JPH041140A - ３―アミノ―２―オキソ脂肪酸誘導体の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野１ 本発明はエンドペプチダーゼ（特にセリン酵素または５
ＨＩＷ素に分類される酵素）に対し阻害活性を有する新
規合成ペプチドの製造法に関する。

［従来の技術］ エンドペプチダーゼを阻古する低分子の剛害ペプチドは
従来天然物としては、ロイペプチン、エラスタチナール
などのペプチドアルデヒドが知られており、さらにこれ
らを参考にし、多数のペプチドアルデヒドが阻害剤とし
て合成されている。

これらのペプチドアルデヒドはＮ＃と結合しアルデヒド
が酵素上のペプチドカルボニル基との灰応部位を占める
ことにより阻害活性を表すことがＴｈｏｍｐｓｏｎ、　
Ｒ，Ｃ，により指摘されている（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ、　１２巻、４７−５１頁（１９７３））。

［発明が解決しようとする問題点コ ベブチドアルデヒド基は活性中心であるカルボニル基が
ペプチド鎖のＣ末端にあるために、酵素との結合を選択
的にするために分子構造を変更できるのはその活性中心
のカルボニル基のＮ末端側のみである。本発明者等が先
に発明したポストスタチン（後記化合物Ｎ０１）はペプ
チド鎖中に下記部分構造式 ％式％ の３−アミノ−２−オキソカルボニル基を持ちその両側
にアミノ酸残基を持つ新規な構造を持っている。両側の
アミノ酸残基を適当に変えて、このカルボニル基を含む
構造部分と、適当に組合せ、合成することが出来れば、
様々なペプチダーゼに対して選択的に阻害活性を示す物
質を製造することが可能であると考えられる。

本発明の目的は、上記の部分構造を含む生理活性物質の
新規製造法を提供することにある。

３−アミノ−２−ケト酸を含むペプチドは過去に於て１
例報告されている。Ｈｏｒｉ等はアシルアミノ酸とアル
キル又はベンジルオキサリルクロライドとの反応でＣ−
末端に３−アミノ−２−オキソ−ペンタン酸エチル、ま
たはベンジルエステルを持つペプチドを合成してエラス
ターゼを阻害することを報告している（Ｐｅｐｔｉｄｅ
ｓ、　５ｔｒｕｃｔｕｒｅ　ａｎｄＦｕｎｃｔ＋ｏｎ、
Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　　ｏｆ　　ｔｈｅ　　Ｎ１ｎ
ｔｈＡｌｅｒｉＣａｎ　　ｐｅｔ＋ｔｉｄｅ　　Ｓｙｍ
ｐｏｓｉｕｇｉ、　　ＤＤ　　８　１　９　−８　２２
）。しかしながら、彼等はＤａｋｉｎ−Ｗｅｓｔ反応を
用いたために３−アミノ基の付は根はラセミ化しており
、しかもこの方法ではＣ−末端エステルしか合成出来な
い等の問題点を有している。

［問題点を解決するための手段］ そこで、本発明者等は上記問題点を克服するべく鋭意検
討した結果、上記部分構造を有する生理活性物質の前駆
体として、下記部分構造式（式中Ｒ１は飽和または不飽
和炭化水素基を示す。）を有する３−アミノ−２−ヒド
ロキシ脂肪酸誘導体く２位のヒトＯキシ基以外の官能基
は必要に応じて保護されている。）を合成し、次いで、
この３−アミノ−２−ヒドロキシ脂肪酸誘導体を酸化し
、下記部分構造式 （式中Ｒ１は前記と同じ） を有する３−＝アミノ−２−オキソ脂肪Ｉ！誘導体を得
、必要に応じて官能基の保護基を除去することにより、
上記の３−アミノ−２−オキソカルボニル基を有する生
理活性物′１Ｋ（もしくはその中間体）が得られること
を見い出し本発明を完成した。

本発明の酸化反応は、上記部分構造式の２位の酸化以外
に悪影響を与えないよう穏やかな条件で行うのがよい。

例えば酸化剤としてＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）
を使用する酸化が好ましい。

ＤＭＳＯを用いるとき、通常触媒として、弱塩基（例え
ばＰＫａ’　７．５程度以下のピリジン類など）と酸（
例えばＰＫａ約３以下のトリフルオロ酢酸、リン酸など
）との組合せ触媒、好ましくはトリフルオロ酢酸とピリ
ジン類との塩を用い、更に、カルボジイミドＩ（例えば
ジシクロヘキシルカルボジイミド、シイツブＯビルカル
ボジイミドＬデルジメチルアミノプロピルカルボジイミ
ドと）、無水酢酸またはオキサリルク［１リドなどを併
用するのが好ましい。

反応はＤＭＳＯを溶媒としてもよいし、本反応に悪影響
を与えないかぎり、不活性な他の溶媒中で行うこともで
きる。反応温度は大よそＯ℃〜４０℃の範囲で行うのが
好ましい。反応時間は条件により異なるが通常３〜５０
時間程度で１〜分である。

本発明方法によって得られる生理活性物質（もしくはそ
の中間体）としてはアミノ酸もしくはペプチドが上記の
部分構造式［Ｉ［］のカルボニル基に結合した部分構造
式 ％式％［１１１ （式中Ｒ１は前記と同じ、Ｙはアミノ酸又はペプチドも
しくはそれらのエステルのアミノ基から水素を除いた残
基を示す。Ｙが官能基をもつときは保護基で保護されて
いてもよい。） をもつペプチド類、より好ましくは一般式Ｘ　　−Ｎ　
　Ｈ−ＣＩＩ　　−ＣＯ−ＣＯ−Ｙ　　　　　　　　［
ＩＶ　　］Ｒ１ 〈式中Ｒ及びＹは前記と同じ、Ｘはアミノ酸まま たはペプチドのカルボキシル基からＯＨを除いた残基を
示し、Ｘが官能基を有するときは保護されていてもよい
。） で示されるポストスタチンおよびその類縁化合物があげ
られる。

これらのポストスタチン及びその類縁化合物は一般式 （式中Ｘ′及びＹ′はそれぞれ官能基の保護されたＸ及
びＹを示し、Ｘ及びＹは前記と同じ。Ｒ１は前記と同じ
。） で示される３−アミノ−２−ヒトＯキシ脂肪酸誘導体を
酸化することにより得ることができる。

一般式［Ｖｌで示される物質はアミノ酸としてＲ１に対
応する置換基を持つ３−保護−アミノ−２−ヒト０キシ
−プロピオン酸を用いて通常のペプチド合成法により製
造できる。

一般の液相法を用いるならば、例えば最終脱保護に接触
水糸化分解を用いる場合にはアミノ酸ベンジルエステル
またはペプチドのベンジルエステルと例えばｐ−メトキ
シベンジルオキシカルボニル−３−アミノ−２−ヒドロ
キシ−脂肪酸またはｔ−ブトキシカルボニル− Ｏキシ−脂肪酸等を通常ペプチド合成に用いられる溶媒
例えばジメチルフォルムアミド中で、通常ペプチド合成
に用いられる縮合剤例えばジシクロヘキシルカルボジイ
ミド、シイツブＯビルカル、ポジイミド、Ｎ−（３−ジ
メチルアミノプロピル）−Ｎ’　−エチルカルボジイミ
ドまたはその塩、等のカルボジイミド類、またはそれ等
と縮合補助剤、例えば、１−ヒドロキシベンゾトリアゾ
ール（ＨｏＢｔ）、Ｎ−ヒドロキシ」ハク酸イミドなど
の組み合せを用いて縮合し、ついでトリフルオロ酢酸な
どの選択的脱保護剤でｐ−メトキシベンジルオキシカル
ボニル ボニル（ＢＯＣ）基を除き、さらに、順次一般式［Ｖｌ
におけるＹ’　、Ｘ’　に応じて、通常の方法で縮合し
て合成することが出来る。

また、最終脱保護にトリフルオロ酢酸を用いるならば、
アミノＩｌｔーブチルエステルとｐ−メトキシベンジル
オキシカルボニル− ヒドロキシ−脂肪酸またはベンジルオキシカルボニル− 様に縮合し、接触水素化分解によりｐ−メトキシベンジ
ルオキシカルボニル基またはベンジルオキシカルボニル
基を除きさらに順次一般式（ＩｌにおけるＹＳＸまたは
それらの適当な誘導体を縮合してもよい。また、同相法
を用いるならば、９−フルオレニルメチルオキシカルボ
ニル−アミノアシル−ｐ−アルコキシベンジルアルコー
ル樹脂を出発原料とし、塩基処理による９−フルオレニ
ルメチルオキシカルボニル（ＦｍＯＣ）基の除去、１”
ｍｏ　ｃ−アミノ酸の綜合を順次繰り返し最後に、ベン
ジルオキシカルボニル−アミノ酸、または、Ｂｏｃ−ア
ミノ酸、または、カルボン酸、を縮合することにより合
成できる。

