JPH0217525B2

JPH0217525B2 -

Info

Publication number: JPH0217525B2
Application number: JP57001515A
Authority: JP
Inventors: Shigeru Kametaka; Toshiko Kurokawa; Akyoshi Yoshida; Shinichi Hayashi
Original assignee: Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1982-01-07
Filing date: 1982-01-07
Publication date: 1990-04-20
Also published as: JPS58121218A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はう蝕予防剤に関し、更に詳しくはグル
コシルトランスフエラーゼ阻害作用を有する生薬
抽出エキスを必須成分とするう蝕予防剤に関す
る。う蝕の原因については、過去多数の研究者によ
つて多くの説が唱えられて来たが、今日では、ミ
ラー（Miller）らの化学細菌説から発展した細菌
感染疾患説が有力である。この説によれば、う蝕
は以下に述ぺる機構によつて発生する。即ち、口
腔内の微生物、特にストレプトコツカス・ミユー
タンス（Streptococcus mutans、以下S.mutans
という）の菌体外酵素であるグルコシルトランス
フエラーゼ（以下GTaseという）によつて食物
中の蔗糖が粘着性を有する多糖類（グルカン）に
変換され、このグルカンが歯面に付着して菌体の
凝集塊、即ち歯垢を形成する。この歯垢中で微生
物が増殖し、解糖系により乳酸などの有機酸が産
生する。この有機酸により歯面のPHが5.4以下に
なるとエテメル質に脱灰がおこり、う蝕が発生、
進行する。以上のう蝕発生機構から明らかな様に、う蝕の
発生には１）食物成分、特に蔗糖、２）有機酸に
侵されやすい歯質、および３）口腔内微生物の三
大要因が必要である。従つて、う蝕を予防するに
は蔗糖を摂取しないか、歯質を強化するか、口腔
内微生物を死滅させればよい。この様な目的で、
従来から種々のう蝕予防処置がとられて来たが、
いづれも顕著な効果をあげるまでには至つていな
い。即ち、食物から蔗糖を完全に除去することは
現実的には不可能であり、またフツ素入り歯みが
きを使用したり水道水にフツ素を混入したりして
歯質を強化する方法も、その効果がそれほど大き
くない上に斑状歯になりやすいという副作用を伴
い、決して満足し得るものではない。一方、生成
した歯垢を分解する酵素入り歯みがきや口腔用殺
菌剤も市販されているが、その効果は期待された
ものとは、ほど遠いのが現状である。本発明者らは、GTaseの不溶性のグルカン生
合成作用を阻害することによつて菌体の歯面への
付着を阻止し、歯垢の生成自体を防止し、もつて
う蝕の発生を防止するのが最も有効な方法の１つ
であることに着目し、この様な阻害物質を求めて
研究を重ねた結果、意外にも現在他の用途に使用
されている数多くの生薬抽出エキスにGTase阻
害作用があることを見い出し、本発明を完成する
に至つた。即ち、本発明の目的は、S.Mutansの菌体外酵
素であるGTaseを阻害する生薬抽出エキスを必
須成分とするう蝕予防剤を提供することにある。尚、本明細書に於て生薬抽出エキスとは、特に
明記しない限り、後述の方法によつて得られる生
薬抽出液、その希釈液、その濃縮エキスあるいは
その乾燥粉末を意味するものとする。上記の目的に使用し得る代表的な生薬は、大棗
ウイキヨウ、芍薬、ゲンチアナ、センソ、白ホ、
龍胆、黄連、センブリおよび黄苓などである。こ
れらの生薬を、常法により適当な抽出溶媒で抽出
すれば、GTase阻害作用を有する生薬抽出エキ
スが得られる。抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノー
ルまたはアセトンの如き水混和性有機溶媒、ある
いは水とこれらの有機溶媒との混合物などを使用
することができ、さらに、エーテル、ヘキサンな
どの炭化水素系有機溶媒も使用することができ
る。この様にして得られる生薬抽出エキスを単独
で、あるいは２種またはそれ以上を混合してその
まま使用するか、あるいは後述する様に、適当な
製剤化した後口腔内に適用すれば、S.Mutansの
菌体外酵素であるGTaseが不活性化され、歯垢
の生成が防止される。本発明に係る１種またはその以上の生薬から得
られる生薬抽出エキスは、それが水抽出エキスの
場合、そのままあるいは適当に希釈して使用する
こともできるが、要すれば濃縮あるいは凍結乾燥
して粉末あるいはペースト状とした後、適当な口
腔用組成物の形に製剤化して使用するのが好まし
い。この様な口腔用組成物は液剤、固形剤、半固
形剤のいづれであつてもよく、好ましい組成物と
しては歯まがき剤、含嗽剤、トローチ剤、うがい
薬、塗布液剤、チユーインガムなどが挙げられ
る。これらの口腔用組成物を製造するのに使用され
る賦形剤または補助剤は、通常この種の目的に使
用されるものから剤型に応じて適宜選択すればよ
く、特に制限されるものではないが、例えば乳
糖、デンプン、コーンスターチ、ステアリン酸マ
グネシウム、第２燐酸カルシウム・２水和物、ソ
ルビツト、カルボキシメチルセルロース、サツカ
リン、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリン、ソ
ジウムカルボキシメチルセルロース、無水ケイ
酸、ゼラチン、二酸化チタン、メントール、脂肪
酸、クエン酸、ポリエチレングリコール、ソジウ
ムラウロイルサルコシネート、炭酸カルシウム、
アルコール、カラゲナン、ソジウムアシルタウレ
ート、ペプトン、アラビアゴム、ラウリルジエタ
ノールアミドなどが好適に使用される。上記の組成物に、クロルヘキシジンおよび塩化
ベンザルコニウムなどの殺菌剤を配合し、そのう
蝕予防効果を一層高めることもできるし、さらに
保存剤、香料および着色剤などを適宜添加するこ
ともできる。この様にして製造されるう蝕予防用口腔組成物
中に占める生薬抽出エキスの量は剤型によつて異
なるが、通常濃縮エキス重量で約0.001％（重
量／重量）以上であることが望ましい。各種生薬エキスのGTase阻害作用の測定１ GTase酵素の調製う蝕原性連鎖球菌ストレプトコツカス・ミユー
タンスOMZ176（血清型、ｄ型）を斜面培地で２
回前培養した後ブレインハートインヒユージヨン
ブロスで24時間、37℃で培養し、5000rpmで10分
間遠心分離して培養上清を得た。氷冷下、この上
清に（NH₄）₂SO₄を50％飽和となるまで添加して
塩析し、5000rpmで10分間遠心分離して沈澱物を
集めた。この沈澱物を１／1000M酢酸緩衝液に溶
解し、同一の緩衝液に対して４℃で18時間透析
し、GTase酵素標品液を得た。２生薬エキスの調製生薬約１ｇ〜10ｇに、その約10倍量の水、メタ
ノール、石油エーテルまたは水−メタノール混液
などの抽出液を加えて１時間振盪抽出するか、あ
るいは１時間マントルヒーター中で加熱還流下に
抽出した後、2500rpmで15分間遠心分離し、上澄
液を紙を用いて過し、減圧下に濃縮乾固す
る。得られるエキスの収率は、生薬の種類や抽出
溶媒によつて異なるが、１例を挙げれば表１の通
りである。

