JPH022332A - 細胞融合装置 - Google Patents
細胞融合装置Info
- Publication number
- JPH022332A JPH022332A JP9152788A JP9152788A JPH022332A JP H022332 A JPH022332 A JP H022332A JP 9152788 A JP9152788 A JP 9152788A JP 9152788 A JP9152788 A JP 9152788A JP H022332 A JPH022332 A JP H022332A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- suction
- cell
- plates
- cell fusion
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
Landscapes
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- Electromagnetism (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、希望する２種類の細胞同士を大量かつ正確に
融合させるための細胞融合装置に関するものである。
融合させるための細胞融合装置に関するものである。
従来の細胞融合法はニュートン（Ｎｅｗｔｏｎ）誌別冊
″バイオテクノロジー総集編″（教育社刊）に記載のよ
うに交雑させるべき異種細胞を緩衝液中で混合し、それ
に融合促進剤を添加して融合させていた。あるいは交雑
させるべき細Ｊ抱同士の）鵠濁液に交番電界を加え、細
胞同士を交番電界作用で接触させた後パルス状の直流電
界を加え融合させていた。融合する細胞の組合せは異種
、同種、複数個というように多々あるため、融合を終え
た細胞を培養、検定した後目的とする交雑細胞が得られ
ていた。
″バイオテクノロジー総集編″（教育社刊）に記載のよ
うに交雑させるべき異種細胞を緩衝液中で混合し、それ
に融合促進剤を添加して融合させていた。あるいは交雑
させるべき細Ｊ抱同士の）鵠濁液に交番電界を加え、細
胞同士を交番電界作用で接触させた後パルス状の直流電
界を加え融合させていた。融合する細胞の組合せは異種
、同種、複数個というように多々あるため、融合を終え
た細胞を培養、検定した後目的とする交雑細胞が得られ
ていた。
従来の細胞融合では融合させるべき異種の細胞の組合せ
を特定し制御することができないため、融合後の細胞を
培養し選抜する作業が必要であった。本発明の目的は融
合させる細胞の組合せを制御し確実に融合を行わしめる
ため交雑線ａの検定を不要とする装置を提供することに
ある。
を特定し制御することができないため、融合後の細胞を
培養し選抜する作業が必要であった。本発明の目的は融
合させる細胞の組合せを制御し確実に融合を行わしめる
ため交雑線ａの検定を不要とする装置を提供することに
ある。
上記目的は、交雑しようとするそれぞれの細胞の位置を
特定し、確実に交雑するように細胞を強制的に接触させ
た状態で細胞融合処理を行うことにより達成される。す
なわち、本発明においては、相対向する特定の位置に所
定の数の細胞を拘束できる複数の穴を有する一組の吸着
板と、それぞれの吸着板に拘束した細胞同士を強制的に
接触するように該一組の吸着板の距離を近接させる機構
と、吸着板の所定位置以外の細胞を除去する手段と。
特定し、確実に交雑するように細胞を強制的に接触させ
た状態で細胞融合処理を行うことにより達成される。す
なわち、本発明においては、相対向する特定の位置に所
定の数の細胞を拘束できる複数の穴を有する一組の吸着
板と、それぞれの吸着板に拘束した細胞同士を強制的に
接触するように該一組の吸着板の距離を近接させる機構
と、吸着板の所定位置以外の細胞を除去する手段と。
互いに接触した細胞を融合させるための手段をもって細
胞融合装置を構成する。
胞融合装置を構成する。
ある特定の位置に細胞を固定できる複数の穴を備えた吸
着板を２枚用意する。細胞を固定するための複数の穴の
位置は、２枚の吸着板の吸着面を互いに対向させた時に
、２枚の吸着板の？、Ｖ数の穴がそれぞれ相対する位置
に対応している。
着板を２枚用意する。細胞を固定するための複数の穴の
位置は、２枚の吸着板の吸着面を互いに対向させた時に
、２枚の吸着板の？、Ｖ数の穴がそれぞれ相対する位置
に対応している。
以下、本発明の一実施例の装置構成を第１図により説明
