JPH03200795A - 脂質親和性白金錯体及びそれを含有する製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は制癌剤として有用な脂質親和性白金錯体及びそ
れを包含する製剤に関する。

〔従来の技術〕

制癌作用を有する白金錯体についてはシスプラチンを始
めとして多くの誘導体の合成が試みられている。現在、
臨床で用いられているシスプラチンは点滴静注時に腎臓
障害及び悪心、嘔吐等の副作用が発現したり、血漿蛋白
と結合するため利用率が低下する等の性質がある。

これらの欠点を克服する目的でシスプラチンをリポゾー
ムに封入して投与することにより、腫瘍部位における濃
度をより高め、生体の全身的又は他の部位への拡散によ
る副作用の防止が試みられている。

〔発明が解決しようとする課題〕

シスプラチンは水にも油にも溶解し難い為リボゾームへ
の封入量は少なく充分１．薬効は期待できない。また形
成されたりポゾームの安定性も悪い。本発明ではりポゾ
ームの膜に使われるリン脂質との親和性の高い白金錯体
な得ること〔課題を解決する為の手段〕 本発明は一般式（１） 〔式中ＳＲＩ＃Ｒ２はそれぞれアンモニア又はＲ１とＲ
２がいっしょになって１．２−ジアミノシクロヘキサン
もしくは１−アミノ−１−アミノメチルシクロヘキサン
を示し、Ｒ３，Ｒ４はそれぞれ式（式中、ｎは７〜２０
の整数を示す） で表わされるα−ヒドロキシカルボン酸酸残基基又はＲ
ｓ、　Ｒ４がいっしょになって式（式中、ｎは前記と同
じ） で表わされるアルキルマロン酸残基もしくは式％式％ （式中、ｎは前記と同じ） で表わされるアルキルグリコール酸残基を示す〕で表わ
される脂質親和性白金錯体及びこの白金錯体並びにリン
脂質を含有する製剤に関する。

本発明の白金錯体においてり、　Ｒｚはそれぞれアンモ
ニア又はＲ１とＲ２がいっしょになって１．２−ジアミ
ノシクロヘキサンもしくは１−アミノ−１−アミノメチ
ルシクロヘキサンである。

１、２−ジアミノシクロヘキサンはシス体、トランス体
の２つの立体異性体が存在するが、本発明の白金錯体は
これらのいずれであってもよい。

上記の一般式（１）で示される本発明の白金錯体におい
て九と九で示されるα−ハイドロキシ脂肪酸残基として
は炭素原子数１０〜２３のものが挙げられる。より具体
的には２−ヒドセキシ脂肪酸類の脂肪酸部分としてはカ
プリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、
ステアリン酸、アラキン酸、トリコサン酸、ネオデカン
酸、ネオテトラデカン酸等があげられる。

又、一般式（１）の本発明の白金錯体において、Ｒ３と
Ｒ４で示されるアルキルマロン酸残基としては炭素原子
数８〜２１の脂肪酸残基が挙げられる。モノアルキルマ
ロン酸のアルキル基としてはｎ−オクチル、ｎ−デシル
、ｎ−ドデシル、ネオドデシル、ｎ−テトラデカニル、
ネオ−テトラデカニル等があげられる。

更に、一般式（１）の発明の白金錯体においてＲ３とル
で示されるアルキルグリコール酸残基としては炭素原子
数８−２１の脂肪酸残基が挙げられる。アルキルグリコ
ール酸のアルキル基としてはｎ−オクチル、ｎ−デシル
、ｎ−ドデシル、ネオドデシル、ｎ−テトラデカニル、
ネオ−テトラデカニル等が挙げられる。

