JPH0324018A - 脂質代謝改善剤 - Google Patents

脂質代謝改善剤

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JPH0324018A
JPH0324018A JP1158161A JP15816189A JPH0324018A JP H0324018 A JPH0324018 A JP H0324018A JP 1158161 A JP1158161 A JP 1158161A JP 15816189 A JP15816189 A JP 15816189A JP H0324018 A JPH0324018 A JP H0324018A
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powder
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eicosapentaenoic acid
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microbial
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Kazuyoshi Yazawa
一良 矢澤
Shuichi Kimura
修一 木村
Akira Kanai
金井　晃
Sei Kondo
近藤　聖
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Sagami Chemical Research Institute
Tosoh Corp
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Sagami Chemical Research Institute
Tosoh Corp
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
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    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A—HUMAN NECESSITIES
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は新規な脂質代謝改善剤に関する。
（従来の技術） 今日、いわゆる典型的成人病の一種である動脈硬化性疾
患、血栓性疾患、高脂血症、肥満、高血圧、糖尿病等は
、いずれも正常な脂質代謝の乱れがその一因を成してい
るものであるが、これらの治療・予防薬としては、いく
つかが提案されている。しかしながら、それらはどれも
薬理効果及び副作用等の点で必ずしも十分満足し得るも
のとは言い難く、より安全で効果的な薬剤への希求が一
段と高まっている。最近、安全性が高い事からエイコサ
ペンタエン酸（以下ＥＰＡ）が注目されているが、これ
までに開発されてきたＥＰＡの化学形態は、主としてエ
チルエステル又はトリグリセリドの形態であったが、そ
れらに比較してリン脂質に結合した化学形態のものが１
／１０以下の投与量で迅速な効果をもたらす事から、Ｅ
ＰＡ結合リン脂質を化学合成法により製造する試みも為
されている（特開昭６３−２６４４２２．特開昭５８−
３８２１５）。
しかしながらこれら化学合成法を用いた場合には、明ら
かに有害なきょう雑物の混入がまぬがれず、さらに反応
効率が低いため、製造・精製コストが高くなり実用には
程遠いものになっている。
（発明が解決しようとする課題） 本発明の目的は、より効果的なかつ安全性の高い新規な
脂質代謝改善剤を大量かつ安価に提供することにある。
（課題を解決するための手段） 本発明者等は、脂質代謝改善剤につき鋭意研究の結果、
ＥＰＡ産生能を有する微生物の脂質について次のような
知見を得た。即ち、■ＥＰＡ産生能を有する微生物の総
脂質の含有量は乾物換算で６〜１２％と高く、そのうち
９０％以上がリン脂質であること、■総脂質の脂肪酸組
或を見てもＥＰＡが２５〜４０％と高く、かつ高度不飽
和脂肪酸としては唯一ＥＰＡのみを含有する事、■総脂
質を溶剤分別により、容易に高純度リン脂質が得られる
事である。さらにここで用いるＥＰＡ産生能を有する微
