JPH0210380B2 - - Google Patents
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- JPH0210380B2 JPH0210380B2 JP8413680A JP8413680A JPH0210380B2 JP H0210380 B2 JPH0210380 B2 JP H0210380B2 JP 8413680 A JP8413680 A JP 8413680A JP 8413680 A JP8413680 A JP 8413680A JP H0210380 B2 JPH0210380 B2 JP H0210380B2
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- G—PHYSICS
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Description
この発明はグアニジン誘導体の分析法およびそ
の分析装置に関する。 近来、グアニジン誘導体は人体の循環器、消化
器、呼吸器、造血器、神経系に多彩な尿毒症症状
をひきおこす尿毒素として注目されている。従つ
て腎機能検査のため、生体液中のグアニジン誘導
体の分析の重要性が一層高まつている。従来この
分析法としては次のような方法が用いられてき
た。 即ち試料液を強酸性陽イオン交換樹脂を充填し
た内径６〜８mm、ながさ30cm程度のカラムを用い
る液体クロマトグラフイーに付して各グアニジン
誘導体に溶離する。次いでこの溶離液を発蛍光化
反応部の内径0.7〜１mmの反応コイル内でアルカ
リ溶液中９，10―フエナンスレンキノン（PQ）
と反応させた後、蛍光分析法によつて分析され
る。 しかし、この従来法は分析時間が１〜２時間と
いうような長時間を要し、ルーチン分析には適用
しにくい。また反応試薬のPQは水溶性でないの
でエタノールやジメチルホルムアミドに溶解して
使用されるが、溶離液と混合するとしばしば析出
物を生じ分析が中断される。 この発明は上記のごとき欠点を解消するために
なされたものであつて微量のグアニジン誘導体を
含有する試料を高速液体クロマトグラフイに付
し、その溶離液に水酸化ナトリウム水溶液次いで
ニンヒドリン水溶液を連続的に添加して反応さ
せ、その反応液に励起光を照射して発蛍光させ、
その蛍光強度を測定することによりグアニジン誘
導体を定量することを特徴とするグアニジン誘導
体の分析法；ならびに高速液体クロマトグラフ、
該クロマトグラフからの溶離液の発蛍光化反応部
および蛍光強度測定部とが順に連結してなり、高
速液体クロマトグラフのカラムは内径が５mm以下
で長さが５cm以下でありかつ粒径約5μｍの強酸
性陽イオン交換樹脂が充填され、発蛍光化反応部
の反応コイルが内径0.3mm以下であり、該反応部
の前に水酸化ナトリウム水溶液の注入手段および
ニンヒドリン水溶液の注入手段を具備するグアニ
ジン誘導体の分析装置を提供するものである。 この発明の特徴は、グアニジン誘導体の発蛍光
化試薬として、まず水酸化ナトリウム水溶液を添
加した後従来用いられていなかつたニンヒドリン
水溶液を添加して用いること、高速液体クロマト
グラフのカラムは内径および長さが極めて小さく
かつ充填される強酸性陽イオン交換樹脂の粒径が
小さいこと、および発蛍光化反応部の反応コイル
の内径が小さいことである。 またこの発明によれば、以下で詳しく説明する
がグアニジン誘導体を短時間で感度よく定量する
ことができる。また溶離液には水酸化ナトリウム
水溶液を加えてからニンヒドリン溶液を添加して
反応させるので通常のアミノ酸は発蛍光化しな
い。また発蛍光化試薬の水酸化ナトリウムおよび
ニンヒドリンは水溶性なので析生物が発生して分
析が中断されるということがない。なお従来法で
は、特に生体液中に存在し尿毒素として注目され
ているクレアチニン、クレアチンの中クレアチニ
ンしか定量できなかつたが、この発明によればク
レアチンも定量できる。さらに分離カラムの内径
および長さが小さいので経済的にも有利であり、
樹脂の出し入れが容易である。 従つて、この発明は特に生体液中のグアニジン
誘導体の臨床試験定量法として極めて優れた発明
といえる。 この発明における微量のグアニジン誘導体を含
