JPH0416145B2 - - Google Patents
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- JPH0416145B2 JPH0416145B2 JP59042982A JP4298284A JPH0416145B2 JP H0416145 B2 JPH0416145 B2 JP H0416145B2 JP 59042982 A JP59042982 A JP 59042982A JP 4298284 A JP4298284 A JP 4298284A JP H0416145 B2 JPH0416145 B2 JP H0416145B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bifidobacterium
- powder
- acid
- add
- sodium
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- Dairy Products (AREA)
- Seeds, Soups, And Other Foods (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
本発明は、胃酸に対する耐性が高く、しかも室
温保存中にも生菌数が殆んど減少しない高菌数の
ビフイズス菌生菌粉末、およびその製法に関する
ものである。 一般に、ビフイズス菌は有用な腸内細菌とされ
ている。 しかしながらビフイズス菌を生菌粉末としたと
き、凍結障害や乾燥障害があり、また保存中の生
菌数の減少が著じるしく、更に、服用時の胃酸に
よる生菌数減少が著じるしく、活性の高い生菌粉
末の製品を得ることはきわめて困難であつた。 本発明者らは、凍結障害や乾燥障害を防止し、
保存中の生菌数の減少がなく、また、胃酸による
生菌数の減少のないビフイズス菌生菌粉末を求め
て鋭意研究したところ、本発明においてこれら目
的を達成することができた。 本発明は、牛乳蛋白質の加水分解物、糖類、酵
母エキス及びオレイン酸を主成分とする食用乳化
剤を含有する培地でビフイズス菌を嫌気条件下で
PHをほぼ一定にして培養し、得られた菌体含有液
に脱脂粉乳、澱粉分解質、グルタミン酸ソーダ、
アスコルビン酸ソーダ、マグネシウム塩を加え、
凍結乾燥してなる胃酸耐性の高いビフイズス菌生
菌粉末及びその製造方法である。 本発明において生菌粉末にするビフイズス菌と
してはヒト由来のBifidobacterium longum、
Bifidobacterium breve、Bifidobacterium
bifidum等のいずれの菌株でもよい。例示とし
て、Bifidobacterium longum ATCC15707、
Bifidobacterium breve ATCC15700、
Bifidobacterium bifidum ATCC11146などがあ
る。 本発明においては、特定成分の培地を必要と
し、かつ、特定成分の凍結乾燥分散媒を必要と
し、これらの組合せおよびPHをほぼ一定にして培
養することによつてはじめて保存性がよく、胃酸
耐性のあるビフイズス菌生菌粉末が得られるので
ある。 培地としては、牛乳蛋白質の加水分解物、糖
類、酵母エキス及びオレイン酸を主成分とする食
用乳化剤がすべて組合される。牛乳蛋白質の加水
分解物としては脱脂乳、ホエー、ガゼインなどの
蛋白質分解酵素による加水分解物があげられる。
糖類としては、各種糖類があるが、乳糖で十分で
ある。オレイン酸を主成分とする食用乳化剤とし
てはオレイン酸モノグリセライド、ソルビタンオ
レイン酸モノエステルなどがあげられる。 培地の成分中オレイン酸を主成分とする食用乳
化剤は、ビフイズス生菌の胃酸耐性を付与するの
に特に重要のものである。 培地としては、牛乳蛋白質の加水分解物１〜10
％程度、糖類１〜７％程度、酵母エキス0.01〜２
％程度、オレイン酸を主成分とする食用乳化剤
