JPH0222289A - オリゴグルコシド誘導体の製造法 - Google Patents
オリゴグルコシド誘導体の製造法Info
- Publication number
- JPH0222289A JPH0222289A JP8415589A JP8415589A JPH0222289A JP H0222289 A JPH0222289 A JP H0222289A JP 8415589 A JP8415589 A JP 8415589A JP 8415589 A JP8415589 A JP 8415589A JP H0222289 A JPH0222289 A JP H0222289A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- oligoglucoside
- general formula
- compound
- alkyl group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、後記の一般式Ｉの化合物の製造法に関する。
従来の技術
血清中のコーアミラーゼの測定は、すいぞうの機能の重
要な臨床上のパラメータである。α−アミラーゼを測定
するためＩこ市場で得られる試薬は、以前ｌこは主とし
て基質としての澱粉又は澱粉誘導体の使用であった。し
かしながらこの基質は、殊に均一性に関して不十分であ
ることが判明しｔ；。それ故この欠点を除去するために
、澱粉及び澱粉誘導体をオリゴサツカリド及びその光学
的に測定される誘導体に代え、その際殊にマルトテトラ
オース、−ペンタオース、−ヘキサオース及び−へブタ
オース及びこれらの誘導体によって重要な改良が得られ
た（ドイツ公開特許第２７４１１９２号明細書、ドイツ
公開特許第２７５５８０３号明細書、米国特許第３８７
９２．６３号明細書、米国特許第４００００４２号明細
書）。
要な臨床上のパラメータである。α−アミラーゼを測定
するためＩこ市場で得られる試薬は、以前ｌこは主とし
て基質としての澱粉又は澱粉誘導体の使用であった。し
かしながらこの基質は、殊に均一性に関して不十分であ
ることが判明しｔ；。それ故この欠点を除去するために
、澱粉及び澱粉誘導体をオリゴサツカリド及びその光学
的に測定される誘導体に代え、その際殊にマルトテトラ
オース、−ペンタオース、−ヘキサオース及び−へブタ
オース及びこれらの誘導体によって重要な改良が得られ
た（ドイツ公開特許第２７４１１９２号明細書、ドイツ
公開特許第２７５５８０３号明細書、米国特許第３８７
９２．６３号明細書、米国特許第４００００４２号明細
書）。
前記オリゴグルコシドを使用してのα−アミラーゼ測定
の特に重要な実施形式は、α−グルコシダーゼの存在で
得られた。それというのもオリゴグルコシドのグルコー
スへの完全な分解が得られ、更にグルコースはこのため
の公知方法によって容易に測定することができたからで
ある（ドイツ公開特許第２７４１１９２号明細書参照）
。
の特に重要な実施形式は、α−グルコシダーゼの存在で
得られた。それというのもオリゴグルコシドのグルコー
スへの完全な分解が得られ、更にグルコースはこのため
の公知方法によって容易に測定することができたからで
ある（ドイツ公開特許第２７４１１９２号明細書参照）
。
しかしながら、助酵素のα−グルコシダーゼは、でき上
がった試薬混合物の保管貯蔵時間を下げることが判明し
た。それというのもこれはａ−アミラーゼの影響を有し
ないで、オリゴグルコシドの一定分解を惹起するからで
ある。
がった試薬混合物の保管貯蔵時間を下げることが判明し
た。それというのもこれはａ−アミラーゼの影響を有し
ないで、オリゴグルコシドの一定分解を惹起するからで
ある。
発明が解決しようとする問題点
それ故、本発明の課題はこれらの欠点を除去し、α−グ
ルコシダーゼの存在でも十分に保存することができ、α
−アミラーゼの検出の正確性を改良するα−アミラーゼ
の基質を得ることである。