生物の増殖速度は、通常の微生物に比較して著しく速く
、多量の菌体を極めて短時間のうちに得る事が出来る。
さらに上記菌体より抽出したＥＰＡ結合リン脂質、ある
いはＥＰＡ産生微生物菌体を投与した動物の血中及び肝
臓中の脂質や脂肪組織重量を効果的に低下させる事が出
来る。
本発明は、以上の知見に基づいて完成されたもので、Ｅ
ＰＡ産生能を有する海洋微生物の菌体脂質画分及び／又
はＥＰＡ産生能を有する海洋微生物菌体を主成分とする
、新規の脂質代謝改善剤に関するものである。
本発明で使用できるＥＰＡ産生能を有する微生物は、Ｅ
ＰＡ含有量さえ高いものであれば特に属、種あるいは株
などを限定するものではないが、通常は、シュードモナ
ス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、アルテロモナス（Ａ
ｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ）属、シーワネラ（Ｓｈｅｗａｎ
ｅｌｌａ）属、デレヤ（Ｄｅｌｅｙａ）属、アルテロマ
リナス（Ａｌｔｅｒｏｍａｒｌｎｕｓ）属、パスツレラ
（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ）属、またはビブリオ（Ｖｉ
ｂｒｉｏ）属などに分類される、ＥＰＡ産生能を有する
微生物を用いる。これらの微生物については、本発明者
等がＥＰＡ生産用微生物として先に提案したヨーロッパ
特許出願番号８７３１１３７２．４号、特願昭６２−４
９９２９．特願昭６２−４９９３０．特願昭６２−４９
９３１．特願昭６２−１５６６９３及び特願昭６２−２
７３２００にその性質について詳細に記載されている。
本発明の実施に当たっては、上記ＥＰＡ産生能を有する
微生物を常法により例えば培地で培養して菌体を得、こ
れを遠心分離法などで集め、乾燥して微生物粉末を得る
。この際の培地としては例えば次の第１表に示す組戊の
培地を用いることができる。
第１表（培地の組或） この微生物粉末から、菌体脂質画分を抽出することがで
きる。その方法には特に限定はないが例えば有機溶剤を
用いて脂質抽出を行ない、脱溶剤後、アセトン分画を行
ない、アセトンに不要な物質を集めれば、リン脂質の粗
分画物が得られる。
有機溶剤としては、リン脂質を溶解する通常の溶剤を単
独または混合して用いればよく、例えばクロロホルムー
メタノール系、ｎ−ヘキサンーエタノール水一系、クロ
ロホルムーヘキサン系、クロロホルムーエーテル系、ク
ロロホルムーエタノール系などが挙げられる。
また、分別に用いられる溶剤は、通常、脂質の分別に用
いられる有機溶剤を用いることが出来る。
例えば、アセトン、酢酸、クロロホルム、エーテル等が
挙げられる。また、溶剤にＭｇＣｌ　　、力２ ルシウム等を添加し、その共存下、分別を行なっても良
く、必要に応じて過熱、冷却を行なっても良い。
この様にして得られるリン脂質は、ＴＬｃ（薄層クロマ
トグラフィー）でその組成を分析し、さらに常法により
ケン化分解、メチルエステル化してＧＬＣ　（ガスクロ
マトグラフィー）で分析して構成脂肪酸組成を求めるこ
とが出来る。
上記の方法により得られるリン脂質組成物（ＥＰＡ−Ｐ
Ｌ）は、ホスファチジルエタノールアミン、フォスファ
チジルグリセロール等が主であり、またその構成脂肪酸
は、ＥＰＡ，オレイン酸、パルミトレイン酸、パルミチ
ン酸、ミリスチン酸等であった。
以上のようにして得られた、ＥＰＡ産生能を有する海洋
微生物の菌体脂質画分または該菌体は、脂質代謝改善剤
として利用される。このときの投与量は特に限定はない
が、例えば、ＥＰＡ結合リン脂質で換算して約ｌｍｇ／
ｋｇ体重・日〜Ｉｇ／ｋｇ体重・日であり、また菌体で
投与した場合には、その約２０倍の量で同程度の効果が
得られる。本発明の脂質代謝改善剤の剤型には特に限定
はないが、例えば、カプセル剤，顆粒剤，丸剤，懸濁剤
・乳剤，散剤．錠剤，シロップ剤，注射剤などがあげら
れる。また、生物学的，薬学的に許容されうる添加物を
含んでも良い。
本発明の脂質代謝改善剤は、ヒトはもちろん、家畜，ベ
ットなどの動物の疾病の予防，治療に利用されるだけで
なく、健康食品として、またはニワトリに投与すること
により低コレステロール卵の生産に使用するなど幅広く
利用することができる。
第２表（飼料の組成） 実施例Ｉ ＥＰＡ産生能を有する微生物（アルテロモナスビュート
