JPH028741A - 非水溶性抗酸化剤を含有する水性分析試薬の調製方法 - Google Patents
非水溶性抗酸化剤を含有する水性分析試薬の調製方法Info
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- JPH028741A JPH028741A JP1654489A JP1654489A JPH028741A JP H028741 A JPH028741 A JP H028741A JP 1654489 A JP1654489 A JP 1654489A JP 1654489 A JP1654489 A JP 1654489A JP H028741 A JPH028741 A JP H028741A
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K15/00—Anti-oxidant compositions; Compositions inhibiting chemical change
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- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、水不溶性抗酸化剤を含む水性分析試薬を該抗
酸化剤を可溶化するのに有効な量の担体タンパク質を用
いて調製する方法に関す背景技術 分析試薬の安定性は製造元にとってもユーザにとっても
極めて関心のあるところである。適正な分析結果を得る
には安定な試薬が必要である。特に水性分析試薬は加水
分解と酸化を受は易い。水性分析試薬はフリーラジカル
開始連鎖反応を受けることがあり、その結果活性成分が
酸化されてしまう。この連鎖反応は、熱、光（紫外輻射
エネルギーを含む）、過酸化物、または重金属例えば銅
または鉄などによって開始され得る。その開始段階では
、フリーラジカルが形成され、それは次いで酸素と反応
して酸化過程を開始し得る更に別のフリーラジカルを生
じる。
酸化剤を可溶化するのに有効な量の担体タンパク質を用
いて調製する方法に関す背景技術 分析試薬の安定性は製造元にとってもユーザにとっても
極めて関心のあるところである。適正な分析結果を得る
には安定な試薬が必要である。特に水性分析試薬は加水
分解と酸化を受は易い。水性分析試薬はフリーラジカル
開始連鎖反応を受けることがあり、その結果活性成分が
酸化されてしまう。この連鎖反応は、熱、光（紫外輻射
エネルギーを含む）、過酸化物、または重金属例えば銅
または鉄などによって開始され得る。その開始段階では
、フリーラジカルが形成され、それは次いで酸素と反応
して酸化過程を開始し得る更に別のフリーラジカルを生
じる。
酸化は抗酸化剤の使用により防止することができる。水
性分析試薬に対する理想的な抗酸化剤は、広いｐＨ範囲
にわたって安定かつ有効であリ、その自然の状態および
酸化された状態のいずれの状態においても安定し、低濃
度で有効であり、熱安定性があり、また分析方法におけ
る他のすべての試薬と相溶性があるべきである。
性分析試薬に対する理想的な抗酸化剤は、広いｐＨ範囲
にわたって安定かつ有効であリ、その自然の状態および
酸化された状態のいずれの状態においても安定し、低濃
度で有効であり、熱安定性があり、また分析方法におけ
る他のすべての試薬と相溶性があるべきである。
水性分析試薬への抗酸化剤の溶解性および分散液の均一
性は給送および分注にとって特に重要である。
性は給送および分注にとって特に重要である。
通常用いられる水溶性抗酸化剤には亜硫酸ナトリウム、
メタ重亜硫酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、チオ硫
酸ナトリウムおよびアスコルビン酸が挙げられる。これ
らの物質は試薬中の活性成分よりも酸化ポテンシャルが
低いので、それらは優先的に酸化を受ける。酸化を受け
ることにより、これらの抗酸化剤は速やかに消費され、
そして−旦消費されてしまうと、それらはもはや試薬を
有効に安定化することはない。
メタ重亜硫酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、チオ硫
酸ナトリウムおよびアスコルビン酸が挙げられる。これ