ルコシダーゼの存在でも十分に保存することができ、α
−アミラーゼの検出の正確性を改良するα−アミラーゼ
の基質を得ることである。
問題点を解決するための手段
この課題は、本発明によれば、一般式Ｉ：［式中Ｒ及び
Ｒ１は、相互に独立にそれぞれ炭素原子１〜６個を有す
る直鎖状又は分校状のアルキル基又はアルコイル基又は
フェニル基を表わし、その際Ｒ及びＲ１は一緒になって
メチレン橋を形成してもよく、その水素原子は相互に独
立にそれぞれ炭素原子１〜５個を有するアルキル基又は
フェニル基によって置換されていてもよく、Ｒ２はグル
コース単位２〜７個を有するオリゴグルコシド基を表わ
し、Ｘは水素原子又は光学的に測定される基を表わす］
の化合物の製法によって解決される。
Ｒ１は、相互に独立にそれぞれ炭素原子１〜６個を有す
る直鎖状又は分校状のアルキル基又はアルコイル基又は
フェニル基を表わし、その際Ｒ及びＲ１は一緒になって
メチレン橋を形成してもよく、その水素原子は相互に独
立にそれぞれ炭素原子１〜５個を有するアルキル基又は
フェニル基によって置換されていてもよく、Ｒ２はグル
コース単位２〜７個を有するオリゴグルコシド基を表わ
し、Ｘは水素原子又は光学的に測定される基を表わす］
の化合物の製法によって解決される。
本発明による化合物ですぐ使える試薬は、αグルコシダ
ーゼの存在でも変化をこうむらずそれ放炎時間後にも正
確なａ−アミラーゼの値が得られる。
ーゼの存在でも変化をこうむらずそれ放炎時間後にも正
確なａ−アミラーゼの値が得られる。
アルキル基としては、メチル−、エチルーグロビルー
イソプロピル−ブチル−イソブチル−ｔ−ブチル−ｎ−
ペンチル基、これらの異性体、ｎ−ヘキシル基、この異
性体ｆｆｉびにシクロヘキシル基が挙げられる。同じよ
うにして、前記アルキル基に相応するアルコイル基は、
末端グルコシド基の４位及び／又は６位の酸素原子の置
換分として該当する。本発明の範囲内ではＲとＲ１とが
一緒になって場合により置換されているメチレン橋を形
成する化合物が好ましく、特にアルキル基又はフェニル
基、殊にエチリデン基又はベンジリデン基によって置換
されている化合物好ましい。
イソプロピル−ブチル−イソブチル−ｔ−ブチル−ｎ−
ペンチル基、これらの異性体、ｎ−ヘキシル基、この異
性体ｆｆｉびにシクロヘキシル基が挙げられる。同じよ
うにして、前記アルキル基に相応するアルコイル基は、
末端グルコシド基の４位及び／又は６位の酸素原子の置
換分として該当する。本発明の範囲内ではＲとＲ１とが
一緒になって場合により置換されているメチレン橋を形
成する化合物が好ましく、特にアルキル基又はフェニル
基、殊にエチリデン基又はベンジリデン基によって置換
されている化合物好ましい。
オリゴグルコシド基Ｒ２では、グルコース単位３．４及
び６個を有するものが好ましい。
び６個を有するものが好ましい。
Ｘが光学的に測定される基の場合には、可視光線又は紫
外線の帯域でも色を有する基であるか又は他の化合物と
の反応により、例えば色素に変換するか又は色素と結合
して光学的に測定される基である。かかる光学的に測定
される基は当業者には明らかであり、詳説は不必要であ
る。好ましくはニトロ基を有するフェニル基、例えばニ
トロフェニル基又は３．４−ジニトロフェニル基である
。
外線の帯域でも色を有する基であるか又は他の化合物と
の反応により、例えば色素に変換するか又は色素と結合
して光学的に測定される基である。かかる光学的に測定
される基は当業者には明らかであり、詳説は不必要であ
る。好ましくはニトロ基を有するフェニル基、例えばニ
トロフェニル基又は３．４−ジニトロフェニル基である
。
本発明による化合物の製造は、末端に場合により光学的
に測定される基Ｘを有するグルコース単位３〜８個を有
するオリゴグルコシドから出発して、これをエステル化
又はエーテル化の条件下にオルトオキシ化合物、好まし
くはジアルコキシエタン又は相応するベンジル誘導体と
反応させ、Ｒ及びＲ１が一緒になって場合により置換さ