一般式［■１おいて、Ｘ’　、Ｙ’　としてセリン、ト
レオニン等の水１１ｆ基を含むアミノ酸が含まれる場合
、同相法及び液相法で最終脱保護にトリフルオロ酢酸を
用いる場合には各々のアミノ酸はｔブチルエーテルとし
て保護しておけばよい。また、液相法で最終脱保護に接
触水素化分解を用いる場合には各々のアミノ酸はベンジ
ルエーテルとして保護しておけばよい。

ＸおよびＹの定義においてでて来る「アミノ酸」もしく
は［ペプチド１を構成するアミノ酸としては、−膜内に
はα−アミノ酸類があげられるが必ずしもα−アミノ酸
である必要性はない。

α−アミノ酸類としては下記式 ％式％ ［式中Ｒ２は（１）水素、（２）非置換低級アルキル又
は（３）置換低級アルキル（ＩＩ置換基してはアミノ基
、ヒドロキシ、メルカプト、低級アルキルチオ、カルボ
キシルフェニル、ヒトＯキシフェニル、イミダゾール基
、インドリル基など）を示す。）でホされるアミノ酸又
は弐 Ｈ （式中Ｒ３は水素又はヒドロキシ基を示す）でボされる
アミノ酸があげられる。

これらのアミノ酸としては具体的には、グリシン、アラ
ニン、バリンロイシン、イソロイシン、セリン、トレオ
ニン、システィン、メチオニン、アスパラギン酸、グル
タミン酸、リジン、アルギニン、フェニルアラニン、チ
ロシン、ヒスチジン、トリプトファン、プロリン、オキ
シプロリンなどがあげられる。

ベプタイドとしては一般的には上記アミノ酸が２〜３個
程度結合した低重合ベブタイドがあげられる。

またＸなどにおけるアミノ基の保護基としては、（１）
フタリル基およびスルホニルなどを含めたアシル基や（
２）ウレタン型にして保護するオキシカルボニル基など
があげられる。例えば（１）のアシル基としては、非置
換低級？ルキルカルボニル、置換低級アルキルカルボニ
ル（置換基としてはハロゲン原子、ニトロ、低級アルコ
キシ、）Ｉニル、など）、ベンゾイル、フタリルアリー
ルスルホニル、などがあげられる。これらのアシル基に
おいてフェニル基をもつものはそのフェニル基上に置換
基として、低級アルキル、ハロゲン原子、低級アルコキ
シ、ニトロなどの置換基を有してもよい。

これらの具体例としてはアセチル、トリフルオロアセチ
ル、フェニルアセチル、フェニルブタノイル、フェニル
プロピオニル、ベンゾイルなどがあげられる。

（２）のウレタン化して保ｌｉするオキシカルボキシ基
としては、非置換低級フルコキシ力ルボニル、置換低級
アルキルオキシカルボニル（置換基としては前記（１）
のアシル基のところであげたものが同様にあげられる。

）があげられる。具体的にはイソプロピルオキシカルボ
ニル、ｔ−ブトキシカルボニル、インペンデルオキシカ
ルボニル、ベンジルオキシカルボニル ル げたものが同様にあげられる。）などがあげられる。

上記（１）及び（２）の保護基の他にベンジル、置換ベ
ンジル（置換基は前記と同様なものがあげられる。）、
Ｏ−ニトロフ１ニルヂオ、トリフェニルメチルチオ、ト
リフェニルメチル り使用できる。

Ｒ１の（２）の飽和または不飽和の炭化水素基としては
飽和もしくは不飽和の低級脂肪族炭化水素基、芳香族炭
化水素基などがあげられる。これらは置換基を有しても
よい。これらの具体例としては低級アルキル基、ベンジ
ル基、フェニル基などがあげられる。

Ｙにおけるエステルとしては、低級アルコール、ベンジ
ルアルコールなどとのエステルがあげられる。

本発明において、低級アルキルとしては、メチル、エチ
ル、プロピル、ブチル、ペンチルなどのＣ１〜Ｃ５のフ
ルキルがあげられる。

低級アルコールとしてはメタノール、エタノール、プロ
パツール、ブタノールおよびペンチルアルコールなどの
Ｃ１〜ｃ５のアルコールがあげられる。

一般式［Ｖ］において好ましくは、Ｒはメチル、エチル
、プロピル、ベンジル、ＸはＬ−バリン、ベンジルオキ
シカルボニル−バリン、ベンゾイル−バリン、°ノエニ
ルアセチルーバリン、フェニルブ日ピオニルーバリン、
フェニルブタノイル−バリン、ベンジルオキシカルボニ
ル−アスパラギン酸、ベンジルオキシカルボニル−リジ
ンれらのいずれかのアミノ酸とバリン、フェニルアラニ
ン、プロリンまたはトレオニンなどのアミノ酸が縮合し
たペプチドがあげられる。

ＹはＤ−ロイシル−し〜バリン、グリシル−バリン、し
−ロイシル−し−バリン及びそれらのエステル、例えば
メチルまたはｔ−ブチルエステルなどの低級フルキルエ
ステルまたはベンジルニス７　／Ｌｌ　すどが挙げられ
る。本発明で製造されたエンドベブチダーゼ阻害ペプチ
ドの構造、理化学的性質、Ｌンドペブチダーゼ阻害活性
は表１にまとめて小寸。

族プロリルエンドペプチダーゼ活性は Ｙｏｓｌｗｏｔｏらの方法［（８ｉｏｃｈｉｍ、　Ｐｉ
ｏｐｈｙｓ、　Ａｃｔａ）５６９巻、１８４−１９２負
（１９７９）］の改良法で行った。即ち、試験管に４０
％のジオキサンを含む０．５１８のＮ−ベンジルオキシ
カルボニル−し−グリシル−し−プロリル−β−ナフチ
ルアミド０．２ｅ、０．０５Ｍトリス−塩１ｍ！ｌｉｉ
液（＋）Ｈ７，８）　０．５ａｅ、検体を含む水溶液０
．２５１！を加えた混合溶液を３７度、３分間加温した
後、にｏｉｄａ　、　Ｍａｔｔｅｒらの［Ｊ、　Ｂ１０
１．　ＣｈｅＩｍ、　１２５１巻、７５９３−７５９９
頁（１９７６）に記載の方法の改良による酵素の精製法
で、ブタの腎臓から硫酸アンモニウムによる分画、ＤＥ
ＡＥ−セファデックスＡ−５０カラムクロントゲラフイ
ーにより精製したプロリルエンドペプチダーゼ溶液０．
０５ｄを加えて、３７度で３０分間反応させた。反応後
、ツイーンＢｗｅｅｎ　−２０）を１０％、ファースト
ガーネットＧＢＣ＠を０．１％含む１Ｍ酢酸ナトリウム
緩Ｗｉ液（ｐＨ４，２）ＩＩｌ、を加え、Ｖ温に１ｂ分
放置後に、５２５　ｎｌにおける吸光度（ａ）を測定し
た。同時に検体を含まない緩ＷｊＪ液のみを用いた盲検
反応液の吸光度（ｂ）を測定し、プロリルエンドペプチ
ダーゼ阻害率を ［（ｂ−ａ）／ｂ］ｘ１００の式より計算した。

抗エラスターピ阻害活性はＨＬＩＩｌｆＯｒｄ、　ＲＡ
らの方法［Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｔ　２２５巻、２
２２７頁（１９８０）］、抗力テブシンＢ阻害活性はＫ
１１ｉ（ｌｈｔＣＧ、の方法［Ｂｉｏｃｈｅｗ、　Ｊ、
　　１８９巻、４４７４５３頁（１９８０）１によって
測定した。

ｆ１ Ｒｆ３ ｆ４ Ｒｆ２　　＝ＴＬＣｒｅｖｅｒｓｅ　　Ｐｈａｓｅ　　
（ＲＰ−１８）ＫＯＡＣ５％−クエンｌｌｌ　１％：Ｈ
ｅＣＮ＝６５二３５−ＴＬＣ，シリカゲル１゜ ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２Ｏ＝　４：１：１＝　Ｔ
ＬＣ，シリカゲルＦ。

ＣＨＣｌ３：Ｈｅ０Ｈ＝＾ｃＯＨ＝　９０：１０：５Ｐ
ＣＥ １ａｓｔ ａｔ−ａ Ｂｏｃ Ｂ Ｐ Ａ ｚ ＯＢｚ　ｌ ０Ｂｕｔ ０Ｈｅ ＝プロリルエンドペプチダーゼ阻害活 性、　ＩＣ５０（ｕ９／ｍｅ） 一１ラスターゼ阻害活性。

ＩＣＡＯ（ｕ９／ｍｅ） 一力テプシンＢ阻害活性 ＩＣ５０（ｕ９／ｍｅ） ＃ベンジルオキシカルボニル ＝ｔ−ブトキシカルボニル ＝フェニルブタノイル ＝フェニルプロピオニル ＝フェニルアセチル 一ベンゾイル ＝ベンジルエステル −ｔ−ブチルエステル 一メチルエステル ［実施例１ 以下実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明
はこれにより限定されるものではない。

