JPH035500A - 新規な抗癌抗生物質ｍｈ５６３―３２ｆ１及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

〔産業上の利用分野〕 本発明は新規な抗癌抗生物質ＭＨＩ５６３−３２Ｆ１お
よびその製造法に関する。 〔従来の技術〕 微生物の生産する抗生物質は、これまでに約５０００種
類が報告されており、癌および感染症の治療に広く用い
られている。このうち、ストレプトミセス属に属する微
生物からは、アクチノマイシンＤ１マイトマイシンＣ１
ブレオマイシン、ダウノマイシン、アドリアマイシン、
アクラシノマイシンなどが抗癌性抗生物質として報告さ
れている。 〔発明が解決しようとしている課題〕 抗生物質の使用においては、その抗生物質の副作用は避
けられず、また、より強い制癌活性を有し、かつ弱い毒
性をも有して癌治療に有効な物質が望まれている。本発
明の目的は、人癌細胞にも有効な新規な抗生物質を提供
することにある。 〔課題を解決するための手段〕 本発明者らは、放線菌の一菌株を分離し、これが新規な
抗生物質を産生ずることを見出し、これを分離すること
に成功して抗癌抗生物９ＭＨ５６３−３２Ｆ１と命名し
た。 従って、第１の本発明によると、下記の特性、すなわち
白色物質（通常は飴状である）であり、元素分析値は炭
素５２．８０％、水素７．９５％、窒素１２、４３％、
酸素２４．５０％であり、分子量は８２２であり、分子
式はＣ：＋ｑＨ６Ｊ、、Ｑ、であり、比旋光度は（α）
：’　＝＋１９．１°　（ｃ＝１　、メタノール）であ
り、紫外部吸収スペクトル（メタノール中）は末端吸収
を示し、赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）は添付図画
に示すとおりであり、メタノール、クロロホルムに易溶
、水及びヘキサンに難溶であり、アニスアルデヒド反応
、およびライドン・スミス反応は共に陽性を示すことを
特徴とする抗癌抗生物質ＭＦＩ５６３−３２Ｆ１が提供
される。 ＭＨ５６３−３２Ｆ１の物理化学的性状の上記及びその
他の性質を次表に要約する。 なお本発明の抗生物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１を６Ｎ−塩
酸で１０５’Ｃ１１８時間加水分解し、分解物をダウエ
ックス５０Ｗ−Ｘ２イオン交換樹脂を用いて分離した結
果、抗生物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１は、構成アミノ酸と
して、グリシン、アラニン、３−ハイドロキシロイシン
、Ｎ−ハイドロキシアラニン、６−カルボキシルバーハ
イドロピリダジンを含有することがわかった。 抗生物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１の生物学的性質は下記の
通りである。 抗生物質Ｍ）１５６３−３２Ｆ１の各種動物癌細胞およ
び人癌細胞に対する増殖阻害活性（ｒｃｓ。）値を測定
してその結果は、第２表（１）に示した。また、細胞懸
濁液と抗生物質Ｍ１１５６３−３２Ｐ１を３７℃で１時
間反応させ、洗浄後、細胞を栄養寒天培地に移しその集
落形成に対する阻害活性（ＩＣ，。）値を測定して、そ
の結果を第２表（２）に示した。 いずれの活性評価方法に於ても、抗生物質ＭＦ［５６３
３２Ｆ１はマウス癌細胞の他に、ヒト肺癌（ＬＸ−１）
およびヒト胃癌細胞（ＳＣ−６）に強い増殖阻害活性を
示した。 すなわち、Ｍ！（５６３−３２Ｆ１の各種動物癌細胞お
