JPH0330570B2

JPH0330570B2 -

Info

Publication number: JPH0330570B2
Application number: JP57157105A
Authority: JP
Priority date: 1982-09-09
Filing date: 1982-09-09
Publication date: 1991-04-30
Also published as: JPS5946216A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、２，６−ジ−tert−ブチル−ｐ−ク
レゾールを有効成分として含有することを特徴と
する新規な制癌剤に関するものである。従来、癌化学療法剤として、アルキル化剤（ナ
イトロジエンマスタード類、エチレンイミン類、
スルホン酸エステル類）、代謝拮抗物質（葉酸拮
抗剤、プリン拮抗剤、ピリミジン拮抗剤）、植物
性核分裂毒（コルセミド、ビンブラスチン等）、
抗生物質（ザルコマイシン、カルチノフイリン、
マイトマイシン等）、ホルモン類（副賢ステロイ
ド、男性ホルモン、女性ホルモン）及びポルフイ
リン錯塩（マーフイリン、copp）等が用いられ
ている。しかしながら、その殆んどは、細胞毒型
の物質であり、重大な副作用を呈するため、低毒
性で優れた制癌活性を有する制癌剤の開発が強く
望まれている。そこで、本発明者らは、上記の趣旨に鑑み、低
毒性で制癌活性を有する物質について探索、鋭意
研究の結果、２，６−ジ−tert−ブチル−ｐ−ク
レゾールが、動物の腫瘍細胞に対して分化誘導活
性を有すること及び該物質が著しく低毒性で、優
れた制癌活性を有することの新たな知見を得て、
本発明の制癌剤を完成するに至つた。本発明の制
癌剤の有効成分は、人、家畜、犬、猫等の温血動
物に対する優れた癌化学療法剤となり得るもので
ある。本発明に用いる制癌活性を有する２，６−ジ−
tert−ブチル−ｐ−クレゾールについて、以下に
説明する。２，６−ジ−tert−ブチル−ｐ−クレゾール
は、通称「BHT」と呼ばれ、フツ化水素、無水
塩化アルミニウムなどの存在下にｐ−クレゾール
とイソブチレンとを加熱することにより容易に得
られる物質であり、その物理的性質は、次の通り
である。 (1) m.p.：69〜70℃、（わずかにフエノール臭を
有する白色結晶） (2) b.p.：265℃ (3) 溶解性：水に不溶、エタノール、石油、綿実
油、落花生油に可溶。また、毒性はLD₅₀1.3ｇ／Kg（マウス経口）で
ある。本発明の制癌剤は、経口及び非経口投与のいず
れも使用可能であり、経口投与する場合は、軟・
硬カプセル剤又は錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤と
して投与され、非経口投与する場合は、水溶性懸
濁液、油性製剤などの皮下或いは静脈注射剤、点
滴剤及び固体状又は懸濁粘稠液状として持続的な
粘膜吸収が維持できるように坐薬のような剤型で
投与され得る。本発明の有効成分の製剤化は、界面活性剤、賦
形剤、滑沢剤、佐剤、及び必要に応じて腸溶性製
剤とするために医薬的に許容し得る皮膜形成物
質、コーテイング助剤等を用いて適宜行うことが
でき、その具体例を挙げれば、次のとおりであ
る。本発明の組成物の崩壊、溶出を良好ならしめる
ために、界面活性剤、例えばアルコール、エステ
ル類、ポリエチレングリコール誘導体、ソルビタ
ンの脂肪酸エステル類、硫酸化脂肪アルコール類
等の１種又は２種以上を添加することができる。また、賦形剤として、例えば蔗糖、乳糖、デン
プン、結晶セルロース、マンニツト、軟質無水珪
酸、アルミン酸マグネシウム、メタ珪酸アルミン
酸マグネシウム、合成珪酸アルミニウム、炭酸カ
ルシウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸水素カル
シウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム
等の１種又は２種以上を組合せて添加することが
できる。滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシ
ウム、タルク、硬化油等を１種又は２種以上添加
することができ、また矯味剤及び矯臭剤として、
食塩、サツカリン、糖、マンニツト、オレンジ油
カンゾウエキス、クエン酸、ブドウ糖、メントー
ル、ユーカリ油、リンゴ酸等の甘味剤、香料、着
色料、保存料等を含有させてもよい。懸濁剤、湿潤剤の如き佐剤としては、例えばコ
コナツト油、オリーブ油、ゴマ油、落花生油、乳
酸カルシウム、ベニバナ油、大豆リン脂質等を含
有させることができる。また皮膜形成物質としては、セルロース、糖類
等の炭水化物誘導体として酢酸フタル酸セルロー
ス（CAP）、またアクリル酸系共重合体、二塩基
酸モノエステル類等のポリビニル誘導体としてア
クリル酸メチル・メタアクリル酸共重合体、メタ
アクリル酸メチル・メタアクリル酸共重合体が挙
げられる。また、上記皮膜形成物質をコーテイングするに
際し、通常使用されるコーテイング助剤、例えば
可塑剤の他、コーテイング操作時の薬剤相互の付
着防止のための各種添加剤を添加することによつ
て皮膜形成剤の性質を改良したり、コーテイング
操作をより容易ならしめることができる。なお、
有効成分を皮膜形成物質を用いてマイクロカプセ
ル化してから賦形剤等と混合した剤型としても良
い。特に代表的な剤型における配合比は下記の通り
である。

