JPH0380261B2 - - Google Patents
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- JPH0380261B2 JPH0380261B2 JP59079915A JP7991584A JPH0380261B2 JP H0380261 B2 JPH0380261 B2 JP H0380261B2 JP 59079915 A JP59079915 A JP 59079915A JP 7991584 A JP7991584 A JP 7991584A JP H0380261 B2 JPH0380261 B2 JP H0380261B2
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
- G01N33/525—Multi-layer analytical elements
- G01N33/526—Multi-layer analytical elements the element being adapted for a specific analyte
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- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
発明の背景
技術分野
本発明は、ヒドロペルオキシドまたは前反応に
よつて生ずる過酸化水素もしくは他のヒドロペル
オキシドを、ペルオキシダーゼまたはペルオキシ
ダーゼ様反応を用いて測定する試験紙、またはペ
ルオキシダーゼもしくはペルオキシダーゼ作用物
質を検出する試験紙、またはジアゾカツプリング
反応を用いて測定する試験紙に対する検体中に存
在することのある還元性物質の影響を除去した試
験用具に関するもので、特に尿および血液中のブ
ドウ糖またはビリルビンの検出用ならびに尿、糞
便および体液中の血液の検出用、さらに微生物に
起因する尿中の亜硝酸塩の検出用の改良された試
験用具に関するものである。 先行技術 最近、迅速診断剤は、医学的プラクテイスおよ
び臨床試験において著しく重要になつており、吸
収性担持体をベースとする迅速診断剤は重要であ
る。多くの場合、紙であるこの吸収性担持体に検
出反応に必要な薬剤を含浸させ、これを体液中に
浸漬すると、検出すべき物質が存在する場合には
呈色反応を呈する。医学的診断で非常に重要にな
つた迅速診断剤としては、例えば尿および血液中
のブドウ糖またはビリルビンの検出用ならびに
尿、糞便および体液中の潜血の検出用、さらに微
生物に起因する尿中の亜硝酸の検出用迅速診断剤
がある。 この試験は、つぎの原理に基いている。 (1) ヒドロペルオキシドまたは過酸化水素の生成
に関する例 この例としては検体中に含まれるグルコー
ス、尿酸、コレステロール、トリグリセライ
ド、遊離脂肪酸などがあり、その原理はグルコ
ースを代表例として説明する。 すなわち、体液中のグルコース（ブドウ糖）
を検出する際には、グルコースはグルコースオ
キシダーゼ（GOD）によつてグルコン酸に酸
化され、その際に空中酸素は過酸化水素に還元
される。この過酸化水素は、ペルオキシダーゼ
またはペルオキシダーゼ作用性物質の存在下で
酸化指示薬を酸化・発色せしめ、その色の濃度
が存在するグルコース量の尺度である。 (2) ペルオキシダーゼまたはペルオキシダーゼ作
用性物質の例 この例としては検体中に含まれるヘモグロビ
ン（潜血）、ミオグロピン（腎疾患）などがあ
り、その原理はヘモグロビンを例にとつて説明
する。血液を検出する際には、ヘモグロビンの
ペルオキシダーゼ様活性によりあらかじめ試験
紙などに含まれているペルオキシドから酸素が
発生し酸化指示薬を発色せしめる。 (3) ジアゾカップリング反応の例 この例としては、検体中に含まれる亜硝酸塩
（細菌尿）、ビリルビル（たんのう炎など）など
があり、その原理はジアゾ化可能な試薬が上記
検体中物質によりジアゾ化され呈色する。 上記のごとき迅速診断剤は種々知られている。 上記(1)、(2)については、特開昭48−1120、特公
昭58−3679、特公昭56−43238、特公昭57−
53539、特開昭53−16692号などに開示され、上記
(3)については、米国特許第3415717号、同3547780
号、同3718543号、特開昭58−134067、特公昭48
−1792、同49−27719、同53−27964、同53−
43431、同53−27964、同54−13508、同55−26426
などに開示されている。 しかるに、最近の加工食品、清涼飲料等にはビ
タミンＣとして多量のアスコルビン酸が含まれて
おり、また健康管理の点からもビタミンＣ剤等が
多量服用されているので、血液中に多量含まれて
いるだけでなく、余分なビタミンＣ剤は尿中に含
有されて体外に排泄されることになる。このた
め、前記のごとき診断剤を用いて尿や血液の試験
を行なう場合、アスコルビル酸は還元性が強いた
め、ペルオキシダーゼあるいはペルオキシダーゼ
作用物質により生成した酸素がアスコルビン酸と
の酸化還元反応に消費され、酸化指示薬との反応
が阻害され、充分な発色が得られないという問題
点が生じてきた。また、酸化反応であるジアゾカ
ツプリング反応を利用した試験紙についても同様
である。 このようなアスコルビン酸などの検体中の還元
性物質の試験結果への悪影響については、上記
(1)、(2)については上記刊行物においても指摘はさ
れている。また、(3)については上記刊行物に指摘
されていない。しかし、いずれの場合において
も、検体中の還元性物質の試験への悪影響を防止
する方策は見い出されていない。 発明の目的 したがつて、本発明は、ヒドロペルオキシドま
たは前反応によつて生ずる過酸化水素もしくは他
のヒドロペルオキシドを、ペルオキシダーゼまた
はペルオキシダーゼ様反応を用いて測定する試験
紙、またはペルオキシダーゼもしくはペルオキシ
ダーゼ作用物質を検出する試験紙、またはジアゾ
カツプリング反応を用いて測定する試験紙に対す
る検体中に存在することのある還元性物質の影響
を除去する試験用具を提供することを目的とす