リファシエンス　ＳＣＲＣ　　２８７４（微工研菌寄第
９１５８号））をペブトン１％，酵母エキス０．５％，
ＮａＣ１１．５％を含有しｐＨ７に調整した培地中で培
養し、菌体を遠心分離して集め、洗浄、乾燥して微生物
粉末を得た。
微生物粉末１００ｇをクロロホルム：メタノール−２：
ｌ混合溶剤で抽出し、８ｇの抽出脂質を得た。この脱溶
剤後の総脂質にアセトン４００ｍｌを加え、冷却しなが
ら撹拌を行ない、ろ過によりアセトン不溶分を回収した
。このアセトン不溶分を脱溶剤したところ約７ｇのリン
脂質組成物（以下ＥＰＡ−ＰＬ）が得られた。得られた
リン脂質の組成はＴＬＣ分折の結果、フォスファチジル
エタノールアミン及びフォスファチジルグリセロールが
主成分であり、また構成脂肪酸はＥＰＡ，オレイン酸、
バルミチン酸、パルミトレイン酸、ミリスチン酸等であ
った。
該ＥＰＡ−ＰＬは、第２表に示す実験動物用飼料に混入
させて使用した。
コントロール用飼料としてＥＰＡ−ＰＬの代わりにバタ
ー２０％を混入させたものを使用した。
上記ＥＰＡ−ＰＬ食またはバター食をＳＨＲ−ＳＰラッ
ト（易脳卒中ラット、雄、体重２　０　０　ｇ）にＩＯ
５ｇ投与し、更に普通飼料（ＳＰ食、フナバシ社製）を
１日１３ｇ投与した。
このようにして４週間飼育し、その間１週ごとに尾動脈
血圧を測定した。
また投与４週間後に解剖し、脂肪組織重量、肝臓中トリ
グリセリド量及び血漿脂質の測定を行なった。肝臓中ト
リグリセリドは、クロロホルム：メタノール−２：１混
合溶剤で総脂質を抽出した後アセチルアセトン法にて測
定した。血漿総コレステロールはズルコウスキー法にて
、またＶＬＤＬ及びキロミクロンは超遠心法にて各リボ
蛋白に分画した後同方法にてコレステロール量を測定し
た。血漿トリグリセリド及びリン脂質はそれぞれアセチ
ルアセトン法及びリン灰化法にて測定した。
このようにして得られた結果を第１図及び第３表〜第５
表に示す。なお、第３表〜第５表に於けるカツコ内の数
字は、コントロールを１００％とした時の低下率（％）
を示したものである。
第３表（脂肪組織重量の低下） （発明の効果） ＥＰＡ産生能を有する微生物より、高収率でＥＰＡ含有
リン脂質を得ることができ、該リン脂質組成物をＳＨＲ
−ＳＰラットに投与したところ血圧の低下、脂肪組織重
量の著しい低下、肝臓トリグリセリド及び血漿脂質の低
下が見られたことから、ＥＰＡ産生能を有する海洋微生
物の菌体脂質画分及び／又は該菌体は、効果的かつ安価
な、新規な脂質代謝改善剤となることが示された。
【図面の簡単な説明】
第１図は実施例において使用した飼料と血圧の変動との
関係を示す図である。

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. （１）エイコサペンタエン酸産生能を有する海洋微生物
    の菌体脂質画分及び／又は該菌体を有効成分として含有
    することを特徴とする脂質代謝改善剤。
  2. （２）前記海洋微生物がシュードモナス （＠Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ＠）属、アルテロモナス（
    ＠Ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ＠）属、シーワネラ（＠Ｓｈ
    ｅｗａｎｅｌｌａ＠）属、デレヤ（＠Ｄｅｌｅｙａ＠）
    属、アルテロマリナス（＠Ａｌｔｅｒｏｍａｒｉｎｕｓ
    ＠）属、パスツレラ（＠Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ＠）属
    、またはビブリオ（＠Ｖｉｂｒｉｏ＠）属である特許請
    求の範囲第（１）項記載の脂質代謝改善剤。
  3. （３）前記菌体脂質画分が、フォスファチジルエタノー
    ルアミン及び／又はフォスファチジルグリセロールを主
    成分とするエイコサペンタエン酸結合リン脂質である特
    許請求の範囲第（１）項又は／第（２）項記載の脂質代
    謝改善剤。
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AU5250790A (en) 1991-01-03
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