JPH03187328A

JPH03187328A - コマクサ属植物の育苗方法

Info

Publication number: JPH03187328A
Application number: JP32379789A
Authority: JP
Inventors: Hiroshi Hamazaki; 浩濱崎
Original assignee: Hitachi Reinetsu KK
Current assignee: Hitachi Reinetsu KK
Priority date: 1989-12-15
Filing date: 1989-12-15
Publication date: 1991-08-15
Anticipated expiration: 2009-07-20
Also published as: JPH0653034B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野］本発明は、コマクサ属植物の育苗方法に係り、特に、器
官培養により幼苗を短期間で大量に得るのに好適なコマ
クサ属植物の育苗方法に関するものである。

［従来の技術］コマクサは、ケシ科の多年草１代表的な高山植物であり
、７，８月頃淡紅色もしくは白色の花を咲かせる。すな
わち、コマクサ腐植物は観賞用植物として人気があり、
しかも、全草にアルカロイド・デイセントリン（Ｃ２゜
Ｈ２□０４Ｎ）、プロトピン（Ｃ２，Ｈ工、○Ｓ　Ｎ　
）など麻酔作用をもつ成分を含有する有用な植物である
。

コマクサ腐植物の増殖方法は、実生による増殖と、株分
けによる増荊とがある。しかし、実生から発芽させるこ
とは難かしく、これら実生２株分けの両者の方法とも、
その増殖率は極めて低いものであった。

［発明が解決しようとする課題］上記のように、コマクサ腐植物は、実生２株分けの両者
の方法とも、その増殖率は極めて低く、また、開花株に
生育させるには、２年以上を要するなど、コマクサ腐植
物の大量生産は極めて困難である。

さらに、従来の方法では、季節に影響され、春だけにし
か幼苗を生産することができない。

現在、洋画栽培等で植物の組織培養により大量に幼苗を
得ることが行われているが、コマクサ腐植物からこのよ
うな方法で幼苗を得ることは全く知られていない。

本発明は、上記従来技術の問題点を解決するためになさ
れたもので、コマクサ腐植物の幼苗を短期間で大量に、
しかも季節に影響されず、年間を通じて生産しうるコマ
クサ腐植物の育苗方法を提供することを、その目的とす
るものである。

［課題を解決するための手段］上記目的を達成するために、本発明に係るコマクサ腐植
物の育苗方法の構成は、コマクサ腐植物の器官の一部を
採取して、その採取したものを、植物ホルモンとして少
なくともオーキシン類を含有するカルス誘導用培地で培
養してカルスを誘導する工程、そのカルスを、カルス増
殖用培地を用いて分割移植を繰り返して増殖させる工程
、増殖したカルスを不定芽誘導用培地に移して不定芽を
誘導する工程、および、その不定芽を発根用培地に移し
て発根させ幼苗とする工程を有し、発根させた幼苗を育
成して植物体を再生させるものである。

図面はコマクサ腐植物の育苗方法の工程説明図である。

本発明は、図面に示すように、コマクサの器官（葉片）
を採取しく工程の）、カルス誘導用培地でカルスを誘導
しく工程■）、そのカルスの分割移植を繰り返し大量に
増殖する（工程■）。増殖したカルスを別の不定芽誘導
用培地に移して不定芽を誘導しく工程■）、その不定芽
を発根用培地に移し発根させ（工程■）、その幼苗を育
威しコマクサの植物体を再生させる（工程■）各工程か
らなる方法である。

なお、ここで植物の器官とは、根、茎１葉、花。

果実などであり、一般に同じような形と働きをもつ細胞
が集まったものを組織といい、組織がいくつか集まって
器官となる。

また、植物学上のカルスとは、実験的に細胞分裂で形成
される無定形の植物の細胞塊（かたまり）をいう。

さらに、培地は試験管または培養容器に形成される。

次に、本発明の方法を、より具体的に説明する。

まず、コマクサ腐植物の葉、茎、根など器官の一部、例
えば葉片などを切り取り、これをカルス誘導用培地で培
養してカルスの誘導を行う。

カルス誘導用培地としては、植物組織培養に通常用いら
れるガンボルグのＢ５培地、ムラシゲ・スクーグの培地
、ホワイトの培地、リンスマイヤースクーグの培地、お
よびこれらの改変培地などが用いられ、これにオーキシ
ン類、サイトカイニン類の植物成長ホルモンが添加され
ている。

