JPH0455433B2 - - Google Patents
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- JPH0455433B2 JPH0455433B2 JP59250306A JP25030684A JPH0455433B2 JP H0455433 B2 JPH0455433 B2 JP H0455433B2 JP 59250306 A JP59250306 A JP 59250306A JP 25030684 A JP25030684 A JP 25030684A JP H0455433 B2 JPH0455433 B2 JP H0455433B2
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- polymerizable
- glycerophospholipid
- acid residue
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Description
〔産業上の利用分野〕
本発明は重合性を有するグリセロリン脂質に関
するものである。 〔従来の技術〕 天然リン脂質は主にホスフアチジルコリン、ホ
スフアチジルエタノールアミン、ホスフアチジル
セリン、ホスフアチジルイノシトールなどのグリ
セロリン脂質およびスフインゴミエリンなどのス
フインゴリン脂質からなり、細胞の生体膜の重要
な成分として生存している。この中でもホスフア
チジルコリンは一般にレシチンと呼ばれ、動植物
界のリン脂質の中で一番多く存在している。これ
らのリン脂質の共通した特徴は親水基と疎水基を
持つことであり、生体膜中では二重層膜を形成
し、タンパク質、コレステロールなどとともに物
質の透過、選択的輸送などの生命現象に欠くこと
のできない機能をはたしている。リン脂質は工業
的にはすでに天然乳化剤として用いられ、食品工
業、化粧品業界等で用いられている。 最近リン脂質はその脂質の特徴により水溶液中
でリポソームと呼ばれる非常に小さな閉鎖小胞体
を作ることが知られるようになつた。そしてこの
リポソームに薬剤を詰め、ドラツグデリバリーシ
ステムと呼ばれる投薬手段に用いる試みが数多く
なされてきている。しかしながら、リポソームの
原料には現在天然リン脂質、主にレシチンが用い
られているために、生体内酵素の攻撃を受けやす
く、薬剤を含んだリポソームを生体に注入する
と、その薬剤が局部まで移送されるうちにリポソ
ームが破壊され薬剤の効力が十分発揮されない欠
点がある。 このような欠点を補うために種々の試みがなさ
れている。一つは、リン脂質そのものが酵素に対
して抵抗力を示す形をしているもの、たとえば本
来はエステル結合の構造をしているものをエーテ
ル結合の構造に変換したアルキル型のリン脂質等
である。もう一つは、エステル結合の構造を持つ
が、それが重合可能な基を持つものである。 後者の場合はリン脂質が水溶液中では規則正し
く配向する性質を用い、重合させることにより酵
素に対して抵抗性を示し、しかも外界からの圧力
に対しても抵抗力を示すリポソームが得られる。
このような重合性リン脂質としては、メタクリル
酸基を持つもの（特開昭56−152816号）、アセチ
レン基を持つもの（特開昭56−135492号）などが
提案されている。 〔発明が解決しようとする問題点〕 しかしながら、このような従来の重合性リン脂
質は天然品に由来しない基を導入するため、食
品、化粧品、医薬品等として生体に利用しにく
く、外界からの圧力に弱いほか、酵素に対する抵
抗性が大きすぎて、ドラツグデリバリーシステム
に利用した場合、患部に到達した後も分解せず、
薬剤の放出および代謝が有効に行われないという
問題点があつた。 本発明は、このような従来の問題点を解決する
ためのもので、生体に利用可能で、酵素に対して
適度な抵抗性を有するため、ドラツグデリバリー
システムに利用できるほか、外界からの圧力に対
して抵抗性を示す新規な重合性グリセロリン脂質
を提供することを目的としている。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明は、下記一般式〔Ｉ〕で表わされる化合
物からなる重合性グリセロリン脂質である。 （式中、R1CO−およびR2CO−はそれぞれ天
然由来の脂肪酸残基を示し、その一方または両方
が共役型の二重結合を有する共役脂肪酸残基であ
り、R3は−CH2CH2N+（CH3）3，−CH2CH2N+
H3，
するものである。 〔従来の技術〕 天然リン脂質は主にホスフアチジルコリン、ホ
スフアチジルエタノールアミン、ホスフアチジル
セリン、ホスフアチジルイノシトールなどのグリ
セロリン脂質およびスフインゴミエリンなどのス