よび人癌細胞の増殖に対する阻害活性を要約すると次表
の通りである。 Ｕ−■ 癌細胞の増殖に対する阻害活性 更に、抗生物質Ｍ１１５６３−３２ＦｌのＬ−１２１０
のマウス白血病に対する抗腫瘍効果の評価は以下の方法
で行なった。 ＣＤＦ　ＩマウスにＬ−１２１０白血病細胞を１×１０
Ｓ個／マウスとなるように腹腔内に移植し、抗生物質Ｍ
ｌ１５６３−’３２ＦＩを移植直後から１０日間連続し
て腹腔内に投与し、マウスの延命日数を求めた。結果は
生理食塩水を投与したマウスの生存日数を１００とした
ときの延命率で後記の第３表（１）に示した。 エールリッヒ腹水癌担癌マウスに対する結果は以下の方
法で行なった。 ＩＣＲマウスにエールリッヒ腹水癌細胞を２×１０ｈ個
／マウスとなるように腹腔内に移植し、移植直後より１
０日間連続して抗生物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１を腹腔内
に投与し、マウスの延命日数を調べた。結果は生理食塩
水を投与した対照群のマウスの生存日数を１００とした
ときの延命率を第３表（２）に示した。 ＩＭＣ固型固型癌マウスに対する抗癌効果の評価は以下
の方法によって行なった。 ＣＤＦ　、マウスにＩＭＣ−ｃａｒｃｉｎｏｗａ腹水癌
細胞を２×１０６個／マウスとなるように皮下に移植し
、移植後７．　９．１１．１２．１４．１６日目に抗生
物質旧５６３−３２Ｆ１を腹腔的投与し、移植後２８日
目に固型癌の重量を測定した。生理食塩水を投与した対
照群のマウスの固型癌の重量を１００とした時のＭＨ５
６３−３２Ｆ１投与群の固型癌の重量の減少の割合を抑
制率として第３表（３）に示した。 ヒト肺癌（ＬＸ−１）担癌マウスに対する抗癌効果の評
価は以下の方法によって行なった。 Ｂａ　ｌｂ／ｃ　（ｎｕ／ｎｕ）マウスに約１！ＩＩｍ
’のＬＸ−１固型癌塊を皮下に移植し、移植後１４日目
より１０日間連続して抗生物質Ｍ）１５６３−３２Ｆ１
を腹腔的投与した。移植後３１日目に固型癌の重量を測
定した。生理食塩水を投与した対照群のマウスの固型癌
の重量を１００とした時のＭＨ５６３−３２Ｆ１投与群
の固型癌の重量の減少の割合を抑制率として後記の第３
表（４）に示した。 すなわち、マウスに移植された各種の癌に対するＭＨ５
６３−３２Ｆ１０制癌効果を要約すると、次表の通りで
ある。 １−」−」

【−ｍ Ｌ−１２１０マウス白血病担癌マウスに対する効果＊腹
腔丙投与、癌細胞の移植直後から１０日目土で連日′投
与。 ■−ニー表−冊 エールリッヒ腹水癌担癌マウスに対する効果ｍ−□□□ ヒト肺癌細゛胞（Ｌχ−１）担癌マウスに対する効果＊
腹腔的投与、癌細胞の移植直後から１０日目土で連日投
与。 男−Ｊ−」Ｌ−皿 ＩＭＣ固型癌胆癌マウスに対する効果 ＊腹腔的投与、癌細胞の移植後１４日目上り１０日間連
日投与。 また、抗生物質Ｍｌ＋５６３−３２Ｆ１の栄養寒天培地
上での各種細菌に対する発育阻止濃度（寒天平板希釈法
による）結果を次の第４表に示した。 ＊腹腔的投与、癌細胞の移植後７，９ １２、１４．１６．１８日目土で隔日投与。 第−土一表 抗生物質Ｍ）１５６３−３２Ｆ１の毒性を調べるために
雌性ＩＣＲマウスに腹腔的投与した時のＬＤＳ。値は０
．５■／ｋｇであった。 更に、本発明の第２の発明によると、ストレプトミセス
属に属する抗生物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１生産菌を培養