実施例１ Ｂｏｃ−Ｄ−口イシル−Ｌ−バリンベンジルエステルの
合成 り０Ｃ−Ｄ−Ｃｌイシン・１水和物０．７４９９（３，
ＯＯｓｍｏｌ）　、Ｌ−バリンベンジルエステル・ｐ−
トルエンスルホン酸塩１．２５２９（　３　、　３　０
１１０１）及びＮ−ヒトＯキシルベンゾトリアゾール０
．　８　１　１　９　（６．　ＯＯｓｇｉｏｌ＞をジク
ロロメタン１５Ｍ１に溶解し、水冷化でトリエチルアミ
ン０．５０４ａｅ（３．６０−−０１）及び９７％１−
エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジ
イミド・過塩素酸塩１．１０８ｇ（４．　２０ｔｌｏｌ
）を加え２時間撹拌後、室温でざらに４時間撹拌した。

反応終了後、水３０ｅ及び１％クエン酸水溶１５ｄを加
え、析出した結晶を濾別後分液した。有機層を水２０ｍ
，飽和炭酸水素ナトリウム水溶液２０ｍ及び水１０ｄで
洗浄し、無水！ｌＩ鍍ナトナトリウム燥後、溶媒留去す
ることで、粗Ｂｏｃ−Ｄ−ロイシル−し一バリンベンジ
ルエステルの白色結晶１．３９ＣＩを得た。次いで、こ
の粗結晶をカラムクロマトグラフィー精製（シリカゲル
、酢酸エチル：ヘキサン（５　：　２）　）することで
、白色結晶としてＢＯＣ−Ｄ−ロイシル−し−バリンベ
ンジルエステル１．２３３ｇを得た。収率９７．８％。

１９８２．０〜８３．０℃。

［α］Ｄ＋３５．１’　　　［α］　　　＋７６、６。

（ｃｌ．０２、クロロホルム）。

１　）１−ＮＭＲ　（ＣＤＣ１　３） δ　０．８５．０．９２　（ｄ，ｄ．３Ｈ．３Ｈ。

Ｊ＝７Ｈｚ．ＣＨ３’） ０、９０−０．９８　（ｄ，ｄ，３Ｈ．３Ｈ。

Ｊ　＝　２　、　　７　Ｈ　ｚ　、　Ｃ　Ｈ３）１、３
６−１．５４　（ｍ，ＩＯＨ。

（ＣＨ３）３ＣＯＣＯ，（ＣＨ３）２ Ｃ　　Ｈ　　−　　Ｃ　　Ｈ　　ａ　　Ｈ　　ｂ　　）
１、６２−１．７６　（ｍ，２Ｈ。

（ＣＨ３）２ＣＨ−ＣＨａＨｂ） ２、　　１４−２．　　２７　　（ｍ，　　ＩＨ。

（ＣＨ３）２　ＣＨＣＨ） ４、　　１４　　（ｂｒ．　　１Ｈ．　　ＮＨＣＨｃＯ
ＮＩ−１）４、　　５７　　（ｄｄ．　　１）（、Ｊ＝
９．　　２。

４、　　２）１ｚ．　　ＣＯＮＭＣＩ−１ｃＯＯ）４、
　　７９　　（ｂｒ．　　１Ｈ．ＮＨ＞５、　　１３．
５．　　１９　　（ｄ，ｄ，　　ＩＨ．　　ＩＨ。

Ｊ−１　２．０Ｈｚ．ＣＩ−１２Ｐｌ”ｔ）６、６８　
　（ｂｒ，ＩＨ，ＮＨ） ７、２９−７．４０　　（ｍ．５Ｈ．Ｐｈ）実施例２ 実施例１でＮ−ヒトＯキシベンゾトリアゾールのかわり
にＮ−ヒトＯキシコハク酸イミド０、６９３９　（６．
０２ｔｌｏｌ）を用い、同様にしてＢｏｃ−Ｄ−０イシ
ルーＬ−バリンベンジルエステル０．７１０５７を得た
。

実施例３ スレオ（２Ｒ．３８）、（２８．３Ｒ）−３−（ｐ−メ
トキシベンジルオキシカルボニル）アミノ−２−ヒドロ
キシペンタン酸の合成 スレオ（２Ｒ，３Ｓ）、（２Ｓ、３Ｒ）−３−アミノ−
２−ヒドロキシペンタン１１５．９９９（４５，０ｓ■
０１）に８−４．６−シメチルビリミジンー２−イルチ
オールカルボン ベンジル１　５．　０７ＳＦ　（４９．　５ｇ＋ｎｏｌ
）　、水２５−、ジオキサン２５ｍ及びトリエチルアミ
ン９、　４　５ａｅ　（６　７．　５ｖｅｏｌ）を加え
、室温で２４時間撹拌した。反応終了後、水６５ａｅを
加え、酢酸エチル１００ｄで２回洗浄後、水層を水浴で
冷却した。水層に５Ｎ塩酸２２−を加えｐＨ２に調整後
、酢酸エチル６５ｄで１回及び３０Ｍ１で２目抽出した
。油層を５％塩酸５０ａｅで３回及び飽和食塩水５０−
で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去
することで、スレオ（２Ｒ。

３Ｓ）、（２８．３Ｒ）−３−　（ｐ−メトキシベンジ
ルオキシカルボニル）アミノ−２−ヒドロキシペンタン
酸９．６５９１を得た。収率７２．１％。

実施例４ エリト０　（２Ｒ．３８）、（２８，３Ｒ）−３−（ｐ
−メトキシベンジルオキシカルボニル）アミノ−２−ヒ
ドロキシペンタン酸の合成 実施例３のスレオ（２Ｒ，３８）、（２８。

３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタン酸の代わ
りにエリトロ（２Ｒ．３８）、（２８。

３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタン酸５、　
９９ＳＦ　（４５．　Ｏｌｌｏｌ）を用い、同様にして
エリトロ（２Ｒ．３８）、（２８．３Ｒ）−３（ｐ−メ
トロキシベンジルオキシカルボニル）アミノ−２−ヒド
ロキシペンタン１１０．７６９を得た。

実施例５ Ｚ　（ＯＭｅ）−　（２Ｒ．３８）−３−アミノ−２−
ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−ロイシル−し−バリンベ
ンジルエステルの合成 ３ｏｃ−Ｄ−ロイシル−し−バリンベンジルエステル１
　８９．２Ｎ　（０．４５０ｍｓｏｌ）にトリフルオロ
酢酸２ｍを加え、室温で４０分間撹拌後、溶媒留去し、
さらにトルエン２Ｉ１１を加えて溶媒留去する操作を２
回行うことで白色結晶として、Ｄ−ロイシル−しーバリ
ンベンジルエステル・トリフルオロ酢酸塩を得た。ここ
に、（２Ｒ．３８）３−（ｐ−メトキシベンジルオキシ
カルボニルアミノ−２−ヒト０キシペンタン１１３３．
８１１ｇ（０．４５０１１ｏ１）　、Ｎ−ヒドロキシベ
ンゾトリアゾール９　１　、　２Ｑ　（０．　６　７　
５ｇｖｏｌ）及びＤＭＦ　　２ａｅを加えて溶解し、水
冷下でＮ−メチルモルホリン５０．４μ！　（０．　４
５０ｍｍｏｌ）及び９７％１−エチル−３−（３−ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド・過塩素酸塩１　
４８、　３ａｅ　（０．　５６３ｇｉｍｏｌ）を加え２
時間撹拌後、室温でさらに一晩閤撹拌した。反応終了後
、反応混合物をジクロロメタン３０−で希釈し、１％ク
エン酸水溶液１０Ｍ１１水１　０ｍ，飽和炭酸水素ナト
リウム水溶液１０ｄ及び水１０−で順次洗浄し、無水硫
酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去することで、油状の粗
Ｚ　（ＯＭｅ）−　（２Ｒ．３８）−３−アミノ−２−
ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−ロイシル−し−バリンベ
ンジルエステル３１６、５＊を得た。次いで、この組体
をカラムクロマトグラフィー精製（シリカゲル、酢酸エ
チル：ヘキサン（５：１））することで、白色結晶とし
てＺ　（ＯＭｅ）−　（２Ｒ．３８）−３−７ミノー２
−ヒトＯキシペンタノイルー〇ーロイシル−Ｌ−バリン
ベンジルエステル１９７．６■を得た。収率７３．２％
。■ｐ１１５．０〜１１５．５１０２、９’　　（ｃｌ
．０４、クロロホルム）。

１　Ｈ−ＮＭＲ　　（ＣＤＣ１　３） ６　０、８０−１．０４　（ｍ．１　５Ｈ．ＣＨ３×５
） １、　　　５１−１．　　　８０　　　（ｍ，　　　５
　　ト１．　　　ＣＨ　　２ｘ２．ＣＨ　　（Ｌｅｕ）
） ２、１９　　（ｍ．１Ｈ．ＣＨ　　（Ｖａｌ））３、７
０−３．８５　（ｍ．４Ｈ．　ＣＨ３０。