0.001〜1.0％程度が用いられる。 培地のPHは使用するビフイズス菌の種類によつ
てもわずかづつ変化するが、約6.8〜4.7程度の間
に調整される。 この培地は120℃10分間程度で加熱滅菌する。 ここでビフイズス菌種菌を接種し、窒素ガス又
は炭素ガスを通気しながら約37℃で嫌気培養を行
う。培養中はカセイソーダ等によりPHの変動を防
止し、それぞれのビフイズス菌に適したPHを一定
に維持するのが好ましい。 約12時間程度培養して略最高菌数に達するので
培養をとめ、培養液は遠心分離し、濃縮された菌
体含有液を得る。菌体を含有する培養液はそのま
までもよいが、高菌数の生菌を得るために濃縮す
るのが好ましい。 菌体含有液には脱脂粉乳、澱粉分解物、シヨ
糖、グルタミン酸ソーダ、アスコルビン酸ソー
ダ、マグネシウム塩を添加し、−20℃以下に凍結
し、凍結乾燥する。この際、マグネシウム塩の添
加は生菌の凍結乾燥時の障害を防止するのに必要
なもので、塩化マグネシウム又は硫酸マグネシウ
ムなどの可溶性マグネシウム塩を用いる。 これら分散媒はいずれもビフイズス生菌の凍結
乾燥に必要なもので、脱脂粉乳0.5〜20％、澱粉
分解物0.5〜20％、グルタミン酸ソーダ0.01〜２
％、アスコルビン酸ソーダ0.01〜２％、マグネシ
ウム塩0.001〜0.2％程度づつ配合される。 凍結乾燥物には、更に脱脂粉乳、澱粉分解物、
アスコルビン酸ソーダ等を添加、混合して、保存
中の生菌数の減少を防止する。 次に本発明の試験例及び実施例を示す。 試験例 実施例１で製造した本発明のビフイズス菌生菌
粉末の胃酸耐性と37℃及び20℃による保存中の菌
数低下を試験した。対照として市販のビフイズス
菌生菌粉末の市販品Ａ及び市販品Ｂを同時に試験
した。 (1) 胃酸耐性 人工胃液（PH3.5）耐性は、試料を水に溶解
し、人工胃液（0.3％NaCl、0.35％ペプシン５
％1N−HCl、PH1.4）を加えてPHを3.5とする。
37°60分保持したのち、直ちにPHを6.5に調整
し、ビフイズス菌数を計測する。原菌数に対す
る生存菌％で表示する。 人工胃液（PH2.5）耐性は、上記同様に操作
する。ただし反応PHを2.5とする。 試験の結果は次の第１表に示される。
温保存中にも生菌数が殆んど減少しない高菌数の
ビフイズス菌生菌粉末、およびその製法に関する
ものである。 一般に、ビフイズス菌は有用な腸内細菌とされ
ている。 しかしながらビフイズス菌を生菌粉末としたと
き、凍結障害や乾燥障害があり、また保存中の生
菌数の減少が著じるしく、更に、服用時の胃酸に
よる生菌数減少が著じるしく、活性の高い生菌粉
末の製品を得ることはきわめて困難であつた。 本発明者らは、凍結障害や乾燥障害を防止し、
保存中の生菌数の減少がなく、また、胃酸による
生菌数の減少のないビフイズス菌生菌粉末を求め
て鋭意研究したところ、本発明においてこれら目
的を達成することができた。 本発明は、牛乳蛋白質の加水分解物、糖類、酵
母エキス及びオレイン酸を主成分とする食用乳化
剤を含有する培地でビフイズス菌を嫌気条件下で
PHをほぼ一定にして培養し、得られた菌体含有液
に脱脂粉乳、澱粉分解質、グルタミン酸ソーダ、
アスコルビン酸ソーダ、マグネシウム塩を加え、
凍結乾燥してなる胃酸耐性の高いビフイズス菌生
菌粉末及びその製造方法である。 本発明において生菌粉末にするビフイズス菌と
してはヒト由来のBifidobacterium longum、
Bifidobacterium breve、Bifidobacterium
bifidum等のいずれの菌株でもよい。例示とし
て、Bifidobacterium longum ATCC15707、
Bifidobacterium breve ATCC15700、
Bifidobacterium bifidum ATCC11146などがあ
る。 本発明においては、特定成分の培地を必要と
し、かつ、特定成分の凍結乾燥分散媒を必要と
し、これらの組合せおよびPHをほぼ一定にして培
養することによつてはじめて保存性がよく、胃酸
耐性のあるビフイズス菌生菌粉末が得られるので