し、その培養物から抗生物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１を採
取することを特徴とする抗癌抗生物質Ｍｌ１５６３−３
２Ｆ１の製造法が提供される。 抗生物１ＭＨ５６３−３２Ｆ１生産菌の一例には、本出
願人が単離した放線菌でＭＨ５６３−３２Ｆ　１株と命
名した菌がある。 このＭｌ１５６３−３２Ｆ１株の菌学的性質は次の通り
である。 １、形態 ＭＨ５６３−３２Ｆ１株は顕微鏡下で、分枝した基中菌
糸より気菌糸を伸長し、らせん形成が認められる。 輪生技は認められない。気菌糸には２０個以上の胞子の
連鎖を認め、成熟した胞子は円柱状で０．５ｘｌ。 ２〜１．６　ミクロン位の大きさを示す。胞子の表面は
とげ状であ゛る。 ２、各種培地における生育状態 色の記載について〔〕に示す標準は、コンテイナー・コ
ーポレーション・イブ・アメリカのカラー・ハーモニー
・マニュアル（ＣｏｎｔａｉｎｅｒＣｏｒｐｏｒａｔｉ
ｏｎ　ｏｆ　ＡｍｅｒｉｃａのＣｏ１ｏｒ　Ｈａｒｍｏ
ｎｙ　Ｍａｎｕａｌ）を用いた。 （１）　　シュクロース・硝酸塩寒天培地（２７°Ｃ培
養）無色の発育上にうつすらと条内　［３ｂｃ、　５ａ
ｎｄｌ〜明るい茶入［３ｄｃ、　Ｎａｔｕｒａｌｌ　の
気菌糸を着生する。 溶解性色素は認められない。 （２）グルコース・アスパラギン寒天培地（２７°Ｃ培
養） 発育はうす黄茶［２ｇｃ、　Ｂａｍｂｏｏ〜３ｉｅ、　
Ｇａｍｅｌ］、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認めら
れない。 （３）グリセリン・アスパラギン寒天培地（ＩＳＰ培地
５．２７°Ｃ培養） うす黄茶［２ｉｅ、　Ｌｔ、　Ｍｕｓｔａｒｄ　Ｔａｎ
］　の発育上に、条内［２ｄｃ、　Ｎａｔｕｒａｌｌ　
〜明るい茶入［２ｆｅ、　ＣｏｎｅｒｔＧｒａｙｌ　の
気菌糸を着生する。溶解性色素は認められない。 （４）スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ培地４．２７
°Ｃ培養） 無色の発育上に、うつすらと明るい茶入［２ｆｅ。 Ｃｏｎｅｒｔ　Ｇｒａｙｌの気菌糸を着生する。溶解性
色素は認められない。 （５）チロシン寒天培地（ＩＳＰ培地７．２７°Ｃ培養
）うす黄（２ｅｃ、　Ｂ１５ｃｕｉｔｌ　の発育上に、
白の気菌糸を着生する。溶解性色素は認められない。 （６）栄養寒天培地（２７°Ｃ培養） 発育はうす黄茶［２ｇｃ、　Ｂａｍｂｏｏ］　、気菌糸
は着生せず、溶解性色素も認められない。 （７）イースト・麦芽寒天培地（ＩＳＰ培地２．２７°
Ｃ培養） うす黄茶［２１ｅ、　Ｍｕｓｔａｒｄｌ　〜黄茶［４１
ｇ、　Ｌｔ。 ５ｐｉｃｅ　Ｂｒｏｗｎ］〜灰味赤茶［４１ｅ、　Ｍａ
ｐｌｅｌ　の発育上に、明るい茶入［２ｆｇ、　Ｃｏｎ
ｅｒｔ　Ｇｒａｙ　〜３ｉＴｏ　ＢｅｔｇｅＧｒａｙ］
の気菌糸を着生する。溶解性色素は認められない。 （８）オートミール寒天培地（ＩＳＰ培地３．２７°Ｃ
培養） 無色〜うす黄の発育上に、条内〜明るい茶入の気菌糸を
わずかに着生する。溶解性色素は認められない。 （９）グリセリン・硝酸塩寒天培地（２７°Ｃ培養）発
育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められな
い。 ００）スターチ寒天培地（２７°Ｃ培養）無色の発育上
に、うつすらと白〜明るい茶入の気菌糸を着生する。溶
解性色素は認められない。 Ｃ１１）　　＋Ｊンゴ酸石灰寒天培地（２７“Ｃ培養）
無色の発育上に、うつすらと明るい茶入の気菌糸を着生