る。 すなわち、本発明は、ペルオキシダーゼ反応ま
たはペルオキシダーゼ様反応あるいはジアゾカツ
プリング反応を利用して検体中に存在する被測定
物質を検出測定するための前記被測定物質の濃度
に対応した呈色をする指示薬を含む試験紙と、前
記試験紙上に前記試験紙の単位面積当りの酸化剤
の量として0.9〜15ｍmol／m2含有する酸化剤膜
とを備えたことを特徴とする試験用具を提供する
ものである。 すなわち、被測定物質は指示薬に接触する前に
酸化剤膜と接触するので指示薬に接触する被測定
物質は還元性物質の影響が少ない。 また、本発明は、酸化剤が酸素酸、その塩およ
び酸化性金属塩類よりなる群から選ばれたもので
ある試験用具である。さらに、本発明は、酸素酸
またはその塩がMIXO、MIXO3、MIXO4、およ
びMI 3H2XO6（ただし、MIは一価の陽イオンとな
り得る原子であり、またＸはハロゲン原子であ
る。）よりなる群より選ばれたものである試験用
具である。また、本発明は、酸素酸またはその塩
がMIIO4（ただし、MIは前記のとおりである。）、
特にNaIO4またはHIO4である試験用具である。 さらに、本発明は、酸化性金属塩類がエチレン
ジアミン四酢酸第二鉄（EDTA−鉄〔〕）、塩
化第二鉄、塩化第一銅、硫酸銅、酢酸銅、酢酸水
銀、酢酸ビスマスおよび酢酸鉛よりなる群から選
ばれたものである試験用具である。 さらに本発明は、酸化剤膜が、ナイロン等のメ
ツシユに酸化剤を付着させた膜である試験用具で
ある。 発明の具体的構成 本発明による試験用具は、ヒドロペルオキシド
または前反応によつて生じる過酸化水素もしくは
他のヒドロペルオキシドを、ペルオキシダーゼま
たはペルオキシダーゼ様反応を用いて測定する試
験紙、または、ペルオキシダーゼもしくはペルオ
キシダーゼ作用物質を測定する試験紙、あるいは
ジアゾカツプリング反応を用いて測定する試験紙
に対する検体中に存在することのある還元性物質
の影響を除去するため試験紙上に酸化剤膜を装着
したものである。 上記酸化剤膜は、透明または半透明（すくなく
とも検体液に濡れた場合）で、吸水性担持体の色
の変化が透かして見えるものであり、メツシユ状
または複数のピンホールのある膜基材に還元性物
質と反応して還元性を除去する物質である酸化剤
を含浸またはコーテイングまたは付着したもので
ある。膜基材としては、プラスチツク素材からな
る不織布や多孔質膜、さらにガラス繊維、半透
膜、濾紙等がある。 上記酸化剤膜中の酸化剤の量は試験紙の単位面
積当りの量として0.9〜15ｍmol／m2とするのが
良い。この量が0.9ｍmol／m2未満の場合には、
酸化剤の量が少なすぎて検体中の還元性物質を十
分に酸化することができず、また15ｍmol／m2を
越えると、検体中に還元性物質がない場合でも試
験紙が呈色、すなわち、陽性となつてしまう。 本発明による試験用具１の構成例を第１図及び
第２図に側面図で示す。第１図においては、試験
紙２はステイツク３上に酸化剤膜４により支持装
着されており、第２図においては試験紙２と酸化
剤膜４とを重層し、試験紙固定用のメツシユ５に
てステイツク３上に支持装着されており、検体の
尿、血液などの体液は酸化膜剤４を浸透し、ここ
で検体中の還元性物質は酸化された上で試験紙に
至り、検体中の還元性物質により影響を受けるこ
となく、試験紙は呈色するから、検体の正常な検
査を行うことができる。 検体中の還元性物質の酸化のために配合される
酸化剤としては、酸素酸、その塩および酸化性金
属塩類などが好ましく、以下にその代表例を挙げ
る。 酸素酸またはその塩としては、MIXO、MI
XO3、MIXO4、MI 3H2XO6（ただし、MIは一価の
陽イオンとなり得る原子、例えばNa、Ｋ、Ｈ等
であり、またＸはハロゲン原子、例えば、Ｉ、
Br、Cl等である）等がある。一例を挙げると、
例えばHClO、NaClO、KClO、HBrO、
NaBrO、KBrO、HIO、NaIO、KIO、HClO3、
NaClO3、KClO3、HBrO3、NaBrO3、KBrO3、
HIO3、NalO3、KIO3、HClO4、NaClO4、
KClO4、HBrO4、NaBrO4、KBrO4、HIO4、
NaIO4、KIO4、Na3H2IO6、K3H2IO6等があり、
好ましくはMIXO4であり、さらに好ましくはMI
IO4であり、最も好ましくはNaIO4およびHIO4で
ある。酸化性金属塩類としては、エチレンジアミ
ン四酢酸第二鉄（EDTA−鉄［］）、塩化第二
鉄、塩化第一銅、硫酸銅、酢酸銅、酢酸水銀、酢
酸ビスマス、酢酸鉛等がある。 前記酸化剤は、試験用具の保存期間中には酸化
指示薬を酸化しないが、試薬に使用するに際して
は、検体中に存在するアスコルビン酸等の還元性
物質による酸化指示薬の反応阻害を防止するに有
効なだけの量が使用される。具体的には、前記試
験用具中に含有されている酸化指示薬および検体
中に存在する還元性物質の量に影響されるが、上
述の如く試験紙の単位面積当り0.9〜15ｍmol／
m2の酸化剤が酸化剤膜中に含有されているのが良
い。また、酸化剤を試験紙に組み込むより、試験
紙と別に膜として重層させて存在させる方が試験
紙は安定である。経時的に酸化されて発色する酸
化指示薬には、ペルオキシダーゼまたはペルオキ
シダーゼ様反応によつて生成した酸素の測定系と
して酸化縮合物を生成する反応（フエノール系と
４−アミノアンチピリン等）、メタノールがホル
ムアルデヒドに酸化され、アセチルアセトンと縮
合物を生成する反応、ヨウ化カリウム等のヨウ化
物が酸化されてヨウ素を生成する反応等に関与す
るものまたはジアゾ化可能なものである。 酸化指示薬としては、ベンジジン系化合物、ヘ
テロ環式アジン類、フエノール類、グアヤク樹脂
成分等公知のものがある。一例を挙げると、例え
ばｏ−トリジン、ｍ−トリジン、ベンジジン、
３，3′，５，5′−テトラメチルベンジジン、ｏ−
メチルベンジジン、２，７−ジアミノフルオレン
またはこれらを種々の割合で含む混合物、４，
4′−ジアミノジフエニル、ｏ−フエニレンジアミ
ン、ｍ−フエニレンジアミン、ｐ−フエニレンジ
アミン、２，３−トリレンジアミン、２，４−ト
