JPS60215700A - 新規シクロスポリン類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 し産業−１−の利用分野］ この３明は、新規ツクロスポリン類、その製造法、その
医薬としての用途およびそれを含む医薬組成物に関する
ものである。

［先行技術］ ツクロスボリン類は、共通して薬理活性、特に免疫抑制
、抗炎症および抗寄生物活性を有ずろ、一群の構造的に
特徴ある、環状の、ポリ〜Ｎ−メチル化つンデカペプヂ
ド類を包含する。ツクロスボリン類のうち最初に単離さ
れ、前記群の１母体」化合物とされるものは、シクロス
ポリンＡとしても知られ、天然の真菌代謝物である式（
Ａ）＼ ＣＨ。

□ 　Ｈ３ （式中、−Ｘ−Ｙ−は−〇　Ｈ＝　ＣＨ−（トランス）
テある） て示される、Ｎ−メヂルー（４Ｒ）−４−ブタ−２Ｅ−
エン−１−イル−４−メチル−（［、）スレオニル残ノ
、（を、仁（味４−ろ１ で示されろツクロスボリンである。

ツクロスボリンの最初の発見以来、広範囲の天然シクロ
スポリン類か子離同定され、さらに多数の非天然ツクロ
スボリン類か全合成、半合成または修正培養法により製
造された。現在、ツクロスボリン類か構成止る群は充実
しており、例えは、天然ツクロスボリンＡないしＺ［コ
ベル等、ヨーロピアン・ジャーナル・オシ・アプライド
・マイクロバイオ［１ノー・アンド・バイオテクノロジ
ー（Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ａｐｐ
ｌｉｅｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄ　１３ｉｏ
ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）　ｌ　４巻２３７〜２４０頁（
１９８２年）およびトララバー等、２４ス・インターザ
イエンス・コンファランス・オン・アンチマイクロバイ
アル・エイシエンツ・アンド・ケモセラピ−（２４ｔｈ
　Ｉ　ｎＬｅｒｓｃｉｅｎｃｅ　Ｃｏｎｒｅｒｅｎｃｅ
ｏｎ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ａｇｅｎｔｓ　ａ
ｎｄ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ）ワノントン（１９８
４年ｌＯ月８〜１０日）のポスター参照］および、ノヒ
トロシクロスボリン類［−ＭｅＢｍｔ−残基の基−ｘ−
ｙ−（上記式（Ｂ）参照）か例えば米国特許第４１０８
９８５シ（、第４２１０５８１号および第４２２０６４
１号開示のように飽和されているもの］、−ＭｅＢｍＬ
−残基が異性体形またはＮ−デスメチル形として存在す
るシクロスポリン類［ヨーロッハ特Ｍ’Ｆ第００３４５
６７号、および［−シクロスポリンＡ　Ｊ　（”Ｃｙｃ
ｌｏｓｐｏｒｉｎＡ”）、プロノーディング・オシ・イ
ンターナショナル・フンファランス・オン・シクロスポ
リンＡ（Ｐｒｏｏｃ、Ｉ　ｎ１ｅｒｎａ［、Ｃｏｎｆｅ
ｒｅｎｃｅ　ｏｎ　Ｃｙｃｌｏｓｐｏ−ｒｉｎ　Ａ）ケ
ンブリッジ（英国）、１９８１年９月、ホワイト編、エ
ルスバイヤー・プレス（１９８２年）参照。何れもベン
ガ−が開発しんツクロスボリン類の全合成法を記載して
いる」、およびペプヂド配列の特定位置に変異形アミノ
酸の挿入を行なったシクロスポリン類［ヨーロッパ特許
第ｏ。

５６７８２号参照］を含む、種々の非天然または人造ツ
クロスボリン類を包含している。上記参照文献中に開示
されたシクロスポリン類の例は、例えば［Ｔ　ｈｒｌ　
’−１［Ｖａｌ］’−１［Ｎ　ｖａ］　２−および１Ｎ
ｖａ」２−「Ｎｖａ］５−ツクロスボリン（それぞれシ
クロスポリンＣ，Ｄ、ＧおよびＭとしても知られる）、
［ンヒトロ−ＭｅＢｍｔ］　’−［Ｖ　ａｌ］２−シク
ロスポリン（ノヒドロンクロスボリンＤとしても知られ
る）並びに［（１））Ｓｅｒ］８−および［ンヒドロ−
Ｍｅｌ−３ｍＬ’、ｌ　’−［、（Ｉ）　）　−Ｓ　ｅ
ｔ］６−シクロスポリンである。

