JPH0372498A - アノレキシゲニック作用及び血圧降下作用を持つペプタイド及び、該ペプタイドを含有する高血圧症候群並びに過食症及び肥満状態を治療するための医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は食欲不振をおこさせる（アルキシゲニツク（ａ
ｎｏｒｅｘｉｇｅｎｉｃ）　）作用及び、血圧降下作用
を有する新規な生理活性ベグタイド類、その化学的製剤
及び治療上投与する為の薬学的製剤を製造するためのそ
の使用に関する。

本発明のベグタイド類は１次記一般式 式中Ｘはアミノ酸残基、又は ＭＥＴ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−ＬＥｔＪ−（ＩＶ）ＰＹＲ−
ＬＥＵ−ＬＥＵ−ＴＹＲ−（Ｖ）ＰＹＲ−ＭＥＴ−ＬＥ
Ｕ−ＬＥＵ−（ＶＩ）ＰＹＲ−ＣＹＳ−Ｉ、ＥＵ−ＬＥ
Ｕ−（■）ＭＥＴ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−５ＥＲ−（■）Ｐ
ＹＲ−ＨＩＳ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−（ＩＸ）からなる群か
ら選ばれたベプタイド鎖であり、Ｗは水酸基又はアミノ
基である。

特に好ましいペグタイド類は、Ｘが上記ペプタイド残基
Ｃｍ）　、　　（ＩＩＩ）　、　　（ＩＶ）及び（Ｖ）
の一つであるものである。

本発明のベプタイドは、次記薬学的性質を有している。

マウス、ラット、犬、猿及び人間における経皮、粘膜経
由又は吸入経路による本ペプタイドの有効量を軟膏、ク
リーム、緩衝塗布剤、舌下用のマイクロカプセル、鼻ス
プレー、チューインガム、砂糖ドロップ、注射液として
投与することによるアルキシゲニック（ａｎｏｒｅｘｉ
ｇｅｎｉｃ）活性；同じ種類の動物での上記薬学的製薬
としての血圧降下作用 アルキシゲニツク（ａｎｏｒｅｘｉｇｅｎｉｃ　）活性
は平均して４−６時間、血圧降下作用は約３−５時間で
終了する０両作用は末梢形のものである。即ち上記ペプ
タイドはへマドエンセファリック（ｈｅｍａｔ。

ｅｎｃｓｐｈａｌｉｅ）な障害と著しくクロスすること
がない、従って人間の患者への薬学的な使用は明白であ
り、高血圧症状群や各種過食症及び肥満状態の治療に関
与することが出来る。

本発明のベグタイド類は、重合物担体上に固形で製造で
きる。その製造は一〇−末端アミノ酸から出発し、第１
段階でメチルベンゼンヒドリルアミン、ベンズヒドリル
アミン又はクロロメチル化合成樹脂にグラフトされる。

その他のアミノ酸は該鎖を防護した後、−段一段グラフ
トされる。Ｓｓｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ及びＨｉｓ
残基の側鎖用保護基は当業者によく知られている０次い
で。

全体の保護されたベプタイドを、クロルメチル化合或摺
脂からアンモノリシスによって放出し、保護されたアミ
ドを得るか或いはメチルベンヅヒドリルアミン又はペン
ヅヒドリルアミン樹脂からフッ化水素酸で０℃で処理す
ることにより、放出される。同時に樹脂から放され保護
基が取れる。

ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）基は、好ましくはα
−アミノ基を保護するために用いられる。

側鎖用の保護基を選択する原理は、該基がその製造中に
一段一段ＢＯＣをα−アミノ基から除去するとき除去さ
れなければならないことである。

下記例と試験を挙げるが、それらは単に本発明の幾つか
のベプタイドの製造とその薬理学的性質を説明するもの
であり、本発明が下記実施例に限定されるものでないこ
とは言うまでもない。

例１ 本発明のベプタイドのすべてに共通のアミノ酸配列 法 ベンズヒドリルアミン樹脂（６ｇ）を固形相の製造に用
い、その樹脂にジクロルメタンに１０％のジメチルホル
ムアミド５０ｍ１に溶解して、ＢＯＣ−ＩＬＥアミノ酸
（Ｃ−ターミナル）をグラフトし、その際３倍過剰のＢ
ＯＣ−誘導体とジシクロへキシルアミドを活性化剤に２
時間使用した。

