JPH0243000A - ハイブリッド形成用試料核酸調製法 - Google Patents
ハイブリッド形成用試料核酸調製法Info
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- JPH0243000A JPH0243000A JP1089586A JP8958689A JPH0243000A JP H0243000 A JPH0243000 A JP H0243000A JP 1089586 A JP1089586 A JP 1089586A JP 8958689 A JP8958689 A JP 8958689A JP H0243000 A JPH0243000 A JP H0243000A
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- B01L3/508—Rigid containers without fluid transport within
- B01L3/5082—Test tubes per se
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M47/00—Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
- C12M47/06—Hydrolysis; Cell lysis; Extraction of intracellular or cell wall material
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/06—Lysis of microorganisms
- C12N1/066—Lysis of microorganisms by physical processes
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- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
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- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、−船釣には核酸ハ・イブリッド形成の分野に
関し、より詳細には、核酸プローブとのハイブリッド形
成用生物試料を調製するための新しい方法を提供する。
関し、より詳細には、核酸プローブとのハイブリッド形
成用生物試料を調製するための新しい方法を提供する。
（従来の技術）
核酸プローブとのノ゛・イブリッド形成（ＤＮＡあるい
はＲＮＡプローブとのハ・イブリッド形成）には、外来
の核酸プローブとのハイブリッドを形成させる前に、加
工処理した生物試料を試料あるいは標的核酸として提供
する必要がある。このような加工処理が必要とされるの
は、核酸プローブを真菌細胞・細菌細胞あるいはウィル
ス粒子として定義付けられている微生物内に含まれる核
酸試料とハイブリッド形成させるためには、核酸試料を
プローブに近付きやすくするため組織の内側から遊離し
なければならないという理由による。
はＲＮＡプローブとのハ・イブリッド形成）には、外来
の核酸プローブとのハイブリッドを形成させる前に、加
工処理した生物試料を試料あるいは標的核酸として提供
する必要がある。このような加工処理が必要とされるの
は、核酸プローブを真菌細胞・細菌細胞あるいはウィル
ス粒子として定義付けられている微生物内に含まれる核
酸試料とハイブリッド形成させるためには、核酸試料を
プローブに近付きやすくするため組織の内側から遊離し
なければならないという理由による。
生物組織から遊離し譬♂ゝいろいろな生物体、細胞、細
歯あるいはウィルスは、その特質上、核酸を効果的に遊
離させるための異なった化学条件を必要とする。また、
試料を加工処理する物理的方法も実施されており、これ
らは、圧力、熱、凍結−溶解サイクルならびにガラスピ
ーズ共存下および非共存下での超音波処理を含む。さら
に、化学的に細胞を溶解させた後に超音波処理を行なう
といったような物理的方法と化学的方法の組合わせもま
た、ＤＮＡプローブとのハイブリッド形成用に試料を調
製するために用いられている。
歯あるいはウィルスは、その特質上、核酸を効果的に遊
離させるための異なった化学条件を必要とする。また、
試料を加工処理する物理的方法も実施されており、これ
らは、圧力、熱、凍結−溶解サイクルならびにガラスピ
ーズ共存下および非共存下での超音波処理を含む。さら
に、化学的に細胞を溶解させた後に超音波処理を行なう
といったような物理的方法と化学的方法の組合わせもま
た、ＤＮＡプローブとのハイブリッド形成用に試料を調
製するために用いられている。
超音波処理装置には超音波振動を用い、かっこの装置は
以前、均一化、細胞破砕、分子の分離、給温、エアロゾ
ルの発生、潤滑、コーティングの各システム、および噴
霧器を含むいろいろなプロセスに用いられてきた。一般
に、超音波（ｕｌｔｒａ−ｓｏｕｎｄ）は、溶液中の音
波の伝播を包含しくｅｎｃｏｍｐａｓｓ）、それに付随
して圧縮領域と希薄領域を形成すると理解されている。
以前、均一化、細胞破砕、分子の分離、給温、エアロゾ
ルの発生、潤滑、コーティングの各システム、および噴
霧器を含むいろいろなプロセスに用いられてきた。一般
に、超音波（ｕｌｔｒａ−ｓｏｕｎｄ）は、溶液中の音
波の伝播を包含しくｅｎｃｏｍｐａｓｓ）、それに付随
して圧縮領域と希薄領域を形成すると理解されている。
交互に生じる音圧（ａｃｏｕｓｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒ
ｅ）は微細な気泡（ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ｂｕｂｂ
ｌｅｓ） を作ったり壊したりする原因となる。キャ
ビテーション（ｃａｖｉｔａｔｉｏｎ）が起こる微細環
境内では圧力変化が２０，０００気圧に達する。微細気
泡あるいはキャビティは何回も繰返して発生し、いった
ん臨界気泡サイズとして知られる一定Ｑ）臨界容積に達
すると強力な力で崩壊する。臨界気泡サイズは実質上周
波数の関数であり、周波数が増大する程より大きな力が
キャビテーション形成のために必要となる。１■ｈ以上
では、超音波処理効力が著るしく減少し、２．５■ｈ以
上ではキャビテーションは全く形成されない。
ｅ）は微細な気泡（ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ｂｕｂｂ
ｌｅｓ） を作ったり壊したりする原因となる。キャ
ビテーション（ｃａｖｉｔａｔｉｏｎ）が起こる微細環
境内では圧力変化が２０，０００気圧に達する。微細気
泡あるいはキャビティは何回も繰返して発生し、いった
