JPH0346119B2 - - Google Patents
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- JPH0346119B2 JPH0346119B2 JP57190895A JP19089582A JPH0346119B2 JP H0346119 B2 JPH0346119 B2 JP H0346119B2 JP 57190895 A JP57190895 A JP 57190895A JP 19089582 A JP19089582 A JP 19089582A JP H0346119 B2 JPH0346119 B2 JP H0346119B2
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- factor
- amino
- plasma
- nitro
- factor xiia
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/56—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving blood clotting factors, e.g. involving thrombin, thromboplastin, fibrinogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2337/00—N-linked chromogens for determinations of peptidases and proteinases
- C12Q2337/10—Anilides
- C12Q2337/12—Para-Nitroanilides p-NA
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/95—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99)
- G01N2333/964—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue
- G01N2333/96425—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals
- G01N2333/96427—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general
- G01N2333/9643—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general with EC number
- G01N2333/96433—Serine endopeptidases (3.4.21)
- G01N2333/96441—Serine endopeptidases (3.4.21) with definite EC number
- G01N2333/96458—Factor XII (3.4.21.38)
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は血漿中に含有される因子XII（前酵素）
を因子XIIａ（酵素）に活性化し、因子XIIａを酵素
により分解性の気質と直接反応させることにより
人血漿中の凝固因子XII（ハーゲマン因子）を定量
的に測定するための方法に関する。
を因子XIIａ（酵素）に活性化し、因子XIIａを酵素
により分解性の気質と直接反応させることにより
人血漿中の凝固因子XII（ハーゲマン因子）を定量
的に測定するための方法に関する。
因子XIIは内因性血液凝固段階を活性化する第１
の因子である。この因子は凝固機構においてのみ
重要な役割をはたすのではなく、カリクレイン−
キニンシステムにおいても、またフイブリノリシ
スシステムにおいても重要な役割を果すので、血
漿中の該因子を定量測定することができるという
ことは重要なことである。今日、最も多く使用さ
れている測定法は、血漿試料をカオリンと共に恒
温保持することによりハーゲマン因子
（Hageman−Faktor）を最大に活性化し、活性
化混合物をハーゲマン−因子−欠乏血漿と共に恒
温保持し、一定の時間後恒温保持した混合物にカ
ルシウムイオンを添加することによりカルシウム
再添加を行ない、カルシウム再添加混合物の凝固
時間を測定する。凝固時間は試料中のハーゲマン
因子の濃度の関数にほぼ等しい（例えば、Oscar
D.Ratnoff 著“Thrombosis and Bleeding
Disorders”1971年、Georg Thieme Verlag社、
ステユツトガルト、第215〜218頁参照）。この測
定法の欠点は長い反応段階の結果である値を測定
するので、多数の反応パラメーターに依存すると
いうことである。入手困難なハーゲマン因子−欠
乏血漿を較正曲線の作成のために必要とするとい
うこともこの発明を困難にしている。
の因子である。この因子は凝固機構においてのみ