フインゴリン脂質からなり、細胞の生体膜の重要
な成分として生存している。この中でもホスフア
チジルコリンは一般にレシチンと呼ばれ、動植物
界のリン脂質の中で一番多く存在している。これ
らのリン脂質の共通した特徴は親水基と疎水基を
持つことであり、生体膜中では二重層膜を形成
し、タンパク質、コレステロールなどとともに物
質の透過、選択的輸送などの生命現象に欠くこと
のできない機能をはたしている。リン脂質は工業
的にはすでに天然乳化剤として用いられ、食品工
業、化粧品業界等で用いられている。 最近リン脂質はその脂質の特徴により水溶液中
でリポソームと呼ばれる非常に小さな閉鎖小胞体
を作ることが知られるようになつた。そしてこの
リポソームに薬剤を詰め、ドラツグデリバリーシ
ステムと呼ばれる投薬手段に用いる試みが数多く
なされてきている。しかしながら、リポソームの
原料には現在天然リン脂質、主にレシチンが用い
られているために、生体内酵素の攻撃を受けやす
く、薬剤を含んだリポソームを生体に注入する
と、その薬剤が局部まで移送されるうちにリポソ
ームが破壊され薬剤の効力が十分発揮されない欠
点がある。 このような欠点を補うために種々の試みがなさ
れている。一つは、リン脂質そのものが酵素に対
して抵抗力を示す形をしているもの、たとえば本
来はエステル結合の構造をしているものをエーテ
ル結合の構造に変換したアルキル型のリン脂質等
である。もう一つは、エステル結合の構造を持つ
が、それが重合可能な基を持つものである。 後者の場合はリン脂質が水溶液中では規則正し
く配向する性質を用い、重合させることにより酵
素に対して抵抗性を示し、しかも外界からの圧力
に対しても抵抗力を示すリポソームが得られる。
このような重合性リン脂質としては、メタクリル
酸基を持つもの（特開昭56−152816号）、アセチ
レン基を持つもの（特開昭56−135492号）などが
提案されている。 〔発明が解決しようとする問題点〕 しかしながら、このような従来の重合性リン脂
質は天然品に由来しない基を導入するため、食
品、化粧品、医薬品等として生体に利用しにく
く、外界からの圧力に弱いほか、酵素に対する抵
抗性が大きすぎて、ドラツグデリバリーシステム
に利用した場合、患部に到達した後も分解せず、
薬剤の放出および代謝が有効に行われないという
問題点があつた。 本発明は、このような従来の問題点を解決する
ためのもので、生体に利用可能で、酵素に対して
適度な抵抗性を有するため、ドラツグデリバリー
システムに利用できるほか、外界からの圧力に対
して抵抗性を示す新規な重合性グリセロリン脂質
を提供することを目的としている。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明は、下記一般式〔Ｉ〕で表わされる化合
物からなる重合性グリセロリン脂質である。 （式中、R1CO−およびR2CO−はそれぞれ天
然由来の脂肪酸残基を示し、その一方または両方
が共役型の二重結合を有する共役脂肪酸残基であ
り、R3は−CH2CH2N+（CH3）3，−CH2CH2N+
H3，
【式】Ｈ，
【式】
【式】または
本発明のグリセロリン脂質は重合性を有し、グ
リセロリン脂質重合体の製造に使用される。この
グリセロリン脂質は水溶液中でリポソームを形成
し、規則正しく配向するので、この状態で重合さ
せることにより均一な薄膜状の重合体が生成す
る。この重合体の抵抗性は、レシチンの酵素に対
する分解性を100としたとき、その分解率が10〜
30となる適度の抵抗性を有するため、ドラツグデ
リバリーシステムに利用した場合、患部に到達す
るまでは酵素により分解せず、到達後は分解され
て、内部の薬剤を効果的に放出できるとともに、
重合体自身は代謝されて蓄積しないほか、外界か
らの圧力に対しても抵抗力を示す重合体が得られ
る。 重合方法は従来の重合性リン脂質の重合と同様
の方法により重合を行うことができ、重合速度は
速い。リポソームなどの場合は紫外線照射により
水溶液中で重合させる方法が適している。また目
的に応じて水溶性または油溶性過酸化物等を用い
て重合させることもできる。 本発明のグリセロリン脂質またはその重合体は
食品、化粧品、医薬品等として生体に利用するこ
とができる。 〔発明の効果〕 本発明によれば、天然由来の脂肪酸残基であつ
て、少なくとも一方が共役型の二重結合を有する
共役脂肪酸残基を導入したので、生体に利用して
も阻害性がなく、酵素に対して適度の抵抗性を有
するほか、外界からの圧力に対しても高い抵抗性
を示す重合性グリセロリン脂質が得られる。また
このグリセロリン脂質は優れた重合性を有するた
め、重合リポソームとしてドラツグデリバリーシ
ステムに利用することができる。この場合、重合
リポソームも、酵素に対して適度の抵抗性を有す
