａ界である。
避けることにおいてａ界である。
そのようなグループにおける個々のペプチドは、同時に
又は別々に使用され得る。通常、そのペプチドは混合さ
れ、そして単一の固相に結合され、そして次に、そのア
ッセイが従来の方法で行なわれる（典型的な方法が、下
記に示される）。１又はそれ以上のペプチドへの患者か
らのサンプルにおける抗体の結合は、陽性試験をもたら
すが、しかし抗体を結合するすべてのペプチドの不良性
は、患者が旧Ｖ−１抗体を有さない高い信頬性の示唆で
ある。しかしながら、多（の場合、それぞれ個々のペプ
チド又はサブグループのペプチドの反応性に対して別々
に試験することが所望される。そめような個々のスクリ
ーニングにより得られた反応性プロフィールは、実質的
に価値がある患者の免疫応答に対するより詳細な情報を
提供するであろう。
又は別々に使用され得る。通常、そのペプチドは混合さ
れ、そして単一の固相に結合され、そして次に、そのア
ッセイが従来の方法で行なわれる（典型的な方法が、下
記に示される）。１又はそれ以上のペプチドへの患者か
らのサンプルにおける抗体の結合は、陽性試験をもたら
すが、しかし抗体を結合するすべてのペプチドの不良性
は、患者が旧Ｖ−１抗体を有さない高い信頬性の示唆で
ある。しかしながら、多（の場合、それぞれ個々のペプ
チド又はサブグループのペプチドの反応性に対して別々
に試験することが所望される。そめような個々のスクリ
ーニングにより得られた反応性プロフィールは、実質的
に価値がある患者の免疫応答に対するより詳細な情報を
提供するであろう。
本発明はまた、患者からのサンプル、特に血清サンプル
における旧Ｖ−１調節タンパク質の検出も提供する。そ
の調節タンパク質は、構造ペプチドと同時に又は別々に
検出され得る。、患者の血清における調節タンパク質が
比較的低濃度であるために、患者からのサンプルにおＬ
Ｊる抗体の検出を確かにするためには、固相上での高い
調節ペプチド濃度を用いることが通常所望されるであろ
う。
における旧Ｖ−１調節タンパク質の検出も提供する。そ
の調節タンパク質は、構造ペプチドと同時に又は別々に
検出され得る。、患者の血清における調節タンパク質が
比較的低濃度であるために、患者からのサンプルにおＬ
Ｊる抗体の検出を確かにするためには、固相上での高い
調節ペプチド濃度を用いることが通常所望されるであろ
う。
本発明のペプチド及び抗体は、免疫学的検出のいづれか
のタイプ、たとえば均質及び非均質（固相）イムノアッ
セイ、競争及び非競争アッセイ及び免疫組織化学的染色
技法において実質的に有用である。トンドブロット及び
酵素結合免疫吸着ア・ンセイ （［１ＬＩＳＡ）が好ま
しく、そしてそのようなアッセイのための特定の方法が
下記に示される。
のタイプ、たとえば均質及び非均質（固相）イムノアッ
セイ、競争及び非競争アッセイ及び免疫組織化学的染色
技法において実質的に有用である。トンドブロット及び
酵素結合免疫吸着ア・ンセイ （［１ＬＩＳＡ）が好ま
しく、そしてそのようなアッセイのための特定の方法が
下記に示される。
次の例は例示的であって、限定するものではない。
２３５個のペプチド及び１５個のアミノ酸を、Ｇｅｙｓ
ｅｎなど、（１９８５） Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａ
ｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ ８１ ：３９９８及び８２ ：
１７８の同時複数のペプチド合成法に従って、ＦＭＯＣ
−β−アニリンに結合された６個の炭素子の脂肪族ジア
ミンスペーサーにより官能価されたポリエチレンロンド
上で合成した。そのロッドは、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｒ
ｅ５ｅａｒｃｈ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ。