ん臨界気泡サイズとして知られる一定Ｑ）臨界容積に達
すると強力な力で崩壊する。臨界気泡サイズは実質上周
波数の関数であり、周波数が増大する程より大きな力が
キャビテーション形成のために必要となる。１■ｈ以上
では、超音波処理効力が著るしく減少し、２．５■ｈ以
上ではキャビテーションは全く形成されない。
キャビテーションを形成する超音波処理装置には、ヒー
トシステムスウルトランニックス（ＨｅａｔＳｙｓｔｅ
ｍｓ Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ）、トミー（Ｔｏｍｙ）
株式会社、ラピディス（Ｒａｐｉｄｉｓ）、レイセ
オン（Ｒａｙｔｈｅｏｎ）、ムラルド（ＭｕｌＬａｒｄ
） およびブランンン（Ｂｒａｎｓｏｎ）、 として
商品として売られているシステムを含め、いろいろな装
置が数多くあり、核酸等の研究に用いらねてきた。商品
として売られているこれらの超音波処理装置は、伝統的
に５〜３５ＫＨｚの周波数に共振するように、特に２０
ＫＨｚ付近で最も共振するように設計されている。商品
として入手可能な代表的超音波処理装置には次の２つの
モードのうちのどちらかが使われている：２つのモード
とは、ｌ）振動グローブの試料内への直接浸せき；およ
び２）試料を包含すあるいは共通浴内への設ＦＩＺ （
ｐｌａｃｅｍｅｎｔ） ＋ である。第一モードは、
試料から試料へと試料の持越しを招くという点で不都合
であり、従って臨床試験用に設置するには実用的でない
。第二モードを使用すると、液体は容器あるいはキュベ
ツト内の試料しこ超音波振動を伝達するために働くと共
に、また、試料温度を冷却および／′ｉたけ制御するた
めにも役立つであろう。この方法は比較的効果的である
が、液体浴を行うのに必要な装置が複雑であることおよ
びこの方法によると汚染をもたらすおそれがあることの
二点で不都合である。従って、臨床での応用もまた制限
される。
トシステムスウルトランニックス（ＨｅａｔＳｙｓｔｅ
ｍｓ Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ）、トミー（Ｔｏｍｙ）
株式会社、ラピディス（Ｒａｐｉｄｉｓ）、レイセ
オン（Ｒａｙｔｈｅｏｎ）、ムラルド（ＭｕｌＬａｒｄ
） およびブランンン（Ｂｒａｎｓｏｎ）、 として
商品として売られているシステムを含め、いろいろな装
置が数多くあり、核酸等の研究に用いらねてきた。商品
として売られているこれらの超音波処理装置は、伝統的
に５〜３５ＫＨｚの周波数に共振するように、特に２０
ＫＨｚ付近で最も共振するように設計されている。商品
として入手可能な代表的超音波処理装置には次の２つの
モードのうちのどちらかが使われている：２つのモード
とは、ｌ）振動グローブの試料内への直接浸せき；およ
び２）試料を包含すあるいは共通浴内への設ＦＩＺ （
ｐｌａｃｅｍｅｎｔ） ＋ である。第一モードは、
試料から試料へと試料の持越しを招くという点で不都合
であり、従って臨床試験用に設置するには実用的でない
。第二モードを使用すると、液体は容器あるいはキュベ
ツト内の試料しこ超音波振動を伝達するために働くと共
に、また、試料温度を冷却および／′ｉたけ制御するた
めにも役立つであろう。この方法は比較的効果的である
が、液体浴を行うのに必要な装置が複雑であることおよ
びこの方法によると汚染をもたらすおそれがあることの
二点で不都合である。従って、臨床での応用もまた制限
される。
本発明の目的は、液体浴超音波処理法に匹敵する効果を
も、つ新規超音波処理システムを提供することである。
も、つ新規超音波処理システムを提供することである。
本発明の他の目的は、浸せき型超音波処理に関連してお
こる汚染という不利益を排除した、ＤＮＡプローブとの
ノ・イブｊ）ラド形成用の試料を調製する新規超音波処
理法？提供することである。
こる汚染という不利益を排除した、ＤＮＡプローブとの
ノ・イブｊ）ラド形成用の試料を調製する新規超音波処
理法？提供することである。
慣用の超音波トランスデユーサ−を直接容器表面に当て
た場合、超音波エネルギーは簡単には容器内に含まれる
流体に伝達されないことが知られている。こねは、エネ
ルギーのかなりの割合が熱の形で、トランスデユーサ−
の接触表面および容器壁、あるいは容器の材質そハ自体
のどちらかに失なわれることが原因で起こる。実際に伝
達されるエネルギー量は、そハぞれの材質の音響インピ
ーダンスによってさらに制限される。このように、実質
的には初発エネルギーのうちの比較的少量のエネルギー
のみが流体に伝達され、非常に大過剰量の初発エネルギ
ーを用いなければキャビテーションは起こらない。その
ような過剰エネルギーを使用すると、時として容器の溶
解が起こる程の高い局部加熱をその結果として生ずるた
め、一般的には非常に不利である。そのような結果は、
特に試料が伝染性の病気を持っている危険性のある臨床
系実施態様では、事実上間らかに認容しがたい。
た場合、超音波エネルギーは簡単には容器内に含まれる
流体に伝達されないことが知られている。こねは、エネ
ルギーのかなりの割合が熱の形で、トランスデユーサ−
の接触表面および容器壁、あるいは容器の材質そハ自体
のどちらかに失なわれることが原因で起こる。実際に伝
達されるエネルギー量は、そハぞれの材質の音響インピ
ーダンスによってさらに制限される。このように、実質
的には初発エネルギーのうちの比較的少量のエネルギー
のみが流体に伝達され、非常に大過剰量の初発エネルギ
ーを用いなければキャビテーションは起こらない。その
ような過剰エネルギーを使用すると、時として容器の溶
解が起こる程の高い局部加熱をその結果として生ずるた
め、一般的には非常に不利である。そのような結果は、
特に試料が伝染性の病気を持っている危険性のある臨床
系実施態様では、事実上間らかに認容しがたい。
本発明の他の目的は、トランスデューサー−容器の直接
接触を利用するが、以前必要とされた高レベルのエネル
ギーの使用を排除した、ＤＮＡハイブリッド形成用試料
を調製するための新しい方法を提供することにある。
接触を利用するが、以前必要とされた高レベルのエネル
ギーの使用を排除した、ＤＮＡハイブリッド形成用試料
を調製するための新しい方法を提供することにある。
（発明の概要）
本発明の原理および目的に従って、本発明は核酸プロー
ブとハイブリッド形成する核酸の試料を調製するための
新しい方法を提供し、この方法は、容器内に試験しよう
と−ｒる核酸を含む溝体試料を供給すること、容器の外
側をトランスデー−サー装置の振動エレメントと接触さ
せること、およびあらかじめ決めておいた予定時間の間
超音波処理装置に電気エネルギーを与えろこと、からな
る。
ブとハイブリッド形成する核酸の試料を調製するための
新しい方法を提供し、この方法は、容器内に試験しよう
と−ｒる核酸を含む溝体試料を供給すること、容器の外
側をトランスデー−サー装置の振動エレメントと接触さ