らの物質は試薬中の活性成分よりも酸化ポテンシャルが
低いので、それらは優先的に酸化を受ける。酸化を受け
ることにより、これらの抗酸化剤は速やかに消費され、
そして−旦消費されてしまうと、それらはもはや試薬を
有効に安定化することはない。
低濃度ではこれらの抗酸化剤は水性分析試薬の長期安定
性に対し有意には貢献しない。より高い濃度ではそれら
抗酸化剤はもはや可溶でなくなる可能性がある。
性に対し有意には貢献しない。より高い濃度ではそれら
抗酸化剤はもはや可溶でなくなる可能性がある。
水不溶性抗酸化剤、例えばブチル化ヒドロキシアニソー
ル（ＢＨＡ）およびブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨ
Ｔ）は様々な化粧品および医薬における油脂の酸化劣化
を遅延させるのに用いることができる。これらの抗酸化
剤はフリーラジカルと反応しそして連鎖反応を止めるこ
とによって働く。水不溶性抗酸化剤は長期安定性を高め
るのに低濃度、典型的には０．１％しか必要としない点
で理想的である。
ル（ＢＨＡ）およびブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨ
Ｔ）は様々な化粧品および医薬における油脂の酸化劣化
を遅延させるのに用いることができる。これらの抗酸化
剤はフリーラジカルと反応しそして連鎖反応を止めるこ
とによって働く。水不溶性抗酸化剤は長期安定性を高め
るのに低濃度、典型的には０．１％しか必要としない点
で理想的である。
ＪＰ ５７０７４３８４ （１９８２年５月ｌＯ日発行
）は少なくとも０．００５％の水溶性タンパク質を含む
ポリヒドロキシル化合物、例えばグリコールまたは糖に
水不溶性抗酸化剤溶液を撹拌下に滴下して加えることに
よる抗酸化剤組成物の調製を記載している。安定化され
るべき材料は水性溶液ではなかった。
）は少なくとも０．００５％の水溶性タンパク質を含む
ポリヒドロキシル化合物、例えばグリコールまたは糖に
水不溶性抗酸化剤溶液を撹拌下に滴下して加えることに
よる抗酸化剤組成物の調製を記載している。安定化され
るべき材料は水性溶液ではなかった。
抗酸化剤を直接水性溶液に添加することにより水不溶性
抗酸化剤を水性溶液中で可溶化しようとする試みがなさ
れている。しかしながら−数的に抗酸化剤の水溶液中の
濃度が極めて低いので酸化分解に対し有効な安定化を得
ていない。
抗酸化剤を水性溶液中で可溶化しようとする試みがなさ
れている。しかしながら−数的に抗酸化剤の水溶液中の
濃度が極めて低いので酸化分解に対し有効な安定化を得
ていない。
水不溶性抗酸化剤により安定化される水性分析試薬が必
要とされている。
要とされている。
水不溶性抗酸化剤を含有する水性分析試薬を調製するた
めの本発明の方法は、次の諸段階、すなわち （ａ）まず水不溶性抗酸化剤を水と混和し得る溶媒に溶
解して第一溶液を形成し、そして（ｂ）前記水不溶性抗
酸化剤を溶解状態に保つのに有効な量の担体タンパク質
と活性成分とを含有する水性溶液と該第一溶液とを混合
する 段階より成る。
めの本発明の方法は、次の諸段階、すなわち （ａ）まず水不溶性抗酸化剤を水と混和し得る溶媒に溶
解して第一溶液を形成し、そして（ｂ）前記水不溶性抗
酸化剤を溶解状態に保つのに有効な量の担体タンパク質
と活性成分とを含有する水性溶液と該第一溶液とを混合
する 段階より成る。
本発明の方法は、水不溶性抗酸化剤を含有する水性分析
試薬の調製に有用である。水性分析試薬は酸化により劣
化し得る活性成分、例えば酵素および担体を含有する。
試薬の調製に有用である。水性分析試薬は酸化により劣
化し得る活性成分、例えば酵素および担体を含有する。
水不溶性抗酸化剤、例えばブチル化ヒドロキシアニソー
ル（ＢＨＡ）およびブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＩ
Ｔ）は、水性溶液中に形成されるフリーラジカルと反応
しそしてフリーラジカル開始連鎖反応の進行を止めるこ
とによって活性成分を保護することができる。ＢＨＡお
よびＢＨＴは低濃度で有効であり、従って水性分析試薬
に用いるのに理想的である。
ル（ＢＨＡ）およびブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＩ
Ｔ）は、水性溶液中に形成されるフリーラジカルと反応
しそしてフリーラジカル開始連鎖反応の進行を止めるこ
とによって活性成分を保護することができる。ＢＨＡお
よびＢＨＴは低濃度で有効であり、従って水性分析試薬
に用いるのに理想的である。
意外にも、有効料のタンパク質を用いて水不溶性抗酸化
剤を活性成分の水性溶液中に取り込むことができること
がわかった。そのタンパク質は抗酸化剤の担体として働
くことができる。
剤を活性成分の水性溶液中に取り込むことができること
がわかった。そのタンパク質は抗酸化剤の担体として働
くことができる。
水と混和し得る溶媒中に溶解された水不溶性抗酸化剤が
タンパク質表面に非共有結合的に結合でき、そのために
該抗酸化剤が溶液状態または溶液中で均一分散状態に保
たれるのが助長されるものと考えられる。様々なタンパ
ク質、例えばアルブミンおよびグロブリンをこの目的に
用いることができる。アルブミン、例えば牛血清アルブ
ミン（Ｂ Ｓ Ａ）は利用可能な多くの結合部位を有し
ている故に好ましい。
タンパク質表面に非共有結合的に結合でき、そのために
該抗酸化剤が溶液状態または溶液中で均一分散状態に保
たれるのが助長されるものと考えられる。様々なタンパ
ク質、例えばアルブミンおよびグロブリンをこの目的に
用いることができる。アルブミン、例えば牛血清アルブ
ミン（Ｂ Ｓ Ａ）は利用可能な多くの結合部位を有し
ている故に好ましい。
本発明の方法は水不溶性抗酸化剤をまず溶解し、次いで
タンパク質および活性成分を含有する水性溶液に添加す
る二段階の手順により成る、特に水不溶性抗酸化剤、例
えばＢＨＡおよびＢＨＴを水と混和し得る溶媒に溶解す
る。
タンパク質および活性成分を含有する水性溶液に添加す
る二段階の手順により成る、特に水不溶性抗酸化剤、例
えばＢＨＡおよびＢＨＴを水と混和し得る溶媒に溶解す
る。
アルコール、例えばエタノールおよび水と混和し得ない
溶媒と水と混和し得る溶媒との混合物（得られる混合物
は水と混和し得る）等の多くの水と混和し得る溶媒を用
いることができる。
溶媒と水と混和し得る溶媒との混合物（得られる混合物
は水と混和し得る）等の多くの水と混和し得る溶媒を用
いることができる。
プロピレングリコールもＢＨＡの可溶化に用いることが
できる。しかしながら、ＢＨＴは有効に用いるにはプロ
ピレングリコールに十分に可溶でない。エタノールは特
に好ましい溶媒である。
できる。しかしながら、ＢＨＴは有効に用いるにはプロ
ピレングリコールに十分に可溶でない。エタノールは特
に好ましい溶媒である。
水不溶性抗酸化剤を溶解することにより形成された溶液
を次いで活性成分と有効量の担体タンパク質とを含有す
る水性溶液と混合する。有効量の担体タンパク質とは水
不溶性抗酸化剤を非共有結合的に結合してそれを溶解状
態または溶液中で均一分散状態に保つ量である。担体タ
ンパク質対ＢＨＡおよびＢＨＴの重量比はそれぞれ１０
：ｌおよび１００：１より大にすべきである。それら二
溶液を混合すると、水不溶性抗酸化剤は溶解状態のまま
となり、そして安定化された水性分析試薬が形成される
。
を次いで活性成分と有効量の担体タンパク質とを含有す
る水性溶液と混合する。有効量の担体タンパク質とは水
不溶性抗酸化剤を非共有結合的に結合してそれを溶解状
態または溶液中で均一分散状態に保つ量である。担体タ
ンパク質対ＢＨＡおよびＢＨＴの重量比はそれぞれ１０
：ｌおよび１００：１より大にすべきである。それら二
溶液を混合すると、水不溶性抗酸化剤は溶解状態のまま
となり、そして安定化された水性分析試薬が形成される
。
他に多くの要因があるが、とりわけ水不溶性抗酸化剤が
通常用いられる水溶性抗酸化剤に比べ有利とする主な点
はそれらが低濃度で有効でありかつ長時間安定であると
いう点である。
通常用いられる水溶性抗酸化剤に比べ有利とする主な点
はそれらが低濃度で有効でありかつ長時間安定であると
いう点である。
次に実施例を挙げて本発明を説明する：実施例
ＢＨＡおよびＢ）ＩＴを含有する水性テトラヒドロカン
ナビノール（ＴＨＣ）酵素接合体試薬の調製ＢＨＡおよ
びＢＩＴの各々の２０１１１？／＋１１２原液を、２０
０ｍ９のＢｔ（Ａ （Ｓｉｇｍａ社から入手可。カタロ
グ番号Ｂ１２５３）およびＢＨＴ （Ｓｉｇｍａ社から