イソロイシン残基はこうしてアミド結合で樹脂にグラフ
トした。ＴＨＲアルコール残基は、そのアミノ酸をペプ
タイド鎖にグラフトするに先立って、前もってｔｅｒｔ
−ブチル基により保護した。各アミノ酸はベックマン９
９０Ｂの固形相での合成法を用いてペプタイド鎖に次記
プログラムにより添加した。

１　、　２　Ｘ　８０　ｍ　ｌのジクロロメタンでの３
分間洗浄 ２、　２Ｘ３９ｍｌのメタノールでの３分間洗浄３、　
３Ｘ８０ｍｌのジクロロメタンでの３分間洗浄 ４、ジクロロメタン（７０ｍｌ）中、２×５０％ＴＥＡ
プラス５％１，２エタノール１０回洗浄 ５、ジクロロメタン２　Ｘ　８０　ｍ　ｌでの３分間洗
浄 ６、　７０ｍ１ジクロロメタン中２Ｘ１２．５％ＴＥＡ
　　５分間 ７、　２Ｘ４０ｍｌメタノールでの２分間洗浄８、　３
Ｘ８０ｍｌのジクロロメタンでの３分間洗浄 ９、　ジクロロメタン又はジメチルホルムアミド中３０
ｍ１中旦ＱＣ−７Ｅ／　　　（１０ｍｍｏｌ）プラス、
ジクロロメタン中（５０−３００分）ジシクロへキシル
カルボジイミド（１０ｍｍｏｌ） １０．３Ｘ４０ｍｌメタノール３分間洗浄１１、ジクロ
ロメタン（７０ｍｌ）中１２．５％ＴＥＡ３分間洗浄 １２．２Ｘ３０ｍｌメタノール３分間洗浄１３．２Ｘ８
０ｍｌジクロロメタン３分間洗浄１３ステップで、サン
プルを抽出する。アミノ酸がドラフトされていなければ
、ニンヒドリンテストはマイナスでなければならない。

その場合、配列は再びそれに続くアミノ酸のグラフトの
ために行われる。若しテストがプラスならばサイクルは
９−１３まで反復される。

配列が完了したとき、ペプタイドを樹脂から放出し、側
鎖から一２０℃で３０分間、引き続いてＯ℃４０分間、
１５ｍ１のＨＦ　／　ｇ樹脂−ペブタイド化合物であら
かじめアニソール（２，０ｍ１）とメチルエチルスルフ
イツト（０，５ｍ１）／ｇを加えて保護基を外した。

ＨＦを真空で除去し、樹脂をエーテルで洗い５０％酢酸
で抽出した。粗ペプタイドを含む抽出物を凍結乾燥する
。精製は、先ずセファデックス０２５カラム上でｎ−ブ
タノール：酢酸及び水５：１：４（容量）混合物を溶出
剤として用いて行い、次いで２５ｃｍＸ１０ｍｍスペロ
コジル５ＰＬＣＩ８−０８カラム上で、０．１％トリフ
ルオロ酢酸水溶液中１８％から４５％へと量を変更した
アセトニトリルを溶出剤として使用して行った。

ＨＰ　Ｌ　Ｃで精製した後、得られた純度は９８％であ
る。こうして精製したノナペプタイドはＨＰＬＣで単一
ピークを示し、上述のシステムの中で１２．７分なる滞
留時間そして［α］よ３＝−５２±１の光学活性を有し
ている。

例２−５ 例１に説明したものと、近縁した方法によって下記ペプ
タイドを得た。

［α］ＳＪ＝　　４４±１ ペプタイドＩＩ［：　ＰＹＲ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−ＡＲＧ
Ｈ２ ［α］Ｓｌ”＝−３２±ｌ Ｎ！（。

［α］”＝−３９±１ Ｈ２ ［α］２３＝−２７±１ 粂笠直鼠作亘 本発明のベプタイドは、すべてのテスト動物（古人間）
で急速投与及び３か月の長期投与でアルキシゲニツク（
ａｎｏｒｅｘｉｇｅｎｉｃ）性であり血圧降下的である
０例としてペプタイド■に関するテストをそれぞれラッ
ト及びモンキー（Ｍａｃａｃａ　ｍｕｌａｔｔａ）で行
い、下記に報告する。