せること、およびあらかじめ決めておいた予定時間の間
超音波処理装置に電気エネルギーを与えろこと、からな
る。
理想から言えば、この予定時間とは約４０〜１０ロであ
る。、隋くべきことに、超斤波処理装カを約４０〜１０
ロー、最適には６０ ＫＨｚで共振させるために同調さ
せた場合、前述の方法が浸せき型超音波処理法とほとん
ど同程度効果的である本発明の最適な実施態様を図に示
す。図中、４０ＴＧ（ｚ以上で共振する超音波トランス
デユーサ−１２はハウジング（ｈｏｕｓｉｎｇ） １
７の内部の基部１９上に据付けたフレーム部材１８に設
置されている。超音波トランスデユーサ−１２は使い捨
てのキュベツト（ｃｕｖｅｔｔｅ）１１に対する超音波
先端部１の圧力を制御するために空気シリンダー（ｐｎ
ｅｕｍａｔｉｃ ｃｙｌｉｎｄｅｒ） １３上に据付け
られている。キュベツト１１は、スクリュー取付部位１
６を軸に回転しキュベツト１１の最上部に滑らせてかみ
合わせることのできる圧力保持器（ｆｏｒｃｅｒｅｔａ
ｉｎｅｒ） 、１０によって、先端１上に保持されてい
る。トランスデユーサ−１２は周波数発電機（ｆｒｅｑ
ｕｅｎｃｙ ｇｅｎｅｒａｔｏｒ） １５および電源
装置（ｐｏｗｅｒ ５ｕｌ）ｐＩ）’） １４によっ
て制御されて（・るが、それらの電気的接続については
示していない。
る。、隋くべきことに、超斤波処理装カを約４０〜１０
ロー、最適には６０ ＫＨｚで共振させるために同調さ
せた場合、前述の方法が浸せき型超音波処理法とほとん
ど同程度効果的である本発明の最適な実施態様を図に示
す。図中、４０ＴＧ（ｚ以上で共振する超音波トランス
デユーサ−１２はハウジング（ｈｏｕｓｉｎｇ） １
７の内部の基部１９上に据付けたフレーム部材１８に設
置されている。超音波トランスデユーサ−１２は使い捨
てのキュベツト（ｃｕｖｅｔｔｅ）１１に対する超音波
先端部１の圧力を制御するために空気シリンダー（ｐｎ
ｅｕｍａｔｉｃ ｃｙｌｉｎｄｅｒ） １３上に据付け
られている。キュベツト１１は、スクリュー取付部位１
６を軸に回転しキュベツト１１の最上部に滑らせてかみ
合わせることのできる圧力保持器（ｆｏｒｃｅｒｅｔａ
ｉｎｅｒ） 、１０によって、先端１上に保持されてい
る。トランスデユーサ−１２は周波数発電機（ｆｒｅｑ
ｕｅｎｃｙ ｇｅｎｅｒａｔｏｒ） １５および電源
装置（ｐｏｗｅｒ ５ｕｌ）ｐＩ）’） １４によっ
て制御されて（・るが、それらの電気的接続については
示していない。
一般的に、本発明の好適な方法はアッセイしようとする
核酸を含む細菌、細胞、ウィルスあるいはこれ以外の材
料の試料を適切な溶剤に接触させることからなり、ここ
で言う適切な溶剤とは最も好適には溶剤を形成するため
のカオトロピンク作用剤（ｃｈａｏｔｒｏｐｉｃ ａｇ
ｅｎｔ）の緩衝溶液であり、溶剤量は試料キュベツト添
加用にあらかじめ決めておいた量が最も好適であり、溶
１ＪｌＩへの接触は代表的には事実上注入方式で行なう
。あるいはまた、混合物をまずキュベツト内に形成させ
ることもできる。次いで、試料用キュベツトをマウンテ
ィングブラケット（ｍｏｕｎｔｉｎｇ ｂｒａｃｋｅｔ
）２０内に置き、そわからキュペントの底をトランスデ
ユーサ−１２の先端部１に接触するように置く３、圧力
保持器１０を回転させキュベツトにすべらせてかみ合わ
せてマウンティングプラケット２０内にキュベツトを保
持し、そうすることによって、あらかじめ予定していた
圧力、約８ポンド／（インチ）２〔０，５６ｋｌ？／ｉ
〕〜約３０ポンド／（インチ）２［２，１ｋｌ？／ｃ
１Ｔｌ）が先端１とキュベント１１との間の表面接触部
分に維持さねる。あるいはまた、圧力保持器を用いて維
持圧力を約１０ポンド（４，５ｋｇ）と等価にすること
もできる。このような圧力は、キュベツト１１の底部に
対して先端（ｔｉｐ）１を押付ける空気シリンダー１６
にあらかじめ予定していた圧力を与えることによって、
最も好都合に得られるであろう。次いで超音波処理装置
に、−船釣には１０秒〜１０分間、最も好適には１〜５
分間エネルギーを与える。最も好適には、容器は超音波
処理装置の先端１に接触あるいは隣接した壁の内側表面
と連続した表面を持つ容器であろう。このような表面が
不連続になった超音波処理装置用容器は、スイス特許出
願第４．９６１号（８６年４月）に゛ゝ超音波処理装Ｗ
ｔ （Ｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ Ｄｅｖｉｃｅ）“の名称
で記載されており、超音波エネルギーの伝達効果を高め
るものとして、ここで引用さｈている。
核酸を含む細菌、細胞、ウィルスあるいはこれ以外の材
料の試料を適切な溶剤に接触させることからなり、ここ
で言う適切な溶剤とは最も好適には溶剤を形成するため
のカオトロピンク作用剤（ｃｈａｏｔｒｏｐｉｃ ａｇ
ｅｎｔ）の緩衝溶液であり、溶剤量は試料キュベツト添
加用にあらかじめ決めておいた量が最も好適であり、溶
１ＪｌＩへの接触は代表的には事実上注入方式で行なう
。あるいはまた、混合物をまずキュベツト内に形成させ
ることもできる。次いで、試料用キュベツトをマウンテ
ィングブラケット（ｍｏｕｎｔｉｎｇ ｂｒａｃｋｅｔ
）２０内に置き、そわからキュペントの底をトランスデ
ユーサ−１２の先端部１に接触するように置く３、圧力
保持器１０を回転させキュベツトにすべらせてかみ合わ
せてマウンティングプラケット２０内にキュベツトを保
持し、そうすることによって、あらかじめ予定していた
圧力、約８ポンド／（インチ）２〔０，５６ｋｌ？／ｉ
〕〜約３０ポンド／（インチ）２［２，１ｋｌ？／ｃ
１Ｔｌ）が先端１とキュベント１１との間の表面接触部
分に維持さねる。あるいはまた、圧力保持器を用いて維
持圧力を約１０ポンド（４，５ｋｇ）と等価にすること
もできる。このような圧力は、キュベツト１１の底部に
対して先端（ｔｉｐ）１を押付ける空気シリンダー１６
にあらかじめ予定していた圧力を与えることによって、
最も好都合に得られるであろう。次いで超音波処理装置
に、−船釣には１０秒〜１０分間、最も好適には１〜５
分間エネルギーを与える。最も好適には、容器は超音波
処理装置の先端１に接触あるいは隣接した壁の内側表面
と連続した表面を持つ容器であろう。このような表面が
不連続になった超音波処理装置用容器は、スイス特許出
願第４．９６１号（８６年４月）に゛ゝ超音波処理装Ｗ
ｔ （Ｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ Ｄｅｖｉｃｅ）“の名称
で記載されており、超音波エネルギーの伝達効果を高め
るものとして、ここで引用さｈている。
（ｎｏｎ−１ｈＶｅＸｓｉｕａ）
本発明の熱浸１い１丁ｒτゴ法は、溶液中に核 ノ駿を
遊心させることを必要とする血液、尿、血清、脳牙髄液
、スワブ（ｓｗａｂ）、スワブからの抽出物、およびそ
の他のタイプの流体懸濁液とともに使用するのに適して
いる。最も好適には、負荷サイクルを無侵襲型超音波処