るため、薬剤を効率よく患部に移送した後、薬剤
を効果的に放出させることができるとともに、重
合リポソーム自体の代謝も行われて蓄積すること
がなく、また温度変化による破壊、凝集がなく、
内容物の漏出も少ないなど、外界からの圧力に対
する高い抵抗性を示す。 〔実施例〕 以下、本発明を参考例および実施例により説明
する。 参考例 １ キリ油100gをメタノールに溶解させた
KOH24gとメタノールのリフラツクス温度で２
時間けん化した。温度を50〜60℃に保ち、塩酸水
溶液でPHを１〜２に下げ、遊離してきた脂肪酸を
ヘキサンで抽出して混合脂肪酸を得た。この脂肪
酸の脂肪酸組成はエレオステアリン酸83％、リノ
ール酸８％、オレイン酸７％、ステアリン酸１
％、パルチミン酸１％であつた。この混合脂肪酸
ヘキサン溶液を水洗後、無水硫酸ナトリウムで脱
水した。この溶液を５℃の冷蔵庫中で再結晶し
た。結晶をろ別し、再びヘキサンに溶解して再結
晶を行つた。結晶をろ別後、室温減圧下乾燥して
41gの白色鱗片状結晶脂肪酸を得た。この脂肪酸
中のエレオステアリン酸は99％であつた。 参考例 ２ 市販卵黄レシチン50gを、直径80cmのガラスカ
ラムに充填した1.5のシリカゲルで分離した。
溶出溶剤にはクロロホルム／メタノール／水＝
65／25／４の混合溶媒を用いた。各フラクシヨン
ごとに薄膜クロマトグラフイーで追跡し、レシチ
ン部から31gのレシチンを得、ホスフアチジルエ
タノールアミン部から9gのホスフアチジルエタ
ノールアミンを得た。得られたレシチンを500ml
のエーテルに溶解させ、攪拌しつつテトラブチル
アンモニウムヒドロキサイド10％メタノール溶液
80mlを加えた。底に沈殿したグリセリルホスホリ
ルコリンをテカンテーシヨンで回収してエーテル
で洗浄した。得られたグリセリルホスホリルコリ
ンは9.1gであつた。このグリセリルホスホリルコ
リンを温水に溶解し、別に温水に溶解しておいた
塩化カドミウム・2.5水塩18.9gと混合して反応さ
せた。不溶分をろ別し、このグリセリルホスホリ
ルコリン−塩化カドミウムコンプレツクス水溶液
に白濁が生じるまでエタノールを加えて、０〜５
℃に一晩放置し、生じた結晶を回収した。この結
晶を再び温水に溶解し、同様にエタノールを加え
て結晶化させた。結晶を回収して乾燥させ、
11.8gのグリセリルホスホリルコリン−塩化カド
ミウムコンプレツクスを得た。 実施例 １ 参考例−１で得られたエレオステアリン酸
16.8gを乾燥クロロホルムに溶解し、ジシクロヘ
キシルカルボジイミド6.2gを加えて、５℃で一晩
反応させエレオステアリン酸無水物を合成した。
副生したジシクロヘキシル尿素をろ別し、参考例
−２のグリセリルホスホリルコリン−塩化カドミ
ウムコンプレツクス4.4gとジメチルアミノピリジ
ン2.5gをこのエレオステアリン酸無水物クロロホ
ルム溶液に加えた。常温で攪拌しながら48時間反
応させ、反応後沈殿物をろ別し、クロロホルムを
除いて粗レシチンを得た。粗レシチンをメタノー
ル／クロロホルム混合溶媒に再溶解し、イオン交
換樹脂アンバーライトIRC−50、IRA−45（ロー
ムアンドハース社商標）各10gを加え、バツチ方
式で残存塩化カドミウムを除いた。メタノールを
除いて再び粗レシチンを得た。この粗レシチンを
クロロホルム／メタノール／水＝65／25／４の混
合溶媒を溶出剤として、直径５cmのカラムにシリ
カゲル0.5を充填したカラムによりカラム分別
した。TLCで追跡しながらレシチン部を回収し、
脱溶媒して純１，２−ジエレオステアロイル−
Sn−３−グリセロホスホリルコリン5.4gを得た。 得られた１，２−ジエレオステアロイル−Sn
−３−グリセロホスホリルコリンの元素分析値は
次の通りである。 元素分析値 Ｃ Ｈ Ｎ （wt％） 理論値 67.95 9.78 1.80 実測値 66.81 9.46 1.81 また上記１，２−ジエレオステアロイル−Sn
−３−グリセロホスホリルコリンのNMRスペク
トルは第１図に示す通りであり、第１図に付記し
た位置符号は〔〕式の通りである。 上記により得られた１，２−ジエレオステアロ
イル−Sn−３−グリセロホスホリルコリン200mg
をベンゼンに溶解し、50ml容のナスフラスコ中で
ロータリーエバポレーターにより減圧下脱ベンゼ
ンし、フラスコ壁に膜状に１，２−ジエレオステ
アロイル−Sn−３−グリセロホスホリルコリン
を付着させた。フラスコにイオン交換水12.5mlを
加え、プローブ型超音波発生装置によりリポソー
ムを形成させた。35ワツトで、20分間超音波処理
した後、その５mlをとり１cmの石英セルに入れ
た。石英セルを30℃に保ち、窒素をバブリングし
ながら２時間脱気した。この脱気されたリポソー
ム溶液の入つた石英セルに紫外線を３時間照射し