ある。 培地としては、牛乳蛋白質の加水分解物、糖
類、酵母エキス及びオレイン酸を主成分とする食
用乳化剤がすべて組合される。牛乳蛋白質の加水
分解物としては脱脂乳、ホエー、ガゼインなどの
蛋白質分解酵素による加水分解物があげられる。
糖類としては、各種糖類があるが、乳糖で十分で
ある。オレイン酸を主成分とする食用乳化剤とし
てはオレイン酸モノグリセライド、ソルビタンオ
レイン酸モノエステルなどがあげられる。 培地の成分中オレイン酸を主成分とする食用乳
化剤は、ビフイズス生菌の胃酸耐性を付与するの
に特に重要のものである。 培地としては、牛乳蛋白質の加水分解物１〜10
％程度、糖類１〜７％程度、酵母エキス0.01〜２
％程度、オレイン酸を主成分とする食用乳化剤
0.001〜1.0％程度が用いられる。 培地のPHは使用するビフイズス菌の種類によつ
てもわずかづつ変化するが、約6.8〜4.7程度の間
に調整される。 この培地は120℃10分間程度で加熱滅菌する。 ここでビフイズス菌種菌を接種し、窒素ガス又
は炭素ガスを通気しながら約37℃で嫌気培養を行
う。培養中はカセイソーダ等によりPHの変動を防
止し、それぞれのビフイズス菌に適したPHを一定
に維持するのが好ましい。 約12時間程度培養して略最高菌数に達するので
培養をとめ、培養液は遠心分離し、濃縮された菌
体含有液を得る。菌体を含有する培養液はそのま
までもよいが、高菌数の生菌を得るために濃縮す
るのが好ましい。 菌体含有液には脱脂粉乳、澱粉分解物、シヨ
糖、グルタミン酸ソーダ、アスコルビン酸ソー
ダ、マグネシウム塩を添加し、−20℃以下に凍結
し、凍結乾燥する。この際、マグネシウム塩の添
加は生菌の凍結乾燥時の障害を防止するのに必要
なもので、塩化マグネシウム又は硫酸マグネシウ
ムなどの可溶性マグネシウム塩を用いる。 これら分散媒はいずれもビフイズス生菌の凍結
乾燥に必要なもので、脱脂粉乳0.5〜20％、澱粉
分解物0.5〜20％、グルタミン酸ソーダ0.01〜２
％、アスコルビン酸ソーダ0.01〜２％、マグネシ
ウム塩0.001〜0.2％程度づつ配合される。 凍結乾燥物には、更に脱脂粉乳、澱粉分解物、
アスコルビン酸ソーダ等を添加、混合して、保存
中の生菌数の減少を防止する。 次に本発明の試験例及び実施例を示す。 試験例 実施例１で製造した本発明のビフイズス菌生菌
粉末の胃酸耐性と37℃及び20℃による保存中の菌
数低下を試験した。対照として市販のビフイズス
菌生菌粉末の市販品Ａ及び市販品Ｂを同時に試験
した。 (1) 胃酸耐性 人工胃液（PH3.5）耐性は、試料を水に溶解
し、人工胃液（0.3％NaCl、0.35％ペプシン５
％1N−HCl、PH1.4）を加えてPHを3.5とする。
37°60分保持したのち、直ちにPHを6.5に調整
し、ビフイズス菌数を計測する。原菌数に対す
る生存菌％で表示する。 人工胃液（PH2.5）耐性は、上記同様に操作
する。ただし反応PHを2.5とする。 試験の結果は次の第１表に示される。
【表】
(2) 菌数低下
保存（37℃及び20℃）中の菌数低下は、１ケ
月ごとに５ケ月まで、試料１ｇ中のビフイズス
菌数を計測する。 結果は第１図（37℃保存）と第２図（20℃保
存）に示される。 ここにおいて、１は実施例１にて製造したビ
フイズス菌生菌粉末、Ａは市販品Ａ、Ｂは市販
品Ｂを示す。 実施例 １ 脱脂粉乳10Kgを温水100Kgに溶解し、蛋白質分
解酵素粉末（微生物由来）40ｇを加え、50℃で３
時間反応させて牛乳蛋白質を加水分解する。これ
に酵母エキス500ｇ、オレイン酸モノグリセリド
100ｇを加え、PHを6.5に調整する。121℃７分間
加熱し、酵素の不活性化と滅菌をあわせ行なう。
冷却後ヒト由来のBifidobacterium longumを接
種し、炭酸ガスを通気しながら37℃で嫌気培養を
行なう。培養に際してば滅菌した2N−NaOHを
滴下してPHを6.2〜6.5となるように調整する。約
15時間培養したのち冷却し、約10000回転／分で