ＣＨ　　（ＥｔＡｈｐ）） ４、１２　　（ｄｄ，ＩＨ．Ｊ＝６．４。

３、０Ｈｚ．ＣＨＯＨ） ４、５２　　（ｄｄ．１Ｈ．Ｊ＝８．４。

４、８Ｈｚ．ＣＨ　　（Ｖａ　ｌ　　））４．４９　　
（ｍ、ＩＨ，ＣＨ（Ｌｅｕ））４．６１　　（ｂｒ　　
　ｄ、ＩＨ，Ｊ＝６．４Ｈｚ、０Ｈ） ４．９８　（ｓ、２Ｈ，ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４）５．０８，
５．１８　　（ｄ、ｄ、２Ｈ。

Ｊ＝１２．４Ｈｚ、ＣＨ２Ｐｈ） ５．３１　　（ｂｒ　　　ｄ’、ＩＨ，Ｊ＝８　、　４
　ト１ｚ、　　　ＮＨ（ＥｔＡｈｐ）　　　）６．７９
（ｂｒ　　　ｄ、ＩＨ，Ｊ＝ ８．４Ｈｚ、ＮＨ（Ｖａ　ｌ　）） ６．８４−６．９２　（ｍ、２Ｈ，Ｃ６Ｈ４）７．０７
（ｂｒ　　　ｄ、ＩＨ，Ｊ＝ ８．４Ｈｚ、ＮＨ（Ｌｅｕ）） ７．２２−７．４０　（ｍ、７Ｈ，Ｃ６Ｈ４゜Ｐｈ） 但しＥｔＡｈｐは３−アミノ−２−ヒドロキシペンタン
酸 実施例６ Ｂｏｃ−Ｌ−ｔ＜＋）ルー　（２Ｒ，３Ｓ）−３−７ミ
ノー２−ヒトＯキシペンタノイルーＤ−ロイシル−し−
バリンベンジルエステルの合成 Ｚ　（ＯＭｅ）−（２Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−２−ヒ
ドロキシペンタノイル−Ｄ−ロイシル−Ｌ−バリンベン
ジルエステル１９０．２ａｙ（０，３１７−−０１）に
アニソールＯ，１ｍ及びトリフルオロ酢酸２ｄを加え、
室温で４０分間撹拌後、溶媒留去し、さらにトルエン２
〆を加えて溶媒留去する操作を２回行うことで白色アモ
ルファスとして、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｄ−ロイシル−しバ
リンベンジルエステル・トリフルオロ酢酸塩２４３．６
■を得た。この塩２１９．２■（０，２８５ｓｍｏｌ相
当）にＢＯＣ−Ｌ−バリン６５．４ＩＩｇ（０，３０１
鵬ｍｏｌ）　、Ｎ−ヒドロキシルベンゾトリアゾール５
８．１■（０，４３０ｍｇ１ｏｌ）及びＤＭＦ　　２ａ
ｅを加えて溶解し、水冷下でＮ−メチルモルホリン３２
μｍ　（０，２８６ｗｍｏｌ）及び９７％１−エチル−
３−（３−ジメチルアミツブ０ビル）カルボジイミド・
過塩素酸塩９４．０■（０，３５７■ｏｌ）を加え２時
間撹拌後、室温でさらに一晩間撹拌した。反応終了後、
反応混合物をジクロロメタン３０ｄで希釈し、１％クエ
ン酸水溶液１０ａ！、水１０ａｄ！、飽和炭酸水素ナト
リウム水溶液１０Ｉｄ及び水１０ｍで順次洗浄し、無水
ｖｉ酸ナナトリウム乾燥後溶媒留去することで、油状の
粗Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−（２Ｒ１３Ｓ）−３−アミノ−
２−ヒドロキシペンタノイル−Ｑ−ｏイルルーし−バリ
ンベンジルエステル５２０．８■を得た。

次いで、口の組体をカラムクロマトグラフィー精製（シ
リカゲル、ジクロロメタン：メタノール（２４：１））
することで、白色結晶としてＢｏｃ−Ｌ−バリル−（２
Ｒ，３８）−３−アミノ−２−ヒトＯキシペンタノイル
ーＤ−ロイシル−Ｌ−バリンベンジルエステル１４９．
７■を得た。収率８２．８％。Ｉｔ）１６７．０〜１６
８．０８１．０°　（Ｃ１，００、クロロホルム）。

１　Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ　３） ６０．８０−１．０３　（ｍ、２１Ｈ，ＣＨ３Ｘ７） １、　４４　　（Ｓ、９１−１゜ （ＣＨ３）３ＣＯＣＯ） １．５２−１．９０　（ｍ、５）１．ＣＨ２ｘ２、ＣＨ
（Ｌｅｕ）） ２．１１　　（ｍ、ＩＨ，ＣＨ（Ｖａｔ）＞２．１９（
ｍ、１Ｈ，Ｃ）−１（Ｖａｌ）＞３、　８７　　（ｍ、
　　１Ｈ。

ＣＨＮＨ（ＥｔＡｈｐ）） ３．９３　　（ｄｄ、１Ｈ，Ｊ＝５．８゜８．５Ｈｚ、
ＣＨ（Ｖａ　　ｌ　　））４．１０　　（ｄｄ、ＩＦ（
、Ｊ＝３．４゜７．０）（ｚ、Ｃ）−１０８） ４．３６　（ｍ、Ｉｔ−１，Ｃｔ−１（Ｌｅｕ））４．
５８　　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝５．０゜８．６Ｈｚ、ＣＨ
（Ｖａ　ｌ　）） ５．０９　　（ｂｒ、ＩＨ，ＮＨ（Ｖａ　ｌ　））５．
１０，５．２０　　（ｄ、ｄ、２Ｈ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ
、ＣＨ２Ｐｈ） ５．３６　　（ｂｒ、１Ｈ，ＯＨ） ６．９８　　（ｂｒ　　　ｄ、　　１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈ
ｚ、ＮＨ（Ｖａ　　Ｉ　　））７．０４　　（ｂｒ　　
　ｄ、ＩＨ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、ＮＨ（ＥｔＡｈｐ）） ７．２０（ｂｒ　　　ｄ、１Ｈ，Ｊ＝ ８．４Ｈｚ、ＮＨ（Ｌｅｕ）＞ ７．３０−７．４０　　（ｍ、５Ｈ，Ｐｈ）但しＥｔＡ
ｈｐは３−アミノ−２−ヒドロキシペンタン酸 実施例７ Ｚ−Ｌ−バリル−し−バリル−（２Ｒ，３Ｓ）−３−ア
ミノ−２−ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−〇イシルーＬ
−バリンベンジルエステルの合成り０Ｃ−Ｌ−バリル−
（２Ｒ，３８）−３−アミノ−２−ヒトＯキシペンタノ
イルーＤ−ロイシル−し−バリンベンジルエステル１４
５．０ＩＩｇ（０，２２８−−０１）にトリフルオロ酢
酸２ＩＩＩｌを加え、室温で４０分間撹拌後、溶媒留去
し、さらにトルエン２ｄを加えて溶媒留去する操作を２
回行うことで白色結晶として、Ｌ−バリル−（２Ｒ９３
３）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタノイル−〇−
日イシル−［−バリンベンジルエステル・トリフルオロ
酢酸塩を得た。この塩を酢酸エチルで１０ａｅにメスア
ップし、１ｍｌ！サンプリング後の残りを溶媒留去した
（０．２０６１１０１相当）。

ここにＺ−Ｌ−バリン５４．８■（０，２１８＋ｕｏｌ
）　、Ｎ−ヒドロキシルベンゾトリアゾール４２、４ｊ
ＦＦ　（０，３１４＊ｍｏｌ）及びＤＭＦｌ、５ＩＩｉ
を加えて溶解し、水冷下でＮ−メチルモルホリン２３μ
ｍ　（０，２０６ｓｍｏｌ）及び９７％１−エチル−３
−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・過
塩素酸塩６８．０Ｍｇ（０，２５８ｗｎｏｌ）を加え２
時間撹拌後、室温でさらに一晩間撹拌した。反応終了後
、反応混合物をジクロロメタン１５ａｅで希釈し、１％
クエン酸水溶液７ｍ、水７ｄ、飽和炭酸水素ナトリウム
水溶液７ａｅ及び飽和食塩水７ｄで順次洗浄し、無水硫
酸ナトリウム乾燥後、溶媒留去することで、部結晶のア
モルフアスとして粗Ｚ−Ｌ−バリルし一バリルー（２Ｒ
，３Ｓ）−３−アミノ−２ヒドロキシペンタノイル−〇
−ロイシル−し〜バリンベンジルエステル２７７．９■
を得た。次いで、この相体をカラムクロマトグラフィー
精製（シリカゲル、ジクロロメタン：メタノール（４０
：１））することで、白色結晶としてＺ−し−バリル−
Ｌ−バリル−（２Ｒ，３８）−３−アミノ−２−ヒトＯ
キシペンタノイルーＤ−ロイシル−し−バリンベンジル
エステル１２５．９■を得た。収率７９．７％。