れているメチレン基を形成する一般式■の化合物を形成
し、続いて場合により例えばベルアセチル化によって遊
離ＯＨ基を封鎖し、４位又は６位の酸素原子のメチレン
橋を分解し必要の場合にはこのようにして形成した４位
又は６位の遊離ＯＨ基をなおエーテル化又はエステル化
又はエーテル置換又はエステル置換し、Ｒ後に他のＯＨ
−封鎖基、例えばアセチル基を脱離することによって行
うことができる。
に測定される基Ｘを有するグルコース単位３〜８個を有
するオリゴグルコシドから出発して、これをエステル化
又はエーテル化の条件下にオルトオキシ化合物、好まし
くはジアルコキシエタン又は相応するベンジル誘導体と
反応させ、Ｒ及びＲ１が一緒になって場合により置換さ
れているメチレン基を形成する一般式■の化合物を形成
し、続いて場合により例えばベルアセチル化によって遊
離ＯＨ基を封鎖し、４位又は６位の酸素原子のメチレン
橋を分解し必要の場合にはこのようにして形成した４位
又は６位の遊離ＯＨ基をなおエーテル化又はエステル化
又はエーテル置換又はエステル置換し、Ｒ後に他のＯＨ
−封鎖基、例えばアセチル基を脱離することによって行
うことができる。
この合成で中間生成物として生じるが、その外に最終産
物としても好ましく場合により置換されているメチレン
橋を有する化合物は、本発明によれば、一般式■： Ｒ３−Ｘ ｎ［式中Ｘは前記
のものを表わし、Ｒ３はグルコース単位３〜８個を有す
るオリゴグルコシド基を表わす］の化合物を、ｐ−ドル
オールスルホン酸の存在で一般弐■： ［式中Ｒ４及びＲ５は相互に独立にそれぞれ水素原子又
は炭素原子１〜５個を有するアルキル基又はフェニル基
を表わす］の化合物と極性有機溶剤中で反応させること
によって製造される極性有機溶剤としては、ジメチルホ
ルムアミド又はホルムアミドが好ましいが、比較される
塩基度を有する他の極性有機溶剤も適当である意外なこ
とにも、前記反応によって均一な生成物が得られ、存在
する多（のＯＨ基を保護することは不必要である。場合
により形成した副産物は容易に分離することができる。
物としても好ましく場合により置換されているメチレン
橋を有する化合物は、本発明によれば、一般式■： Ｒ３−Ｘ ｎ［式中Ｘは前記
のものを表わし、Ｒ３はグルコース単位３〜８個を有す
るオリゴグルコシド基を表わす］の化合物を、ｐ−ドル
オールスルホン酸の存在で一般弐■： ［式中Ｒ４及びＲ５は相互に独立にそれぞれ水素原子又
は炭素原子１〜５個を有するアルキル基又はフェニル基
を表わす］の化合物と極性有機溶剤中で反応させること
によって製造される極性有機溶剤としては、ジメチルホ
ルムアミド又はホルムアミドが好ましいが、比較される
塩基度を有する他の極性有機溶剤も適当である意外なこ
とにも、前記反応によって均一な生成物が得られ、存在
する多（のＯＨ基を保護することは不必要である。場合
により形成した副産物は容易に分離することができる。
反応は好ましくは温度的１０〜７０℃、好ましくは室温
で行う。反応では殆ど副産物は形成しないので、十分な
収率を得るためには、好ましくは化学量論的過剰量の一
般弐ＩＩＩの化合物で作業する。
で行う。反応では殆ど副産物は形成しないので、十分な
収率を得るためには、好ましくは化学量論的過剰量の一
般弐ＩＩＩの化合物で作業する。
一般弐ＩＩＩの化合物の例は、ジメトキシメタンジメト
キシエタン、ジェトキシエタン、ジアルコキシエタン、
ジブトキシエタン、ジメトキシプロパン、ジメトキシイ
ソプロパン及びフエニルジメトキシメタンである。
キシエタン、ジェトキシエタン、ジアルコキシエタン、
ジブトキシエタン、ジメトキシプロパン、ジメトキシイ
ソプロパン及びフエニルジメトキシメタンである。
一般式■の化合物の例は、マルトテトラオース、マルト
ペンタオース、マルトヘキサオースマルトヘプタオース
及び末端で光学的に測定される基によって置換されてい
るこれらの誘導体、例りばモノニトロフェニル−マルト
へフタオース、３．４−ジニトロフェニル−マルトへブ
タオースその他である。