理装置１２に賦課して、先端１の表面およびキュベツト
１１の底の熱を消失させる。最適な時比率（ｄｕｔｙ
ｃｙｃｌｅ： 例えば、実効作用時間／全体時間、を
パー七ントで表示する）は約２５係〜約７５係である。
遊心させることを必要とする血液、尿、血清、脳牙髄液
、スワブ（ｓｗａｂ）、スワブからの抽出物、およびそ
の他のタイプの流体懸濁液とともに使用するのに適して
いる。最も好適には、負荷サイクルを無侵襲型超音波処
理装置１２に賦課して、先端１の表面およびキュベツト
１１の底の熱を消失させる。最適な時比率（ｄｕｔｙ
ｃｙｃｌｅ： 例えば、実効作用時間／全体時間、を
パー七ントで表示する）は約２５係〜約７５係である。
同様に、本発明の最も好適な実施態様は、超音波処理装
置を約６０ ＫＨｚの周波数で共振するように同調させ
ることである。
置を約６０ ＫＨｚの周波数で共振するように同調させ
ることである。
本発明の原理は、次の実施例を研究することによってよ
り良く理解されるであろう。
り良く理解されるであろう。
（実施例１）
リステリアインツク了（Ｌｉｓｔｅｒｉａ １ｎｎｏｃ
ｕａ’）を−晩培養した培養液の１ ｍｌア’ｌ コ−
ト＜ａｌｉｑｕｏｔ。
ｕａ’）を−晩培養した培養液の１ ｍｌア’ｌ コ−
ト＜ａｌｉｑｕｏｔ。
量が正確にわかっている試料Ｊ）一部を意味する。）か
ら得られたベレント状細胞を、０．０４０ＭのＴｒｉｓ
−Ｃｌおよび０．０１０Ｍのエチレンジアミン四酢酸塩
を含むｐＨ７，５の２．５Ｍチオシアン酸ダグ無侵襲型
超音波処理および酵素処理を行なって、それぞれの処理
様式によって遊離してくるハイブリッド形成可能なＲＮ
Ａ量を定量比較した。
ら得られたベレント状細胞を、０．０４０ＭのＴｒｉｓ
−Ｃｌおよび０．０１０Ｍのエチレンジアミン四酢酸塩
を含むｐＨ７，５の２．５Ｍチオシアン酸ダグ無侵襲型
超音波処理および酵素処理を行なって、それぞれの処理
様式によって遊離してくるハイブリッド形成可能なＲＮ
Ａ量を定量比較した。
使用したハイブリッド形成アッセイは、ハイブリッドを
形成していない一本鎖の放射能標識ＲＮＡを分解するＲ
ＮＡ５ｅ の能力を測定することを基本とした。このア
ッセ・イに使用した放射能標識ＲＮＡ（ＩＪボグローブ
）は、大腸菌の１６ ｓ ＩＪボソームの３′末端から
の７００塩基配列をＳＦ３゜ｐＧＥＭベクターにクロー
ン化したものである。
形成していない一本鎖の放射能標識ＲＮＡを分解するＲ
ＮＡ５ｅ の能力を測定することを基本とした。このア
ッセ・イに使用した放射能標識ＲＮＡ（ＩＪボグローブ
）は、大腸菌の１６ ｓ ＩＪボソームの３′末端から
の７００塩基配列をＳＦ３゜ｐＧＥＭベクターにクロー
ン化したものである。
５Ｐ６ＲＮＡポリメラーゼを３２ｐ標識のＧＴＰと共に
用い、ＲＮＡ転写物（即ち、リボグローブ）を作成した
。そわぞねの試料を１ ｎｇ のりボブロープと共に、
０．０４０ＭのＴｒ ｉ ５−ＣＡ’およびｏ、ｏｉ。
用い、ＲＮＡ転写物（即ち、リボグローブ）を作成した
。そわぞねの試料を１ ｎｇ のりボブロープと共に、
０．０４０ＭのＴｒ ｉ ５−ＣＡ’およびｏ、ｏｉ。
Ｍのエチレンジアミン四酢酸塩を含む２．５Ｍのチオシ
アン酸グアニジニウム（ｐＨ７，５）中で１５分間６７
°Ｃに保温した。そわぞれの試料を０．２〜／ｍｌのり
ボヌクレアービを含むｐＨ７，５の ０．０１ＭＴｒｉ
ｓ−Ｃｌ 溶液で２０倍に希釈し、さらに４５°Ｃで
１５分間保温した。遊離したハイブリッド形成可能な核
酸の定量は、残存ハイブリッドをトリクロロ酢酸で沈澱
させ、シンチレーションカウンターを用いて決定した。
アン酸グアニジニウム（ｐＨ７，５）中で１５分間６７
°Ｃに保温した。そわぞれの試料を０．２〜／ｍｌのり
ボヌクレアービを含むｐＨ７，５の ０．０１ＭＴｒｉ
ｓ−Ｃｌ 溶液で２０倍に希釈し、さらに４５°Ｃで
１５分間保温した。遊離したハイブリッド形成可能な核
酸の定量は、残存ハイブリッドをトリクロロ酢酸で沈澱
させ、シンチレーションカウンターを用いて決定した。
リステリアインツク了（Ｌｉｓｔｅｒｉａ １ｎｎｏｃ
ｕａ）を−晩培養した培養液から同じ液量を用いて、１
）ヒート システムズ・ウルトラソニックス（Ｈｅａｔ
Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ）・Ｗ−２２
５型を用いたプ。
ｕａ）を−晩培養した培養液から同じ液量を用いて、１
）ヒート システムズ・ウルトラソニックス（Ｈｅａｔ
Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ）・Ｗ−２２
５型を用いたプ。
ロープ浸せき型超音波処理、および１１）５−早泣／Ｉ
ｎｔ槍のムタノリシン（ｍｕｔａｎｏｌｙｓｉｎ）およ
び１０ｍｇ ／ ｔｎｌ量のリゾチームを含有する酵素
溶液との接触からなる生化学的処理、を行なった。ブソ
ーブ浸せき型超音波処理および生化学的処理がリステノ
アインノクアからハイブリッド形成可能な核酸を遊離す
る能力を、図示した好適な超音波処理装置を使用した無
侵襲型超音波処理のそれと比較した。この実験において
他のパラメーターはすべて同一にした。ヒート・システ
ムズ・ウルトラソニックス・Ｗ−２２５にはマイクロ千
ｙプホーン（ｍｉｃ、ｒｏｔｉｐ ｈｏｒｎ）を用い、
出力レベル５、時比率５０係で４分間走行させた。無侵
襲型超音波処理装置は時比率６６係で６分間走行させた
。無侵襲型超音波処理装置は次の表に示したように、ハ
イブリント形成可能な標的を遊離するという点では、プ
ローブ浸せき型超音波処理装置にと同程度効果的である
ことが証明された。
ｎｔ槍のムタノリシン（ｍｕｔａｎｏｌｙｓｉｎ）およ
び１０ｍｇ ／ ｔｎｌ量のリゾチームを含有する酵素
溶液との接触からなる生化学的処理、を行なった。ブソ
ーブ浸せき型超音波処理および生化学的処理がリステノ
アインノクアからハイブリッド形成可能な核酸を遊離す
る能力を、図示した好適な超音波処理装置を使用した無
侵襲型超音波処理のそれと比較した。この実験において
他のパラメーターはすべて同一にした。ヒート・システ
ムズ・ウルトラソニックス・Ｗ−２２５にはマイクロ千
ｙプホーン（ｍｉｃ、ｒｏｔｉｐ ｈｏｒｎ）を用い、
出力レベル５、時比率５０係で４分間走行させた。無侵
襲型超音波処理装置は時比率６６係で６分間走行させた
。無侵襲型超音波処理装置は次の表に示したように、ハ
イブリント形成可能な標的を遊離するという点では、プ
ローブ浸せき型超音波処理装置にと同程度効果的である
ことが証明された。
第１表 ハイブリッドを形成した
の１６ｓＲＮＡ
試行回数 １ ２ ３ ４生化学的処理
５．６９ ５．３６ ．３８７ ４．３０（実施例２） 培地中で一晩培養したリステリアインノクアのベレット
状細胞１ｍｌを、前述濃度のムタノリシンおよびリゾチ
ームの酵素溶液Ｑ、 ５ ｍｌで処理し、次いで２．５
Ｍグアニジン−イソチオシアン酸エステル緩衝液１、Ｏ