１１）２２２．０〜２２３．０℃。［α］、＋９．２°
　　［α］　　　＋２４．４°　（Ｃ１，０１、りｏｎ
ホルム）、Ｓｉ　−ＭＳ　　ｍ／ｚ　　７６Ｂ（Ｍ＋１
＋）、７９０　（Ｍ＋Ｎａ＋）。

１　）−１−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ　３） ６０．７６−１．００　（ｍ、２７１−１．ＣＨ３Ｘ９
） １．３７　（ｍ、１Ｈ，（ＣＨ３ −ＣＨａＨｂ） １．５３−１．８５　（ｍ、４Ｈ。

（ＣＨ）　　ＣＨＣＨ、ＣＨ３ ＨａＨｂ） １．９３−２．　１０　　（ｍ、　　２Ｈ，ＣＨＸ２　
　（Ｖａ　　ｌ　　）　　） ２．１７（ｍ、ＩＨ，ＣＨ（Ｖａｔ））４．１３−４．
２７　　（ｍ、２Ｈ。

ＨＮＣＨＣＨ（ＯＨ）Ｇｏ） ４．４１−４．６４　　（ｍ、４Ｈ，ＣＨｘ３（Ｖａ　
ｌ　　）、ＣＨ（Ｌｅｕ）） ５．０６．５．１５　　（ｄ、ｄ、２Ｈ。

Ｊ＝１２．０Ｈｚ、Ｃ００ＣＨ２Ｐｈ）５．０６．５．
０９　　（ｄ、ｄ、２Ｈ。

Ｊ＝１２．０Ｈｚ、ＰｈＣＨ２０００）５．４９　　（
ｂｒ　　　ｓ、１）−１，０Ｈ）５．８６　（ｂｒ、Ｉ
　Ｈ，ＮＨ（Ｖａ　ｌ　））７．０９　　（ｂｒ、１　
日、ＮＨ（Ｖａ　Ｉ　））７．２２　　（ｂｒ、１Ｈ，
ＮＨ （ＥｔＡＭ）） ７．２２−７．３９　　（ｍ、１０Ｈ。

Ｐｈｘ２） ７．４５　　（ｂｒ、ｄ、１Ｈ，Ｊ＝ ７．８Ｈｚ、ＮＨ（Ｌｅｕ）） ７．９４−８．２３　　（ｂｒ、１Ｈ。

ＮＨ（Ｖａ　　ｌ　　）　　） 但しＥｔＡｈｐは３−アミノ−２−ヒドロキシペンタン
酸 実施例８ Ｚ−Ｌ−バリル−し−バリル−（３８）−３−アミノ−
２−オキソペンタノイル−Ｄ−ロイシル−し−バリンベ
ンジルエステルの合成 Ｚ−Ｌ−バリンーＬ−バリル−（２Ｒ，３８）−３−ア
ミノ−２−ヒドロキシペンタノイル−Ｄロイシル−Ｌ−
バリンベンジルエステル１０８、　ｉｌｌ　（０，１４
１Ｓｍｏｌ）　ニビリシン・トリフルオロ酢酸塩１９．
９■（０，１０３ｓ１０３ｓ、９７％１−エチル−３−
〈３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・過塩
素酸塩１１６．２ｑ（０，４４１Ｓｍｏｌ）　、ＤＭＳ
Ｏ０，５ａｅ及びベンゼン２ＩＩｌを加え、室温で２４
時間撹拌した。

反応終了後、反応混合物を酢酸エチル１５ｅで希釈し、
水５ｍで洗浄し、無水硫酸ナトリ・クムで乾燥後、溶媒
留去することで、一部ゲル状の粗ＺＬ−バリルーＬ−バ
リル−（３８）−３−アミノ−２−オキソペンタノイル
−Ｄ−ロイシル−し−バリンベンジルエステルを得た。

次いで、この組体を１１層クロマトグラフィー（シリカ
ゲル、ツク０ロメタン：メタノール（１５：１））で精
製することで、白色結晶としてＺ−Ｌ−バリル−し−バ
リル−（３８）−３−アミノ−２−オキソペンタノイル
−Ｄ−ロイシル−し−バリンベンジルエステル６３．２
ａｙを得た。収率５８．６％。

１Ｄ２０１．ｏ〜２０２．０℃。［α］、＋８．４°　
［α］　　　＋５０．３°　（ｃｏ、９０、クロロホル
ム）。

１　Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１３） δ　０．７７　１．０４　（ｍ、２７Ｈ，ＣＨ３Ｘ９） １．５０−１．８５　（ｍ、４Ｈ。

ＣＨＣＨ，ＣＨ３−Ｃｌ−１ａＨｂ） ２．００　（ｍ、ＩＨ，ＣＨ３−ＣＨａＨｂ）２．０５
−２．２５　（ｍ、３Ｈ，ＣＨｘ３（■ａｌ）） ４．０６　（ｍ、１Ｈ，ＣＨ（Ｖａ　ｌ　））４．３２
　（ｄｄ、１Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ。

８．６）１ｚ、Ｃｌ−１（Ｖａ　ｌ　））４．４７−４
．６３　（ｍ、２）（。

ＣＨ（Ｖａ　ｌ　）、Ｃ）−１（Ｌｅｕ））５、　　０
８．　　５．　　１６　　　（ｄ、　　　ｄ、　　　２
　　ト１　。

Ｊ＝１２．０Ｈｚ、ＣＨ２−Ｐｈ） ５．１０．５．１１　（ｄ、（１，２Ｈ。

ＣＨ２−Ｐｈ） ５．３４　（ｄｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝４．８゜８．２．８．
２Ｈｚ。

ＣＨ（ＥｔＡＯｌ））） ５、　　５７　　　（ｂｒ、　　　６．　　１Ｈ。

Ｊ＝８．６Ｈｚ、ＮＨ（Ｖａ　ｌ　））６．６９　（ｂ
ｒ、ｄ、１Ｈ。

Ｊ−８，６Ｈｚ、ＮＨ（Ｖａ　ｌ　））６．７４　（ｂ
ｒ、ｄ、ＩＨ。

Ｊ＝９．１　Ｈｚ、ＮＨ（Ｖａ　Ｉ　））６．８６　（
ｂｒ、ｄ、ＩＨ。

Ｊ＝８．２Ｈｚ、ＮＨ（ＥｔＡｈｏ））７．２５−７．
４０　（ｍ、ＩＯＨ。

ｐｈｘ２） ７．４８（ｂｒ　　ｄ、ＩＨ。

Ｊ＝８．８Ｈｚ、ＮＨ（Ｌｅｕ）） 但しＥｔＡｈｐは３−アミノ−２−ヒドロキシペンタン
酸 実施例９ ポストスタチン（し−バリル−Ｌ−バリル−（３Ｓ）−
３−アミノ−２−オキソペンタノイル−Ｄ−ロイシルー
し一バリン）の合成 Ｚ　−Ｌ−ハ＋Ｊルー　Ｌ−ハ＋Ｊルー　（３Ｓ　）　
−３−アミノ−２−オキソペンタノイル−〇−ロイシル
ーし一バリンベンジルエステル４６．９ｑ（０，０６１
ｇ＋ｇｔｏｌ）にパラジウム黒６．６■及びメタノール
１２−を加え、系内を水素置換後、室温で２０．５時間
接触還元した。触媒を濾別後、濾液を溶媒留去すること
で、白色結晶４０．０■を得た。このうち３９．７ｑを
ＨＰＬＣ（カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ　　ＰＡＫ　　Ｃ１
８，５ＨＩＳＥＩＤＯ社、２０Ｘ２５０ａｍ、ｉ離後：
１％クエン酸、０．６５％酢酸カリウム水溶液ニアセト
ニトリル＝８：２、流速：８ａｉ！／ｓｉｎ、検出波長
：２５４１１）にかけて、目的物と未反応の原料および
一部エビメリ化することで生成したし一バリルーしバリ
ル−（３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタノイ
ル−Ｄ−口イシル−Ｌ−バリンを分離し、し−バリル−
Ｌ−バリル−（３８）−３−アミノ−２−ヒドロキシペ
ンタノイル−Ｄ−ロイシル−し−バリンを含むフラクシ
ョンを分取した。