ラットでの７ルキシゲニツク　ａｎｏｒｅｘｉ　ｅｎｉ
ｃ生理食塩水に溶かしたベプタイド■を４８時間固定（
ｆａｓｔｅｄ）　シた２０雄ウイスターラド（平均体重
２００ｇ）皮下注射した。同じ種、性、及び体重で同時
間固定（ｆａｓｔｅｄ）　シた２０の他のラット（コン
１−ロール）に溶剤だけを皮下注射した。注射に続く１
２時間に動物の採取した食物量をａ±０．１ｇ精度で２
１１！Ｉ定した。

グラフ１ａはテストにより得られた用量効果関係を示す
。

血圧効果作用は２８℃で意識的に保持した尾上に置かれ
たｓｐｈｙｇｒａｏｍａｎｏｍｅｔｒｉｃ　５ｌｅｅｖ
ｅの方法での動脈圧のインクルエンド（ｉｎｃｒｕｅｎ
ｔ）測定により測定したものであり、１５−２０μｇ／
ｋｇ用量及び２００μｇ／ｋｇ用量での証拠である。そ
れは約４時間の期間で６０ｍｍＨＨの最大圧力減少の中
にある。

食物摂取を５０％阻止するペプタイド用量は５μｇ／ｋ
ｇ体重である。■０μｇ／ｋｇ０μで食物摂取を阻止す
る作用は１２峙間以上の間に終息する。１ａグラフは、
ラットでの血圧効果作用に関連した用量効果を説明する
ものである。

ベプタイド■を２４時１１ｆｆ固定した後、２５ｋｇ体
重の３匹のモカカムラタモンキーに皮下注射した。

同一動物をコントロールとして使用し、彼らがペグタイ
ド注射前の１週及びそれに続く１週間に８時間で摂取し
た食物量を測定した。

２ａと２ｂは、それぞれペプタイドの３用量（ＩＯ，２
０，３０μｇ／ｋｇ）の食物摂取に対する阻止効果、モ
ンキーでのベプタイドの５０，１００　＋　２００　ｕ
　ｇ　／　ｋ　ｇの血圧降下作用を示す。５０％食物摂
取を阻止するこの用量は２０μｇ／ｋｇである。一方２
５ｍｍｇＨｇの圧力低下は、２００μｇ／ｋｇ用量で得
られた。

この血圧降下作用は、約４週間で持続する。一方アルキ
シゲニック（ａｎｏｒｅｘｉｇｅｎｉｃ　）作用は約１
２時間に達した。

手続補正書（方式） 平成　２午　９　月ノ子日

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）Ｘ−ＩＬＥ−ＧＬＵ−ＬＹＳ−ＡＲＧ−ＬＥＵ−Ｌ
   ＥＵ−ＡＳＰ−ＴＨＲ− ＩＬＥ−Ｗ（ I ） 式中Ｘはアミノ酸残基、又は ＡＳＰ−ＬＥＵ−ＳＥＲ−ＬＥＵ− ＧＬＵ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−ＭＥＴ−（II） ＰＹＲ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−ＡＲＧ−ＣＹＳ−（III） ＭＥＴ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−（IV） ＰＹＲ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−ＴＹＲ−（Ｖ） ＰＹＲ−ＭＥＴ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−（VI） ＰＹＲ−ＣＹＳ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−（VII） ＭＥＴ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−ＳＥＲ−（VIII） ＰＹＲ−ＨＩＳ−ＬＥＵ−ＬＥＵ−（IX） からなる群から選ばれたペプタイド鎖であり、Ｗは水酸
   基又はアミノ基である で示される一般式のペプタイド類 ２）血圧降下剤及びアノレキシゲニック（ａｎｏｒｅｘ
   ｉｇｅｎｉｃ）剤としての治療的使用のための請求項１
   のペプタイド類 ３）高血圧症候群又は過食症及び肥満状態を薬剤学的に
   処理するための医薬を製造するための請求項１のペプタ
   イド類の使用法 ４）請求項１に請求された一個又は多数のペプタイドを
   含有する薬学的組成物 ５）皮下、経皮、粘膜経由又は吸入経路で投与するため
   の請求項４の薬学的組成物