JPH0260595A

JPH0260595A - α−ヒドロキシ−β−アミノ酸誘導体の製造方法

Info

Publication number: JPH0260595A
Application number: JP63211776A
Authority: JP
Inventors: Kunikazu Sakai; 酒井　邦和; Kyoko Takahashi; 恭子高橋; Atsuro Terajima; 孜郎寺島; Daiei Tsunemoto; 常本　大英; Tetsukiyo Kamijo; 上條　哲聖; Hiroshi Harada; 弘原田
Original assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd; Sagami Chemical Research Institute
Current assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd; Sagami Chemical Research Institute
Priority date: 1988-08-26
Filing date: 1988-08-26
Publication date: 1990-03-01

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、式（Ｉ）Ｈ（式中のＲはアミノ基の保護基である）で表されるアミ
ノアルデヒドに酵素の存在下シアン化水素を作用させ、
ついで加水分解することからなる一般式で表されるα−ヒドロキシ−β−アミノ酸誘導体の製造
方法に関する。

式（１）で表される化合物は、優れたヒトレニン阻害活
性を有し、経口投与が可能な高血圧症治療薬として有用
な、式（ｎ）で表されるα−ヒドロキシ−β−アミノ酸誘導体の製造
方法。

で表される化谷物（特開昭６２−２３４０７１参照）を
製造する上で重要な原料となるものである。

〔従来の技術〕

前記式（１）で表される化合物は、Ｌ−フェニルアラニ
ンより誘導される一般式（Ｉ）（式中、Ｒはアミノ基の保護基である）で表される化合
物に、シアン化ナトリウムやシアン化カリウム等を酸の
存在下に付加反応させ、シアンヒドリンとした後、塩酸
等の酸を用いて加水分解を行うことにより得ることでき
る（特開昭６２−２３４０７１　）。

〔発明が解決しようとする問題点〕

前記従来法は、式（１）で表される物質を製造する上に
おいて中間体として形成されるシアンヒドリン化合物を
含む反応残留物を単離するため、溶媒抽出や洗浄、乾燥
等の煩雑な操作を含んでいる。これらの操作は廃棄物を
ふやすことになり、シアン化合物の場合には後処理を煩
雑にする要素となるので、より簡便な方法が求められて
いる。

本発明者らは、この点を解決すべく鋭意検討を加えた結
果、上記煩雑な過程を含むことなく、少ない反応操作に
よる簡便な方法の開発に成功し、本発明を完成した。

〔問題点を解決するための手段〕

前記一般式（１）で表される化合物は下記の反応式に従
い製造することができる。

Ｈ〈式中、Ｒはアミノ基の保護基である〉本発明に用いら
れる原料（ＩＩＩ）はＬ−フェニルアラニンメチルエス
テル塩酸塩より容易に誘導することができる（下記参考
側参照）。

このようにして用意された式（ＩＩ［）の化合物は光学
活性体であり、その立体配置は（２Ｓ）である。

また、式（ＩＩＩ）の化合物より製造される式（１）の
化合物の立体配置は（２Ｒ，３Ｓ＞体が望ましいが、（
２Ｒ，３Ｓ）体と（２Ｓ、　３Ｓ）体の混合物であって
も一向に差し支えない。

第１工程本工程は、式（ＩＶ）で表されるし一フェニルアラニン
、メチルエステル塩酸塩のアミノ基にＲで示される保護
基をかけた後、エステル部分を還元し、アルコール体と
し、ついでフェニル基の還元および水酸基の酸化を行う
ものである。

Ｒで示されるアミノ基の保護基としては、酸性条件下に
除去できるものであれば良く、例えばホルミル基、アセ
チル基、ｌ−プロピルカルボニル基、ｔ−ブチルカルボ
ニル基、ジメチルアミノカルボニル基、エトキシカルボ
ニル基、１−プロピルオキシカルボニル基、ｔ〜ブチル
オキシカルボニル基等を挙げることができる。また、こ
れらの保護基は、公知の方法により導入することができ
る。（Ｔ、Ｗ。

Ｇｒｅｅｎｅ、　　”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　　Ｇｒｏ
ｕｐｓ　　ｉｎ　　Ｏｒｇａｎｉｃ　　５ｙｎｔｈｅｓ
ｉｓ”、　Ｊｏｈｎ−Ｗｉｌｅｙ　＋　５ｏｎｓ、Ｎｅ
ｗ　Ｙｏｒｋ、　１９８０．　ｐｐ２１８二２８７参照
）。