このフラクションを２５℃で濃縮後、濃縮液をＣＨＰ２
０樹脂にかけ、水洗ののち、８０％メタノールで溶出し
た。溶出液を溶媒留去し、真空ポンプで一晩乾燥するこ
とで、類白色粉体のポストスタチン１５．２ａｙを得た
。このポストスタチンには、ＮＭＲでＣＨＰ２０樹脂由
来の不純物が認められたため、この内５．１Ｍｇを再度
ＣＨＰ２０樹脂にかけ、５５ＶＯ１％メタノールで溶出
し、溶出液を溶媒留去後、得られた固体をデカンテーシ
ョンによりエーテルで洗浄し、真空ポンプで乾燥するこ
とで、白色粉体のポストスタチン２，４■を得た。収率
２１．７％。８１−ＭＳ　　ｍ／ｚ５４２　（Ｍ＋１＋
）。

１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６） δ　０．　７０　０．９５　（ｍ、　　２７　Ｈ，ＣＨ
３×９） １．４０−１．６７　（ｍ、３Ｈ。

ＣＨａＨｂＣＨ（Ｌｅｕ）、ＣＨ２ ＯＨａ　Ｈｂ　） １、　６１　　（ｍ、　　ＩＨ。

Ｃｌ−１ａＨｂｃＨ（Ｌｅｕ）） １．７６　（ｍ、１Ｈ，ＣＨ３−Ｃ）−１ａＨｂ）１．
８６−２．　１０　　（ｍ、　　３Ｆ１゜ＣＨ（Ｖａ　
　ｌ　　）） ３．２０　　（ｍ、Ｉ　Ｈ，ＣＨ（Ｖａ　　ｌ　　））
４．０６（ｍ、　　１Ｈ，ＣＨ（Ｖａｌ））４、　２７
　　（ｍ、　　１Ｈ，ＣＨ（Ｖａ　　Ｉ　　））４．４
３　　（ｍ、　　ＩＨ，ＣＨ（Ｌｅｕ））４．９５　　
（ｍ、　　ＩＨ，Ｃ）−１ｃＯｃｏ）７．９８（ｂｒ　
　　ｄ、ＩＨ。

Ｊ＝８．４Ｈｚ、ＮＨ（Ｖａ　ｌ　））８．１０　　（
ｂｒ　　　ｄ、１）１゜Ｊ＝８．９Ｈｚ、ＮＨ（Ｖａ　
ｌ　）＞８．３６　（ｄ、ＩＨ，Ｊ−６，６Ｈｚ。

ＮＨ（ＥｔＡｈｐ）’） ８．５６　（ｄ、１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ。

ＮＨ（Ｌｅｕ）） 但しＥｔＡｈｐは３−アミノ−２−ヒドロキシペンタン
酸 ただし、６２．８０−３．９０に水く７ミノ基、カルボ
キシル基を含む）に由来するブロードのピークあり。

実施例１０ Ｚ−Ｄ−ｏイシルーＬ−バリンｔ−ブチルエステルの合
成 Ｚ−Ｄ−ｏイシ＞１．０００９　（３，７７−■０１）
　、Ｌ−バリンｔ−ブチルエステル・塩酸塩０、７１９
　（３，４３ｅ＋ｍｏｌ）及びＮ−ヒドロキシルベンシ
トＩＪ　７ゾール０．９２７９　（６，００＋ｎｏｌ）
をツク０ロメタン１７−に溶解し、水冷化でトリエチル
アミン０．５３０ａｄ！　（３，７９ｇｉｍｏｌ）及び
９７％１−エチル−３〜（３−ジメチルアミノプロピル
）カルボジイミド・過塩素酸塩１．２６５９　（４，８
０ｖｏｌ）を加え２時間撹拌後、室温でさらに１４時間
撹拌した。反応終了後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液
７ａｅ、水７ｙｄ、１％クエン酸水溶液７ａｅ及び水７
ＭＮで順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒
留去することで、油状の粗Ｚ−Ｄ−ロイシル−し一バリ
ン１−ブチルエステル１．９３２９を得た。次いで、こ
の粗結晶をカラムクロマドグラフイー精製（シリカゲル
、ツク００メタン：メタノール （４００：　３）’）することで、白色結晶としてＺ−
Ｄ−０イシルーＬ−バリンｔ−ブチルエステル１．２６
７９を得た。

（Ｃ１，０６、りｎｏホルム）。

実施例１１ エリス０　（２Ｒ，３Ｒ）、（２８，３３）−Ｚ（ＯＭ
ｅ）−３−アミノ−２−ヒトＯキシペンタノイルー〇−
ロイシル−し−バリンｔ−ブチルエステルの合成 Ｚ−Ｄ−ロイシル−Ｌ−バリンｔ−ブチルエステル５０
３．９ｍｇ（１，１９８−ｍｏｌ）にパラジウム黒２１
．２ｑ及びメタノール５ｄを加え、系内を水素置換後、
室温で３時間接触還元した。触媒を濾別後、濾液を溶媒
留去することで、油状のＤ−口イシル−Ｌ−バリンｔ−
ブチルエステルを得た。ここに、エリスロ（２Ｒ，３Ｒ
）、（２８゜３３）−３−（ｐ−メトキシベンジＪレオ
キシカルボニル）アミノ−２−ヒドロキシペンタン酸３
９１．８η（１，３１８Ｉ■ｏｆ）　、　Ｎ−ヒドロキ
シルベンゾトリアゾール３２４．１■ （２，３９９ｓｓｏｌ）及びジクロロメタン８ｍを加え
て溶解し、水冷下で９７％１−エチル−３〜（３−ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド・過塩素酸塩４４
２．１■（１，６７７露−０１）を加え２時間撹拌後、
室温でさらに一晩間撹拌した。

反応終了後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶
液８Ｍ１、水８ｄ、１％クエン酸水溶液８Ｉ７！及び水
８ａｅで順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶
Ｉ！留去することで、アメ状の粗１リス０（２Ｒ，３Ｒ
）、（２８，３Ｓ）−Ｚ（ＯＭｅ）３−アミノ−２−ヒ
ドロキシペンタノイル−Ｄ−口イシル−［−バリンｔ−
ブチル１ステル７２Ｂ、１■を得た。次いで、この組体
をカラムクロマトグラフィー精製（シリカゲル、ジクロ
ロメタン：メタノール（１００：１））することで、ア
モルファス固体としてエリスロ（２Ｒ，３Ｒ）。

（２８，３８）−Ｚ　（ＯＭｏ）−３−アミノ−２−ヒ
ドロキシペンタノイル−Ｄ−ロイシル−し−バリンｔ−
ブチルエステル６６６．９１９１を得た。

収率９８．４％。Ｓｌ−Ｍ５　　ｍ／ｚ　　５６６（Ｍ
＋１＋）。

実施例１２ Ｚ−Ｌ−フェニルアラニル＜２Ｒ８，３Ｒ８）−３−ア
ミノ−２−ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−ロイシル−し
−バリンｔ−ブチルエステルの合成エリス０（２Ｒ，３
Ｒ）、（２８，３８）−Ｚ（ＯＭｅ）−３−Ｆミノ−２
−ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−ロイシル−Ｌ−バリン
ｔ−ブチルエステル３４０．９４（０，６０３ｓｓｏｌ
）をメタノール４ｍに溶解し、パラジウム黒５０．７ｊ
１９を３回に分けて、数時間ごとに加え、水素雰囲気中
、Ｖ潟で３２時間接接触光した。触媒を濾別後、濾液を
溶媒留去することで、エリスロ（２Ｒ９３Ｒ）、（２８
，３８）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタノイル−
Ｄ−０イシルーＬ−バリンｔ−ブチルエステルを得た。

このうちの半分量にＺ−Ｌ−フェニルアラニン１００．
８ｍ（０，３３７ｕｉｏｌ）　、Ｎ−ヒドロキシルベン
ゾトリアゾール クロロメタン１０ｄを加えて、水冷下で９７％１エチル
−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
・過塩素酸塩１１１．３ｊｌ（０．　４　２　２１１ｏ
ｌ）を加え２時間撹拌後、室温でさらに１８時間撹拌し
た。ＤＭＦ　　２．Ｏａｅを追加しさらに２２．５時間
撹拌後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液９
ｄ、水９ａｉ！、１％クエン酸水溶液９ｄ及び水９ｄで
順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去す
ることで、油状の粗Ｚ−Ｌ−フェニルアラニル−（２Ｒ
Ｓ。

３ＲＳ）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタノイル−
〇ーロイシルーし一バリンｔーブチルエステル２５５．
６１９を得た。この組体は、精製すること無く次の反応
に用いた。

実施例１３ Ｚ−Ｌ−７エニルアラニルー（ＲＳ）−３−アミノ−２
−オキソペンタノイル−［）−０イシルー［−バリンｔ
−ブチルエステルの合成 実施例１２で得られた粗Ｚ−Ｌ−フェニルアラニル−（
２ＲＳ，３ＲＳ）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタ
ノイル−Ｄ−ロイシル−し−バリンベンジルエステル２
５５．６ａｙにピリジン・トリフルオロ酢酸塩２５．　
８ｊｌｇ（０．　１　３４１１０１）、９７％１−エチ
ル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミ
ド・過塩素酸塩２１１．６ｑ　（０．　　８０３ｖｅｏ
ｌ）　　、　ＤＭＳＯ　　　　０．　　６５ａｅ及びベ
ンゼン２ＩＩｉを加え、室温で２０時間撹拌した。