有する試料とは、血清、尿、潅流液等の生体液等
が挙げられる。またこの発明においてグアニジン
誘導体と称しているものの中にはグアニジン
（Ｇ）、メチルグアニジン（MG）、グアニジノ酢
酸（GAA）、グアニジノプロピオン酸（GPA）
およびグアニジノ酪酸（GBA）、グアニジノコハ
ク酸（GSA）の外に、グアニジン関連物質のク
レアチン（CR）、クレアチニン（CRN）および
アルギニン（ARG）も含まれる。 この発明では試料が生体液試料であれば一般に
脱蛋白処理したものが用いられる。 この試料は、まず高速液体クロマトグラフイー
に付される。そのカラムとしては内径が５mm以下
で長さが50mm以下のもので、粒径が約5μｍの強
酸性陽イオン交換樹脂を充填したものが用いられ
る。また移動相としてはクエン酸ナトリウムの水
溶液が用いられ、一般に濃度を順次変化させて傾
斜溶離が行われ、カラムの温度は約50℃である。 次に上記高速液体クロマトグラフから溶出する
溶離液にまず水酸化ナトリウム水溶液を添加し、
次いでニンヒドリン水溶液を添加して反応させ
る。水酸化ナトリウム水溶液は0.75〜1.0規定、
ニンヒドリン水溶液は0.4％以上の濃度のものが
用いられる。次いでこの混合液は発蛍光反応部の
反応コイル（内径0.3mm以下）に送られ約50℃で
発蛍光化反応が行われる。次いで蛍光光度計に送
られ蛍光強度が測定される。 第１図にこの発明の分析装置の一実施例の流路
図を示した。即ち１はステツプワイズグラジエン
ト装置、２は高速液体クロマトグラフ用送液ポン
プ、３は試料導入口、４はカラム、５は水酸化ナ
トリウム水溶液、７はニンヒドリン水溶液、６お
よび８は反応試薬送液ポンプ、９は発蛍光化反応
部、１０は反応コイルおよび１１は蛍光光度計を
示す。 次にこの発明を実験例および実施例によつて詳
しく説明する。 実験例 １ （発蛍光化反応条件の検討） グアニジン誘導体の水溶液について発蛍光化反
応条件をを検討した結果を述べる。 (1) 水酸化ナトリウム水溶液濃度の影響 MGおよびGSAそれぞれ1nmolおよび
100pmol水溶液の試料について検討した。 第１図において、カラム４には何も充填しな
いまゝで0.15規定のクエン酸ナトリウム水溶液
の移動相を0.7ml／分の流速でで流しながら、
試料導入口３から上記試料を注入した。次いで
種々の濃度の水酸化ナトリウム水溶液を0.6
ml／分の流量で注入した後、0.6％濃度のニン
ヒドリン水溶液を0.4ml／分の流量で注入し、
50℃に保持した内径0.25mm長さ10ｍの反応コイ
ル中で反応させ、次いで蛍光強度を測定し、水
酸化ナトリウム水溶液濃度の影響を調べた。
MGおよびGSAの場合の測定結果を第２図と第
３図に示した。その結果、水酸化ナトリウム水
溶液の濃度は0.75〜1.0規定が適切なことが分
かつた。 (2) ニンヒドリン水溶液濃度の影響 MGの1nmolおよび100pmol水溶液の試料に
ついて検討した。 前記(1)の実験において、0.75規定の水酸化ナ
トリウム水溶液と各種濃度のニンヒドリン水溶
液を用いる以外同様の実験を行いニンヒドリン
水溶液濃度の影響を調べた。結果を第４図に示
したが、ニンヒドリン水溶液の濃度は0.4％以
上必要なことが分かる。 (3) 発蛍光化反応温度の影響 MGの1nmolおよび100pmol水溶液について
検討した。 前記実験(1)において水酸化ナトリウム水溶液
濃度を0.75規定とし、反応温度を変えること以
外同様の実験を行い反応温度の影響を調べた。
結果を第５図に示したが反応温度は50℃が適切
なことが分かる。 実験例 ２ （検量線の作製） GSAおよびMGの各種濃度の水溶液を作製し
た。 これらの各試料液について、下記の条件下で実
験例１と同様にして蛍光強度を測定した。 0.15規定クエン酸ナトリウム水溶液の流量：
0.7ml／分 水酸化ナトリウム水溶液濃度および流量：１規
定、0.6ml／分 ニンヒドリン水溶液濃度および流量：0.6％、
0.6ml／分 発蛍光化反応温度：50℃ 結果を第６図に示したが測定値の変動係数は次
のとおりであつた。 濃 度 変動係数(%) GSA 1nmol 1.19 〃 100pmol 2.12 MG 1nmol 2.42 〃 100pmol 2.54 上記の結果からグアニジン誘導体の10pmol程
度が検出可能でかつ1nmolまで良好な直線性が得
られまたよい再現性が得られていることが分か
る。 実験例 ３ （高速液体クロマトグラフのカラムの検討） GSA，GAA，GPA，GBA，ARGおよびMG
の濃度が1nmolである混合水溶液について各化合
物の溶離挙動を調べるために下記条件下で実験し
た。 (1) 分析機器 移動相送液ポンプ：島津LC―3A型 高速液体クロマトグラフカラム：内径４mm、長さ
５cm、50℃、粒径5μｍの強酸性陽イオン交
換樹脂充填 発蛍光化反応部のコイル：テフロン製内径0.25
mm、長さ10ｍ 蛍光光度計：島津RF―500LCA型（Em500nm，
Ex395nm） (2) 発蛍光化反応条件 水酸化ナトリウム水溶液濃度と流量：0.75規定、
0.6ml／分 ニンヒドリン水溶液濃度と流量：0.6％，0.4ml／
分 反応温度：50℃ (3) 移動相（流量0.7ml／分） 0.2規定のクエン酸ナトリウム水溶液 上記移動相のPHを3.5，4.8，6.0，11.4と変化さ
せて溶離し、それぞれの容量比（k′）を測定し結
果を第７図に示した。 上記の結果から、この発明によれば移動相の一
つのPH領域でたかだか２つのグアニジン誘導体が
溶離できればよいことは明らかである。従つて充
填するイオン交換樹脂の粒径を小さくしておけ
ば、カラムの内径および長さを小さくすることが
可能であり、その結果分析時間が短かくできるこ
とが分かつた。 実施例 １ Ｇ，MG，GAA，GPA，GBA，GSA，ARG
およびCRの濃度が各々1nmol，CRNの濃度が3μ
ｇ／の試料液を下記分析機器を用いて下記分析
条件で分析した。 (1) 分析機器 ステツプワイズグラジエント装置：島津SGR―
1A型 移動相送液ポンプ：島津LC―3A型 高速液体クロマトグラフカラム：内径4.6mm、長
さ3.8cm、50℃、粒径5μｍの強酸性陽イオン
交換樹脂充填 発蛍光化反応部のコイル：テフロン製内径0.25
mm、長さ10ｍ 蛍光光度計：島津RF―500LCA型（Em500nm，
Ex395nm） (2) 発蛍光化反応条件 水酸化ナトリウム水溶液濃度と流量：0.75規定、
0.6ml／分 ニンヒドリン水溶液濃度と流量：0.6％、0.4ml／
分 反応温度：50℃ (3) 溶離プログラム（移動相流量0.7ml／分）
の分析装置に関する。 近来、グアニジン誘導体は人体の循環器、消化
器、呼吸器、造血器、神経系に多彩な尿毒症症状
をひきおこす尿毒素として注目されている。従つ
て腎機能検査のため、生体液中のグアニジン誘導
体の分析の重要性が一層高まつている。従来この
分析法としては次のような方法が用いられてき
た。 即ち試料液を強酸性陽イオン交換樹脂を充填し
た内径６〜８mm、ながさ30cm程度のカラムを用い
る液体クロマトグラフイーに付して各グアニジン
誘導体に溶離する。次いでこの溶離液を発蛍光化
反応部の内径0.7〜１mmの反応コイル内でアルカ
リ溶液中９，10―フエナンスレンキノン（PQ）
と反応させた後、蛍光分析法によつて分析され
る。 しかし、この従来法は分析時間が１〜２時間と
いうような長時間を要し、ルーチン分析には適用
しにくい。また反応試薬のPQは水溶性でないの
でエタノールやジメチルホルムアミドに溶解して
使用されるが、溶離液と混合するとしばしば析出
物を生じ分析が中断される。 この発明は上記のごとき欠点を解消するために
なされたものであつて微量のグアニジン誘導体を
含有する試料を高速液体クロマトグラフイに付
し、その溶離液に水酸化ナトリウム水溶液次いで
ニンヒドリン水溶液を連続的に添加して反応さ
せ、その反応液に励起光を照射して発蛍光させ、
その蛍光強度を測定することによりグアニジン誘
導体を定量することを特徴とするグアニジン誘導
体の分析法；ならびに高速液体クロマトグラフ、
該クロマトグラフからの溶離液の発蛍光化反応部
および蛍光強度測定部とが順に連結してなり、高
速液体クロマトグラフのカラムは内径が５mm以下
で長さが５cm以下でありかつ粒径約5μｍの強酸
性陽イオン交換樹脂が充填され、発蛍光化反応部
の反応コイルが内径0.3mm以下であり、該反応部
の前に水酸化ナトリウム水溶液の注入手段および
ニンヒドリン水溶液の注入手段を具備するグアニ
ジン誘導体の分析装置を提供するものである。 この発明の特徴は、グアニジン誘導体の発蛍光