重要な役割をはたすのではなく、カリクレイン−
キニンシステムにおいても、またフイブリノリシ
スシステムにおいても重要な役割を果すので、血
漿中の該因子を定量測定することができるという
ことは重要なことである。今日、最も多く使用さ
れている測定法は、血漿試料をカオリンと共に恒
温保持することによりハーゲマン因子
（Hageman−Faktor）を最大に活性化し、活性
化混合物をハーゲマン−因子−欠乏血漿と共に恒
温保持し、一定の時間後恒温保持した混合物にカ
ルシウムイオンを添加することによりカルシウム
再添加を行ない、カルシウム再添加混合物の凝固
時間を測定する。凝固時間は試料中のハーゲマン
因子の濃度の関数にほぼ等しい（例えば、Oscar
D.Ratnoff 著“Thrombosis and Bleeding
Disorders”1971年、Georg Thieme Verlag社、
ステユツトガルト、第215〜218頁参照）。この測
定法の欠点は長い反応段階の結果である値を測定
するので、多数の反応パラメーターに依存すると
いうことである。入手困難なハーゲマン因子−欠
乏血漿を較正曲線の作成のために必要とするとい
うこともこの発明を困難にしている。
因子XIIから生じた因子XIIａの酵素的活性を、一
定の色原体のトリペプチド誘導体を分解可能な基
質として使用することにより、血漿中で直接かつ
定量的に測定することができるということが判明
した。
定の色原体のトリペプチド誘導体を分解可能な基
質として使用することにより、血漿中で直接かつ
定量的に測定することができるということが判明
した。
本発明による方法は、血漿を活性剤で処理する
ことにより血漿中に含有される因子XIIを因子XIIａ
に変換し、因子XIIａを一般式： ［式中、R1はｐ−ニトロフエニルアミノ−、１
−カルボキシ−２−ニトロ−フエニル−(5)−アミ
ノ−、１−スルホ−２−ニトロ−フエニル−(5)−
アミノ−、β−ナフチルアミノ−、５−ニトロ−
α−ナフチルアミノ−、シノニル−(5)−アミノ
−、８−ニトロ−シノニル−(5)−アミノ−、又は
４−メチル−クマリル−(7)−アミノ基を表わし、
R2は炭素原子数１〜４の直鎖又は分枝鎖アルキ
ル基、又はベンジン−、ｐ−ヒドロキシベンジル
−、シクロヘキシルメチル−又は４−ヒドロキシ
シクロヘキシルメチル基を表わす］のトリペプチ
ド誘導体又は該化合物と有機酸又は鉱酸との塩と
反応させ、XIIａ因子により酵素的にトリペプチド
誘導体から遊離した有色の又は蛍光性分解生成物
R1Hの量を側光法、分光測定法又は蛍光側定法
で測定するとを特徴とする。
ことにより血漿中に含有される因子XIIを因子XIIａ
に変換し、因子XIIａを一般式： ［式中、R1はｐ−ニトロフエニルアミノ−、１
−カルボキシ−２−ニトロ−フエニル−(5)−アミ
ノ−、１−スルホ−２−ニトロ−フエニル−(5)−
アミノ−、β−ナフチルアミノ−、５−ニトロ−
α−ナフチルアミノ−、シノニル−(5)−アミノ
−、８−ニトロ−シノニル−(5)−アミノ−、又は
４−メチル−クマリル−(7)−アミノ基を表わし、
R2は炭素原子数１〜４の直鎖又は分枝鎖アルキ
ル基、又はベンジン−、ｐ−ヒドロキシベンジル
−、シクロヘキシルメチル−又は４−ヒドロキシ
シクロヘキシルメチル基を表わす］のトリペプチ
ド誘導体又は該化合物と有機酸又は鉱酸との塩と
反応させ、XIIａ因子により酵素的にトリペプチド
誘導体から遊離した有色の又は蛍光性分解生成物
R1Hの量を側光法、分光測定法又は蛍光側定法
で測定するとを特徴とする。
活性剤としては、ケフアリン及びエラグ酸を含
有する製剤又はカオリンを使用することができ
る。因子XIIの活性化は有利に約０℃で実施され
る。因子XIIａとトリペプチド誘導体との反応は有
利に大豆トリプシンインヒビターの存在下に緩衝
システム中でPH7.4〜8.0、有利に7.7で、かつイオ
ン強度0.025〜0.2、有利に0.05で実施する。
有する製剤又はカオリンを使用することができ
る。因子XIIの活性化は有利に約０℃で実施され
る。因子XIIａとトリペプチド誘導体との反応は有
利に大豆トリプシンインヒビターの存在下に緩衝
システム中でPH7.4〜8.0、有利に7.7で、かつイオ
ン強度0.025〜0.2、有利に0.05で実施する。
トリペプチド誘導体の塩は鉱酸、例えばHCl、
HBr、H2SO4又はH3PO4、又は有機酸、例えば
蟻酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、クエン酸、蓚
酸、酒石酸、安息香酸、フタル酸、三塩化酢酸又
は三弗化酢酸との塩であつてよい。
HBr、H2SO4又はH3PO4、又は有機酸、例えば
蟻酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、クエン酸、蓚
酸、酒石酸、安息香酸、フタル酸、三塩化酢酸又
は三弗化酢酸との塩であつてよい。
本発明により使用したトリペプチド誘導体は自
体公知法で製造することができる 前記一般式の中には例えば次の個々のトリペプ