次に本発明化合物の代表例及びその物性を表１にあげる
。

本発明化合物は例えば次の方法により得ることができる
。

即ち白金原子に配位するアミン成分以外の配位子がカル
ボキシル基のみである場合、−紋穴（４）（５） （式中、Ｒ１，Ｒ２は前記と同じ） で示されるニドラード白金（ＩＩ）のアコ体又はこのア
コ体を隘イオン交換摺脂で処理して得られる一般式（Ｉ
υ （８） （式中、Ｒｔ＋　Ｒｚは前記と同じ） で示されるジヒドロキソ白金ＯＤに、−紋穴（Ｑ（式中
、ｎは前記と同じ） で示される２−ヒドロキシカルボン酸又はそのアルカリ
金属塩を化合物−又は化合物（Ｂ）　１モルに対し２モ
ル以上、好ましくは２〜３モル程度反応させるか又は−
紋穴（ＤＩ ｔｓ （式中、ｎは前記と同じ） で示されるアルキルマロン酸又はそのアルカリ金属塩を
１モル以上、好ましくは１〜１．５モル反応させればよ
い。

ここでアルカリ金属塩としてはカリウム塩、ナトリウム
塩、リチウム塩などがあげられるがナトリウム塩が好ま
しい。反応は水中で０°Ｃ〜１００℃、好ましくは常温
から５０℃の温度でおこ々われる。

又アミン成分以外の配位子が水酸基からの酸素原子とカ
ルボキシル基である化合物の場合、前記−紋穴（Ｂｌで
示されるジヒドロキシ白金０に前記−紋穴０で示される
２−ヒドロキシカルボン酸を化合物（８）１モルに対し
０，９〜１モル、好ましくは０．９５〜１モル反応させ
ればよい。反応は水中で、当初Ｏ〜３０℃程度好ましく
は常温付とでカルボキシル基を配位させ、次いで、水酸
基を配位させるため４０〜ｓｏ’ｃ、好ましくは５０〜
７０℃の温度に昇温しておこなわれる。

本発明化合物を医薬品として使用する場合には、単独ま
たは賦形剤と混合して注射剤、経口剤、坐剤等として投
与する。混形剤は薬剤学的に許容されるものであればい
ずれでもよく、その社類および組成は投与経路や投与方
法によって決まる。例えば、液状賦形剤としては水、ア
ルコール類、大豆油、ビーナツツ油、ゴマ油、ミネラル
油等の動植物油また＆ま合成油更にはリン脂質を始めと
する各種界面活性剤を用いることができる。固体賦形剤
としてはマルトース、ツユクロースｈどの糖類、各種ア
ミノ酸類、ヒデアリン酸マグネシウムなどの脂肪酸金属
塩類更にに、リン脂質類及び有機酸塩類などを使用する
ことができる。

注射剤の場合には、賦形剤としては、生理食塩水、各種
緩衝液、グルコース、イノシトール、マンニトール等ノ
糖類溶液、エチレングリコール、ポリエチレングリコー
ル等のグリコール類溶液が望ましい。また、イノシトー
ル、マンニトール、クルコース、マンノーズ、マルトー
ス、シュクロース等の糖類やフェニルアラニン等のアミ
ノ酸類の賦形剤と共に凍結乾燥剤となし、投与時に注射
用の適当々溶剤、例えば、滅菌水、ブドウ糖溶液、電解
質溶液、アミノ酸溶液等に分散して皮下および筋肉内等
に投与することもできる。

経口剤の場合には、前記液状賦形剤もしくは固体賦形剤
とともに錠剤、カプセル剤、粉剤、顆粒剤、液剤、ドラ
イシロップ剤等の形態にするのがよい。また、ペレット
剤として経皮、粘膜剤などの局所投与剤としてもよい。

製剤中における本化合物の含量は１通常０．００１〜３
０重量％であり、好ましくは０．０１〜２０重量％であ
る。例えば、注射剤の場合には、通常０．０１〜１５重
量％がよい。経口剤の場合には０．００５〜２０重量％
、好ましくは０．０５〜１５重量％とし、残部を賦形剤
とする。

投与量は、患者の年令、体重、症状、治療目的等により
決定されるが、一般的には、非経口投与で０１〜５μｇ
／ｋｇ／日、経口投与で０．５〜３０μｇ／ｋｇ／日で
ある。