ペンタオース、マルトヘキサオースマルトヘプタオース
及び末端で光学的に測定される基によって置換されてい
るこれらの誘導体、例りばモノニトロフェニル−マルト
へフタオース、３．４−ジニトロフェニル−マルトへブ
タオースその他である。
本発明による化合物のすぐれた保管貯蔵性は基質として
のｐ−二トロフェニルマルトへブタオシド（Ｇｅ１）Ｎ
Ｐ）での十分に普及した常用のα−アミラーゼの呈色試
験の条件下、即ち緩衝液のｐＨ７，ｌ ；ＮａＣＱ５０
ｍＭ； ａ−グルコシダーゼ約３０Ｕ／ｍ１２Ｂ基質５
ｍＭで、４．５−ｚチリデンーｐ−ニトロフェニルマル
トへブタオシド（Ｅｔｈ −Ｇ７＋）ＮＰ）で２５℃で
４日間内のラグ相及び線型に関する実際に同じ反応経過
でグルコースは形成しないが、Ｇ７ｐＮＰでは著しいグ
ルコースへの分解が生じることを示す。４℃での同じ条
件下では、本発明による基質で８日間後にグルコースの
形成は生じなかったが、これに反して公知比較基質では
著しい分解が生じた。
のｐ−二トロフェニルマルトへブタオシド（Ｇｅ１）Ｎ
Ｐ）での十分に普及した常用のα−アミラーゼの呈色試
験の条件下、即ち緩衝液のｐＨ７，ｌ ；ＮａＣＱ５０
ｍＭ； ａ−グルコシダーゼ約３０Ｕ／ｍ１２Ｂ基質５
ｍＭで、４．５−ｚチリデンーｐ−ニトロフェニルマル
トへブタオシド（Ｅｔｈ −Ｇ７＋）ＮＰ）で２５℃で
４日間内のラグ相及び線型に関する実際に同じ反応経過
でグルコースは形成しないが、Ｇ７ｐＮＰでは著しいグ
ルコースへの分解が生じることを示す。４℃での同じ条
件下では、本発明による基質で８日間後にグルコースの
形成は生じなかったが、これに反して公知比較基質では
著しい分解が生じた。
それ数本発明によって、ａ−アミラーゼの基質としてα
−グルコシダーゼの存在ですぐれた性質を有する新規化
合物が得られる。
−グルコシダーゼの存在ですぐれた性質を有する新規化
合物が得られる。
実施例
例 １
４．６−エチリデン−４−ニトロフェニル−σ−Ｄ−マ
ルトヘプタオシドの製造法。
ルトヘプタオシドの製造法。
バッチ：
４−ニトロフェニル−α−〇−マルトヘフタオシド
２５０ｇ （１９６ｍモル）アセトアルデヒド−ジ
メチルアセタール３１．５ｍＱ（２９７ｍモル） パラ−ドルオールスルホン酸−Ｈ２０ ０ｇ ＤＭＦ （ジメチルホルムアミド） １．５Ｑ合
成 ： ４−ニトロフェニル−σ−Ｄ−マルトヘクタオシド２５
０ｇ及びパラ−ドルオールスルホン酸・Ｈ２Ｏ２０１Ｆ
をＤＭＦ約１．５１２にとかし、無水にするために回転
蒸発器で回転させて乾燥する。その除水の含量が０．４
％から０．０２％に下がる。
２５０ｇ （１９６ｍモル）アセトアルデヒド−ジ
メチルアセタール３１．５ｍＱ（２９７ｍモル） パラ−ドルオールスルホン酸−Ｈ２０ ０ｇ ＤＭＦ （ジメチルホルムアミド） １．５Ｑ合
成 ： ４−ニトロフェニル−σ−Ｄ−マルトヘクタオシド２５
０ｇ及びパラ−ドルオールスルホン酸・Ｈ２Ｏ２０１Ｆ
をＤＭＦ約１．５１２にとかし、無水にするために回転
蒸発器で回転させて乾燥する。その除水の含量が０．４
％から０．０２％に下がる。
残渣をＤＭＦｌ、５１２にとかし、アセトアルデヒド−
ジメチルアセタール３１．５ｍ１２を添加し、先づ５０
℃で９時間撹拌し、次いで室温で約１０時間維持する。
ジメチルアセタール３１．５ｍ１２を添加し、先づ５０
℃で９時間撹拌し、次いで室温で約１０時間維持する。
反応混合物を濃縮乾燥し、残渣を水にとかし、水酸化リ
チウム溶液でｐＨ７，３に調節し、濾過し、７５０ｔ１
２に濃縮する。
チウム溶液でｐＨ７，３に調節し、濾過し、７５０ｔ１
２に濃縮する。
ＨＰ Ｌ Ｃ分析によって、原料的２０％を有するエチ
リデン−４−ニトロフェニル−α−Ｄ−マルトヘグタオ
シド約７５〜８０％の含量が得られる。
リデン−４−ニトロフェニル−α−Ｄ−マルトヘグタオ
シド約７５〜８０％の含量が得られる。
クロマトグラフィーによる精製二
試料溶液（７５０ｍＱ）を、Ｄｏｗｅｘ５０ Ｗ Ｘ
２（２００〜４００メツシユ）リチウム＋７０Ｑを有