エステル部分の還元は適当な還元剤として例えば塩化リ
チウム存在下に水素化ホウ素す）　ＩＪウムを作用させ
ることで行なえる。

また、フェニル基の還元は接触水添によって容易に行う
ことができ、触媒としては、白金、ロジウム等を用いる
ことができる。

ついで水酸基の酸化は、例えばジメチルスルホキシド中
に二酸化イオウ−ピリジン錯体とトリエチルアミンを用
いる方法が好適な方法として例示できる（以上参考側参
照）。

第２工程本工程は式（ＩＩ［）で表されるアルデヒドに酵素の存
在下にシアン化水素を付加させ、シアンヒドリン（Ｖ）
を得るものである。

本工程で用いられる酵素、例えばマンゾロニトリルリア
ーゼ（ｍａｎｄｅｌｏｎｉｔｒｉｌｅ　１ｙａｓｅ）　
　（εＣ４，ｌ。

２、１０）は市販されており、容易に人手できるもので
ある。反応に際しては、上記酵素をイオン交換セルロー
スに吸着させた固定化酵素を用いるのが簡便であり、く
り返し使用が可能である。固定化に用、いられるイオン
交換セルロースとしては、ＥＣＴＥＯＬＡ−セルロース
を用いるのが好適である（Ｗ。

Ｂｅｃｋｅｒ　　ａｎｄ　　ε、　Ｐｆｅｉｌ、　　Ｊ
、　　八ｍ、　　Ｃｈｅｍ、　　Ｓａｃ、、　　１９６
Ｂ。

８８、４２９９参照）。

固定化酵素を充填した短いカラム中を式（ＩＩＩ）で表
されるアルデヒドとシアン化水素とを溶媒に溶かした溶
液を通過させることにより、反応は定量的に進行し、シ
アンヒドリン（Ｖ）を得ることができる。アルデヒド（
ＩｉＩ）に対してシアン化水素は１当量以上必要である
が、反応を定量的に完結させるためには、１．２当量あ
れＶ工充分である。

用いられる溶媒としてはメタノールやエタノール等のア
ルコール類および水であるが、一般には、水−アルコー
ルの混合溶媒またはアルコール溶媒である。反応温度は
一２０℃〜３０℃の範囲で行なえるが、シアン化水素の
気化を抑える意味において水冷下から室温までの範囲で
行うのが好適である。

生成したシアンヒドリン（Ｖ）は溶媒で抽出すれば単離
可能であるが、（参考側参照）実際にはその必要はなく
、カラム通過液に、加水分解に用いられる酸を加えれば
そのまま第３工程に進むことができる。

第３工程本工程は式（Ｖ）で表されるシアンヒドリンを単離また
は単離することなく酸加水分解してα−ヒドロキシ−β
−アミノ酸（１）を得るものである。

用いられる酸としては塩酸、硫酸、リン酸、メタンスル
ホン酸等があげられるが、塩酸を用いると生成物（Ｉ）
を塩酸塩として結晶化させることができる利点を持つの
で好適である。反応温度は８０℃〜１２０℃の加熱下に
行われるが、約１００℃で行うのが好適である。反応終
了後、塩酸溶液は不溶物をろ別の後、溶媒を留去するこ
とにより式Ｎ）の化合物を塩酸塩として得ることができ
る。

このとき生成物は、（２Ｒ，３Ｓ）体と（２３，３Ｓ）
体との混合物であるが、もしく２Ｒ，３Ｓ）体を単独に
ほしい時には、濃縮を結晶が析出しはじめた所で止め、
静置放冷すると（２Ｒ，３Ｓ）体が結晶化するのでろ別
により得ることができる。

以下参考例および実施例により更にくわしく説明する。

参考例　ｌＬ−フェニルアラニンメチルエステル塩Ｒ塩２５　ｇ（
１１６ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下において氷冷し、
無水テトラヒドロフラン１２０ｍ１に懸濁した。これに
トリエチルアミン１６ｉｆ　　（ＬＬ、６　ｇ＋　　１
１６　ｍｍｏｌ。

