JPH02145196A - マグネシウムの定量方法 - Google Patents

マグネシウムの定量方法

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JPH02145196A
JPH02145196A JP63299551A JP29955188A JPH02145196A JP H02145196 A JPH02145196 A JP H02145196A JP 63299551 A JP63299551 A JP 63299551A JP 29955188 A JP29955188 A JP 29955188A JP H02145196 A JPH02145196 A JP H02145196A
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美子 砂原
Shigeru Takada
高田　卯
Isamu Kokawara
高河原　勇
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、微量のマグネシウムの定量方法に関するもの
である。
更に詳細には、本発明は、ヒト体液中のマグネシウムの
定量方法に関するものである。
一般に、マグネシウムは、動植物の細胞内に広く存在し
、成長と生命維持に不可欠なイオンである。
そして、生体内のマグネシウムはカルシウムと拮抗的に
変動し、中枢神経系や心臓の機能不全時にあるいは腎不
全、急性膵炎時などにその変動が観察されることからマ
グネシウムの定量は重要な検査項目の一つになりつつあ
る。
本発明のマグネシウムの定量方法によれば、体液中のマ
グネシウムが短時間に正確に定量できるので、臨床検査
に大いに貢献するものである。
（従来技術及び問題点） 従来、マグネシウムの測定方法としては、キシリジルブ
ルーを用いてキレートを生成させる比色法や、原子吸光
法などが知られているが、これらの方法のうち、前者は
特異性の面で問題を有し、後者については、特殊な装置
を必要とするという欠点を持っていた。
（問題点を解決するための手段） 本発明者らは、体液中のマグネシウムをすみやかに、か
つ、正確に定量するために、マグネシウムと各種酵素活
性との関係を詳細に検討した結果、イソクエン酸脱水素
酵素がその酵素活性を発現するために、マグネシウムイ
オンあるいはマンガンイオンを要求し、マグネシウムイ
オン濃度の増加に応じてイソクエン酸脱水素酵素の活性
が高まることを知り、本発明を完成するに至った。
本発明は、マグネシウムの定量を行うに際し、イソクエ
ン酸脱水素酵素の反応によってマグネシウム量を測定す
ることを特徴とするマグネシウムの定量方法である。
即ち、本発明はイソクエン酸脱水素酵素がマグネシウム
イオンの増加に応じて、活性が定量的に高まることを利
用して、マグネシウムの濃度を測定するものである。
具体的には、ＮＡＤ（Ｐ）”、イソクエン酸、イソクエ
ン酸脱水素酵素を適当な緩衝液に溶解したものに、検体
を加え、ＮＡＤ　（Ｐ）Ｈの生成による３４００重にお
ける吸光度の上昇度をレートアッセイするか、あるいは
反応を一定時間後に反応停止剤で停止した後に測定する
ものである。
反応停止剤としてはマグネシウムイオンのキレート剤お
よび／またはアデノシントリリン酸（ＡＴＰ）が用いら
れる。
また、イソクエン酸脱水素酵素はマンガンイオンによっ
ても活性化されるが、これはマグネシウムイオンをトラ
ップせず、マンガンイオンを選択的にトラップするキレ
ート剤、例えば、ＧＥＤＴＡを反応溶媒に共存させるこ
とによりマンガンイオンの影響を回避することができる
。
本発明においては、マグネシウムイオンの量に応じてイ
ソクエン酸脱水素酵素の活性が高まる性質を利用し、特
異的に短時間に感度よくマグネシウムを定量するもので
ある。
本発明の方法によれば、微量の検体を用いてマグネシウ
ムを正確に定量することができる。
次に本発明の実施例を示す。
実施例Ｉ ＭｇＣＪ２□６Ｈ２０４２，３ｍｇを精製水１０ｍ１２
に溶解しＭｇｌとして２５０ｍｇ／ｄ１２の標準液を調
整した。
さらに、この標準液を稀釈してＯ１５，１０，１５，２
０、２５，３０，３５，４０，４５，５０ｍｇ／ｄａの
溶液を調整した。
これらの溶液５０μ２を各々、下記反応溶液’Ｊａｎに
加え、２５℃で３４０ｒｕ＋＋の吸光度変化をレートア
ッセイにより測定した。
反応溶液組成 ８３ｍＭ　　　　Ｔｒｉｓ−ＨＣＱｐＨ８，５５０ｍＭ
　　　　ＧＥＤＴＡ １．６７ｍＭ　　　０Ｌ−ｉｓｏｃｉｔｒａｔｅｌ　、
　ＯｍＭ　　　ＮＡＤＰ” ０．２５ｕ／ｍＱｉｃＤＨ（ＮＡＤＰ）結果は第１図に
示されるようにマグネシウムが測定できた。
実施例２ ＭｇＣ１２，６Ｈ２０４２，３Ｂを精製水に溶解し　Ｍ
　ｇ　２　＋とじて、２５０ｍｇ／ｄ１２の標準液を調
整した。
さらに、この標準液を稀釈して、０．１．３．５．７．
１０ｍｇ／ｄＪ１の溶液を調整した。
これらの溶液５０μＱを各々、下記反応溶液３ｍＭに加
え、２５℃で３４０ｎｍの吸光度変化をレートアッセイ
により測定した。
反応溶液組成 ８３ｍＭ　　　　τｒｉｓ−ＨＣｎ　　ｐＨ８，５１５
■Ｍ　　　　ＡＴＰ １．６７ｍＭ　　　ＤＬ−ｉｓｏｃｉｔｒａｔｓｌ、０
鳳Ｍ　　　　　　ＮＡＤＰ” ０．８ｕ／ｍｆｆ１　１ＣＤＨ（ＮＡＤＰ）結果は第２
図に示されるとおり、マグネシウム濃度の測定値が得ら
れた。
【図面の簡単な説明】
第１図は、実施例１におけるマグネシウム定量の検量線
を示す図で、第２図は、実施例２におけるマグネシウム
定量の検量線を示す図である。 代理人　弁理士　戸　１）親　男 第１図 マグネシウムイ３度 ＜ｍｇ／ｄｉ） 第２図 旬 ユ２ マグネシウム、ａ度 （ｍｇ／ｄＢ

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. （１）マグネシウムの定量を行うに際し、イソクエン酸
    脱水素酵素の反応によってマグネシウム量を測定するこ
    とを特徴とするマグネシウムの定量方法。
  2. （２）第１項のイソクエン酸脱水素酵素の反応時に阻害
    剤として、マグネシウムイオンのキレート剤および／あ
    るいはアデノシントリリン酸（ＡＴＰ）を添加すること
    を特徴とするマグネシウムの定量方法。
  3. （３）マンガンイオンのキレート剤としてグリコールエ
    ーテルジアミン四酢酸（ＧＥＤＴＡ）を添加してマグネ
    シウム量を測定することを特徴とする第１項のマグネシ
    ウムの定量方法。
JP63299551A 1988-11-29 1988-11-29 マグネシウムの定量方法 Expired - Lifetime JP2748134B2 (ja)

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