て重合させ、重合リポソームを形成させた。この
リポソームを電子顕微鏡で観察したところ、直径
約300〓の１枚膜リポソームであつた。またこの
リポソーム水溶液にベンゼンを加えて共沸脱水さ
せることにより重合ホスフアチジルコリンを得
た。IRで測定した結果、1600cm-1付近の共役二
重結合による吸収は消失しており、平均分子量は
約38000であつた。 実施例 ２ 参考例−１で得られたエレオステアリン酸（シ
ス−９，トランス−11，トランス−13）30gをヘ
キサン300mlに溶解し、ヨウ素0.3gを加えて室温
下異性化し、全トランス型エレオステアリン酸を
得た。次いで参考例−１と同様に再結晶により精
製した。この全トランス型エレオステアリン酸
（トランス−９，トランス−11，トランス−13）
16.8gを実施例−１と同様に反応、精製し、全ト
ランス１，２−ジエレオステアロイル−Sn−３
−グリセロホスホリルコリン5.2gを得た。 得られた全トランス１，２−ジエレオステアロ
イル−Sn−３−グリセロホスホリルコリンの元
素分析値は次の通りである。 元素分析値 Ｃ Ｈ Ｎ （wt％） 理論値 67.95 9.78 1.80 実測値 67.22 9.39 1.80 上記により得られた全トランス１，２−ジエレ
オステアロイル−Sn−３−グリセロホスホリル
コリン200mgをクロロホルムに溶解し、スリ付試
験管中でロータリーエバポレーターにより減圧下
脱クロロホルムし、試験管壁に膜状に全トランス
１，２−ジエレオステアロイル−Sn−３−グリ
セロホスホリルコリンを付着させた。試験管にイ
オン交換水12.5mlを加え、試験管ミキサーにより
１時間攪拌してリポソームを形成させた。リポソ
ーム溶液５mlを１cmの石英セルに入れ、実施例−
１と同様にして重合リポソームを形成した。この
リポソームは電子顕微鏡で観察した結果直径500
〜3000オングストロームのリポソームであつた。
この重合リポソーム水溶液にベンゼンを加えて共
沸脱水させることにより、重合ホスフアチジルコ
リンを得た。IRで測定した結果、1600〜1650cm-
１付近の共役二重結合による吸収は消失しており、
平均分子量は82000であつた。 実施例 ３ パリナリン酸2.8gを乾燥クロロホルムに溶解
し、ジシクロヘキシルカルボジイミド1.1gを加
え、５℃で一晩反応させ、パリナリン酸無水物を
合成した。副生したジシクロヘキシル尿素をろ別
し、参考例−２のグリセリルホスホリルコリン−
塩化カドミウムコンプレツクス0.55gとジメチル
アミノピリジン0.4gをこのパリナリン酸無水物ク
ロロホルム溶液に加え、実施例−１と同様に反
応、精製し、１，２−ジパリナロイル−Sn−３
−グリセロホスホリルコリン0.71gを得た。 得られた１，２−ジパリナロイル−Sn−３−
グリセロホスホリルコリンの元素分析値は次の通
りである。 元素分析値 Ｃ Ｈ Ｎ （wt％） 理論値 68.31 9.31 1.81 実測値 68.15 9.22 1.79 試験例１（凍結融解試験） 実施例１で得られた重合リポソーム試料につい
て、凍結（液体窒素）と融解（室温）の操作を10
回操返して、凍結融解試験を行つた。試験終了後
溶液の状態を観察したところ、透明なリポソーム
分散液のままであつた。 比較例として下記化合物〔１〕〜〔４〕の重合
性グリセロリン脂質を用い、実施例１に準じて重
合リポソームを形成させた。この重合リポソーム
を用いて上記と同様にして凍結融解試験を行つ
た。結果を表１に示す。 （ここで、ｎ＝８、ｍ＝１、ｌ＝17である。）
リセロリン脂質重合体の製造に使用される。この
グリセロリン脂質は水溶液中でリポソームを形成
し、規則正しく配向するので、この状態で重合さ
せることにより均一な薄膜状の重合体が生成す
る。この重合体の抵抗性は、レシチンの酵素に対
する分解性を100としたとき、その分解率が10〜
30となる適度の抵抗性を有するため、ドラツグデ
リバリーシステムに利用した場合、患部に到達す
るまでは酵素により分解せず、到達後は分解され
て、内部の薬剤を効果的に放出できるとともに、
重合体自身は代謝されて蓄積しないほか、外界か
らの圧力に対しても抵抗力を示す重合体が得られ
る。 重合方法は従来の重合性リン脂質の重合と同様
の方法により重合を行うことができ、重合速度は
速い。リポソームなどの場合は紫外線照射により
水溶液中で重合させる方法が適している。また目
的に応じて水溶性または油溶性過酸化物等を用い
て重合させることもできる。 本発明のグリセロリン脂質またはその重合体は
食品、化粧品、医薬品等として生体に利用するこ
とができる。 〔発明の効果〕 本発明によれば、天然由来の脂肪酸残基であつ
て、少なくとも一方が共役型の二重結合を有する
共役脂肪酸残基を導入したので、生体に利用して