１．０当量）を加え、次いでトリエチルアミン１７．８
ｍｊ２　（１２，９ｇ、　１２８　ｍｍｏｌ、　　１．
１当量）トクロルキ酸イソプロピル１５．６ｍ１２　（
１６，８ｇ、１２８　＋ｙ＋ｎ＋ｏｌ、　　１．１当量
）を同時に滴下した。水冷下２．５時間、さらに室温で
２．５時間撹拌後、減圧下溶媒を留去し、ジエチルエー
テル２００　ｍ１２を加え、１規定の塩酸、飽和炭酸水
素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫
酸ナトリウムで乾燥後、減圧上溶媒を留去し、透明油状
のＮ−（インプロポキシカルボニル）−Ｌ−フェニルア
ラニンメチルエステル３２．１ｇ（定量的）を得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１３） δ：　１．１５（ｄ、　６Ｎ、　Ｊ＝５．０）、　３．
０５（ｄ、　２Ｈ，Ｊ：〜３．０）、　３．６３（ｓ、
　３１（）、　４．４０〜５．２０（ｍ。

３Ｈ）、　？、１２（ｓ、　５）１）参考例　２Ｎ−（イソプロポキシカルボニル）＝シーフェニルアラ
ニンメチルエステル３２．１　ｇ　（１１６ｍｍｏｌ）
を無水テトラヒドロフラン１５０　ｍｊ２に溶解し、塩
化リチウム１４．９　ｇ　（３４８ｍｍｏｌ、　３当量
）、水素化ホウ素す′トリウム１３．２　ｇ　（３４８
ｍｍｏｌ、　３当量）を加え、次いでエタノール３００
ｄを加え、室温で３時間撹拌後、過剰の試薬を酢酸エチ
ルで処理した。反応液から減圧上溶媒を留去し、残渣に
水、塩酸を加えてｐＨ２に調製し、ジエチルエーテルで
抽出、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸す）　ＩＪウムで
乾燥後、減圧上溶媒を留去し、白色結晶のＮ−（イソプ
ロポキシカルボニルン−Ｌ−フェニルアラニノール（定
量的）を得た。

’Ｈ−ＮＭＲ　（ＣＤＣ１３） δ：　１．１９（ｄ，　６１１，　Ｊ＝６．０）、　２
．８８（ｄ．　２Ｈ，　Ｊ３、５）、　３．７０〜４．
１０（ｍ，　３Ｈ）、　４．８０（ｂｒｓ。

ＩＨ）、　４．９５（ｓｅｐ，　ｌｆｌ，　Ｊ＝６．０
）、　７．３０（ｓ。

参考例　３Ｎ−（インプロポキシカル−ボニル）−Ｌ−フェニルア
ラニノール１７。２　ｇ　（６５　ｍｍｏｌ）をメタノ
ール４４ｍｌに溶解し、５％ロジウム−アルミナ１．７
２　ｇ　（１０ｗ／ｗ％）を加えて水素圧（６０ｋｇ／
ｃｍ’　〜５０ｋｇ／ａｍ’　）において１７時間撹拌
した。ろ過により触媒を除去し減圧上溶媒を留去し、さ
らにベンゼンを加えて再度減圧下乾燥し、透明油状の２
３−　（Ｎ−　（インプロポキシカルボニル）アミノ）
−３−　シクロへキシルプロパツール１６．２　ｇ　（
９２％）を得た。

’Ｈ−ＮＭＲ　（ＣＤＣ１３） δ：　１．２４（ｄ，　６日，　Ｊ＝６．５）、　０．
６０〜１．８５（ｍ。

１３１（）、　２ＪＯ（ｂｒｓ，　ＬＨ）、　３．４５
〜３．７０（ｍ。

３Ｈ）、　４．６８（ｂｒｓ，　　ＬＨ）、　４．８８
（ｓｅｐ．　　ｉｌｌ。

Ｊ＝６．　５）参考例　４２Ｓ−　（Ｎ−　（インプロポキシカルボニル）アミン
）−３−シクロへキシルプロパツール１、０２　ｇ　（
４．２ｍｍｏｌ）　　を約１８℃におき、無水ベンゼン
１．５ｍｊ２（１．３１　ｇ，　　１６．８　ｍｍｏｌ
、４当量）、無水ジメチルスルホキシド３．１ｆｆ！！
　（’３．４１　ｇ、４３、７　ｍｍｏｌ、１０当量）
、無水トリエチルアミン１．７６ｄ　（１．２８　ｇ。

