JPH024800A - インターロイキン２レセプターの除去モジュールおよびそれを用いたインターロイキン２レセプターの除去方法 - Google Patents
インターロイキン２レセプターの除去モジュールおよびそれを用いたインターロイキン２レセプターの除去方法Info
- Publication number
- JPH024800A JPH024800A JP15460988A JP15460988A JPH024800A JP H024800 A JPH024800 A JP H024800A JP 15460988 A JP15460988 A JP 15460988A JP 15460988 A JP15460988 A JP 15460988A JP H024800 A JPH024800 A JP H024800A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- monoclonal antibody
- module
- receptor
- interleukin
- present
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、ヒト血中のヒトインターロイキン２レセプタ
ー（ヒトインターロイキン２に対して親和性を有する高
分子蛋白質であり、その親和性によってインターロイキ
ン２の生物学的効果が調節されると考えられている。以
下、ＩＬ−２Ｒと略すこともある。）を除去するための
モジュール及びそのモジュールを用いてＩＬ−２Ｒを除
去する方法に関するものである。
ー（ヒトインターロイキン２に対して親和性を有する高
分子蛋白質であり、その親和性によってインターロイキ
ン２の生物学的効果が調節されると考えられている。以
下、ＩＬ−２Ｒと略すこともある。）を除去するための
モジュール及びそのモジュールを用いてＩＬ−２Ｒを除
去する方法に関するものである。
ヒトインターロイキン２（以下、Ｉ Ｌ−２と略すこと
もある）は、分子量が約１５，０００であり、抗原活性
化Ｔ細胞によって合成・分泌されるリンホカインの一種
である。ＩＬ−２は、抗原活性化Ｔ細胞の表面上に存在
するＩＬ−２Ｒとの相互作用によって活性化Ｔ細胞の増
殖刺激などの生物学的効果を示すと考えられている。
もある）は、分子量が約１５，０００であり、抗原活性
化Ｔ細胞によって合成・分泌されるリンホカインの一種
である。ＩＬ−２は、抗原活性化Ｔ細胞の表面上に存在
するＩＬ−２Ｒとの相互作用によって活性化Ｔ細胞の増
殖刺激などの生物学的効果を示すと考えられている。
ところで、最近、西日本、特に九州地方を中心として高
頻度に発生しているために注目されている成人Ｔ細胞白
血病（以下、ＡＴＬと略すこともある）の発症・進展は
、白血病細胞の由来が成熟したヘルパーＴｔ、ｔ［ｌ胞
であり、その表面に多数の■Ｌ−２Ｒが構成的に異常発
現していることなどから、ｒＬ−２システムの関与が示
唆されている。
頻度に発生しているために注目されている成人Ｔ細胞白
血病（以下、ＡＴＬと略すこともある）の発症・進展は
、白血病細胞の由来が成熟したヘルパーＴｔ、ｔ［ｌ胞
であり、その表面に多数の■Ｌ−２Ｒが構成的に異常発
現していることなどから、ｒＬ−２システムの関与が示
唆されている。
即ち、そのようなＡＴＬの発症・進展の説明としては、
ヘルパーＴｉＪＩｌ胞がＨＴＬＶ−１ウイルスに惑染し
てそのＴ細胞表面に多数のＩＬ−２Ｒを構成的に異常発
現した状態になる第一段階、次に、それらの［ＩＬ−２
ＲＪ及び［そのＨＴＬＶ−１ウイルス遺伝子由来の産物
（ｐ４０Ｘ）と抗原刺激に基づき異常産生されたＩＬ−
２Ｊとの反応によって、そのＴｊＩＩｌ胞が異常に増殖
する第二段階とからなる！Ｌ−２システムの２段階活性
化モデルがある［Ｍａｒｕｙａｍａ Ｍ、、ｅｔ ａｌ
、ｃｅｌ１４８．３４３＋（１９８７）〕。
ヘルパーＴｉＪＩｌ胞がＨＴＬＶ−１ウイルスに惑染し
てそのＴ細胞表面に多数のＩＬ−２Ｒを構成的に異常発
現した状態になる第一段階、次に、それらの［ＩＬ−２
ＲＪ及び［そのＨＴＬＶ−１ウイルス遺伝子由来の産物
（ｐ４０Ｘ）と抗原刺激に基づき異常産生されたＩＬ−
２Ｊとの反応によって、そのＴｊＩＩｌ胞が異常に増殖
する第二段階とからなる！Ｌ−２システムの２段階活性
化モデルがある［Ｍａｒｕｙａｍａ Ｍ、、ｅｔ ａｌ