も阻害性がなく、酵素に対して適度の抵抗性を有
するほか、外界からの圧力に対しても高い抵抗性
を示す重合性グリセロリン脂質が得られる。また
このグリセロリン脂質は優れた重合性を有するた
め、重合リポソームとしてドラツグデリバリーシ
ステムに利用することができる。この場合、重合
リポソームも、酵素に対して適度の抵抗性を有す
るため、薬剤を効率よく患部に移送した後、薬剤
を効果的に放出させることができるとともに、重
合リポソーム自体の代謝も行われて蓄積すること
がなく、また温度変化による破壊、凝集がなく、
内容物の漏出も少ないなど、外界からの圧力に対
する高い抵抗性を示す。 〔実施例〕 以下、本発明を参考例および実施例により説明
する。 参考例 １ キリ油100gをメタノールに溶解させた
KOH24gとメタノールのリフラツクス温度で２
時間けん化した。温度を50〜60℃に保ち、塩酸水
溶液でPHを１〜２に下げ、遊離してきた脂肪酸を
ヘキサンで抽出して混合脂肪酸を得た。この脂肪
酸の脂肪酸組成はエレオステアリン酸83％、リノ
ール酸８％、オレイン酸７％、ステアリン酸１
％、パルチミン酸１％であつた。この混合脂肪酸
ヘキサン溶液を水洗後、無水硫酸ナトリウムで脱
水した。この溶液を５℃の冷蔵庫中で再結晶し
た。結晶をろ別し、再びヘキサンに溶解して再結
晶を行つた。結晶をろ別後、室温減圧下乾燥して
41gの白色鱗片状結晶脂肪酸を得た。この脂肪酸
中のエレオステアリン酸は99％であつた。 参考例 ２ 市販卵黄レシチン50gを、直径80cmのガラスカ
ラムに充填した1.5のシリカゲルで分離した。
溶出溶剤にはクロロホルム／メタノール／水＝
65／25／４の混合溶媒を用いた。各フラクシヨン
ごとに薄膜クロマトグラフイーで追跡し、レシチ
ン部から31gのレシチンを得、ホスフアチジルエ
タノールアミン部から9gのホスフアチジルエタ
ノールアミンを得た。得られたレシチンを500ml
のエーテルに溶解させ、攪拌しつつテトラブチル
アンモニウムヒドロキサイド10％メタノール溶液
80mlを加えた。底に沈殿したグリセリルホスホリ
ルコリンをテカンテーシヨンで回収してエーテル
で洗浄した。得られたグリセリルホスホリルコリ
ンは9.1gであつた。このグリセリルホスホリルコ
リンを温水に溶解し、別に温水に溶解しておいた
塩化カドミウム・2.5水塩18.9gと混合して反応さ
せた。不溶分をろ別し、このグリセリルホスホリ
ルコリン−塩化カドミウムコンプレツクス水溶液
に白濁が生じるまでエタノールを加えて、０〜５
℃に一晩放置し、生じた結晶を回収した。この結
晶を再び温水に溶解し、同様にエタノールを加え
て結晶化させた。結晶を回収して乾燥させ、
11.8gのグリセリルホスホリルコリン−塩化カド
ミウムコンプレツクスを得た。 実施例 １ 参考例−１で得られたエレオステアリン酸
16.8gを乾燥クロロホルムに溶解し、ジシクロヘ
キシルカルボジイミド6.2gを加えて、５℃で一晩
反応させエレオステアリン酸無水物を合成した。
副生したジシクロヘキシル尿素をろ別し、参考例
−２のグリセリルホスホリルコリン−塩化カドミ
ウムコンプレツクス4.4gとジメチルアミノピリジ
ン2.5gをこのエレオステアリン酸無水物クロロホ
ルム溶液に加えた。常温で攪拌しながら48時間反
応させ、反応後沈殿物をろ別し、クロロホルムを
除いて粗レシチンを得た。粗レシチンをメタノー
ル／クロロホルム混合溶媒に再溶解し、イオン交
換樹脂アンバーライトIRC−50、IRA−45（ロー
ムアンドハース社商標）各10gを加え、バツチ方
式で残存塩化カドミウムを除いた。メタノールを
除いて再び粗レシチンを得た。この粗レシチンを
クロロホルム／メタノール／水＝65／25／４の混
合溶媒を溶出剤として、直径５cmのカラムにシリ
カゲル0.5を充填したカラムによりカラム分別
した。TLCで追跡しながらレシチン部を回収し、
脱溶媒して純１，２−ジエレオステアロイル−
Sn−３−グリセロホスホリルコリン5.4gを得た。 得られた１，２−ジエレオステアロイル−Sn
−３−グリセロホスホリルコリンの元素分析値は
次の通りである。 元素分析値 Ｃ Ｈ Ｎ （wt％） 理論値 67.95 9.78 1.80 実測値 66.81 9.46 1.81 また上記１，２−ジエレオステアロイル−Sn
−３−グリセロホスホリルコリンのNMRスペク
トルは第１図に示す通りであり、第１図に付記し
た位置符号は〔〕式の通りである。 上記により得られた１，２−ジエレオステアロ
イル−Sn−３−グリセロホスホリルコリン200mg
をベンゼンに溶解し、50ml容のナスフラスコ中で
ロータリーエバポレーターにより減圧下脱ベンゼ
ンし、フラスコ壁に膜状に１，２−ジエレオステ
アロイル−Sn−３−グリセロホスホリルコリン