［この明細書では、現在慣用されているツクロスボリン
の命名法にしたがって、シクロスポリン構造（すなイつ
ち、シクロスポリンＡ）を引用して定義を行なう。これ
は、まず分子中の残基のうちツクロスボリンに存在する
ものと異なる残基を示した後、シクロスポリンに存在す
るものと同一の残基を特徴づけろために［シクロスポリ
ン」の語をつｌづることによって行なう。また、−ンヒ
ドロ−ＭｅＢｍｔ−−の語は上記式（Ｂ）において−Ｘ
−Ｙ−が−ＣＨ２−ＣＩＩ、−の残基を示すために用い
ろ。したかって、［ノヒトａ　−ＭｅＢｍｔコ’　−［
Ｖａｌ］２−　ツクロスボリンは、式（Ａ）に示す配列
を育するシクロスポリンてあって、１位の−ＭｅＢｍＬ
−［式（Ｂ）、−Ｘ−ｙ−ニーＣＨ＝ＣＨＯランス）コ
が一ジヒドｏ−ＭｅＢｍｔ−［式（Ｂ）、−Ｘ−Ｙ−：
　ＣＨ３−ＣＨ２］で置きかえられ、２位の一α−Ａｂ
ｕ−が−Ｖａｌ−で置きかえられたものである。同様に
、［（Ｄ）Ｓ　ｅｒａ８−　ツクロスボリンは、式（Ａ
）に示す配列を有するシクロスポリンであって、８位の
−（Ｄ）Ａｌａ−か−（Ｄ　）　Ｓ　ｅｒ−て置きかえ
られたものである。

さらに、慣用法にしたがって、例えば−Ａｌａ−１−Ｍ
ｅＶ　ａｌ−等の略号で示すアミノ酸は、特記しない限
り（Ｌ）−配置を有するものとする。−ＭｅＬｅｕ−の
ようにｒＭｅｊが先行している残基の略号は、Ｎ−メチ
ル化された残基を示す。ツクロスボリン分子の各残基は
公知文献にしたがって、１位の−ＭｅＢｍｔ−または一
ジヒドａ−Ｍｅ５．ｍＬ−残基から始まり時計まわりの
番号をつけろ。この明細書では、この番号系を使用する
。

この発明によると、８位の残基が（Ｄ）−配置を有する
アシルオキシ−α−アミノ酸残基を含む医薬上有用な新
規シクロスポリン類が得られることが判明した。

したかって、最乙広範には、この発明は、８位のアミノ
酸残基か（Ｄ）−アラルオキシーα−アミノ酸残基、す
なわちα−炭素原子に結合する側鎖がアシルオギノ置換
された（Ｄ）一系列のα−アミノ酸残基てあろ、ツクロ
スボリンを提供するものである。

８位のアミノ酸残基は、（Ｄ）−β−アシルオキシーα
−アミノ酸残基、すなわち、β−炭素原子に結合したア
シルオキシ括を有する（１つ）一系列のα−アミノ酸残
基であるのか好ましい。

好ましい（Ｉ〕）−β−アシルオキソ−α−アミノ酸残
基は、式（１１） ％式％ （） （） （式中、Ｒ１は水素、Ｃ１−４アルキルまたはフェニル
、Ｒ２は水素またはメチルを意味ケる） て示されろ残基を意味する］ で示されろ乙のである。

特に好ましいこの発明のツクロスボリン類は、８位のア
ミノ酸残基が０−アンルー（Ｄ）−セリルまたはＯ−ア
シル〜（Ｄ）−スレオニル残基、特に上記式（（１）で
示される０−アシル−（Ｄ）−セリルまたはＯ−アンル
ー（１））−スレオニル残基のものである。

