JPH04210632A - 血管拡張剤および免疫抑制薬２−イソプロピル−２−フェニルアミノバレロニトリルの使用方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

発明の背景 ［０００１］本発明は新規の化合物および組成物の新好
の使用方法に関し、前記の化合物が哺乳動物の抗高圧荀
薬としてまた免疫抑制に対して薬理学的に有用であり、
特にほかの免疫抑制性薬品、特にシクロスポリン（シろ
ロスポリンＡとしても知られている）の投与と連合しＸ
哺乳動物の抑制に有用である場合の新規の使用方法に■
する。 ［０００２）さらに具体的には、本発明の方法は、フェ
ネチルアミノ部分が置換されている一つの部類の２−イ
ソプロピル−２−フェニル−５−（フェネチルアミノ）
バレロニトリルの投与により免疫抑制をもたらすことで
ある。本発明の化合物は、カルシウムおよびカリウムＣ
チャンネルに対する混合イオンチャンネル遮断剤である
ことが知られているベラパミルと構造的に関係がある。 ［０００３］ 〔産業上の利用分野〕免疫抑制は臓器および骨−骨髄移
植の分野に必要な技術である。免疫抑制剤は同種の移植
組織（同じ種の、しかし発生学的に同一でない個体間の
移植組織）における臓器拒絶の予防および治療に使用さ
れる。この治療は膵臓、心臓−肝移植組織および骨−骨
髄移植組織の小さな範囲の移植組織に対すると同様に腎
臓、肝臓、および心臓の移植組織の生存の延長を助ける
。前記免疫抑制は、通常移植された臓器または組織の宿
主の免疫系統による拒絶および大規模な破壊を生じる、
外から入ってきた臓器または組織の存在に対する免疫系
統の反応を変えるために必要である。 ［０００４）シクロスポリンＡは臓器拒絶の予防と治療
に特に効果的な免疫抑制剤である。シクロスポリンＡは
一家族の化合物の一員であり、菌トリポクラジウム　イ
ンフラタム　ガム（Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ　　ｉ
ｎｆｌａｔｕｍ　　ｇａｍｓ）によって作られる疎水性
環状ウシデカペプチドである。ほかのシクロスポリンと
してはシクロスポリンＢとシクロスポリンＧが挙げられ
る。 シクロスポリンＡは細胞介在反応と同様に液素性免疫性
を抑える。シクロスポリンＡは腎臓、肝臓、心臓、膵臓
、骨−骨髄および心臓−肝移植組織の臓器拒絶に対して
必要である。シクロスポリンＡはまたクローン病、グレ
ーブス眼病、激性乾廊、再生不良性貧血、多重硬化症、
円形脱毛症、並びにｐｅｎｐｈｉｇｕｓおよびｐｅｎｐ
ｈｉｇｏｉｄ、皮膚筋炎、多筋炎、ベーチェット病、葡
萄膜炎、肺性類肉症、胆のう硬変症、重症性無筋力症お
よび過敏性皮膚炎に有用である。 〔０００５〕不幸なことに、シクロスポリンＡは、もし
その方法が腎臓移植であるならば移植された腎臓そのも
のに対する損害を含めて、臓器移植を受ける患者にいち
じるしい肝臓または腎臓の損害をもたらす、腎および肝
細胞前をもたらし得る。それゆえ、本発明の目的は、哺
乳動物に投与したとき、免疫抑制をもたらしなおかつシ
クロスポリンの投与よりもいちじるしく低い毒性を示す
部類の化合物を投与する方法を提供することにある。 ［０００６）本発明のそれ以上の目的は、シクロスポリ
ンまたは別の免疫抑制薬と同時に哺乳動物に投与したと
き、所望レベルの免疫抑制を達成するのに必要なシクロ
スポリンまたは別の免疫抑制薬の投与量を低下させるた
めに相乗的な仕方で作用し、したがってシクロスポリン
または別の免疫抑制薬によってもたらされる毒性の原因
となる可能性を減少させる一つの部類の化合物を提供す
ることにある。ほかの免疫抑制薬としてはレバミソル、
コルチコステロイド、非ステロイド抗炎症性薬品（ＮＳ
ＡＩＤＳ）、ある種のプロスタグランジンおよびマクロ
ライドＦＫ−５０６（藤沢）が挙げられる。 ［０００７］本発明は、そのインターロイキン生産を阻
啓する能力、それによってＴ−リンパ芽球、したがって
ｒ−細胞増殖を阻害する能力のおかげで免疫抑制剤とし
び有効性を示す、新しい置換２−イソプロピル−２−フ
Ｌニル−５−（フェネチルアミノ）バレロニトリルを投
手する新規の方法を提供する。Ｔ−細胞増殖の阻害はた