ｅｎなど、（１９８５） Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａ
ｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ ８１ ：３９９８及び８２ ：
１７８の同時複数のペプチド合成法に従って、ＦＭＯＣ
−β−アニリンに結合された６個の炭素子の脂肪族ジア
ミンスペーサーにより官能価されたポリエチレンロンド
上で合成した。そのロッドは、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｒ
ｅ５ｅａｒｃｈ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ。
Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍか
ら得られた。ＦＭＯＣ−保護アミノ酸活性エステルを、
スペーサーに付加し、ここで活性エステルはペンタフル
オロフェニルエステルであった（但し、１−オキソ−２
−ジヒドロキシジヒドロベンゾトリアジンエステルであ
るセリン及びトレオニンを除く）。合成の後、ペプチド
の側鎖保８Ｉ基を除去し、ペプチドを支持体に結合した
ままにした。そのペプチドの配列は、ＨＩＶ−１株＋１
ＢＸ ２及びＢＨＩＯの予定配列に基づかれ、そしてす
べての旧Ｖ−］遺伝子生成物の完全なアミノ酸配列を得
るために選択された。連続ペプチドは５個のアミノ酸に
よりオーバラップし、そして個々のペプチドは、ＩＩＩ
Ｖ−１陽性及び陰性血清のパネルとの反応性のために試
験された。試験された２３５個のペプチドのうち、８４
個が旧Ｖ−１陽性すンプルの少なくとも６０％と反応し
、そして１ＩｆＶ−１陰性サンプルとは反応しないこと
が見出された。
ら得られた。ＦＭＯＣ−保護アミノ酸活性エステルを、
スペーサーに付加し、ここで活性エステルはペンタフル
オロフェニルエステルであった（但し、１−オキソ−２
−ジヒドロキシジヒドロベンゾトリアジンエステルであ
るセリン及びトレオニンを除く）。合成の後、ペプチド
の側鎖保８Ｉ基を除去し、ペプチドを支持体に結合した
ままにした。そのペプチドの配列は、ＨＩＶ−１株＋１
ＢＸ ２及びＢＨＩＯの予定配列に基づかれ、そしてす
べての旧Ｖ−］遺伝子生成物の完全なアミノ酸配列を得
るために選択された。連続ペプチドは５個のアミノ酸に
よりオーバラップし、そして個々のペプチドは、ＩＩＩ
Ｖ−１陽性及び陰性血清のパネルとの反応性のために試
験された。試験された２３５個のペプチドのうち、８４
個が旧Ｖ−１陽性すンプルの少なくとも６０％と反応し
、そして１ＩｆＶ−１陰性サンプルとは反応しないこと
が見出された。
これらの８４個のペプチドは、０記の第１表に列挙され
ている。
ている。
次に８４個のペプチドのうち選択された１つを、次のよ
うにして試験した。ＨＩＶ−１合成ペプチド１５−マー
を含むＰＦＧ、ピンを、室温（ＲＴ）で振盪機上で３０
分間、Ｂｌｏｔｔｏ溶液中で予備インキュベートした。
うにして試験した。ＨＩＶ−１合成ペプチド１５−マー
を含むＰＦＧ、ピンを、室温（ＲＴ）で振盪機上で３０
分間、Ｂｌｏｔｔｏ溶液中で予備インキュベートした。
次にピンをＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ＠により２度洗浄した
。これらのピンを、１／１００に希釈されたＩＩＴＶ−
陽性又は陰性血清１７５μｌをそれぞれのウェルに含む
９６−ウェルマイクロタイタープレートのウェル中に含
浸した。振盪機上で１時間、室温でのインキュベーショ
ンの後、初めに、ピン上へのヒト１ｇの非特異的結合を
減じるために、０．３ＭのＮａＣｌにより補足されたＰ
ＢＳ−Ｔｗｅ、ｅｎ ＠により、ピンを洗浄した。この
後、ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ Ｏにより２度洗浄した。次に