する１５０Ｘ２５ｃｍのカラムにあけ、水で流量１．５
Ｑ／時間で溶出する。その際７ラクシヨン４．５Ｑを採
取し、クロマトグラフィーを紫外線検出器を用いて２８
０ｎｍで行う。
２（２００〜４００メツシユ）リチウム＋７０Ｑを有
する１５０Ｘ２５ｃｍのカラムにあけ、水で流量１．５
Ｑ／時間で溶出する。その際７ラクシヨン４．５Ｑを採
取し、クロマトグラフィーを紫外線検出器を用いて２８
０ｎｍで行う。
約１００ａによって未反応の４−二トａフェニルーα−
Ｄ−マルトヘプタオシドが溶出し、約２００Ｑによって
求める生成物が溶出する。
Ｄ−マルトヘプタオシドが溶出し、約２００Ｑによって
求める生成物が溶出する。
生成物を含有するフラクションを合し、濃縮乾燥する。
残渣をメタノール１．５１２にとかし、濾過し、０℃で
インプロパツール４Ｉ２及び石油エーテルｌ（［で沈殿
させる。４℃で１夜撹拌後に、生成物を吸引濾過し、イ
ソプロパツール及び石油エーテルで洗浄し、乾燥基中で
３０℃で乾燥する。
インプロパツール４Ｉ２及び石油エーテルｌ（［で沈殿
させる。４℃で１夜撹拌後に、生成物を吸引濾過し、イ
ソプロパツール及び石油エーテルで洗浄し、乾燥基中で
３０℃で乾燥する。
収量：ｌ５０ｇ （理論量の５８％）、無色の粉末、分
子量１３００゜ 分析： Ｈ２Ｏ［フイシャ−（に、 Ｆｉｓｃｈｅｒ）による１
４．５％ インプロパツール（ガスクロマトグラフィーによる）
５％酸性加水分解（酵素
）によるアセトアルデヒド９１％ ［αＩＤ２５℃（乾燥物質に対する）−７７°（Ｃ−１
％Ｈ２０） ＨＰＬＣ二面の％９９（−ＮＨ２−柱５μニアセトニト
リル／水１：ｌ、ｃ−燐酸１ｍモル／Ｌ３０５ｎｍＴ検
波）。
子量１３００゜ 分析： Ｈ２Ｏ［フイシャ−（に、 Ｆｉｓｃｈｅｒ）による１
４．５％ インプロパツール（ガスクロマトグラフィーによる）
５％酸性加水分解（酵素
）によるアセトアルデヒド９１％ ［αＩＤ２５℃（乾燥物質に対する）−７７°（Ｃ−１
％Ｈ２０） ＨＰＬＣ二面の％９９（−ＮＨ２−柱５μニアセトニト
リル／水１：ｌ、ｃ−燐酸１ｍモル／Ｌ３０５ｎｍＴ検
波）。
例 ２
４．６−ニチリデンーマルトヘプタオースの製造法。
バッチ：
マルトヘプタオース ｌＯｇ（８，７ｍモル）アセトア
ルデヒド−ジメチルアセタール１−ａｍ（ｌｃ１７ｍモ
ル） パラ−ドルオールスルホン酸壷Ｈ２０１ｇＤＭＦ
７５＋ｍ（２合 成 ： マルトヘプタオース１０ｇ 及びパラ−ドルオールスル
ホン酸・Ｈ２Ｏ１ｇをＤＭＦｌｏｏｍＱにとかし、濃縮
乾燥する。この方法で残渣を無水にする。残渣をＤＭＦ
７５ｍ１２にとかし、アセトアルデヒド−ジメチルアセ
タール１．７ｍｆｆヲ加え、密閉して５０℃で１５時間
撹拌する。次いで反応溶液を濃縮乾燥し、残渣を水にと
かし、水酸化リチウムでｐＨ７に中和し、濾過し、５０
ｍＱに濃縮する。
ルデヒド−ジメチルアセタール１−ａｍ（ｌｃ１７ｍモ
ル） パラ−ドルオールスルホン酸壷Ｈ２０１ｇＤＭＦ
７５＋ｍ（２合 成 ： マルトヘプタオース１０ｇ 及びパラ−ドルオールスル
ホン酸・Ｈ２Ｏ１ｇをＤＭＦｌｏｏｍＱにとかし、濃縮
乾燥する。この方法で残渣を無水にする。残渣をＤＭＦ
７５ｍ１２にとかし、アセトアルデヒド−ジメチルアセ
タール１．７ｍｆｆヲ加え、密閉して５０℃で１５時間
撹拌する。次いで反応溶液を濃縮乾燥し、残渣を水にと
かし、水酸化リチウムでｐＨ７に中和し、濾過し、５０
ｍＱに濃縮する。
クロマトグラフィーによる精製：
試料溶液５０ｒＲＱを、Ｄｏｗｅｘ５０ ＷＸ ２
（２００〜４００メツシユ）Ｌ＋ ３．５ｆ２を有する
クロマトグラフィーのカラム（１８０Ｘ５ｃｍ）にあけ
水で流量１５０ ｒａＱ／時間で溶出する。紫外線検波
器（２８０ｎｍ）を通るフラクション３０ｍＱを採取す
る。
（２００〜４００メツシユ）Ｌ＋ ３．５ｆ２を有する
クロマトグラフィーのカラム（１８０Ｘ５ｃｍ）にあけ
水で流量１５０ ｒａＱ／時間で溶出する。紫外線検波
器（２８０ｎｍ）を通るフラクション３０ｍＱを採取す