ち代わって標準の哺乳動物の免疫応答のキーステップ、
田胞障害性Ｔ−リンパ球の活性を阻止する。 ［０００８３本発明は更に系統的抗高血圧剤として活性
日よび有用性を有し、腎虚血および脳虚血の治療に有用
よ部位選択性血管拡張活性を有する化合物を提供する。 障発明の化合物の免疫活性に対する作用機構はその化合
的の心臓血管のカルシウムチャンネル阻止活性と関係が
よいと考えられる。

【化１３】 ［００１０］式中、Ｒ１は水素；ヒドロキシ；炭素原子
数１〜１０の置換または非置換アルキル、アルケニル、
またはアルキニル、ただし置換基はヒドロキシまたはケ
ト；炭素原子数１〜１０のアルキルカルボニルである；
炭素原子数１〜１０のアルコキシカルボニル；または越
素原子数１〜１０のアルキルアミドであり；Ｒ２、Ｒ３
，Ｒ５およびＲ６は独立的にヒドロキシまたは炭奔原子
数１〜１０のアルコキシであり；Ｒ４とＲ７は独尤的に
水素、炭素原子数１〜１０のアルキル、アルケニ月また
はアルキニルであり：ｍは１〜２の整数であり；ｎは１
〜５の整数である、の新規の化合物およびその薬学的に
許容し得る塩の新規の投与方法に関する。 〔００１１）本発明の更に好ましい実施態様は一般式Ｉ
■、

【化１４】 ［００１２〕式中、Ｒ１は水素；ヒドロキシ：炭素原子
数１〜１０の置換または非置換アルキル、アルケニル、
またはアルキニル、ただし前記置換基はケトまたはヒド
ロキシ：炭素原子数１〜１０のアルキルカルボニル；炭
素原子数の１〜１０のアルコキシカルボニル；または炭
素原子数１〜１０のアルキルアミドである、である、［
００１３）の新規の化合物およびその薬学的に許容し得
る塩の投与方法に関する。 ［００１４〕その化合物およびその薬学的な組成物は本
発明の免疫抑制方法に有用である。本発明は更に経口、
局部および非経口投与に適合させられた投薬量単位の形
の投与を提供する。本発明においてはまた、免疫抑制の
ために、その化合物の薬学的に許容し得る塩の投与を提
供する。 〔００１５３本明細に使用するとき、表現”′アルキル
゛、アルケニルおよび“アルキニル“は１またはそれ以
上の不飽和度をもつ炭素原子数１〜１０の直鎖または分
枝炭素−炭素結合を含むものと定義する。 ［００１６）用語°“アルキルカルボニル“および“カ
ルコキシカルボニル“は上記に定義したようなアルキル
、アルケニルまたはアルキニル部分を含むものと定義す
る。 ［００１７）用語゛′アルキルアミド”″は上記に定義
したようなアルキル、アルケニルまたはアルキニル部分
を含むものと定義する。 ［００１８）用語゛薬学的に許容し得る塩゛は本発明の
化合物の非毒性塩を言い、それは一般に遊離塩基と適切
な有機酸または無機酸を反応させることによってまたは
酸と適切な塩基とを反応させることによって調製される
。 （００１９）代表的な塩としては次の塩が挙げられる；
詐借塩 へ１１ンそ“ンＺル震ン麩峡彌 キ惠畳醋埴 ７膚職貞 重発Ｒ鵡 を二〇７；熾１ ホヤ橢堰 攻・イ（！ｔ＞ ｊＬ功燻境（Ｌａそｔｓｂｔｏ−ｑ４亡０２ウノン噌蝋 ソン″：Ｐ織点 、マレインＲｔ鼠 ７ン左ル穢壇 〉Ｋ　シ　ルｒｌｌＢ（ル１＜５ｙｌｔｓｔｃフメ＋Ｉ
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【図１１　　［００２７］ 【図２１　　［００２８］ 【図３］　　［００２９） 【図４］　　［００３０）上記の図において、ＡｃはＣＯＣＨ３部分を意味し、Ｐｈはフェニル部分を意味する。 ［００３１）免疫抑制を達成するのに、本発明の化合物は錠剤、カプセル、火剤、粉末、顆粒、エリキシル、チンキ剤、懸濁液、シロップおよびエマルジョンのような経口投薬の形で投与できる。さらに、それらはまた静脈内、腹腔内、皮下または筋肉内形で、調剤技術で通常の精通者に知られている形をすべて使用して投与することができる。 ［００３２）一般に、投与の好ましい形は経口投与である。新規の方法において特許請求をを行った化合物の一つの有効であるが非毒性の量は、哺乳動物の免疫応答の抑制に、または高血圧症、腎虚血または脳虚血の治療に免疫抑制剤として使用できる。本発明の代わりの実施態様は免疫抑制の養生計画におけるシクロスポリンの効果的であるが以前に規定したものより少ない量と同時に有効な非毒性量の一つまたはそれ以上の前記の化合物の新規の投与方法である。 ［００３３］本発明の投薬養生計画は、患者の型、種、年令、停電、性および医学的状態；治療される条件のきびしさ；投与の経路；患者の腎臓および肝臓の機能；および使用する特別の化合物またはその塩を含むさまざまな要因に従って選定される。普通に精通した内科医または獣医は、免疫抑制を達成するために必要とされる薬品の有効量を容易に決定し指示することができる。 ［００３４）本発明の方法に利用する化合物の投薬量は、必要とする効果のために使用するとき、１日当り体重のｋｇ当り０．１ｍｇ　（ｍｇ／ｋｇ／日）〜約１，０００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましく（ま１．０〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。都合よく、本発明の方法に利用する化合物は日に１回の投薬で投与でき、または−日の全投薬量を日に２．３または４回の分割投薬で投与できる。 ［００３５）その上、本発明に利用するのに好ましい化合物は、その技術に通常の精通者に良く知られている鼻内皮膚貼剤の形のものを使用して、適切な鼻内使薬の局所的使用によって、または経皮的経路によって鼻内形で投与することができる。鼻内交付方式の形で投与するためには、投薬量の投与は、もちろん、投薬養生計画を通じて連続するものである。 ［：００３６１本発明の方法において、本明細書に詳細に記述した化合物は活性成分を形成でき、典型的に意図する投与の形に関して、すなわち、経口錠剤、カプセル、エリキシル、チンキ剤、シロップなど、従来の製剤慣行と一致して適切に選定した適切な薬学的希釈剤、賦形剤または担体（集合的に゛担体パ材料として本明細書で称する）との混合物で投与される。 ［００３７）たとえば、錠剤またはカプセルの形の経口投与のために、活性薬品成分は経口、非毒性、薬学的に許容し得る、不活性担体、たとえばラクトース、でんぷん、スクロース、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸シカルシウム、硫酸カルシウム、マンニトール、ソルビトールなどと合体でき、液体形の経口投与のために、経口薬品成分はどのような経口、非毒性、薬学的に許容し得る不活性担体、たとえばエタノール、グリセロール、水などと合体させることができる。 （ＯＯ３８）その上、望むときまたは必要なとき、適切な結合剤、潤滑剤、崩解剤および着色剤も混合物中に混合することができる。適切な結合剤としてはでんぷん、ゼラチン、グラコースやβ−ラクトースのような天然の糖、コーン甘味料、アカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウムのような天然および合成ガム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが挙げられる。これらの投薬形に使用される潤滑剤としてはオレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、限定なしに、でんぷん、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。 ［００３９）本発明に利用される化合物はまたリポソーム交付方式、たとえば小形−層状小胞、大形−層状小胞、および多層状小胞の形で投与できる。リポソームはさまざまなリン脂質、たとえばコレステロール、ステア月しアミンまたはホスファチジルコリンから生成することができる。 ［００４０）本発明に利用する化合物はまた複合分子が結合する個体担体としてモノクローナル抗体の使用によって交付される。本発明に利用する化合物は標的を定めることができる薬品の担体として可溶性重合体と結合することもできる。そのような重合体としてはポリビニルピロリドン、ビラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスバルチミドーフェノール、またはバルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリシンが挙げられる。 ［００４１）さらに、化合物は薬品の抑制された解放を達成するのに有用な生物分解可能な一つの部類の化合物、たとえば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸の共重合体、ポリニブシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルソエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロビラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコーポリマーと結合することができる（００４２］本発明の方法に利用した化合物は移植した臓器の拒絶の治療に有用な免疫抑制活性を示す。化合物のこの活性を測定するために使用した試験手順を以下に記述する。 ［００４３］ 実施例　２ ＮＭＲスペクトルを内部標準として（ＣＨ３）　４　Ｓ　ｉを使用して表示するとき溶媒中でパリアン（Ｖａｒｉａｎ）ＸＬ−２００またはＧＴＥ−ＱＥ３００分光計のどちらかで得た。赤外スペクトルをＣＨＣｌ３中でパーキン・エルマー（Ｐｅ　ｒｋ　ｉｎ−ＥＩｍｅ　ｒ）６８５分光計で記録した。 ［）０４４］ ２−　（３，４−ジメトキシフェニル）−２−イソプロピル−５−［３，４−ジメトキシ−（６−置換フェネチル）メチルアミノコバレロニトリルの一般的調製方法：［００４５）ベンゼン２５０ｍ１中のベラパミル２．５ミリモルの撹拌溶液に酢酸パラジウム（２価）３０ミリモルを加え、４日間撹拌した。次いでガス計量装置（Ｒ，Ｆ、　Ｈｅｃｋ、　Ｊ、　Ａ、　Ｃ，Ｓ、　、　８３．　１０９７（１９６１）に移し、−酸化炭素（Ｃｏ）をどっと流して室温で求核試薬（アルコール、アミン、グリニヤール試薬）を加えた。４時間後、反応混合物をム濾マ過し、溶媒を減圧下に除去した。残分をシリカゲル上でクロマトグラフ分析を行った。 ［００４６］ 実施例　３ 【化１５】

Ｃｏ　０４７） カルボニル化パラジウム錯体にＣＨ３ ＯＨ※ ※を添加して標題の化合物を得た。 ネナ’１＜殻 ６７．９５ ７．８６ ５．４６ ’ｊｌ：５ｊづイｄ１ ６７．０１ ８．１２ ５．２４ Ｃ２９”４Ｇ’２０６ ＮにＲ ４０，７９（３Ｈ−ｄｔ　　Ｊ−６−６Ｈ）１．１８（
３Ｈ−ｄ−Ｊ−６−６Ｈ＞１−１９（ＬＨ−ｍ）１．５
５−２．０５（ｎ、　　３８）、　　２．２３（３Ｈ，
Ｓ）、　　２．２５−２．フ５（）Ｈ，ｍ）６．５−６
．１！（ｍ、　　４Ｍ）７．３５（ｉｓ、　　ＩＨ）、
　　３．８Ｇ、　　（８，３１）３．７８（Ｓ、　　コ
Ｈ）、　　３．１８（ｌｉ！、　　３）１）３．８９（
６，３Ｈ）ｌ ！ｍｌ　　　、１７１８ｃｍ　　　　　　　　４１１［
００４８］ 実施例　４

【化１６】 ［００４９］エーテル中の実施例３の生成物のエーテル
を含んだ溶液にエーテル中のクエン酸の添加によって標
題の化合物を調製した。沈澱をム濾マ過、［００５０］ 乾燥した。 Ｃ １＋１１値 ５９．６５ ブー５５１色すイ一一二 ６Ｇ、１１ ６．８６ ７．１０ Ｃ３１０Ｃ３５ス０１３ ３．９７ ３．９９ ［００５１）上記の方法によって、当接術の普通の精通
者は１．　２．　３−プロパントリカルボン酸塩または
２゜３−ジヒドロキシブタンジオン酸塩を得ることがで
きる。 ［００５２］ 実施例　５

【化１７】 （００５３］力ルボニル化パラジウム錯体にｔ−ブチル
アミンを添加して標題の化合物を得た。標題の化合物の
クエン酸塩を遊離塩基のエーテル溶液に飽和クエン酸の
添加によって得た。収集した沈澱を乾燥した。収率：３
２％。 〔００５４） 代わりに、ｔ−ブチルアミンの代わりにメチルアミンを
添加して対応するメチルアミドを生じた。 ［００５５］ 軒１運 ６２．０３ ６．１６ ５．７１ 文壇フ１１虐［− ６２，７２ ７，４６ ６，０ａ Ｃ３１１’５５”コ０１２ Ｘλ ０．７５ｐｐｃａ、　（ｄ、　３Ｈ，Ｊ＝６−６Ｈ）、
　１．ｘ６ｔａ、　３Ｈ，Ｊ属６．６）１）１．４６ｐ
ＦＩｌ（Ｓ、　　９Ｍ）、　　２．８（８，コＬ　　Ｎ
−ｍｅ）３．Ｂｌ（Ｓ、　　３ｇ）・３．１！３（８，
９Ｋ）、６．９７−７．０３（ｍ、４）１）７．３６（
Ｓ、ＩＨ）１７１５０！ｌ−”（クエン噸シ１）。 １８４０ｃｒｍ　　　。 ２２１釈１−１ （００５６）実施例４の方法によって、クエン酸塩。 １、　２．　３−トリカルボン酸塩または２，３−ジヒ