この発明のシクロスポリン類の第１群は、８位のアミノ
酸残基がＯ−アシル−（Ｄ）−セリル残基、特にアシル
部分が式Ｒ，Ｃｏ　（ここで、Ｒ１は前記の意味）を有
する０−アンルー（Ｄ）−セリル乱のものである。

この発明のシクロスポリン類の第２群は、８位のアミノ
酸残基か（Ｄ）−β−アンルオギノーα−アミノ酸残基
、特にＯ−アノルー（Ｄ）−セリル残基、さらにアシル
部分が式Ｒ１−〇〇−にごて、Ｒ１は水素またはＣ３−
４アルキルを意味する）を有するＯ−アシル−（Ｄ）−
セリル残基で、５位の残基が（Ｌ）−ノルバレリル残基
のものである。

最す好ましいのは、式（１） （１） １式中、Ｘは−ＭｃＢｍｔ−またはンヒドロ−ＭｃＢｍ
ｔ、Ｙは　αΔｂｕ−１−Δ１ａ−１−Ｔｈｒ−１−Ｖ
ａｌ　よたは−Ｎｖａ−１ Ｚは−Ｖａｌ−または−Ｎ　ｖａ−１ Ｑはｔｉｑ記式（１（）て示される残基を意味ずろ］ て示されるツクロスボリン類である。

式（１）において、Ｑとしてはアシル部分が式Ｉえ、−
ＣＯ−（ここて、Ｒ，は式（ｌ　＋）について定義した
意味）を何する０−アノルー（Ｄ）−セリルまたはＯ−
アシル−（Ｄ）−スレオニル残基か好ましし）。

この発明のツクロスボリン類の１つの群は、」１記式（
１）において、Ｙが−αＡ―−または−Ｎｖａ−１Ｚか
一■ａ１−１Ｒ２が水素のものである。

この発明の７クロスボリン類の別の群は、」１記式（１
）において、Ｙ力にαＡｂｕ−または−Ｎｖａ−１Ｚか
−Ｎｖａ−１Ｒ，か水素まノこはＣ１’４アルキル、Ｒ
７か水素のものである。

この発明はまた、８位のアミノ酸残基が（１））−アシ
ルオキシーα−アミノ酸残基、例えば（Ｄ）−β−アア
ノオギンーα−アミノ酸残塙であるツクロスボリンの製
造法、例えば前記式（Ｄて示されるツクロスボリンの製
造法において、 ａ）　８位のアミノ酸残基が（Ｄ）−ヒドロキシ−α−
アミノ酸残基、例えば（Ｄ）−β−ヒドロキシ−α−ア
ミノ酸残基であるシクロスポリンをアノル化、例えば式
（ＩＩ＋） （ｍ） １式中、Ｘ、ＹおよびＺは式（１）について定義した意
味、Ｗは式（１■） ■−■０−ＣＩ］（１■） １ −Ｎｌｌ−ＣＨ−ＣＯ− （Ｄ） （式中、■也、は式（ｌＩ）について定義した意味） て示されろ残基を色味する］ て示されろシクロスポリンをアノル化し、ｈ（１’（、
−Ｇ　Ｏ− （式中、Ｒ，は式（１１）について定義した意味） を上記式（１ｖ）で示される残晧のβ位に導入リーるか
、または ｂ）　１位のアミノ酸残基が−ＭｅＢｍｔ−であり、８
位のアミノ酸残基が（Ｄ）−アンルオキシ〜α−アミノ
酸残承、例えば（Ｄ）−β−アシルオキシ−α−アミノ
酸残基であるシクロスポリンを還元して、１位の残基が
一ジヒドローＭｅＢｍｔ−である対応シクロスポリンを
生成、例えば上記式（Ｉ）においてＸが−ＭｅＢｍｔ−
のシクロスポリンを還元してＸが一ジヒドローＭｅＢＩ
ｌｌｔ−てあろ対応シクロスポリンを生成させること からなる方法を提供するものである。