、ｃｅｌ１４８．３４３＋（１９８７）〕。
従って、ＡＴＬ患者、ＨＴＬＶ−ＩまたはＨｌ■などの
ウィルスに惑染した者の血中からＩＬ−２Ｒを除去でき
れば、その患者の治療またはその感染者の発症防止が可
能になると考えられる。
ウィルスに惑染した者の血中からＩＬ−２Ｒを除去でき
れば、その患者の治療またはその感染者の発症防止が可
能になると考えられる。
また、局所的なＧＶＨＲ（移植片対宿主の反応）が急激
に増加した状態では、ＩＬ−２Ｒを有するＴ細胞が重要
な役割を演じているという報告（Ｈ，Ｄ、Ｖｏｌｋ、ｅ
ｔ ａｔＳＥｕｒ、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、１６ｓ １３
０９〜１３１２（１９８６） 〕がなされており、ＩＬ
−２Ｒを有する細胞を除去することによって臓器移植の
際に起きる拒絶反応を抑制することも可能と考えられる
。
に増加した状態では、ＩＬ−２Ｒを有するＴ細胞が重要
な役割を演じているという報告（Ｈ，Ｄ、Ｖｏｌｋ、ｅ
ｔ ａｔＳＥｕｒ、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、１６ｓ １３
０９〜１３１２（１９８６） 〕がなされており、ＩＬ
−２Ｒを有する細胞を除去することによって臓器移植の
際に起きる拒絶反応を抑制することも可能と考えられる
。
しかしながら、これまでにＩＬ−２Ｒ含有物質中からＩ
Ｌ−２Ｒを除去する方法は知られていない 〔発明が解決しようとする問題点〕 本発明の目的は、ＩＬ−２Ｒ含有物質中から、ＩＬ−２
Ｒを容易に、かつ効果的に除去するために用いることが
できるモノクローナル抗体を担持した担持体からなるモ
ジュール、及びそのモジュールを用いたＩＬ−２Ｒの除
去方法を提供するものである。
Ｌ−２Ｒを除去する方法は知られていない 〔発明が解決しようとする問題点〕 本発明の目的は、ＩＬ−２Ｒ含有物質中から、ＩＬ−２
Ｒを容易に、かつ効果的に除去するために用いることが
できるモノクローナル抗体を担持した担持体からなるモ
ジュール、及びそのモジュールを用いたＩＬ−２Ｒの除
去方法を提供するものである。
本発明者らは、前記の問題点を解決するために鋭意研究
した結果、本発明のモジュールを用いてＩＬ−２Ｒ含有
物質中からＩＬ−２Ｒを非常に容易に、かつ効果的に除
去することができることを見出し、本発明を完成した。
した結果、本発明のモジュールを用いてＩＬ−２Ｒ含有
物質中からＩＬ−２Ｒを非常に容易に、かつ効果的に除
去することができることを見出し、本発明を完成した。
部ち、本発明は、
ＩＬ−２Ｈに対して非常に高い特異的な反応性を有する
モノクローナル抗体を担持した担持体を有するカラムか
らなることを特徴とするＩＬ−２只の除去モジュールに
関するものである。
モノクローナル抗体を担持した担持体を有するカラムか
らなることを特徴とするＩＬ−２只の除去モジュールに
関するものである。
さらに、本発明は、そのモジュールを用いたＩＬ−２Ｒ
含有物質中のＩＬ−２Ｒの除去方法に関するものである
。
含有物質中のＩＬ−２Ｒの除去方法に関するものである
。
以下、本発明について、さらに詳しく説明する。
本発明のＩＬ−２Ｒ含有物質中からｒＬ−２Ｒを除去す
るために用いることができるモジュール（以下、「モジ
ュール１と略記する）は、モノクローナル抗体、その担
持体及びカラムを必須とするものである。
るために用いることができるモジュール（以下、「モジ
ュール１と略記する）は、モノクローナル抗体、その担
持体及びカラムを必須とするものである。
Ｉ Ｌ−２Ｒを除去するために用いるＩＩ、−２Ｒ含有
物質としては、ヒト血液などを挙げることができる。ヒ
ト血液を用いる場合には、全血をそのまま用いることも
できるが、予め血漿分離装置などで分離して得られた血
漿を用いることもできるし、また、血清として用いるこ
ともできる。ＩＬ−２Ｒ含有物質が溶液状態でない場合
には、予め適当な溶媒（例えば、水、緩衝液など）を用
いて溶液状態にしておく必要がある。
物質としては、ヒト血液などを挙げることができる。ヒ
ト血液を用いる場合には、全血をそのまま用いることも
できるが、予め血漿分離装置などで分離して得られた血
漿を用いることもできるし、また、血清として用いるこ
ともできる。ＩＬ−２Ｒ含有物質が溶液状態でない場合
