JPH02101086A - グリセロ−Ｓｎ−３−ホスホリルコリン粉末の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、天然リン脂質から直接、天然構造を維持した
グリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリン粉末を製造する
方法に関するものである。

（従来の技術） 天然リン脂質の立体特異性を有するホスファチジルコリ
ン、即ち１，２−ジアシル−３ｎ−グリセロ３−ホスホ
リルコリンを合成するには、この天然構造を維持したグ
リセロ−５ｎ−３−ホスホリルコリンが必要である。何
故なら天然リン脂質はグリセロール骨格第２位に不斉炭
素を有するため光学活性を示すからである。そのため従
来の有機合成法による天然と同一配位の光学対掌体を合
成する場合、通常、対応する立体配位の置換グリセロー
ル、例えば、１．２−０−イソプロピリデン−Ｄ−グリ
セロールをＤ−マンニトールから合成して出発原料とす
る方法が用いられる（Ｍ、　Ｂ。

Ｊｕｎｇ、　Ｔ、Ｊ、　Ｓｈａｗ、　Ｊ、　Ａｍ、　Ｃ
ｈｅｗ、　Ｓｏｃ、、　１０２＋６３０４　（１９８０
））。これらの出発原料から合成されるリン脂質はプロ
ピル−２−トリメチルアンモニオエチルホスフェート誘
導体である。

また、天然構造を維持したグリセロ−３ｎ−３−ホスホ
リルコリンを得る手段として、前述した全合成法とは別
に、天然リン脂質において、グリセロ−３ｎ−３−ホス
ホリルコリンと脂肪酸を結合させているエステル結合の
みを特異的に加水分解させる方法も知られている。この
加水分解法には、酵素法と 化学薬品法がある。酵素法では脂質のエステル分解酵素
であるホスホリパーゼやリパーゼ等が使われている。

化学薬品法による天然構造を有するグリセロ５ｎ−３−
ホスホリルコリンを得る方法としては、下記の報告が知
られている。

■Ｈ，Ｂｒｏｃｋｅｒｈｏｆｆ、　Ｍ、　Ｙｏｒｋｏｗ
ｓｋｉ、　Ｃａｎ、　Ｊ、　Ｂｉ。

ｃｈｅｍ、、４３．１７７７　（１９６５）■Ｊ、　Ｓ
、　Ｃｈａｄｈａ、　Ｃｈｅｍ、　Ｐｈｙｓ、　Ｌｉｐ
ｉｄｓ、　ａｌ　１０４■　実験化学講座、第３巻、“
脂質の化学”７・１、ジアシルグリセロリン脂質、第２
６１頁、東京化学同人社 以上の方法は共通して、ホスファチジルコリンを無水エ
ーテル中テトラブチルアンモニウムヒドロキシドで加水
分解し、得られた分解物を濾別後、塩化カドミウム溶液
により、グリセロ−３−ホスホリルコリン−塩化カドミ
ウム複合体とじて結晶状で析出させている。

（発明が解決しようとする課題） グリセロール誘導体を出発原料としてプロピル２−トリ
メチルアンモニオエチルホスフェート誘導体に至る全合
成法は、非常に合成段階が多く、また各段階ごとの反応
生成物の精製工程が複雑であり、その最終生成物の収量
が低い。また、このグリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコ
リンを原料として合成されるホスファチジルコリンは、
用いた脂肪酸を基準として収率が非常に低い。そのため
、反応生成物のコストが非常に高く、工業的製造法とし
て不適である。

また、全合成法では反応途中において立体配位が逆配位
に反転するワルデン反転が生じる可能性があり、天然構
造でない立体配位物が混在する危険性を含んでいる。

天然リン脂質のグリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリン
と脂肪酸を結合させているエステル結合を酵素で特異的
に加水分解する手段には、■リパーゼによる非特異的分
解、■ホスホリパーゼＡ２とホスホリパーゼＡ、又はホ
スホリパーゼＡ２とリゾホスホリパーゼによる段階的分
離、■ホスホリパーゼＢによる非特異的分解がある。