上記工程ａ）は、ヒドロキシ基のアノル化における標準
方法にしたがって、たとえば、（好ましくは２当量また
はＹ＝Ｔｈｒ−の場合１当量の）適当なアシルハライド
、例えばＣ４−５アルカノイルまたはヘンジイルハライ
ド、または対応する無水物との反応、またはホルミル化
の場合、例えば酢酸・ぎ酸無水物との反応を、例えば約
−１０ないし５０℃の温度で行なうことにより、実施す
ることができる。この反応は、無水条件下、好ましくは
メチレンクロライドのような不活性溶媒または希釈剤の
存在下、および４−ジメチルアミノピリジンのような縮
合剤の存在下に行なわれる。ここで、１位のアミノ酸残
基のヒドロキシ基に優先して８位のアミノ酸基における
ＯＨ基のアノル化反応が進行することに注意する必要が
ある。

上記工程ｂ）は、天然シクロスポリンを対応するジヒド
ロシクロスポリンに還元する公知方法と同様に、例えば
接触還元により、例えば英国特許第１５６７２　（ｌ　
１号に開示さイまた一般法にしたかって実施ずろことが
できる。

水素添加は、好適には中性ｐｒ−を条件で、約２０ない
し約３０℃の温度および大気圧または僅かな加圧下、白
金まｌこは好ましくはパラジウム（例えばパラノウ１３
炭素）のような触媒の存在および酢酸エチルまたはメタ
ノールもしくはイソプロパツールのような低級脂肪族ア
ルコール類の如き不活性溶媒または希釈剤の存在下に行
なイつれろ。

上記工程ａ）の出発原料として適当な８位のβ−ヒドロ
キシ−α−アミノ酸残基を有するシクロスポリン類、特
に［（Ｄ）Ｓｅｒ１８−ツクロスボリンおよび［ジヒド
ロ−Ｍａｒ３ｍｔｌ’−［（Ｄ）Ｓｅｒ１８−シクロス
ポリンは公知であり、例えば前記ヨーロッパ特許第００
５６７８２号にその製法と共に記載されている。工程ａ
）の出発原料として必要な８位にヒドロギン−α−アミ
ノ酸残基を有する他のツクロスポリン類は、同様に、ま
たはヨーロッパ特許第００５６７８２号が引用している
ヨーロッパ特許第００３４５６７号に記載されたシクロ
スポリン全合成の一般法にしたかって、または以下の記
載特に実施例の方法にしたかって、製造することができ
る。

上記工程ｂ）で出発原料として用いろシクロスポリン類
は、工程ａ）の方法にしたがって得ることができる。

実施例中に具体的に記載した上記式（Ｉ［ｌ）のツクロ
スボリン出発原料は、前記ヨーロッパ特許第００５６７
８２号に広範な記載に包含されるが、これらツクロスボ
リン類のあるものは、上記公報の教示に照らして形式的
に新規であり、すなわちそれ自体が従来記載されたこと
がなかった。この発明によると、これらシクロスポリン
類か、特に免疫抑制活性に関して、殊に移植、例えば、
臓器移植の阻害、拒絶に関して、例えば式（１）の公知
のツクロスポリン類ずなわちヨーロッパ特許第００５６
７８２号に具体的に記載された式（ＩＩＩ）のシクロス
ポリン類に較べて、特に興味あるまたは有利な生物活性
または特性を有することが見出された。

別の特徴によると、この発明は、式（ＩＩｌａ）（Ｉｒ
ｌａ） ［式中、ＹｏはαＡｂｕ−１−’Ｉ”ｈｒ−１−Ｖａｌ
−ま　）こは　−Ｎｖａ−、 Ｚｏは−Ｖａｌ−であるか、またはＹｏか一αＡｂｕ−
または−Ｎｖａ−のとき、−Ｎｖａ−１ Ｗｏは−（Ｄ）Ｓｅｒ−であるか、またはＹ。

が−ａ−Ａｂｕ−てＺｏがＶａｌ−のとき、−（Ｄ）Ｔ
ｈｒ−１ Ｘｏは−Ｍｅ１３ｍＬ−であるか、またはＹｏか−Ｔｈ
ｒ−１−Ｖａｌ−または−Ｎｖａ−１Ｚ′が−Ｖａｌ−
でＷｏが−（Ｄ）Ｓｅｒ−のとき、−＝ジヒドロ−Ｍｅ
Ｂｍｔ−を意味する］ で示されるツクロスボリンを提供する。