には、予め適当な溶媒（例えば、水、緩衝液など）を用
いて溶液状態にしておく必要がある。
本発明のｒモジュールｊに使用されるモノクローナル抗
体としては、マウス（例えば、ＢＡＬＢ／ （？ウスな
ど）にＩＬ−２Ｒ（例えば、ＩＬ−２Ｒ１ＩＬ−２Ｒを
発現した細胞など）を免疫して得られたリンパ球とマウ
スのミエローマ細胞（例えば、ＳＰ２１０−Ａｇ１４な
どの抗体を分泌・産生じない細胞など）とをポリエチレ
ングリコールを用いて細胞融合して得られたハイプリド
ーマ株が産生したＩＬ−２Ｒに対して非常に高い特異的
な反応性を有するモノクローナル抗体であれば、どのよ
うなモノクローナル抗体を用いてもよいが、好ましくは
モノクローナル抗体Ｈ−４８（微工研条寄第１９１３）
、ＨＡ−２６（微工研条寄第１９１４）を用いた方がよ
く、さらに好ましくはＨ−４８を用いた方がよい。
体としては、マウス（例えば、ＢＡＬＢ／ （？ウスな
ど）にＩＬ−２Ｒ（例えば、ＩＬ−２Ｒ１ＩＬ−２Ｒを
発現した細胞など）を免疫して得られたリンパ球とマウ
スのミエローマ細胞（例えば、ＳＰ２１０−Ａｇ１４な
どの抗体を分泌・産生じない細胞など）とをポリエチレ
ングリコールを用いて細胞融合して得られたハイプリド
ーマ株が産生したＩＬ−２Ｒに対して非常に高い特異的
な反応性を有するモノクローナル抗体であれば、どのよ
うなモノクローナル抗体を用いてもよいが、好ましくは
モノクローナル抗体Ｈ−４８（微工研条寄第１９１３）
、ＨＡ−２６（微工研条寄第１９１４）を用いた方がよ
く、さらに好ましくはＨ−４８を用いた方がよい。
本発明の？モジュール１に使用されるモノクローナル抗
体を担持する担持体としては、ポリエチレン、ポリプロ
ピレン、ポリメチルメタクリレート、ポリビニルアルコ
ール、４メチルペンテン、ポリカーボネート、ポリスチ
レン、ＡＳ樹脂（アクリルニトリル−スチレン樹脂）な
どの合成高分子物質、ガラス、シリカゲルなどの無機物
質、または蛋白質、多糖などの生物に由来する不溶性の
生体高分子物質などを挙げることができるが、モノクロ
ーナル抗体と担持体との担持方法、担持力及び担持に要
するコストなどの観点から考えると、ポリエチレン、ポ
リプロピレンを用いる方が好ましい。
体を担持する担持体としては、ポリエチレン、ポリプロ
ピレン、ポリメチルメタクリレート、ポリビニルアルコ
ール、４メチルペンテン、ポリカーボネート、ポリスチ
レン、ＡＳ樹脂（アクリルニトリル−スチレン樹脂）な
どの合成高分子物質、ガラス、シリカゲルなどの無機物
質、または蛋白質、多糖などの生物に由来する不溶性の
生体高分子物質などを挙げることができるが、モノクロ
ーナル抗体と担持体との担持方法、担持力及び担持に要
するコストなどの観点から考えると、ポリエチレン、ポ
リプロピレンを用いる方が好ましい。
そのような担持体の形状は、本発明の目的に適合する限
り、ビーズ状、板状、棒状、管状などのいかなる形状で
あってもよいが、好ましくは管状の担持体である中空糸
として用いた方がよい。
り、ビーズ状、板状、棒状、管状などのいかなる形状で
あってもよいが、好ましくは管状の担持体である中空糸
として用いた方がよい。
本発明のｒモジュール」に使用されるカラムとしては、
ポリカーボネート、ポリスチレン、Ａｓ樹脂（アクリル
ニトリル−スチレン樹脂）などの合成高分子物質、ガラ
スなどを用いたものを挙げることができる。そして、そ
のカラムの形状としては、例えば、一端にＩＬ−２Ｒ含
有物質の溶液回路と容易に接続できる少なくとも１つの
入口部を有し、他端に少なくとも１つの出口部を有した
ものを挙げることができるが、モノクローナル抗体を担
持した担持体とＩＬ−２Ｒ含有物質の溶液とを有効に接
触させることができる場を提供することができるもので
ある限り、その形状は特に制限されない。
ポリカーボネート、ポリスチレン、Ａｓ樹脂（アクリル
ニトリル−スチレン樹脂）などの合成高分子物質、ガラ
スなどを用いたものを挙げることができる。そして、そ
のカラムの形状としては、例えば、一端にＩＬ−２Ｒ含
有物質の溶液回路と容易に接続できる少なくとも１つの
入口部を有し、他端に少なくとも１つの出口部を有した
ものを挙げることができるが、モノクローナル抗体を担
持した担持体とＩＬ−２Ｒ含有物質の溶液とを有効に接
触させることができる場を提供することができるもので