本発明の脂質親和性白金錯体は、水に殆ど溶解しないが
、メタノール、エタノール等のアルコール系溶媒やクロ
ロホルム、塩化メチレン、ジエチルエーテル等に可溶で
あり、又リン脂質に対し強い親和性を有し、このリン脂
質と組合せることにより、より強い抗腫瘍効果を発揮す
る。

リン脂質としては例えばレシチン（フォスファチジルコ
リン）、フォスファチジルエタノールアミン、フォスフ
ァチジルセリン、フォスファチジン酸などのホスホグリ
セド、フォスファチジルイノシトールなどのホスホイノ
シチド及びこれらのリゾ体、カルシオリピン、スフィン
ゴミエリン、セレロシド類が挙げられ、より具体的には
天然レシチンとして卵黄レシチン、大豆レシチン等が、
飽和合成レシチン類としてジパルミトイルフォスファチ
ジルコリン、ジミリストイルフォスファチジルコリン、
及びジステアロイルフォスファチジルコリン等が、また
不飽和合成レシチン類としてジオレイルフォスファチジ
ルコリン、ジリルイルフォスファチジルコリン等が、更
に極性のものとしてジパルミトイルフォスファチジルエ
タノールアミン（カチオン性）、ジパルミトイルフォス
ファチジルセリン、ジパルミトイルイノシトール及びジ
セチルフォスファチジン酸（アニオン性）等が挙げられ
る。

本発明の脂質親和性白金錯体とリン脂質との混合製剤は
微粒子状のものが好ましく、その製法としてはりポゾー
ムの調製法、例えばハイドレーション法や凍結乾燥法等
の一般に知られている方法で良い。即ち、所定量の脂質
と本発明の脂質親和性白金錯体を丸底フラスコに取り、
これに有機溶媒を加えて均一な溶液と々す。次に有機溶
媒を留去してフラスコの内壁面に該脂質親和性白金錯体
を含む脂質の薄膜を形成する。

次に、これに生理食塩水等の水性媒体を加えて脂質の薄
膜を水和させ、適宜の方法で分散させる事により得られ
る。又、更にこれを超音波等で分散を強めてもよい。

本発明の脂質親和性白金錯体と脂質の重量比率はｌ：５
〜１：５０．より好ましくはｌニア〜ｌ：２０、更に好
ましくは１：９〜１：１５程度がよい。

上記の脂質親和性白金錯体と脂質の両方を同時に溶解す
る有機溶媒としては、その溶解性能を有する物であれば
何でも良いが、製剤の調製士・に作性及び残留性等を勘
案するとより沸点の低い物が好ましく、例えばクロロフ
ォルム、塩化メチレン、メタノール等及びこれらの混合
物が拳けられる。

次に、該脂質親和性白金錯体を含む脂質の薄膜に加える
水性媒体の量は該薄膜が分散する最少量以上で良く、本
発明では脂質ｌｆｆ１ｇに対して約０．０５　ｍ１以上
であれば良い。この際、上限は水性媒体の量が多い根分
散液の濃度が低くなるので、投与に必要な薬剤の量に対
して調節する。

更に該薄膜の水性媒体に対する分散方法は該薄膜が微細
に分散されるのであれば特に限定されないが、より具体
的にはソニケーター　リポプレツブ−ラボ（ＤＩＡＣＣ
ＨＥＭＡ　Ｃｏ　）、リポプレツブ（同）、マイクロフ
ルーダイザ−システム（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ　
Ｃｏ　）、エクストルーダー（ＬＩＰＥＸＢｉ□ｍｅｎ
ｂｒａｎ　Ｃｏ　）等を用いて行う事が出来、目的とす
る粒子径及び分散濃度等によって適宜選択する。本発明
で得られる製剤の粒子径は約１〜１０００　ｎｍの範囲
である。