式（Ｉｌｌａ）に含まれる具体的なシクロスポリン類ａ
）　［（Ｄ　）　Ｔ　ｈｒ］８−　ツクロスボリン、ｂ
）　［Ｔｈｒｌ２−［（Ｄ）ｇｅｒ１８−シクロスポリ
ン、ｃ）　［ジヒドロ−ＭｅＢｍＬ］ｌ−［Ｔｈｒｌ２
［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シクロスポリン、 ｄ）　［Ｖａｌ］’−［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−’ｉシクロ
スポリンｅ）　［ンヒドｏ−ＭｅＢｍｔｌ’−［Ｖａｌ
］’−［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−ノクロスボリン、 ｆ）　［Ｎｖａ］２−［（Ｄ）Ｓｅｒ１８−ツクロスボ
リン、ｇ）　［ンヒトａ−ＭｅＢｍｔｌ’　−［Ｎｖａ
］２−［（Ｄ）Ｓｅｔ］６−シクロスポリン、 ｈ）　ＩＮｖａ］５−　［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−７クロス
ボリン、ｉ）　［Ｎｖａ１２−４Ｎｖａ１５−［（Ｄ）
Ｓｅｒコ８−シクロスポリンである。

」二に列記したツクロスボリン中、ａ）、ｂ）、ｅ）、
ｒ）およびｉ）、特にａ）、ｒ）およびｉ）は、例えば
ヨーロッパ特許用００５．６７８２号に具体的記載のあ
るツクロスポリン類との関係において、その活性（例え
ば免疫抑制活性）／活性プロフィルについて特に興味が
もたれる。

さらに、この発明は、前記式（Ｉｌｌａ）で示されるツ
クロスボリンの製造法において、 ｃ）０＝−保護形である前記式（Ｉｌａ）で示されるツ
クロスボリンを脱保護し、 ｄ）配列 一１’　−１１ｅＬｅｕ　−ＭｅＬｅｕ　−Ｍｅｇａ　
ｌ　−Ｘ’　−Ｙ’　−３ａｒ　−ＭｅＬｅｕ　−Ｚ’
　−１１ｅＬｅｕ　−Ａ　ｌａ　−８９１０１１１２３
４５６７ ［ここで、Ｙｏ、Ｚｏ、ＷｏおよびＸｏは前記式（Ｉｌ
ｌａ）について定義した意味］ を含む直鎖ウンデカペプチド（このウンデカペプチドは
非保護形または〇−保護形である）を閉環させ、必要な
らば工程Ｃ）を実施し、 ｅ）式（Ｉｌｌａ）において、 Ｙｏは−Ｔｈｒ−１−Ｖａｌ−または−Ｎｖａ−１Ｚ°
は−Ｖａｌ−であるか、またはＹｏが−Ｎｖａ−のとき
−Ｎｖａ−１ Ｗｏは−（Ｄ）Ｓｅｔ−１ Ｘｏは−ＭｅＢｍｔ− であるシクロスポリンを製造するために、［Ｔｈｒｌ”
−ツクロスボリン、［Ｖａｌ］２〜シクロスポリン、−
［Ｎｖａ］２−シクロスポリンまたは［Ｎ　ｖａ］　２
−［Ｎｖａｌ’−シクロスポリン生産性真菌株を（Ｄ）
−セリン含有栄養培地と接触させて培養し、得られた培
地から式（Ｉｌｌａ）て示されるツクロスボリンを単離
し、 ｒ）式（Ｉ［ｌａ）においてＸｏが一ンヒトｃＪ−Ｍｅ
Ｂｍｔ−であるツクロスボリンを製造するために、式（
■ａ）においてＸｏが−ＭｅＢｍｔ−である対応シクロ
スポリンを還元すること からなる方法を提供する。