リレンジアミン、２，５−トリレンジアミン、
２，６−トリレンジアミン等の種々の置換フエニ
レンジアミン類、焦性没食子酸、没食子酸、フロ
ログルシノール、ヒドロキノン、ロイコインドフ
エノール等のフエノール類、グアイヤコール、ピ
リジン誘導体、置換アジン類、ロイコマライカイ
グリーン等がある。これらの酸化指示薬は通常２
〜250ｍmol／、好ましくは９〜50ｍmol／
の濃度で使用される。ジアゾ化合物としては、ｐ
−ジアゾベンゼンスルホン酸、２，６−ジクロル
ベンゼンジアゾニウム四フツ化ホウ酸塩、２−ト
リフロロメチルベンゼンジアゾニウム、テトラフ
ロロホウ酸塩、２，４−ジクロルベンゼンジアゾ
ニウム四フツ化ホウ酸塩等を挙げることができ
る。 本発明で使用されるヒドロペルオキシドとして
は、２，５−ジメチルヘキサン−２，５−ジヒド
ロペルオキシド、クメンヒドロペルオキシド、
２，５−ジヒドロペルオキシド、ジイソプロピル
ベンゼンヒドロペルオキシド、ｔ−ブチルヒドロ
ペルオキシド、ｐ−メンタンヒドロペルオキシ
ド、４−メチルフエニルイソプロピルヒドロペル
オキシド等があり、特に２，５−ジメルチルシク
ロヘキサン−２，５−ジヒドロペルオキシドおよ
びクメンヒドロペルオキシドが比較的分解率の低
い好ましいヒドロペルオキシドである。 本発明による試験用具は、プラチツクステイツ
ク等に単独にあるいは複数取りつけた試験片とし
て使用される。これらの試験片に取りつけられた
本発明の試験用具には、必要により緩衝剤や潤滑
剤が配合される。例えば試験片を体液中に浸漬し
た際のPH値を４〜８、好ましくは５〜７に保つた
めの緩衝剤としては、例えばクエン酸−クエン酸
ナトリウム、酒石酸−酒石酸ナトリウム、リンゴ
酸−ホウ砂、フタル酸水素カリウム−フタル酸ジ
カリウム、コハク酸水素ナトリウム−コハク酸ジ
ナトリウム等がある。 また、試験片を体液中に浸漬したとき、該体液
が均一に湿潤するように使用される湿潤剤として
は、ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナト
リウム、テトラドデシル硫酸ナトリウム等のアル
キル硫酸塩、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリ
ウム等のアルキルベンゼンスルホン酸塩、ジオク
チルスルホコハク酸ナトリウム、ジヘプチルスル
ホコハク酸ナトリウム等のジアルキルスルホコハ
ク酸塩等の界面活性剤等がある。 また、本発明の試験用具においては、ヘモグロ
ビンにおけるペルオキシダーゼ活性等を増強させ
る薬剤を配合してもよい。代表的な増強剤として
は、キノリンおよびその誘導体、例えばキニー
ネ、シンコニン、６−メトキシキノリン、キナル
ジン、８−アミノ−６−メトキシキノリン、２−
キノリノール、イソキノリン、ベンゾ［ｆ］キノ
リン、３−アミノキノリン等がある。これらの増
強剤が存在すると、通常醸化反応速度が促進さ
れ、かつ酸化された色原体の呈色強度が促進さ
れ、そして試験片の感度は高められる。 また、本発明からの薬剤の流出を防止するため
に、粘稠剤を使用してもよい。代表的な粘稠剤と
しては、ポルビニルアルコール、ポリビニルピロ
リドン、ポリエチレングリコール、ポリアクリル
酸塩、ポリアクリルアミド、ポリヒドロキシエチ
ルメタクリレート、ポリヒドロキシエチルアクリ
レート、カルボキシメチルセルロース等の重合
体、ゼラチン、アラビアゴム等がある。 前記薬剤は、溶媒、例えばベンゼン、トルエ
ン、キシレン、メタノール、エタノール、イソプ
ロパノール、アセトン、メチルエチルケトン、ク
ロロホルム、四塩化炭素、水等に溶解させて該溶
液を基材に含浸させて乾燥して得られる試験紙の
形で使用される。このような試験紙は常法により
製造される。 試験紙基材としては、濾紙、ガラス繊維、プラ
スチツク素材からなる不織布等があり、含浸液と
反応したりあるいは含浸液に溶解したりせず、か
つ吸収性を有しているものであればよい。 本発明による試験用具は、下記のように種々の
診断に使用される。 ヒドロペルオキシド又は前反応によつて生ずる
過酸化水素もしくは他のヒドロペルオキシドを、
ペルオキシダーゼ又はペルオキシダーゼ様反応を
用いて測定する試験紙、またはペルオキシダーゼ
もしくはペルオキシダーゼ作用物質を測定する試
験紙、あるいはジアゾカツプリング反応を利用し
て測定する試験紙の試験対象の例として、尿にお
いては、グルコース、尿酸、ヘモグロビン、ミオ
グロビン、亜硝酸塩、ビリルビンなどがあり、血
液においては、グルコース、尿酸、コレステロー
ル、トリグリセライド、遊離脂肪酸、ヘモグロビ
ン、ビリルビンなどがある。 発明の具体的作用 上述の如く本発明の試験用具はステイツク状、
試験紙状などいかなる形状で使用しても良いが、
第１図に示すようなステイツク状に構成し、還元
性物質がアスコルビン酸の例につき、その作用を
説明する。 本発明の試験紙用具は、ヒドロペルオキシドま
たはヒドロペルオキシド生成に関与する反応にか
かる試験紙、ペルオキシダーゼまたはペルオキシ
ダーゼ作用性物質を測定するための試験紙、また
はジアゾカツプリング反応を利用して測定する試
験紙上に検体試料中の還元性物質の悪影響を除去
するための酸化剤膜を装着したものである。 したがつて、尿、血液などの被検体液は、まず
上記酸化剤膜を浸透し、この時被検体液中の還元
性物質（アスコルビン酸など）は上記酸化剤によ
り酸化された上で、次の試験紙に至り、試験紙を
呈色させる。したがつて、被検体液中に還元性物
質が含まれていても測定結果に悪影響を与えな
い。 被検体液中の還元性物質（アスコルビン酸な
ど）および酸化剤膜中の酸化剤は次のような作用
により試験結果に影響を及ぼす。 (1) ヒドロペルオキシドまたはヒドロペルオキシ
ド生成に関与する反応 (1‐1) アスコルビン酸が共存するとH2O2より過
酸化酵素によつて生成した発生期の［０］が
アスコルビン酸の酸化のために消費され次の
発色反応が阻害される。 (1‐2) 試験紙中に上記のような酸化剤を適当量含
ませておくと発生期の［０］が発生する前に
アスコルビン酸との酸化還元反応が先に進行
するためアスコルビン酸による反応阻害がな