化試薬として、まず水酸化ナトリウム水溶液を添
加した後従来用いられていなかつたニンヒドリン
水溶液を添加して用いること、高速液体クロマト
グラフのカラムは内径および長さが極めて小さく
かつ充填される強酸性陽イオン交換樹脂の粒径が
小さいこと、および発蛍光化反応部の反応コイル
の内径が小さいことである。 またこの発明によれば、以下で詳しく説明する
がグアニジン誘導体を短時間で感度よく定量する
ことができる。また溶離液には水酸化ナトリウム
水溶液を加えてからニンヒドリン溶液を添加して
反応させるので通常のアミノ酸は発蛍光化しな
い。また発蛍光化試薬の水酸化ナトリウムおよび
ニンヒドリンは水溶性なので析生物が発生して分
析が中断されるということがない。なお従来法で
は、特に生体液中に存在し尿毒素として注目され
ているクレアチニン、クレアチンの中クレアチニ
ンしか定量できなかつたが、この発明によればク
レアチンも定量できる。さらに分離カラムの内径
および長さが小さいので経済的にも有利であり、
樹脂の出し入れが容易である。 従つて、この発明は特に生体液中のグアニジン
誘導体の臨床試験定量法として極めて優れた発明
といえる。 この発明における微量のグアニジン誘導体を含
有する試料とは、血清、尿、潅流液等の生体液等
が挙げられる。またこの発明においてグアニジン
誘導体と称しているものの中にはグアニジン
（Ｇ）、メチルグアニジン（MG）、グアニジノ酢
酸（GAA）、グアニジノプロピオン酸（GPA）
およびグアニジノ酪酸（GBA）、グアニジノコハ
ク酸（GSA）の外に、グアニジン関連物質のク
レアチン（CR）、クレアチニン（CRN）および
アルギニン（ARG）も含まれる。 この発明では試料が生体液試料であれば一般に
脱蛋白処理したものが用いられる。 この試料は、まず高速液体クロマトグラフイー
に付される。そのカラムとしては内径が５mm以下
で長さが50mm以下のもので、粒径が約5μｍの強
酸性陽イオン交換樹脂を充填したものが用いられ
る。また移動相としてはクエン酸ナトリウムの水
溶液が用いられ、一般に濃度を順次変化させて傾
斜溶離が行われ、カラムの温度は約50℃である。 次に上記高速液体クロマトグラフから溶出する
溶離液にまず水酸化ナトリウム水溶液を添加し、
次いでニンヒドリン水溶液を添加して反応させ
る。水酸化ナトリウム水溶液は0.75〜1.0規定、
ニンヒドリン水溶液は0.4％以上の濃度のものが
用いられる。次いでこの混合液は発蛍光反応部の
反応コイル（内径0.3mm以下）に送られ約50℃で
発蛍光化反応が行われる。次いで蛍光光度計に送
られ蛍光強度が測定される。 第１図にこの発明の分析装置の一実施例の流路
図を示した。即ち１はステツプワイズグラジエン
ト装置、２は高速液体クロマトグラフ用送液ポン
プ、３は試料導入口、４はカラム、５は水酸化ナ
トリウム水溶液、７はニンヒドリン水溶液、６お
よび８は反応試薬送液ポンプ、９は発蛍光化反応
部、１０は反応コイルおよび１１は蛍光光度計を
示す。 次にこの発明を実験例および実施例によつて詳
しく説明する。 実験例 １ （発蛍光化反応条件の検討） グアニジン誘導体の水溶液について発蛍光化反
応条件をを検討した結果を述べる。 (1) 水酸化ナトリウム水溶液濃度の影響 MGおよびGSAそれぞれ1nmolおよび
100pmol水溶液の試料について検討した。 第１図において、カラム４には何も充填しな
いまゝで0.15規定のクエン酸ナトリウム水溶液
の移動相を0.7ml／分の流速でで流しながら、
試料導入口３から上記試料を注入した。次いで
種々の濃度の水酸化ナトリウム水溶液を0.6
ml／分の流量で注入した後、0.6％濃度のニン
ヒドリン水溶液を0.4ml／分の流量で注入し、
50℃に保持した内径0.25mm長さ10ｍの反応コイ
ル中で反応させ、次いで蛍光強度を測定し、水
酸化ナトリウム水溶液濃度の影響を調べた。
MGおよびGSAの場合の測定結果を第２図と第
３図に示した。その結果、水酸化ナトリウム水
溶液の濃度は0.75〜1.0規定が適切なことが分
かつた。 (2) ニンヒドリン水溶液濃度の影響 MGの1nmolおよび100pmol水溶液の試料に
ついて検討した。 前記(1)の実験において、0.75規定の水酸化ナ
トリウム水溶液と各種濃度のニンヒドリン水溶