反応終了後、黄色の反応混合物を酢酸エチル６、５７で
希釈し、水７７！で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥
後、溶媒留去することで、アモルファス固体のＺ−１−
フェニルアラニル−（Ｒ８）＝３−アミノ−２−オキソ
ペンタノイル−Ｄ−ロイシル−し−バリンｔ−ブチルエ
ステル２４４．４■を得た。次いで、この組体をカラム
クロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン：メ
タノール（１００：１））で精製することで、アモルフ
ァス固体のＺ−Ｌ−フェニルアラニル−（Ｒ３）　−３
−アミノ−２−オキソペンタノイル−Ｄ−ロイシル−し
−バリンｔ−ブチルエステル１１３．７ＩＩ！ｇを得た
。収率６３．５％。３１Ｍ５　　ｍ／ｚ６８１　（Ｍ＋
１＋）。

実施例１４ Ｚ−Ｌ−フェニルアラニル−（Ｒ８）−３−アミノ−２
−オキソペンタノイル−Ｄ−ＤイシルーＬ−バリンの合
成 Ｚ−Ｌ−７エニルアラニルー（Ｒ８）−３−アミノ−２
−オキソペンタノイル−［）−０イシル−［−バリンｔ
−ブチルエステル１０５．９■（０，１５６ｇＨ１ｏｌ
）にトリフルオロ酢酸２〆を加え、室温で９０分間撹拌
後、溶媒留去し、さらにトルエン２１１１ｅを加えて溶
媒留去する操作を２回行うことでアモルファス固体とし
て、Ｚ−Ｌ−フェニルアラニル−（Ｒ８）−３−アミノ
−２−オキソペンタノイル−Ｄ−ロイシル−し−バリン
１０６．５１１ｇを得た。次いで、この組体をカラムク
ロマトグラフィー精製（ＬＨ−２０、メタノール）する
ことで、アモルファス固体白色結晶としてＺ−Ｌ−フェ
ニルアラニル−（Ｒ８）　−３−アミノ−２−オキソペ
ンタノイル−Ｄ−ロイシルし一バリン７０．５Ｍｇを得
た。収率７２．６％。

８１−Ｍ５　　ｍ／ｚ　　６２５（Ｍ＋１＋）、６４７
　（Ｍ＋Ｎａ＋）。

実施例１５ Ｚ　（ＯＭｅ）−（２Ｒ８，３Ｒ８）　−３−アミ／２
−ヒドロキシペンタノイル−Ｑ−０イシンｔ−ブチルエ
ステルの合成 り一ロイシンｔ−ブチルエステル・塩１塩０、８９６ｇ
（４，００１ａｏｌ）に（２Ｒ８゜３Ｒ８）−３−（ｐ
−メトキシベンジルオキシカルボニル）アミノ−２−ヒ
ドロキシペンタン酸１．３０９９　（４，４０■−ｏｆ
）　、Ｎ−ヒドロキシルベンゾトリアゾール１．０８１
９　（８，００１１０１）及びジクロロメタン２Ｃ）ｄ
！を加えて、水冷下でトリエチ）Ｌｔ７ミン０．６２ｍ
　（４，４３ｍｍｏｌ）及び９７％１−エチル−３−（
３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・過塩素
酸塩１．４７６ＳＦ　（５，６０１１ｏ１）を加え２時
開撹拌後、室温でさらに１５時間撹拌した。反応終了後
、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液８ｅ、水
８ａ１！、１％クエン酸水溶液８ｅ及び水８ｄで順次洗
浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去すること
で、アメ状の粗Ｚ（ＯＭｅ）−（２Ｒ８，３Ｒ８）−３
−アミノ−２−ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−ロイシン
ｔ−ブチルエステル２．１２２９を得た。次いで、この
組体をカラムクロマトグラフィー精製（シリカゲル、ジ
クロロメタン：メタノール（１００：１））することで
、白色結晶としてＺ　（ＯＭｅ）−（２Ｒ３，３Ｒ３）
−３−７ミノー２−ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−ロイ
シンｔ−ブチルエステル１．８５８９を得た。収率９９
．６％。８１−Ｍ５　　ｍ／Ｚ４６７　（Ｍ＋１＋）。

実施例１６ ＢＯＣ−Ｌ−バリル−（２Ｒ８，３Ｒ８）−３アミノ−
２−ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−ロイシンｔ−ブチル
エステルの合成 エリスロ（２Ｒ，３Ｒ）、（２８，３８＞−Ｚ（ＯＭｅ
）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−０
イシンｔ−ブチルエステル３０３．９■（０，６５１ｓ
ｓｏｌ）をメタノール４ｄに溶解し、パラジウム黒４３
．４Ｑを３回に分けて、数時間ごとに加え、水素雰囲気
中、室温で１５時間接触還元した。触媒を濾別後、濾液
を溶媒留去することで、エリス０　（２Ｒ，３Ｒ）。

（２８，３８）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタノ
イル−Ｄ−ロイシンｔ−ブチルエステルを得た。ここに
Ｂｏｃ−Ｌ−バリン１５５．９ｍ（０，７１８ｍ５ｏｌ
）　、Ｎ−ヒドロ主シルベンゾトリアゾール１７６．１
■（１、３０３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン３．５ｍ
を加えて、水冷下で１−エチル−３−（３−ジメチルア
ミツブＯビル）カルボジイミド・塩酸塩４９９．４ｊ１
９（２，６０５■■０１）を加え２時開撹拌後、室温で
さらに１６．５時間撹拌した。反応混合物にジクロロメ
タン７ＩＩｌを加えて希釈後、１％クエン酸水溶液６ｄ
、水６１１１、飽和炭酸水素±トリウム水溶液６Ｉ１１
及び水６−で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後
、溶媒留去することで、アモルファス状の粗Ｂｏｃ−Ｌ
−バリル−（２Ｒ３，３Ｒ８）−３アミノ−２−ヒト０
キシペンタノイル−Ｄ−ロイシンｔ−ブチルエステルを
得た。この組体は、精製することなく次の反応に用いた
。

実施例１７ Ｅ３ｏｃ−Ｌ−バリル−（Ｒ８）−３−アミノ−２−オ
キツベンタノイルー〇−ｏイシルｔ−ブチルエステルの
合成 りｏｃ−Ｌ−バリル−（２Ｒ８，３Ｒ３）−３アミノ−
２−ヒドロキシペンタノイル−〇−ロイシルｔ−ブチル
ニスデル０．６５１ｍｍｏｌにピリジン・トリフルオロ
酢酸塩６９．５９ （０，３６０−ｍｏｌ）　、ジシクロヘキシルカルボジ
イミド ＤＭＳＯ　　１．３ａｅ及びベンゼン２．５ｄを加え、
室温で１８時間撹拌した。反応終了後、黄色の反応混合
物を酢酸エチル１０ｍで希釈し、生成したＤＣＣウレア
を濾別した。有機層を水１０ｍで洗浄し、無水硫酸ナト
リウムで乾燥後、溶媒留去した。得られた油状物に再び
酢酸エチル５Ｍｌを加え、析出したＤＣＣウレアを濾別
し、濾液を溶媒留去することで粗３ｏｃ−Ｌ−バリル−
（ＲＳ）−３アミノ−２−オキソペンタノイル−Ｄ−ロ
イシルｔ−ブチルエステル−Ｌ−バリンベンジルエステ
ルを得た。次いで、この組体をカラムクロマドグラフイ
ー（シリカゲル、■ジクロロメタン：メタノール（１０
０：１）、■ジクｏｎメタン：酢鍍エチル（１２：１〜
１０：１）で精製することで、白色結晶としてＢｏｃ−
Ｌ−バリル−（ＲＳ）３−アミノ−２−オキソペンタノ
イル−Ｄ−ロイシルｔ−ブチルエステル１７８．９■を
得た。