【表】特に好ましい賦形剤は、乳糖、結晶セルロー
ズ、カルボキシメチルセルロースカルシウムであ
る。また、投与量は、対象腫瘍を有効に治療するに
十分な量であり、腫瘍の症状、投与経路、剤型な
どによつて左右されるが、一般に、経口投与の場
合、大人では１日当り、約0.01〜100mg／Kg体重
（小人では、0.01〜60mg／Kg体重）の範囲で、そ
の上限は好ましくは約50mg／Kg体重、更に好まし
くは約10mg／Kg体重程度であり、非経口投与の場
合、その上限は約10mg／Kg体重程度であり、好ま
しくは５mg／Kg体重、更に好ましくは２mg／Kg体
重が適当である。次に、BHTの制癌活性を確認した制癌性試験
について述べる。〔１〕フレンド白血病細胞（mouse erythroid
leukemia cell，B8細胞）に対する試験 GIBCO製HAMのＦ−12培地に、15％の牛
胎児血清及び60mg／のカナマイシンを加えた
ものに、2.5×10⁴cell／mlとなるようにB8細胞
を接種し、これに所定量の被験化合物を加える
（最終容量５ml）。 7.5％CO₂中、37℃７日間培養した後、オル
キン（orkin）のベンジジン染色法により染色
し、染色された細胞数、すなわち、赤血球への
分化によりヘモグロビンを生成するようになつ
た細胞数を測定し、分化誘導率を求める。分化誘導率（％）＝染色された細胞数／全細胞数×10
0 〔２〕マウス奇形腫細胞（teratocarcinoma
cell）に対する試験方法テラトーマ細胞をマウスの腹腔から腹腔へ移
植後、１ケ月経過したものを用いた。テラトー
マ細胞は、腹腔中では初期胚に似た胚様体
（embroid body）という細胞塊として存在し、
それらをトリプシン処理などを行うことなく用
いた。採取した腹水中で自然沈下させて得られ
る胚様体をダルベコー変法培地、あるいはハン
クス液で３度洗浄後、10％牛胎児血清を含む培
地に接種し、所定量の被験化合物を加え、37℃
でCO₂7.5〜８％を含む水蒸気を飽和して、空
気中で１週間培養する。遠心分離（2000r.p.
m.10分）して得た胚様体を0.86％NaCl溶液で
洗浄後、ナフトールAS−MXホスフエートと
ジアゾ試薬（Fast Violet Ｂ Salt）を加えて
１時間室温で放置する。これを遠心分離
（2000r.p.m.、10分）して胚様体を分離し、エ
タノールを加えて１時間室温で放置する。（未
分化の細胞は、赤く着色する）。これを、
535nmの吸収を測定し、アルカリホスフアター
ゼ活性（分化誘導の程度）を求める。ヘキサメ
チレンビスアセトアミド（HMBA）5mMを加
えた場合（アルカリホスフアターゼ活性を全く
示さない。）を「＋＋」とし、HMBAを加えな
い場合（アルカリホスフアターゼ活性を極めて
強く示す。）を「−−」とし、分化誘導の程度
を次の段階で示した。＋＋：アルカリホスフアターゼ活性を全く示さ
ない。＋：アルカリホスフアターゼ活性をほとんど
示さない。 ±：アルカリホスフアターゼ活性を若干示
す。 −：アルカリホスフアターゼ活性を強く示
す。 −−：アルカリホスフアターゼ活性を極めて強
く示す。なお、後述の試験例では、分化誘導作用をもつ
て、制癌活性を示した。以下に、本発明を製剤例及び試験例によつて具
体的に説明する。製剤例１（注射・点滴剤） BHT10mgを含有するように粉末ぶどう糖５ｇ
を加えてバイアルに無菌的に分配し、密封した
上、窒素、ヘリウム等の不活性ガスを封入して冷
暗所に保存する。使用前にエタノールに溶解し、
0.85％生理的食塩水100mlを添加して静脈内注射
剤とし、１日、10〜100mlを症状に応じて静脈内
注射又は点滴で投与する。製剤例２（注射・点滴剤） BHT2mgを用いて、製剤例１と同様の方法によ
り軽症用静脈内注射剤とし、１日、10〜100mlを
症状に応じて静脈内注射又は点滴で投与する。製剤例３（腸溶性カプセル剤） BHT5ｇ、乳糖2.46ｇ及びヒドロキシプロピル
セルロース0.04ｇを各々とり、よく混合した後、
常法に従つて粒状に成形し、これをよく乾燥して
篩別してビン、ヒートシール包装などに適した顆
粒剤を製造する。次に、酢酸フタル酸セルロース
0.5ｇ及びヒドロキシプロピルメチルセルロース
フタレート0.5ｇを溶解して被覆基材となし、前
記顆粒を浮遊流動させつつこの基材を被覆して腸
溶性の顆粒剤とする。この組成物をカプセルに充
填して腸溶性カプセル製剤100個を製造する。試験例 BHTを用い、前記試験法〔１〕及び〔２〕よ
り、フレンド白血病細胞の分化誘導率及びマウス
奇形腫細胞の分化誘導程度を調べたところ、それ
ぞれ、第１表、及び第２表に示す結果が得られ
た。

【表】

【表】上記試験例の結果から明らかなように、BHT
は癌細胞に対して、正常細胞への分化誘導作用を
示すことから、毒性の少ない優れた制癌活性を示
すことが立証された。

Claims

【特許請求の範囲】１２，６−ジ−tert−ブチル−ｐ−クレゾール
（２，６−di−tert−butyl−ｐ−cresol）を有効
成分として含有することを特徴とする制癌剤。２非経口投与形態による特許請求の範囲第１項
記載の制癌剤。３経口投与形態による特許請求の範囲第１項記
載の制癌剤。