する。本装置は、交雑させたい２種類の細胞１，２を吸
着させる吸着板３，４と、吸着板間の距離を制御する機
構５と、細胞懸濁液や緩衝液を満すための容器６とから
構成されている。吸着板３，４は相対する位置に細胞を
吸着するための吸着穴で、８を複数個所定の配列で備え
ている。
する。本装置は、交雑させたい２種類の細胞１，２を吸
着させる吸着板３，４と、吸着板間の距離を制御する機
構５と、細胞懸濁液や緩衝液を満すための容器６とから
構成されている。吸着板３，４は相対する位置に細胞を
吸着するための吸着穴で、８を複数個所定の配列で備え
ている。
細胞を固定するための吸着板３，４の一例を第２図で説
明する。吸着板３と４は同様の構造なので第２図では吸
着板３について説明する。吸着板３は吸着穴７を備えた
吸着穴付板９．電電気的細胞台を行うための電極板１２
．細胞を吸着するための負圧室１３．電極板１２を絶縁
しかつ負圧室１３を形成するための絶縁密閉リング１１
より構成さ九る。吸着穴７の最小径は負圧室１３を負圧
にして細胞を吸着した時にも細胞が吸着穴７を通り抜け
ないように、細胞の直径より小さくする。
明する。吸着板３と４は同様の構造なので第２図では吸
着板３について説明する。吸着板３は吸着穴７を備えた
吸着穴付板９．電電気的細胞台を行うための電極板１２
．細胞を吸着するための負圧室１３．電極板１２を絶縁
しかつ負圧室１３を形成するための絶縁密閉リング１１
より構成さ九る。吸着穴７の最小径は負圧室１３を負圧
にして細胞を吸着した時にも細胞が吸着穴７を通り抜け
ないように、細胞の直径より小さくする。
例えば扱う細胞の大きさが直径４０μｍ〜６０μｒｎの
場合、吸着穴７の大きさを３０μｍとする。
場合、吸着穴７の大きさを３０μｍとする。
次に本装置の動作を第３図により説明する。
（ａ） まず交雑させたい細胞１を含む細胞懸濁液を
容器６に満す。
容器６に満す。
（ｂ） 細胞吸着板３の吸着穴７に、！ｌＩ胞１を吸
着させた後、緩衝液を用いて容器６に残った細胞１を洗
い流す。
着させた後、緩衝液を用いて容器６に残った細胞１を洗
い流す。
（ｃ） 次に交雑させたい細胞２を含む細胞懸濁液を
容器６に濶す。
容器６に濶す。
（ｄ） 細胞吸着板４の吸着穴８に細胞２を吸着させ
た後、再び緩衝液を用いて容器６に残った細胞２を洗い
流す。
た後、再び緩衝液を用いて容器６に残った細胞２を洗い
流す。
（ｅ） 吸着板３，４に細胞１，２を吸着させた後、
吸着板移動機構５を用い細胞１，２が接触する位置に吸
着板を移動させる。
吸着板移動機構５を用い細胞１，２が接触する位置に吸
着板を移動させる。
（ｆ）ａ胞１，２が接触している状態で、融合促進剤例
えばポリエチレングリコール（Ｐ Ｅ Ｇ ）による化
学的細胞融合処理、あるいはパルス状の直流電界を吸着
板３，４に設けられた電極に印加し電気的細胞融合処理
を行うと、特定された２種類の細胞が全て融合する。
えばポリエチレングリコール（Ｐ Ｅ Ｇ ）による化
学的細胞融合処理、あるいはパルス状の直流電界を吸着
板３，４に設けられた電極に印加し電気的細胞融合処理
を行うと、特定された２種類の細胞が全て融合する。
次に本発明の他の実施例として、細胞をより高速、高効
率に吸着板３，４に吸着する構造を第４図にて説明する
。
率に吸着板３，４に吸着する構造を第４図にて説明する
。
吸着板３，４の間に、第１の細胞供給用流路１４と第２
の細胞供給用流路１５とを裏表に成形した流路板１６を
挟む。流路板１６を吸着板３，４で挟んだ状態でそれぞ
れの流路１４，１５に細胞を流す。流路板１６により細
胞懸濁液は緩衝液に拡散することなく吸着穴７，８近傍
のみを流れる。
の細胞供給用流路１５とを裏表に成形した流路板１６を
挟む。流路板１６を吸着板３，４で挟んだ状態でそれぞ
れの流路１４，１５に細胞を流す。流路板１６により細
胞懸濁液は緩衝液に拡散することなく吸着穴７，８近傍
のみを流れる。
しかも細胞１の懸濁液と細胞２の懸濁液とを同時に吸着
穴近傍で流せるため吸着板３，４上のすべての吸着穴７
，８に細胞を吸着するのに要する時間を短縮できる。細
胞を吸着した後は、吸着板間の距離を変える機構５を用
いて、いったん吸着板の間隔を太きくし流路板１６をは
ずす。その後、前記と同様に第１の細胞と第２の細胞を
接触させ融合処理を行う。
穴近傍で流せるため吸着板３，４上のすべての吸着穴７
，８に細胞を吸着するのに要する時間を短縮できる。細
胞を吸着した後は、吸着板間の距離を変える機構５を用
いて、いったん吸着板の間隔を太きくし流路板１６をは
ずす。その後、前記と同様に第１の細胞と第２の細胞を