ある限り、その形状は特に制限されない。
前記の管状の担持体である中空糸のサイズとしては、内
径が１００〜５００μｍ、膜厚が１０〜２００μｍがよ
いが、内径は好ましくは３００〜４００μｍがよく、中
空糸の内径基準による総面積は０．３〜１．０ｍ”がよ
い。
径が１００〜５００μｍ、膜厚が１０〜２００μｍがよ
いが、内径は好ましくは３００〜４００μｍがよく、中
空糸の内径基準による総面積は０．３〜１．０ｍ”がよ
い。
本発明における担持体の表面（内面及び／または外面）
とモノクローナル抗体との担持方法としては、担持が比
較的強固であり、かつモノクローナル抗体とＩＬ−２Ｒ
との反応性が損なわれない限りどのような方法で行って
もよいが、例えば、物理的吸着による担持法、またはグ
ルタルアルデヒドなどの架橋剤を用いた化学的方法によ
る担持法などを用いることができる。
とモノクローナル抗体との担持方法としては、担持が比
較的強固であり、かつモノクローナル抗体とＩＬ−２Ｒ
との反応性が損なわれない限りどのような方法で行って
もよいが、例えば、物理的吸着による担持法、またはグ
ルタルアルデヒドなどの架橋剤を用いた化学的方法によ
る担持法などを用いることができる。
本発明の「モジュールｊを用いたＩＬ−２Ｒの除去は、
ＩＬ−２Ｒ含有物質（このような物質としては、例えば
、ＩＬ−２Ｒを含有する血液、血漿、血清などの溶液を
挙げることができる。該物質が溶液状態でない場合には
、予め水、緩衝液などの適当な溶媒で溶液状態にしてお
く必要がある。
ＩＬ−２Ｒ含有物質（このような物質としては、例えば
、ＩＬ−２Ｒを含有する血液、血漿、血清などの溶液を
挙げることができる。該物質が溶液状態でない場合には
、予め水、緩衝液などの適当な溶媒で溶液状態にしてお
く必要がある。
）を本発明の「モジュールｊ中を通過させることによっ
て行うことができる。
て行うことができる。
本発明で、「モジュールｊ中を通過させるＩＬ−２Ｒ含
有物質の濃度及び流速は、特に限定されないが、ＩＬ−
２Ｒ濃度が高い場合には、流速の低下及び／または本発
明のｒモジュールｊの追加連結などによって本発明の目
的を達成することができる。
有物質の濃度及び流速は、特に限定されないが、ＩＬ−
２Ｒ濃度が高い場合には、流速の低下及び／または本発
明のｒモジュールｊの追加連結などによって本発明の目
的を達成することができる。
このようにして、ＩＬ−２Ｒ含有物質の溶液からＩＬ−
２Ｒを除去するために用いたｒモジュール」は、そのｒ
モジュール１のモノクローナル抗体にアフィニティ結合
したＩ Ｌ−２Ｒを塩濃度及び／またはｐＨを高めて離
脱させることによって、Ｉ Ｌ−２Ｒ含有物質中のＩＬ
−２Ｒの除去に再利用することができる。
２Ｒを除去するために用いたｒモジュール」は、そのｒ
モジュール１のモノクローナル抗体にアフィニティ結合
したＩ Ｌ−２Ｒを塩濃度及び／またはｐＨを高めて離
脱させることによって、Ｉ Ｌ−２Ｒ含有物質中のＩＬ
−２Ｒの除去に再利用することができる。
以下、本発明を実施例によって具体的に説明する。なお
、これらの実施例は、本発明の範囲を限定するものでは
ない。
、これらの実施例は、本発明の範囲を限定するものでは
ない。
実施例１
〔「モジュール」の作製〕
担持体であるポリプロピレン製の高分子製中空系（膜面
積が０．３５ｍ”、内径が３２０μｍ、外径が４３０μ
ｍ、膜厚が５５μｍ、長さが１８ｃｍ）２０００本を納
めたカラム（ポリカーボネート製、内径が３ｃｍ、長さ
が２０ｃｍ、両端に各々１個づつ開口部を有する）の開
口部の一端から、ペリスタポンプ（井内盛栄堂製）を用
いて、流速５００ｍｊ！／ｈｒで約３０分間エタノール
を流して洗浄した後に、さらに、精製水で十分に洗浄し
た。
積が０．３５ｍ”、内径が３２０μｍ、外径が４３０μ
ｍ、膜厚が５５μｍ、長さが１８ｃｍ）２０００本を納
めたカラム（ポリカーボネート製、内径が３ｃｍ、長さ
が２０ｃｍ、両端に各々１個づつ開口部を有する）の開
口部の一端から、ペリスタポンプ（井内盛栄堂製）を用
いて、流速５００ｍｊ！／ｈｒで約３０分間エタノール
を流して洗浄した後に、さらに、精製水で十分に洗浄し
た。
次に、ＩＬ−２Ｒに対して非常に問い特異的な反応性を
有するモノクローナル抗体（Ｈ−４８）を溶解した溶液
（ｐＨ７，４のリン酸緩衝液に溶解し、２００μｇ／ｍ