する。溶解性色素は認められない。 ０２）セルロース（濾紙片添加合成液、２７°Ｃ培養）
培養後３週間観察したが、生育を認めなかった。 面　ゼラチン穿刺培養（１５％単純ゼラチン培地；２０
°Ｃ培養、グルコース・ペプトン・ゼラチン培地；２７
°Ｃ培養） 単純ゼラチン培地、グルコース・ペプトン・ゼラチン培
地ともに、発育は無色、気菌糸は着生せず、熔解性色素
も認められない。 ０４）脱脂牛乳（３７°Ｃ培養） 発育はうす黄茶〜黄茶、気菌糸は着生せず、溶解性色素
も認められない。 ３、生理的性質 （１）生育温度範囲 ベネット寒天（イーストエキスＯ１１％、牛肉エキス０
．１％、　Ｎ−Ｚ−アミン（タイプＡ）０．２％、グル
コース１．０％、ひも寒天３％、ｐＨ７，３）を用い２
０°Ｃ９２４°Ｃ１３０°Ｃ１３７°Ｃ，５０’Ｃの各
温度で試験した結果、５０”Ｃを除いてそのいずれの温
度でも発育したが、最適生育温度は２４“０〜３７°Ｃ
付近と思われる。 （２）ゼラチンの液化（１５％単純ゼラチン培地、２０
°Ｃ培養ｔグルコース・ペプトン・ゼラチン培地、２７
°Ｃ培養） １５％単純ゼラチン培地、グルコース・ペプトン・ゼラ
チン培地ともに、培養３週間後の観察では、はとんど液
化性を認めない。しかし、培養後期３０〜６０日を経て
、特に単純ゼラチン培地の場合は液化を示し、中等度の
強さである。グルコース・べプトン・ゼラチン培地は液
化を示しても極く弱いものである。 （３）スターチの加水分解くスターチ・無機塩寒天培地
およびスターチ寒天培地、いずれも２７°Ｃ培養） スターチ寒天培地では氷解性が認められず、スターチ・
無機塩寒天の場合は認められない時と、培養後５日目頃
より極めて弱い氷解作用をみる場合がある。 （４）脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、３７°
Ｃの培養） 凝固・ペプトン化は培養後２８日目以降にみられ、凝固
完了時後直ちにペプトン化する。その作用は共に弱い。 （５）メラニン様色素の生成（トリプトン・イースト・
プロス・ＩＳＰ培地１；ペプトン・イースト・鉄寒天、
ＩＳＰ培地６；チロシン寒天、ｒｓｐ培地７いずれも２
７°Ｃ培養） いずれの培地も陰性であった。 （６）炭素源の利用性（ブリドハム・ゴトリーブ寒天培
地、ｒｓｐ培地９．２７°Ｃ培＃）Ｄ−グルコース、Ｄ
−キシロース、Ｄ−フラクトース、イノシトール、Ｌ−
ラムノースを利用して生育し、シュクロースとＤ−マン
ニトールは利用しない、　Ｌ−アラビノースおよびラフ
ィノースはおそらく利用しないと思われる。 （７）　　リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天培地
、２７℃培養） 陰性である。 （８）硝酸塩の還元反応（０，１％硝酸カリ含有ペプト
ン水、ＩＳＰ培地８．２７°Ｃ培養）培養後２１日目土
陽性となった。 （９）セルロニスの分解（濾紙片添加合成液、２７°Ｃ
培養） 生育しない。 以上の性状を要約すると、Ｍ）１５６３−３２Ｆ１株の
気菌糸はらせんを形成し、輪生技は認められず、胞子の
表面はとげ状である。ＭＨ５６３−３２Ｆ１株は継代す
るに従い、生育が良好となり、種々の培地で無色〜うす
黄〜うす黄茶の発育上に、条内〜明るい茶入の気菌糸を
着生し、溶解性色素は認められない。 メラニン様色素の生成は陰性、蛋白分解力は中等度〜弱
い方、スターチの氷解性は極めて弱い。 なお、細胞壁に含まれる２、６−ジアミノピメリン酸は
Ｌし一型であった。これらの性状より、Ｍ８５６３３２
Ｆ１株はストレプトミセス（鉦■且匹匹見）に属するも