液を用いる以外同様の実験を行いニンヒドリン
水溶液濃度の影響を調べた。結果を第４図に示
したが、ニンヒドリン水溶液の濃度は0.4％以
上必要なことが分かる。 (3) 発蛍光化反応温度の影響 MGの1nmolおよび100pmol水溶液について
検討した。 前記実験(1)において水酸化ナトリウム水溶液
濃度を0.75規定とし、反応温度を変えること以
外同様の実験を行い反応温度の影響を調べた。
結果を第５図に示したが反応温度は50℃が適切
なことが分かる。 実験例 ２ （検量線の作製） GSAおよびMGの各種濃度の水溶液を作製し
た。 これらの各試料液について、下記の条件下で実
験例１と同様にして蛍光強度を測定した。 0.15規定クエン酸ナトリウム水溶液の流量：
0.7ml／分 水酸化ナトリウム水溶液濃度および流量：１規
定、0.6ml／分 ニンヒドリン水溶液濃度および流量：0.6％、
0.6ml／分 発蛍光化反応温度：50℃ 結果を第６図に示したが測定値の変動係数は次
のとおりであつた。 濃 度 変動係数(%) GSA 1nmol 1.19 〃 100pmol 2.12 MG 1nmol 2.42 〃 100pmol 2.54 上記の結果からグアニジン誘導体の10pmol程
度が検出可能でかつ1nmolまで良好な直線性が得
られまたよい再現性が得られていることが分か
る。 実験例 ３ （高速液体クロマトグラフのカラムの検討） GSA，GAA，GPA，GBA，ARGおよびMG
の濃度が1nmolである混合水溶液について各化合
物の溶離挙動を調べるために下記条件下で実験し
た。 (1) 分析機器 移動相送液ポンプ：島津LC―3A型 高速液体クロマトグラフカラム：内径４mm、長さ
５cm、50℃、粒径5μｍの強酸性陽イオン交
換樹脂充填 発蛍光化反応部のコイル：テフロン製内径0.25
mm、長さ10ｍ 蛍光光度計：島津RF―500LCA型（Em500nm，
Ex395nm） (2) 発蛍光化反応条件 水酸化ナトリウム水溶液濃度と流量：0.75規定、
0.6ml／分 ニンヒドリン水溶液濃度と流量：0.6％，0.4ml／
分 反応温度：50℃ (3) 移動相（流量0.7ml／分） 0.2規定のクエン酸ナトリウム水溶液 上記移動相のPHを3.5，4.8，6.0，11.4と変化さ
せて溶離し、それぞれの容量比（k′）を測定し結
果を第７図に示した。 上記の結果から、この発明によれば移動相の一
つのPH領域でたかだか２つのグアニジン誘導体が
溶離できればよいことは明らかである。従つて充
填するイオン交換樹脂の粒径を小さくしておけ
ば、カラムの内径および長さを小さくすることが
可能であり、その結果分析時間が短かくできるこ
とが分かつた。 実施例 １ Ｇ，MG，GAA，GPA，GBA，GSA，ARG
およびCRの濃度が各々1nmol，CRNの濃度が3μ
ｇ／の試料液を下記分析機器を用いて下記分析
条件で分析した。 (1) 分析機器 ステツプワイズグラジエント装置：島津SGR―
1A型 移動相送液ポンプ：島津LC―3A型 高速液体クロマトグラフカラム：内径4.6mm、長
さ3.8cm、50℃、粒径5μｍの強酸性陽イオン
交換樹脂充填 発蛍光化反応部のコイル：テフロン製内径0.25
mm、長さ10ｍ 蛍光光度計：島津RF―500LCA型（Em500nm，
Ex395nm） (2) 発蛍光化反応条件 水酸化ナトリウム水溶液濃度と流量：0.75規定、
0.6ml／分 ニンヒドリン水溶液濃度と流量：0.6％、0.4ml／
分 反応温度：50℃ (3) 溶離プログラム（移動相流量0.7ml／分）
【表】
【表】
得られた分析チヤートを第８図に示したが、良
好な感度で32分という短時間で測定できた。
好な感度で32分という短時間で測定できた。
第１図はこの発明の分析装置の一実施例の流路
図、第２図および第３図はそれぞれ、MGおよび
GSA水溶液試料についてのこの発明の分析法に
おける水酸化ナトリウム水溶液の影響を示すグラ
フ、第４図および第５図はそれぞれ、MG水溶液
試料についてのこの発明の分析法におけるニンヒ
ドリン水溶液濃度および発蛍光化反応温度の影響
を示すグラフ、第６図はMGおよびMSG水溶液
についての検量線、第７図は、微量グアニジン誘
導体混合水溶液の移動相PHとk′（容量比）との関
係を示すグラフ、第８図は、微量のグアニジン誘