入手可。カタログ番号Ｂ１３７８）を１０ｍＱ等分のエ
タノールに溶解することにより調製した。
ナビノール（ＴＨＣ）酵素接合体試薬の調製ＢＨＡおよ
びＢＩＴの各々の２０１１１？／＋１１２原液を、２０
０ｍ９のＢｔ（Ａ （Ｓｉｇｍａ社から入手可。カタロ
グ番号Ｂ１２５３）およびＢＨＴ （Ｓｉｇｍａ社から
入手可。カタログ番号Ｂ１３７８）を１０ｍＱ等分のエ
タノールに溶解することにより調製した。
テトラヒドロカンナビノール酵素接合体試薬〔△” −
ＴＨＣ−Ｇ６ＰＤＨ接合体、トリス（ヒドロキシメチル
）アミノメタン緩衝剤、増量剤、安定化剤および窒化ナ
トリウム； ｐＨ８，０）の二つの溶液は、０．５ｍＱ
の３０％牛血清アルブミン（ＢＳＡ）溶液を１．４ｍ１
１のテトラヒドロカンナビノール酵素接合体試薬に添加
することにより調製した。
ＴＨＣ−Ｇ６ＰＤＨ接合体、トリス（ヒドロキシメチル
）アミノメタン緩衝剤、増量剤、安定化剤および窒化ナ
トリウム； ｐＨ８，０）の二つの溶液は、０．５ｍＱ
の３０％牛血清アルブミン（ＢＳＡ）溶液を１．４ｍ１
１のテトラヒドロカンナビノール酵素接合体試薬に添加
することにより調製した。
Ｑ、１ｍｆｆ等分のＢＨＡｉ液をそれら接合体試薬溶液
の一方に添加し、そして０．１肩Ｑ等分のＢＩＴ原液を
他方に添加した。ＢＨＡは完全に可溶化したのに対し、
ＢＩＴはテトラヒドロカンナビノール酵素接合体試薬溶
液中均一な分散液を形成した。前記ＢＳＡ溶液の代わり
に０ 、５ｔＱの脱イオン水を使用することにより二つ
の対照品に調製した。担体タンパク質が存在しない場合
ＢＨＡ、 ＢＩＴのいずれも可溶化されなかった。
の一方に添加し、そして０．１肩Ｑ等分のＢＩＴ原液を
他方に添加した。ＢＨＡは完全に可溶化したのに対し、
ＢＩＴはテトラヒドロカンナビノール酵素接合体試薬溶
液中均一な分散液を形成した。前記ＢＳＡ溶液の代わり
に０ 、５ｔＱの脱イオン水を使用することにより二つ
の対照品に調製した。担体タンパク質が存在しない場合
ＢＨＡ、 ＢＩＴのいずれも可溶化されなかった。
以上、本発明の詳細な説明したが、本発明はさらに次の
実施態様によってこれを要約して示すことができる。
実施態様によってこれを要約して示すことができる。
ｌ）次の諸段階、すなわち
（ａ）まず非水溶性抗酸化剤を水と混和し得る溶媒に溶
解して第一溶液を形成し、そして（ｂ）前記非水溶性抗
酸化剤を溶解状態に保つのに有効な量の担体タンパク質
と活性成分とを含有する水性溶液と該第一溶液とを混合
する 段階より成る、非水溶性抗酸化剤を含有する水性分析試
薬の調製方法。
解して第一溶液を形成し、そして（ｂ）前記非水溶性抗
酸化剤を溶解状態に保つのに有効な量の担体タンパク質
と活性成分とを含有する水性溶液と該第一溶液とを混合
する 段階より成る、非水溶性抗酸化剤を含有する水性分析試
薬の調製方法。
２）非水溶性抗酸化剤がブチル化ヒドロキシアニソール
またはブチル化ヒドロキシトルエンである前項ｌ記載の
方法。
またはブチル化ヒドロキシトルエンである前項ｌ記載の
方法。
３）非水溶性抗酸化剤がブチル化ヒドロキシアニソール
であり、そして担体タンパク質対ブチル化ヒドロキシア
ニソールの重量比がＩＯ対対置以上ある前項２記載の方
法。
であり、そして担体タンパク質対ブチル化ヒドロキシア
ニソールの重量比がＩＯ対対置以上ある前項２記載の方
法。
４）非水溶性抗酸化剤がブチル化ヒドロキシトルエンで
あり、そして担体タンパク質対ブチル化ヒドロキシトル
エンの重量比が１０１１以上である前項２記載の方法。
あり、そして担体タンパク質対ブチル化ヒドロキシトル
エンの重量比が１０１１以上である前項２記載の方法。
５）非水溶性抗酸化剤がブチル化ヒドロキシアニソール
であり、そして水と混和し得る溶媒がアルコールおよび
プロピレングリコールよりなる群より選択される前項２
記載の方法。
であり、そして水と混和し得る溶媒がアルコールおよび
プロピレングリコールよりなる群より選択される前項２
記載の方法。
６）非水溶性抗酸化剤がブチル化ヒドロキシアトルエン
であり、そして水と混和し得る溶媒がアルコールである
前項２記載の方法。
であり、そして水と混和し得る溶媒がアルコールである
前項２記載の方法。
７）水と混和し得る溶媒がエタノールである前項６記載
の方法。
の方法。