い。 (2) ペルオキシダーゼまたはペルオキシダーゼ作
用性物質 （１−１）（１−２）と同じ。 (3) ジアゾカツプリング反応 ジアゾカツプリング反応は酸化反応であるた
め、アスコルビン酸が存在すると反応が阻害さ
れる。酸化剤があれば、アスコルビン酸との酸
化還元反応の方が速いため阻害を受けない。 つぎに、実施例をあげて本発明をさらに具体的
に説明する。 各試験を行うにあたり、第１図および第２図に
示すような各試験用具を作成した。まず2.5％メ
チルセルロース液に酸化剤としてNaIO4を１mg／
mlになるように溶解して酸化剤膜液とした。メツ
シユのナイロンメツシユをこの液に浸漬し、乾燥
させ、酸化剤膜を得た。この酸化剤膜は以後の説
明では理解し易いようにアスコルビン酸除去膜と
いう。この膜を第１図および第２図に示すように
各試験紙を含む形でステイツク上に接着した。こ
のアスコルビン酸除去膜は試験紙の単位面積当り
２ｍmol／m2の酸化剤を含有するものであつた。 実施例 １ ブドウ糖試験 ブドウ糖試験紙に上記方法で得たアスコルビン
酸除去膜を重層した第１図および第２図に示す試
験用具を、ブドウ糖を含有しない尿、ブドウ糖
150mg／dl含有する尿にいずれもアスコルビン酸
50mg／dl含む試料中に浸漬し、アスコルビン酸除
去膜のないものと対比したところ、第１表の結果
が得られた。
よつて生ずる過酸化水素もしくは他のヒドロペル
オキシドを、ペルオキシダーゼまたはペルオキシ
ダーゼ様反応を用いて測定する試験紙、またはペ
ルオキシダーゼもしくはペルオキシダーゼ作用物
質を検出する試験紙、またはジアゾカツプリング
反応を用いて測定する試験紙に対する検体中に存
在することのある還元性物質の影響を除去した試
験用具に関するもので、特に尿および血液中のブ
ドウ糖またはビリルビンの検出用ならびに尿、糞
便および体液中の血液の検出用、さらに微生物に
起因する尿中の亜硝酸塩の検出用の改良された試
験用具に関するものである。 先行技術 最近、迅速診断剤は、医学的プラクテイスおよ
び臨床試験において著しく重要になつており、吸
収性担持体をベースとする迅速診断剤は重要であ
る。多くの場合、紙であるこの吸収性担持体に検
出反応に必要な薬剤を含浸させ、これを体液中に
浸漬すると、検出すべき物質が存在する場合には
呈色反応を呈する。医学的診断で非常に重要にな
つた迅速診断剤としては、例えば尿および血液中
のブドウ糖またはビリルビンの検出用ならびに
尿、糞便および体液中の潜血の検出用、さらに微
生物に起因する尿中の亜硝酸の検出用迅速診断剤
がある。 この試験は、つぎの原理に基いている。 (1) ヒドロペルオキシドまたは過酸化水素の生成
に関する例 この例としては検体中に含まれるグルコー
ス、尿酸、コレステロール、トリグリセライ
ド、遊離脂肪酸などがあり、その原理はグルコ
ースを代表例として説明する。 すなわち、体液中のグルコース（ブドウ糖）
を検出する際には、グルコースはグルコースオ
キシダーゼ（GOD）によつてグルコン酸に酸
化され、その際に空中酸素は過酸化水素に還元
される。この過酸化水素は、ペルオキシダーゼ
またはペルオキシダーゼ作用性物質の存在下で
酸化指示薬を酸化・発色せしめ、その色の濃度
が存在するグルコース量の尺度である。 (2) ペルオキシダーゼまたはペルオキシダーゼ作
用性物質の例 この例としては検体中に含まれるヘモグロビ
ン（潜血）、ミオグロピン（腎疾患）などがあ
り、その原理はヘモグロビンを例にとつて説明
する。血液を検出する際には、ヘモグロビンの
ペルオキシダーゼ様活性によりあらかじめ試験
紙などに含まれているペルオキシドから酸素が
発生し酸化指示薬を発色せしめる。 (3) ジアゾカップリング反応の例 この例としては、検体中に含まれる亜硝酸塩
（細菌尿）、ビリルビル（たんのう炎など）など
があり、その原理はジアゾ化可能な試薬が上記
検体中物質によりジアゾ化され呈色する。 上記のごとき迅速診断剤は種々知られている。 上記(1)、(2)については、特開昭48−1120、特公
昭58−3679、特公昭56−43238、特公昭57−
53539、特開昭53−16692号などに開示され、上記
(3)については、米国特許第3415717号、同3547780
号、同3718543号、特開昭58−134067、特公昭48
−1792、同49−27719、同53−27964、同53−
43431、同53−27964、同54−13508、同55−26426
などに開示されている。 しかるに、最近の加工食品、清涼飲料等にはビ
タミンＣとして多量のアスコルビン酸が含まれて
おり、また健康管理の点からもビタミンＣ剤等が
多量服用されているので、血液中に多量含まれて
いるだけでなく、余分なビタミンＣ剤は尿中に含
有されて体外に排泄されることになる。このた
め、前記のごとき診断剤を用いて尿や血液の試験
を行なう場合、アスコルビル酸は還元性が強いた
め、ペルオキシダーゼあるいはペルオキシダーゼ
作用物質により生成した酸素がアスコルビン酸と
の酸化還元反応に消費され、酸化指示薬との反応
が阻害され、充分な発色が得られないという問題
点が生じてきた。また、酸化反応であるジアゾカ
ツプリング反応を利用した試験紙についても同様
である。 このようなアスコルビン酸などの検体中の還元
性物質の試験結果への悪影響については、上記
(1)、(2)については上記刊行物においても指摘はさ
れている。また、(3)については上記刊行物に指摘
されていない。しかし、いずれの場合において
も、検体中の還元性物質の試験への悪影響を防止
する方策は見い出されていない。 発明の目的 したがつて、本発明は、ヒドロペルオキシドま
たは前反応によつて生ずる過酸化水素もしくは他
のヒドロペルオキシドを、ペルオキシダーゼまた
はペルオキシダーゼ様反応を用いて測定する試験
紙、またはペルオキシダーゼもしくはペルオキシ
ダーゼ作用物質を検出する試験紙、またはジアゾ
カツプリング反応を用いて測定する試験紙に対す
る検体中に存在することのある還元性物質の影響
を除去する試験用具を提供することを目的とす
る。 すなわち、本発明は、ペルオキシダーゼ反応ま
たはペルオキシダーゼ様反応あるいはジアゾカツ