１２、６　ｍｍｏｌ、３当量）を加え、撹拌しなから内
温１７℃にて三酸化イオウ−ピリジン錯塩２．ＯＯｇ（
１２．６　ｍｍｏｌ，　３当量）を徐々に加えた。４０
分反応後、氷水を加えジエチルエーテルで抽出し、１規
定の塩酸、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥後、減圧上溶媒を留去し、粗生成物１．０ｇを
得た。これをシリカゲルカラムクロマト（展開溶媒ヘキ
サン／酢酸エチル＝８／１）により精製し、淡黄色油状
の２３−　（Ｎ−（インプロポキシカルボニルアミノ）
−３−　シクロへキシルプロパナール８１２＋ｎｇ　（
８０％）を得た。

’Ｈ−ＮＭＲ　（ＣＤＣ１３） δ：　１．　２６　（６．　６Ｈ，　Ｊ＝６．　０）　
、　０．　８５　〜１．　７５　（ｍ。

１３Ｈ）、　４．　２８（ｂｒｓ，　１）１）、　４．
　９７＜ｓｅ９．　　ＩＬＪ＝６．０）、　　５．０３
＜ｂｒｓ、　　１Ｎ）、　　９．６３（ｓ、　　ＬＨ）
参考例　５酵素カラムの調製まず、イオン交換セルロースを蒸留水で膨潤した。次い
で１規定の水酸化ナトリウム水溶液、蒸留水で洗浄し、
カラム管につめ、これに脱塩した酵素の溶液を流し、吸
着させた。

また、脱塩していない酵素を用いた場合にも、吸着後の
セルロースを蒸留水でよく洗浄することにより同様の活
性を得ることができた。

参考例、６２Ｓ−（Ｎ−（インプロポキシカルボニル）アミノ）３
−シクロヘキシルプロパナール６４ｍｇ　（０，２７ｍ
ｍｏｌ）をメタノール：水（２：　１）の溶媒０，７ｍ
ｆｆ１に溶解し、液体シアン化水素２Ｑ４　（１３，７
ｍｇ、　　Ｑ、５１　ｍｍｏｌ、１、ｇ当量）を加え、
前記のように調製したカラムに通し、同じ溶媒的１０ｍ
１．で流出させた。これに飽和食塩水１５ｍ１を加え、
ジエチルエーテル１５ｍ１で２回抽出し、飽和食塩水で
洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を留
去した。このようにして得られた２−ヒドロキシ−３３
−（Ｎ−（インプロポキシカルボニル）アミン）−４−
シタ口へキシルブチロニトリル７２ｍｇ　（０，２７ｍ
ｍｏｌ）　（定量的）をクロロホルム２．５１ＴＬｉ２
に溶解し、ピリジン４４ｄ（２当量）、塩化アセチル２
２　ｔｉ　（２３，３ｍｇ、０．３　ｍｍｏｌ、１．１
当１）、４−ジメチルアミノピリジン１．６５　ｎ＋ｇ
　（０，０１４ｍｍｏｌ　、０．０５当量）を加え、室
温で１時間撹拌後、氷水を加えた。これをジエチルエー
テル５ｍｊ２で２回抽出し、飽和炭酸水素す）　ＩＪウ
ム水溶液、１規定の塩酸、飽和食塩水で順次洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去し、２Ｒ
体と２８体の比が２＝１の混合物である２−アセトキシ
３Ｓ−（Ｎ−（インプロポキシカルボニル）アミノ）−
４−シフシロへキシルブチロニトリル８７ｍｇ（定量的
）を得た。’　１（−ＮλＩＲのδ２．１６とδ２゜１
５のピークの積分比をもって２Ｒ体と２Ｓ体の立体生成
比とした。

）！−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ２） δ：　０．８８〜１．７３（ｍ、　１３Ｈ）、　１．２
５（ｄ、　６）１．　ＪＯ，６６）、　２．１５．２．
１６（各Ｓ、　合わせて３日）。