上記のエステル結合を触媒的に加水分解する酵素群は微
生物、動物の膜結合酵素および動物の分泌酵素から精製
される。しかし、これらの原料から、これらの酵素群を
単離あるいは精製するには、硫安分画、ＤＥＡＥ−セル
ロースおよび電気泳動等の分析的手法を多数組み合わせ
る精製法の処理によってのみ入手される。微少な原料か
ら分析的手法で得られるこれらの酵素群の収量は著しく
低く、またその酵素活性も低く、しばしば保存中に力価
が失活する。そのため、これらの酵素群は生化学実験に
使用されても、グリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリン
の工業的製造法としては不適である。

天然リン脂質のグリセロ−８ｎ−３−ホスホリルコリン
と脂肪酸を結合させているエステル結合を化学製品で特
異的に加水分解して天然構造を有するグリセロ−５ｎ−
３−ホスホリルコリンを８周製する方法では、加水分解
剤として高価なテトラブチルアンモニウムヒドロキシド
を無水無極性溶媒中で反応させなくてはならない。特に
、この方法で問題となる工程は、加水分解されたグリセ
ロ−３ｎ３−ホスホリルコリンの回収にカドミウムを使
用して複合体として結晶化させることである。

吸水性の著しいグリセロ−８ｎ−３−ホスホリルコリン
を結晶化させるために使用するこのカドミウムは、生体
中で蓄積されて著しく毒性を生じる重金属である。天然
構造を有するグリセロ−３ｎ３−ホスホリルコリンを用
いて調製される各種ホスファチジルコリンの使用目的が
、医薬品および医薬品原料であるため、それらの各種ホ
スファチジルコリンは生体内に投与される事が明確にな
っており、合成原料中のカドミウム残存は非常に問題で
ある。　また、グリセロ−８ｎ−３−ホスホリルコリン
−塩化カドミウム複合体を用いたホスファチジルコリン
の合成法では、その収率が約５０％前後と低い欠点を有
している。

以上述べた如く、天然構造のリン脂質を大量に合成する
には、天然構造を有するグリセロ−３ｎ３−ホスボリル
コリンが安価で多量に確保される必要がある。その使用
目的から安全な原料で、しかもホスファチジルコリン合
成時の反応収率の良い原料という条件を満足させるグリ
セロ−３ｎ−３−ホスホリルコリンの製造法の開発が望
まれている。

従って、本発明は、安価で安全な天然構造を有するグリ
セロ−３ｎ−３−ホスホリルコリンを大量に製造する方
法を確立することを目的とする。

（課題を解決するための手段） 本発明のグリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリン粉末の
製造方法は、天然リン脂質をアルコール中で金属ナトリ
ウム又はナトリウムアルコラートで脱アシル化した後、
この脱アシル化物をメタノール中で塩酸酸性とし、次い
でこれをアセトン中に加えて−１０〜−３０℃で晶析濾
過し、さらに晶析した脱アシル化物をメタノール中でシ
リカを加えて粉末状にすることを特徴とする。

本発明に用いる天然リン脂質の組成は、ホスファチジル
コリン含量９０％以上で残りは、リゾホスファチジルコ
リンであることが好ましい。何故ならリゾホスファチジ
ルコリンの脱アシル化処理によりグリセロ−８ｎ−３−
ホスホリルコリンが生じるからである。

天然リン脂質原料中にホスファチジルコリンを豊富に含
む場合、しばしばホスファチジルコリンやリゾホスファ
チジルコリンと同様のホスホリルコリン骨格を有するス
フィンゴミエリンを併存している。そのため、ホスファ
チジルコリンの濃縮に従って、これらの物質が付随的に
濃縮される。

しかし、スフィンゴミエリンは脂肪族物質をスフィンゴ
シン残基や脂肪酸が酸アミド結合した状態で保持してい
るため、本発明で採用されるアルカリ処理に対して安定
であり、しかもクロロホルム可溶であるので、脱アシル
化時のクロロホルム処理により容易に除去される。従っ
て、本発明の天然リン脂質原料にスフィンゴミエリンの
混在は問題がないので幅広い原料を対象と出来る。