遠心分離し、濃厚菌体部分約20Kgを集める。これ
に脱脂粉乳１Kg、酸分解澱粉500ｇ、グルタミン
酸ナトリウム50ｇ、アスコルビン酸ナトリウム50
ｇを加え、さらにMgCl2・6H2O ４ｇを少量の水
にとかして加える。−80℃に凍結したのち、凍結
乾燥し、乾燥物約3.2Kgを得る。粉砕し、これに
脱脂粉乳１Kg、酸分解澱粉１Kg、アスコルビン酸
ナトリウム50ｇを加え混合し、ビフイズス菌生菌
粉末とする。 この生菌粉末は１ｇ当りビフイズス菌1011以上
を含有し胃酸耐性、および保存性ともすぐれてい
た。 実施例 ２ ナトリウムカゼイン３Kgに熱水100Kgを加えて
溶解する。微生物由来の蛋白質分解酵素粉末40ｇ
を加え、50℃で４時間反応させてカゼインを加水
分解する。これに乳糖５Kg、酵母エキス500ｇ、
ソルビタンオレイン酸モノエステル50ｇ、を加え
PHを6.0に調整する。120℃10分間加熱し、滅菌と
酵素の不活性化とをあわせ行なう。冷却後ヒト由
来のBifidobacterium longumを接種し、窒素ガ
スを通気しながら37℃で嫌気培養を行なう。培養
に際して滅菌した10％NaOHを滴下してPHを6.0
近傍に調整する。約12時間培養したのち冷却し、
6000回転／分で遠心分離し、濃厚菌体部分約30Kg
を得る。これに酸分解澱粉１Kg、脱脂粉乳300ｇ、
グルタミン酸ナトリウム30ｇ、アスコルビン酸ナ
トリウム50ｇを加え、さらにMgSO4・7H2O ５
ｇを少量の水にとかして加える。−30℃に凍結し
たのち、凍結乾燥し、乾燥物約3.0Kgを得る。粉
砕し、これに脱脂粉乳500ｇ、酸分解澱粉500ｇ、
アスコルビン酸100ｇを加えてビフイズス菌生菌
粉末とする。 この生菌粉末は１ｇ当りビフイズス菌1011以上
含有し、胃酸耐性および保存性共すぐれていた。 実施例 ３ ホエー粉10Kgに温水100Kgを加えて溶解する。
微生物由来の蛋白質分解酵素粉末40ｇを加え、50
℃で３時間反応させてホエー蛋白質を加水分解す
る。これに酵母エキス500ｇ、ソルビタンオレイ
ン酸モノエステル25ｇ、オレイン酸モノグリセリ
ド40ｇを加えPHを5.6に調整する。120℃８分間加
熱し、滅菌と酵素の不活性化とをあわせ行なう。
冷却後、ヒトの乳児由来のBifidobacterium
breveを接種し、37℃で嫌気培養する。培養に際
しては、滅菌した2N−NaOHを滴下してPHを5.5
近傍に調整する。約15時間培養後冷却し、脱脂粉
乳１Kg、酸分解澱粉１Kg、グルタミン酸ナトリウ
ム50ｇ、アスコルビン酸ナトリウム50ｇを加え、
さらにMgSO4・7H2O10ｇを少量の水にとかして
加える。−20℃に凍結したのち、凍結乾燥し、乾
燥物約5.0Kgを得る。粉砕し、これに脱脂粉乳１
Kg、酸分解澱粉１Kg、アスコルビン酸ナトリウム
500ｇを加え、ビフイズス菌生菌粉末とする。こ
の生菌粉末は１ｇ当りビフイズス菌を２×1010以
上含有し、胃酸耐性および保存性ともすぐれてい
た。
月ごとに５ケ月まで、試料１ｇ中のビフイズス
菌数を計測する。 結果は第１図（37℃保存）と第２図（20℃保
存）に示される。 ここにおいて、１は実施例１にて製造したビ
フイズス菌生菌粉末、Ａは市販品Ａ、Ｂは市販
品Ｂを示す。 実施例 １ 脱脂粉乳10Kgを温水100Kgに溶解し、蛋白質分
解酵素粉末（微生物由来）40ｇを加え、50℃で３
時間反応させて牛乳蛋白質を加水分解する。これ
に酵母エキス500ｇ、オレイン酸モノグリセリド
100ｇを加え、PHを6.5に調整する。121℃７分間
加熱し、酵素の不活性化と滅菌をあわせ行なう。
冷却後ヒト由来のBifidobacterium longumを接
種し、炭酸ガスを通気しながら37℃で嫌気培養を
行なう。培養に際してば滅菌した2N−NaOHを
滴下してPHを6.2〜6.5となるように調整する。約
15時間培養したのち冷却し、約10000回転／分で
遠心分離し、濃厚菌体部分約20Kgを集める。これ
に脱脂粉乳１Kg、酸分解澱粉500ｇ、グルタミン
