JPH0243471B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH0243471B2 JPH0243471B2 JP8263084A JP8263084A JPH0243471B2 JP H0243471 B2 JPH0243471 B2 JP H0243471B2 JP 8263084 A JP8263084 A JP 8263084A JP 8263084 A JP8263084 A JP 8263084A JP H0243471 B2 JPH0243471 B2 JP H0243471B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- uricase
- solution
- preparation
- serum albumin
- turbidity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
（産業上の利用分野）
本発明はウリカーゼを安定な状態で含有するウ
リカーゼ製剤に関するものである。 （従来技術との関係） ウリカーゼは体液中の尿酸測定に適応され、診
断用酵素材として有用なものである。これらの測
定方法の原理は下記反応式に基づき、生成する過
酸化水素、炭酸ガス、アラントイン又は消費され
る酸素を測定することによる。 尿酸＋O2＋2H2Oウリカーゼ ―――――→ アラントイン＋CO2＋H2O2 しかしながらウリカーゼを溶液状態に変換して
使用する場合、溶解時及び保存中に著しい変性が
進んで混濁を発生し、測定精度に重大な悪影響を
及ぼし、安定なウリカーゼ製剤が得難い欠点があ
つた。 従来からウリカーゼ溶液に非イオン界面活性剤
を添加することにより、ウリカーゼ溶液が安定化
され沈澱物を生じないことが公知である（特公昭
48−6556号）。しかしながら、この溶液を凍結乾
燥した後、再溶解させると若干濁りが発生する。 （発明の目的） 本発明者等はかかる欠点を解決するために鋭意
検討した結果、以下に述べる様な組成からなる酵
素製剤とすれば、凍結乾燥後溶解時にも溶液状態
で保存しても前述の様な変性や濁りが生じないこ
とを見出し、本発明を完成するに至つた。 （発明の構成の説明） すなわち本発明は(i)非イオン界面活性剤、(ii)血
清アルブミンおよび／または塩基性アミノ酸およ
び(iii)ウリカーゼを含有することを特徴とする安定
なウリカーゼ製剤である。 本発明のウリカーゼ製剤とは、ウリカーゼを必
須成分として含有する他、非イオン性界面活性剤
および血清アルブミン及び／または塩基性アミノ
酸（以下これらを総称して安定化剤と述べる）を
含有する。 ウリカーゼとしては動物起源、植物起源、微生
物起源など如何なる起源のものでもよいが酵母起
源のものが好ましい。そして本発明におけるウリ
カーゼ製剤としては、上記の如きウリカーゼを単
独で含有するものに限定されず、他の物質、例え
ば尿酸定量に必要な酵素並びに補酵素、更には基
質、発色剤、又これらの安定化に必要な安定剤、
防腐剤成分等を含有するものを総称する。なおウ
リカーゼ製剤は溶液状及び乾燥粉末状等任意の状
態で提供されるものを含む。 本発明で用いられる非イオン性界面活性剤とは
構造式、その他については全く制限がなく、種々
のものを使用することができるが、代表的な非イ
オン性界面活性剤を表示するとポリオキシエチレ
ンアルキルエーテル型、ポリオキシエチレンアル
キルフエノールエーテル型、ポリオキシエチレン
アルキルエステル型等が挙げられる。 又血清アルブミンとしては動物、ヒト由来どち
らでも良い。代表的なものとしてはウシ血清アル
ブミン、ウマ血清アルブミン、ヒト血清アルブミ
ンが例示される。又塩基性アミノ酸としてはアル
ギニン、リジン、ヒスチジン並びにその塩が挙げ
られる。 前述の様な安定化剤の配合割合は安定化作用の
強弱、或は安定化剤自体の化学的安定性、更には
上記各安定化剤の併用等を考慮して定めれば良い
が、一般的な目安を述べるとウリカーゼを含有す
る溶液に対して0.0001％〜10％程度の範囲から選
択すれば確実な効果が得られる。 上記安定化剤を含有するウリカーゼ製剤を得る
に当つては、ウリカーゼ単独もしくはウリカーゼ
に他の酵素、補酵素、基質、発色剤、安定化剤、
防腐剤等の併用剤を配合して溶液を調製する工
程、該溶液に上記安定化剤を添加混合する工程、
並びに必要であれば該溶液を乾燥する工程を組合
わせるが、最初に述べたウリカーゼ溶液の調製に
際しては適切な緩衝液を選択した方が良い。好ま
しくは濃度１〜500mM、PH6.0〜9.5程度に設定し
た緩衝液に溶解することが望ましい。 次に安定化剤の添加混合に当つては上記ウリカ
ーゼ溶液に安定化剤を直接配合するか、該安定化
剤を一旦水あるいは緩衝液に分散乃至溶解してか
ら添加し、常法に従つて撹拌する。最後にこの混
合液を乾燥させたいときは、凍結乾燥や噴霧乾燥
等の常当手段をより用すれば良い。 （発明の効果） 本発明のウリカーゼ製剤は上記の様に構成され
ているので、安定なウリカーゼ製剤が得られ、尿