しかし、ホスホリルコリン骨格を持たない一般リン脂質
は、本発明の脱アシル化条件において加水分解を受は相
応する脱アシル化物を生成し、製造目的であるグリセロ
−３ｎ−３−ホスホリルコリンの純度を低下させるので
、本発明における天然リン脂質原料から可能な限りこれ
を除去することが好ましい。

本発明に用いられる天然リン脂質は、落花生、大豆、卵
黄等の天然レシチンを原料とし、冷アセトンによる脱脂
処理、含水エタノールによる溶剤分画処理、二価の金属
塩を付加する錯体処理、シリカカラムや連続遠心液々多
段分配等によるクロマトグラフィー処理等をいくつか組
み合わせることによって得ることができる。

本発明に用いるアルカリ性エステル交換法による脱アシ
ル化法は、グリセロ−５ｎ−３−ホスホリルコリン製造
に適している。室温３時間以上の反応条件が好ましく、
得られるグリセロ−５−ホスホリルコリンの天然構造に
変化を与えない。

硫酸や塩酸等の鉱酸を用いた酸性エステル交換法でも脱
アシル化は可能であるが、得られたグリセロ−３ｎ−３
−ホスホリルコリンに関して５ｎ−３のコリンホスフェ
ートのリン酸基と５ｎ−２の水酸基が分子内で縮合した
ように見受けられるコンホメーション変化が観察される
。また、アルカリ性触媒は反応終了後、容易に酸で中和
されるが、この反応はグリセロ−５ｎ−３−ホスホリル
コリンの立体構造に何ら変化を与えず、生成する塩も同
様にグリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリンの立体構造
またはホスファチジルコリン合成時の反応に何らの影響
も与えない。

本発明に用いた金属ナトリウムおよびナトリウムアルコ
ラートによるエステル交換法は、反応の目的物であるグ
リセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリンとエステル交換さ
れた脂肪酸誘導体との分離に好ましい条件である。

反応の目的物であるグリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコ
リンは、水酸基とリン酸基を有するため、水溶性化合物
であり、極性溶媒であるメタノールに可溶であるが、ア
セトン、クロロホルムに不溶であり、当然、無極性溶媒
には不溶である。一方、エステル交換された脂肪酸誘導
体はメタノールに可溶であるが、アルコールエステルで
あるので、アセトン、クロロホルムに可溶である。

即ち、天然リン脂質をメタノール中でエステル交換反応
を行うと、出発原料およびいずれの反応生成物も、メタ
ノールに可溶なため、均−系で反応が進行する。反応終
了後の均一溶液にクロロホルムを加える事により、クロ
ロホルム中に脂肪酸誘導体、未反応リン脂質原料および
原料由来の脂質不純物は移行するが、目的物のグリセロ
−３ｎ３−ホスホリルコリンは移行しない。それ故、反
応物の除去にこのクロロホルム処理が適している。

次いで、反応の目的物であるグリセロ−５−ホスホリル
コリンはメタノールに可？容なため、グリセロ−３ｎ−
３−ホスホリルコリンを塩酸酸性でメタノール溶液に調
製後、アセトンを加える。

これによりメタノールは溶解されたアセトンにより、グ
リセロ−５ｎ−３−ホスホリルコリンの溶解能を失い、
溶液外にグリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリンを放出
する。そして、グリセロ−５−ホスホリルコリンはアセ
トンに対して不溶性であるため、結晶として析出する。

クロロホルムやアセトンによる溶剤分画処理において、
メタノール中からより効率的にグリセロ−３ｎ−３−ホ
スホリルコリンを晶析させるため、−１５℃〜−３０℃
で、望ましくは数時間以上、最低２時間以上保持するこ
とが好ましい。また、アセトンによるグリセロ５ｎ−３
−ホスホリルコリン結晶の洗浄および晶析は、望ましく
は４回以上、最低２回以上繰り返すことが好ましい。