を付着させた。フラスコにイオン交換水12.5mlを
加え、プローブ型超音波発生装置によりリポソー
ムを形成させた。35ワツトで、20分間超音波処理
した後、その５mlをとり１cmの石英セルに入れ
た。石英セルを30℃に保ち、窒素をバブリングし
ながら２時間脱気した。この脱気されたリポソー
ム溶液の入つた石英セルに紫外線を３時間照射し
て重合させ、重合リポソームを形成させた。この
リポソームを電子顕微鏡で観察したところ、直径
約300〓の１枚膜リポソームであつた。またこの
リポソーム水溶液にベンゼンを加えて共沸脱水さ
せることにより重合ホスフアチジルコリンを得
た。IRで測定した結果、1600cm-1付近の共役二
重結合による吸収は消失しており、平均分子量は
約38000であつた。 実施例 ２ 参考例−１で得られたエレオステアリン酸（シ
ス−９，トランス−11，トランス−13）30gをヘ
キサン300mlに溶解し、ヨウ素0.3gを加えて室温
下異性化し、全トランス型エレオステアリン酸を
得た。次いで参考例−１と同様に再結晶により精
製した。この全トランス型エレオステアリン酸
（トランス−９，トランス−11，トランス−13）
16.8gを実施例−１と同様に反応、精製し、全ト
ランス１，２−ジエレオステアロイル−Sn−３
−グリセロホスホリルコリン5.2gを得た。 得られた全トランス１，２−ジエレオステアロ
イル−Sn−３−グリセロホスホリルコリンの元
素分析値は次の通りである。 元素分析値 Ｃ Ｈ Ｎ （wt％） 理論値 67.95 9.78 1.80 実測値 67.22 9.39 1.80 上記により得られた全トランス１，２−ジエレ
オステアロイル−Sn−３−グリセロホスホリル
コリン200mgをクロロホルムに溶解し、スリ付試
験管中でロータリーエバポレーターにより減圧下
脱クロロホルムし、試験管壁に膜状に全トランス
１，２−ジエレオステアロイル−Sn−３−グリ
セロホスホリルコリンを付着させた。試験管にイ
オン交換水12.5mlを加え、試験管ミキサーにより
１時間攪拌してリポソームを形成させた。リポソ
ーム溶液５mlを１cmの石英セルに入れ、実施例−
１と同様にして重合リポソームを形成した。この
リポソームは電子顕微鏡で観察した結果直径500
〜3000オングストロームのリポソームであつた。
この重合リポソーム水溶液にベンゼンを加えて共
沸脱水させることにより、重合ホスフアチジルコ
リンを得た。IRで測定した結果、1600〜1650cm-
１付近の共役二重結合による吸収は消失しており、
平均分子量は82000であつた。 実施例 ３ パリナリン酸2.8gを乾燥クロロホルムに溶解
し、ジシクロヘキシルカルボジイミド1.1gを加
え、５℃で一晩反応させ、パリナリン酸無水物を
合成した。副生したジシクロヘキシル尿素をろ別
し、参考例−２のグリセリルホスホリルコリン−
塩化カドミウムコンプレツクス0.55gとジメチル
アミノピリジン0.4gをこのパリナリン酸無水物ク
ロロホルム溶液に加え、実施例−１と同様に反
応、精製し、１，２−ジパリナロイル−Sn−３
−グリセロホスホリルコリン0.71gを得た。 得られた１，２−ジパリナロイル−Sn−３−
グリセロホスホリルコリンの元素分析値は次の通
りである。 元素分析値 Ｃ Ｈ Ｎ （wt％） 理論値 68.31 9.31 1.81 実測値 68.15 9.22 1.79 試験例１（凍結融解試験） 実施例１で得られた重合リポソーム試料につい
て、凍結（液体窒素）と融解（室温）の操作を10
回操返して、凍結融解試験を行つた。試験終了後
溶液の状態を観察したところ、透明なリポソーム
分散液のままであつた。 比較例として下記化合物〔１〕〜〔４〕の重合
性グリセロリン脂質を用い、実施例１に準じて重
合リポソームを形成させた。この重合リポソーム
を用いて上記と同様にして凍結融解試験を行つ
た。結果を表１に示す。 （ここで、ｎ＝８、ｍ＝１、ｌ＝17である。）
【表】
表１から明らかなように、実施例１の重合リポ
ソームは従来の重合性グリセロリン脂質〔１〕〜
〔４〕からなる重合リポソームに比べて温度変化
に対して安定であることがわかる。 化合物〔１〕〜〔４〕からなる重合リポソーム
において沈殿物が発生するのは、試料中の重合リ
ポソームが温度変化により破壊されたためである
と推定される。 試験例２（漏出試験） 実施例１で得られた重合性グリセロリン脂質お
よび試験例１で示した化合物〔１〕〜〔４〕の重
合性グリセロリン脂質のそれぞれについて、以下
の方法により、５（６）−カルボキシフルオレセイ
ン（CF）を内包させた重合リポソーム分散液を
作製した。 すなわち、各リン脂質（0.2g）をクロロホルム
に溶解した後、フラスコ壁に薄膜を形成するよう
ゆつくりとロータリーエバポレーターで減圧下に
