JPH0378105B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH0378105B2 JPH0378105B2 JP58176296A JP17629683A JPH0378105B2 JP H0378105 B2 JPH0378105 B2 JP H0378105B2 JP 58176296 A JP58176296 A JP 58176296A JP 17629683 A JP17629683 A JP 17629683A JP H0378105 B2 JPH0378105 B2 JP H0378105B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- methanol
- medium
- growth
- days
- hyphomicrobium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
本発明はハイホミクロビウム バリアビル
（Hyphomicrobium variabile）42−３−１に関
する。 本発明者らは、メタノールを炭素源とするエタ
ノールの製造方法について種々検討した結果、メ
タノールをエタノール等に変換する能力を有する
微生物ハイホミクロビウム バリアビル42−３−
１を取得し、本発明に到達した。 この菌株は微工研菌寄第7019号（FERMP−
7019）として寄託されている。 本発明に係るハイホミクロビウム バリアビル
42−３−１は、昭和56年12月オーストラリアで採
取された土壌より分離されたものであり、その細
菌学的性状は次の通りである。 (1) 顕微鏡的特徴 メタノール1.5％含有寒天平板培地、30℃５
日間の培養的性質（コロニーの形態） (イ) 外形 ：円形 (ロ) 大きさ ：1.0〜2.0mm (ハ) 表面の隆起 ：凸レンズ状 (ニ) 表面の形状 ：平滑 (ホ) 光沢 ：無 (ヘ) 色調 ：クリーム色〜淡黄色 (ト) 透明度 ：半透明 (チ) 周縁 ：全縁 メタノール1.5％含有液体培地および寒天平
板培地、30℃、２〜５日間の形態的性質 (イ) 細胞の形態 ：卵形〜ダ円形の桿菌 (ロ) 細胞の大きさ ：0.5〜1.0×1.0〜3.0μｍ (ハ) 多形性 ：なし (ニ) 運動性 ：あり、単一の極ベン毛 (ホ) 胞子形成 ：なし (ヘ) グラム染色 ：陰性 (ト) 抗酸性 ：陰性 (チ) 分裂様式：出芽（budding）により増殖す
る。その出芽様式は、カビの胞子の発芽を想
起させる。発芽管様の菌糸の先端が膨潤し
て、娘細胞が形成される。 (2) 各培地における生育状態 (イ) メタノール1.5％含有斜面培地、30℃、５
日間の生育状態。 旺盛な生育、接種線に一様に生育する。コ
ロニーの色調は、クリーム色〜淡黄色。表面
は平滑。周辺は全円平滑。不透明。 (ロ) メタノール1.5％含有高層培地、30℃、５
日間の生育状態。 接種線に沿つてのみ生育する。表面での生
育は旺盛。 (ハ) メタノール1.5％含有液体静置培養、30℃、
５日間の生育状態。 中程度の生育。混濁する。皮膜は形成され
ず。 (ニ) メタノール1.5％含有ゼラチン培地、30℃、
５日間の生育状態。 中程度の生育。ゼラチンを液化せず。 (ホ) 肉汁寒天斜面培地、30℃、５日間の生育状
態。 生育状態は、メタノール含有斜面培地上で
の生育状態に似る。 (ヘ) 肉汁高層培地、30℃、５日間の生育状態。 メタノール含有高層培地上での生育と同
じ。 (ト) 肉汁液体静置培養、30℃、５日間の生育状
態。 メタノール含有液体培養での生育と同じ。 (チ) 肉汁・ゼラチン培地、30℃、５日間の生育
状態。 メタノール含有ゼラチン培地中での生育と
同じ。ゼラチンを液化せず。 (3) 生理的性質
（Hyphomicrobium variabile）42−３−１に関
する。 本発明者らは、メタノールを炭素源とするエタ
ノールの製造方法について種々検討した結果、メ