【表】３ GTase阻害活性の測定 0.04％NaN₂水溶液中の20％蔗糖溶液500μl、
200mM酢酸緩衝液（PH7.5）200μl、生薬抽出エ
キス（原液、×10、×100、または×1000倍液）
200μlおよびGTase酵素標品液100μlを混合し、37
℃で18時間培養する。10％トリクロル酢酸100μl
を加えて反応を終了させ、13000rpmで５分間遠
心分離する。上清をデカントして捨て、沈渣を水
１mlで３回、次いでアセトン１mlで３回洗浄した
後乾燥し、1M−NaOH1mlを加えて一夜放置し、
完全に溶解させる。この溶液100μlを1MNaOHで
20〜30倍に希釈し、GTaseの作用で生成した不
溶性グルカンをフエノール硫酸法※ により定量す
る。生薬エキスの代りに蒸留水を用いて同様の操
作を行なつてコントロールとし、以下の式から
GTase阻害率を計算する。 GTase阻害率（％）＝（１−サンプルのOD490nm／コントールのOD490nm
）×100 フエノール硫酸法：グルカン含有NaOH溶液
200μl、５％フエノール水溶液200μlおよび濃硫酸
１mlの混合物をよく撹拌し、490nmにおける吸光
度（OD490nm）を測定する。各種の生薬抽出エキスを用いて行なつた実験の
結果を以下の表２に示す。