チド誘導体が入る： 2AcOH.H−Ｄ−Ala−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−But−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Val−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Nval−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Leu−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Nleu−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Ile−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Phe−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Tyr−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−CHA−Gly−Arg−pNA、 前記省略形は次の意味を有する： AcOH＝酢酸 Ala＝アラニル Arg＝アルギニル But＝α−アミノブチリル CHA＝３−シクロヘキシル−アラニル CHT＝３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）−
アラニル Gly＝グリシル Ile＝イソロイシル Leu＝ロイシル Nleu＝ノルロイシル Nval＝ノルバリル Phe＝フエニルアラニル Tyr＝チロシル Val＝バリル Ｄ−アミノ酸基についた２個のアミノ酸基はＬ
−型である。
体公知法で製造することができる 前記一般式の中には例えば次の個々のトリペプ
チド誘導体が入る： 2AcOH.H−Ｄ−Ala−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−But−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Val−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Nval−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Leu−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Nleu−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Ile−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Phe−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−Tyr−Gly−Arg−pNA、
2AcOH.H−Ｄ−CHA−Gly−Arg−pNA、 前記省略形は次の意味を有する： AcOH＝酢酸 Ala＝アラニル Arg＝アルギニル But＝α−アミノブチリル CHA＝３−シクロヘキシル−アラニル CHT＝３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）−
アラニル Gly＝グリシル Ile＝イソロイシル Leu＝ロイシル Nleu＝ノルロイシル Nval＝ノルバリル Phe＝フエニルアラニル Tyr＝チロシル Val＝バリル Ｄ−アミノ酸基についた２個のアミノ酸基はＬ
−型である。
前記トリペプチド誘導体は自体公知の化合物で
あり、ここでｐ−ニトロフエニルアミノ基は他の
色原体又は発蛍光団置換アミノ基、例えば１−カ
ルボキシ−２−ニトロ−フエニル−(5)−アミノ
基、１−スルホ−２−ニトロ−フエニル−(5)−ア
ミノ基、β−ナフチルアミノ基、４−メトキシ−
β−ナフチルアミノ基、５−ニトロ−α−ナフチ
ルアミノ基、キノニル−(5)−アミノ基、８−ニト
ロ−シノニル−(5)−アミノ基、４−メチル−クマ
リル−(7)−アミノ基又は１，３−ジ（メトキシカ
ルボニル）−フエニル−(5)−アミノ基（５−アミ
ノ−イソフタル酸−ジメチルエステルから誘導）
と変換することもできる。
あり、ここでｐ−ニトロフエニルアミノ基は他の
色原体又は発蛍光団置換アミノ基、例えば１−カ
ルボキシ−２−ニトロ−フエニル−(5)−アミノ
基、１−スルホ−２−ニトロ−フエニル−(5)−ア
ミノ基、β−ナフチルアミノ基、４−メトキシ−
β−ナフチルアミノ基、５−ニトロ−α−ナフチ
ルアミノ基、キノニル−(5)−アミノ基、８−ニト
ロ−シノニル−(5)−アミノ基、４−メチル−クマ
リル−(7)−アミノ基又は１，３−ジ（メトキシカ
ルボニル）−フエニル−(5)−アミノ基（５−アミ
ノ−イソフタル酸−ジメチルエステルから誘導）
と変換することもできる。
本発明方法の実施のために次のように行なう。
因子XIIの含量を測定すべきクエン酸塩血漿を水