タノールをエタノール等に変換する能力を有する
微生物ハイホミクロビウム バリアビル42−３−
１を取得し、本発明に到達した。 この菌株は微工研菌寄第7019号（FERMP−
7019）として寄託されている。 本発明に係るハイホミクロビウム バリアビル
42−３−１は、昭和56年12月オーストラリアで採
取された土壌より分離されたものであり、その細
菌学的性状は次の通りである。 (1) 顕微鏡的特徴 メタノール1.5％含有寒天平板培地、30℃５
日間の培養的性質（コロニーの形態） (イ) 外形 ：円形 (ロ) 大きさ ：1.0〜2.0mm (ハ) 表面の隆起 ：凸レンズ状 (ニ) 表面の形状 ：平滑 (ホ) 光沢 ：無 (ヘ) 色調 ：クリーム色〜淡黄色 (ト) 透明度 ：半透明 (チ) 周縁 ：全縁 メタノール1.5％含有液体培地および寒天平
板培地、30℃、２〜５日間の形態的性質 (イ) 細胞の形態 ：卵形〜ダ円形の桿菌 (ロ) 細胞の大きさ ：0.5〜1.0×1.0〜3.0μｍ (ハ) 多形性 ：なし (ニ) 運動性 ：あり、単一の極ベン毛 (ホ) 胞子形成 ：なし (ヘ) グラム染色 ：陰性 (ト) 抗酸性 ：陰性 (チ) 分裂様式：出芽（budding）により増殖す
る。その出芽様式は、カビの胞子の発芽を想
起させる。発芽管様の菌糸の先端が膨潤し
て、娘細胞が形成される。 (2) 各培地における生育状態 (イ) メタノール1.5％含有斜面培地、30℃、５
日間の生育状態。 旺盛な生育、接種線に一様に生育する。コ
ロニーの色調は、クリーム色〜淡黄色。表面
は平滑。周辺は全円平滑。不透明。 (ロ) メタノール1.5％含有高層培地、30℃、５
日間の生育状態。 接種線に沿つてのみ生育する。表面での生
育は旺盛。 (ハ) メタノール1.5％含有液体静置培養、30℃、
５日間の生育状態。 中程度の生育。混濁する。皮膜は形成され
ず。 (ニ) メタノール1.5％含有ゼラチン培地、30℃、
５日間の生育状態。 中程度の生育。ゼラチンを液化せず。 (ホ) 肉汁寒天斜面培地、30℃、５日間の生育状
態。 生育状態は、メタノール含有斜面培地上で
の生育状態に似る。 (ヘ) 肉汁高層培地、30℃、５日間の生育状態。 メタノール含有高層培地上での生育と同
じ。 (ト) 肉汁液体静置培養、30℃、５日間の生育状
態。 メタノール含有液体培養での生育と同じ。 (チ) 肉汁・ゼラチン培地、30℃、５日間の生育
状態。 メタノール含有ゼラチン培地中での生育と
同じ。ゼラチンを液化せず。 (3) 生理的性質
【表】
【表】
(4) 各種糖類から酸及びガスの生成の有無
【表】
(5) 糖類の資化性
【表】
(6) 糖類以外の炭素源の資化性
【表】
【表】
(7) 菌体の化学的組成分析
DNA中のグアニン＋シトシン含量（融解温
度測定法による）は60.2〜60.5モル％であつ
た。 属レベルの同定 本菌株、42−３−１は出芽型の分裂様式を示す
こと、運動性の極ベン毛を有することからバージ
ーズマニユアル第８版（Bargey′s Manual of
Determinative Bactericlogy 8th ed.（1974））に
記載されているハイホミクロビウム
（Hyphomicrobium）属に帰属することが判明し
た。 バージーズマニユアル第８版によれば、出芽型
分裂細菌（Budding Bacteria）にはハイホミク
ロビウム（Hyphomicrobium）、ハイホモナス
（Hyphomonas）およびペドミクロビウム
（Pedomicrobium）の３属が記載されている。
HyphomonasはC1化合物を利用しないこと、
PedomicrobiumはC1化合物を利用しない点およ
び、多形性の形態を有することによつて
Hyphomicrobium属から識別されている。 種レベルの同定 ハイホミクロビウム属にはH.ネプチニウム
（H.neptinium）、H.バルガレ（H.vulgare）、H.
インジカム（H.indicum）、H.バリアビル（H.