る。
１．８Ｑによりマルトヘプタオースが溶出し、２．２５
ｆｆによりエチリデン−マルトへブタオースが溶出する
。
ｆｆによりエチリデン−マルトへブタオースが溶出する
。
主要フラクションを合し、回転させて乾燥し水を若干添
加してメタノール２００１１（２にとかしインプロパツ
ール２００＋Ｑを加え、４°Ｃで撹拌する。その際生成
物が沈殿し、これを吸引濾過レインプロパツール及び石
油エーテルで洗浄し、真空中で２５℃でＰ２Ｏ５によっ
て乾燥する。
加してメタノール２００１１（２にとかしインプロパツ
ール２００＋Ｑを加え、４°Ｃで撹拌する。その際生成
物が沈殿し、これを吸引濾過レインプロパツール及び石
油エーテルで洗浄し、真空中で２５℃でＰ２Ｏ５によっ
て乾燥する。
収量：６．２ｇ （理論量の６０％）
分析：
水［フィシャ−（Ｋ、 Ｆｉｓｃｈｅｒ）による］７．
６％ 酸性加水分解（酵素）によるアセトアルデヒド９１．２
％ ［σ］Ｄ２５°Ｃ（乾燥物質に対する）−６９° （ｃ
−１％Ｈ２０） ＨＰＬＣ（例１の条件参照）二面の％ ９６テトラゾリ
ウムプルーとの反応は、還元性末端が存在しないことを
示す。
６％ 酸性加水分解（酵素）によるアセトアルデヒド９１．２
％ ［σ］Ｄ２５°Ｃ（乾燥物質に対する）−６９° （ｃ
−１％Ｈ２０） ＨＰＬＣ（例１の条件参照）二面の％ ９６テトラゾリ
ウムプルーとの反応は、還元性末端が存在しないことを
示す。
例 ３（参考例）
試薬：
エチリデン−Ｇ７ｐＮＰ ６８２．５ｍｇ（５，２５ｍ
モル／４）を、塩化ナトリウム（５２，５ｍモル／Ｑ）
並びにアルファーグルコシダーゼ（４２Ｕ／ｍＱ）を含
有する燐酸ナトリウム緩衝液１００ＩＩｌ＋２（１０５
ｍモル／ｆ２）にとかし、ｐＨ７，１０に調節した。
モル／４）を、塩化ナトリウム（５２，５ｍモル／Ｑ）
並びにアルファーグルコシダーゼ（４２Ｕ／ｍＱ）を含
有する燐酸ナトリウム緩衝液１００ＩＩｌ＋２（１０５
ｍモル／ｆ２）にとかし、ｐＨ７，１０に調節した。
試験の最終濃度：
燐酸塩緩衝液１００ｍモル／ Ｑ、 Ｎａ（４５０ｍモ
ル／ Ｑｓ 基質５ ｍモル／Ｑ１アルファーグルコシ
ダーゼ４０Ｕ／ｒｔｒＱ。
ル／ Ｑｓ 基質５ ｍモル／Ｑ１アルファーグルコシ
ダーゼ４０Ｕ／ｒｔｒＱ。
試験バッチ：
２５℃に加熱した試薬２．０諺Ｑに試料０ 、 ｌ ｒ
ｓＱを添加し、混合物を２５℃に加熱した。予培養時間
４分間（ラグ相）後に、吸光の増大をＨｇ４０５ｎｍで
エツベンドルフ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）光度計で記録し
た。毎分の吸光の変化（ΔＥ／分）から、試料中のアミ
ラーゼの活性を次式によって計算した。
ｓＱを添加し、混合物を２５℃に加熱した。予培養時間
４分間（ラグ相）後に、吸光の増大をＨｇ４０５ｎｍで
エツベンドルフ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）光度計で記録し
た。毎分の吸光の変化（ΔＥ／分）から、試料中のアミ
ラーゼの活性を次式によって計算した。
ΔＥ／分・■・１０００・３
＝ΔＥ／分・７０００ ［Ｕ／１２］
−Ｖ−ｄ
アルファーアミラーゼの再発見：
活性の測定を、４°Ｃ及び２５℃で保存した試薬で一定
の時間間隔でくり返し、次の値が得られた。
の時間間隔でくり返し、次の値が得られた。
４８時間 〃
８時間（４℃）
２４時間 ／／
４８時間 〃
７２時間 ／／
８０時間 〃
平均値／ＶＫ
＋２６ ３８２
１１９３．２％ ３８３
３．０％ ２１４
個々の値は、手工による酵素の活性の測定に対する通常
の変動中である。
の変動中である。
２．０％
最初の値
４時間（２５°Ｃ）
８時間 ／１
２４時間 〃
３２時間 〃
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、一般式 I ： ▲数式、化学式、表等があります▼ I ［式中Ｒ及びＲ＿１は、相互に独立にそれぞれ炭素原子