４．０１〜４．３２（ｍ、　ＩＨ）、　４．４６〜４．
７３（ｍ、　１）１）。

４．９６（ｓｅｐ、　ＩＨ，Ｊ＝０．６６）、　５．４
３（ｄ、　　ＩＨ）２Ｓ−（Ｎ−（イソプロポキンカル
ボニル）アミノ）＝３−シクロへキシルプロパナール４
００ｍｇ　（１，６５ｍｍｏｌ）をメタノール：水（２
：　１）混液８ｍｌに溶解し、液体シアン化水素７１Ｊ
　（４９，１ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ、１．１当量）を
加え氷冷し、流速的１．５ｍｆｆ／ｍｉｎ　でカラムに
通した。流出液を冷却した濃塩酸５１ＴＬｆ２の中に受
け、次いで同じ溶媒１５＋ｎＮを用いてカラムを洗浄し
、流出液に合わせた。減圧下にメタノールを留去し、さ
らに濃塩酸５１Ｔ＋７！を加え、１００℃で１５時間加
熱した。反応液を結晶が析出し始めるまで濃縮し、室温
に放置し、析出する白色結晶をろ取し、（２Ｒ，３Ｓ）
−３−アミノ−４−シクロへキシル−２−ヒドロキシ醋
酸塩酸塩１８４ｍｇ　（４７％）を得た。この’Ｈ−Ｎ
ＭＲは完全に標準品と一致した。また、ろ液を蒸発乾燥
し、２Ｒ体と２Ｓ体の比が１対１．７の混合物である３
Ｓ−アミノ−４−シクロへキシル−２−ヒドロキシ酪酸
塩酸塩１９３ｍｇ　（４３％）を得た。

Ｉｔ−ＮＭＲ（Ｄ、０） δ：　０．９０〜１．０２（ｍ、　２Ｈ）、　１．１３
〜１．２９（ｍ。

３Ｈ）、　ｌＪ６〜１．４５（ｍ、　ＩＩ（）、　１．
４９〜１．５６（ｍ、　　ＩＨ）、　　１．６２〜１．
７８（ｍ、　　６１（）、　　３．γＩ（ｄｔ、　　Ｉ
Ｈ，Ｊ＝３．４．　７．３）、　　４．３７（ｄ、　　
ＬＨ，Ｊ３．５）ｌＲ（ＫＢｒ　　ｄｉｓｋ）ｃ＋ｔｒ’３３６０、　３
２６０．　３０４０．　２９４０．　２８７０．　１７
３０゜ｍｍｏｌ）をメタノール：水（４：　１）混液６
ｍｊ２に溶解し、液体シアン化水素３５．６逆（２４，
４ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ、１．１当量）を加え、氷冷
し、流速約１．５ｄ／　ｍ　ｉ　ｎ　にてカラムに通し
た。次いで溶媒Ｌｏｎｅを用いてカラムを洗浄し、流出
液と洗液は共に３ｒｎ１．の冷却した濃塩酸の中に受け
、減圧下メタノールを留去し、さらに濃塩酸３ｍＪ２を
加えて１００℃で１５時間加熱した。反応終了後減圧下
溶媒を留去し、うずく黄色のついた結晶として３−アミ
ノ−４−シクロへキシル−２−ヒドロキシ酪酸塩酸塩１
９２ｍｇ（定量的）ヲ得り。’　Ｈ−１ｉＭＲ（７）δ
４．４Ｇ、δ４．４５付近のピークの積分比をもって２
Ｒ体と２Ｓ体の立体生成比とした。その比は約２対１で
あった。

Ｈ２Ｓ−（Ｎ−（インプロポキシカルボニル）アミノ）−
３−シクロへキシルプロパナール２００　ｍｇ　（０，
８２実施例　３〜９実施例２と類似の条件下に行ったその他の反応例を以下
に示す。

２：１２：１４：１４：１０．０８０．３３０．２５０．３９２．０２．０２．０１．９４　：１．１８　　　Ｍ　ｅ　ＯＨのみ　　０，１９　　１．１９　
　　　　４：１　　　　０．１４　　　１．１０Ｘ５０８×５０８×５０Ｘ８０Ｘ７０１０■ ０ｍｇ０ｍｇ２５０　　ｕｎｉｔ２５０　　ｕｎｉｔ２／１２／１３／１

Claims

【特許請求の範囲】

（１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＲはアミノ基の保護基である）で表されるアミ
ノアルデヒドに酵素の存在下シアン化水素を作用させ、
ついで加水分解することからなる一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表されるα−ヒドロキシ−β−アミノ酸誘導体の製造
方法。
（２）酵素がマンデロニトリルリアーゼ（ＥＣ４、１、
２、１０）である請求項（１）記載の製造方法。