variabile）（特開昭47−14589号）およびH.コア
グランス（H.coagulans）（Takada、1974）の５
種が知られている。これら５種のうち、前者３種
は汽水〜海水域に生息するMarine Bacteriaとし
て知られており、50〜100％海水中で生育可能な
微生物である。一方H.バリアビルおよびH.コア
グランスは土壌性細菌として知られている。 本菌株、42−３−１をH.コアグランスの原記
載と比較したところ、ペプトン水での生育は弱
く、薄膜（Pellicle）を形成しないことおよび炭
素源の資化性パターンにおいてH.コアグランス
から区別された。本菌株、42−３−１とH.バリ
アビルの基準菌株（NCIB 10517）について、各
種の微生物的諸性質を比較検討したところ、試験
項目の(3)〜(8)に示すように、炭素源の資化性およ
び他の生理的性質等において、両菌株はよく類似
していた。また両菌株についてDNAのＧ−Ｃ含
量を測定したところ、H.バリアビル（NCIB
10517）は60.2〜60.7モル％、本菌株42−３−１
は、60.2〜60.5モル％の測定値を示し、この点に
おいても両菌はよく一致した。従つて、本菌株42
−３−１はハイホミクロビウム バリアビルと同
定された。 本発明において使用される培地としては、主炭
素源としてメタノールを含むものであれば、特に
制限されない。 炭素源としては、メタノール以外に、種々の炭
水化物、有機酸等をさらに添加してもよく、窒素
源としては、有機アンモニウム塩、無機アンモニ
ウム塩、尿素等を用いることができる。 また、必要に応じ、無機物として各種リン酸
塩、硫酸塩等を使用することができ、必要に応じ
各種有機栄養物を添加することもできる。 培養は、通常12時間〜10日間程度、好気的条件
下に行なわれるが、培養の一部（後期）を嫌気的
条件下で行なうこともできる。 培地のPHは４−10、温度は20−40℃程度から選
ばれる。 エタノール等の生産に際しては、増殖菌体、休
止菌体のいずれをも用いることができる。 培養物からエタノール等の採取、精製に際して
は、一般に有機化合物の採取、精製に用いられて
いる方法を採用することができる。 以下、実施例により、本発明をさらに説明す
る。 なお、実施例における物質の同定はガスクロマ
トグラフー質量分析等により標品と比較して行な
つた。 実施例 １ 水１あたりメタノール（15ｇ）、 NH4Cl（４ｇ）、K2HPO4（１ｇ）、 Na2HPO4（１ｇ）、 MgSO4・7H2O（0.5ｇ）、塩酸ピリドキシン（１
mg）、ビオチン（0.01mg）、塩酸チアミン（１mg）、
リボフラビン（１mg）、Ｄ−パントテン酸ナトリ
ウム（１mg）、 葉酸（0.01mg）、FeSO4・7H2O（１mg）ZnSO4・
7H2O（１mg）、 CuSO4・5H2O（0.1mg）、 MuCl2・4H2O（0.04mg）を溶解し、PH7.0に調整し
た培地(A)を50mlを500ml容肩付コルベンに分注し、
120℃で10分間殺菌した。この培地Ａに寒天20ｇ
１を添加したメタノール含有寒天斜面培地にハ
イホミクロビウム バリアビル42−３−１菌を30
℃、４日間培養し、その一白金耳を上記コルベン
に接種し、30℃往復振とう機で112回／分の回転
数を与え培養を６日間行つた。得られた培養液を
さらに30℃で２〜５日間静置培養することにより
エタノール1.5mg、アセトン15mg、イソプロパノ
ール４mg、酢酸３mgを得た。 実施例 ２ ハイホミクロビウム バリアビル42−３−１菌
を使用し、実施例１と同様に培養した培養液を遠
心分離（12000rpm15分）し、菌体を集菌し、さ
らに同様の培地A10mlで懸濁し、30℃にて２〜６
日間静置培養を行ないエタノール３mg、アセトン
15mg、イソプロパノール４mg、酢酸３mgを得た。
度測定法による）は60.2〜60.5モル％であつ
た。 属レベルの同定 本菌株、42−３−１は出芽型の分裂様式を示す
こと、運動性の極ベン毛を有することからバージ
ーズマニユアル第８版（Bargey′s Manual of
Determinative Bactericlogy 8th ed.（1974））に
記載されているハイホミクロビウム
（Hyphomicrobium）属に帰属することが判明し
た。 バージーズマニユアル第８版によれば、出芽型
分裂細菌（Budding Bacteria）にはハイホミク
ロビウム（Hyphomicrobium）、ハイホモナス
（Hyphomonas）およびペドミクロビウム
（Pedomicrobium）の３属が記載されている。
HyphomonasはC1化合物を利用しないこと、
PedomicrobiumはC1化合物を利用しない点およ
び、多形性の形態を有することによつて
Hyphomicrobium属から識別されている。 種レベルの同定 ハイホミクロビウム属にはH.ネプチニウム
（H.neptinium）、H.バルガレ（H.vulgare）、H.