１〜６個を有する直鎖状又は分枝状のアルキル基又はア
ルコイル基又はフェニル基を表わし、その際Ｒ及びＲ＿
１は一緒になってメチレン橋を形成してもよく、その水
素原子は相互に独立にそれぞれ炭素原子１〜５個を有す
るアルキル基又はフェニル基によって置換されていても
よく、Ｒ＿２はグルコース単位２〜７個を有するオリゴ
グルコシド基を表わし、Ｘは水素原子又は光学的に測定
される基を表わす］の化合物を製造する方法において、
一般式II： Ｒ＿３−ＸII ［式中Ｘは前記のものを表わし、Ｒ＿３はグルコース単
位３〜８個を有するオリゴグルコシド基を表わす］の化
合物を、ｐ−トルオールスルホン酸の存在で一般式III
： ▲数式、化学式、表等があります▼III ［式中Ｒ＿４及びＲ＿５は、相互に独立にそれぞれ水素
原子又は炭素原子１〜５個を有するアルキル基又はフェ
ニル基を表わす］の化合物と極性有機溶剤中で反応させ
ることを特徴とする、一般式 I の化合物の製造法。 ２、有機溶剤としてジメチルホルムアミドを使用する、
特許請求の範囲第１項記載の方法。 ３、反応を１０〜７０℃で行う、特許請求の範囲第１項
又は第２項記載の方法。 ４、一般式IIIの化合物を過剰量で使用する、特許請求
の範囲第１項から第３項までのいずれか１項記載の方法
。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19823228616 DE3228616A1 (de) | 1981-07-31 | 1982-07-30 | Kolben fuer verbrennungsmotoren |
| DE3228616.7 | 1983-08-08 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59165035A Division JPS6054395A (ja) | 1983-08-08 | 1984-08-08 | オリゴグリコシド誘導体 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0222289A true JPH0222289A (ja) | 1990-01-25 |
Family
ID=6169786
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8415589A Pending JPH0222289A (ja) | 1982-07-30 | 1989-04-04 | オリゴグルコシド誘導体の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0222289A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998029690A1 (en) | 1996-12-27 | 1998-07-09 | Sumitomo Osaka Cement Co., Ltd. | Device and method for combustion of fuel |
-
1989
- 1989-04-04 JP JP8415589A patent/JPH0222289A/ja active Pending
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| METHODS IN CARBOHYDRATE CHEMISTRY 2=1963 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998029690A1 (en) | 1996-12-27 | 1998-07-09 | Sumitomo Osaka Cement Co., Ltd. | Device and method for combustion of fuel |
| US6389998B2 (en) | 1996-12-27 | 2002-05-21 | Sumitomo Osaka Cement Co., Ltd. | Device and method for combustion of fuel |