ドロキシブタンジオン酸を得ることができた。 実施例　６

【化１８】 Ｃｏ　０５８） １００ｍｌのベンゼン中のベラパミル４ｇ（８゜ ８ミリモル） を２゜ ２ｇのＰｄ （ＯＡｃ） に加 え、室温で４日間撹拌した。１００ｍ１の水の中のＮａ
Ｃ１飽和溶液と９６ｍ１のアセトンを生成した溶液に加
え、室温で１５分間撹拌した。次いで溶媒を減圧下に除
去した。 ［００５９） それから１００ｍ１のトルエン、２５ｍ１のトリエチル
；アミンを加え、混合物を１２０℃に２時間加熱し、次
いで室温に冷却した。有機相をム濾マ過し、水で洗浄し
、乾燥し、再度ム濾マ過して溶媒を除去した。 ［００６０〕 クロマト分析後、標題の化合物を得た（３．２ｇ、８０
％）、融点１１９〜１２１℃（エーテルから）。 計Ｖ櫨 ８．１０ ５．３６ 亥　ジーブイ直 ７１．５７ ８．３０ ５．２５ ＮにＲ ＜　ｐＰｎ）・ ０．７９（ｄ。 ２．２２（＄１゜ ６．６８＜８゜ ７．０８（８゜ ３．８７（５１゜ ３Ｈ２ ３Ｈ）。 ｌＨ）。 ＬＨ）。 ３Ｈ）。 Ｊ−６，６Ｈ＞、　　１．１５１（（１，３Ｈ，＊Ｔ畠
６．６Ｈ）２．３６（８，３１４）、６．５６（（！、
ＩＨ，Ｊ、１５Ｈ）６．８０−６．９２（１！に＃　　
２８）、６．８６（８，１８）７．７６（ｄ、　　ＩＨ
，Ｊ■１５Ｈ）３．８８ぐＳ、　コ）［）、　　４．０
０（Ｓ、　　３Ｈ）、　　４．０１（８゜３Ｍ） ３４１０ａｍ−１゜ １５９３ａｍ　　。 ２１５０ａｒｏ−１ １５０９ｃ！Ｅｌ−１ １６５９ｃ填−１゜ １６３９ｃｍ−１ ［００６１） 実施例　７

【化１９】 ［００６２） イソプロパツールをカルボニル化パラジウ★　★ム錯体
に加えた。 寥ヤ葦４　　　　１賞慢１４ Ｃ６１！１．８６　　　　　６８．３４Ｈ！１，２０　
　　　　　８．３２ Ｎ　　　　　　　５．ｌａ　　　　　　　４．９２収率
：４０％ Ｎに冨。 Ｓ　　　Ｏ，フ９（３Ｈ，（１，Ｊ麟６．６Ｈ）、　　
１．１８（３４，（１，：ｆ■６．６１）１．３８（６
Ｈ，ｄ、　　Ｊ雪６．６Ｈ）、　　２．２４（３）ｌ、
　　Ｓ、　　３８ン３．１１０．　（８，３１１）３Ｊ
２（８，３）り３．８５（Ｉｉ！、３）り３．９０（８
，３！（）５．２４（１１＠ｐｔ・ｔ　５層６．６Ｈ，
ｌＦｉ＞１　６．）３（５，１Ｍ）６．９０（ｍ、　　
３１り　　７．０５（８，ＩＨ）ＩＲ。 （ＣｕＣ１３）　　ｌフ１４３−’ ［００６３） 実施例　８ Ａ１分裂促進剤誘誘起−細胞増殖に対する効果当接術の
普通の精通者に良く知られている方法を使用して、本発
明に利用した化合物が、１０〜１１００ｕの一囲にわた
って、投薬に関連した様式で植物性血球凝集Ａ（ＰＨＡ
）誘起Ｔ−細胞増殖を抑制することを見出した。試験し
た効力の相対的順序は実施例４の化合者（１，２，３−
プロパントリカルボン酸塩）〉実施例５の化合物（１，
２，３−プロパントリカルボン酸塩）〕実施例５の化合
物（２，３−ジヒドロキシブタンジオシ酸塩）であった
。 （００６４）Ｔ−細胞増殖の抑制における同様の投薬り
存関係および相対的効力の順序がさまざまな化合物の樗
的としてインターロイキン−２依存ＰＨＡ−誘起Ｔ−リ
ンパ芽球を使用して観察できる。ＰＨＡ−誘起芽球細陛
または末梢血液単核細胞白血球（ＰＢＭＣ）およびＰＨ
Ａの新鮮な培養のいずれかに対する外因的なヒト組換λ
ＩＬ−２の添加は、その化合物の抗増殖効果に打ち克て
なかった。 ［００６５） Ｂ０分裂促進剤誘誘起−細胞増殖の抑制における本発つ
に利用した化合物とシクロスポリンＡ（ＣｓＡ）の相沖
作用 ［００６６）本発明に利用した化合物は試験管内でのＴ
細胞の増殖の阻止にＣｓＡと相乗作用をする。当接体の
普通の精通者によく知られている方法を使用して、ＦＨ
Ａ刺激したＰＢＭＣを試験した各化合物の一定の投葦量
において、増殖を全体的に阻止する最低投薬量のＣｓＡ
　（１２５ｎｇ／ｍｌ）でスタートして、ＣｓＡの投擬
量を減少させながら培養した。６ｎｇ／ｍｌという低い
ＣｓＡ投薬量を利用した。実施例４の化合物（１，２゜
３−プロパントリカルボン酸塩）の濃度を５ｕＭに一定
に維持し、一方実施例５の化合物（１，２，３−プロパ
ントリカルボン酸塩）および実施例５の化合物（２，３
ジヒドロキシブタンジオン酸塩）の濃度を２５ｕＭに維