３１−ＭＳ　　ｍ／ｚ　　５３４　（Ｍ＋１＋−）。

実施例１８ （２Ｒ．３８）−３−　（９−フルオレニルメチルオキ
シカルボニル タン酸の合成 （２Ｒ．３８）−３−アミノ−２−ヒドロキシペンタン
酸０．７５９９　（５．７０ｇｉｓｏｌ）に、炭酸水素
ナトリウム１．１９９９　＜１４．２８ｓｓｏｌ）を水
２０ａｅに溶解した水溶液及びジオキサン２０ｄを加え
、氷冷下でりＯロギ酸９−フルオレニルメチル１．６２
３９　（６．２７ｓｓｏｌ）をジオキサン１０−に溶解
した液を３０分で滴下した。滴下終了後も室温で２時間
撹拌したのち、反応液に水１００１１１ｅを加え希釈し
、エーテル１５〇−及び７５Ｉ１１で１回ずつ洗浄した
。水層に６Ｎ塩酸２．８−を加えｐ旧．５に調整後、酢
酸エチル５０Ｉｌｌで３回抽出した。油層を飽和食塩水
５０ｍで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留
去することで、粗（２Ｒ．３Ｓ）−３−　（９−フルオ
レニルメチルオキシカルボニル シペンタン酸１．６２２９を得た。この組体に酢酸エチ
ル４ｓｅ及びｎ−ヘキサン４Ｉｄを加え結晶化させた後
、結晶を濾取し、酢酸エチル−ｎ−ヘキサン（１：１）
溶液２ｄで洗浄後、乾燥することで白色固体の（２Ｒ．
３８）−３−　（９−フルオレニルメチルオキシカルボ
ニル）アミノ−２−ヒドロキシペンタン酸０．９９（ｉ
ｓを得た。ｍｐ１６０〜１６１．５℃。次いで、このＮ
−保護アミノ酸０．９９９９に酢酸エチル４ａｅを加え
、浴ａ！５０℃で懸濁しながら４０分間撹拌したのちｎ
−ヘキサン４ｄを加え結晶を濾取した。結晶を酢酸エチ
ル−ｎ−ヘキサン（１：１）溶液２−で洗浄後、乾燥す
ることで白色結晶の（２Ｒ．３８）３−（９−フルオレ
ニルメチルオキシカルボニル）アミノ−２−ヒドロキシ
ペンタン酸（ｃｌ．０１．メタノール）。２６２６ｍｐ
　　　１６２〜１６２．５℃。ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ　　
３５６（Ｍ＋１＋）。

１　Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１３） ６　０．９６　　（ｄｄ、３Ｈ，Ｊ＝７．４゜７．４Ｈ
ｚ、０Ｈ３） １．６９　（ｍ、２Ｈ，ＣＨ２） ３、　２５　　（ｂｒ、Ｃ０ＯＨ，０Ｈ）４．０１　　
（ｍ、ＩＨ，ＣＨＮＨ） ４、　１８　　（ｄｄ、　　１Ｈ，Ｊ＝６．６゜６．６
Ｈｚ、ＡｒＣＨＡｒ） ４、　２４　　（ｂｒ　　　ｓ、　　１Ｈ，ＣＨＯＨ）
４．４０．４．４１　　（ｄ、ｄ、ＩＨ，ＩＨ。

Ｊ−６，６，６，６Ｈ２゜ ＡｒＣＨＣＨａＨｂ） ５．１３　　（ｄ、１）−１，Ｊ＝９．６Ｈｚ。

ＮＨ） ７．２０−７．８０　　（ｍ、８Ｈ，Ａｒ）一方、先の
結晶化濾液及び洗液を溶媒留去することで得られたアモ
ルファス０．５４８をカラムクロマドグラフイー精製（
シリカゲル、クロロホルム：メタノール：酢１ｔ（９５
：５：１））・することで、白色固体として（２Ｒ，３
Ｓ）−３（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）
７ミノー２−ヒドロキシペンタン１１０．３０７９を得
た。

実施例１９ Ｂｏｃ−Ｌ−Ｖａ　１−Ｌ−Ｖａ　ｌ　−Ｌ−３−アミ
ノ−２−ヒドロキシペンタノイル−０−１ｅｕ−Ｌ−Ｖ
ａｌ樹脂の合成 Ｆｍｏｃ−Ｌ−バリル−ｐ−アルコキシベンジルアルコ
ール樹脂０．５９　（０，３４５−ｏｌのバリンを含む
）（渡辺化学から購入）をジメチルフォルムアミド（３
Ｘ６ｄＸｉ分）中で膨潤させた。

次いで２０％ピペリジン／ＤＭＦ６ａ！加え３分間撹拌
し、廃液後間様にピペリジン処理を２（ロ）（２回目は
３分、３回目は２０分撹拌）繰り返した。廃液後、ＤＭ
Ｆ　（３Ｘ６ｓｅＸ１分）で洗った。

次いでＮ−メチルピロリドン（３Ｘ６ａｅＸＩ分）テ洗
ツタ。次イテ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ３６６■（３当ｍ
）、ＨｏＢｔ　　１４０■（３当社）、ジイソプロピル
カルボジイミド０．２６５ｍ１（３当ＩＩ）を６Ｍｌの
Ｎ−メチルピロリドンに溶解して加え３１Ｍ間撹拌した
。廃液後Ｎ−メチルピロリドン（３Ｘ６ｄＸ１分）で洗
い、廃液後、ＤＭＦ　（３ｘ６ｄｘＩ分）で洗った。

次いで、上記のようなピペリジン脱保護を行い、Ｆｍｏ
ｃ−３−アミノ−２−ヒドロキシ−ペンタン酸３６８１
９、ＨＯＢｔ１４０■、ジイソプロピルカルボジイミド
０．２６５ｍ（３当Ｉ）を６ｄのＮ−メチルピロリドン
に溶解して加え３時間撹拌した。以下間′様に洗浄、ピ
ペリジン脱保護、洗浄の後同様にＦｍｏｃ−Ｌ−Ｖａｌ
　（３５１ｊ１９）、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｖａｌ　（２２５■
）を縮合した。

実施例２０ Ｂｏｃ−Ｌ−Ｖａ　１−Ｌ−Ｖａ　Ｉ　−Ｌ−３−アミ
ノ−２−ヒドロキシペンタノイル−Ｄ−１ｅｕ−Ｌ−Ｖ
ａｌ樹脂の酸化 上記の樹脂をＤＭＦで洗浄後（３Ｘ６ｄＸＩ分）ＤＭＳ
Ｏで洗浄（３ｘ６ｄｘ１　）Ｌ、次いでビリジンートリ
フルオＯｉ￥酸塩１２５ｑ、無水酢酸０．４５ａｅを６
−のＤＭＳＯに溶解して加え、１８８時間撹拌た。廃液
後ＤＭＳＯ（３ｘ６ａ＋ｅｘＩ分）、ＤＭＦ　（３Ｘ６
ＩＩＩＸ１分）、メタノール（３Ｘ６ｓ！ＸＩ分）で順
次洗浄後、真空下で２時間乾燥した。

実施例２１ Ｌ−Ｖａ　１−Ｌ−Ｖａ　１−Ｌ−３−アミノ−２−オ
クソペンタノイルーＤ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｖａ　Ｉの合成 上記実施例２０の乾燥樹脂をＴＦＡ　：フェノール９５
　：　５　（３ｘ６ｄｘ６０分）で処理した。この処１
から得られた溶液を真空蒸発させ、残留物をメタノール
３ｍに溶解し、メタノールで膨潤させたセファデックス
ＬＨ−２０（３００＋＋ｄ）のカラムにそそいだ。メタ
ノールで展開し、最初に溶出するＵｖ吸収を示す分画を
集め真空蒸発させた。

得られた一残留物一噌をｎ−ブタノール、酢酸、水１０
０：１：１００の混合物の上１１１１ｊＩｅと下層１−
に溶解し、三鬼エンジニアリング社製通心自流クロマト
グラフィー装置にかけＦ−を移動相としてクロマトグラ
フィーを行った、Ｕｖ吸収を示す分画を集め真空蒸発さ
せると、標題化合物の無色粉末−■が得られた。

実施例２２ 実施例１９．２０．２１と同様に０．５９のＦｍｏｃ−
Ｌ−バリル樹脂を出発原料とし、３倍当量のＦｍｏＣ−
アミノ酸を順次綜合後、酸化、脱保護をすることにより
、Ｌ−バリル−し−プロリル−３−アミノ−２−オキソ
ペンタノイル−〇−〇イシルー１−−バリン１２４．６
ｑを得た。

物性値は表１に示した。

実施例２３ 実施例２２で得たし一バリル＝Ｌ−ブＯリルー３−アミ
ノ−２−オキソペンタノイル−Ｄ−ロイシル−し−バリ
ン２３．６■をメタノール２ｄに溶解し４−フェニルブ
タン酸無水物３０１１の塩化メチレン溶液１−とトリエ
チルアミン０．０５０ｄを加えて室温１時開撹拌した。

反応液を酢酸で酸性にし、メタノールで充填したセファ
デックス［Ｈ２Ｏのカラム（３００ａｄりを用いて精製
し、２０．９１９のフェニルブタノイル−し−バリル−
し−ブＯリルー３−アミノー２−オキソペンタノイル−
Ｄ−ロイシル−し−バリンを得た。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 下記部分構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼［ I ］ （式中Ｒ＿１は飽和または不飽和の炭化水素基を示す。 ） を有する３−アミノ−２−ヒドロキシ脂肪酸の誘導体を
   酸化し、下記部分構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼［II］ （式中Ｒ＿１は前記と同じ） を有する３−アミノ−２−オキソ脂肪酸誘導体を得、必
   要に応じ官能基の保護基を除去することを特徴とする３
   −アミノ−２−オキソ脂肪酸誘導体の製造法。