のと考えられ、近縁の既知菌種を検索すると以下の４種
があげられた。すなわちストレプトミセス・ガンシディ
クス（釘皿匹姐匹競　■匹１ｄｉｃｕｓ　）　（文献１
：ｒ千葉医学会雑誌」３３巻１＋　５３ｆｌｉ頁（１９
５７）　、文献２：「放線菌の同定実験法」２８４頁５
日本放線菌研究会Ｗ　（１９８５）　）　、ストレプト
ミセス・ナタレンシス（鉦匹已憇匹腔ｎａｔａｌｅｎｓ
ｉｓ）〔文献’Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒ
ｎａｌ　ｏｆ　ＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｔｏ
ｌｏｇｙＪ　２２巻、３２３頁（１９７２）　）　、ス
トレプトミセス・グリゼオルベンス（Ｓｔｒｅ　ｔｏｍ
　ｃｅｓ肛１ｓｅｏｒｕｂｅｎｓ　）　（文献１　：　
ｒｌｎｔｅｒｎａＬｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　
５ｙｓｔｅｖ＋ａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　
Ｊ　１Ｂ巻。 １２６頁（１９６８）　；文献２　：　Ｇ、Ｆ、Ｇａｕ
ｚｅのｒＺｆ７ｒ　Ｋｌａｓｓｔｆｉｚｉｅｒｕｎｇ　
ｄｅｒ　ＡｃｔｉｎｏｌＩｌｙｃｅｔｅｎ　１１３１頁
。 ｒＶｅｂ　Ｇｕｓｔａｖ　Ｆｉｓｃｈｅｒ　Ｖｅｒｌａ
＠、　　Ｊｅｎａ　Ｊ　（１９５８））およびストレプ
トミセス・グリゼオブラヌス（Ｓｔｒｅ　ｔｏｎ　ｃｅ
ｓ　　ｒｉｓｅｏ　Ｉａｎｕｓ）　　（文献’ｒｎｔｅ
ｒ−ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｙｓ
ｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　Ｊ１８巻
、１２４頁、　　（１９６８）〕である。次にストレプ
トミセス・ガンシディクスを入手し、他３種については
当研究所で保存中の菌株を用いてＭ１１５６３−３２Ｆ
１株との比較検討を行なった。次の第５表に示すのはそ
の結果である。 第５表に示したように、いずれの菌株も培養性状はよく
類似しているが、生理・生化学性状にはそれぞれの相違
がみられる。比較試験において、ＭＨ５６３−３２Ｆ１
株の生育状態に極めてよく類似していたのはストレプト
ミセス・ガンシデイクスおよびストレプトミセス・グリ
ゼオプラヌスであった。 ところで、ストレプトミセス・グリゼオプラヌスは胞子
の表面がいぼ状であり、また炭素源の利用も大きく異な
り、ＭＨ５６３−３２Ｆ１株とは異なる種と想定される
。 なお、ストレプトミセス・ナタレンシスは、胞子の形が
楕円体であり、ＭＨ＋５６３−３２Ｆ１株の円柱状とは
異なり、ストレプトミセス・グリゼオルベンスは気菌糸
が短く、鉤状に近いらせん形成が観察される点で、ＭＨ
５６３−３２Ｆ１株との相異がみられる。 さて、前述のごとく、ＭＨ５６３−３２Ｆ１株に最も近
い性状を示したストレプトミセス・ガンシディクスとは
Ｌ−アラビノース、Ｄ−マンニトールの利用およびスタ
ーチの加水分解に強弱の差異が認められる他は、近似な
性状を示した。これらの差異は、？１Ｈ５６３−３２Ｆ
１株を他に位置づける理由にはならない。 これらの事から、ＭＨ５６３−３２Ｆ１株をストレプト
ミセス・ガンシデイクス（Ｓｔｒｅ　ｔｏｍ　ｃｅｓ　
　肢匹貝に旦）ＭＨ５６３−３２Ｆ１と同定した。 尚、ＭＨ５６３−３２Ｆ１株を工業技術院微生物工業技
術研究所に寄託申請し、昭和６２年６月１８日、微工研
菌寄第９４２１号として受託された。 次に、第２の本方法の方法による新規な抗癌抗生物質Ｍ
Ｈ５６３−３２Ｆ１の製造について記載する。 ストレプトミセス属に属するＭＨ５６３−３２Ｆｌ生熾
菌株を栄養源含有培地に接種して好気的に発育させるこ
とによって、抗生物質１’１ｌ１５６３−３２Ｆ１を含
む培養物が得られる。 栄養源として放線菌の栄養源として通常使用しうる炭素
源及び窒素源、並びに無機塩が使用される。 次に本発明の好ましい実施法を説明するが、本発明はこ
れに限定されるものではない。 寒天斜面培地で培養したＭＨ５６３−３２Ｆ１生産菌を
、ガラクトース２．０％、デキストリン２゜０％、ソイ
ペフトン１．０％、コーン・ステイープ・リカー０．５
％、硫酸アンモニウム０．２％、炭酸カルシウム０．２
％から成る液体培地（ｐ［！　７．４）　１１０ｄに一
白金耳接種し、３０°Ｃで２日間、振盪培養する。それ
を種培養液として用い、この種培養液の２ｄをコーン・
ステイープ・リカー１．０％、グルコース１．０％、ポ
テトスターチ１，０％、ポリペプトン０．５％、酵母エ
キス０．２％、ＮａＣｌ　０．１％、シリコーンオイル
０．０３％からなる液体培地（ｐＨ７，４）　１２５ｒ
ｄに接種し、放線菌の培養に適する温度、例えば２７°
Ｃ３〜４日間、好ましくは４日間振盪培養するのが好適
である。 培養液と菌体を濾過により分離しくｐＨ６，５）その培
養濾液はｐＨ８に調整して、半量のｎ−ブチルアルコー
ルで２回抽出する。この抽出液を減圧下にて濃縮し、得
られた抗生物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１の粗粉末をシリカ
ゲルクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー
等を適宜組合わせることによって精製し、純粋に目的物
質を採取することができる。 次に本発明を実施例により説明するが、本発明はこれに
限定されるものではない。 実ＩＬＬ 寒天斜面培地で培養したストレプトミセスＭＨ５６３−
３２Ｆ１株（微工研菌寄第９４２１号）よりガラクトー
ス２．０％、デキストリン２．０％、ソイペプトン（デ
イフコ社製バタトソイトン）１．０％、コーン・ステイ
ープ・リカー〔日本食品化工■製〕０．５％１硫酸アン
モニウム０．２％、炭酸カルシウム０．２％。 消泡用シリコーンオイル〔信越化学工業■製シリコンＫ
Ｍ７０）　０．０３％からなる液体培地（ρＩＩ　７．
４）を１１０成ずつ分注したワツフル付三角フラスコ２
本に、−白金耳ずつ接種し、３０°Ｃで２日間振盪培養
した。 それを種培養液として、コーン・ステイープ・リカー１
．０％、グルコース１，０％、ポテトスターチ１．０％
、ポリペプトン０．５％、酵母エキス０．２％、ＮａＣ
１Ｏ，１％からなる液体培地（ｐＨ７，４）を１２５城
ずつ分注した坂ロフラスコ９０本に２．５ｄずつ接種し
、２７°Ｃで４日間振盪培養した。 濾過により培養液から菌体を除去し、培養濾液はｐＨ８
，０に調整した。半量のｎ−ブチルアルコールで２回抽
出し、抽出液を減圧濃縮し、３ｇの褐色油状物質を得た
。これを１５ｇのシリカゲルにまぶし、クロロホルムで
充填した３００ｍｅのシリカゲルカラムに重層し、クロ
マトグラフィーを行なった。 まずクロロホルム３００ｍｊ！で洗浄後、クロロホルム
：メタノール＝８：２の混合液１０００　ｙｔＲで溶出
した。 溶出液を減圧！！ｌ、２ｇの褐色物質を得た。この褐色