、、抗−ヒトＩｇ−アルカリポスファターゼ（Ｂｉｏ−
Ｒａｄ） １７５μＺを含む９６−ウェルマイクロタイ
タープレートのウェル中に、ピンを再び、室温で３０分
間、振盪機上で含浸せしめた。再び、ピンを０．３Ｍの
ＮａＣｌにより補足されたＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ＠によ
り洗浄し、次にＰＢＳ−Ｔｉｖｅｅｎ Ｏにより２度洗
浄した。ジェタノールアミン緩衝液（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）
に溶解された基質（Ｐ−二１ヘロフェニルボスフェート
）を、９６−ウェルマイクロタイタープレートのウェル
中に添加し、そしてピンをこれらのウェル中に３７°Ｃ
で３０分間含浸せしめた。４０５ｎｍでの吸光度を、Ｍ
ｉｃｒｏｖａｘコンピューターに連結されたＴｉｔｅｒ
ｔｅｋ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒを用いて記録した。
。これらのピンを、１／１００に希釈されたＩＩＴＶ−
陽性又は陰性血清１７５μｌをそれぞれのウェルに含む
９６−ウェルマイクロタイタープレートのウェル中に含
浸した。振盪機上で１時間、室温でのインキュベーショ
ンの後、初めに、ピン上へのヒト１ｇの非特異的結合を
減じるために、０．３ＭのＮａＣｌにより補足されたＰ
ＢＳ−Ｔｗｅ、ｅｎ ＠により、ピンを洗浄した。この
後、ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ Ｏにより２度洗浄した。次に
、、抗−ヒトＩｇ−アルカリポスファターゼ（Ｂｉｏ−
Ｒａｄ） １７５μＺを含む９６−ウェルマイクロタイ
タープレートのウェル中に、ピンを再び、室温で３０分
間、振盪機上で含浸せしめた。再び、ピンを０．３Ｍの
ＮａＣｌにより補足されたＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ＠によ
り洗浄し、次にＰＢＳ−Ｔｉｖｅｅｎ Ｏにより２度洗
浄した。ジェタノールアミン緩衝液（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）
に溶解された基質（Ｐ−二１ヘロフェニルボスフェート
）を、９６−ウェルマイクロタイタープレートのウェル
中に添加し、そしてピンをこれらのウェル中に３７°Ｃ
で３０分間含浸せしめた。４０５ｎｍでの吸光度を、Ｍ
ｉｃｒｏｖａｘコンピューターに連結されたＴｉｔｅｒ
ｔｅｋ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒを用いて記録した。
陽性度を、棒グラフからのバックグラウンド読みより高
い吸光度の値から決定した。個々のＩＩＩＶ−１陽性及
び陰性血清を用いた。但し、ＩＩＬＲＰ Ｉ、ｎ及び
■（それぞれは、ｌｌｏｆｆｍａｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ
から得られた１０種の個々の陽性血清のプールである）
を除く。
い吸光度の値から決定した。個々のＩＩＩＶ−１陽性及
び陰性血清を用いた。但し、ＩＩＬＲＰ Ｉ、ｎ及び
■（それぞれは、ｌｌｏｆｆｍａｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ
から得られた１０種の個々の陽性血清のプールである）
を除く。
ペプチド含有ポリエチレンロッドは、いくつかの抗血清
のスクリーニンクに再使用されるので、それらは、６０
°Ｃで３０分間、分配緩衝液を加熱することによって付
着する抗体又はタンパク質を洗浄された。この緩衝液は
、リン酸す１−リウム緩衝液（ｐＨ７，２）中、１％ド
デシル硫酸すＩ〜リウム及び０．１％２−メルカプトエ
タノールから成った。
のスクリーニンクに再使用されるので、それらは、６０
°Ｃで３０分間、分配緩衝液を加熱することによって付