なお、本発明の製剤にはさらにリポゾーム製造の際使用
される種々の添加剤、例えばコレステロール、コレスタ
ノール及ヒコレスタン等のステロイド類を、また酸化に
対する安定化の為にはα−トコフェロール及びプチルヒ
ドロキシトルエン等を加えても良い。

〔実施例〕

実施例１゜ シスージニトラートー（トランス−１，２−ジアミノシ
クロヘキサン−白金ｆｆ１）４３３■（１ミリモル）を
水２０ｍ１に溶解する。この溶液に、ドデシルマロン酸
２７２■（１ミリモル）ヲ０、０３３　Ｎ−Ｎａ０Ｉｌ
　６０　ｍｌに溶解した溶液を４０〜４５℃で滴下して
加え、更に４時間撹拌する。

冷却後生成した沈澱物を濾過、水洗、乾燥して白色粉末
を得る。この粉末をクロロフォルム−メタノール混液（
３：ｌ）５ｍｔに室温で溶解濾過し、濾液にメタノール
１５ｆｆ１１を撹拌下に加え生成した沈澱をメタノール
で洗浄する。この操作を更に１回反復し、脂質親和性白
金錯体ニジスートデシルマロナート−（トランス−１，
２−ジアミノシクロヘキサン）白金・１１水塩（Ｎｎ５
　）を３３７■得た。（収率５８％） 対応する原料を用い、本実施例と同様にしてＮｎ７の化
合物を得た。

実施例２゜ シスージニトラートジアンミン白金［１１４１３■（４
ミリモル）を水７０ｍｔに溶解し、陰イオン交換樹脂ダ
ウエックスｌ−Ｘ８（ＯＨ型）で処理してシス−ジヒド
ロキシジアンミン白金（社）の水溶液と成す。これにメ
タノール８０ｍ１を加え。

更に２−ヒドロキシミリスチン酸９７６■（４ミリモル
）のメタノール（１５０ｍｌ）溶液を加え、室温で２４
時間撹拌後６０〜６５℃に昇温しで３時間反応させる。

反応後に濃縮して得られた脂質親和性白金錯体：シス−
（２−ｎ−ドデシルグリコラート−ｏ、　ｏ’　）ジア
ンミン白金（ＩＤの粗結晶をメタノ−ルとクロロフォル
ムの混合溶媒（１：２）５０ｍｌに溶解し、活性炭０．
４ｇを加えて１時間撹拌後濾過し、濾液を１〜２ｍｌに
濃縮し得られた沈澱をメタノールで洗浄後減圧乾燥し、
隘８の化合物を得た。（収量８４０■、収率４５％） 対応する原料を用い、本実施例と同様にしてＮ１１９．
１１の化合物を得た。

実施例３゜ ２−ヒドロキシミリスチン酸３６６■（１，５ミリモル
）を０．１５Ｎ−水酸化ナトリウム４６ｍ１に加熱溶解
し、冷却して得られたスラリーにシスージニトラートー
（１−アミノ−１−アミノメチルシクロヘキサン）白金
０３３６■（０，７５ミリモル）の水（２ｏｍｔ）溶液
を加え室温で４８時間撹拌反応させた後、濾過、水洗、
乾燥して脂質親和性白金錯体：シスージ（２−ヒドロキ
シミリステート）１−アミノ−１−アミノメチルシクロ
ヘキサン）白金（２）・１水塩（Ｎｎ６）を得た。（収
量４７０■、収率７７％）対応する原料を用い、本実施
例と同様にして〜、　１．２．３．４．１０の化合物を
得た。

製剤例１゜ 実施例１で得られた脂質親和性白金錯体５■、ジパルミ
トイルフォスフアテジルコリン７３．４■及びジセテル
フォスフェートｌｆｆ１ｇをｌｏｏｍｔのナス型フラス
コにとり、クロロフォルム５　ｍｌを加えて均一な溶液
とする。更にロータリーエバポレーターにてクロロフォ
ルムを留去しフラスコの内壁に脂質親和性白金錯体な含
んだ脂質の薄膜を形成させる。この薄膜を十分に減圧乾
燥した後に５　ｍｌの生理食塩液を加え４０℃の加温下
ニポルテックシングし薄膜を剥離させる。