酸測定精度に対する高い信頼性を与えることがで
き、極めて有用な診断用酵素製剤が提供されるこ
ととなつた。 （実施例） 以下本発明を実施例をもつて説明する。 実施例 １ 酵母から得られたウリカーゼを用い、0.1Mホ
ウ酸緩衝液（PH8.0）に10単位／mlとなる様に溶
解し、この溶液に第１表の各化合物を加え、必要
があればPH8.0に再調整した。得られた酵素製剤
溶液をそのまま及び一旦凍結乾燥して再び溶解し
たものについて保存テスト（25℃、５日放置）を
して、濁りの発生を見たのが第１表である。 第１表より明らかな様に非イオン性界面活性
剤、血清アルブミン及び／または塩基性アミノ酸
を添加したものは濁りの生成が少なかつたが、無
添加のものは著しく濁りを発生した。
リカーゼ製剤に関するものである。 （従来技術との関係） ウリカーゼは体液中の尿酸測定に適応され、診
断用酵素材として有用なものである。これらの測
定方法の原理は下記反応式に基づき、生成する過
酸化水素、炭酸ガス、アラントイン又は消費され
る酸素を測定することによる。 尿酸＋O2＋2H2Oウリカーゼ ―――――→ アラントイン＋CO2＋H2O2 しかしながらウリカーゼを溶液状態に変換して
使用する場合、溶解時及び保存中に著しい変性が
進んで混濁を発生し、測定精度に重大な悪影響を
及ぼし、安定なウリカーゼ製剤が得難い欠点があ
つた。 従来からウリカーゼ溶液に非イオン界面活性剤
を添加することにより、ウリカーゼ溶液が安定化
され沈澱物を生じないことが公知である（特公昭
48−6556号）。しかしながら、この溶液を凍結乾
燥した後、再溶解させると若干濁りが発生する。 （発明の目的） 本発明者等はかかる欠点を解決するために鋭意
検討した結果、以下に述べる様な組成からなる酵
素製剤とすれば、凍結乾燥後溶解時にも溶液状態
で保存しても前述の様な変性や濁りが生じないこ
とを見出し、本発明を完成するに至つた。 （発明の構成の説明） すなわち本発明は(i)非イオン界面活性剤、(ii)血
清アルブミンおよび／または塩基性アミノ酸およ
び(iii)ウリカーゼを含有することを特徴とする安定
なウリカーゼ製剤である。 本発明のウリカーゼ製剤とは、ウリカーゼを必
須成分として含有する他、非イオン性界面活性剤
および血清アルブミン及び／または塩基性アミノ
酸（以下これらを総称して安定化剤と述べる）を
含有する。 ウリカーゼとしては動物起源、植物起源、微生
物起源など如何なる起源のものでもよいが酵母起
源のものが好ましい。そして本発明におけるウリ
カーゼ製剤としては、上記の如きウリカーゼを単
独で含有するものに限定されず、他の物質、例え
ば尿酸定量に必要な酵素並びに補酵素、更には基
質、発色剤、又これらの安定化に必要な安定剤、
防腐剤成分等を含有するものを総称する。なおウ
リカーゼ製剤は溶液状及び乾燥粉末状等任意の状
態で提供されるものを含む。 本発明で用いられる非イオン性界面活性剤とは
構造式、その他については全く制限がなく、種々
のものを使用することができるが、代表的な非イ
オン性界面活性剤を表示するとポリオキシエチレ
ンアルキルエーテル型、ポリオキシエチレンアル
キルフエノールエーテル型、ポリオキシエチレン
アルキルエステル型等が挙げられる。 又血清アルブミンとしては動物、ヒト由来どち
らでも良い。代表的なものとしてはウシ血清アル
ブミン、ウマ血清アルブミン、ヒト血清アルブミ
ンが例示される。又塩基性アミノ酸としてはアル
ギニン、リジン、ヒスチジン並びにその塩が挙げ
られる。 前述の様な安定化剤の配合割合は安定化作用の
強弱、或は安定化剤自体の化学的安定性、更には
上記各安定化剤の併用等を考慮して定めれば良い
が、一般的な目安を述べるとウリカーゼを含有す
る溶液に対して0.0001％〜10％程度の範囲から選
択すれば確実な効果が得られる。 上記安定化剤を含有するウリカーゼ製剤を得る
に当つては、ウリカーゼ単独もしくはウリカーゼ
に他の酵素、補酵素、基質、発色剤、安定化剤、
防腐剤等の併用剤を配合して溶液を調製する工
程、該溶液に上記安定化剤を添加混合する工程、
並びに必要であれば該溶液を乾燥する工程を組合
わせるが、最初に述べたウリカーゼ溶液の調製に
際しては適切な緩衝液を選択した方が良い。好ま
しくは濃度１〜500mM、PH6.0〜9.5程度に設定し
た緩衝液に溶解することが望ましい。 次に安定化剤の添加混合に当つては上記ウリカ
ーゼ溶液に安定化剤を直接配合するか、該安定化
剤を一旦水あるいは緩衝液に分散乃至溶解してか
ら添加し、常法に従つて撹拌する。最後にこの混
合液を乾燥させたいときは、凍結乾燥や噴霧乾燥
等の常当手段をより用すれば良い。 （発明の効果） 本発明のウリカーゼ製剤は上記の様に構成され
ているので、安定なウリカーゼ製剤が得られ、尿
酸測定精度に対する高い信頼性を与えることがで
き、極めて有用な診断用酵素製剤が提供されるこ
ととなつた。 （実施例） 以下本発明を実施例をもつて説明する。 実施例 １ 酵母から得られたウリカーゼを用い、0.1Mホ
ウ酸緩衝液（PH8.0）に10単位／mlとなる様に溶
解し、この溶液に第１表の各化合物を加え、必要