物質を６８のＭＭＣ−ＧＥＬ　［Ｏ［ｌＳ　６０＾９′
８山村化学研究所製１にまぶし、６０％メタノール−水
で充填した１００ｍｊ！のＹＡＣ−ＧＥＬ（ＯＤＳ　６
０＾）のカラムに重層し、６０％メタノール−水で洗浄
後、メタノールで溶出した。溶出液は減圧濃縮し４００
ｍｇの黄色物質を得た。 この黄色物質を高速液体クロマトグラフィー（日立製；
カラム：■センシュー科学製、センシェーバツク　（Ｏ
ＤＳ　３３０　ＩＮ）　２０φＸ　３００ｍｍ）にかけ
、メタノール７０％から１００％までの直線濃度勾配を
かけ、ｄａｔｅ／分の流速で分画を行なった。 約９０％メタノール溶出分画の活性画分を集め、減圧Ｓ
縮し、１４０　ｍｇの黄色物質を得た。この黄色物質を
同じ高速液体クロマトグラフィーにて、６０％アセトニ
トリル−２％酢酸から、９８％　アセトニトリル−２％
酢酸までの直線濃度勾配をかけ約８０％アセトニトリル
溶出分画の活性画分を集め、減圧濃縮し、７０■の黄色
物質を得た。この黄色物質を２０Ｉ１１のクロロホルム
で充填したシリカゲルカラムにかけ、クロロホルム１０
０ｄで洗浄後、クロロホＪレム：メタノ−Ｊし＝１９：
１液１００ｄでｔ容出した。 活性画分を集め、５０■の白色物質として抗生物質ＭＨ
５６３−３２Ｆ１を得た。 これは、シリカゲル薄層クロマトグラフィ、−（メルク
社Ａｒｔ、５７！５プレート、展開：クロロホルム：メ
タノール＝２０．：　１　）にて単一スポット（Ｒｆ＝
０．５５）を与え、また高速液体クロマトグラフィー〔
日本分光■製、カラム：　ＹＡＣ−ｐａｃｋｅｄカラム
−Ａ３０２０ＤＳ　）で９０％メタノールを移動層とし
て１ｄ／分の流速において抗生物質Ｍ１１５６３−３２
Ｆ１は単一のピーク（Ｒｔ＝４．０分）を与えた。 〔発明の効果〕 以上詳細に説明した通り、本発明により、マウス継代癌
細胞および人癌細胞並びにダラム陰性菌の増殖阻害に有
効である新規な抗生物質およびその製造法が提供された
。 ４、【図画の簡単な説明】 図画は本発明による抗生物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１のＩ
Ｒスペクトログラム（ＫＢｒ錠）を示す。 手続補正書（自発） 平成２年９月 １゜

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記の特性、すなわち白色物質であり、元素分析値
   は炭素５２．８０％、水素７．９５％、窒素１２．４３
   ％、酸素２４．５０％であり、分子量は８２３［（Ｍ＋
   Ｈ）＾＋、ＳＩ−マススペクトロメトリーによる］であ
   り、分子式はＣ＿３＿９Ｈ＿６＿９Ｎ＿１＿０Ｏ＿９で
   あり、比旋光度は■＝＋１９．１゜（ｃ＝１、メタノー
   ル）であり、紫外部吸収スペクトル（メタノール中）は
   末端吸収を示し、赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）は
   添付図画に示すとおりであり、メタノール、クロロホル
   ムに易溶、水及びヘキサンに難溶であり、アニスアルデ
   ヒド反応およびライドン・スミス反応は共に陽性を示す
   ことを特徴とする抗癌抗生物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１。 ２、ストレプトミセス属に属する抗生物質ＭＨ５６３−
   ３２Ｆ１生産菌を培養し、その培養物から抗生物質ＭＨ
   ５６３−３２Ｆ１を採取することを特徴とする抗癌抗生
   物質ＭＨ５６３−３２Ｆ１の製造法。