８）担体タンパク質がアルブミンである前項１記載の方
法。
法。
９）担体タンパク質が牛血清アルブミンである前項８記
載の方法。
載の方法。
特許出願人 イー・アイ・デュポン・ド・ネモアース
・アンド・コンパニ 外２名
・アンド・コンパニ 外２名
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 次の諸段階、すなわち （ａ）まず非水溶性抗酸化剤を水と混和し得る溶媒に溶
解して第一溶液を形成し、そして（ｂ）前記非水溶性抗
酸化剤を溶解状態に保つのに有効な量の担体タンパク質
と活性成分とを含有する水性溶液と該第一溶液とを混合
する 段階より成る、非水溶性抗酸化剤を含有する水性分析試
薬の調製方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US14950888A | 1988-01-28 | 1988-01-28 | |
| US149,508 | 1988-01-28 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH028741A true JPH028741A (ja) | 1990-01-12 |
Family
ID=22530607
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1654489A Pending JPH028741A (ja) | 1988-01-28 | 1989-01-27 | 非水溶性抗酸化剤を含有する水性分析試薬の調製方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0326407A3 (ja) |
| JP (1) | JPH028741A (ja) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3852502A (en) * | 1973-04-09 | 1974-12-03 | Us Army | The method of stabilizing foods with an antioxidant |
| US3955005A (en) * | 1973-11-14 | 1976-05-04 | Swift & Company | Retardation of oxidation and microbial growth in foods |
| JPS5774384A (en) * | 1980-10-27 | 1982-05-10 | Nippon Kagaku Shiryo Kk | Antioxidant compsition |
-
1989
- 1989-01-27 JP JP1654489A patent/JPH028741A/ja active Pending
- 1989-01-27 EP EP19890300808 patent/EP0326407A3/en not_active Ceased
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3852502A (en) * | 1973-04-09 | 1974-12-03 | Us Army | The method of stabilizing foods with an antioxidant |
| US3955005A (en) * | 1973-11-14 | 1976-05-04 | Swift & Company | Retardation of oxidation and microbial growth in foods |
| JPS5774384A (en) * | 1980-10-27 | 1982-05-10 | Nippon Kagaku Shiryo Kk | Antioxidant compsition |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0326407A2 (en) | 1989-08-02 |
| EP0326407A3 (en) | 1990-10-24 |
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