ｍｌに懸濁した。また、同液量のリステリアインノクア
を遠沈し、こうして得られたリステリアインノクアを１
． Ｑ ｍｌの採取しだてのヒトの血液に懸濁し、続い
てプローブ浸せき型超音波処理および無侵襲型超音波処
理を行なって比較した。本発明の無ｉ＞＞型超音波処理
装設およびミクロチップを使い出力設定を４にしたヒー
ト・システムズ・ウルトランニックスのＷ−２２５型は
両方共、時比率を３６係に設定した。
５．６９ ５．３６ ．３８７ ４．３０（実施例２） 培地中で一晩培養したリステリアインノクアのベレット
状細胞１ｍｌを、前述濃度のムタノリシンおよびリゾチ
ームの酵素溶液Ｑ、 ５ ｍｌで処理し、次いで２．５
Ｍグアニジン−イソチオシアン酸エステル緩衝液１、Ｏ
ｍｌに懸濁した。また、同液量のリステリアインノクア
を遠沈し、こうして得られたリステリアインノクアを１
． Ｑ ｍｌの採取しだてのヒトの血液に懸濁し、続い
てプローブ浸せき型超音波処理および無侵襲型超音波処
理を行なって比較した。本発明の無ｉ＞＞型超音波処理
装設およびミクロチップを使い出力設定を４にしたヒー
ト・システムズ・ウルトランニックスのＷ−２２５型は
両方共、時比率を３６係に設定した。
遊離したハイブリッド形成可能な核酸量は、３２ｐ−標
識リボプローブ（標識プローブ）および標識していない
捕獲プローブな用いて定量した。使用した標識プローブ
は、Ｔ７ｐＧＥＭベクターにクローン化した大腸菌の１
６８Ｉ＋ボンームの５′末端からのＲＮＡ転写配列であ
る。Ｔ７ＲＮＡポリメラーゼを３２ｐ標ａ！ＧＴＰと共
に用いてリボプローブを作成した、捕獲プローブは４４
個のオリコ５’ ＴＧＴＣＣＣＣＧＡＡＧＧＧΔＡＡＧ
ＣＴＣＴＧＴＣＴＣＣＡＧＡＧＴＧＧＴＣＡＡＡＧＡＴ
ＡＴろ′ＤＮＡからなり、これにターミナルデオキシヌ
クレオチジルトランスフェラーゼを用いて約１６０のデ
オキシアデニン基の尾を付けたものである。
識リボプローブ（標識プローブ）および標識していない
捕獲プローブな用いて定量した。使用した標識プローブ
は、Ｔ７ｐＧＥＭベクターにクローン化した大腸菌の１
６８Ｉ＋ボンームの５′末端からのＲＮＡ転写配列であ
る。Ｔ７ＲＮＡポリメラーゼを３２ｐ標ａ！ＧＴＰと共
に用いてリボプローブを作成した、捕獲プローブは４４
個のオリコ５’ ＴＧＴＣＣＣＣＧＡＡＧＧＧΔＡＡＧ
ＣＴＣＴＧＴＣＴＣＣＡＧＡＧＴＧＧＴＣＡＡＡＧＡＴ
ＡＴろ′ＤＮＡからなり、これにターミナルデオキシヌ
クレオチジルトランスフェラーゼを用いて約１６０のデ
オキシアデニン基の尾を付けたものである。
捕獲グローブおよび標識プローブを上述の１１ステリア
インノクアを入わだ血液と共に混合し、さらに表面に共
有結合したｄＴ１４をもつ磁性１粒子に加え、室温に５
分間保温した。捕獲プローブ、標識プローブ、および標
的核酸の間に形成されたハイブリッドをｄＴ１４磁性粒
子上に捕獲し、さらに磁界を用いてアッセイ混合物より
分離した。磁性粒子を洗浄して非特異的に結合している
物質を除去し、０．５係の洗剤および０．５４ＢＳＡを
含有する洗浄緩衝液に再懸濁し、６８℃で２分間加熱し
た。その後、磁性粒子は磁界を用いてアッセイ混合物か
ら分離し捨てた。残りの溶液（ｔｈｅ ｂｕｌｋｓｏｌ
ｕｔｉｏｎ） を別の新たな磁性ビーズに加え、同じ操
作をくり返した。その結果得られた残りの溶液全部をシ
ンチレーション混合物（ｓｃｉｎｔｉｌｌａ−ｔｉｏｎ
ｃｏｃｋｔａｉｌ） に加えシンチレーションカウ
ンターで計数した。アッセイは、無侵襲型超音波処理に
対しては３通り、プローブ浸せき型超音波処理に対して
は４通り行なった。５０μｌアリコートを１分、２分お
よび３分間超音波処理したもののそれぞれから取り出し
、ハイブリッド形成アッセイに使用した。超音波処理し
たそれぞれから遊離したハイブリッド形成可能な核酸量
を、ムクノリシン／リゾチーム処理（対照）によって遊
離した七ハと比較した。結果を次表に示す。それぞれの
時間において、無侵襲型超音波処理後ハイフリット形成
用に有用なハイブリッド形成可能な核酸の量は、プロー
ブ直接浸せき型超音波処理で得られた有効核酸量と同量
あるいはそれ以上であった。
インノクアを入わだ血液と共に混合し、さらに表面に共
有結合したｄＴ１４をもつ磁性１粒子に加え、室温に５
分間保温した。捕獲プローブ、標識プローブ、および標
的核酸の間に形成されたハイブリッドをｄＴ１４磁性粒
子上に捕獲し、さらに磁界を用いてアッセイ混合物より
分離した。磁性粒子を洗浄して非特異的に結合している
物質を除去し、０．５係の洗剤および０．５４ＢＳＡを
含有する洗浄緩衝液に再懸濁し、６８℃で２分間加熱し
た。その後、磁性粒子は磁界を用いてアッセイ混合物か
ら分離し捨てた。残りの溶液（ｔｈｅ ｂｕｌｋｓｏｌ
ｕｔｉｏｎ） を別の新たな磁性ビーズに加え、同じ操
作をくり返した。その結果得られた残りの溶液全部をシ
ンチレーション混合物（ｓｃｉｎｔｉｌｌａ−ｔｉｏｎ
ｃｏｃｋｔａｉｌ） に加えシンチレーションカウ
ンターで計数した。アッセイは、無侵襲型超音波処理に
対しては３通り、プローブ浸せき型超音波処理に対して
は４通り行なった。５０μｌアリコートを１分、２分お
よび３分間超音波処理したもののそれぞれから取り出し
、ハイブリッド形成アッセイに使用した。超音波処理し
たそれぞれから遊離したハイブリッド形成可能な核酸量
を、ムクノリシン／リゾチーム処理（対照）によって遊
離した七ハと比較した。結果を次表に示す。それぞれの
時間において、無侵襲型超音波処理後ハイフリット形成
用に有用なハイブリッド形成可能な核酸の量は、プロー
ブ直接浸せき型超音波処理で得られた有効核酸量と同量
あるいはそれ以上であった。
無侵襲型超音波処理 ３２．５ ５２ ４８．５
侵襲型超音波処理 ９，９ １６．９ ２３．３
（実施例３） 実施例２に設定した方法を、無侵襲型超音波処理と、ヒ
ート・システムズ・ウルトラソニックスのＷ−２２５型
を用い出力を６および５に設定したプローブ浸せき型超
音波処理とを比較する目的で繰り返し、間隔をあけて１
分、２分、６分、４分および５分間超音波処理したそれ
ぞれから取り出したアリコートを用い、同様の方法でハ
イブリッド形成アッセイを行なった。下の表に示すよう
、に、各々の時間共、無侵襲型超音波処理によってハイ
ブリッド形成に利用できるようになったハイブリット形
成可能な核酸量は、グローブ直接浸せき型超音波処理に
よって利用できるようになったそれと同量あるいはそわ
以上であった。
侵襲型超音波処理 ９，９ １６．９ ２３．３
（実施例３） 実施例２に設定した方法を、無侵襲型超音波処理と、ヒ
ート・システムズ・ウルトラソニックスのＷ−２２５型
を用い出力を６および５に設定したプローブ浸せき型超
音波処理とを比較する目的で繰り返し、間隔をあけて１
分、２分、６分、４分および５分間超音波処理したそれ
ぞれから取り出したアリコートを用い、同様の方法でハ
イブリッド形成アッセイを行なった。下の表に示すよう