| US6439140B2 (en) | 1996-12-27 | 2002-08-27 | Sumitomo Osaka Cement Co., Ltd. | Device and method for combustion of fuel |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0223891A (ja) | α―アミラーゼの測定法及びそのための試薬 | |
| GB2058780A (en) | Maltoheptaoside derivatives | |
| JPH0566393B2 (ja) | ||
| EP0319993B1 (en) | Maltooligosaccharide derivatives and reagents for determination of amylase activity | |
| JPH0222289A (ja) | オリゴグルコシド誘導体の製造法 | |
| JPH0655753B2 (ja) | 新規オリゴグルコシド誘導体、α‐アミラーゼの測定方法および測定試薬 | |
| JP790H (ja) | オリゴグルコシド誘導体 | |
| JPH04229196A (ja) | α‐アミラーゼアイソザイム活性の分別定量法 | |
| JPH02178296A (ja) | 新規グルコサミン誘導体、これを用いる酵素活性測定試薬及び酵素活性測定方法 | |
| JP3029925B2 (ja) | マルトオリゴ糖誘導体およびその製造法 | |
| JP2888506B2 (ja) | 非還元末端アジド化マルトオリゴ糖及びその製造方法 | |
| JPH03200801A (ja) | アンヒドロマルトオリゴシド誘導体、これを有効成分とするα―アミラーゼ活性測定用試薬及びこれを用いたα―アミラーゼ活性の測定方法 | |
| EP0452067A2 (en) | Oligosaccharide compounds and preparation thereof | |
| JP3070709B2 (ja) | マルトオリゴ糖誘導体の製造法 | |
| JPS63214193A (ja) | ６−グルコシルマルトオリゴ糖誘導体の製法およびそれを用いるα−アミラ−ゼ活性測定法 | |
| DE2755803A1 (de) | Verfahren und reagens zur bestimmung von alpha-amylase | |
| JPH05507094A (ja) | α―アミラーゼ基質としてのインドフェノール置換マルトオリゴシド | |
| JPH0650996B2 (ja) | α−アミラ−ゼ活性測定用基質及び測定方法 | |
| SI8411385A8 (sl) | Postopek za pripravo derivatov oligoglukozida | |
| JPH0656869A (ja) | ６‐アルコキシメトキシマルトオリゴシド誘導体、これを有効成分とするα‐アミラーゼ活性測定用試薬及びこれを用いたα‐アミラーゼ活性の測定方法 | |
| JPS587649B2 (ja) | Ｎａｄ↑＋−ポリエチレングリコ−ル誘導体 | |
| JPH0488996A (ja) | ３―ケトブチリデン２―クロロ―４―ニトロフェニル―β―マルトペンタオシドの製造法 | |
| JPH04346994A (ja) | 非還元末端カルバモイルマルトオリゴシド誘導体、これを有効成分とするα‐アミラーゼ活性測定用試薬及びこれを用いたα‐アミラーゼ活性の測定方法 | |
| JPS63170393A (ja) | 非還元末端修飾オリゴサッカライド誘導体の新規な製造法 | |
| JPH04211389A (ja) | ３−ケトブチリデン ２−クロロ−４−ニトロフェニル−β−マルトペンタオシドの製造法 |