クロロホルムを除去し、一晩真空乾燥した。 次にリン脂質薄膜の付着したフラスコへ
100mM CFがリポソーム内水相に内包される濃
度のCFを含むリン酸衝撃液（PH7.0、20ml）を注
入し、十分に水和した後、超音波照射（トミー精
工(株)UR−200P、商標、出力30W）を15分間、氷
冷下で行いリポソーム分散液を作製した。これら
のリポソーム分散液を25℃下でγ線照射重合
（0.34Mrad）を行つた後、ゲルカラム
（Sepharose CL−4B）にて精製し、漏出試験の
ための試料とした。 CFの漏出試験は、これらの分散液からCF漏出
を促進させるため50℃に加温し、２時間後それぞ
れの分散液をゲルカラムで重合リポソームから漏
出したCFを分離し、蛍光強度をスペクトロメー
ター（(株)日立製作所製、HPF−４、商標）で定
量することにより漏出率（％）を測定した。結果
を表２に示す。
ソームは従来の重合性グリセロリン脂質〔１〕〜
〔４〕からなる重合リポソームに比べて温度変化
に対して安定であることがわかる。 化合物〔１〕〜〔４〕からなる重合リポソーム
において沈殿物が発生するのは、試料中の重合リ
ポソームが温度変化により破壊されたためである
と推定される。 試験例２（漏出試験） 実施例１で得られた重合性グリセロリン脂質お
よび試験例１で示した化合物〔１〕〜〔４〕の重
合性グリセロリン脂質のそれぞれについて、以下
の方法により、５（６）−カルボキシフルオレセイ
ン（CF）を内包させた重合リポソーム分散液を
作製した。 すなわち、各リン脂質（0.2g）をクロロホルム
に溶解した後、フラスコ壁に薄膜を形成するよう
ゆつくりとロータリーエバポレーターで減圧下に
クロロホルムを除去し、一晩真空乾燥した。 次にリン脂質薄膜の付着したフラスコへ
100mM CFがリポソーム内水相に内包される濃
度のCFを含むリン酸衝撃液（PH7.0、20ml）を注
入し、十分に水和した後、超音波照射（トミー精
工(株)UR−200P、商標、出力30W）を15分間、氷
冷下で行いリポソーム分散液を作製した。これら
のリポソーム分散液を25℃下でγ線照射重合
（0.34Mrad）を行つた後、ゲルカラム
（Sepharose CL−4B）にて精製し、漏出試験の
ための試料とした。 CFの漏出試験は、これらの分散液からCF漏出
を促進させるため50℃に加温し、２時間後それぞ
れの分散液をゲルカラムで重合リポソームから漏
出したCFを分離し、蛍光強度をスペクトロメー
ター（(株)日立製作所製、HPF−４、商標）で定
量することにより漏出率（％）を測定した。結果
を表２に示す。
【表】
表２から明らかなように、実施例１の重合リポ
ソームは従来の重合性グリセロリン脂質〔１〕〜
〔４〕からなる重合リポソームに比べて外界から
の圧力に対する抵抗性が高いことがわかる。 試験例３（酵素に対する抵抗性試験） 実施例１、２で得られた重合性グリセロリン脂
質と、比較例としての卵黄レシチン（EYPC）お
よび前記試験例１で示した化合物〔１〕、〔３〕、
〔４〕の重合性グリセロリン脂質とについて、酵
素（ホスホリパーゼA2、ホスホリパーゼＤ）に
対する抵抗性を測定した。卵黄レシチンの分解率
を100とした時の値を表３に示す。
ソームは従来の重合性グリセロリン脂質〔１〕〜
〔４〕からなる重合リポソームに比べて外界から
の圧力に対する抵抗性が高いことがわかる。 試験例３（酵素に対する抵抗性試験） 実施例１、２で得られた重合性グリセロリン脂
質と、比較例としての卵黄レシチン（EYPC）お
よび前記試験例１で示した化合物〔１〕、〔３〕、
〔４〕の重合性グリセロリン脂質とについて、酵
素（ホスホリパーゼA2、ホスホリパーゼＤ）に
対する抵抗性を測定した。卵黄レシチンの分解率
を100とした時の値を表３に示す。
【表】
表３から明らかなように、実施例１、２の重合
性グリセロリン脂質の酵素に対する抵抗性は、卵
黄レシチンよりも高く、また天然に由来しない残
基を有するグリセロリン脂質〔１〕、〔３〕、〔４〕
よりも低いことがわかる。
性グリセロリン脂質の酵素に対する抵抗性は、卵
黄レシチンよりも高く、また天然に由来しない残
基を有するグリセロリン脂質〔１〕、〔３〕、〔４〕
よりも低いことがわかる。
第１図は実施例−１におけるNMRスペクトル
図である。
図である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 下記一般式〔Ｉ〕で表わされる化合物からな
る重合性グリセロリン脂質。 （式中、R1CO−およびR2CO−はそれぞれ天
然由来の脂肪酸残基を示し、その一方または両方
が共役型の二重結合を有する共役脂肪酸残基であ
り、R3は−CH2CH2N+（CH3）3，−CH2CH2N+