プリング反応を利用して検体中に存在する被測定
物質を検出測定するための前記被測定物質の濃度
に対応した呈色をする指示薬を含む試験紙と、前
記試験紙上に前記試験紙の単位面積当りの酸化剤
の量として0.9〜15ｍmol／m2含有する酸化剤膜
とを備えたことを特徴とする試験用具を提供する
ものである。 すなわち、被測定物質は指示薬に接触する前に
酸化剤膜と接触するので指示薬に接触する被測定
物質は還元性物質の影響が少ない。 また、本発明は、酸化剤が酸素酸、その塩およ
び酸化性金属塩類よりなる群から選ばれたもので
ある試験用具である。さらに、本発明は、酸素酸
またはその塩がMIXO、MIXO3、MIXO4、およ
びMI 3H2XO6（ただし、MIは一価の陽イオンとな
り得る原子であり、またＸはハロゲン原子であ
る。）よりなる群より選ばれたものである試験用
具である。また、本発明は、酸素酸またはその塩
がMIIO4（ただし、MIは前記のとおりである。）、
特にNaIO4またはHIO4である試験用具である。 さらに、本発明は、酸化性金属塩類がエチレン
ジアミン四酢酸第二鉄（EDTA−鉄〔〕）、塩
化第二鉄、塩化第一銅、硫酸銅、酢酸銅、酢酸水
銀、酢酸ビスマスおよび酢酸鉛よりなる群から選
ばれたものである試験用具である。 さらに本発明は、酸化剤膜が、ナイロン等のメ
ツシユに酸化剤を付着させた膜である試験用具で
ある。 発明の具体的構成 本発明による試験用具は、ヒドロペルオキシド
または前反応によつて生じる過酸化水素もしくは
他のヒドロペルオキシドを、ペルオキシダーゼま
たはペルオキシダーゼ様反応を用いて測定する試
験紙、または、ペルオキシダーゼもしくはペルオ
キシダーゼ作用物質を測定する試験紙、あるいは
ジアゾカツプリング反応を用いて測定する試験紙
に対する検体中に存在することのある還元性物質
の影響を除去するため試験紙上に酸化剤膜を装着
したものである。 上記酸化剤膜は、透明または半透明（すくなく
とも検体液に濡れた場合）で、吸水性担持体の色
の変化が透かして見えるものであり、メツシユ状
または複数のピンホールのある膜基材に還元性物
質と反応して還元性を除去する物質である酸化剤
を含浸またはコーテイングまたは付着したもので
ある。膜基材としては、プラスチツク素材からな
る不織布や多孔質膜、さらにガラス繊維、半透
膜、濾紙等がある。 上記酸化剤膜中の酸化剤の量は試験紙の単位面
積当りの量として0.9〜15ｍmol／m2とするのが
良い。この量が0.9ｍmol／m2未満の場合には、
酸化剤の量が少なすぎて検体中の還元性物質を十
分に酸化することができず、また15ｍmol／m2を
越えると、検体中に還元性物質がない場合でも試
験紙が呈色、すなわち、陽性となつてしまう。 本発明による試験用具１の構成例を第１図及び
第２図に側面図で示す。第１図においては、試験
紙２はステイツク３上に酸化剤膜４により支持装
着されており、第２図においては試験紙２と酸化
剤膜４とを重層し、試験紙固定用のメツシユ５に
てステイツク３上に支持装着されており、検体の
尿、血液などの体液は酸化膜剤４を浸透し、ここ
で検体中の還元性物質は酸化された上で試験紙に
至り、検体中の還元性物質により影響を受けるこ
となく、試験紙は呈色するから、検体の正常な検
査を行うことができる。 検体中の還元性物質の酸化のために配合される
酸化剤としては、酸素酸、その塩および酸化性金
属塩類などが好ましく、以下にその代表例を挙げ
る。 酸素酸またはその塩としては、MIXO、MI
XO3、MIXO4、MI 3H2XO6（ただし、MIは一価の
陽イオンとなり得る原子、例えばNa、Ｋ、Ｈ等
であり、またＸはハロゲン原子、例えば、Ｉ、
Br、Cl等である）等がある。一例を挙げると、
例えばHClO、NaClO、KClO、HBrO、
NaBrO、KBrO、HIO、NaIO、KIO、HClO3、
NaClO3、KClO3、HBrO3、NaBrO3、KBrO3、
HIO3、NalO3、KIO3、HClO4、NaClO4、
KClO4、HBrO4、NaBrO4、KBrO4、HIO4、
NaIO4、KIO4、Na3H2IO6、K3H2IO6等があり、
好ましくはMIXO4であり、さらに好ましくはMI
IO4であり、最も好ましくはNaIO4およびHIO4で
ある。酸化性金属塩類としては、エチレンジアミ
ン四酢酸第二鉄（EDTA−鉄［］）、塩化第二
鉄、塩化第一銅、硫酸銅、酢酸銅、酢酸水銀、酢
酸ビスマス、酢酸鉛等がある。 前記酸化剤は、試験用具の保存期間中には酸化
指示薬を酸化しないが、試薬に使用するに際して
は、検体中に存在するアスコルビン酸等の還元性
物質による酸化指示薬の反応阻害を防止するに有
効なだけの量が使用される。具体的には、前記試
験用具中に含有されている酸化指示薬および検体
中に存在する還元性物質の量に影響されるが、上
述の如く試験紙の単位面積当り0.9〜15ｍmol／
m2の酸化剤が酸化剤膜中に含有されているのが良
い。また、酸化剤を試験紙に組み込むより、試験
紙と別に膜として重層させて存在させる方が試験
紙は安定である。経時的に酸化されて発色する酸
化指示薬には、ペルオキシダーゼまたはペルオキ
シダーゼ様反応によつて生成した酸素の測定系と
して酸化縮合物を生成する反応（フエノール系と
４−アミノアンチピリン等）、メタノールがホル
ムアルデヒドに酸化され、アセチルアセトンと縮
合物を生成する反応、ヨウ化カリウム等のヨウ化
物が酸化されてヨウ素を生成する反応等に関与す
るものまたはジアゾ化可能なものである。 酸化指示薬としては、ベンジジン系化合物、ヘ
テロ環式アジン類、フエノール類、グアヤク樹脂
成分等公知のものがある。一例を挙げると、例え
ばｏ−トリジン、ｍ−トリジン、ベンジジン、
３，3′，５，5′−テトラメチルベンジジン、ｏ−
メチルベンジジン、２，７−ジアミノフルオレン
またはこれらを種々の割合で含む混合物、４，
4′−ジアミノジフエニル、ｏ−フエニレンジアミ
ン、ｍ−フエニレンジアミン、ｐ−フエニレンジ
アミン、２，３−トリレンジアミン、２，４−ト
リレンジアミン、２，５−トリレンジアミン、
２，６−トリレンジアミン等の種々の置換フエニ