ｊ２とする）の４００ｍｆをペリスタポンプ（井内盛栄
堂製）を用いて、流速約２５ｍ１／ｈｒで前記のエタノ
ール洗浄済カラムに流すことによって、このモノクロー
ナル抗体を中空糸の内面に物理的吸着によって担持した
。
有するモノクローナル抗体（Ｈ−４８）を溶解した溶液
（ｐＨ７，４のリン酸緩衝液に溶解し、２００μｇ／ｍ
ｊ２とする）の４００ｍｆをペリスタポンプ（井内盛栄
堂製）を用いて、流速約２５ｍ１／ｈｒで前記のエタノ
ール洗浄済カラムに流すことによって、このモノクロー
ナル抗体を中空糸の内面に物理的吸着によって担持した
。
次に、このカラムに１％のヒトＴ−グロブリン溶液を５
０ｍｊ２注入し、室温下３時間静置してこのモノクロー
ナル抗体で被覆されていない中空糸表面をヒトγ−グロ
ブリンで被覆した。これを０゜１Ｍｌ−リス−塩酸緩衝
液（ｐＨ８，０，０，１５Ｍ塩化ナトリウム）を用いて
十分に洗浄し、【Ｌ−２Ｒ含有物質中からＩＬ−２Ｒを
除去するために用いるｒモジュール」として、使用時ま
で４°Ｃで保存した。
０ｍｊ２注入し、室温下３時間静置してこのモノクロー
ナル抗体で被覆されていない中空糸表面をヒトγ−グロ
ブリンで被覆した。これを０゜１Ｍｌ−リス−塩酸緩衝
液（ｐＨ８，０，０，１５Ｍ塩化ナトリウム）を用いて
十分に洗浄し、【Ｌ−２Ｒ含有物質中からＩＬ−２Ｒを
除去するために用いるｒモジュール」として、使用時ま
で４°Ｃで保存した。
なお、このようにして作製したｒモジュールｊをそのま
ま保存していても、また、通常のアフィニティークロマ
トグラフィーに用いても、Ｖモジュールｊからの蛋白質
の離脱は殆ど認められなかった。
ま保存していても、また、通常のアフィニティークロマ
トグラフィーに用いても、Ｖモジュールｊからの蛋白質
の離脱は殆ど認められなかった。
実施例２
［緩衝液中のＩ Ｌ−２Ｒの除去］
２００ｍｊ！の０． Ｉ Ｍ Ｉ−リス−塩酸緩衝液（
ｐＨ８，０，０，１５Ｍ塩化ナトリウム）に、ヒトＴ細
胞培養上清から調製されたＩＬ−２Ｒの濃度が４０ｎｇ
／ｍｆ！となるように添加し、このＩＬ−２Ｒ含有物質
を実施例１で作製した「モジュールｊにペリスタポンプ
（井内盛栄堂製）を用いて流速５００ｍｆ／ｈｒで流し
、ｒモジュールＪの出口からの流出液をフラクションコ
レクターを用いて１０ｍ１づつ分画した。
ｐＨ８，０，０，１５Ｍ塩化ナトリウム）に、ヒトＴ細
胞培養上清から調製されたＩＬ−２Ｒの濃度が４０ｎｇ
／ｍｆ！となるように添加し、このＩＬ−２Ｒ含有物質
を実施例１で作製した「モジュールｊにペリスタポンプ
（井内盛栄堂製）を用いて流速５００ｍｆ／ｈｒで流し
、ｒモジュールＪの出口からの流出液をフラクションコ
レクターを用いて１０ｍ１づつ分画した。
各画分中のＩ Ｌ−２Ｈ濃度、及びｒモジュール」に流
す前のＩＬ−２Ｈ濃度を通常のサンドインチ酵素免疫測
定法（ＥＬＩＳＡ）に従って、次に示すようにして測定
した。
す前のＩＬ−２Ｈ濃度を通常のサンドインチ酵素免疫測
定法（ＥＬＩＳＡ）に従って、次に示すようにして測定
した。
モノクローナル抗体のＨ−４８をコーティングした分析
用マイクロタイタープレートの各ウェルに標準Ｉ Ｌ−
２Ｒまたは流出液を１００μ乏づつ入れて１時間反応さ
せ、これらの各ウェルを洗浄し、ペルオキシダーゼで標
識したモノクローナル抗体のＨＡ−２６溶液を１００μ
ｌづつ入れて室温で１時間反応させ、さらに各ウェルを
洗浄し、オルソフェニレンジアミン、Ｈ２０□からなる
基質溶液（ｐ Ｈ５，０）を１００μ２づつ入れて室温
で３０分間反応させ、２Ｎ硫酸溶液を５０μ２づつ入れ
た後に４９２ｎｍの吸光度を測定した。
用マイクロタイタープレートの各ウェルに標準Ｉ Ｌ−
２Ｒまたは流出液を１００μ乏づつ入れて１時間反応さ
せ、これらの各ウェルを洗浄し、ペルオキシダーゼで標
識したモノクローナル抗体のＨＡ−２６溶液を１００μ
ｌづつ入れて室温で１時間反応させ、さらに各ウェルを
洗浄し、オルソフェニレンジアミン、Ｈ２０□からなる
基質溶液（ｐ Ｈ５，０）を１００μ２づつ入れて室温
で３０分間反応させ、２Ｎ硫酸溶液を５０μ２づつ入れ
た後に４９２ｎｍの吸光度を測定した。
その結果、ＩＬ−２Ｒの除去率の平均値は、９２．３％
であった。
であった。
実施例３〜４
〔ヒト正常血清中のＩＬ−２Ｒの除去〕市販管理ヒト血
清であるネスコールＸ（化血研製）の１０ｍ２に、ＩＬ