、に、各々の時間共、無侵襲型超音波処理によってハイ
ブリッド形成に利用できるようになったハイブリット形
成可能な核酸量は、グローブ直接浸せき型超音波処理に
よって利用できるようになったそれと同量あるいはそわ
以上であった。
第ろ表 実施例乙の結果
遊離したＲＮＡ量の平均値
（ムクノリシン／リゾチーム処理＝１００）方 法
１分 ２分 ３分 ４分 ５分無侵襲型超音波処理
１，３ ２４．８ ３２Ｊ］ １５，９ ３１．２
侵襲型超音波処理 出力 ５ １．０ ６．０ １２．０ ８．６
２１．０出力 ３ １．２ ろ、９
５．ろ ５．０ ７．０
１分 ２分 ３分 ４分 ５分無侵襲型超音波処理
１，３ ２４．８ ３２Ｊ］ １５，９ ３１．２
侵襲型超音波処理 出力 ５ １．０ ６．０ １２．０ ８．６
２１．０出力 ３ １．２ ろ、９
５．ろ ５．０ ７．０
図は本発明の無侵襲製超音波処理装置の最も好適な実施
例の断面図である。 （外４名）
例の断面図である。 （外４名）
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、微生物に含まれる試料核酸をハイブリッド形成用に
遊離させるため、微生物を含む水性試料を処理する方法
において、 ａ）４０ＫＨｚ〜１００ＫＨｚの周波数で共振するよう
に同調された振動エレメントを持つ無侵襲型超音波処理
装置を準備すること； ｂ）前記水性試料を受けるための容器で、該振動エレメ
ントとかみ合わせるために改造した該振動エレメントと
かみ合う表面を少なくとも１つ有する該容器をさらに準
備すること； ｃ）該容器に前記水性試料を加えること； ｄ）該容器の該振動エレメントとかみ合う表面を該超音
波処理装置の該振動エレメントに接触させること； ｅ）該振動エレメントを約１０秒間以上振動させるため
に該超音波処理装置に電気エネルギーを与えること； の各段階からなることを特徴とする上記の水性試料処理
方法。 ２、該容器を、該振動エレメントとかみ合う表面を介し
て該振動エレメント超音波処理装置に約８ポンド／（イ
ンチ）＾２〔０．５６ｋｇ／ｃｍ＾２〕〜約３０ポンド
／（インチ）＾２〔２．１ｋｇ／ｃｍ＾２〕の圧力で接
触させる、請求項１記載の方法。 ３、該超音波処理装置を約６０ＫＨｚの周波数に同調さ
せる、請求項１記載の方法。 ４、該超音波処理装置が約２５％〜約７５％の正の時比
率を持ち、かつ電気エネルギーを与える段階が約３０秒
〜約５分間である、請求項３記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US179349 | 1980-08-18 | ||
| US07/179,349 US4983523A (en) | 1988-04-08 | 1988-04-08 | Methods for preparing sample nucleic acids for hybridization |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0243000A true JPH0243000A (ja) | 1990-02-13 |
Family
ID=22656215
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1089586A Pending JPH0243000A (ja) | 1988-04-08 | 1989-04-07 | ハイブリッド形成用試料核酸調製法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4983523A (ja) |
| EP (1) | EP0337690B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0243000A (ja) |
| AT (1) | ATE91155T1 (ja) |
| DE (1) | DE68907370T2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6046378A (en) * | 1995-03-14 | 2000-04-04 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wettable article |
| US6318158B1 (en) * | 2000-03-01 | 2001-11-20 | Coulter International Corp. | Sample preparation and delivery system employing external sonicator |
| JP2002540783A (ja) * | 1999-04-01 | 2002-12-03 | ビオメリオークス エス．ア． | 生物細胞の超音波分解の装置と方法 |
| JP2012523318A (ja) * | 2009-04-14 | 2012-10-04 | ビオカルティ ソシエテ アノニム | 集束音響エネルギーを用いたサンプルの処理方法 |
| JP2016517516A (ja) * | 2013-03-15 | 2016-06-16 | セラノス， インコーポレイテッド | サンプル作成のための装置、システムおよび方法 |
Families Citing this family (42)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5212191A (en) * | 1988-04-08 | 1993-05-18 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Heterocyclic compounds |
| EP0555449A1 (en) * | 1991-07-31 | 1993-08-18 | Amoco Corporation | Simultaneous shear and denaturation of nucleic acids |
| JP3143636B2 (ja) * | 1991-09-11 | 2001-03-07 | 株式会社サン・クロレラ | 細胞破裂によるクロレラ細胞壁の破砕方法 |
| US6071480A (en) * | 1994-12-22 | 2000-06-06 | Abbott Laboratories | Method for generating a standing sonic wave, methods of sonication with a standing sonic wave, and a standing sonic wave sonicator |
| US6235501B1 (en) * | 1995-02-14 | 2001-05-22 | Bio101, Inc. | Method for isolation DNA |