持した。 ［００６７）相乗作用は分解促進剤誘起Ｔ−細胞の増殖
の超加成性抑制により、ＣｓＡと試験した化合物により
仲介された抗増殖効果によって明示された。本発明に利
用した化合物の添加はＣｓＡのＩＣ５ｏを３〜４倍だけ
移動させた。 ［００６８］ Ｃ，Ｔ−細胞活性化遺伝子発現に関する本発明に利用し
た化合物の効果ＣｓＡはＰＨＡ刺激培養におけるさまざ
まな新たな転写事象の発現にいくつもの特徴的な効果を
有する。インターロイキン−２（ＩＬ−２）メツセンジ
ャーＲＮＡ　（ｍＲＮＡ）　　（ただしＩＬ−２受容体
ｍＲＮＡでない）の転写は、分解促進剤刺激ヒトＰＢＭ
Ｃｓ中で阻止される。全ＲＮＡは無刺激、分解促進剤刺
激、および分解促進剤刺激薬品処理（１００ｕＭ）培養
によりヒトＰＢＭＣｓから抽出される。転写はノーザン
ブロツト法によって分析した；ＲＮＡはＩＬ−２および
ｐ５５ＩＬ−２受容体ｍＲＮＡ　（ＴＡＣ，ＣＤ２５）
に対する放射標識ｃＤＮＡに混成した。 ［００６９］　　１００　ｕＭの実施例４の化合物（１
，２゜３−プロパントリカルボン酸塩）および実施例５
の化合物（１，２，３−プロパントリカルボン酸塩）は
ＩＬ−２ｍＲＮＡの蓄積を完全に破壊したが、一方ＩＬ
−２受容体ｍＲＮＡは、せいぜい、僅かに減少させられ
るだけであった。ｐ５５ＩＬ−２受容体タンパク質（Ｃ
Ｄ２５）の翻訳および表面発現はどちらの化合物によっ
てもほんの僅かに抑制されるだけであった。ＣＤ２５発
現はム高マ濃度の二つの化合物によって僅かに減少した
が、ＴＡＣ（ＣＤ２５）タンパク質の表面発現は抗ＣＤ
２５モノクローナル抗体を使用するＦＡＣ３分析によっ
て明瞭に検出できた。 ［００７０］その上、活性化誘起したＨＬＡ−ＤＲ抗体
の表面発現はこれらの物質によって抑制されなかった。 対照的に、ＩＬ−２ｍＲＮＡの不在を維持することにお
いて、ＩＬ−２タンパク質はＥＬＩＳＡ系の使用によっ
て培養上澄み液中に検出できなかった。 ［００７１］本発明の方法に利用した化合物は、免疫抑
制薬として期待しなかった、驚くべきかつ非自明な活性
を有する。同様に、そのＣｓＡとの相乗効果も期待しな
かったし非自明であった。そのＣｓＡとの投薬量低下相
乗作用は治療的免疫抑制において、それらが低血圧症、
徐脈および腎毒性の副作用を避けることを期待できる。 ［００７２）実施例　９実施例１、図１の生成物である
化合物は、脳および腎組織に対しカルシウムチャンネル
の封鎖活性により血管の抵抗に減少をもたらすことにお
いて部位選択的であることが見出された。 ［００７３：］麻酔のもとに、大人の雄のＳＨＲの頚動
脈、大腿動脈および左心室にカニユーレを挿入した。３
〜５時間の回復期間後、動物を試験化合物または擬薬の
どちらかで処理した。１０分間定常状態の条件に到達さ
せるためにかけた。それから動脈の血圧を大腿のカニユ
ーレを経て監視した。この測定の直後、参照血液試料を
採取し、放射能標識したミクロスフェアを左心室に注射
した。それからラットを殺し、臓器を取り除き、重量を
計り計数した。心臓血液搏出量を計算した。 ［００７４〕組織ｇ当りの心臓血液搏出量分配％、組織
ｇ当り流量、および組織ｇ当りの抵抗時間を次の臓器：
脳、心臓、腎臓、内臓器（肝臓＋膵臓、牌およびＧ。 ■、道）、骨格筋および皮膚に対して計算した。試験化
合物を１．０ｍｇ／ｋｇの１．Ｖ、大粒丸薬として投与
した。治療群と対照群の間の平均値の差を一方向一変数
分析および最も小さい顕著差試験によって分析した。対
象化合物は脳に対し 菅埒伊７１１８１ 対謂、Ｃ’　ｋ／Ｉ　Ｓ　Ｏ Ｐ　＜　、９．　、ｉｆ 臂鳩ｌ（えテし 」丈ｒＬ（１！ｆ　／　　１８　／ 肘ｒｐ　　ｒ；ｒＭｓ。 ？＜ａ、、ｉｒ ／　９．ｅ３冑４ｗＩＨ）　４＞　１　／　側ｅ２−％
０　／ＨＡ−Ｈ２Ｑ　：Ｆ　／　伺（：２２−１ｉ−％
−Ｉ＠ＨＩＩ不２／剣１５７．６　　ｗ　　％　Ｈ２−
Ｇ　　？　　／　＞　　ｅの血管抵抗の減少をもたらし
た。 ［００７５，１前記の部位選択性の治療的有用性は脳虚
面または腎虚血において存在する。 ［：００７６］ 実施例　１０ カルシウム拮抗質活性を自発的にム高マ血圧症のラット
の単離された大動脈の平滑筋のｐＡ２　　（その受容体
に刻する薬品分子の見掛けの解離定数の負の対数）を測