次にバス型すニケーターで４５℃の加温下１時間分散す
る。得られた懸濁液中の微粒子の粒径はサブミクロンア
ナライザー（コールタ−Ｎ４）で測定し約１００　ｎｍ
であった。

得られた懸濁液及び４０００　ｒｐｍにて遠心分離して
得た上澄液中の脂質親和性白金錯体の量を２２４　ｎｍ
における紫外線スペクトル法により測定した。この結果
から計算した微粒子中の脂質親和性白金錯体の含有率、
即ち保持率は９７．８％であった。

製剤例２゜ 実施例２で得られた脂質親和性白金錯体５ｍｇ、ジパル
ミトイルフォスファチヂルコリン５８．７■、ジオレイ
ルフオスファチジルコリン１５，７■、コレステロール
４．８■及びステアリルアミン２．７　ｍｇを１００ｍ
１のナス型フラスコにとり、クロロフォルム５　ｍｌを
加えて均一な溶液とする。

更にロータリーエバポレーターにてクロロフォルムを留
去しフラスコの内壁に脂質親和性白金錯体を含んだ脂質
の薄膜を形成させる。この薄膜を十分に減圧乾燥した後
に５　ｍｌの生理食塩液を加え４０℃の加温下ニポルテ
ックシングし薄膜を剥離させる。次にバス型すニケータ
ーで４５℃の加温下１時間分散する。得られた懸濁液中
の微粒子の粒径はサブミクロンアナライザー（コールタ
−１Ｎ４）で測定し約８０　ｎｍであった。また、製剤
例１と同様に測定した保持率は９９．１％であった。

製剤例３゜ 実施例３で得られた脂質親和性白金錯体５ｍｇ、卵黄レ
シチン７０ｆ１ｇ及びコレステロール４．８Ｉｑｇを１
００　ｍｌのナス型フラスコにとり、クロロフォルムｓ
　ｍｔを加えて均一な溶液とする。更にロータリーエバ
ポレーターにてクロロフォルムを留去しフラスコの内壁
に脂質親和性白金錯体を含んだ脂質の薄膜を形成させる
。この薄膜を十分に減圧乾燥した後に５　ｍｌの生理食
塩液を加え４０℃の加温下ニボルテックシングし薄膜を
剥離させる。次にパス型すニケーターで４５℃の加温下
１時間分散する。得られた懸濁液中の微粒子のね径はサ
ブミクロンアナライザー（コールタ−１Ｎ４）で測定し
約９５　ｎｍであった。また製剤例１と同様に測定した
保持率は９８．３％であった。

製剤例４゜ 実施例２で得た脂質親和性白金錯体５ｍｉ；、卵黄レシ
チン７０■及びコレステロール４．８■を１００ｍ１の
ナス型フラスコにとり、エタノール１０ｍｔ加えて均一
な溶液とする。次に、この溶液を回転式凍結乾燥機で凍
結乾燥する。得られ１と同様に測定した保持率は９９．
０％であった。

〔作　用〕

次に本発明化合物の作用について説明する。

実験例１゜ （１）試料 製剤例１の製剤を用いた。

（２）実験方法 （イ）継代培養中のマウス白血病Ｌ−１２１０細胞を硫
酸カナマイシン１００／ｍｌを加えた１０％牛脂児血清
添加ＲＰＭＹ　１６４０培養液に０．５５　１０個／ｍ
ｌに分散し、各Ｗｅｌｌ（２４Ｗｅｌ１Ｍｕｌｔｉ　Ｐ
ｌａｔｅ）ここの分散液を０．９　ｍｌずつ分注する。

更に、各種薬剤濃度に調整した本発明の微粒子懸濁液を
６．１　ｍｔずつ添加し５％炭酸ガスインキュベーター
中で３７℃、４８時間培養した。培養前後の細胞数をコ
ールタ−カウンターＭｏｄｅｌ−ＺＢＩで測定し、細胞
増殖阻害作用指数（ＩＤ）を求めた。