本発明において、アルカリ性触媒として用いられる金属
ナトリウムおよびナトリウムメチラートやナトリウムエ
チラートのようなナトリウムアルコラートは、原料の天
然リン脂質に対して最大量２重量％で、好ましくは、０
．５重量％を添加する。

触媒を効率良く用いるためには、触媒の添加に先立って
、天然リン脂質を０．５〜２時間攪拌状態でメタノール
に溶解する。この天然リン脂質のメタノール溶液に触媒
を入れて室温で３時間以上反応させる。反応の進行状態
は薄層クロマトグラフィ−を用いてホスファチジルコリ
ンが検出されなくなった時に終了する。添加した触媒は
、脱アシル化後にグリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリ
ンのメタノール溶液調製時に塩酸、好ましくは１６〜２
０％塩酸でＰ）１４．０〜６．０に中和して失活させる
。この際、四級アミンを有するグリセロ−３ｎ−３−ホ
スホリルコリンのホスホリルコリン塩は塩酸塩に変換さ
れて四級アミン塩として安定する。この塩酸塩はホスフ
ァチジルコリン合成時の反応に何らの影響も与えない。

トリアジルグリセロールの場合には、水酸化ナトリウム
や水酸化カリウムのようなアルカリ金属塩を触媒として
、室温で少量のアルコールと１２時間以上の反応でエス
テル交換が可能であるが、天然リン脂質は触媒量や反応
時間を増加しても、その反応率は低く、本発明の目的に
は不適である。

また、前述のようなアルカリ金属塩を用いて天然リン脂
質原料を高温でケン化分解して脱アシル化する方法は、
生成する脂肪酸塩の水、アルコールおよびアセトンに対
する溶解性がグリセロ−３ｎ３−ホスホリルコリンに近
仙しており、かつ、脱アシル溶媒のクロロホルムに対す
る溶解性が不十分なため、反応生成物のグリセロ−３ｎ
−３−ホスホリルコリンと脂肪酸塩を直ちに分別出来な
い。

さらに、ケン化分解法では、天然リン脂質原料のモル数
に相当するモル数のアルカリ金属塩に反応過剰率を付加
してアルカリ金属塩を加える。そのため、反応系中に多
量のアルカリ金属塩が残存する。即ち、反応終了時の過
剰アルカリの中和、さらには、脂肪酸塩の中和による脂
肪酸への変換後の脱脂肪酸に際してグリセロ−５ｎ−３
−ホスホリルコリン中に大量に塩、例えば塩化カリウム
、硫酸ナトリウム等が混在する。この条件で得られるグ
リセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリンは晶析が難しく、
しばしば黄褐色の着色があり、ホスファチジルコリン合
成時における反応収率が低い。

これに対して、本発明におけるグリセロ−３ｎ　−３−
ホスホリルコリンの収率は定量的である。ホスファチジ
ルコリンから産生されるグリセロ−３ｎ３−ホスホリル
コリンの理論収率は、３４．０％である。

本発明では、晶析した脱アシル化物をメタノール中でシ
リカを加えて粉末状にするが、使用したホスファチジル
コリン９５％とりゾホスファチジルコリン５％からなる
天然リン脂質原料１００ｇから３２〜３７ｇのグリセロ
−３ｎ−３−ホスホリルコリン量に相当するシリカ担持
物が得られる。シリカ担持物中のグリセロ−５ｎ−３−
ホスホリルコリン含量は乾燥重量に換算して、少なくと
も５０％、そして上限は８０％、特に６０〜７０％が好
ましく、この含量以上では取り扱いや保存が困難となり
、この含量以下では担持物の容量が大きくなり、ホスフ
ァチジルコリン合成時の反応容積や攪拌効果から好まし
くない。

本発明に用いるシリカは無水ケイ酸の９９．８％以上の
純度を示すもので、比表面積１１０±２０ｒｒｒ／ｇで
化学的に表面をメチル基でコーティングして疎水化し、
平均径が１６ａｍ程度のものが好ましい。シリカは化学
的に不活性であり、メタノール中でグリセロ−３ｎ−３
−ホスホリルコリンを高濃度、約６０％以上を含有して
粉末となる。この際、シリカは少量の添加で嵩容積を減
少させる流動性を向上させるが、添加量を上記濃度以下
になるよう増加すると嵩容積が著しく増加するので好ま
しくない。