上記工程ｄ）で用いるに好適なウンデカペプチド類は、
前記ヨーロッパ特許第００５６７８２号に記載の一般法
と同様に、例えばその実施例１ａのフローチャートに関
して、シクロスポリン分子の残基８−１１からなるペプ
チド配列を残基ｌ−７からなる配列であって２位のおよ
び／または５位および／または８位の残基に必要な置換
を施したものを組みあわせることによって、得ることが
できる。８位の−（Ｄ）Ｓｅｒ−または＝（Ｄ）Ｔｈｒ
−残基は、〇−保護形、例えば０−１−ブチル形である
のが好ましい。閉環は、前記ヨーロッパ特許に記載の個
々の技術を用いて行ない、０−保護基が存在する場合の
最終工程におけろ除去［工程Ｃ）］は、ペプヂド化学に
おいて公知の技術にしたがって行なう。

工程ｅ）の方法で用いるに好適な菌株は、トリボクラジ
ウム・インフラツム（ガムス）　［’ｒ　ｏｌｙｐｏｃ
　−１ａｄｉｕｍ　ｉｎＮａｔｕｍ（Ｇａｍｓ）］種の
ＮＲＲＩ、８０４４株であり、その培養はアメリカ合衆
国農務省［ノーザン・リザーヂ・アンド・デベロプメン
ト・ディヒノヨノ（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　Ｒｅ５ｅａｒｃ
ｈ　ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　Ｄ　１ｖｉｓｉ
ｏｎ）、アメリカ合衆国イリノイ州、ビオリア］に寄託
されており、自由に入手できる。

さらに、この株の培養は、微工研菌寄第２７９６号（Ｆ
ＲＩ−ＦＥＲＭ−＋１　Ｎｏ、２７９６）として、日本
国千葉市稲毛、微生物工業技術研究所に寄託されている
。上記法は、当初トリコデルマ・ポリスボルム（リンク
・エクスプレス）　［Ｔ　ｒｊｃｈｏｄｅｒｍａｐｏｌ
ｙｓｐｏｒｕｍ（Ｌ　ｉｎｋ　ｅｘ　Ｐｅｒｓ）］種に
属するものとして分類されたが、その形態学的特性並び
に前培養および継代培養の調整法は英国特許第１４９１
５０９号に詳細に記載されている。

工程ｅ）によると、選択した株［例えばトリボフラジラ
ム・インフラツム（ガムス）［Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉ
ｕｍｉｎｆｌａｔｕｍ（Ｇ　ａｍｓ）］を後記実施例記
載０）　ヨウナ培地中、添加（Ｄ）−または（Ｄ、Ｌ）
−セリンの存在下約２７°Ｃの温度で約２週間の期間保
持するのが適当である。アミノ酸前駆体は、好適には約
１ないし約１５ｇ、さらに好ましくは約４ないし約ｌＯ
ｇ／培地リットルの量で加える。培地はまた、所期のシ
クロスポリンの２位の存在する残基の前駆体となる添加
アミノ酸を、例えば約６．０ないし約１０．０ｇ、好ま
しくは約８　、０　ｇ／培地リットルの量で含むのが好
適である。培養後、培養物を採取し、得られる式（Ｉｌ
ｌａ）のシクロスポリンを公知技術により、例えば分生
子および菌糸の粉末化により抽出し、次いで抽出および
／または吸着法で単離する。当初得られる粗シクロスポ
リンは、その後、例えばクロマトグラフィーおよび／ま
たは再結晶、特に他のシクロスポリン挟雑物との分離、
特に「天然シクロスポリン」挟雑物との分離により、精
製することができろ。