（ロ）同様に、継代培養中のマウス肺５ｉ！（ＬＬ）細
胞についても細胞分散濃度５　１０個／　ｍｌ　。

Ｗｅｌｌｈへの分注量０．９５ｍ１で５％炭酸ガスイ／
キーベーター中で３７℃、４８時間培養後細胞数をカウ
ントし、さらに各種薬剤濃度の微粒子懸濁液を０．０５
　ｍ１％添加し３７℃で７２時間培養した。培養後エチ
レンジアミン四酢酸二ナトリウム水溶液０．１　ｍｌを
加え細胞数を測定し細胞増殖阻害作用指数（ＩＤ）を求
めた。

（３）結果 結果を表１．２に示す。

表１　癌細胞（Ｌ１２１０）に対する増殖抑制効果（ｉ
ｎ　−ｖｉｔｒｏ　）試料　投与量　細胞数　阻害率Ｉ
Ｃｓ。

０．２５０　　　　　　　５．９１　　　　　　　４６
．９７　　０．５４０．１２５　　　　　　　８．０６
　　　　　　　２５．６８０．０６２５ ９．４５ １１．９４ 試　　料 投与量 細胞数 阻害率　ＩＣｓ。

製剤例１ １０．００００（ｍｃｇ／１ｎｌ）　　０．２１２．５
０００　　　　　　　　０．５７１０２．２９％ ９８．０４ ０．０３９１ ８．７５ ２．３９ 実験例２゜ （１）試料 製剤例１の製剤を用いた。

（２）実験方法 生後６週齢のＣＤＰＩマウス（１群５匹）の腹腔内にマ
ウス白血病Ｌ−１２１０細胞１１０個を移植し、その翌
日から１日１回５日間各種濃度の製剤を腹腔内に投与し
た。腫瘍細胞移植後３０日問マウスの生死を観察し、薬
剤投与及び非投与両群間の平均生存日数比（Ｔ／Ｃ％）
を求めた。

（３）結果 結果を表３に示す。

又、本発明の製剤を投与した群に急性死したものはなか
った。

実験例３゜ 本発明の製剤の安定性 製剤例１〜４の製剤の微粒子中の薬効酸物について調製
時及び室温で６ケ月間保存後の含有率を調べた。結果を
表４に示す。

製剤例１　　９７．８％　　　９７．０％製剤例２　９
９．１　　　　９８．０ 製剤例３　　９８．３　　　　９９．５ｓ、ｏｏ。

本発明品　　　　　　　４．０００ （実施例１　　　　　　２．０００ の製剤）　　　　　　　１．０００ ５００ ８１ ３９ ２３ １５ ０９ 〔効　果〕 以上から明らかなように本発明の白金錯体は強い抗腫瘍
活性を有し、抗腫瘍剤として期待される。又、本発明の
製剤は安定性の良好なものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（１） ▲数式、化学式、表等があります▼（１） 〔式中Ｒ＿１、Ｒ＿２はそれぞれアンモニア又はＲ＿１
   とＲ＿２がいっしょになって１，２−ジアミノシクロヘ
   キサンもしくは１−アミノ−１−アミノメチルシクロヘ
   キサンを示し、Ｒ＿３、Ｒ＿４はそれぞれ式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ｎは７〜２０の整数を示す） で表わされるα−ヒドロキシカルボン酸残基か又はＲ＿
   ３、Ｒ＿４がいっしょになって式▲数式、化学式、表等
   があります▼ （式中、ｎは前記と同じ） で表わされるアルキルマロン酸残基もしくは式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ｎは前記と同じ） で表わされるアルキルグリコール酸残基を示す〕 で表わされる脂質親和性白金錯体。 ２、特許請求の範囲第１項の脂質親和性白金錯体及びリ
   ン脂質を含有する白金錯体製剤