【表】

【表】＊酵素反応液中での濃縮エキスの濃度
表２から大棗、ウイキヨウ、芍薬およびゲンチ
アナは強い阻害活性を有することがわかる。これ
らは0.0001％〜0.001％の低濃度でも有意な活性
を保持していることがわかつた。この様に、広い
濃度範囲において活性を示す生薬抽出エキスは、
う蝕防止用口腔組成物を製造するのに特に有用で
ある。以下に生薬エキスの抽出法および該エキスを必
須成分とするう蝕予防剤の製造法についての実施
例を挙げる。実施例１大棗を細かく破砕し、この10ｇを200mlのテス
型フラスコに入れ、水100mlを加え、還流冷却器
を付して直火で１時間還流した後、減圧下で濃縮
して大棗水抽出濃縮エキス3.4ｇを得た。冷水で
振盪抽出した場合もほぼ同量の濃縮エキスが得ら
れた。センソは粉砕した後、芍薬、ウイキヨウ、ゲン
チアナ、白ボ、龍胆、黄連、センブリおよび黄苓
は、生薬粉末をそのまま使用し、上記と同様にし
て生薬水抽出エキスを得た。実施例２水の代りにメタノール、水とエタノールの混合
溶媒および石油エーテルを用いるほかは実施例１
と同様の操作を行なつた。得られた濃縮エキスの
量はメタノールの場合2.8ｇ、水／エタノールの
場合3.0ｇ、石油エーテルの場合0.4ｇであつた。実施例３歯磨剤第２リン酸カルシウム 42 グリセリン 18 カラギーナン 0.9 ラウリル硫酸ナトリウム 1.2 サツカリン 1.0 珍大棗エキス※ 0.005 パラオキシ安息香酸ブチル 0.005 香料 1.1 水残量全量 100（重量％）生薬エキスは水又はMeOH又は石油エーテル
抽出濃縮エキス。以下の実施例に於ても同じ。練り歯磨剤の製造の常法に従つて製造する。即
ち、水、グリセリン、カラギーナン、サツカリ
ン、大棗エキス、パラオキシ安息香酸ブチル、香
料の処方量を計量し、混合して粘結剤を膨潤させ
たのち、第２リン酸カルシウム、ラウリル硫酸ナ
トリウルを加え更に混合する。よく脱泡混合した
のちチユーブ充填する。実施例４含嗽剤常法に従つて、下記処方の含嗽剤を製造する。エタノール（90％） 20 サツカリン 0.3 ソジウムアシルタウレート 0.5 ゼラチン 0.5 ウイキヨウエキス 0.005 香料 1.0 クロルヘキシジン 0.005 水残量全量 100（重量％）実施例５トローチ剤アラビアゴム８白糖 70 芍薬エキス 0.005 大棗エキス 0.005 香料 1.0 乳糖 17.0 ステアリン酸マグネシウム適量全量 100（重量％）アラビアゴム、白糖、乳糖、芍薬エキス、大棗
エキス、香料に水を加え、練合後、適当な造粒機
で造粒後、乾燥する。12メツシユフルイを通して
粒を整えたのち、ステアリン酸マグネシウムを加
えて、適当な形状に打錠する。実施例６チユーインガム常法に従つて下記処方のチユーインガムを製造
する。ガムベース 20 炭酸カルシウム２サツカリン 0.1 大棗エキス 0.005 乳糖 74.9 香料１全量 100（重量％）実施例７歯磨粉常法に従い下記処方の歯磨粉を製造する。第２リン酸カルシウム・２水和物 50 炭酸カルシウム 25 グリセリン 10 ラウリル硫酸ナトリウム 1.3 クロルヘキシジンジグルコネート 0.5 ゲンチアナエキス 0.01 サツカリン 0.1 香料１水残量全量 100（重量％）実施例８トローチ剤常法に従い、下記処方のトローチ剤を製造す
る。アラビアゴム６ブドウ糖 72 ウイキヨウエキス 0.05 大棗エキス 0.005 リン酸二カリウム 0.2 リン酸一カリウム 0.1 香料 1.0 乳糖 17.0 ステアリン酸マグネシウム適量全量 100（重量％）実施例９２種の生薬エキスを配合した歯磨剤常
法に従い、下記処方の練り歯磨剤を製造する。ピロリン酸カルシウム 42 ラウリル硫酸ナトリウム 1.2 ソジウムラウロイルザルコシネート 0.2 グリセリン 20 カラギーナン 1.1 シヨ糖脂肪酸エステル 2.0 芍薬エキス 0.06 大棗エキス 0.06 クロルヘキシジンジグルコネート 0.5 サツカリン 0.1 香料 1.2 水残量全量 100（重量％）

Claims

【特許請求の範囲】１グルコシルトランスフエラーゼ阻害作用を有
する生薬抽出エキスを必須成分とするう蝕予防剤
であつて、該生薬抽出エキスが大棗の水エキス、
メタノールエキス、石油エーテルエキス、ウイキ
ヨウの水エキス、メタノールエキス、石油エーテ
ルエキス、ゲンチアナのメタノールエキス、石油
エーテルエキス、およびセンソ、龍胆、当薬の
各々水エキスからなる群から選ばれる１種または
それ以上の生薬抽出エキスであることを特徴とす
るう蝕予防剤。２生薬抽出エキスの含量が濃縮エキスで0.001
重量％以上である特許請求の範囲第１項に記載の
う蝕予防剤。