H3，【式】Ｈ， 【式】 【式】または 【式】を示す）。 ２ R1CO−がエレオステアリン酸残基またはパ
リナリン酸残基である特許請求の範囲第１項記載
の重合性グリセロリン脂質。 ３ R2CO−がエレオステアリン酸残基またはパ
リナリン酸残基である特許請求の範囲第１項また
は第２項記載の重合性グリセロリン脂質。 ４ R3が−CH2CH2N+（CH3）3である特許請求の
範囲第２項または第３項記載の重合性グリセロリ
ン脂質。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP25030684A JPS61129190A (ja) | 1984-11-27 | 1984-11-27 | 重合性グリセロリン脂質 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP25030684A JPS61129190A (ja) | 1984-11-27 | 1984-11-27 | 重合性グリセロリン脂質 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61129190A JPS61129190A (ja) | 1986-06-17 |
| JPH0455433B2 true JPH0455433B2 (ja) | 1992-09-03 |
Family
ID=17205940
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP25030684A Granted JPS61129190A (ja) | 1984-11-27 | 1984-11-27 | 重合性グリセロリン脂質 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61129190A (ja) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61155392A (ja) * | 1984-12-28 | 1986-07-15 | Terumo Corp | 重合性のリポソ−ム形成脂質およびその製造方法 |
| JPS61155336A (ja) * | 1984-12-28 | 1986-07-15 | Terumo Corp | 医用担体 |
| JPS638391A (ja) * | 1986-06-27 | 1988-01-14 | Terumo Corp | 重合性β−グリセロリン脂質およびその製造方法 |
| JPH07122055B2 (ja) * | 1989-11-17 | 1995-12-25 | 富士写真フイルム株式会社 | ポリペプチド薄膜 |
| USRE40546E1 (en) * | 1996-05-01 | 2008-10-21 | Scarista, Ltd. | 1,3-Propane diol esters and ethers and methods for their use in drug delivery |
| MY118354A (en) | 1995-05-01 | 2004-10-30 | Scarista Ltd | 1,3-propane diol derivatives as bioactive compounds |
| ATE272055T1 (de) * | 1995-05-01 | 2004-08-15 | Scarista Ltd | Nicotinsäureester und diese enthaltende pharmazeutischen zusammensetzungen |
| GB9705102D0 (en) * | 1997-03-12 | 1997-04-30 | Scotia Holdings Inc | Presentation of fatty acids |
| JP7475024B2 (ja) * | 2019-07-26 | 2024-04-26 | 国立大学法人 東京大学 | 脂質膜構造体の表面修飾材 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5931786A (ja) * | 1982-08-16 | 1984-02-20 | Hidetoshi Tsuchida | ホスフアチジルコリン型リン脂質化合物 |
-
1984
- 1984-11-27 JP JP25030684A patent/JPS61129190A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS61129190A (ja) | 1986-06-17 |
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