酸ナトリウム50ｇ、アスコルビン酸ナトリウム50
ｇを加え、さらにMgCl2・6H2O ４ｇを少量の水
にとかして加える。−80℃に凍結したのち、凍結
乾燥し、乾燥物約3.2Kgを得る。粉砕し、これに
脱脂粉乳１Kg、酸分解澱粉１Kg、アスコルビン酸
ナトリウム50ｇを加え混合し、ビフイズス菌生菌
粉末とする。 この生菌粉末は１ｇ当りビフイズス菌1011以上
を含有し胃酸耐性、および保存性ともすぐれてい
た。 実施例 ２ ナトリウムカゼイン３Kgに熱水100Kgを加えて
溶解する。微生物由来の蛋白質分解酵素粉末40ｇ
を加え、50℃で４時間反応させてカゼインを加水
分解する。これに乳糖５Kg、酵母エキス500ｇ、
ソルビタンオレイン酸モノエステル50ｇ、を加え
PHを6.0に調整する。120℃10分間加熱し、滅菌と
酵素の不活性化とをあわせ行なう。冷却後ヒト由
来のBifidobacterium longumを接種し、窒素ガ
スを通気しながら37℃で嫌気培養を行なう。培養
に際して滅菌した10％NaOHを滴下してPHを6.0
近傍に調整する。約12時間培養したのち冷却し、
6000回転／分で遠心分離し、濃厚菌体部分約30Kg
を得る。これに酸分解澱粉１Kg、脱脂粉乳300ｇ、
グルタミン酸ナトリウム30ｇ、アスコルビン酸ナ
トリウム50ｇを加え、さらにMgSO4・7H2O ５
ｇを少量の水にとかして加える。−30℃に凍結し
たのち、凍結乾燥し、乾燥物約3.0Kgを得る。粉
砕し、これに脱脂粉乳500ｇ、酸分解澱粉500ｇ、
アスコルビン酸100ｇを加えてビフイズス菌生菌
粉末とする。 この生菌粉末は１ｇ当りビフイズス菌1011以上
含有し、胃酸耐性および保存性共すぐれていた。 実施例 ３ ホエー粉10Kgに温水100Kgを加えて溶解する。
微生物由来の蛋白質分解酵素粉末40ｇを加え、50
℃で３時間反応させてホエー蛋白質を加水分解す
る。これに酵母エキス500ｇ、ソルビタンオレイ
ン酸モノエステル25ｇ、オレイン酸モノグリセリ
ド40ｇを加えPHを5.6に調整する。120℃８分間加
熱し、滅菌と酵素の不活性化とをあわせ行なう。
冷却後、ヒトの乳児由来のBifidobacterium
breveを接種し、37℃で嫌気培養する。培養に際
しては、滅菌した2N−NaOHを滴下してPHを5.5
近傍に調整する。約15時間培養後冷却し、脱脂粉
乳１Kg、酸分解澱粉１Kg、グルタミン酸ナトリウ
ム50ｇ、アスコルビン酸ナトリウム50ｇを加え、
さらにMgSO4・7H2O10ｇを少量の水にとかして
加える。−20℃に凍結したのち、凍結乾燥し、乾
燥物約5.0Kgを得る。粉砕し、これに脱脂粉乳１
Kg、酸分解澱粉１Kg、アスコルビン酸ナトリウム
500ｇを加え、ビフイズス菌生菌粉末とする。こ
の生菌粉末は１ｇ当りビフイズス菌を２×1010以
上含有し、胃酸耐性および保存性ともすぐれてい
た。
第１図は試験例で37℃保存の菌数低下を計測し
た図で、第２図は試験例で20℃保存の菌数低下を
計測した図である。 １……実施例１にて製造したビフイズス菌生菌
粉末、Ａ……市販品Ａ、Ｂ……市販品Ｂ。
た図で、第２図は試験例で20℃保存の菌数低下を
計測した図である。 １……実施例１にて製造したビフイズス菌生菌
粉末、Ａ……市販品Ａ、Ｂ……市販品Ｂ。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 牛乳蛋白質の加水分解物、糖類、酵母エキス
及びオレイン酸を主成分とする食用乳化剤を含有
する培地でビフイズス菌を嫌気条件下でPHをほぼ
一定にして培養し、得られた菌体含有液に脱脂粉
乳、澱粉分解物、グルタミン酸ソーダ、アスコル
ビン酸ソーダ、マグネシウム塩を加え、凍結乾燥
してなる胃酸耐性の高いビフイズス菌生菌粉末。 ２ 牛乳蛋白質の加水分解物、糖類、酵母エキス
及びオレイン酸を主成分とする食用乳化剤を含有
する培地でビフイズス菌を嫌気条件下でPHをほぼ
一定にして培養し、得られた菌体含有液に脱脂粉
乳、澱粉分解質、グルタミン酸ソーダ、アスコル
ビン酸ソーダ、マグネシウム塩を加え、凍結乾燥