導体およびグアニジン関連物質混合液のこの発明
の分析法によるクロマトグラムである。
図、第２図および第３図はそれぞれ、MGおよび
GSA水溶液試料についてのこの発明の分析法に
おける水酸化ナトリウム水溶液の影響を示すグラ
フ、第４図および第５図はそれぞれ、MG水溶液
試料についてのこの発明の分析法におけるニンヒ
ドリン水溶液濃度および発蛍光化反応温度の影響
を示すグラフ、第６図はMGおよびMSG水溶液
についての検量線、第７図は、微量グアニジン誘
導体混合水溶液の移動相PHとk′（容量比）との関
係を示すグラフ、第８図は、微量のグアニジン誘
導体およびグアニジン関連物質混合液のこの発明
の分析法によるクロマトグラムである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 微量のグアニジン誘導体類を含有する試料
を、強酸性陽イオン交換樹脂を用いPH値を３から
12へと変化させた移動相で傾斜溶離する高速液体
クロマトグラフイに付して各グアニジン誘導体に
分離し、その溶離液に水酸化ナトリウム水溶液次
いでニンヒドリン水溶液を連続的に添加して反応
させ、その反応液に励起光を照射して発蛍光さ
せ、その蛍光強度を測定することにより各グアニ
ジン誘導体を定量することを特徴とするグアニジ
ン誘導体の分析法。 ２ PH値を３から12へと変化させた移動相を供給
する移動相傾斜供給部、高速液体クロマトグラ
フ、該クロマトグラフからの溶離液の発蛍光化反
応部および蛍光強度測定部とが順に連結してな
り、高速液体クロマトグラフのカラムは内径が５
mm以下で長さが５cm以下でありかつ粒径約5μｍ
の強酸性陽イオン交換樹脂が充填され、発蛍光化
反応部の反応コイルが内径0.3mm以下であり、該
反応部の前に水酸化ナトリウム水溶液の注入手段
およびニンヒドリン水溶液の注入手段を具備する
グアニジン誘導体の分析装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8413680A JPS578447A (en) | 1980-06-20 | 1980-06-20 | Method and apparatus for analysis of guanidine derivative |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8413680A JPS578447A (en) | 1980-06-20 | 1980-06-20 | Method and apparatus for analysis of guanidine derivative |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS578447A JPS578447A (en) | 1982-01-16 |
| JPH0210380B2 true JPH0210380B2 (ja) | 1990-03-07 |
Family
ID=13822073
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8413680A Granted JPS578447A (en) | 1980-06-20 | 1980-06-20 | Method and apparatus for analysis of guanidine derivative |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS578447A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN118362665B (zh) * | 2024-06-17 | 2024-08-20 | 广州白云山星群(药业)股份有限公司 | 一种小儿清咽颗粒多成分含量测定方法 |
-
1980
- 1980-06-20 JP JP8413680A patent/JPS578447A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS578447A (en) | 1982-01-16 |
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