なお、上記ならびに以下の説明におけるガンボルダＢ５
培地については、ガンボルグ、ミラーオジマ（０，Ｌ、
Ｇａｍｂｏ　ｒｇ、Ｒ，Ａ、Ｍｉｌ　１　ｅ　ｒ、に、
Ｏｊ　ｉｍａ）によるＥｘｐ、Ｃｅ１１　　Ｒｅｓ、５
０．ページ１５１−１５８．１９６８年に記載されてい
る。

ここで植物成長ホルモンとして少なくともオーキシン類
は必ず添加されるもので、オーキシン類の種類としては
、例えば、２．４−ジクロロフェノキシ酢酸（２，４−
Ｄ）、インドール酢酸（工ＡＡ）、ナフタレン酢酸（Ｎ
ＡＡ）　、インドール酪酸（ＩＢＡ）等がある。サイト
カイニン類の種類としては、例えば、カイネチン、ベン
ジルアデニン、ゼアチン等がある。

オーキシン類は、通常、その濃度０．０１〜１０ｐＰｍ
の割合で培地中に必ず入れる。また、サイトカイニン類
は、その濃度１０ｐＰｍ以下の割合で培地中に入れるが
必ずしも入れなくてもよい。

一方、これらの添加量（濃度）がＩＱｐｐｍを超えて多
すぎると、死滅、生長阻害等が認められる。

また、オーキシン類がＯ，Ｏｌｐｐｍより少ないときは
、カルス以外に不定根等の器官が直接分化したり、もし
くは死滅、生長阻害が認められる。

コマクサの葉片をカルス誘導用培地で１周囲温度１５〜
３０℃、暗所で培養を行うと、１５〜３０日後には葉片
の切断面にカルスが形成される。

次に、その培養されたカルスを、カルス増殖用培地に移
植してカルスの増殖を行う。

カルス増殖用培地としては、ガンボルグのＢ５培地など
植物組織培養に通常用いられる培地を用い、これに寒天
を入れた寒天培地などの固体培地、または水を入れた液
体培地が利用される。また、先に述べたカルス誘導培地
を用いてもよい。

増殖を促進する植物ホルモンとしてオーキシン類および
サイトカイニン類を、共に１０ｐｐｍ以下の濃度で添加
するか、もしくは無添加でもよい。

これらの量が多すぎる（１０ｐｐｍをこえる）と、死滅
、生長阻害等が認められる。

培養は周囲温度１８〜３０℃で通常暗所で行われる。増
殖したカルスは図面の■、■工程に示すように分割移植
を繰り返すことによってさらに増殖される。

次に、増殖したカルスを不定芽誘導用培地に移して不定
芽を誘導する。

不定芽誘導培地としては、植物組織培養に通常用いられ
るムラシゲ・スクーグの培地が用いられる。ムラシゲ・
スクーグの培地の成分組成は、Ｔ。

Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ、Ｆ、Ｓｋｏｏｇによるｐｈｙｓｉ
ｏｌ　　Ｐｌａｎｔａｒｕｍ、１５ｅページ４７３〜４
９７．１９６２年に記載されている。

不定芽誘導培地は、前記ムラシゲ・スクーグの培地など
に、不定芽誘導促進用の植物ホルモンとしてベンジルア
デニン、カイネチンなどのサイトカイニン類を濃度５ｐ
ｐｍ以下で添加するか、もしくは無添加とする。オーキ
シン類は、無添加とするか、もしくは添加する場合は、
カルス増殖用＠地よりも低く２ｐｐｍ以下とする。ここ
で、サイトカイニン類は添加した方が不定芽誘導の結果
がよく、オーキシン類はむしろ無添加の方がよい結果が
出る。また、サイトカイニン類は濃度５Ｐｐｍを超えて
多すぎると茶色くなって死滅し、オーキシン類が濃度２
ｐｐｍを超えて多すぎると不定芽の分化は行われず、カ
ルスの増殖のみが行われる。