インジカム（H.indicum）、H.バリアビル（H.
variabile）（特開昭47−14589号）およびH.コア
グランス（H.coagulans）（Takada、1974）の５
種が知られている。これら５種のうち、前者３種
は汽水〜海水域に生息するMarine Bacteriaとし
て知られており、50〜100％海水中で生育可能な
微生物である。一方H.バリアビルおよびH.コア
グランスは土壌性細菌として知られている。 本菌株、42−３−１をH.コアグランスの原記
載と比較したところ、ペプトン水での生育は弱
く、薄膜（Pellicle）を形成しないことおよび炭
素源の資化性パターンにおいてH.コアグランス
から区別された。本菌株、42−３−１とH.バリ
アビルの基準菌株（NCIB 10517）について、各
種の微生物的諸性質を比較検討したところ、試験
項目の(3)〜(8)に示すように、炭素源の資化性およ
び他の生理的性質等において、両菌株はよく類似
していた。また両菌株についてDNAのＧ−Ｃ含
量を測定したところ、H.バリアビル（NCIB
10517）は60.2〜60.7モル％、本菌株42−３−１
は、60.2〜60.5モル％の測定値を示し、この点に
おいても両菌はよく一致した。従つて、本菌株42
−３−１はハイホミクロビウム バリアビルと同
定された。 本発明において使用される培地としては、主炭
素源としてメタノールを含むものであれば、特に
制限されない。 炭素源としては、メタノール以外に、種々の炭
水化物、有機酸等をさらに添加してもよく、窒素
源としては、有機アンモニウム塩、無機アンモニ
ウム塩、尿素等を用いることができる。 また、必要に応じ、無機物として各種リン酸
塩、硫酸塩等を使用することができ、必要に応じ
各種有機栄養物を添加することもできる。 培養は、通常12時間〜10日間程度、好気的条件
下に行なわれるが、培養の一部（後期）を嫌気的
条件下で行なうこともできる。 培地のPHは４−10、温度は20−40℃程度から選
ばれる。 エタノール等の生産に際しては、増殖菌体、休
止菌体のいずれをも用いることができる。 培養物からエタノール等の採取、精製に際して
は、一般に有機化合物の採取、精製に用いられて
いる方法を採用することができる。 以下、実施例により、本発明をさらに説明す
る。 なお、実施例における物質の同定はガスクロマ
トグラフー質量分析等により標品と比較して行な
つた。 実施例 １ 水１あたりメタノール（15ｇ）、 NH4Cl（４ｇ）、K2HPO4（１ｇ）、 Na2HPO4（１ｇ）、 MgSO4・7H2O（0.5ｇ）、塩酸ピリドキシン（１
mg）、ビオチン（0.01mg）、塩酸チアミン（１mg）、
リボフラビン（１mg）、Ｄ−パントテン酸ナトリ
ウム（１mg）、 葉酸（0.01mg）、FeSO4・7H2O（１mg）ZnSO4・
7H2O（１mg）、 CuSO4・5H2O（0.1mg）、 MuCl2・4H2O（0.04mg）を溶解し、PH7.0に調整し
た培地(A)を50mlを500ml容肩付コルベンに分注し、
120℃で10分間殺菌した。この培地Ａに寒天20ｇ
１を添加したメタノール含有寒天斜面培地にハ
イホミクロビウム バリアビル42−３−１菌を30
℃、４日間培養し、その一白金耳を上記コルベン
に接種し、30℃往復振とう機で112回／分の回転
数を与え培養を６日間行つた。得られた培養液を
さらに30℃で２〜５日間静置培養することにより
エタノール1.5mg、アセトン15mg、イソプロパノ
ール４mg、酢酸３mgを得た。 実施例 ２ ハイホミクロビウム バリアビル42−３−１菌
を使用し、実施例１と同様に培養した培養液を遠
心分離（12000rpm15分）し、菌体を集菌し、さ
らに同様の培地A10mlで懸濁し、30℃にて２〜６
日間静置培養を行ないエタノール３mg、アセトン
15mg、イソプロパノール４mg、酢酸３mgを得た。
Claims (1)
- １ メタノール資化性を有し、微工研菌寄第7019
号として寄託されたハイホミクロビウム バリア
ビリ42−３−１（Hyphomicrobium variabile42
−３−１）。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58176296A JPS6066977A (ja) | 1983-09-26 | 1983-09-26 | 微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58176296A JPS6066977A (ja) | 1983-09-26 | 1983-09-26 | 微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6066977A JPS6066977A (ja) | 1985-04-17 |
| JPH0378105B2 true JPH0378105B2 (ja) | 1991-12-12 |
Family
ID=16011101
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58176296A Granted JPS6066977A (ja) | 1983-09-26 | 1983-09-26 | 微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6066977A (ja) |
-
1983
- 1983-09-26 JP JP58176296A patent/JPS6066977A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6066977A (ja) | 1985-04-17 |
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