接触させ融合処理を行う。
なお、流路板を上記のような流路１４，１５がない平坦
な板状のものとし、吸着板３，４の外周をシール可能な
構造として、流路板と吸着板との間隙を微小量穴けて保
持した状態で、この間隙に細゛胞懸濁液を流す方法も可
能である。
な板状のものとし、吸着板３，４の外周をシール可能な
構造として、流路板と吸着板との間隙を微小量穴けて保
持した状態で、この間隙に細゛胞懸濁液を流す方法も可
能である。
本装置では、吸着板上の吸着穴により細胞の位置決めが
行えるため、目的とする細胞同士を互いに接触させて融
合処理が行える。従って細胞融合処理後の交雑細胞の育
種、検定が不用になり、細胞融合の実験サイクルを従来
に比べ数分の一以下に短縮できる。
行えるため、目的とする細胞同士を互いに接触させて融
合処理が行える。従って細胞融合処理後の交雑細胞の育
種、検定が不用になり、細胞融合の実験サイクルを従来
に比べ数分の一以下に短縮できる。
第１図は本発明の一実施例になる装置の概略縦断面図、
第２図は本発明に係る装置の細胞吸着板の縦断面図、第
３図は本発明の実施例における細胞融合装置の動作を説
明する縦断面図、第４図は本発明の他の実施例になる装
置の要部縦断面図である。 １・・・第１図の細胞、２・・第２の細胞、３・・・第
１の、５” ロ皮看オシ乏秒動イーぐ端 ６ 匁器
第２図は本発明に係る装置の細胞吸着板の縦断面図、第
３図は本発明の実施例における細胞融合装置の動作を説
明する縦断面図、第４図は本発明の他の実施例になる装
置の要部縦断面図である。 １・・・第１図の細胞、２・・第２の細胞、３・・・第
１の、５” ロ皮看オシ乏秒動イーぐ端 ６ 匁器
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、相対向する特定の位置に所定の数の細胞を拘束でき
る複数の穴を有する一組の吸着板と、それぞれの吸着板
に拘束した細胞同士を強制的に接触するように該一組の
吸着板の距離を近接させる機構と、吸着板の所定位置以
外の細胞を除去する手段と、互いに接触した細胞を融合
させるための手段を有することを特徴とした細胞融合装
置。 ２、上記一組の吸着板を透過する電界を発生できる電極
を設けたことを特徴とする請求項第１項記載の細胞融合
装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9152788A JPH022332A (ja) | 1988-04-15 | 1988-04-15 | 細胞融合装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9152788A JPH022332A (ja) | 1988-04-15 | 1988-04-15 | 細胞融合装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH022332A true JPH022332A (ja) | 1990-01-08 |
Family
ID=14028904
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9152788A Pending JPH022332A (ja) | 1988-04-15 | 1988-04-15 | 細胞融合装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH022332A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1993002178A1 (en) * | 1991-07-22 | 1993-02-04 | Schmukler Robert E | Apparatus and methods for electroporation and electrofusion |
-
1988
- 1988-04-15 JP JP9152788A patent/JPH022332A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1993002178A1 (en) * | 1991-07-22 | 1993-02-04 | Schmukler Robert E | Apparatus and methods for electroporation and electrofusion |
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