があればPH8.0に再調整した。得られた酵素製剤
溶液をそのまま及び一旦凍結乾燥して再び溶解し
たものについて保存テスト（25℃、５日放置）を
して、濁りの発生を見たのが第１表である。 第１表より明らかな様に非イオン性界面活性
剤、血清アルブミン及び／または塩基性アミノ酸
を添加したものは濁りの生成が少なかつたが、無
添加のものは著しく濁りを発生した。
【表】
実施例 ２
下記組成からなる酵素製剤を調製した。
ウリカーゼ（酵母起源） 10単位
ペルオキシダーゼ（西洋わさび起源）
100単位 ４−アミノアンチピリン 10mg 0.1Mホウ酸緩衝液（PH8.0） 全量１ml そこに第２表の各化合物を加え、必要あればPH
8.0に再調製してから凍結乾燥して得られた酵素
粉末を下記の溶解液10mlに溶解してその保存性
（25℃、５日放置）を濁りの発生で見たのが第２
表である。 （溶解液） 0.1Mリン酸緩衝液（PH7.0） ジエチルアニリン 10mg 第２表より明らかな様に非イオン性界面活性
剤、血清アルブミン及び塩基性アミノ酸を添加し
たものは濁りの生成が少なかつたが、無添加のも
のは著しく濁りを発生した。
100単位 ４−アミノアンチピリン 10mg 0.1Mホウ酸緩衝液（PH8.0） 全量１ml そこに第２表の各化合物を加え、必要あればPH
8.0に再調製してから凍結乾燥して得られた酵素
粉末を下記の溶解液10mlに溶解してその保存性
（25℃、５日放置）を濁りの発生で見たのが第２
表である。 （溶解液） 0.1Mリン酸緩衝液（PH7.0） ジエチルアニリン 10mg 第２表より明らかな様に非イオン性界面活性
剤、血清アルブミン及び塩基性アミノ酸を添加し
たものは濁りの生成が少なかつたが、無添加のも
のは著しく濁りを発生した。
【表】
Claims (1)
- １ (i)非イオン性界面活性剤、(ii)血清アルブミン
および／または塩基性アミノ酸および(iii)ウリカー
ゼを含有することを特徴とする安定なウリカーゼ
製剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8263084A JPS60224499A (ja) | 1984-04-23 | 1984-04-23 | 安定なウリカ−ゼ製剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8263084A JPS60224499A (ja) | 1984-04-23 | 1984-04-23 | 安定なウリカ−ゼ製剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60224499A JPS60224499A (ja) | 1985-11-08 |
| JPH0243471B2 true JPH0243471B2 (ja) | 1990-09-28 |
Family
ID=13779763
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8263084A Granted JPS60224499A (ja) | 1984-04-23 | 1984-04-23 | 安定なウリカ−ゼ製剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60224499A (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1338457C (en) * | 1986-08-22 | 1996-07-16 | Henry A. Erlich | Purified thermostable enzyme |
| FR2733914B1 (fr) * | 1995-05-11 | 1997-08-01 | Sanofi Sa | Composition de liquide stable contenant de l'urate oxydase et composition lyophilisee pour sa preparation |
| DE69933485T2 (de) * | 1998-04-24 | 2007-01-11 | Sysmex Corp. | Verfahren zur Stabilisierung von Alaninaminotransferase und die entsprechenden Zusammensetzungen |
| JP2003000236A (ja) * | 2001-06-18 | 2003-01-07 | Toyobo Co Ltd | エステラーゼの安定化方法 |
-
1984
- 1984-04-23 JP JP8263084A patent/JPS60224499A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS60224499A (ja) | 1985-11-08 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |