JPH0372484A - トリシクロ化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は薬理活性を有するトリシクロ化合物またはそ
の塩、その製造法およびそれを含有する医薬組成物に関
する。

さらに詳細には、この発明は免疫抑制活性、抗菌活性等
のような薬理活性を有する新規なトリシクロ化合物また
はその塩、その製造法、それを含有する免疫抑制剤およ
び抗菌剤に関する。

すなわち、この発明の一つの゛目的は、移植による拒絶
反応、骨髄移植による移植片対宿主病、自己免疫疾患、
感染症等の治療および予防に有用な新規トリシクロ化合
物またはその医薬として許容される塩を提供することで
ある。

この発明のもう一つの目的は、醗酵法および合成法によ
るトリシクロ化合物またはその塩の製造法を提供するこ
とである。

この発明のさらにもう一つの目的は、有効成分としてト
リシクロ化合物またはその医薬として許容される塩を含
有する免疫抑制剤および抗菌剤を提供することである。

この発明は４種の新規化合物であるＦＲ−９００５０６
物質、ＦＲ−９００５２０物質、ＦＲ−９００５２３物
質およびＦＲ−９００５２５物質が初めて見い出された
ことに基づくものである。

さらに詳細には、ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９０
０５２０物質、ＦＲ−９００５２３物質およびＦＲ−９
ＱＯ５２５物質は、ストレプトミセス（兆辻匹竺匹魁）
属に属する新菌種を醗酵することにより得られる培養ブ
ロスから純粋な形で初めて分離されたものである。

そして、ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０
物質、ＦＲ−９００５２３物質およびＦＲ−９００５２
５物質の化学構造を明らかにするため叙意研究した結果
、この発明の発明者等はそれらの化学構造を決定し、そ
れらの化合物の誘導体の合成に成功した。

この発明の新規なトリシクロ化合物は下記一般式で示す
ことができる。

（式中、Ｒ１はヒドロキシ基または保護されたヒドロキ
シ基、Ｒ２は水素、ヒドロキシ基または保護されたヒド
ロキシ基、Ｒ３はメチル基、エチル基、プロピル基また
はアリル基、ｎは１または２の整数、実線と点線により
表わされる記号は単結合または二重結合を意味する） 目的化合物（１）のうち、下記４種の化合物が醗酵によ
り産生されることが見出された。

（１）Ｒ’およびＲ２がそれぞれヒドロキシ基、Ｒ３が
アリル基、ｎが整数２、実線と点線により表わされる記
号が単結合を意味する化合物（１）（ＦＲ−９００５０
６物質と命名） （２）　Ｒ１およびＲ２がそれぞれヒドロキシ基、Ｒ３
がエチル基、ｎが整数２、実線と点線により表わされる
記号が単結合を意味する化合物（Ｉ　）［（ＦＲ−９０
０５２０物質と命名（別名：賀５７２３８Ａ物質）］〈
３〉ＲおよびＲ２がそれぞれヒドロキシ基、Ｒ３がメチ
ル基、ｎが整数２、実線と点線により表わされる記号が
単結合を意味する化合物（Ｉ）［ＦＲ−９００５２３物
質と命名（別名：　ＷＳ７２３８Ｂ物質）コ（４）Ｒ１
およびＲ２がそれぞれヒドロキシ基、Ｒ３がアリル基、
ｎが整数１、実線と点線により表わされる記号が単結合
を意味する化合物（Ｉ）（ＦＲ−９００５２５物質と命
名） この発明のトリシクロ化合物（１）において、フンホー
マーあるいは不斉炭素原子および二重結合に起因する光
学異性体および幾何異性体のような１対以上の立体異性
体対が存在することがあり、そのようなフンホーマーあ
るいは異性体もこの発明の範囲内に包含される。

この発明の目的化合物であるトリシクロ化合物（１）ま
たはその塩は、下記に示す堅造法により製造することが
できる。

［１］ＬＬ！ （２）ＩＬＩｉｊＪＬ−（ヒドロキシ保護基の導入）１
ヒドロキシ保護基の導入 吠納１几） ［１１１亀座迭 ＜　１　）　型」［凄」２（ヒドロキシ保護基の導入）
土ヒドロキシ保護基の導入 （３〉魁」Ｅ圭」−（二重結合の形成）土 塩 基 α社１人当 （４）勤」Ｅを」−（ヒドロキシエチレン基の酸化）（
５〉斃」Ｌ麦」−（アリル基の還元）吠納１んへ １　　　２　　　３ （式中、Ｒ、Ｒ、Ｒ、ｎおよび実線と点線により表わさ
れる記号はそれぞれ前と同じ意味であり、ＲおよびＲ２
はそれぞれ保護されたヒトＯキ／基、Ｒ２は脱離基を意
味する） 上記定義の具体例およびその好ましい実施態様を以下詳
細に説明する。

この明細書において使用される１低級」なる語は、特に
指示がなければ、炭素原子１〜６個を意味する。

１保護されたヒドロキシ基、における好適なヒドロキシ
保護基としては、 例えばメチルチオメチル、エチルチオメチル、プロピル
チオメチル、イソプロピルチオメチル、ブナルチオメチ
ル、インブチルチオメチル、ヘキンルテオメチル等の低
級アルキルチオメチル基のような１−（低級アルキルチ
オ）（低級）アルキル基、さらに好ましいものとしてＣ
１〜Ｃ４アルキルチオメチル基、最も好ましいものとし
てメチルチオメチル基： 例えばトリメチルシリル、トリエチルシリル、トリブチ
ルシリル、第三級ブデルージメデルシリル、トリ第三級
ブチルシリル等のトリ（低級）アルキルシリル、例えば
メチル−ジフェニルシリル、エチル−ジフェニルシリル
、プロピル−ジフェニルシリル、第三級ブチル−ジフェ
ニルシリル等の低級アルキル−ジアリールシリル等のよ
うなトリ置換シリル基、さらに好ましいものとしてトリ
（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルシリル基わよびＣ１−Ｃ４アル
キル−ジフェニルシリル基、最も好ましいものとして第
三級ブチル−ジメチルシリル基および第三級ブチル−ジ
フェニルシリル基； カルボン酸およびスルホン酸から誘導される脂肪族アシ
ル基、芳香族アシル基および芳香族基で置換された脂肪
族アシル基のようなアシル基；等が挙げられる。

脂肪族アシル基としては、例えばホルミル、アセチル、
プロピオニル、ブチリル、インバレリル、バレリル、イ
ンバレリル、ピバロイル、ヘキサノイル、カルボキシア
セチル、カルボキシプロピオニル、カルボキシブチリル
、カルボキシヘキサノイル等の、カルボキシのような適
当な置換基を１個以上有していてもよい低級アルカノイ
ル基、例えばシクロプロピルオキシアセチル、シクロブ
チルオキシプロピオニル、シクロへブチルオキシブチリ
ル、メンチルオキジアセチル、メンデルオキシプロピオ
ニル、メンデルオキシブチリル、メンチルオキシペンタ
ノイル、メンチルオキシヘキサノイル等の、低級アルキ
ルのような適当な置換基を１個以上有していてもよいシ
クロ（低級）アルコキシ（低級）アルカノイル基、カン
７フースルホニル基等が挙げられる。

芳香族アシル基としては、例えばベンゾイル、トルオイ
ル、キシロイル、ナフトイル、ニトロベンゾイル、ジニ
トロベンゾイル、ニトロナフトイル等の、ニトロのよう
な適当な置換基を１個以上有していてもよいアロイル基
、例えばベンゼンスルホニル、トルエンスルホニル、キ
シレンスルホニル、ナフタレンスルホニル、フルオロベ
ンゼンスルホニル、クロロベンゼンスルホニル、ブロモ
ベンゼンスルホニル、ヨードベンゼンスルホニル等の、
ハロゲンのような適当なＩｔ置換基１個以上有していて
もよいアレーンスルホニル基等が挙げられる。

芳香族基で置換された脂肪族アシル基としては、例えば
フェニルアセチル、フェニルプロピオニル、フェニルブ
チリル、２−トリフルオロメチル−２−メトキシ−２−
フェニルアセデル、２−エチル−２−トリフルオロメチ
ル−２−フェニルアセチル、２−トリフルオロメチル−
２−プロポキシ−２−フェニルアセデル等の、低級アル
コキシおよびトリハロ（低級）アルキルのような適当な
置換基を１個以上有していてもよいアル（低級）アルカ
ノイル基等が挙げられる。

上記アシル基中、さらに好ましいアシル基としては、カ
ルボキシを有していてもよいＣ１〜Ｃ４アルカノイル基
、シクロアルキル部分に（０１〜Ｃ）アルキルを２個有
するシクロ（Ｃ５〜Ｃ６）アルキルオキシ（Ｃ１〜Ｃ４
）アルカノイル基、カンファースルホニル基、ニトロを
１個または２個有していてもよいベンゾイル基、ハロゲ
ンヲ有するベンゼンスルホニル基、０１〜Ｃ４アルフキ
シとトリハロ（Ｃ１〜Ｃ，）アルキルを有するフェニル
（Ｃ１〜Ｃ４）アルカノイル基が挙げられ、それらのう
ち、最も好ましいものとしては、アセチル、カルボキシ
プロピオニル セチル ニトロベンゾイル、ジニトロベンゾイル、ヨードベンゼ
ンスルホニルおよび２−トリフルオロメチル−２−メト
キシ−２−フェニルアセデルが挙ケられる。

好適な「脱離基，としては、ヒドロキシ基、アシル部分
が上記で例示したようなものであるアシルオキシ基等が
挙げられる。

この発明のトリシクロ化合物（Ｉ）の製造法を以下詳細
に説明する。

［ｆ］緻薯丑 この発明のｒＲ−９ｏｏｓｏａ＠質、ＦＲ−９００５２
０物質、ＦＲ−９００５２３物質およびＦＲ−９００５
２５物質は、ストレプトミセス・ツクバエンシス（　５
ｔ１−＠　ｔｏａ＋　ａｓｓｔｓｕｋｕｂａｅｎｓｉｓ
　）　Ｎｏ　９９９３およびストレプトミセス・バイグ
ロスコピカス・サブスブ・ヤクシマエンシス（　Ｓｔｒ
ｅ　ｔｏｍ　ｃａｓ　ｈ　　ｒｏｓｃｏ　ｉｃｕｓ　Ｓ
ｕｂｓｐ。

■ｋｕｓｈｉｍａ±ｔｓｉｓ　）　ｔｈ　７２３８のよ
うなストレプトミセス属に属する、ＦＲ−９００５０６
、ＦＲ−９００５２０、ＦＲ−９００５２３および／ま
たはＦＲ−９００５２５物質−生産菌株を培地中で醗酵
させることにより生産することができる。

ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質、Ｆ
Ｒ−９００５２３物質およびＰＲ−９００５２５物質の
醗酵による生産について以下に説明する。

［Ａ］この発明のＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９０
０５２０物質およびＦＲ−９００５２５物質は、ストレ
プトミセス・ツクバエンシスＮ１１９９９３のようなス
トレプトミセス属に属する、ＰＲ−９００５０６、ＦＲ
〜９００５２０および／または叡−９００５２５物質−
生産菌株を培地中で醗酵させることにより生産できる。

漿圭欠 ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０４１１５
質および／またはＦＲ−９００５２５物質の生産に使用
される菌は、ストレプトミセス属に属するＦＲ−９００
５０６、ＦＲ−９００５２０および／またはＦＲ−９０
０５２５物質−生産菌株であり、それらのうちストレプ
トミセス・ツクバエンシス先９９９３が茨城県筑波郡豊
里町で採取された土壌試料から新たに分離された。

この新たに分離されたストレプトミセス・ツクバエンシ
スＮＱ９９９３の凍結乾燥標本は、工業技術院微生物工
業技術研究所（茨城県筑波郡矢田部町東１丁目１−３）
に１９８４年１０月５日付で寄託番号微工研菌寄第７８
８６号として寄託され、次いで１９８５年１０月１９日
付で新しい寄託番号微工研条寄第９２７号として同寄託
機関のブダペスト条約ルートに切り換えられた。

新規なＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物
質および／またはＦＲ−９００５２５物質の生産におい
て、この明細書に記載した菌は単に説明のためにのみ掲
げたものであり、それに限定されるものではない、この
発明にはまた、自然突然変異菌ならびにＸ線照射、紫外
線照射、Ｎ−メチル−Ｎ′−二トローＮ−二トロングア
ニジン、２−アミノプリン等による慣用の処理によって
つくられる人工突然変異菌をも含む、　ＦＲ−９００５
０６物質、　ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦ
Ｒ−９００５２５物質を産生できるいかなる突然変異菌
を使用する場合も含まれる。

ストレプトミセス・ツクバエンシスＮａ９９９３は下記
のような形態学的性質、培養特性、生物学的および生理
学的特徴を有する。

［１］形態学的性質 主に、ンヤーリング（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）およびゴツト
リープ（Ｇｏｔｔｌｉｅｂ）に記載の方法［シャーリン
グ・イー・ビーおよびデイ−・ゴットリープ：メンッズ
・フォー・キャラクテリゼーション・才ブ・ストレプト
ミセス・スペシーズ（インターナショナル・ジャーナル
・才プ・システマチック・バタテノオロジー）　（Ｍｅ
ｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏ
ｎ　ｏｆＳｔｒｅ　ｔｏｗ　ｃｅｓ　５ｐａｃｉａｓ、
　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ　
Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）第
１６巻、第３１３〜３４０頁、１９６６年］を分類学的
検討に用いた。

形態学的観察は、オートミール寒天、イースト・マルト
エキストラクト寒天および無機塩・スターチ寒天上、３
０”Ｃで１４日間生育させた培養物を用い、光学および
電子顕微鏡を用いて行った。

成熟胞子体は各胞子鎖に１０〜５０個または５０個を超
える数の胞子を有する直鎖状または波状（Ｒｅｃｔｉｆ
ｌｅｘｉｂｉｌａｓ　）を形成した。電子顕微鏡での観
察によればこの胞子は楕円形の円筒状で、大きさは０．
５〜０．７ｘ０．７〜０．　ＳＩａである。胞子表面は
滑らかであった。

［２］培養特性 培養特性は上記シャーリングおよびゴツトリープ、なら
びにワクスマン（Ｗａｋｓａａｎ）　［ワクスマン・ニ
ス・エー：ザ・アクチノマイセツツ、第２巻、クラシフ
ィケーション・アイデンティフィケーション・アンド・
デスクリデシ３ン・才ブ・ゼネラ・アンド・スペシーズ
、ザ・ウィリアムス・アンド・ウイルキンス・カンパニ
ー、バルチモア、１９６１年（Ｗａｋｓｍａｎ、　Ｓ、
　Ａ、　：Ｔｈｅ　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ。

ｔｌｏＬ、２　：　Ｃ１ａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ、　
１ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄｄｅｓｃｒｉｐ
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｅｎａｒａ　ａｎｄ　５ｐｅｃｉｅ
ｓ、　ＴｈａＷｉｌｌｉａｍｓ　ａｎｄ％Ｊｉｌｋｉｎ
ｓ　Ｃｏ、、　Ｂａ１ｔｉａ＋ｏｒｅ、１９６１）　］
に記載の１０種類の培地で観察した。

３０°Ｃで１４日間培養した。この研究で使用した色名
は新色冬枯（東京、日本色彩研究所の手引書）に基づい
た。オートミール寒天、イースト・マルトエキストラク
ト寒天および無機塩・スターチ寒天上で成育させた場合
、コロニーは灰色系に属していた。可溶性色素はイース
ト・マルトエキストラクト寒天で生成したが、他の培地
では生成しなかった。結果を表１に示す。

表１゜菌株ＮＱ９９９３およびストレプトミセス・ミサ
キエンシス　ＩＦ０１２８９１　　（８二匹竺匹竺ｍ１
ｓａｋｉｅｎｓｉｓ　ＩＦＯ１２８９１）の培養特性略
号二Ｇ−生育、Ａ−気菌糸の色 Ｒ−裏面の色、Ｓ−可溶性色素 細胞壁組成分析を、ベラカー等の方法［べ・メカ−・ビ
ー・、エム・ピー・レシウ°アリエル、アール・イー・
ゴートンおよびエイチ・ニー・レシウ゛　アリエル：ラ
ピッド・デイフエレンシエーション・ビトウ０　イーン
・ノカルジアおよびストレプトミセス・パイ・ペーパー
クロマトグラフィー・オブ・ホール・セル・ヒドロリゼ
ーツ：アプライド・マイ・クロバイオロジー（Ｂａｃｋ
ａｒ。

Ｂ、、　Ｍ、Ｐ、Ｌａｃｈｅｖａｌｉｅｒ、　Ｒ，Ｅ、
Ｇｏｒｄｏｎ　ａｎｄ　Ｈ，Ａ。

ＬｅｃｈａｖａｌｉａｒｉＲａｐｉｄ　ｄｉｆｆｅｒｅ
ｎｔｉａｔｉｏｎ　ｂａｔｗｅａｎＮｏｃａｒｄｉａ　
ａｎｄ　５ｔｒｅ　ｔｏｗ　ａｓｓ　ｂｙ　ｐａｐｅｒ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｏｆ　ｗｈｏｌｅ　ｃ
ｅｌｌ　ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ：Ａｐｐｌ、　Ｍｉ
ｃｒｏｂｉｏｌ、　）第１２巻、第４２１〜４２３頁、
１９６４年］および山口の方法［山口、ティー・：ＳＩ
エンノゾン・才ブ・ザ・セル・ウオール・フンポジショ
ン・才ブ・モルホロジカリー・ディスティンクト・アク
デノマイセッツ：ジャーナル◆才ブ・バクテリオロジー
（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ、τ、　：Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ
　ｏｆｔｈｅ　ｃａｌｌ　ｗａｌｌ　ｃｏｍｐｏｓｉｔ
ｉｏｎ　ｏｆ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｌｙｄｉｓ
ｔｉｎｃｔ　ａｃｔｉｎｏａ＋ｙｃｅｔｅｓ：Ｊ、Ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｌ、　）第８９巻、第４４４〜４５３頁、
１９６５年］の方法によって行った。

菌株Ｎｏ　９９９３の全細胞加水分解物の分析結果は、
ＬＬ−ジアミノピメリン酸が存在することを示した。従
ってこの菌株の細胞壁はタイプ■に属すると考えられる
。

［３］生物学的および生理学的性質 菌株Ｎ１１９９９３の生理学的性質は、前記シャーリン
グおよびゴツトリーブに記載されている方法によって測
定した。その結果を表２に示す、生育温度範囲および生
育至適温度は、イースト・マルトエキストラクト寒天上
、温度勾配培養器（東洋化学産業株式会社製）を使用し
て測定した。生育温度範囲は１８〜３５℃で、生育至適
温度は２８℃であつた。ミルクのペプトン化およびゼラ
チン液化は陽性であった。メラニン色素の産出は陰性で
あった。

表２．ｉ１株Ｎａ９９９３およびストレプトミセス・ミ
サキエンシスＩＦＯ１２８９１の生理学的性質炭素源の
利用性をプリドハムおよびゴツトリーブの方法［プリド
ハム・ティー・ジー・およびデイ−・ゴットリーブ：ザ
・ユーテイライゼーシ５ン・才プ・カーボン・フンバウ
ンズ・バイ・サム・アクチノマイセッテールズ・アズ◆
アン・エイド・フォー・スペシーズ・デターミネーショ
ン：ジャーナル・才ブ・バクテリオロジー（Ｐｒｉｄｈ
ａｍ、　Ｔ、　Ｇ、　ａｎｄ　Ｄ、　Ｇｏｔｔｌｉｅｂ
：Ｔｈｅ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆ　ｃａｒｂｏｎ
　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｂｙ　５ｏｒｎｅ　Ａｃｔｉｎ
ｏｍｙＣｅｔａｌｅｓａｓ　ａｎ　ａｉｄ　ｆｏｒ　５
ｐｅｃｉｅｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ：ＪＢａｃ
ｔｅｒｉｏｌ、　）第５６巻、第１０７〜１１４頁、１
９４８年］によって試論した。３０℃で１４日間培養後
に、生育状況を観察した。

この菌株の炭素源の利用性を表３にまとめて示す、グリ
セリン、マルトースおよびコハク酸ナトリウムは菌株Ｎ
ｏ、９９９３により利用された。さらにまた、Ｄ−グル
コース、シュークロース、Ｄ−マンノースおよびサリシ
ンは多少利用する。

（以下余白） 表３．菌株Ｎｏ、９９９３およびストレプトミセス・ミ
サキエンシスＩＦ０１２８９１の炭素源利用性記号　十
：良く利用する ±：多少利用する 一：利用しない 菌株ＮＱ　９９９３のＷ４微鏡学的Ｈ寮および細胞壁組
成分析の結果から、この菌株がワクスマン（Ｗａｋｓｍ
ａｎ）およびヘンリシ（Ｈｅｎｒｉｃｉ）、１９４３年
、によるストレプトミセス属に属することが明らかとな
った。

すなわち、この菌株を公表されている性状［インターナ
ショナル−ジャーナル・才プ・システマテインク・バク
テリオロジー（ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎ
ａｌ　ｏｆ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏ
ｌｏｇｙ）第１８巻、第６９〜１８９頁、第２７９〜３
９２頁、１９６８年および第１９巻、第３９１〜５１２
頁、１９６９年、ならびにパージエイズ・マニュアル・
才ブ・デターミネイティブ・バクテリオロジー　（Ｂｅ
ｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆＤｅｔｅｒｍｉｎａ
ｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　）第８版、１９
７４年〕に照らして、ストレプトミセス属の種々の種と
比較した。

比較の結果、菌株Ｎａ９９９３はストレプトミセス・ア
ブラウ゛イエンシス・ニジムラ等（兆二匹２ａｂｕｒａ
ｖｉａｎｓｉｓ　ＮｉｓｈＮ１５ｈｉ　ｅｔ、ａｌ、　
）、ストレプトミセス・アラ０エラネウス・バルダッシ
およびグレイン（７ａｖｅｌｌａｎｅｕｓ　Ｂａ１ｄａ
ｃｃｉ　ａｎｄＧｒｅｉｎ　）およびストレプトミセス
・ミサキエンシス・ナカムラに類似していると考えられ
る。

従って菌株１’ｈ９９９３の培養特性を、対応するスト
レプトミセス・アブラウ′イエンシスＩＦＯ１２８３０
、ストレプトミセス・アウ゛エラネウスＩＦＣＨ３４５
１およびストレプトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２
８９１と比較した。その結果菌株Ｎｏ　９９９３はスト
レプトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２８９１に最も
類似していた。従って菌株Ｎｃ９９９３をさらに上記表
１，２および３に示したストレプトミセス・ミサキエン
シスＩＦ０１２８９１と詳細に比較した。この結果から
、菌株ＮＱ９９９３はストレプトミセス・ミサキエンシ
スＩＦ０１２８９１と下記の点で区別することができ、
従って菌株Ｎｏ　９９９３はストレプトミセスの新種で
あると考えられ、この微生物が茨城県筑波郡で採取した
土壌にらなんでストレプトミセス・ツタバエンシス６ス
プ８ノブ（５ｔｒｅ　ｔｏｍ　ｃｅｓ　ｔｓｕｋｕｂａ
ｅｎｓｉｓ　ｓｐ。

ｎｏｖ、　）と命名された。

ストレプトミセス・ミサキエンシスＩＦＯ１２８９１と
の担Ａ 菌株ＮＱ９９９３の培養特性は、ストレプトミセス・ミ
サキエンシスＩＦ０１２８９１とは、オートミール寒天
、イースト・マルトエキストラクト寒天、グルコース・
アスパラギン寒天５スザペツク寒天およびポテト・デキ
ストロース寒天を用いて＠養したとき異なる。

菌株ＮＱ９９９３のスターチ加水分解は陰性であるが、
ストレプトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２８９１の
場合は陽性である。

菌株Ｎｏ９９９３のゼラチン液化は陽性であるが、スト
レプトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２８９１の場合
は陰性である。

炭素源の利用性においては、菌株Ｎｏ、９９９３はグリ
セリン、マルトースおよびフハク酸ナトリウムを利用す
るが、ストレプトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２８
９１はこれらを利用しない、さらに、菌株階９９９３は
Ｄ−ガラクトースおよびイヌリンを利用しないが、スト
レプトミセス・ミサキエンシスＩＦＯＩ２８９１はこれ
らを利用できる。

この発明の新規なＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９０
０５２０物質およびＦＲ−９００５２５物質は、例えば
ストレプトミセス・ツタバエンシスＮＱ９９９３．　（
寄託番号：微工研条寄第９２７号）のようなストレプト
ミセス属に属するＦＲ−９００５０６、ＦＲ−９００５
２０および／またはＦＲ−９００５２５物質生産菌株を
培地中で培養することにより産生できる。

般的には、ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２
０物質および／またはＦＲ−９００５２５物質は、ＦＲ
−９００５０６、ＦＲ−９００５２０および／またはＦ
Ｒ−９００５２５物質生産菌株を、同化しうる炭素源お
よび窒素源を含有する水性培地中で、好ましくは例えば
振とう培養、深部培養等の好気性条件下で培養すること
により産生できる。

培地の好ましい炭素源としては、グルコース、キシロー
ス、ガラクトース、グリセリン、スターチ、デキストリ
ン等のような炭水化物が挙げられる。他の炭素源として
はマルトース、ラムノース、ラフィノース、アラビノー
ス、マンノース、ナリシン、フハク酸ナトリウム等が挙
げられる。

好ましい窒素源としてはイースト・エキストラクト、ペ
プトン、グルテンミール、綿実粉、大豆粉、コーン・ス
テイープ・リカー、乾燥イースト、小麦胚芽、羽毛粉、
落花生粉等、ならびに例えば硝酸アンモニウム、硫酸ア
ンモニウム、燐酸アンモニウム等のアンモニウム塩、尿
素、アミノ酸等のような無機または有機窒素化合物が挙
げられる。

炭素源および窒素源は好ましくはそれらの組合わせで使
用されるが、微量の生育因子および相当量の無機栄養素
を含有していれば純度の低い物質も使用でき、必ずしも
純粋な形で使用する必要はない、所望により培地に炭酸
ナトリウムまたは炭酸カルシウム、燐酸ナトリウムまた
は燐酸カリウム、塩化ナトリウムまたは塩化カリウム、
沃化ナトリウムまたは沃化カリウム、マグネシウム塩、
銅塩、コバルト塩等の無機塩を添加してもよい。

特に培養培地が著しく発泡する場合には、必要により液
状パラフィン、脂肪油、植物油、鉱油またはシリコンの
ような消泡剤を添加してもよい。

ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質およ
びＦＲ９００５２５物質を大量生産する条件としては、
深部好気培養が好ましい、少量生産にはフラスコまたは
びん中で振とう培養または表面培養が行われる。

さらにまた、大型タンク内で生育を実施する場合には、
ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質およ
びＦＲ−９００５２５物質の生産工程における生育遅延
を回避するために、微生物の前培養を用いて生産タンク
中に菌を接種するのが好ましい、すなわち、比較的少量
の培養培地に微生物の胞子または菌糸を接種し、その接
種培地を培養して微生物の前培養接種物をまず生産し、
次いで培養した前培養接種物を無菌的に大型タンクに移
すのが望ましい、この前培養接種物を生産する培地は、
ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質およ
びＦＲ−９００５２５物質の生産に使用される培地と実
質的に同じであってもよく、また異なってもよい。

培養混合物の攪拌および通気は種々の方法で行うことが
できる。攪拌はプロペラまたはこれに準する攪拌装置を
用いるか、醗酵器を回転させるかまたは振とうするか、
種々のポンプ装置を用いるか、または培地中に滅菌空気
を通すことによっても行うことができる６通気は滅菌空
気を醗酵混合物中を通過させることにより行ってもよい
。

醗酵は通常、約２０℃〜４０°Ｃの温度範囲、好ましく
は２５〜３５℃で、約５０〜１５０時間行われるが、醗
酵条件および醗酵規模によって適宜変化させればよい。

このようにして生産されたＦＲ−９００５０５物質、Ｆ
Ｒ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２５物質は
、他の既知の生物学的活性物質の回収に通常使用される
慣用の方法で培養培地から回収することができる。生産
されたＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物
質およびＦＲ−９００５２５物質は、培養菌糸中および
濾液中に見出され、従ってＦＲ−９００５０６物質、Ｆ
Ｒ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２５物質は
、培養プロスの濾過または遠心分離によって得られる菌
糸および濾液から、減圧濃縮、凍結乾燥、常用の溶媒に
よる抽出、ｐＨ，＊整、例えば陰イオン交換樹脂または
陽イオン交換樹脂、非イオン性吸着樹脂等の常用の樹脂
による処理、例えば活性炭、ケイ酸、シリカゲル、セル
ロース、アルミナ等の常用の吸着剤による処理、結晶化
、再結晶化等の慣用の方法によって分離、精製すること
ができる。

上記醗酵法によって生産されたＦＲ−９００５０６物質
、ＦＲ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２５物
質は下記の物理化学的性質を有する。

巴ユ蜆呻迦ス （１）形状および色調： 白色粉末 （２）元素分析値： Ｃ：６４．７２％、Ｈ：８．７８％、Ｎ：１．５９％６
４．５９％　　８．７４％　　１．６２％（３）呈色反
応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、エールリッヒ反応
、ドラーゲンドルフ反応、沃素蒸気反応陰性：塩化第二
鉄反応、ニンヒドリン反応、モーリッシュ反応 （４〉溶解性： 可溶：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル
、クロロホルム、ジエデルエーテル、ベンゼン 難溶：ヘキサン、石油エーテル 不溶三水 （５）融点： ８５〜９０℃ （６）比旋光度： ［αコ呂３　：　　−７３℃　（Ｃ＝０．８．ＣＨＣｌ
３）（７）紫外線吸収スペクトル二 末端吸収 （８）赤外線吸収スペクトル二 ジＣＨ”３：　３６８０．３５８０．３５２０゜ａｘ ２８３０、１７４５．１７２０゜ １４５０、１３８Ｇ、　１３５０． １２８５、１１７０．１１３５゜ １０３０、　１０００．９９０゜ ９１８　ｃｍ−’ （９）　Ｌ３ｃ核磁気共鳴スペクトル：２９３０．２８
７０゜ １７００、　１６４５゜ １３３０、　１３１０゜ １０９０、　１０５０゜ ９６０　（ｓｈ）。

（１１）薄層クロマトグラフィー： ８４．４１　　（ｄ）。

３９．４０　（ｔ）。

３１．５８　（ｔ）。

３０．７９　（ｔ）。

上記スペクトルのチ勺−トを！５０１に示す。

（１０）ＩＨ核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチャートをＩ！１２に示す。

（１２）物質の性質： 中性物質 ＦＲ−９００５０６物質に関して、１３Ｃおよび１Ｈ核
磁気共鳴スペクトルの測定の際、この物質は種々の化学
シフトにおいてそれぞれ１対のシグナルを示す。

このような特徴を有するＦＲ−９００５０６物質は、さ
らに下記の性質を有する。

（ｉ＞１３Ｃ核磁気共鳴スペクトルを２５°Ｃおよび６
０°Ｃにおいて測定したところ、それぞれ１対のシグナ
ルの強度比が変化する。

（ｉ）′Ｉａ層クロマトグラフィーおよび高速液体クロ
マトグラフィーを測定したところ、　ＦＲ−９００５０
６物質はそれぞれ薄層クロマトグラフィーでは単一スポ
ットとして、高速液体クロマトグラフィーでは単一ピー
クとして現れる。

ＦＲ−９００５０６物質のこの白色粉末はアセトニトリ
ルから再結晶すると結晶の形状に変化し、この結晶は下
記の物理化学的性質を有する。

（１）形状および色＃ＪＩ４： 無色のプリズム状結晶 （２）元素分析値： Ｃ：６４．３０％、Ｈ：８．９２％、Ｎ：１．７７％６
４．２０％、　　　８．８６％、　　　１．７２％（３
〉融点： １２７〜１２９℃ （４〉比旋光度： ［α貼３：　−８４，４”　　（Ｃ＝１．０２．ＣＨＣ
ｌ３）（５）　１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル：上記スペ
クトルのチャートをｒｘＪ３に示す。

（６）　’Ｈ核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチャートを図４に示す。

その他の物理化学的性質、すなわちＦＲ−９００５０６
物質の無色のプリズム状結晶の呈色反応、溶解性、紫外
線吸収スペクトル、赤外線吸収スペクトル、薄層クロマ
トグラフィーおよび物性の性質ｇｔ、白色粉末のそれら
と同じであった。

上記物理化学的性質およびＸ線解析から、ＦＲ−９００
５０６物質は下記の化学構造を有することがわかった。

１７−アリル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−（２−
（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１
−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１
９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ
−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０”９］才クタ
コスー１８−エン−２、３，１０，１６−テトラオン ひｊ明狙跋立亘 この化合物の物理化学的性質は後に述べる。

四コｍ狙旺笠亘 （１）形状および色調： 白色粉末 （２〉元素分析値： Ｃ：６５．１７％、Ｈ：８．５３％、Ｎ：１．７６％（
３）呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、エールリッヒ反応
、ドラーゲンドルフ反応、沃素蒸気反応 陰性：塩化第二鉄反応、ニンヒドリン反応、モーリッシ
ュ反応 （０溶解性： 可溶：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル
、クロロホルム、ジエデルエーテル　ベンゼン 難溶：ヘキサン、石油エーテル 不Ｗに水 （５）融点＝ ８５〜８９”Ｃ （６）比旋光度： ［α］ε３：　−８８°　（Ｃ＝１．０．ＣＨＣｌ３）
〈７〉紫外線吸収スペクトル： 末端吸収 （８）赤外線吸収スペクトルニ ジＣＨＣｌ３　：　３６８０．３５８０゜慣ａ！ ３４７５、　３３４０゜ １７５５、　１７０５゜ １３７０、　１３３０゜ １１３５、　１０９３゜ ９７０．９２０．８６７ トル： ２ｇ８０，２８３０゜ １４５５、　１３８２゜ １２７３、　１１７０゜ １０２０、　９９５゜ ＜９）　１３Ｃ核磁気共鳴スペク ２９４０゜ １６３５゜ １３１０゜ ｔｏｓｏ。

。１１ 上記スペクトルのチャートを図５に示す。

（１０）’）Ｉ核磁気共鳴スペクトル：上記スペクトル
のチ勺−トを図６に示す。

（１１）薄層クロマトグラフィー： （１２）物質の性質： 中性物質 ＦＲ−９００５２５物質に関して、１３Ｃおよび１Ｈ核
磁気共鳴スペクトルの測定の斃、この物質は種々の化学
シフトにおいてそれぞれ１対のシグナルを示したが、７
＃層クロマトグラフィーおよび高速液体クロマトグラフ
ィーを測定したところ、ＦＲ−９００５２５物質はそれ
ぞれ薄層クロマトグラフィーで単一スボンド、高速液体
クロマトグラフィーで１よ単一ピークを示した。

上記物理化学的性質およびＦＲ−９００５０６物質の化
学構造が決定されたことにより、ＦＲ−９００５２５物
質は下記の化学構造を有することが判明した。

１６−アリル−１，１３−ジヒドロキシ−１１−［２−
（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１
−メチルビニル］−２２，２４−ジメトキシ−１２，１
８，２０，２６−テトラメチル−１０，２７−ジオキサ
−４−アザトリシクロ［２１，３，１，０４，８コペプ
タコス−１７−エン−２，３，９，１５−テトラオン ［Ｂ］この発明のＦＲ−９００５２０物質およびＦＲ−
９００５２３物質は、ストレプトミセス・バイグロスコ
ピカス・サブスブ・ヤクシマエンシス＆　７２３ｇのよ
うなストレプトミセス属に属するＦＲ−９００５２０お
よび／またはＦＲ−９００５２３物質−生産菌株を、培
地中で醗酵させることにより生産できる。

艶土１ ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦＲ−９００５
２３物質の生産に使用される菌は、ストレプトミセス属
に属するＰＲ−９００５２０および／またはＦＲ−９０
０５２３物質−生産菌株であり、それらのうちストレプ
トミセス・バイグロスコピカス・サプスプ・ヤクシマエ
ンシスＮｏ　７２３８が鹿児島県屋久島で採取された土
壌試料から新たに分離された。

この新たに分離されたストレプトミセスウバイグロスコ
ピカス・サプスプ・ヤクシマエンシス先７２３８の凍結
乾燥標本は、工業技術院微生物工業技術研究所に寄託番
号微工研菌寄第８０４３号として、１９８５年１月１２
日付で寄託され、次いで１９８５年１０月１９日付で新
しい寄託番号微工研条寄第９２８号として同寄託機関の
ブダペスト条約ルートに切り換えられた。

新規なＦＲ−９００５２０物質）ｊよびＦＲ−９００５
２３物質の生産において、この明細書に記載した菌は単
に説明のためにのみ掲げたものであって、それに限定さ
れるものではない、この発明にはまた、自然突然変異菌
ならびにＸ線照射、紫外線照射、Ｎ−メチル−Ｎ’−二
トローＮ−二トロソグアニジン、２−アミノプリン処理
等のような慣用の処理によってつくられる人工突然変異
菌をも含む、ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦ
Ｒ−９００５２３物質を産生できるいかなる突然変異菌
を使用する場合も含まれる。

ストレプトミセス・バイグロスコピカス・サプスブ・ヤ
クシマエンシスＮｕ　７２３８は下記のような形態学的
性質、培養特性、生物学的および生理学的特徴を有する
。

［１］形態学的特徴 前述のシャーリングおよびゴツトリープによって記載さ
れている方法を主としてこの分類学上の研究に用いた。

形態学的ＩＮ！Ｊは、オートミール寒天、イースト・マ
ルトエキストラクト寒天および無機塩・スターチ寒天上
、３０℃で１４日間生育させた培養物を用い、光学およ
び電子顕微鏡により行った。成熟胞子体は幾分短かく、
それぞれの鎖に約２０個の胞子を有する錐状（Ｒａｔｉ
ｎａｃｕｌｉａ　ａｒｔｉ　）およびら旋状（罰に蘇朋
）を形成していた。吸湿性の胞子塊がオートミール寒天
および無機塩・スターブ寒天上の気菌糸に見られた。胞
子表面の不揃いの凹凸は非常に短くて太い鯨といぼとの
間の中間の形状であった。

［２］培養特性 培養特性は、上記シャーリングおよびゴットノープ、な
らびに前述のワクスマンに記載のｔｏ種類の培地上で観
察した。

３０℃で１４日間培養した。この研究で使用した色名は
前記新色冬枯に基づいた。

オートミール寒天、イースト・マルトエキストラクト寒
天および無機塩・スターブ寒天上で生育させた場合、コ
ロニーは灰色系に属していた。可溶性色素Ｃま試験した
培地中では産生されなかった。結果を表４に示す。

表４．菌株ＮＱ　７２３８、ストレプトミセス・アンチ
マイコティクス（Ｓｔｒｅ　ｔｏｗ　ｃａｓ　ａｎｔｉ
ｍｉｃｏｔｉｃｕｓ）ＩＦＯ１２８３９およびストレプ
トミセス・ハイグロスフビカスｅサブスプ・グレボスス
（５ｔｒｅ　ｔｏｗｎ　ｃｅｓｈ　　ｒｏｓｃｏ　１ｃ
ｕｓ　５ｕｂｓｐ、己左独ｌす）ＩＦＯ１３７８６の培
養特性 略号二〇−生育　　Ａ−気菌糸の色、 Ｒ−裏面の色、　Ｓ−可溶性色素、 ｍｗ壁分析を前述のベラカー等および山口の方法によっ
て行った。菌株Ｎｏ　７２３８の全細胞加水分解物の分
析結果は、ＬＬ−ジアミノピメリン酸の存在を示してい
た。従ってこの菌株の細胞壁はタイプＩに属すると考え
られる。

［３］生物学的および生理学的性質 菌株＆　７２３ｇの生理学的性質は、前記シル−リング
およびゴツトリーブ記載の方法に従って測定した。その
結果を表５に示す、生育温度範囲および生育至適温度は
、イースト・マルトエキストラクト寒天上、温度勾配培
養器（東洋化学産業株式会社製）を使用して測定した。

生育温度範囲は１８〜３６°Ｃで、至適温度は２８°Ｃ
であった。スターチ加水分解およびゼラチン液化は陽性
であった。メラニン色素は産生されなかった。

表５．ｉ１株Ｎｏ７２３８、ストレプトミセス・アンチ
マイコティクスＩＦＯ１２８３９およびストレプトミセ
ス・バイグロスコピカス・サプスプ・グレボススＩＦＯ
１３７８６の生理学的性質炭素源の利用性を前述のブリ
ドハムおよびゴツトリーブの方法によって試験した。生
育状態を３０℃で１４日間培養した後観察した。

この菌株の炭素源利用性を表６にまとめて示す。

Ｄ−グルツース、シュークロース、ラクトース、マルト
ース、Ｄ−トレハロース、イノシトール、７ヌリンおよ
びサリシンが菌株！１＆１７２３８により利用された。

表６．菌株Ｎ１１７２３８、ストレプトミセス・アンチ
マイコティクスＩＦ０１２８３９およびストレプトミセ
ス−ハイグロ２：７とカスｅサブスブ・グレボススＵＦ
Ｏ１３７８６の炭素源利用性記号 十二良く利用する ±：多少利用する −：利用しない 菌株Ｎ１１７２３８の顕微鏡学的観察および細胞壁組成
分析結果から、この菌株がワクスマンおよびヘンリシ、
１９４３年によるストレプトミセス属に属することが明
らかとなった。

従って、この菌株を公表された性状［インターナショナ
ル・ジャーナル・才プ・システマテイック◆バクテリオ
ロジ−（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔａｒｉｏｌｏｇ
ｙ）　　第１８巻、６９〜１８９ｊｌｊ、２７９〜３９
２頁、１９６８年および第１９巻、３９１〜５１２頁、
１９６９年ならびにパージエイズ・マニュアル・才ブ・
デターミネーテイブ・バクテリオロノー第８版、１９７
４年（Ｂａｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆＤｅｔｅ
ｒｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　８ｔ
ｈ　Ｅｄｉｔｉｏｎ。

１９７４）　］に照らして種々のストレプトミセス属に
属する種と比較した。

比較の結果、菌株Ｉｌ＆１７２３８はストレプトミセス
・アンチマイコティクス・ワクスマン１９５７およびス
トレプトミセス・バイグロスコピカス・サプスブ・ダレ
ボススオオモリ等に類似していると考えられる。従って
菌株Ｎｏ　７２３８の培養特性を、さらに対応するスト
レプトミセス・アンチマイコティクスＩＦＯ１２８３９
およびストレプトミセス・バイグロスコピカス・ヅノス
ブ・グレボススＩＦ０１３７８６と、表４．５および６
に示したように比較した。この詳細比較の結果から、菌
株Ｎｏ　７２３８はストレプトミセス・アンプマイコテ
ィクスＩＦＯＩ　２８３９およびストレプトミセス・バ
イグロスコピカス・サプスブ・グレボススＩＦ０１３７
８６とは下記の点で区別することができた。

菌株Ｎ１１７２３８の培養特性は、ストレプトミセス・
アンチマイフティクスＩＦ０１２８３９とは、イースト
・マルトエキストラクト寒天、グルコース・アスパラギ
ン寒天、グリセリンアスパラギン寒天、ポテト・デキス
トロース寒天およびチロシン寒天を用いて培養したとき
異なる。

炭素源の利用性では、菌株＆　７２３８はマルトースを
利用するが、ストレプトミセス・アンプマイコティクス
ＩＦ０１２８３９は利用しない、さらに、菌株地７２３
８はグリセリン、Ｄ−フルクトース、ラムノース、ラフ
ィノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−マンノース、マンニ
トールおよびコハク酸ナトリウムを利用しないが、スト
レプトミセス・アンチマイフティクスＩＦＯ１２８３９
は利用する。

菌株Ｎｏ　７２３８の培養特性は、ストレプトミセス・
バイグロスコピカス・サブスプ・グレボススＩＦｔ）１
３７８６とは、イースト・マルトエキストラクト寒天、
ポテト・デキストロース寒天およびチロシン寒天を用い
て培養したとき異なる。

菌株Ｎｏ　７２３８のミルクペプトン化は陰性であるが
、ストレプトミセス・バイグロスコピカス・サブスブ・
グレボススＩＦ０１３７８６は陽性である。菌株〜７２
３８は７％ＮａＣ１の存在下に生育しうるが、ストレプ
トミセス・バイグロスコピカス・サプスブ・グレボスス
ＩＦＯ１３７８６は同条件下には生育しない。

炭素源の利用性では、菌株ｔｋ　７２３８はラクトース
、イヌリンおよびサリシンを利用しうるが、ストレプト
ミセス・バイグロスコピカス・サプスプ・グレボススＩ
Ｆ０１３７８６はそれらを利用しない、また、菌株Ｎ１
１７２３８はグリセリン、Ｄ−キシａ　−ス、Ｄ−フル
クトース、ラフィノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−マン
ノース、マンニトールおよびコハク酸ナトリウムを利用
しないが、ストレプトミセス・バイグロスコピカス・サ
プスプ・グレボススＩＦ０１３７８６はそれらを利用す
る。

しかしながら、菌株ＮＱ７２３８はオートミール寒天お
よび無機塩スターチ寒天で気菌糸に吸湿性胞子塊を形成
し、さらに菌株＆　７２３８の形態学的特徴および培養
特性はストレプトミセス・バイグロスコピカス・サブス
プ・グレボススＩＦ０１３７８６に類似している。従っ
て菌株＆　７２３８はストレプトミセス・バイグロスコ
ピカスに属し、この公知の菌株がストレプトミセス・バ
イグロスコピカスの亜種中では菌株Ｎ１１１７２３８に
最も類似しているけれども、菌株＆　７２３８はストレ
プトミセス・バイグロスコピカス・サブスプ・グレボス
スＩＦ０１３７８６とは異なる。

以上の事実から菌株Ｎ１１１７２３８は、ストレプトミ
セス・バイグロスコピカスの新亜種であると考えられ、
微生物が屋久島の土壌から分離されたことにちなんで、
ストレプトミセス・バイグロスコピカス・サプスブ・ヤ
クシマエンシス（兆二匹竺Ｅ□ｈ　　ｒｏｓｃｏ　１ｃ
ｕｓ　５ｕｂｓｐ、　ａｋｕｓｈｉｍａａｎｓｉｓ）と
命名された。

ＦＲ−９００５２０およびＦＲ−９００５２３の産生こ
の発明の新規なＦＲ−９００５２０物質および／または
ＦＲ−９００５２３物質は、例えばストレプトミセス・
バイグロスコピカス・サブスプ・ヤケシマエンシスＮｏ
　７２３８　（寄託番号：微工研条寄第９２８号）のよ
うなストレプトミセス属に属するＦＲ−９００５２０お
よび／またはＦＲ−９００５２３物質生産菌株を培地で
培養することにより産生できる。

般的には、ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦＲ
−９００５２３物質は、ＦＲ−９００５２０および／ま
たはＦＲ−９００５２３物質生産菌株を同化しうる炭素
源および窒素源を含む水性栄養培地中、好ましくは例え
ば振とう培養、深部培養等の好気性条件下に培養するこ
とによって産生できる。

培地中の好ましい炭素源としては、グルコース　シュー
クロース、ラクトース、グリセリン、スターチ、デキス
トリン等のような炭水化物が挙げられる。その他端地中
に含まれていてもよい炭素源としては、マルトース、Ｄ
−トレ／Ｘロース、イノシトール、ンヌリン、サリシン
等が挙げられる。

好ましい窒素源としてはイースト◆エキストラクト、ペ
プトン、グルテンミール、綿実粉、大豆粉、コーン・ス
テイープ・リカー、乾燥イースト、小麦胚芽、羽毛粉、
落花生粉等、ならびに例えば硝酸アンモニウム、硫酸ア
ンモニウム、燐酸アンモニウム等のアンモニウム塩、尿
素、アミノ酸等のような無機または有機窒素化合物が挙
げられる。

炭素源および窒素源は好ましくはそれらの組合わせで使
用されるが、微量の生育因子および相当量の無機栄養素
を含有していれば純度の低い物質も使用でき、必ずしも
純粋な形で使用する必要はない、所望により培地に炭酸
ナトリウムまたは炭酸カルシウム、燐酸ナトリウムまた
は燐酸カリウム、塩化ナトリウムまたは塩化カリウム、
沃化ナトリウムまたは沃化カリウム、マグネシウム塩、
銅塩、コバルト塩等の無機塩を添加してもよい。

特に培養培地が著しく発泡する場合には、必要により液
状パラフィン、脂肪油、植物油、鉱油またはシリコンの
ような消泡剤を添加してもよい。

ＦＲ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２３物質
を大量生産する条件としては、深部好気培養が好ましい
、少量生産にはフラスコまたはびん中で振とう培養また
は表面培養が行われる。さらにまた、大型タンク内で生
育を実施する場合には、ＦＲ−９００５２０物質および
ＦＲ−９００５２３物質の生産工程における生育遅延を
回避するために、微生物の前培養を用いて生産タンク中
に菌を接種するのが好ましい、すなわら、比較的少量の
培養培地に微生物の胞子または菌糸を接種し、その接種
培地を培養して微生物の前培養接種物をまず生産し、次
いで培養した前培養接種物を無菌的に大型タンクに移す
のが望ましい、この前培養接種物を生産する培地は、Ｆ
Ｒ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２３物質の
生産に使用される培地と実質的に同じであってもよく、
また異なってもよい。

培養混合物の攪拌および通気は種々の方法で行うことが
できる。攪拌はプロペラまたはこれに準する攪拌装置を
用いるか、醗酵器を回転させるかまたは振とうするか、
種々のポンプ装置を用いるか、または培地中に滅菌空気
を通すことによっても行うことができる０通気は滅菌空
気を醗酵混合物中を通過させることにより行ってもよい
。

醗酵は通常、約２０℃〜４０℃の温度範囲、好ましくは
２５〜３５℃で、約５０〜１５０時間行われるが、醗酵
条件および醗酵規模によって適宜変化させればよい。

このようにして生産されたＦＲ−９００５２０物質およ
びＦＲ−９００５２３物質は、他の呪知の生物学的活性
物質の回収に通常使用される慣用の方法で培養培地から
回収することができる。生産されたＦＲ−９００５２０
物質およびＦＲ−９００５２５物質は、培養菌糸中およ
び濾液中に見出され、従ってＦＲ−９００５２０物質お
よびＦＲ−９００５２３物質は、培養ブロスの濾過また
は遠心分離によって得られる菌糸および濾液から、減圧
濃縮、凍結乾燥、常用の溶媒による抽出、ｐＨ１ｌｌｌ
、例えば陰イオン交換樹脂または陽イオン交換樹脂、非
イオン性吸着樹脂等の常用の樹脂による処理、例えば活
性炭、ケイ酸、シリカゲル、セルロース、アルミナ等の
常用の吸着剤による処理、結晶化、再結晶化等の慣用の
方法によって分離、精製することができる。

特に、ＦＲ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２
３物質は、醗酵によって産生された両生酸物を含む物質
を、酢酸エチル、ｎ−へキサン等のような適切な溶媒に
溶解し、次いでその溶液をクロマトグラフィー、例えば
、シリカゲルを使用するカラムクロマトグラフィーに付
し、酢酸エチルおよびｎ　−ヘキサン、またはそれらの
混合物のような適切な溶媒で溶出することにより分離す
ることができる。また、このようにして分離されたＦＲ
−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２３物質はそ
れぞれ、例えば再結晶、再クロマトグラフィー、高速液
体クロマトグラフィー等の常法によってさらに精製する
ことができる。

（１）形状および色調二 無色の板状結晶 （２〉元素分析値： Ｃ：　　６４．８１％、　Ｈ：　８．８２％、　Ｎ　ｊ
　１．５５％（３）呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、エールリッヒ反応
、ドラーゲンドルフ反応、沃素蒸気反応 陰性：塩化第二鉄反応、ニンヒドリン反応、モーリッシ
ュ反応 （４）溶解性： 可溶：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル
、クロロホルム、ジエチルエーテル、ベンゼン 難溶：ｎ−ヘキサン、石油エーテル 不溶：水 （５）融点： １６３〜１６５℃ （６）比旋光度： ２３゜ ［α］　　・　−８４，１°（Ｃ＝　１．０．　ＣｌＣ
ｌ５）（７）紫外線吸収スペクトル： 末端吸収 （８）赤外線吸収スペクトルニ ジＣＨ”３：　３６８０．３５７５．３５２０．２９４
０．２８７５゜ａｘ ２８２５、１７４５．１７２５．１７００．１６４７゜
１６１０（ｓｈン、　　　１４５２．　　１３８０．　
　１３５０゜１３３０、１２８５．１１７０．１１３５
．１０９０゜１０３０、１０Ｇ５．９９０．　９８０（
ｓｈ）。

上記スペクトルのチャートを図７に示す。

（１０）’Ｈ核核磁気共鳴スペクトル 上上記スペクトルチャートを図８に示す。

（１１〉薄層クロマトグラフイｍ： （１２〉物質の性質： 中性物質 ＰＲ−９００５２０物質に関して、１３Ｃおよび１Ｈ核
磁気共鳴スペクトルの測定の際、この物質は種々の化学
ンフトにそれぞれ１対のシグナルを示すが、薄層クロマ
トグラフィーおよび高速液体クロマトグラフィーを測定
したところ、ＦＲ−９００５２０物質は薄層クロマトグ
ラフィーで単一スポットを高速液体クロマトグラフィー
で単一ピークをそれぞれ示した。

上記物理化学的性質およびＦＲ−９００５０６物質の化
学構造が決定されたことにより、ＦＲ−９００５２０物
質は下記の化学構造を有することが判明した。

１７−ニブル−１，１４−ジヒドロキシー１２−［２−
（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１
−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１
９，２１，２７−テトラメチル−１１゜２８−ジオキサ
−４−アザトリシクロ［２２，３。

１０４°９］才クタコスー１８−エン−２，３゜ｔｏ、
　ｔａ−テトラオン 狸ヨ兜狙聾艷ｌ （１〉形状および色調： 無色の針状結晶 （２）元素分析値： Ｃ：６４．５７％　、Ｈ：８．８４％　、Ｎ、１．８１
％（３）呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、エールノノヒ反応
、ドラーゲンドルフ反応、沃素蒸気反応 陰性二酸化第二鉄反応、ニンヒドリン反応〈４）溶解性
： 可溶：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル
、クロロホルム、ジエチルエーテル、ベンゼン 鴬＃：ｎ−ヘキサン、石油エーテル 不溶：水 （５〉融点： １５２〜１５４”Ｃ 〈６〉比旋光度： ［αコε３：　　−７３，０”　　　（Ｃ＝０．６５．
　　ＣＨＣｌ３ン（７〉紫外線吸収スペクトル： 末端吸収 （８）赤外線吸収スペクトルニ ジＣＨＣｌ３：　３６７０．３５８０．３５１０．２９
３０．２８７５゜鴫ａｘ ２８２５、　１７４５．　１７２２．　１７００．　１
６４７゜１４５０、　１３８０．　１３５０．　１３３
０．　１３０７゜１２８５．１１７０．１１３５．１０
９０．１０５０゜１０３０、　１０００．９９０．９７
８．９６０゜９３０、９１５．８８８．８７０．８５０
　ｔｙａ−”（９）１３ｃ核磁気共鳴スペクトル： （１１〉薄層クロマトグラフィー： １°、６４　（ｑゝ １０．０４　　（ｑ） 上記スペクトルのチャートを図９に示す。

（１０）１Ｈ核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチャートを図１０に示ｆ。

（以下余白） （１２）物質の性質： 中性物質 ３ ＦＲ−９００５２３物質に関して、　Ｃおよび１Ｈ核磁
気共鳴スペクトルの測定の際に、この物質は種々の化学
シフトにそれぞれ１対のシグナルを示すが、薄層クロマ
トグラフィーおよび高速液体クロマトグラフィーの測定
の場合には、ＦＲ−９００５２３物質はそれぞれ薄層ク
ロマトグラフィーで単一スポットを、高速液体クロマト
グラフィーで単一ピークを示した。

上記物理化学的性質およびＦＲ−９００５０６物質の化
学構造が決定されたことにより、ＦＲ−９００５２３物
質は下記の化学構造を有することが判明した。

１．１４−ジヒドロキシ−１２−（２−（４−ヒドロキ
シ−３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチルビニル
］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１７，１９，２１
，２７−ベンタメデルー１１．２８−ジオキサ−４−ア
ザトリシクロ［２２，３、１。

０４°９］才クタコス−１８−エン−２，３，１０゜１
６−テトラオン ［Ｉ］企虚羞： （１）製造法１：（ヒドロキシ保護基の導入）化合物（
Ｉｂ）またはその塩は、化合物（ｊａ）マタはその塩に
ヒドロキシ保護基を導入することによって製造できる。

この反応において使われるヒドロキシ保護基の導入剤と
しては慣用のもの、例えばジメチルスルホキシド、エチ
ルメチルスルホキシド、プロピルメチルスルホキシド、
イソプロピルメチルスルホキシド、ブチルメチルスルホ
キシド、イソブチルメチルスルホキシド、ヘキシルメチ
ルスルホキシド等の低級アルキルメチルスルホキシドの
ようなジ（低級）アルキルスルホキシド；例えば塩化ト
リメチルシリル、臭化トリエチルシリル、塩化トリメチ
ルシリル、塩化ｔ−ブチルジメチルシリル等のトリ（低
級）アルキルシリルハロゲン（ＩＪＩＪ、例えば塩化メ
チル−ジフェニルシリル、臭化エチル−ジフェニルシリ
ル、塩化プロピル−ジトリルシリル、塩化ｔ−ブチル−
ジフェニルシリル等の低級アルキル−ジアリールシリル
ハロゲン化物）ような三置換シリル化合物；前記アシル
基を導入することのできるカルボン酸、スルホン酸およ
び、例えば酸ハロゲン化物、酸無水物、活性アミド、活
性エステルなどのこれらの反応性誘導体のようなアシル
化剤等を挙げることができる。このような反応性誘導体
の適切な例としては、酸塩化物、酸臭化物、例えばジア
ルキル燐酸、フェニル燐酸、ノフェニル燐酸、ジベンジ
ル燐酸、ハロゲン化燐＃等の置換燐酸、ジアルキル亜燐
酸、亜硫酸、ナオ硫酸、硫酸、例えば炭酸メチル、炭酸
エチル、炭酸プロピル等のアルキル炭酸エステル、例え
ばピバリン酸、ペンタン酸、インペンタン酸、２−エデ
ルプチル酸、トリクロｌ：ｌ＃酸、トリフルオロ酢酸等
の脂肪族カルボン酸、例えば安息香酸等の芳香族カルボ
ン酸のような酸との混合酸無水物、対称型酸無水物、イ
ミダゾール、４−置換イミダゾール、ジメデルピラゾー
ル、トリアゾール、テトラゾールのようなイミノ基を含
有する複素環式化合物との活性酸アミド、例えばｐ−二
トロフェニルエステル％　２．４−ジニトロフェールエ
ステル、トリクロロフェニルエステル、ペンタクロロフ
ェニルエステル、メシルフェニルエステル、フェニルア
ゾフェニルエステル、フェニルチオエスデル、ｐ−二ト
ロフェニルデ才エステル、ｐ−クレジルチオエステル、
カルボキシメチルチオエステル、ピリジルエステル、ピ
ペリジルエステル、８−キノリルチオエステルまたはＮ
。

Ｎ−ジメチルヒドロキシルアミン、１−ヒドロキシ−２
−（ＩＨ）−ピリドン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、１−ヒドロキシベンゾ
トリアゾール、１−ヒドロキン−６−クロロベンゾトリ
アゾールのようなＮ−ヒドロキシ化合物とのエステル等
の活性エステル等が挙げられる。

この反応において、ジ（低級）アルキルスルホキシドが
ヒドロキシ保護基の導入剤として使用される場合、反応
は、通常無水酢酸のような無水低級アルカン酸の存在下
に行われる。

さらに、三置換シリル化合物がヒドロキシ保護基の導入
剤として使用される場合、反応は、イミダゾ−ル等のよ
うな慣用の縮合剤の存在下に行うことが好ましい。

さらには、アシル化剤がヒドロキシ保護基の導入剤とし
て使用される場合、反応は、例えばリチウム、ナトリウ
ム、カリウム等のアルカリ金属、例えばカルシウム等の
アルカリ土金属、例えば水素化ナトリウム等のアルカリ
金属水素化物、例えば水素化カルシウム等のアルカリ土
金属水素化物、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウ
ム等のアルカリ金属水酸化物、例えば炭酸ナトリウム、
炭酸カリウム等のアルカリ金属炭酸塩、例えば炭酸水素
ナトリウム、炭酸水素カリウム等のアルカリ金属炭酸水
素塩、例えばナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキ
シド、カリウムｔ−ブトキシド等のアルカリ金属アルフ
キシト、例えば酢酸ナトリウム等のアルカリ金属アルカ
ン酸、例えばトリニブルアミン等のトリアルキルアミン
、例えばピリジン、ルチジン、ピコリン、４−Ｎ、Ｎ−
ジメチルアミノピリジン等のピリジン化合物、キノリン
のような有機または無機塩基の存在下に行うのが好まし
い。

この反応において、アシル化剤が遊離の酸またはその塩
の形で使用する場合、反応は、例えばＮ、Ｎ’−ジシク
ロへキシルカルボジイミド、Ｎ−シクロへキシル−Ｎ’
−（４−ジエチルアミノシクロヘキシル）カルボジイミ
ド、Ｎ、Ｎ’　−ジエデルカルボジイミド、Ｎ、Ｎ’　
−ジイソプロピルカルボジイミド、Ｎ−エテル−Ｎ’−
（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカ
ルホシイミド化合物、例えばＮ、Ｎ’　−カルボニルビ
ス（２−メチルイミダゾール）、ペンタメチレンケテン
−Ｎ−シクロヘキシルイミン、ジフェニルケテン−Ｎ−
シクロヘキシルイミン等のケテンイミン化合物、例えば
エトキシアセチレン、β−シクロビニルエチルエーテル
等のオレフィンまたｌよアセチレン系エーテル化合物、
例えば１−（４−クロロベンゼンスルホニルオキシ）−
５−／ｒｃｒローＩＨ−ベンゾトリアゾール等のＮ−ヒ
ドロキシベンゾトリアゾール誘導体のスルホン酸エステ
ル等の慣用の縮合剤の存在下に行うことが好ましい。

反応は、通常、水、アセトン、ジクロロメタン、例えば
メタノール、エタノール等のアルコール、テトラヒドロ
フラン、ピリジン、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド等ま
たはこれらの混合溶媒のようなこの反応に悪影響を与え
ない慣用の溶媒中で行われ、さらに、塩基またはヒドロ
キシ保Ｎ基の導入剤が液体の場合は、これらも溶媒とし
て使用することができる。

反応温度は特に限定されず、通常冷却下ないし加熱下で
行われる。

この反応において、化合物（Ｉｇ＞のＲ２で示されると
ドロキシ基が保護されたヒドロキシ基に転換することも
あり、このような場合もこの製造法に包含される。

さらに、この反応において、無水低級アルカン酸の存在
下ジ（低級）アルキルスルホキシドをヒドロキシ保護基
導入剤として使用する際、ある）で示される部分構造を
有する化合物（Ｉ　ａ）ドロキシである）で示される部
分構造を有する目的化合物（Ｉｂ）を得ることがあり、
このような場合も、この製造法の範囲に包含される。

（２〉製造法２：（ヒドロキシ保護基の導入）化合物（
Ｉｄ）またはその塩は、化合物（Ｉｃ）またはその塩に
ヒドロキシ保護基を導入することによって製造できる。

この反応は、製造法１と実質的に同様の方法で行うこと
ができ、従って、例えば塩基、縮合剤、溶媒、反応温度
等の反応条件は、製造法１を援用できる。

この反応において、化合物（Ｉｃ）のＲ１におけるヒド
ロキン基が目的化合物（Ｉｄ）では対応する保護された
ヒドロキシ基へ転換することがあり、このような場合も
、この製造法の範囲に包含される。

（３）製造法３：（二重結合の形成） 化合物（Ｉｆ）またはその塩は、化合物（Ｉ　ｇ）また
はその塩に塩基を反応させることによって製造できる。

この反応で使用される塩基としては、製造法１で例示し
た塩基をそのまま挙げることができる。

この反応は、また、Ｒ２がヒドロキシである化合物（Ｉ
　ａ）またはその塩に、塩基の存在下アシル化剤と反応
させることによっても製造できる。

この反応は、水、アセトン、ジクロロメタン、例えばメ
タノール、エタノール、プロパノール等のアルコール、
テトラヒドロフラン、ピリジン、Ｎ、Ｎ−ジメチルホル
ムアミド等またはその混合溶媒のようなこの反応に悪影
響を与えない慣用の溶媒中で行われ、さらに、塩基が液
体である場合には、これらも溶媒として使用することが
できる。

反応温度は特に限定されず、通常冷却下ないし加熱下で
行われる。

（４〉製造法４：（ヒドロキシエチレン基の酸化）化合
物（Ｉｈ）またはその塩は、化合物（Ｉ　ｇ）またはそ
の塩を酸化することによって製造できる。

この反応で使用される酸化剤としては、製造法！で示し
たようなジ（低級）アルキルスルホキシドを挙げること
ができる。

この反応は、通常無水酢酸のような無水低級アルカン酸
の存在下に、アセトン、ジクロロメタン、酢酸エチル、
テトラヒドロフラン、ピリジン、Ｎ、Ｎ−ジメチルホル
ムアミド等またはその混合溶媒のようなこの反応に悪影
響を与えない慣用の溶媒中で行われ、さらに、無水低級
アルカン酸が液体の場合には、これらも溶媒として使用
することができる。

反応温度は特に限定されず、通常冷却下ないし加熱下で
行われる。

この製造法は、反応の途中で、原料化合物（Ｉｇ）のＲ
１で示されるヒドロキシ基が目的化合物（Ｉｈ）におい
て１−（低級アルキルチオ）（低級）アルコキシ基へ転
換することがあり、このような場合もこの製造法の範囲
内に包含される。

（５）製造法５：（アリル基の還元） 化合物（Ｉｊ）またはその塩は、化合物（！ｉ）または
その塩を還元することによって製造できる。

この製造法における還元は、接触還元等のようなアリル
基をプロピル基に還元できる常法によって行うことがで
きる。

接触還元で使用される触媒としては、例えば白金板、白
金海綿、白金黒、コロイド白金、酸化白金、白金線等の
白金触媒、例えばパラジウム海綿、パラジウム黒、酸化
パラジウム、パラジウム・炭素、コロイドパラジウム、
パラジウム・硫酸バリウム、パラジウム・炭酸バリウム
等のバランラム触媒、例えば還元二７ケル、酸化ニッケ
ル、ラネーニッケル等のニッケル触媒、例えば還元コバ
ルト、ラネーコバルト等のコバルト触媒、例えば還元鉄
、ラネー鉄等の鉄触媒、例えば還元鋼、ラネー鋼、ウル
マン鋼等の銅触媒等のような慣用のものが挙げられる。

この還元は、通常、水、メタノール、エタノール、プロ
パノール、ピリジン、酢酸エチル、Ｎ。

Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジクロロエタンまたはその
混合溶媒のようなこの反応に悪影響を与えない慣用の溶
媒中で行われる。

この還元の反応！１度は特に限定されず、通常冷却下な
いし加温下の範囲で行われる。

上記に説明した製造法１〜５によって得られるトリシク
ロ化合物（１）は、例えば抽出、沈澱、分別結晶化、再
結晶化、クロマトグラフィ等の常法により単離、精製で
きる。

化合物（Ｉ）および（Ｉａ）〜（Ｉｊ）における塩とし
ては、無毒の、医薬として許容される慣用の塩であり、
例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、
例えばカルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土金
属塩、アンモニウム塩、例えばトリニブルアミン塩、Ｎ
−ベンジル−Ｎ−メチルアミン塩等のアミン塩のような
無機または有機塩基との塩が挙げられる。

前記の製造法１〜５の反応またはその反応混合物の後想
理中において、出発化合物および目的化合物のフンホー
マーおよび不斉炭素原子または二重結合による立体異性
体が、他のフンホーマーおよび立体異性体に転換される
ことがあり、このような場合もこの発明の範囲に包含さ
れる。

この発明のトリシクロ化合物（Ｉ）は、免疫抑制作用、
抗菌作用等のような薬理作用を有し、従って、心臓、腎
臓、肝臓、骨髄、皮膚等の臓器あるいは組織の移植に対
する拒絶反応、骨髄移植によって起る移植片対宿主反応
、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、橋本甲
状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、夏型糖尿病、ブ
ドウ膜炎等の自己免疫疾患、病原菌によって起る感染症
等の治療および予防に有用である。

このような薬理作用を有することを示すため、トリシク
ロ化合物（Ｉ）の薬理試験データを以下に示す。

芭豊ユ 試験管内混合リンパ球反応（ＭＬＲ）におけるトリシク
ロ化合物（１）の抑制効果 各ウェルにＣ５７ＢＬ／６応答細胞（Ｈ−２ｂ）　５　
Ｘ　１０５個と、マイトマイシンＣ処理（マイトフシシ
ンＣ２５に／ＩＩＱで３７’Ｃで３０分間処理しＲＰＭ
１１６４０培地で３回洗浄す６　）　Ｌ　ｒニーＢＡＬ
Ｂ／（３１ｍ細胞（Ｈ−２ｄ＞５　Ｘ　ｔｏ５ｆｌｌＯ
，２１１＋１〕ｌＯ％牛脂仔血清７０ＲＰ？ｌ１１６４
０培地［炭酸水素ナトリウム２ｍＭ、ペニシリン（５０
単位／ａｌｌ）およびストレプトマイシン（ｓｏｂ／ｉ
Ｑ　）を添加］に加えたマイクロタイタープレート中で
ＭＬＲ試験を行う。

湿度１００％、二酸化炭素５％、空気９５％に保った培
養器内で、３７℃で、６８時間、ｍＭ！を培養し、４ｉ
ｌｌ　３Ｈ−チミジン（０，５μＣｉ）でパルスして、
細胞を集める。この発明の目的化合物をエタノールに溶
解し、ＲＰＭＩ１６４０培地に希釈し、培養物に添加し
最終濃度をｏ、ｔ３７−以下になるようにする。

結果を表７〜１０に示す、この発明のトリシクロ化合物
は、マウスＭＬＲを抑制した。

（以下余白） 表７　：　ＦＲ−９００５０６物質のＭＬＲに対する効
果衣９　、　ＦＲ−９００５２３物質のＭＬＲに対する
効果衣８　：　ＦＲ−９００５２０物質のＭＬＲに対す
る効果衣１０　、　ＦＲ−９（１０５２５物質のＭＬＲ
に対する効果芭験１ トリシクロ化合物（１）の抗菌活性 各種真菌に対するトリシクロ化合物（Ｉ）の抗菌活性を
、サブロー寒天中、寒天倍々希釈法によって測定した。

３０°Ｃで２４時間培養した後、最小発育阻止濃度（Ｍ
工Ｃ）をに／ｌｌｌ１１で表わす。

この発明のトリシクロ化合物は、真菌、例えばアスペル
ギルス・フミガーツスＩＦＯ５８４０およびフナリウム
・オキシスボルムＩＦＯ５９４２に対して、表１１およ
び１２に記載するような抗菌活性を示した。

表１１＝トリシクロ化合物（Ｉ）のアスペルギルス・フ
ミガーツスＩＦＯ５ｇ４０に対するＭＩＣ値（鴫／−）
表１２ニトリシクロ化合物（１）のフサリウム・オキシ
スボルムに対するＭＩＣ値（＜／ｍ１ｌ）ラットにおけ
る同種皮膚移植片生存に対するトリシクロ化合物（１）
の効果 ドナー（ブイラシャ−）う・ノドの腹部皮膚移植片を、
レシピエンド（ＷＫＡ　）ラットの外側胸部に移植する
。５日目に包帯を除去する。移植片上皮の９０％以上が
壊死する拒絶反応があるまで、移植片を毎日検査する。

ＦＲ−９００５０６物質をオリーブ油に溶解し、移植臼
より毎日１４日間連続筋肉内投与する。

表１３に示すように、オリーブ油を１４日間連続筋肉内
投与したラットにおいて、皮膚同種移植片は８日以内に
すべて拒絶されるが、ＦＲ−９００５０６物質で毎日処
置したものは、皮膚同種移植片生存が明らかに延長した
。

表１３　二ＦＲ−９００５０６物質の同種皮膚移植片生
存に対する効果 １０　　　　５　５６．６１．８２．８５．８９隻駄１ ラットにおける■型フラーゲン誘発関節炎に対するトリ
シクロ化合物（Ｉ）の効果 コラーゲンを２ｍｇ／Ｉ！ＩＱの濃度になるよう冷０．
０１Ｍ酢酸に溶解する。溶液を等容量の不完全フロイン
ドアジュバント中で乳化する。総量ｏ、　ｓｍｕのこの
乳化物を雌性ルイス系ラットの背中の数ケ所と尾の１．
２ケ所に皮肉注射する。　ＦＲ−９００５０６物質をオ
リーブ油に溶解し、経口投与する。同量のＩ型コラーゲ
ンで免疫した対照ラットには、オリーブ油のみを経口投
与する。関節炎の発現率を観察する。

試験結果を表１４に示す、■型コラーゲン免疫化と同じ
日から１４日間オリーブ油で処理したラット全てに、関
節炎が誘発された。

ＦＲ−９００５０６物質を１４日間毎日投与すると、３
週間の観察期間中、関節炎の誘発を完全に抑制した。

表１４二ラットにおけるコラーゲン誘発関節炎に対する
ＦＲ−９００５０６物質の効果 投与量（ｍｇ／ｋｇ／日〉　関節炎の発現率５ＪＬｌＪ
系マウスにおける実験的アレルギー性脳をｌ１ｂＮ炎（
ＥＡＥ）に対するトリシクロ化合物（１）の効果 ５ＪＬｌＪ系マウスよりを髄ホモジネートを調整する。

を髄を通気法で取り出し、約等容量の水と混合し、４℃
でホモジネートする０等容量のこの冷ホモジネート（ｌ
ｏａ＋ｇ／ｍｌ！　）をマイコバクテリウム・ツベルク
ローシスＨ３７ＲＡ　０．６ｍｇ／−を含有する完全フ
ロインドアジュバント（ＣＦＡ　）で乳化する。　５Ｊ
ＬｌＪ系マウスに、を髄−ＣＦＡエマルジョン０、２ｍ
Ｑを、０白目と１３日日の二回注入し、ＥＡＥを誘発さ
せる。この試験に使用した全マウスについて、ＥＡＥの
臨床的徴候を毎日評価、判定する。

ＥＡＥの程度は、下記の判定基準によった。グレードｌ
：尾緊張低下、グレード２：ぎこちない歩行、グレード
３：１本以上の四肢の脱力、グレード４：対麻痺または
片麻痺。

ＦＲ−９００５０６物質をオリーブ油に溶解し、０８目
（初回免疫の日）より１９日間経口投与する０表１５に
示すように、ＦＲ−９００５０６物質は、ＥＡＨの徴候
の出現を明らかに阻止した。

表１５　：　ＳＪＬ／Ｊ系マウスにおける実馳的アレル
ギー性脳を髄炎に対するＦＲ−９００５０６物質の効果
に慧１ マウスにおける局所的移植片対宿主反応（ＧｖＨＲ）に
対するトリシクロ化合物（１）の効果Ｃ５７ＢＬ／６ド
ナーより得た生牌細胞（１×１０７個）を、ＢＤＦ１系
マウスの右後肢足厳に皮下注射する。

７日後にマウスを層殺し、右（注射した足）および左（
注射していない足）両方の原素リンパ節（ＰＬＮ）の重
量を測る。　ＧｖＨＲを左右ＰＬＮのｌｉｔ差で表わす
。

ＦＲ−９００５０６物質をオリーブ油に溶解し、感作日
より５日間経口投与する。

ＦＲ−９００５０６物質の局所的移植片対宿主反応抑制
のＥＤ５ｏ（ａｒｌ、１９ｍｇ／ｋｇである。

甚豊ヱ トリシクロ化合物（Ｉ）の急性毒性 ｄｄｙマウスにおける腹腔内投与によるＦＲ−９０（１
５０６、ＦＲ−９００５２０％ＦＲ−９００５２３、Ｆ
Ｒ−９００５２５物質の急性毒性に関する試験を行い、
いずれの場合にも投与量１００ｍｇ／ｋｇで死亡は観察
されなかった。

この発明の医薬組成物は、外用、内服または非経口投与
に適した有機または無機の担体もしくは賦形剤と混合し
て、この発明のトリシクロ化合物＜１）を有効成分とし
て含有する、例えば固体状、半固体状もしくは液状の医
薬製剤の形で使用することができる。有効成分は、錠剤
、ペレット剤、カプセル剤、坐剤、液剤、エマルジョン
、懸濁液およびその他の適切な形で使用でき、例えば、
通常の無毒で、医薬として許容される担体と混合しても
よい、使用し得る担体は、水、グルコース、ラクトース
、アカシアフ゛ム、ゼラチン、マンニトール、でん粉ペ
ースト、三ケイ酸マグネシウム、タルク、コーンスター
チ、ケラチン、コロイドシリカ、バレイショでん粉、尿
素、および他の固体状、半固体状または液状の製剤を製
造するのに適した担体であり、さらに、賦形剤、安定化
剤、粘稠化剤、着色剤、香料を使用してもよい。

目的化合物は、疾患の経過または状態により、所望の効
果を発揮するのに十分な量が医薬製剤中に含有される。

この医薬組成物をヒトに用いる場合は、非経口投与ある
いは内服で使用することが好ましい。

トリシクロ化合物（Ｉ）の治療有効量は、治療する患者
個々の年齢および疾病の程度により変化するが、通常、
有効成分１日約０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは０
．１〜５００ｍｇ、さらに好ましくは０．５〜１００ｍ
ｇが疾患の治療に用いられ、一般に１回平均約０．５ｍ
ｇ、１ｍｇ、５　ｍｇ、　１０ｍｇ、　５０ｍｇ、　１
０（ｂｏｇ、　２５０ｍｇ、５００ｍｇが投与される。

以下、実施例に従って、この発明を説明する。

以下に示す平板希釈法を用いてストレプトミセス・ツク
バエンシス＆９９９３を分離した。

茨城県筑波郡豊里町で採取した約１グラムの土壌を無菌
試験管に入れ、滅菌水を加え、容量５ｍとする。ａ合物
をチューブブザーで１０秒間混合し、１０分間放置する
。上澄液を滅菌水で順次１００倍希釈する。希釈液（０
，１１１１）を塩酸チアミン添加スザペック寒天（サッ
カロース３０ｇ１硝酸ナトノウム３区、リン酸二カリウ
ム１ｇ、硫酸マグネシウム０．５ｇ、塩化カリウム０．
５ｇ、硫酸第１鉄０゜０１ｇ、塩酸デフ２フ０．１ｇ、
寒天２０区、水道水１０１００Ｑ　；　ｐＨ７，２）を
含有するペトリ皿上に広げる。３０℃で２１日間インキ
ュベートし、プレート上に生育させたコロニーを斜面培
地［酵母−麦芽エキス寒天（ＩＳＰ培地２）］に移し、
３０°Ｃで１０日間培養すル０分離したコロニーの中に
ストレプトミセス・ンクバエンシスＮｏ　９９９３を見
い出した。

敷薯 グリセリン（１％）、可溶性でん粉（１％）、グルコー
ス（０，５％）、綿実粉（０，５％）、乾燥酵母（０，
５％）、コーンスタープリ力−（０，５％）、炭酸カル
シウム（０，２％）を含有する培地（１６０ｆｆ１ｍ　
）　（ｐＨ６，ｓにｍｌ）を、各４５ＱＱｌｆｆｌｌ　
（７）　ｍ　４　レン？イヤーフラスコ２０個に入れ、
１２０℃で３０分間滅菌する。ストレプトミセス・ツク
バエンシスＮｃｉ９９９３（寄託番号：微工研条寄第９
２７号）の斜面培養物の１白金耳を各培地に接種し、回
転振盪機上、３０°Ｃで４日間培養する。得られる培養
物を、あらかしめ１２０℃で２０分間滅菌した２００リ
ツトルのジャーフッ−メンタ−に入れた可溶性でん粉（
４，５％〉、コーンスタープリ力−（１％）、乾燥酵母
（１％）、炭酸カルシウム（０，１％）、アデカノール
（消泡剤、商品名、旭電化製）（０，１％〉を含有する
培地（１５０リツトル〉に接種し、３０℃で、通気（１
５０リットル／分）、攪拌（２５０ｒｐｍ）下に４日間
培養する。

見夏旦主旦亙１ このようにして得られる培養プロスをケイソウ上（５ｋ
ｇ）を用いて濾過する。菌糸体の塊をメタノール（５０
リツトル）で抽出し、抽出液５０リツトルを得る。菌糸
体より得られるメタノール抽出液と濾液とを合わせ、非
イオン性吸着樹脂１ダイアイオンＨＰ−２０．＋（商品
名、三菱化成社製）（１０リンドル）のカラムに通す、
水（３０リットル）および水性メタノール（３０リツト
ル）で洗浄した後、メタノールで溶出する。溶出液を減
圧下に蒸発させ、残量を２リツトルとする。これを酢酸
エチル（２リツトル）で抽出する。酢酸エチル抽出液を
減圧濃縮し、油性残留物を得る。油性残留物を二倍重量
の酸性シリカゲル（特殊シリカゲル、グレード＝１２、
富士デビソン塾）と混合し、この混合物を酢酸エチル中
でスラリー化する。溶媒を留去後、得られる乾燥粉末を
、ｎ−ヘキサンで上記と同し酸性シリカゲル（８００１
１１１）を充填したカラムを用いるクロマトグラフィに
付す、カラムをｎ−ヘキサン（３リツトル）、ｎ−ヘキ
サンと酢酸エテルの混合物（９：１ｖ／ｖ、３リットル
；４：１ｖ／ｖ、　３リツトル）および酢酸エチル（３
リツトル）で展開する。目的化合物を含む画分を集め、
減圧濃縮して、油性残留物を得る。油性残留物をｎ−ヘ
キサンと酢酸エチルとの混合物（１：１ｖ／ｖ、３０−
）に溶解し、同じ溶媒系でシリカゲル（２３０〜４００
メツシユ、メルク社製）　（５００＋１１Ｑ）を充填し
たカラムを用いるクロマトグラフィに付す。

ｎ−ヘキサンと酢酸エチルとの混合物（１：ｌｖ／ｖ、
２リットル；　１　：　２ｖ／ｖ、　１．５リツトル）
で溶出する。最初の目的化合物を含む両分を集め、減圧
濃縮し、黄色の油状物を得る。この油性残留物を二倍重
量の酸性シリカゲルと混合し、この混合物を酢酸エチル
中でスラリー化する。溶媒を留太後、得られる乾燥粉末
をｎ−ヘキサンで酸性シノ力ゲルを充填したカラムにか
１す、ｎ−ヘキサンで展開する。目的化合物を含む画分
を集め、減圧濃縮し、粗ＦＲ−９００５０６物質（１０
５４ｍｇ）を白色の粉末として得る。

この粗生成物１００ｍｇを高速液体クロマトグラフィに
付す、リクロソルブ（Ｌｉｃｈｒｏｓｏｒｂ　）　ＳＩ
　　６０（商品名、メルク社製）を担体とするカラム（
８φ×５００閣）を用いて溶出する。このクロマトグラ
フィは、Ｕｖ検出器で波長２３０ｎｍｉこてモニターし
、移動相は塩化メチレン−ジオキサンｍ液（ｓｓ　：１
５ｖ／ｖ）を流速５１１１Ｑ／分で用い、活性画分を集
め、蒸発濃縮する。この高速液体クロマドグ２ブイを、
ｆｆｌ　１’）　返Ｌ　テ、精製ＦＲ−９００５０６物
質１４ｍｇを白色の粉末として得る。

さらに、酢酸エチル（１，５リツトル）で溶出を続けて
行い、第二の目的化合物を含む両分を集め、減圧濃縮し
て、粗ＦＲ−９００５２５物質（３０１１１ｇ）を黄色
の油状物として得る。

犬農通１ 紋攬 グリセリン（１％）、コーンスターチ（１％）、グルコ
ース（０，５％）、綿実粉（１％）、コーンスタープリ
力−（０，５％）、乾燥酵母（０，５％）、炭酸カルシ
ウム（０，２％）を含有するｐＨ６，５の前培養培地（
１００ＩＲ）をｓｏｏｍのエルレンマイヤーフラスコに
入れ、１２０℃で３０分間滅菌する。

ストレプトミセス・ツクバエンシス１＆　９９９３の斜
面培養物の１白金耳を培地に接種し、３０”Ｃで４日間
＠養する。得られる培養物を、あらかじめ１２０℃で３
０分間滅菌した３０リツトルのジャーファーメンタ−中
の前培養培地（２０リツトル）に移す、培養物を３０°
Ｃで２日間インキュベートして、前培養物１６す／トル
を、あらかじめ１２０℃で３０分間滅菌した２トンタン
クに入れた可溶性でん粉（４，５％〉、コーンスタープ
リカー（１％）、乾燥酵母（１％）、炭酸カルシウム（
０，１％）、アデカノール（消泡剤、商品名、旭電化製
＞（０，１％）を含有するｐＨ６，８の醗酵培地（１６
００リツトル）に接種し、３０℃で４日間培養する。

見ａ旦圭グ星皇 このようにして得られる培養プロスを、ケイソウ±（２
５ｋｇ）を用いて濾過する。菌糸体の檎をアセトン（５
００リツトル）で抽出し、抽出液５００リツトルを得る
。このアセトン抽出液と濾液（１３５０リツトル）とを
合わせ、非イオン性吸！欄脂「ダイアイオンＨＩ”２０
」（商品名、三菱化成社製）（１００リツトル）のカラ
ムに通す、水（３００リツトル）および５０％水性アセ
トン（３００リツトル）で洗浄した後、７５％水性アセ
トンで溶出する。溶出液を減圧下に蒸発させ、残量を３
００リツトルとする。

これを酢酸エチル（２０リツトル）で３回抽出する。

酢酸エチル抽出液を減圧濃縮し、油性残留物を得る。こ
の油性残留物を二倍重量の酸性シリカゲル（特殊シリカ
ゲル、グレード１２、富士デビソン製〉と混合し、この
混合物を酢酸エチル中でスラリー化する。＃媒を蒸発さ
せ、得られる乾燥粉末を、ｎ−へキサンで上記と同じ酸
性シリカゲル（８リツトル）を充填したカラムクロマト
グラフィに付す、カラムをｎ−ヘキサン（３０リツトル
）、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル混液（４：　ｌｖ／ｖ、
　３０’Ｊツトル）、酢酸エチル（３０リツトル）で展
開する。

目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮して油性残招物
を得る。この油性残留物を二倍重量の酸性シリカゲルと
混合し、混合物を酢酸エチル中でスラリー化する。溶媒
の留去後、得られる粉末を、ｎ−ヘキサンで充填した酸
性シリカゲル（３，５リツトル）のカラムを用いるクロ
マトグラフィに再度付す、カラムをｎ−ヘキサン（１０
リツトル）、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル混液（４：　ｌ
ｖ／ｖ、　１０リツトル）、酢酸エチル（１０リツトル
）で展開する。目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮
して、黄色の油状物を得る。この油性残留物をｎ−ヘキ
サン−酢酸エチル混液（１：　１　ｖ／ｖ、　３００ｍ
１１　）に溶解し、同じ溶媒系で充填したシリカゲル（
２３０〜４００メツシユ、メルク社製）（２リツトル）
のカラムを用いるクロマトグラフィに付す、ｎ−ヘキサ
ン−酢酸エチル混液（１：　ｌｖ／ｖ、　１０リットル
；　１　：　２Ｖ／Ｖ、　６リツトル）および酢酸エチ
ル（６リツトル）で溶出する。

最初の目的化合物を含む両分を集め、減圧濃縮して、Ｆ
Ｒ−９００５０６物質を白色粉末（３４ｇ）として得る
。この白色粉末をアセトニトリルに溶解し、減圧濃縮す
る。濃縮液を５℃で一夜放置してプリズム状結晶（２ｚ
、７ｇ）を得る。同じ溶媒で再結晶して精製ＦＲ−９０
０５０６物質（１３，６ｇ）を無色プリズム状結晶とし
て得る。

さらに、第二の目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮
して、粗ＦＲ−９００５２５物質（３１４ｍｇ）を黄色
の粉末として得る。

見鼻男ユ 蚊遣 グリセリン（１％）、コーンスターチ（１％）、グルコ
ース（０，５％）、綿実粉（１％）、乾燥酵母（０，５
％）、コーンスターブリ力−（０，５％）、炭酸カルシ
ウム（０，２％）を含有する培地（１６０１Ｑ）（ｐＨ
６，５に調整）を各々５００−のエルリンマイヤーフラ
スコ１０個に入れ、１２０℃で３０分間滅菌する。

ストレプトミセス・ツタバエンシスＮｃ９９９３の斜面
＠焚物の１白金耳を各培地に接種し、回転振ａｍ上、３
０゛Ｃで４日間培養する。得られる培養物を、あらかし
め１２０℃で２０分間滅菌した２００すメトルのブヤー
フアーメンターに入れた可溶性でん粉（５％）、ピーナ
ツ粉（０，５％）、乾燥酵母（０，５％）、グルテンミ
ール（０，５％）、炭酸カルシウム（０，１％）、アデ
カノール（消泡剤、商品名、旭電化製）　（０，１％）
を含有する培地（１５０リツトル）に接種し、３０°Ｃ
で、通気（１５０りントル／分）、攪拌（２５０ｒｐｅ
ａ）下に４日間培養する。

見簾旦主ヱ慧皇 このようにして得られる培養ブロスをケイソウ±（５ｋ
ｇ）を用いて濾過する。菌糸体の塊をアセトン（５０リ
ツトル）で抽出し、抽出液５０す・７トルを得る。菌糸
体より得られるアセトン抽出液と濾ｆｉ　（１３５リツ
トル）とを合わせ、非イオン性吸看樹脂１ダイアイオン
ＨＰ−２０Ｊ　（商品名、三菱化成社製）（１０リツト
ル）にカラムを通す、水（３０リンドル）および５０％
水性アセトン（３０す・７トル）で洗浄し、７５％水性
アセトンで溶出する。溶出液（３０すメトル）を減圧下
に蒸発ａ縮し、残量を２ノツトルし、酢酸エチル（２リ
ツトル）で３回抽出する。酢酸エチル抽出液を減圧濃縮
し、油性残留物を得る。この油性残留物を二倍重量の酸
性シリカゲル（特殊シリカゲル、グレード１２、富士デ
ビソン製）と混合し、混合物を酢酸エチル中でスラリー
化する。溶媒を留去し、得られる乾燥粉末を、ｎ−ヘキ
サンで上記と同じ酸性シリカゲル（８００ｍ１１　）を
充填したカラムを用いるクロマトグラフィにイ寸す、カ
ラムをｎ−ヘキサン（３す・メトル〉、ｎ−ヘキサン−
酢酸エチル混液（４：ＩＶ／Ｖ、３リツトル）、酢酸エ
チル（３リツトル）で展開する。目的化合物を含む画分
を集め、減圧濃縮して、油性残留物を得る。この油性残
留物をｎ−ヘキサン−酢酸エテル混液（１：１ｖ／ｖ、
３０−）に溶解し、同し溶媒系で充填したシリカゲル（
２３０〜４００メツンユ、メルク社製＞　（５００ｍＪ
）　）のカラムを用いるクロマトグラフィに付す、ｎ−
ヘキサン−酢酸エチル混液（１：　ｌｖ／ｖ、　２りン
トル；ｌ：　２ｖ／ｖ、１．５リツトル）および酢酸エ
チル（１，５ノツトル）で溶出する。

最初の目的化合物を含む両分を集め、減圧濃縮して、粗
ＦＲ−９００５０６物質（３ｇ）を黄色の粉末として得
る。

さらに、第二の目的化合物を含む両分を集め、減圧濃縮
して、油性残り物を得る。この油性残留物をシリカゲル
クロマトグラフィに再度付し、黄色の油状物を得る。こ
の油性残留物を゛二倍重量の酸性シリカゲルと混合し、
混合物を酢酸エチル中でスラリー化する。溶媒を留去し
て、得られる乾燥粉末を、ｎ−ヘキサンで酸性シリカゲ
ル（１００ＩＩＩＱ）を充填したカラムを用いるクロマ
トグラフィに付し、ｎ−ヘキサンで展開する。目的化合
物を含ｔＪＦｊｉＭ分ヲ集ａｈ、　Ｍ圧ｆｉ、ｌｆｆ１
１．テ、ＦＲ−９００５２５物１１ｉｉｊを淡黄色の粉
末（３８０ｍｇ　）として得る。この粉末をｎ−ヘキサ
ン−酢酸エチル１ｌｌｌｌ！液（１：　２ｖ／ｖ、５ｍ
１）に溶解し、同じ溶媒系で充填し洗浄した酸性シリカ
ゲル（特殊シリカゲル、グレード９２２、富士デビンン
製）　（ｌｏｏｍＱ　）のカラムを用いるクロマトグラ
フィに付す、酢酸エチルで溶出する。活性画分を集め、
減圧下に蒸発させて、精製したｎ−９００５２５物質（
２３０ｍｇ　）を白色粉末として得る。

以下に示す平板希釈法によって、ストレプトミセス・バ
イグロスコピカス・サブスブ・ヤクシマエンシス賜７２
３８を分離する。

鹿児島県屋久島で採取した土壌約１グラムを無菌試驕管
に入れ、滅菌水を加えて容量を５ｍＱとする。混合物を
チューブブザーで１０秒間混合し、１０分間放置する。

上澄液を滅菌水で順次１００倍希釈する。希釈液（０，
１ｍｌ　）を塩酸チアミン添加スザぺ・／り寒天（サッ
カロース３０ｇ、硝酸ナトリウム３ｇ、リン酸二カリウ
ム１ｇ１硫酸マグネシウム０．５ｇ、塩化力’Ｊ’＞Ａ
ｏ、５ｇ、硫酸第一鉄０．０１　ｇ　。

塩酸チアミン０．１ｇ、寒天２０ｇ、水道水１０００ａ
ｌｌ　。

ｐＨ７，２）を含有するベトリ皿上に広げる。　３０″
Ｃで２１日間インキユベートシ、プレート上に生育させ
たコロニーを斜面培地［酵母−麦芽エキス寒天（Ｉ５Ｐ
−培地２）］に移し、３０°ＣでＩＯ日間培養する。

分離したコロニーの中に、ストレプトミセス・バイグロ
スコピカス・サブスプ・ヤクシマエンシスＮｏ　７２３
８を見い出した。

緻薯 グリセリン（１％）、可溶性でん粉（１％）、グルコー
ス（０，５％）、綿実粉（０，５％）、乾燥酵ｆＪ（０
，５％）、コーンスチープリヵー（０，５％）、炭酸カ
ルシウム（０，２％）を含有する培地（１６０ｆｆｌｌ
ｌ＞（ｐＨ６，５ニ調！１）を、各々５０ｏｌＱノ工ル
レンマイヤーフラスコ２０個に入れ、１２０”ｃで３０
分間滅菌する。

ストレプトミセス・バイグロスコピカス・サプスプ・ヤ
クシマエンシスＮｎ７２３８（寄託番号：微工研条寄第
９２８号〉の斜面培養物の１白金耳を各培地に接種し、
回転振盪機上、３０″Ｃで４日間培養する。

得られる培養物を、グルコース（４，５％）、コーンス
チーブリ力−（１％）、乾燥酵母（１％）、グルテンミ
ール（１％）、麦芽（０，５％）、炭酸カルシウム（０
，１％）、アデカノール（消泡剤、商品名、旭電化製）
（０，１％）を含有する、あらかじめ１２０℃で２０分
間滅菌した２００リツトルのジャーファーメンタ−中の
培地（１５０リツトル）に接種し、３０℃、通気（１５
０リットル／分）、攪拌（２５０ｒｐｎ＋　）下に４日
間培養する。

見腹並孟旦星皇 このようにして得られる培養ブロスを、ケインウ土（５
ｋｇ）を用いて濾過する。菌糸体の塊をアセトン（５０
リツトル）で抽出し、抽出液５０リツトルを得る。菌糸
体より得られるアセトン抽出液と濾液（１３５リツトル
）とを合わせ、非イオン性吸：Ｗ樹脂１ダイアイオンＨ
Ｐ−２０Ｊ　（商品名、三菱化成社製）（１０リツトル
）のカラムに通す、水（３０ノツトル）および水性アセ
トン（３０リツトル）でｆｃ浄した後、アセトンで溶出
する。溶出液を減圧下に蒸発濃縮し残量を２リツトルと
し、これを酢酸エチル（４リツトル）で抽出する。酢酸
エチル抽出液を威圧濃縮し、油性残留物を得る。この油
性残留物を二倍重量の酸性シリカゲル（特殊シリカゲル
グレード１２、富士デビンン製）と渭合し、この混合物
を酢酸エチル中でスラリー化する。溶媒を留去した後、
得られる乾燥粉末をｎ−ヘキサンで充填した同じ酸性シ
リカゲル（ｓｏｏｍｕ　）のカラムを用いるクロマトグ
ラフィに付す、カラムをｎ−ヘキサン（３リツトル）、
ｎ−ヘキサン−酢酸エチル混液（４：　ｌｖ／ｖ、　３
リツトル）、酢酸エチル（３リツトル）で展開する。　
ＦＲ−９００５２０およびＦＲ−９００５２３物質を含
む画分を集め、減圧濃縮して油性残留物を得る。この油
性残留物をｎ−ヘキサン−酢酸エチル混液（１：　１　
ｖ／ｖ、　５０１１１　）に溶解し、同じ溶媒系で充填
したシリカゲル（７０〜２３０メツシユ、メルク社製）
（１０１００Ｏ）のカラムを用いるクロマトグラフィに
付す、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル混液（１：　ｌｖ／ｖ
、　３リットル；１：２ｖ／ｖ、３リツトル）および酢
酸エチル（３す／トル）で溶出する。目的化合物を含む
画分を集め、減圧濃縮して、黄色の粉末（ａ、５ｇ）を
得る。

この粉末をメタノール（２０ｍＱ）に溶解し、水（１０
ｍＱ　）と混合する。＃１合物をメタノール−水混液（
４：　ｌｖ／ｖ）で充填し、これで展開する逆相シリカ
ゲル’ＹＭＣ」（６０〜２００メツシユ）　（ｓｏｏｍ
ｎ　）（商品名、山村化学研究新製）のカラムを用いる
クロマトグラフィに付す。

ＦＲ−９００５２０物質を含む両分を集め、減圧濃縮し
て、ＦＲ−９００５２０物質の粗生成物（１，８ｇ）を
淡黄色の粉末として得る。この粉末を少量のジエチルエ
ーテルに溶解する。−夜装置した後、沈澱する結晶を濾
取し、ジエチルエーテルで洗浄し、減圧乾燥する。ジエ
チルエーテルで再結晶して、精製ＦＲ−９００５２０物
質６００ｍｇを無色の板状晶として得る。

同じ溶媒系を用いる逆相シリカゲルクロマトグラフィを
続けて行い、ＦＲ−９００５２３物質を含む次の両分を
集め、減圧濃縮して、ＦＲ−９００５２３物質の粗生成
物（０，５１ｇ）を淡黄色の粉末として得る。この粗生
成物をアセトニトリル（３１Ｑ）に溶解し、アセトニト
リル−テトラヒドロフラン−５０ｍＭリン酸緩衝液混液
（ｐＨ２，０）（３：　２　：　５ｖ／ｖ）で充填し、
これで展開する逆相シリカゲル’　ＹＭＣＪ　（７０ａ
ｌｌ　）を用いるクロマトグラフィに付す、目的化合物
を含む両分を酢酸エチルで抽出する。この抽出液を減圧
濃縮して、黄白色の粉末（１９ｈ＋ｇ）を得る。

この黄白色の粉末を逆相シリカゲル’　ＹＭＣＪ上で再
びクロマトグラフィに付し、白色粉末（８０ｍｇ）を得
る。この白色粉末を少量のジエチルエーテルに溶解し、
室温で一夜放置して結晶５６■を得る。

ジエチルエーテルで再結晶して、ＦＲ−９００５２３０
１の無色の針状晶３４ｍｇを得る。

大鼻堡互 ＦＲ−９００５０６物質（ｔｏ、４ｍｇ）のジクロロメ
タン（０，２８１１１）中温液にピリジン（０，１１１
１１）および無水酢＠　（０，０５ｍ　）を室温で加え
、混合物を５時間攪拌する。溶媒を減圧下に除去する。

残留物をシリカゲル薄層クロマトグラフィ（Ｒ開溶媒：
ジエデルエーテルージクロロメタン、　１　：　２Ｖ／
Ｖ）に付して、１２−［２−（４−ア七トキシー３−メ
トキンシクロヘキシル）−１−メチルビニル］−１７−
アリルー１．１４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメト
キ／−１３，１９，２１，２７−テトラメテルー１１．
２８−ジオキナ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，
０４，９］才クタコス−１８−エン−２，３，１０，１
６−テトラオン（６，０帖）を得る。

ＩＲν（Ｃ１（Ｃ１３）　’　３５２０．１７２８．１
７０５（ｓｈ）、　１６４０゜１０９５　ａｍ−１ 麦農逍Ｉ ＦＲ−９００５０６物質（５２，５ｍｇ　）のジクロロ
メタン（１−）中温液に、ピリジン（０，５１１１１１
）および無水酢酸（０，３１Ｑ）を室温で加え、混合物
を室温で９時間攪拌する。溶媒を減圧下に除去する。残
漬をシリカゲル薄層クロマトグラフィ（展開溶媒：ジエ
デルエーテルーヘキサン、　３　：　１　ｖ／ｖ）　ニ
付して、１４−アセトキシ−１２−［２−（４−アセト
キシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチルビニ
ル］−１７−アリルー１−ヒドロキシ−２３，２５−ジ
メトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメテルー１
１゜２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３、
１。

０４゛９］才クタコス−１８−エン−２，３，１０，１
６−テトラオン（４８，０ｍｇ　）および１２−［２−
（４−アセトキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１
−メチルビニル］−１７−アリルーｌ−ヒドロキシ−２
３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テト
ラメテルー１１．２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ
［２２゜３、ｔ、ｏ”１オクタフサ−１４，１８−ジエ
ン−２゜３、ｔｏ、１６−テトラオン（５，４ｍｇ）を
得る。

前記化合物 １ １ＲＩ／　（Ｃ）ＩｃＩ３）：　　１７３０．１７２０
（ｓｈ）、１６４０　ｃｍ後記化合物 Ｉ ＩＲν（ｃｏ　ｃ　１３）　　二　１７３０．　１６９
０．　１６４０．　１６２７　　ｃｔａ（以下余白） 衷」１１ヱ ＦＲ−９００５０６物質（９，７１１４！　）のジクｏ
ｏメタン（０，２１１１）およびピリジン（０，１１１
１１）中溶液に、塩化ベンゾイル（５０４）を室温で加
え、混合物を室温で２時間攪拌する。溶媒を減圧下に除
去し、粗油状物を得る。この油状物をシリカゲル薄層ク
ロマトグラフィ（展開溶媒：ジエデルエーテルーヘキサ
ン、２：１ｖ／ｖ）で精製して、１７−アリル−１２−
［２−（４−ベンゾイルオキシ−３−メトキシシクロヘ
キシル）−１−メチルビニムコ−１，１４−ジヒドロキ
シ−２３，２５−ジメトキシ−１３゜１９．２１．２７
−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリ
シクロ［２２，３、１、０４，９］オクタフスー１８−
エンー２　、３．１０．１６−テトラオン（８，０−ｇ
）を得る。

ＩＲＶ　（ＣＨＣｌ３）　’　３５００．１７３５（ｓ
ｈ）、１７１０．１６４０゜１６００　　ａｍ−１ 叉」０生互 ＦＲ−９００５０６物質（３０，５ｍｇ　）のピリジン
（１−）中溶液に、塩化ｐ−ニトロベンゾイル（約１０
１００ＩＩＩを加え、混合物を室温で２時間攪拌する０
反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリ
ウム水溶液、水、ＩＮ塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウ
ム水溶液、水、塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、乾
燥する。得られる溶液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲル
カラムクロマトグラフィで精製して、１７−アリル−１
，１４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３
，１９，２１，２７−テトラメチルーｔ２−［２−［４
−（ｐ−ニトロベンゾイルオキン）−３−メトキシシク
ロへキシル］−１−メチルビニル］−１１，２８−ジオ
キサ−４−アザトリシクロ［２２，３、１、０４，９］
オクタフスー１８−エンー２．３，１０．１６−テトラ
オン（３７，７ｍｇ　）を得る。

１ＲしくＣＨＣｌ３）　：　１７２０．１６４０．１６
１０゜１５３０−１５２０　ｃｍ−’ 東」Ｕ１主 実施例８の方法に準じて、ＦＲ−９００５０６物質（３
０，６ｍｇ　）と塩化３．５−ジニトロベンゾイル（３
３ｍｇ）とをピリジン（０，５１１１１）中で反応させ
ることによって、１７−アリル−１，１４−ジヒドロキ
シ−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７
−テトラメチル−１２−［２−［４−（３，５−ジニト
ロベンゾイルオキジ）−３−メトキシシクロへキシル］
−１−メチルビニル］−１１゜２８−ジオキサ−４−ア
ザトリシクロ［２２，３，１，０４，９］才クタフス−
１８−エン−２、３，１０，１６−テトラオン（３６，
０員ｇ）を得る。

ＩＲしくＣＨＣｌ３）　：　１７３０．１６４Ｇ、　１
６１０゜１５３Ｇ−１５２０ｃｔａ−’ 叉履班刊 実施例８の方法に準じて、ピリジン（０，５ｍｌ　）中
でＦＲ−９００５０６物質（４８ｍｇ）を塩化２−Ｒ−
メンデルオキシアセチル（０，０８ｍ　）と反応させる
ことによって、　１７−アリル−１，１４−ジヒドロキ
シ−２３、２５−ジメトキシ−１ｚ−［ｚ−［４−１−
１−メンチルオキシアセトキシ）−３−メトキシシクロ
ヘキシル］−１−メチルビニル］　−１３，１９，２１
゜２７−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−ア
ザトリシクロ［２２，３，１，０”９］才クタコス−１
８−エン−２，３，１０，１６−テトラオン（５０，９
ｍｇ　）を得ＩＲし　（ニート）　　：　　３５２０．
　１７６０．　１７４０（ｓｈ）。

１７２０（ｓｈ）、　１６５２　ａｍ−１束１己生■ （−）−２−トリフルオロメチル−２−メトキシ−２−
フェニル酢酸（５１ｍｇ）の酢酸エチル（１０ＩＩＩＱ
）中温液に、室温で、Ｎ、　Ｎ’　−ジシクロへキシル
カルボジイミド（４７ｍｇ）を加える。室温で１．５時
間攪拌した後、ＦＲ−９００５０６物質（２５，０＋ｏ
ｇ　）および４−（Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン
（ｆｌｍｇ）を加え、室温で３．５時間攪拌する。得ら
れる溶液をａ縮して残渣を得、これをジエチルエーテル
に取り、次いで、塩酸、炭酸水素ナトリウム水溶液、塩
化ナトリウム水溶液で順次洗浄する。有機層を硫酸ナト
リウムで乾燥し、濃縮して残虐を得、これをシリカゲル
クロマトグラフィ（展開溶媒ニジクロロメタン−ジエチ
ルエーテル、１０：１ｖ／Ｖ）に付して、１７−アリル
−１２−［２−［４−［（−）−２−トリフルオロメゾ
ルー２−メトキシ−２−フェニルアセトキシ］−３−メ
トキシシク口へキシル］−１−メチルビニル］−１，１
４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３，１
９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ
−４−アザトリシクロ［２２，ｓ　、　１　、０　’°
９］オクタフスー１８−エンー２．３，１０．１６−テ
トラオン（６，５ｍｇ）および１７−アリル−１４−［
（−）−ｚ−トリフルオロメチル−２−メトキシ−２−
フェニルア吐トキシ］−１２−［２−［４−［（−）−
２−トノフルオロメチル−２−メトキシ−２−フェニル
アヒトキシ］−３−メトキシシクロへキシル］−１−メ
デルビニルコー１−ヒドロキシ−２３，２５−ジメトキ
シ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−１１゜２
８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３、１０４
°９コ才クタフス−１８−エン−２，３，１０，１６−
テトラオン（２０，２ｍｇ　）を得る。

旌星皇塗薯 ＩＲＶ　（ニー））　　：　　３５１０．　１７５０．
　１７３０（ｓｈ）、　　１７１０゜１６５２、１５０
０　ｃｔａ−’ 盪１□し色物 ＩＲｖ　　（ニー））　　：　　１７５０．　　１７２
０．　　１６５２．　　１５００　　ａｍ−’束１己４
婬 ＦＲ−９００５０６物質（２４８ｍｇ　）のピリジン（
７Ｉｌ１１１）中温液を攪拌しながら、これに無水コハ
ク酸（１４５ｍｇ）および４−（Ｎ、Ｎ−ジメチルアミ
ノ）ピリジン（７ｍｇ）を加え、得られる混合物を室温
で１８時間攪拌する０反応混合物を減圧濃縮し、残渣を
酢酸エチルを用いるシリカゲル（２０ｇ）のクロマトグ
ラフィに付し、１７−アリル−ｒｚ−［２−［４−（３
−カルボキシプロピオニルオキシ）−３−メトキシシク
ロへキシル］−１−メチルビニル］−１，１４−ジヒド
ロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３゜１９．２１．
２７−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−７ザ
トリシクロ［２２，３，１，０４，９］オクタコス−１
８−エン−２、３，１０，１６−テトラオン（９０ｍｇ
　）を得る。

ＩＲν（ＣＯＣｌ２）　：　３５０Ｇ、　３１００−２
３００．１７２０゜１７０５（ｓｈ）、　１６３５　ｃ
ｍ−’宜遣Ｕ艷す ＦＲ−９００５０６物質（１００，７ｍｇ　）のピリジ
ン（３絨）中温液に、塩化ｐ−ヨードベンゼンスルホニ
ル（５００ｍｇ　）を加え、混合物を室温で３６時間攪
拌する。溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナト
リウム水溶液、水、塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。

有機層をｍｓｓｈリウムで乾燥し、ｄＪし、減圧濃縮す
る。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（展開溶媒ニジ
エチルエーテル−ヘキサン、３　：　ｌｖ／ｖ）に付し
、１７−アリル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２
−［４−（ｐ−ヨードベンゼンスルホニルオキシ）−３
−メトキシシクロへキシル］−１−メチルビニル］−２
３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テト
ラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ
［２２，３、１、０４，９］オクタコスー１８−エンー
２．３．１０．１６−テトラオン（６１ｍｇ）および１
７−アリル−１−ヒトａキシ−１２−［２−［４−（ｐ
−ヨードベンゼンスルホニルオキシ）−３−メトキシシ
クロヘキシル］−１−メチルビニル］−２３，２５−ジ
メトキシ−１３，１９，２１゜２７−テトラメチル−１
１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３、
１、Ｏ’°９］オクタフサ−１４゜１８−ジエン−２，
３，１０，１６−テトラオン（１２ｍｇ）を得る。

剪羞□Ｌ色物 ＩＲν（ＣＯＣｌ２）　：　３４７０．１７３０．１７
１７．１６９２．１６３５、１５６８　ａｍ’ ７．６０　（２Ｈ，ｍ）、　７．９０　（２Ｈ，ｍ）大
１己生ｌ 実施例１３の方法に準じて、ピリジン（０，６ｆｆｌＱ
　）中でＦＲ−９００５０６物質（２７ｍｇ）を塩化ｄ
−カンファースルホニル（９７ｍｇ）と反応させること
によって、１７−アリル−１２−［２−（４−ｄ−カン
ファースルホニルオキシ−３−メトキシシクロヘキシル
）＝１・−メチルビニル］−１，１４−ジヒドロキシ−
２３゜２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テ
トラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシク
ロ［２２，３，１゜０４゛９］才クタコス−１８−エン
−２，３，１０，１６−テトラオン（３４ａ＋ｇ　）を
得る。

ＩＲし　（ニー））　　：　　３５００．　１７４７．
　１７２０（ｓｈ）。

１７１０（ｓｈ）、　１６５５　ｃｍ’叉１ｄ生り ＦＲ−９００５０６物質（８９，７１１１ｇ）のジクロ
ロメタン（３ｍ０中溶液を攪拌しながら、これにイミダ
ゾール（１１８＋ａｇ）および塩化ｔ−ブチル−ジフェ
ニルシリル（５２，２ｍｇ　）を加える。混合物を室温
で２時間攪拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液で希釈し
、ノエチルエーテルで３回抽出する。抽出液を水および
塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥
し、減圧乾燥する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィ（Ｒ開溶媒：酢酸エテル−ヘキサン、１　：　３
ｖ／ｖ）で精製し、１７−アリル−１２−［２−（４−
ｔ−ブチル−ジフェニルシリルオキシ−３−メトキシシ
クロヘキシル）−１−メチルビニル］　−１，１４−ジ
ヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２
１，２７−テトラメチル−１１．２８−ジオキサ−４−
アザトリシクロ［２２，３。

１．０４°９］才クタコス−１８−エン−２，３，ＩＯ
，Ｌ６−テトラオン（１０７ｍｇ）を得る。

ＩＲし　（ニー））　　：　　３５２０．　１７４２．
　１７０５．　１６５０　　ｃｍ−’笈凰盟刊 実施例１５の方法に準じて、イミダゾール（１５ｍｇ）
の存在下に、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＱ）
中で、ＦＲ−９００５０６物質（８０ｍｇ）を塩化ｔ−
ブチループメチルシリル（１７ｍｇ）と反応させること
によって、１７−アリル−Ｌ２−［２−（４−ｔ−ブナ
ルーブメチルンリルオキシー３−メトキシシクロへキシ
ル）−１−メチルビニル］−１，１４−ジヒドロキシ−
２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−ア
トラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリ〉ク
ロ［２２，３，１，０４，９］才クタコス−１８−エン
２　、３．１０．１６−テトラオン（８５ｍｇ）を得る
。

ＩＲν（ＣＨＣＬ３）　’　１７３５−１７２０（ｓｈ
）、　ｔ７ｏｏ。

１６４０　ｃａｅ−１ 犬及斑Ｅ ＦＲ−９００５０６物質（１００ｍｇ）のジメチルスル
ホキシド（１，５＋ａｌｌ　）中溶液に、無水酢酸（１
５ｍ＋１）を加え、混合物を室温で１４時間撹拌する０
反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリ
ウム水溶液、水、塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄する
。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、減圧濃縮す
る。残渣をシリカゲルの薄層クロマトグラフィ（展開溶
媒ニジエチルエーテル）に付し、１７−アリル−１，１
４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジフトキン−１３，１
９，２１，２フ−テトラメチル−１２−［２−（４−メ
チルチオメトキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１
−メチルビニル］−１１，２８−ジオキサ−４−アザト
リシクロ［２２，３，１，０４，９］オクタフサ−１４
，１８−ジエン−２，３，１０，１６−テトラオン（５
１ｍｇ）、１７−アリル−１−ヒドロキシ−１２−［２
−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−
１−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，
１９，２１，２７−テトラメチルーＩＬ、２８−ジオキ
サ−４−アザトリシクロ［２２，３、１。

０４°９］オクタコサ−１４，１８−ジエン−２，３，
１０，１６−テトラオン（１８ｍｇ）および１７−アリ
ル−１，１４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ
−１３，１９，２１゜２７−テトラメチル−１２−［２
−（４−メチルチ才メトキシ−３−メトキシシクロヘキ
シル）−１−メチルピニル］−１１，２８−ジオキサ−
４−アザトリシクロ［２２，３、１、０４，９］オクタ
コスー１８−エンー２　、３．１０．１６−テトラオン
（ｌｏｎｇ）を得る。

二ｌ旦虫丈皇逍 ＩＲν（ＣＯＣｌ２）　’　３４７０．１７３０．１６
３５．１６３０（ｓｈ）。

１５８０（ｓｈ）　ｃａｂ−ｌ 二１」し遥に亀豊 ＩＲＶ　（ＣＯＣｌ３）　：　１７２８．１６４０．１
０９０　ｃｒｍ−’旦１」じ賢虹企豊 ＩＲν（Ｃ）ＩＣｌ３）　’　３４ｇ０．１７３５，１
７１０，１６４０　ａｍ−’束１４艷」 １７−アリル−１２−［２−（４−ｔ−ブチル−ジメチ
ルシリルオキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１−
メチルビニル］−１，１４−ジヒドロキシ−２３，２５
−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル
−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２゜
３．１．０４，９コ才クタコス−１８−エン−２、３，
１Ｇ。

１６−テトラオン（３９，９ｓｔｇ　）のピリジン（１
，５１１１）中溶液に無水酢酸（０，５１１１１）を加
え、混合物を室温で６時間攪拌する。＃媒を減圧下に除
去して粗油状物を得、これをシリカゲル薄層クロマトグ
ラフィ（ｊｌ開溶ｆｆｌ　ニジエチルエーテル−ヘキサ
ン、１　：　ｌｖ／ｖ）に付し、１４−アセトキシ−１
７−アリル−１２−［２−（４−ｔ−ブチル−ジメチル
シリルオキシ−３−メトキシンクロヘキシル）−１−メ
チルビニル］−１−ヒドロキシー２３．２５−ジメトキ
シ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２
８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０
”９コ才クタコス−１８−エン−２，３，１０，１６−
テトラオン（２６，５ｍｇ　）を得る。

ＩＲしくＣ）ＩＣｌ３）　：　１７２８．１７１５（’
ｓｈ）、　１６３５　ｃｍ−１叉ｍ 実施例１８の方法に準じて、ピリジン（０，２１１Ｍ　
）中で１７−アリル−１２−［２−（４−ｔ−ブチル−
ジフェニルシリルオキシ−３−メトキシシクロヘキシル
）−１〜メチルビニル］−１，１４−ジヒドロキシ−２
３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テト
ラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ
［２２，３，１，０”９］才クタフスー１Ｂ−エン−２
゜３　、１０．１６−テトラオン（１０，６−ｇ）を無
水酢酸（０，１ｅｍｇ）と反応させることによって、１
４−アセトキシ−１７−アリル−１２−［２−（４−ｔ
−ブチル−ジフェニルシリルオキシ−３−メトキシシク
ロヘキシル）−１−メチルビニル］−１−ヒドロキシー
２３．２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テ
トラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシク
ロ［２２，３，１，０４，９コ才クタフス−１８−エン
−２゜３．１０．１６−テトラオン（１０■）を得る。

ＩＲν（ＣＯＣｌ２）　’　３５００．１７３０，１７
２０（ｓｈ）。

１６６０（ｓｈ）、　１６４０．１６２０（ｓｈ）。

１１００　ｃｒｍ−’ 東上ｄ４象 １４−アセトキシ−１７−アリル−１２−［２−（４−
１−ブチル−ジフェニルシリルオキシ−３−メトキシシ
クロヘキシル）−１−メチルビニル］−１−ヒドロキシ
ー２３．２５−ジメトキシ−１３，１９，２１゜２７−
テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシ
クロ［２２，３、１、０４，９コオクタフスー１８−エ
ンー２　、３．１０．１６−テトラオン（４３，８ｍｇ
　）のテトテヒドロフラン（１，５１１１１）中溶液に
、炭酸カリウム（約１００ｍｇ）を室温で加え、混合物
を同温で３時間撹拌する０反応混合物をジエチルエーテ
ルで希釈し、得られる溶液を飽和塩化アンモニウム水溶
液、水、塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、硫酸ナト
リウムで乾燥する。得られる溶液を減圧濃縮し、残渣を
シリカゲル薄層クロマトグラフィ（展開溶媒ニジエチル
エーテル−ヘキサン、３：２　ｖ／ｖ　）で精製して、
１７−アリル−Ｌ２−　［２−（４−ｔ−ブチル−ジフ
ェニルシリルオキシ−３−メトキシンクロヘキシル）−
１−メチルビニル］−１−ヒドロキシー２３．２５−ジ
メトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−１
１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，
１，０４，９コオクタコサ−１４、１８−ジエン−２、
３，１０，１６−テトラオン（３０ｍｇ）を得る。

ＩＲＬ’　　（Ｃ）ＩＣ１３）　　　’　　　１７３３
．　１７２０（ｓｈ）、　　　１６８５゜１６４０（ｓ
ｈ）、　１６２０　ｃｍ−″１衷簾思旦 ＦＲ−９００５０６物質（５０ｍｇ）の酢酸エチル（−
２ｍｌｌ）中溶液を、１０％パラジウム−炭素（１０ｍ
ｇ）を用いて、大気圧下、室温で、２０分間接触還元す
る６反応層合物を濾過し、濾液を蒸発乾固し、薄層クロ
マトグラフィで精製する。クロロホルム−アセトン混液
（５：　Ｌｖ／ｖ）で展開して、１，１４−ジヒドロキ
シ−１２−［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキンシク
ロへキシル）−１−メチルビニルツー２３．２５−ジメ
トキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−１フ
ーブロビルー１１．２８−ジオキサ−４−アセトン混液
［２２，３，１，０”９：］］オクタスス−１８−エン
−２、３，１０，１６−テトラオン（５０，０ｍｇ　）
を得る。

ＬＲν（ＣＨＣＩ３）　’　３４８０．１７３５（ｓｈ
）、　１７１７，１７００゜１６５０（ｓｈ）、　１６
２５　ａｍ’犬過ｄ生坐 実施例１と同様の醗酵法により得られたＦＲ−９００５
０６物質の粗目色粉末（１ｇ）をアセトニトリル（５鍼
）に溶かし、島津ＬＣ４Ａ　（商標、島津製作所社製）
の高速液体クロマトグラフィーに付す。

ＹＭＣ−５３４３（ＯＤＳ　）　（商標、島久薬品株式
会社製）を充填したスチールカラム（内径２５１１１１
１．　ｉさ２５０ｍ）を用い、１２ｍＱ／分の流速で溶
出する。移動相は２８％アセトニトリル水溶液、１０％
ｎ−ブタノール、０．０７５％燐酸、３．７５ｍＭドデ
シル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）の混液を用い、υＶで２
１０ｎｍにて検出する。１回につき１ｏｏＩｄｌのサン
プルを注入し、この高速成体クロマトグラフィーを５０
回繰り返し、すべての量のサンプルをクロマトグラフィ
ーに付す、８５分〜９０分の保持時間で溶出される画分
を集め、等容量の酢酸エチル（３，６１１で抽出する。

酢酸エチル層を分取し、１％炭酸水素ナトリウム（２ｊ
りで洗浄した後減圧で少量まで濃縮する。

析出するＳＤＳを濾去し、得られる粗粉末を１００ｍｇ
／−の濃度になるようにアセトニトリルに溶かし、さら
に高速液体クロマトグラフィーに付す、移動相として１
２．５％アセトニトリル水溶液、９．７５％ｎ−ブタノ
ール、０．０７５％燐酸、３．７５ａ＋Ｍ　ＳＤＳを用
いる。カラムはｔｏａｍ／分の流速で溶出する。１３１
分〜１４３分の保持時間で溶出される画分を集め、等容
量の酢酸エチルで抽出する。抽出液を１％炭酸水素ナト
リウム水溶液で洗浄し、減圧下で少量まで濃縮する。ｆ
Ｉ！縮の際析出する５ＤＳを濾去する。

得られる粗粉末を少量の酢酸エチルに溶解し、シリカゲ
ル（に１ａｓｅｌ　ｇｅｌ、２３０−４００メ・ｙシュ
）（メルク社製）を用いたカラムクロマトグラフィーに
付す、カラムをｎ−ヘキサンと酢酸エチルノ混液（３０
ｍ１１）　（１：　ｌｖ／ｖ）、次いでｎ−′＼キサン
と酢酸エチルの混液（６０１１１１１）　（１：　２Ｖ
／Ｖ　）で洗浄する。さらにカラムを酢酸エチルで溶出
し、各両分を３＋ＩＩＩ！づつ集める。１ｇ−２４の両
分を合し、減圧下で濃縮すると、ＦＲ−９００５２０物
質（２４ｍｇ）を得る。

【図面の簡単な説明】

図１はＦＲ−９００５０６物質の白色粉末の１３ｃ核磁
気共鳴スペクトルを表わす。 図２はＦＲ−９００５０６物質の白色粉末の１Ｈ核磁気
共鳴スペクトルを表わす。 １！１３はＦＲ−９００５０６物質の無色のプリズム状
結晶の１３Ｃ核磁気共鳴スペクトルを表わす。 図４はＦＲ−９００５０６物質の無色のプリズム状結晶
の１Ｈ核磁気共鳴スペクトルを表わす。 図５はＦＲ−９００５２５物質の１３Ｃ核磁気共鳴スペ
クトルを表わす。 図６はＦＲ−９００５２５物質の１Ｈ核磁気共鳴スペク
トルを表わす。 図７はＦＲ−９００５２０物質の１３ＣＰＡ磁気共鳴ス
ペクトルを表わす。 図８はＦＲ−９００５２０物質の１Ｈ核磁気共鳴スペク
トルを表わす。 図９はＦＲ−９００５２３物質の１３０核磁気共鳴スペ
クトルを表わす。 図１ＯはＦＲ−９００５２３物質の１Ｈ核磁気共鳴スペ
クトルを表わす。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＾１はヒドロキシ基または保護されたヒドロ
   キシ基、Ｒ＾２は水素、ヒドロキシ基または保護された
   ヒドロキシ基、Ｒ＾３はメチル基、エチル基、プロピル
   基またはアリル基、ｎは１または２の整数、実線と点線
   により表わされる記号は単結合または二重結合を意味す
   る） で示される化合物またはその医薬として許容される塩。 ２）下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１はヒドロキシ基または保護されたヒドロ
   キシ基、Ｒ＾２はヒドロキシ基または保護されたヒドロ
   キシ基、Ｒ＾３はメチル基、エチル基、プロピル基また
   はアリル基を意味する） で表わされる特許請求の範囲第１）項記載の化合物。 ３）Ｒ＾３がアリル基である特許請求の範囲第２）項記
   載の化合物。 ４）Ｒ＾１がヒドロキシ基、１−（低級アルキルチオ）
   （低級）アルコキシ基、トリ置換シリルオキシ基または
   アシルオキシ基である特許請求の範囲第３）項記載の化
   合物。 ５）Ｒ＾１がヒドロキシ基、低級アルキルチオメトキシ
   基、トリ（低級）アルキルシリルオキシ基、低級アルキ
   ル−ジアリールシリルオキシ基、カルボキシを有してい
   てもよい低級アルカノイルオキシ基、シクロアルキル部
   分に低級アルキルを２個有していてもよいシクロ（低級
   ）アルコキシ（低級）アルカノイルオキシ基、カンファ
   ースルホニルオキシ基、１個もしくは２個のニトロを有
   していてもよいアロイルオキシ基、ハロゲンを有してい
   てもよいアレーンスルホニルオキシ基、または低級アル
   コキシおよびトリハロ（低級）アルキルを有していても
   よいアル（低級）アルカノイルオキシ基、Ｒ＾２がヒド
   ロキシ基または低級アルカノイルオキシ基である特許請
   求の範囲第４）項記載の化合物。 ６）１７−アリル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［
   ２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）
   −１−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３
   ，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオ
   キサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０＾４＾，
   ＾９］オクタコス−１８−エン−２，３，１０，１６−
   テトラオンである特許請求の範囲第５）項記載の化合物
   。 ７）Ｒ＾１が低級アルカノイルオキシ基であり、Ｒ＾２
   がヒドロキシ基または低級アルカノイルオキシ基である
   特許請求の範囲第５）項記載の化合物。 ８）１２−［２−（４−アセトキシ−３−メトキシシク
   ロヘキシル）−１−メチルビニル］−１７−アリル−１
   ，１４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３
   ，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオ
   キサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０＾４＾，
   ＾９］オクタコス−１８−エン−２，３，１０，１６−
   テトラオンである特許請求の範囲第７）項に記載の化合
   物。 ９）１４−アセトキシ−１２−［２−（４−アセトキシ
   −３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチルビニル］
   −１７−アリル−１−ヒドロキシ−２３，２５−ジメト
   キシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，
   ２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，
   ０＾４＾，＾９］オクタコス−１８−エン−２，３，１
   ０，１６−テトラオンである特許請求の範囲第７）項記
   載の化合物。 １０）１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−
   ［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル
   ）−１−メチルビニル）−２３，２５−ジメトキシ−１
   ３，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジ
   オキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０＾４＾
   ，＾９］オクタコス−１８−エン−２，３，１０，１６
   −テトラオンである特許請求の範囲第２）項記載の化合
   物。 １１）１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２−（４−ヒ
   ドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチル
   ビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，１７
   ，２１，２７−ペンタメチル−１１，２８−ジオキサ−
   ４−アザトリシクロ［２２，３，１，０＾４＾，＾９］
   オクタコス−１８−エン−２，３，１０，１６−テトラ
   オンである特許請求の範囲第２）項記載の化合物。 １２）Ｒ＾１がヒドロキシ基、低級アルキルチオメトキ
   シ基、低級アルカノイルオキシ基またはハロゲンを有し
   ていてもよいアレーンスルホニルオキシ基、Ｒ＾２が水
   素またはヒドロキシ基、ｎが整数２、実線と点線により
   表わされる記号が二重結合である特許請求の範囲第１）
   項記載の化合物。 １３）１６−アリル−１，１３−ジヒドロキシ−１１−
   ［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル
   ）−１−メチルビニル］−２２，２４−ジメトキシ−１
   ２，１８，２０，２６−テトラメチル−１０，２７−ジ
   オキサ−４−アザトリシクロ［２１，３，１，０＾４＾
   ，＾８］ヘプタコス−１７−エン−２，３，９，１５−
   テトラオンである特許請求の範囲第１）項記載の化合物
   。 １４）（ａ）ストレプトミセス属に属するＦＲ−９００
   ５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦ
   Ｒ−９００５２５物質−生産菌株を培地に培養し、得ら
   れる培養物からＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００
   ５２０物質および／またはＦＲ−９００５２５物質を分
   離採取することを特徴とするＦＲ−９００５０６物質、
   ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦＲ−９００５
   ２５物質を得る方法； （ｂ）ストレプトミセス属に属するＦＲ−９００５２０
   物質および／またはＦＲ−９００５２３物質−生産菌株
   を培地に培養し、得られる培養物からＦＲ−９００５２
   ０物質および／またはＦＲ−９００５２３物質を分離採
   取することを特徴とするＦＲ−９００５２０物質および
   ／またはＦＲ−９００５２３物質を得る方法； （ｃ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾２は水素、ヒドロキシ基または保護された
   ヒドロキシ基、Ｒ＾３はメチル基、エチル基、プロピル
   基またはアリル基、ｎは１または２の整数、実線と点線
   により表わされる記号は単結合または二重結合を意味す
   る） で示される化合物またはその塩にヒドロキシ保護基を導
   入して、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾２、Ｒ＾３、ｎおよび実線と点線により表
   わされる記号はそれぞれ前と同じ意味であり、Ｒ＾１は
   保護されたヒドロキシ基を意味する）で示される化合物
   またはその塩を得る方法；（ｄ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾３、ｎおよび実線と点線により表わされる
   記号はそれぞれ前と同じ意味であり、Ｒ＾１はヒドロキ
   シ基または保護されたヒドロキシ基を意味する） で示される化合物またはその塩にヒドロキシ保護基を導
   入して、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３、ｎおよび実線と点線により表
   わされる記号はそれぞれ前と同じ意味であり、Ｒ＾２は
   保護されたヒドロキシ基を意味する）で示される化合物
   またはその塩を得る方法；（ｅ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３およびｎはそれぞれ前と同じ意
   味であり、▲数式、化学式、表等があります▼は脱離基
   を意味する） で示される化合物またはその塩に塩基を作用させ、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３およびｎはそれぞれ前と同じ意
   味） で示される化合物またはその塩を得る方法；（ｆ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３およびｎはそれぞれ前と同じ意
   味） で示される化合物またはその塩を酸化して、式：▲数式
   、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３およびｎはそれぞれ前と同じ意
   味） で示される化合物またはその塩を得る方法；（ｇ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾２、ｎおよび実線と点線により表
   わされる記号はそれぞれ前と同じ意味） で示される化合物を還元して、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾２、ｎおよび実線と点線により表
   わされる記号はそれぞれ前と同じ意味） で示される化合物またはその塩を得る方法からなる、一
   般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾２、Ｒ＾３、ｎおよび実線と点線
   により表わされる記号はそれぞれ前と同じ意味）で示さ
   れる化合物の製造法。 （５）一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１はヒドロキシ基または保護されたヒドロ
   キシ基、Ｒ＾２は水素、ヒドロキシ基または保護された
   ヒドロキシ基、Ｒ＾３はメチル基、エチル基、プロピル
   基またはアリル基、ｎは１または２の整数、実線と点線
   により表わされる記号は単結合または二重結合を意味す
   る） で示される化合物またはその医薬として許容される塩を
   含有する免疫抑制剤または抗菌剤。 １６）微生物ストレプトミセス、ツクバエンシスＮｏ．
   ９９９３の生物学的純粋培養物。１７）微生物ストレプ
   トミセス、ハイグロスコピカス・サブスプ・ヤクシマエ
   ンシスＮｏ．７２３８の生物学的純粋培養物。