定することによって試験管内で測定した。ｐＡ２が大き
けねば大きいほどカルシウム拮抗作用が大きかった。も
しｐＡ２が６．０またはそれよりも大きければ、化合物
は血管のカルシウム拮抗質として活性であると考えられ
る。 ［００７７］Ｃａ”イオンは血管の平滑筋の収縮の誘発
と保持に本質的な役割を演する。Ｋ＋消極血管平滑筋に
おいて、カルシウム拮抗質は細胞中へのＣａ””の侵入
を阻止し、それによってＣａ”＝によって誘起される収
縮を抑制する。血管平滑筋のＣａ＋十誘起収縮の抑市は
血管のカルシウム拮抗作用のための試験化合物に対する
モデルとして作用される。 （００７８）不整脈、狭心症、ム高マ血圧症、末梢血１
疾患のような心臓血管疾患は、Ｃａ”イオンの蜂窩交理
における異常性の原因とするように関係し得る。 ［００７９）摘出した大動脈部分を変性クレヴス溶液を
含有する組織浴中に据え付けた。Ｋ”　　（１００ｍＭ
）１組織の消極後、１０−３Ｍ、３．２Ｘ１０−３Ｍお
よ乙１０−２Ｍの累積濃度のＣａ”を血管平滑筋の収縮
を生じさせるために浴中に注入した。発達した張力（ｇ
）を測定し、抑制投薬量一応答値を得た。濃度１Ｏ−６
Ｎの試験化合物で１時間インキュベート後、同じ投薬量
のＣａ　＋　＋を繰返した。対照と処理後の１０ｇ投薬
量一応答曲線を線形回帰によって解析した。 ナ姉例 夕 ’　　　（／、　　　２．　３−７６　Ｘブ　）八〇ｈ
　　ノ　　−７２ｌしぢず 酸項ン ン ン ビＡ２ ｇ、２！ に、タロ に２５７ ［００８０） 実施例　１１ 系統的な血圧効果を麻酔をかけた自発的にム高マ血圧症
のラットにおいて試験管内で評価した。試験化合物を１
０−３Ｍ胃内に投与した。 ［００８１）初期平均動脈血圧（ＭＡＰ）を化合物の授
与直前に予めしつかりはめ込んだ１ｎｌｌｌｌｔのカテ
ーテルヲ和で直接測定した。血圧の読み取りは試験化合
物の投与葎１、　２．　３および４時間で標準的に行っ
た。この読み耶りの予定は要求によって変えることがで
きる。試験化名物の投薬は処理ラットの平均処理後血圧
が同時に発生Ｊる擬薬対照群のそれといちじるし く妥な （？りρａｆ） な・５１ラサ？、γ暉秋ざ汽 る。 統計的比較を使薬（擬薬）処理対照と比較してノンベア
スチューデント試験を使用して行った。 ・ｋ沌勇 ＨＡＰ（＃嘴め却プラ丁 夕 （１゜ ５−１口／Ｎ′″ ン ン ヤルポ′ン 融塩） 〔００８２〕本発明の新規の方法に利用した最も好まし
い群の化合物は次のいずれかまたはすべてからなる。 ［：００８３） 【図５］　　［００８４） 【図６］　　［００８５） 【図７１　　（００８６）Ｌかしながら、これらの化合
物は本発明に有用と考えられる唯一の属を形成するもの
として解釈されるべきではなくて、前記の化合物のどの
ような組合せもそれ自身−つの属を形成することができ
る。 ［００８７］本発明をある好ましい実施態様を参照して
記述し説明したが、当技術に精通している者はさまざま
な変化、修整および置き換えが本発明の精神および範囲
を離れることなくなし得ることを正しく理解するであろ
う。たとえば、上記明細書に示した好ましい範囲以外の
効果的である投薬量が、臓器移植拒絶反応の厳しさ、投
薬量関連有害効果、もしあっても、および機能上類似し
た考慮のために処置される哺乳動物の応答の変化の結果
として適用できる。 ［００８８）同様に、観察される特別の薬理学的応答は
、選ばれた特別の活性化合物または使用される組成物の
型および投与の様式と同様、薬学学的担体が存在するか
どうかによってそれに依存して変化することができ、そ
の結果の前記の予期される変化または相違は本発明の目
的および実施に従って予想される。それゆえ、本発明は
特許請求の範囲によってのみ限定され、該特許請求の範
囲は合理的であるようにきわめて広く解釈されることを
意図するものである。 ［００８９）

【図面の簡単な説明】

〔図１〕〜〔図４〕　　本発明の免疫抑制方法の実施に
使用した化合物の製造工程の概要を示す反応工程図であ
る。 〔図５〕〜〔図７〕　　本発明の新規の方法に利用した
最も好ましい群の化合物を示す属形成図である。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

Claims (15)