−２Ｒの濃度が３９．５ ｎｇ ／ ｍ ｌとなるよう
にＩＬ−２Ｒを加えた。このＩＬ−２Ｒ含有物質を、実
施例１と同様の方法で作製した膜面積０．００８ｍ”の
アフィニティ力ラム（吸着したモノクローナル抗体量は
約１０ｍｇ）にペリスタポンプ（井内盛栄堂製）を用い
て流速的２０ ｍ ｌ ／ ｈ ｒまたは６０ｍｊ２／
ｈｒで流し、ｒモジュールｊの出口から流出した血清及
びｒモジュールＪに流す前の血清中のＩＬ−２Ｒの濃度
を実施例２と同様のＥＬ Ｉ ＳＡの方法で測定した。
清であるネスコールＸ（化血研製）の１０ｍ２に、ＩＬ
−２Ｒの濃度が３９．５ ｎｇ ／ ｍ ｌとなるよう
にＩＬ−２Ｒを加えた。このＩＬ−２Ｒ含有物質を、実
施例１と同様の方法で作製した膜面積０．００８ｍ”の
アフィニティ力ラム（吸着したモノクローナル抗体量は
約１０ｍｇ）にペリスタポンプ（井内盛栄堂製）を用い
て流速的２０ ｍ ｌ ／ ｈ ｒまたは６０ｍｊ２／
ｈｒで流し、ｒモジュールｊの出口から流出した血清及
びｒモジュールＪに流す前の血清中のＩＬ−２Ｒの濃度
を実施例２と同様のＥＬ Ｉ ＳＡの方法で測定した。
その結果、ＩＬ−２Ｒの除去率の平均値は、流速が約２
０ ｍ ｌ ／ ｈ ｒのときには９７．５％以上であ
り、６０ｍｆ／ｈｒのときには９７．５％であった。
０ ｍ ｌ ／ ｈ ｒのときには９７．５％以上であ
り、６０ｍｆ／ｈｒのときには９７．５％であった。
実施例５〜７
〔ヒト全血中のＩＬ−２Ｒの除去〕
ヘパリンを１単位／ ｍ １となるように添加したヒト
全血１５ｍｊ！に、ＩＬ−２Ｒを４０．０ｎｇ／ｍｌ濃
度となるように添加した。このｒＬ−２’Ｒ含有物質を
、実施例１と同様の方法で作製した膜面積０．００８ｍ
”のアフィニティ力ラム（吸着したモノクローナル抗体
量は約１０ｍｇ）にペリスタポンプ（井内盛栄堂製）を
用いて流速的２０ｍ１／ｈｒ、４０ｍＩ！、／ｈ ｒま
たは８０ｍＩ！、／ｈｒで流し、ｒモジュールＪの出口
から流出した全血及び「モジュールＪに流す前の全血を
血漿分離しく２０００ｒｐｍ、１５分間）、各血漿中の
ＩＲ−２Ｒの濃度を実施例２と同様のＥＬＩＳＡの方法
で測定した。
全血１５ｍｊ！に、ＩＬ−２Ｒを４０．０ｎｇ／ｍｌ濃
度となるように添加した。このｒＬ−２’Ｒ含有物質を
、実施例１と同様の方法で作製した膜面積０．００８ｍ
”のアフィニティ力ラム（吸着したモノクローナル抗体
量は約１０ｍｇ）にペリスタポンプ（井内盛栄堂製）を
用いて流速的２０ｍ１／ｈｒ、４０ｍＩ！、／ｈ ｒま
たは８０ｍＩ！、／ｈｒで流し、ｒモジュールＪの出口
から流出した全血及び「モジュールＪに流す前の全血を
血漿分離しく２０００ｒｐｍ、１５分間）、各血漿中の
ＩＲ−２Ｒの濃度を実施例２と同様のＥＬＩＳＡの方法
で測定した。
その結果、ＩＬ−２Ｈの除去率の平均値は、流速が約２
０ｍ／！／ｈｒのときには７９．７％であり、４０ｍｊ
！／ｈｒのときには７８．３％であり、８０ｍ ｌ ／
ｈ ｒのときには６８．８％であった。
０ｍ／！／ｈｒのときには７９．７％であり、４０ｍｊ
！／ｈｒのときには７８．３％であり、８０ｍ ｌ ／
ｈ ｒのときには６８．８％であった。
実施例８〜９
（ＡＴＬ患者血清中のＩＬ−２Ｒの除去〕ＩＬ−２Ｒ含
有物質であるＡＴＬ患者の血清１０ｍｆを、実施例１と
同様の方法で作製した膜面積０．００８ｍ”のアフィニ
ティ力ラム（吸着したモノクローナル抗体量は約１０ｍ
ｇ）にペリスタポンプ（井内盛栄堂製）を用いて流速的
２０ｍ！／ ｈ ｒまたは４０ｍｊ２／ｈｒで流し、ｒ
モジュール」の出口から流出した血清及びｒモジュール
ｊに流す前の血清中のＩＲ−２Ｒの濃度を実施例２と同
様のＥＬＩＳＡの方法で測定した。
有物質であるＡＴＬ患者の血清１０ｍｆを、実施例１と
同様の方法で作製した膜面積０．００８ｍ”のアフィニ
ティ力ラム（吸着したモノクローナル抗体量は約１０ｍ
ｇ）にペリスタポンプ（井内盛栄堂製）を用いて流速的
２０ｍ！／ ｈ ｒまたは４０ｍｊ２／ｈｒで流し、ｒ
モジュール」の出口から流出した血清及びｒモジュール
ｊに流す前の血清中のＩＲ−２Ｒの濃度を実施例２と同
様のＥＬＩＳＡの方法で測定した。
その結果、ＩＬ−２Ｒの除去率の平均値は、流速が約２
０ｍＡ／ｈｒのときには９２．９％であり、４０ｍｊ２
／ｈｒのときには９０．２％であった。なお、「モジュ