| US6558901B1 (en) * | 1997-05-02 | 2003-05-06 | Biomerieux Vitek | Nucleic acid assays |
| US6413783B1 (en) * | 1997-09-18 | 2002-07-02 | Meso Scale Technologies, Llc | Assay sonication apparatus and methodology |
| US7569342B2 (en) * | 1997-12-10 | 2009-08-04 | Sierra Molecular Corp. | Removal of molecular assay interferences |
| US20080064108A1 (en) * | 1997-12-10 | 2008-03-13 | Tony Baker | Urine Preservation System |
| DK1179585T3 (da) | 1997-12-24 | 2008-11-10 | Cepheid | Indretning og fremgangsmåde til lysis |
| DE19820466C2 (de) * | 1998-05-07 | 2002-06-13 | Fraunhofer Ges Forschung | Vorrichtung und Verfahren zur gezielten Beaufschlagung einer biologischen Probe mit Schallwellen |
| US6100084A (en) * | 1998-11-05 | 2000-08-08 | The Regents Of The University Of California | Micro-sonicator for spore lysis |
| US6887693B2 (en) | 1998-12-24 | 2005-05-03 | Cepheid | Device and method for lysing cells, spores, or microorganisms |
| US7914994B2 (en) * | 1998-12-24 | 2011-03-29 | Cepheid | Method for separating an analyte from a sample |
| US6431476B1 (en) | 1999-12-21 | 2002-08-13 | Cepheid | Apparatus and method for rapid ultrasonic disruption of cells or viruses |
| GB9903906D0 (en) * | 1999-02-19 | 1999-04-14 | Microbiological Res Authority | Method and apparatus for nucleic acid strand separation |
| US9073053B2 (en) | 1999-05-28 | 2015-07-07 | Cepheid | Apparatus and method for cell disruption |
| JP4022069B2 (ja) | 1999-05-28 | 2007-12-12 | シーフィード | 細胞破壊装置および方法 |
| US20040200909A1 (en) * | 1999-05-28 | 2004-10-14 | Cepheid | Apparatus and method for cell disruption |
| US6818185B1 (en) | 1999-05-28 | 2004-11-16 | Cepheid | Cartridge for conducting a chemical reaction |
| US8815521B2 (en) | 2000-05-30 | 2014-08-26 | Cepheid | Apparatus and method for cell disruption |
| US6291180B1 (en) * | 1999-09-29 | 2001-09-18 | American Registry Of Pathology | Ultrasound-mediated high-speed biological reaction and tissue processing |
| US6374684B1 (en) | 2000-08-25 | 2002-04-23 | Cepheid | Fluid control and processing system |
| US8048386B2 (en) * | 2002-02-25 | 2011-11-01 | Cepheid | Fluid processing and control |
| US6739531B2 (en) * | 2001-10-04 | 2004-05-25 | Cepheid | Apparatus and method for rapid disruption of cells or viruses |
| US6819027B2 (en) * | 2002-03-04 | 2004-11-16 | Cepheid | Method and apparatus for controlling ultrasonic transducer |
| GB2405640A (en) * | 2003-09-08 | 2005-03-09 | Secr Defence | Apparatus for ultrasonic microbial disruption |
| US7032605B1 (en) | 2003-10-15 | 2006-04-25 | Douglas B. Dority | Dual piston rotary valve |
| EP2187209B1 (de) * | 2008-11-12 | 2018-03-28 | Roche Diagnostics GmbH | Hämolysator |
| BRPI1014469A2 (pt) | 2009-04-14 | 2017-06-27 | Biocartis Sa | cavitação induzida hifu com limiar de energia reduzido |
| JP2012524242A (ja) | 2009-04-15 | 2012-10-11 | ビオカルティ ソシエテ アノニム | Ｐｃｒ反応をリアルタイムで監視するための光検出システム |
| EP2419220B1 (en) | 2009-04-15 | 2018-06-06 | Biocartis NV | Protection of bioanalytical sample chambers |
| JP5766180B2 (ja) | 2009-05-06 | 2015-08-19 | ビオカルティ ナームローゼ フェノーツハップＢｉｏｃａｒｔｉｓ ＮＶ | 試料キャリヤを切断するための装置 |
| DE102012206064A1 (de) * | 2012-04-13 | 2013-10-17 | Robert Bosch Gmbh | Verfahren zum Aufschließen von biologischen Zellen |
| US9587236B2 (en) | 2013-01-18 | 2017-03-07 | Folim G. Halaka | Continuous sonication for biotechnology applications and biofuel production |
| CN105102110B (zh) * | 2013-03-15 | 2018-01-26 | 默克专利股份公司 | 用于执行声处理的设备 |
| US9359632B2 (en) | 2013-03-15 | 2016-06-07 | Theranos, Inc. | Devices, systems and methods for sample preparation |
| CN113791202B (zh) | 2015-06-12 | 2024-07-12 | 芯易诊有限公司 | 用于分析流体样品的流体设备及用于分析生物样品的方法 |
| US10634602B2 (en) | 2015-06-12 | 2020-04-28 | Cytochip Inc. | Fluidic cartridge for cytometry and additional analysis |
| CN108027310B (zh) | 2015-07-14 | 2020-12-22 | 芯易诊有限公司 | 流体盒中的体积感测 |
| WO2019083844A1 (en) | 2017-10-23 | 2019-05-02 | Cytochip Inc. | DEVICES AND METHOD FOR MEASURING TARGET ANALYTES AND PARTICLES |
| US12546721B2 (en) * | 2023-01-23 | 2026-02-10 | Lightsense Technology, Inc. | Multispectral detection and classification of bacteria utilizing scattering and/or absorbance, excitation, emissions utilizing machine learning |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE952763C (de) * | 1952-07-23 | 1956-11-22 | Siemens Ag | Vorrichtung zum Homogenisieren od. dgl. von Fluessigkeiten, insbesondere von Milch, durch Schwingungsbehandlung |
| FR2344329A1 (fr) * | 1976-03-18 | 1977-10-14 | Deberghe & Lafaye | Procede et dispositif permettant de modifier les caracteristiques d'un fluide |
| US4575485A (en) * | 1983-08-29 | 1986-03-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Ultrasonic enhanced immuno-reactions |
| CH667599A5 (fr) * | 1986-12-11 | 1988-10-31 | Battelle Memorial Institute | Enceinte destinee a contenir un milieu liquide. |
| US4847193A (en) * | 1987-06-18 | 1989-07-11 | Gene-Trak Systems | Signal amplification in an assay employing a piezoelectric oscillator |
-
1988
- 1988-04-08 US US07/179,349 patent/US4983523A/en not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-04-07 JP JP1089586A patent/JPH0243000A/ja active Pending
- 1989-04-10 AT AT89303492T patent/ATE91155T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-04-10 DE DE89303492T patent/DE68907370T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-04-10 EP EP89303492A patent/EP0337690B1/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6046378A (en) * | 1995-03-14 | 2000-04-04 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wettable article |
| JP2002540783A (ja) * | 1999-04-01 | 2002-12-03 | ビオメリオークス エス．ア． | 生物細胞の超音波分解の装置と方法 |
| US6318158B1 (en) * | 2000-03-01 | 2001-11-20 | Coulter International Corp. | Sample preparation and delivery system employing external sonicator |
| JP2012523318A (ja) * | 2009-04-14 | 2012-10-04 | ビオカルティ ソシエテ アノニム | 集束音響エネルギーを用いたサンプルの処理方法 |
| JP2016517516A (ja) * | 2013-03-15 | 2016-06-16 | セラノス， インコーポレイテッド | サンプル作成のための装置、システムおよび方法 |
Also Published As
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