このような不定芽誘導用培地にカルスを置床し、周囲温
度１５〜３０℃で、暗所か、もしくは２０゜０００ルク
ス以下の照射下で培養を行うと、１５〜４０日で不定芽
が誘導される。

次に、このようにして誘導された不定芽を、発根培地に
移して発根させる。

発根培地としては、植物組織培養に通常用いられるガン
ボルグのＢ５培地などを用い、発根促進の植物ホルモン
として、インドール酪酸（ＩＢＡ）インドール酢酸（Ｉ
ＡＡ）などのオーキシン類を５ｐｐｍ以下の濃度で添加
するか、もしくは無添加とする。また、サイトカイニン
類は、通常無添加か、添加する場合は０．５ｐｐｍ以下
とする。

ここで、オーキシン類が濃度５ｐｐｍを超えて多く添加
されると不定芽は枯れてしまい、サイトカイニン類が濃
度０．５ｐｐｍを超えて多く添加されると発根されなく
なるものである。

このような発根培地に不定芽を植え、周囲温度１５〜３
０℃の温度条件下で１０００〜１５０００ルクスの光を
照射して培養を行うと、２０〜５０日で発根し、コマク
サ属の幼苗が得られ、これを育成することで植物体が再
生される。

［作用］上記の技術的手段（育苗方法の各工程）による働きは次
のとおりである。

従来の実生１株分けの方法では、コマクサ属植物の増殖
率はきわめて低いが、本発明の方法では、植物ホルモン
を含有する培地で有効にカルスが誘導される。このカル
スの形態においては増殖は速やかに行われる。そこで、
この増殖したカルスから不定芽を誘導し、発根させるこ
とにより大量のコマクサ属植物の幼苗が短期間で得られ
る。

また、従来の方法では、幼苗が得られる時期は、季節に
影響され春にしか得られないが１本発明の方法では、季
節に影響されず、年間を通じ幼苗を得ることができる。

［実施例］以下に本発明の実施例について述べる。

失見鮭上（１）コマクサの葉片採取（図面の工程の参照）コマク
サの苗を適当な大きさに切り取り、これを７０％エタノ
ール水溶液に６０秒間浸漬し、さらに次亜塩素酸ナトリ
ウム水溶液（Ｃ１−濃度２゜０％）に１２分間浸漬して
殺菌処理を行なった。

これを無菌水での洗浄を３回繰返したのち、葉が３枚つ
いた状態に切断した。

（２）カルスの誘導（図面の工程■参照）前記葉が３枚
ついた状態の葉片をカルス誘導用培地に置床した。

カルス誘導用培地としては、オーキシン類として２．４
ＤをＱ、２ｐｐｍの割合で、サイトカイニン類としては
ベンジルアデニンをＯ，ｌｐｐｍの割合で含有するガン
ボルグＢ５の固形培地（ゲルライト０．２％）を用いた
。

前記葉片を置床したカルス誘導用培地を、周囲温度２４
℃で暗所にて２０日間培養を行なったところ、葉片の切
口にカルスが形成された。

（３）カルスの増殖（図面の工程■参照）（２）で形成
されたカルスをカルス増殖用培地に移植した。

カルス増殖用培地としては、オーキシン類として２．４
ＤをＱ、２ｐｐｍの割合で、サイトカイニン類としては
ベンジルアデニンをＱ、２ｐｐｍの割合で含有するガン
ボルグＢ５の固形培地（ゲルライト０．２％）を用いた
。

カルスを移植した前記カルス増殖用培地を、周囲温度２
４℃で暗所にて３０日間培養を行ない。

図面の工程■、■に示すようにカルスの分割移植を繰り
返してカルスを増殖した。

（４）不定芽の誘導（図面の工程■参照）（３）で得ら
れた増殖カルスを不定芽誘導培地に移植した。

不定芽誘導用の培地としては、サイトカイニン類として
ベンジルアデニンを０．２ｐｐｍの割合で含有し、オー
キシン類を含有しないムラシゲ・スクーグの固形培地（
ゲルライト０．２％）に、カザミノ酸０．１％、硫酸ア
デニン２５ｐｐｍ含有したものを用いた。