ール１に流す前の血清中のＩＲ−２Ｒの濃度は、４６０
ｎｇ／ｍｌであった。
０ｍＡ／ｈｒのときには９２．９％であり、４０ｍｊ２
／ｈｒのときには９０．２％であった。なお、「モジュ
ール１に流す前の血清中のＩＲ−２Ｒの濃度は、４６０
ｎｇ／ｍｌであった。
本発明のｒモジュール１を用いれば、Ｉ Ｌ−２Ｒ含有
物質から容易に、かつ効果的にＴＬを除去することがで
きる。
物質から容易に、かつ効果的にＴＬを除去することがで
きる。
Claims (2)
- （１）ヒトインターロイキン２レセプターに対して非常
に高い特異的な反応性を有するモノクローナル抗体を担
持した担持体を有するカラムからなることを特徴とする
ヒトインターロイキン２レセプターの除去モジュール。 - （２）請求項１に記載のモジュールを用いることを特徴
とするヒトインターロイキン２レセプター含有物質中の
ヒトインターロイキン２レセプターの除去方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15460988A JPH024800A (ja) | 1988-06-24 | 1988-06-24 | インターロイキン２レセプターの除去モジュールおよびそれを用いたインターロイキン２レセプターの除去方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15460988A JPH024800A (ja) | 1988-06-24 | 1988-06-24 | インターロイキン２レセプターの除去モジュールおよびそれを用いたインターロイキン２レセプターの除去方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH024800A true JPH024800A (ja) | 1990-01-09 |
Family
ID=15587923
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15460988A Pending JPH024800A (ja) | 1988-06-24 | 1988-06-24 | インターロイキン２レセプターの除去モジュールおよびそれを用いたインターロイキン２レセプターの除去方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH024800A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2793691A1 (fr) * | 1999-05-21 | 2000-11-24 | Hippocampe | Utilisation d'anticorps reconnaissant le recepteur de l'interleukine-2 dans la prevention et/ou le traitement des infections par les virus du sida |
-
1988
- 1988-06-24 JP JP15460988A patent/JPH024800A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2793691A1 (fr) * | 1999-05-21 | 2000-11-24 | Hippocampe | Utilisation d'anticorps reconnaissant le recepteur de l'interleukine-2 dans la prevention et/ou le traitement des infections par les virus du sida |
| WO2000071159A1 (fr) * | 1999-05-21 | 2000-11-30 | Hippocampe | Utilisation d'anticorps reconnaissant le recepteur de l'interleukine-2 dans la prevention et/ou le traitement des infections par les virus du sida. |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU648655B2 (en) | Adsorbed cellular fibronectin and process for separating and purifying fibronectins | |