することを特徴とする胃酸耐性の高いビフイズス
菌生菌粉末の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59042982A JPS60188060A (ja) | 1984-03-08 | 1984-03-08 | 胃酸耐性の高いビフイズス菌生菌粉末及びその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59042982A JPS60188060A (ja) | 1984-03-08 | 1984-03-08 | 胃酸耐性の高いビフイズス菌生菌粉末及びその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60188060A JPS60188060A (ja) | 1985-09-25 |
| JPH0416145B2 true JPH0416145B2 (ja) | 1992-03-23 |
Family
ID=12651239
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59042982A Granted JPS60188060A (ja) | 1984-03-08 | 1984-03-08 | 胃酸耐性の高いビフイズス菌生菌粉末及びその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60188060A (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3727946A1 (de) * | 1987-08-21 | 1989-03-02 | Werner Georg Munk | Rekonstituierbares trockenprodukt zum direktverzehr, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung |
| US6368591B2 (en) | 1998-05-15 | 2002-04-09 | Shanghai Sine Pharmaceutical Corporation Ltd. | Beneficial microbe composition, new protective materials for the microbes, method to prepare the same and uses thereof |
| CN1898376A (zh) * | 2003-12-03 | 2007-01-17 | 圣诺菲·帕斯图尔有限公司 | 用于微生物的冷冻保护剂 |
| NO322115B1 (no) * | 2004-11-15 | 2006-08-14 | Tine Ba | Anvendelse av en bakteriekultur tilsatt oljesyre for fremstilling av probiotiske produkter. |
| NO323245B1 (no) * | 2004-11-15 | 2007-02-12 | Tine Sa | Fremgangsmåte for fremstilling av fermentert produkt, og produkt fremstilt ved fremgangsmåten |
| JP2008267431A (ja) * | 2007-04-17 | 2008-11-06 | Ntn Corp | 複列円すいころ軸受装置 |
-
1984
- 1984-03-08 JP JP59042982A patent/JPS60188060A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS60188060A (ja) | 1985-09-25 |
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