さらにシリカの添加によりグリセロ−３ｎ−３−ホスホ
リルコリンの表面をこれが覆い、固結を防止し粉体の流
動性を向上させることができる。

本発明で得られたグリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリ
ンは薄層クロマトグラフィーによるＲｆ値と発色反応、
ＧＣ−ＭＳによる分子量測定、ＮＭＲによるスペクトル
解析、ライネッケ塩比色法によるコリン量、モリブドバ
ナドリン酸比色法によるリン量、およびケルプール法に
よる窒素量等から高純度で天然構造を維持していること
が確認された。

本発明で得られたグリセロ−３ｎ−３−ホスホリルコリ
ンのシリカ担持物は、ホスファチジルコリンの合成の原
料として、取り扱いが非常に容易である。

本発明で得られるグリセロ−５ｎ−３−ホスホリルコリ
ン粉末を用いると、ヘキサメチルリン酸トリアミド存在
下に酸塩化物と反応させる方法、および末剤を塩基性エ
ステル化触媒とクロロホルムの存在下に酸無水物と反応
させる方法等によって、好ましくホスファチジルコリン
を合成することができる。特にヘキサメチルリン酸トリ
アミド存在下での反応は、最少量の酸塩化物で短時間に
高収率で進行させることが出来る。

また、ホスファチジルコリン合成時におけるシリカの除
去は、反応溶液の蒸留クロロホルム溶液での濾過と遠心
分離法によって完全に行われ、ホスファチジルコリン反
応の原料として問題はない。

（発明の効果） 本発明によれば、天然リン脂質原料から常温で固体状で
あり、取り扱いが容易な天然の立体構造を有したグリセ
ロ−５ｎ−３−ホスホリルコリンが特別に高価な薬剤、
酵素および毒性の高いカドミウム塩等を使わずに、大量
に安価に、しかも簡便な方法で製造することが出来る。

これによって、有害な重金属を含まないホスファチジル
コリンを高収率で製造する事が出来、しかも製造される
ホスファチジルコリンは、天然の立体構造を有している
。また、シリカ担持物として粉末化しであるので、流動
性があり、取り扱いが容易となり、ホスファチジルコリ
ンの合成において作業性の面で有利である。

（実施例） 以下、本発明を実施例に基づき具体的に説明する。

実施例１ 塩化カルシウム管を装着した２βのフラスコに市販大豆
ホスファチジルコリン（ホスファチジルコリン９４％、
リゾホスファチジル３９２５％含有）１００ｇを量りと
り、０．５１１のメタノールを加えた。

フラスコ中にマグネチックスクーラーを入れ、１時間攪
拌しながらホスファチジルコリンを溶かし、その後０．
５ｇに相当するナトリウムメチラート（和光純薬製、２
８％ナトリウムメチラート／メチルアルコール溶液１　
、８　＋ｄ　）を加えた。この反応混合物を室温で３時
間攪拌した。

反応の終了は薄層クロマトグラフィーで確認した。展開
溶媒はクロロホルム／メタノール／水の６５／２５／　
４　（ｖｏｌ／ｖｏｌ／ｖｏｌ）組成液を用い、呈色は
硫酸発色で行った。薄層クロマトグラフィー上でＲｆ値
０．３のホスファチジルコリンのスポットが消失し、溶
媒フロントに脂肪酸メチルエステルのスポットと原点の
脱アシル化物のスポットのみが観察された時に終了した
。

反応混合物を７０℃の水浴中で減圧留去して、脱溶媒し
、その後、０．５７！のクロロホルムを一度に加えて原
料中の不純物と反応生成物である脂肪酸メチルエステル
を溶解した。このフラスコを２時間、−２５℃に冷却し
た。クロロホルム層をデカンテーションで除去し、脱ア
シル残渣を１００ｍｐのメタノールに溶解し２０％塩酸
数滴でｐｌ＋　４．０〜６．０に調整した。そして、こ
のメタノール溶液をＩＩ！フラスコ中の０．５βのアセ
トン中に攪拌しながら滴下した。このフラスコを一２５
℃で３時間冷却し、その後アセトン層をデカンテーショ
ンで除去した。