レンジアミン類、焦性没食子酸、没食子酸、フロ
ログルシノール、ヒドロキノン、ロイコインドフ
エノール等のフエノール類、グアイヤコール、ピ
リジン誘導体、置換アジン類、ロイコマライカイ
グリーン等がある。これらの酸化指示薬は通常２
〜250ｍmol／、好ましくは９〜50ｍmol／
の濃度で使用される。ジアゾ化合物としては、ｐ
−ジアゾベンゼンスルホン酸、２，６−ジクロル
ベンゼンジアゾニウム四フツ化ホウ酸塩、２−ト
リフロロメチルベンゼンジアゾニウム、テトラフ
ロロホウ酸塩、２，４−ジクロルベンゼンジアゾ
ニウム四フツ化ホウ酸塩等を挙げることができ
る。 本発明で使用されるヒドロペルオキシドとして
は、２，５−ジメチルヘキサン−２，５−ジヒド
ロペルオキシド、クメンヒドロペルオキシド、
２，５−ジヒドロペルオキシド、ジイソプロピル
ベンゼンヒドロペルオキシド、ｔ−ブチルヒドロ
ペルオキシド、ｐ−メンタンヒドロペルオキシ
ド、４−メチルフエニルイソプロピルヒドロペル
オキシド等があり、特に２，５−ジメルチルシク
ロヘキサン−２，５−ジヒドロペルオキシドおよ
びクメンヒドロペルオキシドが比較的分解率の低
い好ましいヒドロペルオキシドである。 本発明による試験用具は、プラチツクステイツ
ク等に単独にあるいは複数取りつけた試験片とし
て使用される。これらの試験片に取りつけられた
本発明の試験用具には、必要により緩衝剤や潤滑
剤が配合される。例えば試験片を体液中に浸漬し
た際のPH値を４〜８、好ましくは５〜７に保つた
めの緩衝剤としては、例えばクエン酸−クエン酸
ナトリウム、酒石酸−酒石酸ナトリウム、リンゴ
酸−ホウ砂、フタル酸水素カリウム−フタル酸ジ
カリウム、コハク酸水素ナトリウム−コハク酸ジ
ナトリウム等がある。 また、試験片を体液中に浸漬したとき、該体液
が均一に湿潤するように使用される湿潤剤として
は、ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナト
リウム、テトラドデシル硫酸ナトリウム等のアル
キル硫酸塩、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリ
ウム等のアルキルベンゼンスルホン酸塩、ジオク
チルスルホコハク酸ナトリウム、ジヘプチルスル
ホコハク酸ナトリウム等のジアルキルスルホコハ
ク酸塩等の界面活性剤等がある。 また、本発明の試験用具においては、ヘモグロ
ビンにおけるペルオキシダーゼ活性等を増強させ
る薬剤を配合してもよい。代表的な増強剤として
は、キノリンおよびその誘導体、例えばキニー
ネ、シンコニン、６−メトキシキノリン、キナル
ジン、８−アミノ−６−メトキシキノリン、２−
キノリノール、イソキノリン、ベンゾ［ｆ］キノ
リン、３−アミノキノリン等がある。これらの増
強剤が存在すると、通常醸化反応速度が促進さ
れ、かつ酸化された色原体の呈色強度が促進さ
れ、そして試験片の感度は高められる。 また、本発明からの薬剤の流出を防止するため
に、粘稠剤を使用してもよい。代表的な粘稠剤と
しては、ポルビニルアルコール、ポリビニルピロ
リドン、ポリエチレングリコール、ポリアクリル
酸塩、ポリアクリルアミド、ポリヒドロキシエチ
ルメタクリレート、ポリヒドロキシエチルアクリ
レート、カルボキシメチルセルロース等の重合
体、ゼラチン、アラビアゴム等がある。 前記薬剤は、溶媒、例えばベンゼン、トルエ
ン、キシレン、メタノール、エタノール、イソプ
ロパノール、アセトン、メチルエチルケトン、ク
ロロホルム、四塩化炭素、水等に溶解させて該溶
液を基材に含浸させて乾燥して得られる試験紙の
形で使用される。このような試験紙は常法により
製造される。 試験紙基材としては、濾紙、ガラス繊維、プラ
スチツク素材からなる不織布等があり、含浸液と
反応したりあるいは含浸液に溶解したりせず、か
つ吸収性を有しているものであればよい。 本発明による試験用具は、下記のように種々の
診断に使用される。 ヒドロペルオキシド又は前反応によつて生ずる
過酸化水素もしくは他のヒドロペルオキシドを、
ペルオキシダーゼ又はペルオキシダーゼ様反応を
用いて測定する試験紙、またはペルオキシダーゼ
もしくはペルオキシダーゼ作用物質を測定する試
験紙、あるいはジアゾカツプリング反応を利用し
て測定する試験紙の試験対象の例として、尿にお
いては、グルコース、尿酸、ヘモグロビン、ミオ
グロビン、亜硝酸塩、ビリルビンなどがあり、血
液においては、グルコース、尿酸、コレステロー
ル、トリグリセライド、遊離脂肪酸、ヘモグロビ
ン、ビリルビンなどがある。 発明の具体的作用 上述の如く本発明の試験用具はステイツク状、
試験紙状などいかなる形状で使用しても良いが、
第１図に示すようなステイツク状に構成し、還元
性物質がアスコルビン酸の例につき、その作用を
説明する。 本発明の試験紙用具は、ヒドロペルオキシドま
たはヒドロペルオキシド生成に関与する反応にか
かる試験紙、ペルオキシダーゼまたはペルオキシ
ダーゼ作用性物質を測定するための試験紙、また
はジアゾカツプリング反応を利用して測定する試
験紙上に検体試料中の還元性物質の悪影響を除去
するための酸化剤膜を装着したものである。 したがつて、尿、血液などの被検体液は、まず
上記酸化剤膜を浸透し、この時被検体液中の還元
性物質（アスコルビン酸など）は上記酸化剤によ
り酸化された上で、次の試験紙に至り、試験紙を
呈色させる。したがつて、被検体液中に還元性物
質が含まれていても測定結果に悪影響を与えな
い。 被検体液中の還元性物質（アスコルビン酸な
ど）および酸化剤膜中の酸化剤は次のような作用
により試験結果に影響を及ぼす。 (1) ヒドロペルオキシドまたはヒドロペルオキシ
ド生成に関与する反応 (1‐1) アスコルビン酸が共存するとH2O2より過
酸化酵素によつて生成した発生期の［０］が
アスコルビン酸の酸化のために消費され次の
発色反応が阻害される。 (1‐2) 試験紙中に上記のような酸化剤を適当量含
ませておくと発生期の［０］が発生する前に
アスコルビン酸との酸化還元反応が先に進行
するためアスコルビン酸による反応阻害がな
い。 (2) ペルオキシダーゼまたはペルオキシダーゼ作