| US5773224A (en) | Immunoselection system for cell elution | |
| US4390623A (en) | Serum-free and mitogen-free T-cell growth factor and process for making same | |
| US4406830A (en) | Regulatory glycoprotein for immune response and the use thereof in the production of T-cell growth factor | |
| US4659666A (en) | Pure alkaline phosphatase, its preparation and use | |
| EP0049611B1 (en) | A t-cell growth factor, and a process of producing the same | |
| JPS61235752A (ja) | 細胞分離材、分離器および分離方法 | |
| CN119193497A (zh) | 一种可递送核酸类药物的靶向性外泌体及其制备方法 | |
| JP2618497B2 (ja) | 腫瘍障害細胞誘導剤および腫瘍障害細胞誘導デバイス | |
| JP3441530B2 (ja) | 温度応答型分離材料及びその製造方法 | |
| JP3441496B2 (ja) | アフィニティー分離材料 | |
| JPH024800A (ja) | インターロイキン２レセプターの除去モジュールおよびそれを用いたインターロイキン２レセプターの除去方法 | |
| CN112760292A (zh) | 一种嵌合抗原受体纳米抗体外泌体及其纯化方法 | |
| JPH07106219B2 (ja) | インターロイキン２レセプターの除去装置およびそれを備えた血液体外循環装置 | |
| US4681844A (en) | Process for producing an Interleukin-1 preparation | |
| US4661447A (en) | Regulatory glycoprotein for immune response and the use there of in the production of T-cell growth factor | |
| Haas et al. | Techniques for separation and selection of antigen specific lymphocytes | |
| JPH03505287A (ja) | 生理学的流体を処理するための生物適合性、物質特異的試薬 | |
| Webb et al. | Fractionation of functional lymphocytes sensitized to basic encephalitogen on derivatized collagen and gelatin gels | |
| JPH0558707B2 (ja) | ||
| JP3970339B2 (ja) | 細胞分離用材料 | |
| JPH06269499A (ja) | 細胞分離方法及びその装置 | |
| US5093479A (en) | Regulatory glycoprotein for immune response and the use, thereof in the production of t-cell growth factor | |
| JPS6357597A (ja) | 血清アルブミンの除去または回収法 | |
| JPH0829428A (ja) | 光化学反応による、白血球分化抗原に対するモノクローナル抗体の担体への共有結合方法と、その担体を用いた細胞の分画定量方法、およびＬｙｍｐｈｏｋｉｎｅ Ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌの誘導方法。 |