着する抗体又はタンパク質を洗浄された。この緩衝液は
、リン酸す１−リウム緩衝液（ｐＨ７，２）中、１％ド
デシル硫酸すＩ〜リウム及び０．１％２−メルカプトエ
タノールから成った。
煮沸メタノール中での最後の洗浄の後、ロンドは再使用
の準備ができた。
の準備ができた。
それぞれをより十分に試験するために、第１表の８４個
のペプチドを、従来の自動及び手動固相技法により多量
合成した。そのペプチドを、ＥＬＩＳＡ及びドットブロ
ントアンセイの両者により、結合試薬としてのそれらの
有用性について評価した。
のペプチドを、従来の自動及び手動固相技法により多量
合成した。そのペプチドを、ＥＬＩＳＡ及びドットブロ
ントアンセイの両者により、結合試薬としてのそれらの
有用性について評価した。
ペプチドを、次のようにしてヒト血清における＋１ＴＶ
−１特異的抗体の検出のためにトンドブロット膜アッセ
イに使用した。ペプチドを、２ ｍｇ ／ ｍρの濃度
で０．１％アジ化ナトリウムを含むリン酸緩衝溶液（Ｐ
ＢＳ）中に溶解した。この溶液の約１μｌを、二ｌ・ロ
セルロース膜（Ｇｅｌｍａｎ）上に直接スポットで移し
、そしてその膜を４５°Ｃで２時間乾燥せしめた。その
膜を、０．３％Ｔｗｅｅｎ ０−２０を含むＰＢＳ及び
次に蒸留水によりそれぞれ２度２０分間洗浄した。
−１特異的抗体の検出のためにトンドブロット膜アッセ
イに使用した。ペプチドを、２ ｍｇ ／ ｍρの濃度
で０．１％アジ化ナトリウムを含むリン酸緩衝溶液（Ｐ
ＢＳ）中に溶解した。この溶液の約１μｌを、二ｌ・ロ
セルロース膜（Ｇｅｌｍａｎ）上に直接スポットで移し
、そしてその膜を４５°Ｃで２時間乾燥せしめた。その
膜を、０．３％Ｔｗｅｅｎ ０−２０を含むＰＢＳ及び
次に蒸留水によりそれぞれ２度２０分間洗浄した。
洗浄希釈剤（０，３％Ｔｗｅｅｎ ＠−２０を含むＰＢ
Ｓ中、０．５％脱脂粉乳粉末）中、個々の血清の１％希
釈物を、室温で６０分間、スポットで移されたペプチド
の膜上でインキュベートした。未結合抗体を、洗浄希釈
剤により２回、１０分づつの洗浄により除去した。次に
、洗浄希釈剤中、ヤギ抗−ヒトＩｇＧアルカリホスファ
ターゼ接合体を、３０分間反応せしめた。希釈剤による
２回の１０分間の洗浄の後、その膜を、５−ブロモ−４
−クロロ−３−インドールイルホスフェート（Ｂ（、Ｉ
Ｐ）及びニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）と共に
１０分間インキュへ一トシた。陽性血清を、膜上でのペ
プチドの位置での紫色の進展により検出した。陰性血清
は色の変化を示さなかった。
Ｓ中、０．５％脱脂粉乳粉末）中、個々の血清の１％希
釈物を、室温で６０分間、スポットで移されたペプチド
の膜上でインキュベートした。未結合抗体を、洗浄希釈
剤により２回、１０分づつの洗浄により除去した。次に
、洗浄希釈剤中、ヤギ抗−ヒトＩｇＧアルカリホスファ
ターゼ接合体を、３０分間反応せしめた。希釈剤による
２回の１０分間の洗浄の後、その膜を、５−ブロモ−４
−クロロ−３−インドールイルホスフェート（Ｂ（、Ｉ
Ｐ）及びニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）と共に
１０分間インキュへ一トシた。陽性血清を、膜上でのペ
プチドの位置での紫色の進展により検出した。陰性血清
は色の変化を示さなかった。
ＥＬＩＳＡアッセイを次のようにして行なった。マイク
ロタイタープレー１−（９６ウエル、Ｉｍｍｕｌｏｎ−
ｎ）を、室温で１６〜２０時間インキュへ−１へするこ
とによって、１又はそれよりも多くのペプチド（ウェル
当り、ＰＢＳ １００μｆ中、２５０〜１１０００ｎ
）により被覆した。次に、ウェルを、０．３％Ｔｗｅｅ
ｎ ０−２０を含むＰＢＳにより３度洗浄した。血清サ
ンプルを、洗浄希釈剤により１ ： １００μｌに希
釈し、そしてサンプル１００Ｉ１１をそれぞれのウェル
に添加した。室温で１時間のインキュベーションの後、