用性物質 （１−１）（１−２）と同じ。 (3) ジアゾカツプリング反応 ジアゾカツプリング反応は酸化反応であるた
め、アスコルビン酸が存在すると反応が阻害さ
れる。酸化剤があれば、アスコルビン酸との酸
化還元反応の方が速いため阻害を受けない。 つぎに、実施例をあげて本発明をさらに具体的
に説明する。 各試験を行うにあたり、第１図および第２図に
示すような各試験用具を作成した。まず2.5％メ
チルセルロース液に酸化剤としてNaIO4を１mg／
mlになるように溶解して酸化剤膜液とした。メツ
シユのナイロンメツシユをこの液に浸漬し、乾燥
させ、酸化剤膜を得た。この酸化剤膜は以後の説
明では理解し易いようにアスコルビン酸除去膜と
いう。この膜を第１図および第２図に示すように
各試験紙を含む形でステイツク上に接着した。こ
のアスコルビン酸除去膜は試験紙の単位面積当り
２ｍmol／m2の酸化剤を含有するものであつた。 実施例 １ ブドウ糖試験 ブドウ糖試験紙に上記方法で得たアスコルビン
酸除去膜を重層した第１図および第２図に示す試
験用具を、ブドウ糖を含有しない尿、ブドウ糖
150mg／dl含有する尿にいずれもアスコルビン酸
50mg／dl含む試料中に浸漬し、アスコルビン酸除
去膜のないものと対比したところ、第１表の結果
が得られた。
【表】
実施例 ２
潜血試験
潜血試験紙に上記方法で得たアスコルビン酸除
去膜を重層した第１図および第２図に示す試験用
具を、ヘモグロビンを含有しない尿、ヘモグロビ
ン15nｇ／dlを含有する尿にいずれもアスコルビ
ン酸50mg／dlを含む試料中に浸漬し、アスコルビ
ン酸除去膜にないものと対比したところ、第２表
の結果が得られた。
去膜を重層した第１図および第２図に示す試験用
具を、ヘモグロビンを含有しない尿、ヘモグロビ
ン15nｇ／dlを含有する尿にいずれもアスコルビ
ン酸50mg／dlを含む試料中に浸漬し、アスコルビ
ン酸除去膜にないものと対比したところ、第２表
の結果が得られた。
【表】
実施例 ３
ビリルビン試験
ビリルビン試験紙に上記方法で得たアスコルビ
ン酸除去膜を重層した第１図および第２図を示す
試験用具を、ビリルビンを含有しない尿、ビリル
ビン0.5mg／dlを含有する尿にいずれもアスコル
ビン酸50mg／dlを含む試料中に浸漬し、アスコル
ビン酸除去膜のないものと対比したところ、第３
表の結果が得られた。
ン酸除去膜を重層した第１図および第２図を示す
試験用具を、ビリルビンを含有しない尿、ビリル
ビン0.5mg／dlを含有する尿にいずれもアスコル
ビン酸50mg／dlを含む試料中に浸漬し、アスコル
ビン酸除去膜のないものと対比したところ、第３
表の結果が得られた。
【表】
実施例 ４
亜硝酸試験
亜硝酸塩試験紙に上記方法で得たアスコルビン
酸除去膜を重層した第１図および第２図に示す試
験用具を、亜硝酸塩を含有しない尿、亜硝酸塩
（イオン）0.1mg／dlを含有する尿にいずれもアス
コルビン酸50mg／dlを含む試料中に浸漬し、アス
コルビン酸除去膜のないものと対比したところ、
第４表の結果が得られた。
酸除去膜を重層した第１図および第２図に示す試
験用具を、亜硝酸塩を含有しない尿、亜硝酸塩
（イオン）0.1mg／dlを含有する尿にいずれもアス
コルビン酸50mg／dlを含む試料中に浸漬し、アス
コルビン酸除去膜のないものと対比したところ、
第４表の結果が得られた。
【表】
比較例
2.5％メチルセルロース液に酸化剤として
NaIO4を4.5mg／mlになるように溶解して酸化剤
膜液とした。ナイロンメツシユをこの液に浸漬
し、乾燥させ酸化剤膜を得た。この酸化剤膜液を
第１図および第２図に示すようにブドウ糖試験紙
上に重層した。この酸化剤膜は試験紙単位面積当
り21ｍmol／m2の酸化剤を含有するものであつ
た。 上記、試験用具を、ブドウ糖を含有しない尿、
ブドウ糖150mg／dl含有する尿にいずれもアスコ
ルビン酸50mg／dlを含む試料中に浸漬したとこ
ろ、第５表の結果が得られた。 第５表の結果からわかるように、酸化剤が過剰
であると、望ましくない。
NaIO4を4.5mg／mlになるように溶解して酸化剤
膜液とした。ナイロンメツシユをこの液に浸漬
し、乾燥させ酸化剤膜を得た。この酸化剤膜液を
第１図および第２図に示すようにブドウ糖試験紙
上に重層した。この酸化剤膜は試験紙単位面積当
り21ｍmol／m2の酸化剤を含有するものであつ
た。 上記、試験用具を、ブドウ糖を含有しない尿、
ブドウ糖150mg／dl含有する尿にいずれもアスコ
ルビン酸50mg／dlを含む試料中に浸漬したとこ
ろ、第５表の結果が得られた。 第５表の結果からわかるように、酸化剤が過剰
であると、望ましくない。
【表】
なお、上記実施例および比較例に用いた各試験
紙は下記のようにして作成した。以下の試験紙作
成法においては、まずＡ液を含漬後乾燥し、次い
で、Ｂ液、Ｃ液の順で同じ操作をしたものであ
る。 (a) ブドウ糖試験紙 Ａ液 クエン酸緩衝液 100ml グルコースオキシダーゼ 300mg ペルオキシダーゼ 50mg Ｂ液 オルトトリジン 2.5ｇ アセトン 100ml (b) 亜硝酸塩試験紙 Ａ液 アルサニル酸 0.8ｇ メタノール 100ml Ｂ液 メフチルエチレンジアミン・2HCl 0.9ｇ メタノール 100ml (c) ビリルビン試験紙 Ａ液 ｐ−ジアゾベンゼルスルホン酸 300mg メタりん酸 15ｇ 蒸留水 100ml Ｂ液 セチルピリジニウムクロライド 3.5ｇ エタノール 100ml (d) 潜血試験紙 Ａ液 ２，５−ジメチルヘキサン−２，５−ジヒド
ロペルオキシド 1.2ｇ エタノール 100ml Ｂ液 クエン酸ナトリウム ９ｇ クエン酸 １ｇ サポニン 100mg 蒸留水 100ml Ｃ液 オルトトリジン 1.2ｇ ベンゼン 100ml 発明の具体的効果 以上述べたように、本発明による試験剤は、ヒ
ドロペルオキシドまたは前反応によつて生ずる過
酸化水素もしくは他のヒドロペルオキシドを、ペ
ルオキシダーゼまたはペルオキシダーゼ様反応を
用いて測定する試験紙、またはペルオキシダーゼ
もしくはペルオキシダーゼ作用物質を測定する試
験紙、あるいはジアゾカツプリング反応を用いて