この残渣を３００ｍｆｆのメタノールに溶かし、この／
８液中に、２０ｇのシリカ（デグノサ社製、商品名Ａｅ
ｒｏｓｉｌ　Ｒ９７２）を加え、５０℃の水浴中、ロー
タリーエバポレーターで溶媒を除去した。得られた固体
を乳鉢ですりつぶし、デシケータ−中で五酸化リンと共
に高度に減圧して、重量が一定になるまで乾燥させてシ
リカ吸着グリセロ−５ｎ−３−ホスホリルコリンの白色
粉末が５５ｇ（グリセロ−５ｎ３−ホスホリルコリン含
量３５ｇ）得られた。収率は９３％であった。

このものの分析値は次の通りであった。

薄層クロマトグラフィー、 移動層：メタノール／水（１／１） Ｒｆ値＝０．４ワンスボツト ドラーゲンドルフ試薬発色ニオレンジ色リン試薬発色：
青色 ＧＣ−ＭＳ　　ＦＡＢ　（ポジデイプ）マトリックス　
トリエタノールアミン ｍ／ｅ　ＣＭ　＋　Ｈ）　”　２５８　、　（Ｍ＋Ｎａ
）　”　２８ＯＮＭＲ，白色粉末をＤ　２０に溶かし、
溶液を遠心分離して不溶性のシリカを除いた。

３．１　ｐｐｍ　　（ｓ　、　　Ｎ”（ＣＲ３）３）３
．２〜４．３　ｐｐｍ　　（ｍ、グリセリン−Ｈおよび
コリン−Ｈ〕 コリン含量、ライネソケ塩比色法 ４７．１％（理論値４１．３％） リン含量、モリブドバナドリン酸比色法１１．９％（理
論値１２．３％） 窒素含量、ケルプール法 ５．２７％（理論値５．５４％） 実施例２ 塩化カルシウム管を装着した２７！のフラスコに市販大
豆ホスファチジルコリン（ホスファチジルコリン９４％
、リゾホスファチジルコリン５％含有）１００ｇを量り
とり、０．５７！のメタノールを加えた。

フラスコ中にマグネチソクスクーラーを入れ、１時間攪
拌しながらホスファチジルコリンを溶かし、そのｆ＆１
．ｏｇに相当する棒状ナトリウム（関東化学製、プロテ
クティブ液パラフィン）を加えた。この反応混合物を室
温で３時間攪拌した。

反応の終了は薄層クロマトグラフィーで確認した。展開
溶媒はクロロホルム／メタノール／水の６５／２５／　
４　　（ｖｏｌ／ｖｏｌ／ｖｏｌ）組成液を用い、呈色
は硫酸発色で行った。薄層クロマトグラフィー上でＲｆ
　（！０．３５のホスファチジルコリンのスポットが消
失し、溶媒フロントに脂肪酸メチルエステルのスポット
と原点の脱アシル化物のスポットのみが観察された時に
終了した。

反応混合物を７０℃の水浴中で減圧留去して、脱溶媒し
、その後、０．５７！のクロロホルムを一度に加えて原
料中の不純物と反応生成物である脂肪酸メチルエステル
を溶解した。このフラスコを２時間、−２０℃に冷却し
た。クロロホルム層をデカンテーションで除去し、脱ア
シル残渣ヲ１００ｍ１のメタノールに溶解し２０％塩酸
数滴でｐＨ４，０〜６．０に調整した。そして、このメ
タノール溶液をＩＩｌフラスコ中の０．５７！のアセト
ン中に攪拌しながら滴下した。このフラスコを一２０℃
で３時間冷却し、その後アセトン層をデカンテーション
で除去した。