ウェルを、０．３％Ｔｗｅｅｎ ０−２０を含むＰＢＳ
により６度洗浄した。洗浄希釈剤中、ヤギ抗−ヒ）Ｉｇ
Ｇアルカリホスフォクーゼの１：３０００希釈液の１０
０μｌアリコートをそれぞれのウェルに添加し、そして
次に、室温で３０分間インキユヘートした。
ロタイタープレー１−（９６ウエル、Ｉｍｍｕｌｏｎ−
ｎ）を、室温で１６〜２０時間インキュへ−１へするこ
とによって、１又はそれよりも多くのペプチド（ウェル
当り、ＰＢＳ １００μｆ中、２５０〜１１０００ｎ
）により被覆した。次に、ウェルを、０．３％Ｔｗｅｅ
ｎ ０−２０を含むＰＢＳにより３度洗浄した。血清サ
ンプルを、洗浄希釈剤により１ ： １００μｌに希
釈し、そしてサンプル１００Ｉ１１をそれぞれのウェル
に添加した。室温で１時間のインキュベーションの後、
ウェルを、０．３％Ｔｗｅｅｎ ０−２０を含むＰＢＳ
により６度洗浄した。洗浄希釈剤中、ヤギ抗−ヒ）Ｉｇ
Ｇアルカリホスフォクーゼの１：３０００希釈液の１０
０μｌアリコートをそれぞれのウェルに添加し、そして
次に、室温で３０分間インキユヘートした。
０．３％Ｔｗｅｅｎ ０−２０を含むＰＢＳによる６回
の洗浄の後、Ｐ−ニトロフェニルホスフェート基質（ジ
ェタノールアミン緩衝液中、１ ｍｇ ／ ｍｌ溶液１
００μｍ）を、それぞれのウェルに添加した。色の進展
を３０分間可能にし、そして次にＥＬＩＳＡプレートリ
ーダーにより４４４ｎｍで読み取った。
の洗浄の後、Ｐ−ニトロフェニルホスフェート基質（ジ
ェタノールアミン緩衝液中、１ ｍｇ ／ ｍｌ溶液１
００μｍ）を、それぞれのウェルに添加した。色の進展
を３０分間可能にし、そして次にＥＬＩＳＡプレートリ
ーダーにより４４４ｎｍで読み取った。
請求項１記載のペプチドは、天然の折りたたみ及びグリ
コジル化を実質的には有さない。
コジル化を実質的には有さない。
請求項４記載の合成ペプチドは、天然の折りたたみ及び
グリコジル化を実質的には有さない。
グリコジル化を実質的には有さない。
請求項７記載のモノクローナル抗体及びポリクローナル
抗体が存在する。
抗体が存在する。
請求項１０記載の組成物は、さらに生理学的に許容でき
るアジュバントを特徴する 請求項１２記載のイムノアッセイにおいて、病原体ば旧
Ｖ−１であり、固定されたペプチドの少なくとも１つは
、旧Ｖ−１調節タンパク質の特徴的なエピトープをコー
ドし、固定された少なくとも４〜８種の別々の合成ペプ
チドを有し、ペプチドは化学的に合成された線状フラグ
メント又は組換え的に産生されたフラグメントであり、
そして合成ペプチドは約６〜５０個の長さのアミノ酸を
有する。
るアジュバントを特徴する 請求項１２記載のイムノアッセイにおいて、病原体ば旧
Ｖ−１であり、固定されたペプチドの少なくとも１つは
、旧Ｖ−１調節タンパク質の特徴的なエピトープをコー
ドし、固定された少なくとも４〜８種の別々の合成ペプ
チドを有し、ペプチドは化学的に合成された線状フラグ
メント又は組換え的に産生されたフラグメントであり、
そして合成ペプチドは約６〜５０個の長さのアミノ酸を
有する。
前述の発明は、明確に理解するために例示的且つ測的に
いくらか詳細に記載されているけれども、特許請求の範
囲内で修飾及び変更を行なうことができる。
いくらか詳細に記載されているけれども、特許請求の範
囲内で修飾及び変更を行なうことができる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、１００個よりも少ないアミノ酸を有し、そして次の
アミノ酸配列： 【アミノ酸配列があります。】 の１つにより定義される少なくとも１つのエピトープを
含んで成るペプチド。 ２、下記アミノ酸配列： 【アミノ酸配列があります。】 から成る群から選択された配列と実質的に同じ配列を含
む合成ペプチド。 ３、下記アミノ酸配列： 【アミノ酸配列があります。】 により定義される少なくとも１つのエピトープと反応性
である抗体。 ４、ＨＩＶ−１（ヒト免疫欠損ウィルス）感染に対する