性ケフアリン及びエラグ酸を含有する製剤、例え
ばアクチン （Actin 、DADE社、マイアミ、
USA）又はケホテスト （Cephotest、Firma
Nyegaard＆Co.AS.オスロ、ノルウエー）と混合
し、この混合物を数分間、有利に４分間低温、有
利に０℃で恒温保持することにより因子XIIを因子
XIIａに変換する。低温での作業は、プラスマイン
ヒビターα2−マクログロブリンとの酵素コンプレ
ツクスの形成を抑制するために重要である。この
理由は基質として使用したトリペプチド誘導体を
このコンプレツクスは酵素的に分解することがで
きるが、相応する遊離酵素より速度がおそいので
ある。次いで、得られた活性化混合物の部分量を
テストシステムに加える。このテストシステムは
緩衝剤、例えばPH7.0〜8.0、有利に7.7及びイオン
強度0.025〜0.2、有利に0.05であり、かつ大豆ト
リプシンインヒビターを含有するトリスイミダゾ
ール緩衝剤を前記トリペプチド誘導体の１つの水
溶液及び活性剤（アクチン又はケホスト）の水溶
液と混合し、かつトリペプチド誘導体の分解を測
定すべき温度で数分間、予備恒温保持することに
より製造した。次に、単位時間あたり遊離する有
色又は蛍光性分解生成物の量を側光法、分光側光
法又は蛍光側光法により測定する。分解生成物が
ｐ−ニトロアニリンである時、測定を有利に
405nｍで実施する。
性ケフアリン及びエラグ酸を含有する製剤、例え
ばアクチン （Actin 、DADE社、マイアミ、
USA）又はケホテスト （Cephotest、Firma
Nyegaard＆Co.AS.オスロ、ノルウエー）と混合
し、この混合物を数分間、有利に４分間低温、有
利に０℃で恒温保持することにより因子XIIを因子
XIIａに変換する。低温での作業は、プラスマイン
ヒビターα2−マクログロブリンとの酵素コンプレ
ツクスの形成を抑制するために重要である。この
理由は基質として使用したトリペプチド誘導体を
このコンプレツクスは酵素的に分解することがで
きるが、相応する遊離酵素より速度がおそいので
ある。次いで、得られた活性化混合物の部分量を
テストシステムに加える。このテストシステムは
緩衝剤、例えばPH7.0〜8.0、有利に7.7及びイオン
強度0.025〜0.2、有利に0.05であり、かつ大豆ト
リプシンインヒビターを含有するトリスイミダゾ
ール緩衝剤を前記トリペプチド誘導体の１つの水
溶液及び活性剤（アクチン又はケホスト）の水溶
液と混合し、かつトリペプチド誘導体の分解を測
定すべき温度で数分間、予備恒温保持することに
より製造した。次に、単位時間あたり遊離する有
色又は蛍光性分解生成物の量を側光法、分光側光
法又は蛍光側光法により測定する。分解生成物が
ｐ−ニトロアニリンである時、測定を有利に
405nｍで実施する。
テストシステム中に含有される大豆トリプシン
−インヒビターは、因子XIIの因子XIIａへの活性化
の際に同時に活性化したプラスマーカリクレイン
を選択的に抑制することにより、基質として使用
したトリペプチド誘導体に対するプラスマーカリ
クレインの酵素的作用を下げるという機能を有す
る。他方、大豆トリプシン−インヒビターは因子
XIIａに対し全く抑制作用を示さない。
−インヒビターは、因子XIIの因子XIIａへの活性化
の際に同時に活性化したプラスマーカリクレイン
を選択的に抑制することにより、基質として使用
したトリペプチド誘導体に対するプラスマーカリ
クレインの酵素的作用を下げるという機能を有す
る。他方、大豆トリプシン−インヒビターは因子
XIIａに対し全く抑制作用を示さない。
本発明による測定法は従来公知の測定法に対し
多くの利点をもたらし、本発明による方法が因子
XIIを活性化因子XIIａを介して直接測定することが
可能であるかぎり、その酵素活性を前記トリペプ
チド誘導体を用いて唯一の工程で求めることがで
きる。従来の方法においては因子XIIａの活性は凝
固時間を用いて間接的に測定する。凝固は因子XII
ａにより惹起された内因性凝固段階が完全に終了
した後ではじめて生じる。比較可能な測定値を得
るためには、因子XIIａの凝固時間に対する影響を
調べ、かつこの目的のために較生曲線を描くため
に必要なハーゲマン−因子−欠乏血漿を使用する
ことが必要である。最終測定結果が複雑に互いに
かみあつた酵素的工程の経過後はじめて得られる
古い方法は多くの調節不可能な欠陥源を有し、こ
のことにより不正確である。因子XIIを全く有さな
い欠乏血漿を得ることは非常に困難である。今
日、臨床実験室においては、分析を迅速かつ正確
で、なるべく人の手をわずらわせない自動分析機
を使用する傾向にある。従来の方法は熟練した実
験者により時間のかかる方法で半定量的に実施す
ることができたが、本発明による測定法は前記の
ような自動分析機に好適である。
多くの利点をもたらし、本発明による方法が因子
XIIを活性化因子XIIａを介して直接測定することが
可能であるかぎり、その酵素活性を前記トリペプ
チド誘導体を用いて唯一の工程で求めることがで
きる。従来の方法においては因子XIIａの活性は凝