この残渣を３００＋＋＋＃のメタノールに溶かし、この
溶液中に、２０ｇのシリカ（デグソサ社製、商品名＾ｅ
ｒｏｓｉｌ　Ｒ９７２）を加え、５０℃の水浴中、ロー
タリーエバポレーターで溶媒を除去した。得られた固体
を乳鉢ですりつぶし、デシケータ−中で五酸化リンと共
に高度に減圧して、重量が一定になるまで乾燥させてシ
リカ吸着グリセロ−３ｎ’−３−ホスホリルコリンの白
色粉末が５２ｇ（グリセロ−５ｎ３−ホスホリルコリン
含量３３ｇ）得られた。収率は８８％であった。

このものの分析値は実施例１と同様であった。

シリカ吸着グリセロ−５ｎ−３−ホスホリルコリンのホ
スファチジルコリン合成原料としての有効性を下記の参
考例に示した。

参考例１ ２９ｍ１ｌのナス型フラスコにシリカ吸着グリセロ５ｎ
−３−ホスホリルコリン１６１３ｍｇ　（グリセロ−５
ｎ３−ホスホリルコリン１ｇ含有：３．９　ミリモル）
を入れ、クロロホルムＩＱｍｌを加えて懸濁させた。

この懸濁液をマグネチソクスターラーで３０分間攪拌し
た後に、ミリスチン酸無水物４．０ｇ（９，１ミリモル
）およびジメチルアミノピリジン１．１１ｇ（９，１ミ
リモル）を加え、室温で５時間攪拌した。反応終了後、
この混合物を乾燥アセトン３００＋＋＋１中に注ぎ、生
成した沈澱物を遠心分離により単離した。沈澱物をクロ
ロホルムに溶解し、シリカを濾過して除いた後に溶媒を
減圧留去した。１，２−シミリストイルホスファチジル
コリンが２．０ｇ得られ、収率は７５．９％であった。

本物質をＦＡＢ−ＭＳで分析した結果、ｍ／ｅ　６７８
　（Ｍ　＋　Ｈ）＋が確認された。

参考例２ ２０−のナス型フラスコにシリカ吸着グリセロ５ｎ−３
−ホスホリルコリン１６１３ｍｇ　（グリセロ−３ｎ３
−ホスホリルコリン１ｇ含有；３．９　ミリモル）を入
れ、ヘキサメチルリン酸トリアミド１０＃＋２を加えて
懸濁させた。この懸濁液を、マグネチソクスクーラーで
３０分間攪拌した後に、リルオイルクロライド４．６ｇ
（１５，３ミリモル）を加え、油浴上で６０℃で３時間
攪拌した。反応終了後、この混合物を１５０艷の氷水中
に注ぎ、ヘキサン抽出した。ヘキサン層を硫酸ナトリウ
ムで乾燥させた後に、残留物をシリカゲルを充填した２
φＸ　５０ｃｍ０カラムにのせ、クロロホルム−メタノ
ール系グラジェントで？容離させると２．３１　ｇの１
．２−シリルオイルホスファチジルコリン あった。本物質をＦＡＢ−ＭＳで分析した結果、ｍ／ｅ
　７８２　（Ｍ　＋　Ｈ　）＋が確認サレタ。

【図面の簡単な説明】

第１図は、実施例において得られたグリセロＳｎ−３−
ホスホリルコリンについて、ファースト・アトム・ボン
バード・イオン化マスクロマトのポジティブ法で分析し
た結果を示す図で、グリセロ−Ｓｎ−３−ホスホリルコ
リン（　ＣＭ＋Ｈ）”２５Ｂ，　ＣＭ＋Ｎａ）　”　２
８０　）が認られる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 天然リン脂質をアルコール中で金属ナトリウム又はナト
   リウムアルコラートで脱アシル化した後、この脱アシル
   化物をメタノール中で塩酸酸性とし、次いでこれをアセ
   トン中に加えて−１０〜−３０℃で晶析濾過し、さらに
   晶析した脱アシル化物をメタノール中でシリカを加えて
   粉末状にすることを特徴とするグリセロ−Ｓｎ−３−ホ
   スホリルコリン粉末の製造方法。