免疫応答を誘発するために使用される組成物であって、
下記アミノ酸配列： 【アミノ酸配列があります。】 から成る群から選択された配列と実質的に同じ配列を含
むペプチドの量（該量は、接種された宿主中に血清中和
応答を誘発するのに十分な量である）を生理学的に許容
される担体に含んで成る組成物。 ５、患者からのサンプル中の抗−病原性抗体を検出でき
る固相イムノアッセイであって：その上に固定された少
なくとも２種の別々の合成ペプチド（該ペプチドは病原
体に特有な免疫学的に別々のエピトープをコードする）
を有する固相に患者からのサンプルを暴露し；そして 前記固定されたペプチドと患者からのサンプル中の抗体
との間の結合を観察することを含んで成るイムノアッセ
イ。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US16037888A | 1988-02-25 | 1988-02-25 | |
| US160378 | 1993-12-01 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01308299A true JPH01308299A (ja) | 1989-12-12 |
Family
ID=22576642
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1043384A Pending JPH01308299A (ja) | 1988-02-25 | 1989-02-27 | Ｈｉｖ―１感染の診断及び治療に有用な組成物 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0330359A3 (ja) |
| JP (1) | JPH01308299A (ja) |
| AU (1) | AU3076189A (ja) |
Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
| JPH04243896A (ja) * | 1990-07-19 | 1992-08-31 | Merck & Co Inc | 環状のｈｉｖ主要中和決定基ペプチド |
| JPH04243895A (ja) * | 1990-07-19 | 1992-08-31 | Merck & Co Inc | 環状ｈｉｖ主中和決定基ペプチド |
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-
1989
- 1989-02-14 EP EP19890301364 patent/EP0330359A3/en not_active Withdrawn
- 1989-02-24 AU AU30761/89A patent/AU3076189A/en not_active Abandoned
- 1989-02-27 JP JP1043384A patent/JPH01308299A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04243896A (ja) * | 1990-07-19 | 1992-08-31 | Merck & Co Inc | 環状のｈｉｖ主要中和決定基ペプチド |
| JPH04243895A (ja) * | 1990-07-19 | 1992-08-31 | Merck & Co Inc | 環状ｈｉｖ主中和決定基ペプチド |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0330359A3 (en) | 1991-06-05 |
| EP0330359A2 (en) | 1989-08-30 |
| AU3076189A (en) | 1989-08-31 |
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