固時間を用いて間接的に測定する。凝固は因子XII
ａにより惹起された内因性凝固段階が完全に終了
した後ではじめて生じる。比較可能な測定値を得
るためには、因子XIIａの凝固時間に対する影響を
調べ、かつこの目的のために較生曲線を描くため
に必要なハーゲマン−因子−欠乏血漿を使用する
ことが必要である。最終測定結果が複雑に互いに
かみあつた酵素的工程の経過後はじめて得られる
古い方法は多くの調節不可能な欠陥源を有し、こ
のことにより不正確である。因子XIIを全く有さな
い欠乏血漿を得ることは非常に困難である。今
日、臨床実験室においては、分析を迅速かつ正確
で、なるべく人の手をわずらわせない自動分析機
を使用する傾向にある。従来の方法は熟練した実
験者により時間のかかる方法で半定量的に実施す
ることができたが、本発明による測定法は前記の
ような自動分析機に好適である。
本発明による方法は次の例中に記載した方法で
実施することができる。
実施することができる。
例
PH7.7及びイオン強度0.05の、１mlあたり大豆
トリプシンインヒビター0.1mgを含有するトリス
イミダゾール緩衝液0.75ml、２×10-3モル
2AcOH.H−Ｄ−Leu−Gly−Arg−pNA水溶液
0.25ml及び活性化水性ケフアロプラスチン試薬
（Actin 、DADE社、マイアミ、USA）0.20ml
からなるテストシステムを４分間37℃で予備恒温
保持する。正常なクエン酸塩血漿0.1ml及び水性
活性ケフアロプラスチン試薬0.2mlを混合し、０
℃で４分間恒温保持して得られた恒温保持物質
0.05mlを予備恒温保持物質に加える。両方の成分
を混合した後、因子XIIａにより遊離したｐ−ニト
ロアニリンの量を405nｍで分光側光法により５
分間連続的に測定する。１分あたりの光学密度の
上昇から因子XIIａの活性を血漿１mlあたりの酵素
単位で計算する。
トリプシンインヒビター0.1mgを含有するトリス
イミダゾール緩衝液0.75ml、２×10-3モル
2AcOH.H−Ｄ−Leu−Gly−Arg−pNA水溶液
0.25ml及び活性化水性ケフアロプラスチン試薬
（Actin 、DADE社、マイアミ、USA）0.20ml
からなるテストシステムを４分間37℃で予備恒温
保持する。正常なクエン酸塩血漿0.1ml及び水性
活性ケフアロプラスチン試薬0.2mlを混合し、０
℃で４分間恒温保持して得られた恒温保持物質
0.05mlを予備恒温保持物質に加える。両方の成分
を混合した後、因子XIIａにより遊離したｐ−ニト
ロアニリンの量を405nｍで分光側光法により５
分間連続的に測定する。１分あたりの光学密度の
上昇から因子XIIａの活性を血漿１mlあたりの酵素
単位で計算する。
この方法によれば、正常プラスマ中に１mlあた
り平均して因子XIIa0.15〜0.30酵素単位が測定さ
れる。因子XII１分子は活性化の際に因子XIIa1分
子を供給するので、因子XIIａにより求められた値
は同時にもともと血漿中に存在する因子XIIの量で
ある。
り平均して因子XIIa0.15〜0.30酵素単位が測定さ
れる。因子XII１分子は活性化の際に因子XIIa1分
子を供給するので、因子XIIａにより求められた値
は同時にもともと血漿中に存在する因子XIIの量で
ある。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 血漿を活性剤を用いて約０℃の低温度で処理
することにより、血漿中に含有される因子XIIを因
子XIIａに変換し、因子XIIａを一般式： ［式中、R1はｐ−ニトロフエニルアミノ−、１
−カルボキシ−２−ニトロ−フエニル−(5)−アミ
ノ−、１−スルホ−２−ニトロ−フエニル−(5)−
アミノ−、β−ナフチルアミノ−、５−ニトロ−
α−ナフチルアミノ−、シノニル−(5)−アミノ
−、８−ニトロ−シノニル−(5)−アミノ−、又は
４−メチル−クマリル−(7)−アミノ基を表わし、
R2は炭素原子数１〜４の直鎖又は分枝鎖アルキ
ル基、又はベンジン−、ｐ−ヒドロキシベンジル
−、シクロヘキシルメチル−又は４−ヒドロキシ
シクロヘキシルメチル基を表わす］のトリペプチ
ド誘導体又は該化合物と有機酸又は鉱酸との塩と
反応させ、XIIａ因子により酵素的にトリペプチド
誘導体から遊離した有色又は蛍光性分解生成物
R1Hの量の側光法、分光測定法又は蛍光側定法
で測定することを特徴とする人血漿中の血液凝固
因子XIIの定量測定法。 ２ 因子XIIの活性化をPH7.4〜8.0で、かつイオン
強度0.025〜0.2の緩衝システム中でケフアリン及
びエラグ酸を用いて、又はカオリンを用いて０℃
で実施する特許請求の範囲第１項記載の測定法。 ３ 因子XIIａとトリペプチド誘導体との反応を大
豆トリプシンインヒビターの存在下に実施する特
許請求の範囲第１項又は第２項記載の測定法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH6972/814 | 1981-11-02 | ||
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