測定する試験紙上に酸化剤膜を装着した試験用具
において、上記ヒドロペルオキシド、ペルオキシ
ダーゼ作用物質あるいはジアゾ化可能な物質より
なる群から選ばれたそれぞれの物質の反応下にお
いて酸化されて発色する酸化指示薬と、有効量の
酸化剤とを有してなるものであるから、尿や血液
等の被検液体中にアスコルビン酸、ゲンチジン酸
等の還元性物質が存在していても、該還元性物質
は前記酸化剤により酸化されるので、ペルオキシ
ダーゼまたは他のペルオキシダーゼ様反応あるい
はジアゾカツプリング反応が阻害されることはな
い。しかも、前記酸化剤を予め酸化剤膜中に共存
させておいてもペルオキシダーゼ又は他のペルオ
キシダーゼ様反応あるいはジアゾカツプリング反
応が該酸化剤に起因して進むことはなく、特に酸
化剤が酸素酸、その塩もしくは酸化性金属塩類で
ある場合にはその効果が著しく、その中でも過ヨ
ウ素酸またはその塩の場合にはその効果が最も大
である。また、酸化剤を試験紙の単位面積当り
0.9〜15ｍmol／m2含有させた酸化剤膜を使用し
た場合には、特に優れた効果を発揮する。さら
に、前記酸化剤は酸化剤膜として、酸化指示薬を
含んだ試験紙とは分離されているため試験用具と
しての経時的安定性が高くなる。
紙は下記のようにして作成した。以下の試験紙作
成法においては、まずＡ液を含漬後乾燥し、次い
で、Ｂ液、Ｃ液の順で同じ操作をしたものであ
る。 (a) ブドウ糖試験紙 Ａ液 クエン酸緩衝液 100ml グルコースオキシダーゼ 300mg ペルオキシダーゼ 50mg Ｂ液 オルトトリジン 2.5ｇ アセトン 100ml (b) 亜硝酸塩試験紙 Ａ液 アルサニル酸 0.8ｇ メタノール 100ml Ｂ液 メフチルエチレンジアミン・2HCl 0.9ｇ メタノール 100ml (c) ビリルビン試験紙 Ａ液 ｐ−ジアゾベンゼルスルホン酸 300mg メタりん酸 15ｇ 蒸留水 100ml Ｂ液 セチルピリジニウムクロライド 3.5ｇ エタノール 100ml (d) 潜血試験紙 Ａ液 ２，５−ジメチルヘキサン−２，５−ジヒド
ロペルオキシド 1.2ｇ エタノール 100ml Ｂ液 クエン酸ナトリウム ９ｇ クエン酸 １ｇ サポニン 100mg 蒸留水 100ml Ｃ液 オルトトリジン 1.2ｇ ベンゼン 100ml 発明の具体的効果 以上述べたように、本発明による試験剤は、ヒ
ドロペルオキシドまたは前反応によつて生ずる過
酸化水素もしくは他のヒドロペルオキシドを、ペ
ルオキシダーゼまたはペルオキシダーゼ様反応を
用いて測定する試験紙、またはペルオキシダーゼ
もしくはペルオキシダーゼ作用物質を測定する試
験紙、あるいはジアゾカツプリング反応を用いて
測定する試験紙上に酸化剤膜を装着した試験用具
において、上記ヒドロペルオキシド、ペルオキシ
ダーゼ作用物質あるいはジアゾ化可能な物質より
なる群から選ばれたそれぞれの物質の反応下にお
いて酸化されて発色する酸化指示薬と、有効量の
酸化剤とを有してなるものであるから、尿や血液
等の被検液体中にアスコルビン酸、ゲンチジン酸
等の還元性物質が存在していても、該還元性物質
は前記酸化剤により酸化されるので、ペルオキシ
ダーゼまたは他のペルオキシダーゼ様反応あるい
はジアゾカツプリング反応が阻害されることはな
い。しかも、前記酸化剤を予め酸化剤膜中に共存
させておいてもペルオキシダーゼ又は他のペルオ
キシダーゼ様反応あるいはジアゾカツプリング反
応が該酸化剤に起因して進むことはなく、特に酸
化剤が酸素酸、その塩もしくは酸化性金属塩類で
ある場合にはその効果が著しく、その中でも過ヨ
ウ素酸またはその塩の場合にはその効果が最も大
である。また、酸化剤を試験紙の単位面積当り
0.9〜15ｍmol／m2含有させた酸化剤膜を使用し
た場合には、特に優れた効果を発揮する。さら
に、前記酸化剤は酸化剤膜として、酸化指示薬を
含んだ試験紙とは分離されているため試験用具と
しての経時的安定性が高くなる。
第１図および第２図は、本発明による試験用具
の２つの実施例を示す側面図である。 符号の説明、１……本発明の試験用具、２……
試験紙、３……ステイツク、４……酸化剤膜、５
……試験紙固定用メツシユ。
の２つの実施例を示す側面図である。 符号の説明、１……本発明の試験用具、２……
試験紙、３……ステイツク、４……酸化剤膜、５
……試験紙固定用メツシユ。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ ペルオキシダーゼ反応またはペルオキシダー
ゼ様反応あるいはジアゾカツプリング反応を利用
して検体中に存在する被測定物質を検出測定する
ための、前記被測定物質の濃度に対応した呈色を
する指示薬を含む試験紙と、前記試験紙上に前記
試験紙の単位面積当りの酸化剤の量として0.9〜
15ｍmol／m2含有する酸化剤膜とを備えたことを
特徴とする試験用具。 ２ 前記酸化剤が酸素酸、その塩および酸化性金
属塩類よりなる群から選ばれたものである特許請
求の範囲第１項に記載の試験用具。 ３ 前記酸素酸またはその塩が、MIXO、MI
XO3、MIXO4、MI 3H2XO6（ただし、MIは一価の
陽イオンとなり得る原子であり、またＸはハロゲ
ン原子である。）よりなる群から選ばれたもので
ある特許請求の範囲第２項に記載の試験用具。 ４ 前記酸素酸またはその塩がMIIO4（ただし、
MIは前記のとおりである。）である特許請求の範
囲第３項に記載の試験用具。 ５ 前記MIIO4がNaIO4またはHIO4である特許
請求の範囲第４項に記載の試験用具。 ６ 前記酸化性金属塩類がエチレンジアミン四酢
酸第二鉄（EDTA−鉄〔〕）、塩化第二鉄、塩
化第一銅、硫酸銅、酢酸銅、酢酸水銀、酢酸ビス
マスおよび酢酸鉛よりなる群から選ばれたもので
ある特許請求の範囲第２項に記載の試験用具。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7991584A JPS60224063A (ja) | 1984-04-20 | 1984-04-20 | 試験用具 |
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