増殖カルスを移植した前記不定芽誘導培地を、周囲温度
２４℃で、光条件としては、１２日間暗所で培養したの
ち３０００ルクスの照射下で培養した。Ｗｌ床後、約２
０日間で不定芽誘導が始まり。

約３０日で直径２５ｍ５の試験管中に２０本以上の不定
芽が誘導された。

（５）発根（図面の工程■参照）（４）で誘導された不定芽を根元から切り、発根培地上
に移植した。

発根培地としては、オーキシン類としてインドール酪酸
を０．２ｐｐｍの割合で含有し、サイトカイニン類を含
有しないガンボルグＢ５の固形培地（ゲルライト０．２
％）を用いた。

前記不定芽を移植した発根培地を、周囲温度２０℃、３
０００ルクスの光条件下で培養を行なった。置床後約２
０日間で発根が始まり、４０日間で２０〜４０ｍの数本
の根が発生し、鉢に移植可能なコマクサの幼苗が得られ
た。

このように、本実施例によれば、従来の実生から発芽さ
せる方法や株分けによる方法にくらべて短期間で幼苗が
得られる。

失見凱主（１）コマクサの葉片採取実施例１（１）と同様である。

（２）カルスの誘導実施例１（２）と同様である。

（３）カルスの増殖（２）で形成されたカルスを、オーキシン類として２．
４ＤをＱ、２ｐｐｍの割合で含有し、サイトカイニン類
を含有しないガンボルグＢ５の液体培地に移植し、往復
旋回方式の振盪培養器により培養を行なった。

同上培地にカルスを２週間毎に植え替えることにより、
カルスは液体培地中に懸濁状態となり。

その増殖率は、固形培地上でのそれより大きい値となっ
た。その他の培養条件としては実施例１（３）と同様で
ある。

（４）不定芽の誘導前記（３）で得られた懸濁状態のカルスを実施例１（４
）で用いた不定芽用培地上に懸濁状態のまま移植し、実
施例１（４）と同様の温度、光条件下で培養した。

移植後約２０日間で不定芽の誘導が始まり、約３０日後
には、大きさがほぼ均一な多数の不定芽が誘導された。

（５）発根前記（４）で得られた不定芽を実施例１（５）と同様の
方法で培養したところ、約４０日間で鉢に移植可能なコ
マクサの幼苗を得た。

［発明の効果コ以上詳細に説明したように、本発明によれば、コマクサ
属植物の幼苗を短期間で大量に、しかも季節に影響され
ず、年間を通じて生産しうるコマクサ属植物の育苗方法
を提供することができた。

【図面の簡単な説明】

図面はコマクサ属植物の育苗方法の工程説明図である。

Claims

【特許請求の範囲】１、コマクサ属植物の器官の一部を採取して、その採取
したものを、植物ホルモンとして少なくともオーキシン
類を含有するカルス誘導用培地で培養してカルスを誘導
する工程、そのカルスを、カルス増殖用培地を用いて分割移植を繰
り返して増殖させる工程、増殖したカルスを不定芽誘導用培地に移して不定芽を誘
導する工程、および、その不定芽を発根用培地に移して発根させ幼苗とする工
程を有し、発根させた幼苗を育成して植物体を再生させる
ことを特徴とするコマクサ属植物の育苗方法。２、カルス誘導用培地は、オーキシン類の濃度が０．０
１〜１０ｐｐｍで、かつ、サイトカイニン類の濃度が１
０ｐｐｍ以下であることを特徴とする請求項１記載のコ
マクサ属植物の育苗方法。３、カルス増殖用培地は、オーキシン類およびサイトカ
イニン類の各濃度がいずれも１０ｐｐｍ以下であること
を特徴とする請求項１記載のコマクサ属植物の育苗方法
。４、不定芽誘導用培地は、オーキシン類の濃度が２ｐｐ
ｍ以下で、かつ、サイトカイニン類の濃度が５ｐｐｍ以
下であることを特徴とする請求項１記載のコマクサ属植
物の育苗方法。５、発根用培地は、オーキシン類の濃度が５ｐｐｍ以下
で、かつ、サイトカイニン類の濃度が０．５ｐｐｍ以下
であることを特徴とする請求項１記載のコマクサ属植物
の育苗方法。