【特許請求の範囲】
1. 〔請求項１〕哺乳動物の免疫抑制方法において、薬理学
   的に有効量の次の構造式、【化１】 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｒ＿１はヒドロキシ；炭素原子数１〜１０の置換
   または非置換アルキル、アルケニル、またはアルキニル
   、ただし置換基はヒドロキシまたはケト；炭素原子数１
   〜１０のアルキルカルボニル；炭素原子数１〜１０のア
   ルコキシカルボニル；または炭素原子数１〜１０のアル
   キルアミドであり；Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿５およびＲ＿
   ６は独立的にヒドロキシまたは炭素原子数１〜１０のア
   ルコキシであり；Ｒ＿４とＲ＿７は独立的に水素；炭素
   原子数１〜１０のアルキル、アルケニルまたはアルキニ
   ルであり；ｍは１〜２の整数であり；ｎは１〜５の整数
   である、の化合物およびその薬学的に許容し得る塩を前
   記哺乳動物に投与する処置を含むことを特徴とする哺乳
   動物の免疫抑制方法。
2. 〔請求項２〕哺乳動物の免疫抑制方法において、薬理学
   的に有効量の一般式、 【化２】 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｒ＿１はヒドロキシ；炭素原子数１〜１０の置換
   または非置換アルキル、アルケニル、またはアルキニル
   、ただし該置換基はケトまたはヒドロキシである；炭素
   原子数１〜１０のアルキルカルボニル；炭素原子数１〜
   １０のアルコキシカルボニル；または炭素原子数１〜１
   ０のアルキルアミドである、の化合物およびその薬学的
   に許容し得る塩を前記哺乳動物に投与する処置を含むこ
   とを特徴とする哺乳動物の免疫抑制方法。
3. 〔請求項３〕次の構造式、 【化３】 式II▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１に記載の方法。
4. 〔請求項４〕次の構造式、 【化４】 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１に記載の方法。
5. 〔請求項５〕次の構造式、 【化５】 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１に記載の方法。
6. 〔請求項６〕次の構造式、 【化６】 ▲数式、化学式、表等があります▼・▲数式、化学式、
   表等があります▼ を有する請求項１に記載の方法。
7. 〔請求項７〕次の構造式、 【化７】 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１に記載の方法。
8. 〔請求項８〕次の構造式、 【化８】 ▲数式、化学式、表等があります▼・▲数式、化学式、
   表等があります▼ を有する請求項１に記載の方法。
9. 〔請求項９〕次の構造式、 ▲数式、化学式、表等があります▼・▲数式、化学式、
   表等があります▼ を有する請求項１に記載の方法。
10. 〔請求項１０〕次の構造式、 【化１０】 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１に記載の方法。
11. 〔請求項１１〕次の構造式、 【化１１】 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１に記載の方法。
12. 〔請求項１２〕次の構造式、 ▲数式、化学式、表等があります▼ 【化１２】 を有する請求項１に記載の方法。
13. 〔請求項１３〕哺乳動物に薬理学的に有効量の請求項１
    に記載の化合物を投与することを特徴とする哺乳動物の
    高血圧症を治療する方法。
14. 〔請求項１４〕哺乳動物に薬理学的に有効量の請求項１
    に記載の化合物を投与することを特徴とする哺乳動物の
    腎虚血を治療する方法。
15. 〔請求項１５〕哺乳動物に薬理学的に有効量の請求項１
    に記載の化合物を投与することを特徴とする哺乳動物の
    脳虚血を治療する方法。