」１記工程ｆ）は、例えば工程ｂ）について記載したの
と同じ方法を用いて実施することができろ。

［実施例］ 以下、この発明を実施例により説明する。

実施例１ ［（０−アセチル）−（Ｄ）Ｓｅｒｌ８−シクロスポリ
ンの合成［式１　：　Ｘ　＝−ＭｅＢｍＬ−１Ｙ−−−
αＡｂｕ−１７．−−Ｖａｌ−１Ｑ−−０−アセチル−
（Ｄ）Ｓｅｒ−１゜ ４−ジメチルアミノピリジン２０ｍｇを、メチレンクロ
ライド３Ｊに溶かした［（Ｄ）Ｓｅｒｌ’−ツクロスボ
リン（前述のヨーロッパ特許第００５６７８２号の実施
例１または３で記載された方法にしたがい製造されたも
の）４７ｍｇに加える。次いで蒸留したばかりのアセチ
ルクロライド６　、　ｌ　ｍｇとメチレンクロライド１
ｎ＋４を加え、得られた反応混合物を室温で１時間撹拌
する。反応混合物をメチレンクロライド５０Ｊ、で希釈
し、Ｈ２Ｏ３０ｒｎＲ，と振盪する。有機相を分離し、
ＮａＳＯ４て乾燥し、シ濾過し、濃縮する。残留物を、
溶離剤としてメチレンクロライド１５％メタノールを用
い、６０ｇのシリカゲル（０，０６２〜０．２０ｍｍ）
でｙ過し、２Ｓｍｆｌずつのフラクションに集める。キ
ャリヤー相としてＣＩ−Ｉ　Ｃｌ。１５％メタノールを
用い薄層クロマトグラフィーによりフラクシヨン４〜８
から標記化合物を回収する：［α］２名＝−２０２°（
ｃ＝０．９２、ＣＨＣｌ　３中）Ｑ実施例２ 対応する非アシル化シクロスポリンから出発して実施例
１と同様に下記化合物を製造する。

２．１　［（０−ヘンシイルー（Ｄ）Ｓｅｒｌ　８−シ
クロスポリン［式１　：Ｘ−−ＭｅＢｍｔ−、Ｙ＝　−
ａ　Ａｂｕ−、Ｚ　＝　−Ｖａｌ、Ｑ＝−０−ベンゾイ
ル−（Ｄ）Ｓｅｔ　−］　［］ａミコ２０− ２０°（ｃ＝１．０、ＣＨＣ１３）； ２．２［０−アセチル−（Ｄ）Ｔｈｒ１６−　ツクロス
ポリンし式１　：　Ｘ＝−ＭｅＢｍｔ−１Ｙ−−ｃ＋Ａ
ｂｕ−１Ｚ＝　−Ｖａｌ　−、Ｑ＝−０−アセデル−（
Ｄ）　−Ｓｅｔ　−］［α］ｔ０−２１９°（Ｃ＝１．
０、ＣＨＣｌ３）；２．３　［Ｎｖａ］２−［０−アセ
デル−（Ｄ）Ｓｅｒｌｅ−ンクロスボリン［式１　：Ｘ
−−ＭｅＢｍｔ−１Ｙ＝−Ｎｖａ−１ＺニーＶａｌ−１
Ｑ＝−０−アセデル−（１））Ｓ　ｃｒ　−］：［α１
”−＝−２４０゜（ｃ＝１．ｏ、ＣＩ−Ｉ　Ｃ１３）／
　−２３３°（ｃ＝ｏ。

８、Ｃｌ−ＩＣ１，）／−１７７°（ｃ＝０．７６、Ｃ
ｌ−１，０ｌ−１）：ｍｐ＝　１４３−　＋　４７°Ｃ
６２，４［Ｖａｌ］２−４０−アセデル−（Ｄ）Ｓｅｒ
］’−シクロスポリン［式１　：Ｘ　＝＝−ＭｅＢｍＬ
−１Ｙ＝−Ｖａｌ−１Ｚ＝−Ｖａｌ−１Ｑ−−０−アセ
デル−（Ｄ）Ｓｃｒｌ：［α１２０−−２１９°（Ｃ＝
０９、ＣｌＣｌ５）； ２．５　［Ｎｖａ］’−［０−−アセチル−（Ｄ）Ｓ　
ｅｒ］８−　ツクロスボリン［式１　：Ｘ　−−Ｍｅ１
３ｍｔ−１Ｙ−−αＡｂｕ−１Ｚ＝−Ｎｖａ−１Ｑ　−
−０−アセデル−（Ｄ）Ｓｅｒ−］：［α１２０＝−２
１５゜（Ｃ＝１．０．ＣＩ−ｒｃＩ３）。

２　、６　［Ｎｖａ］２−　［Ｎｖａ］′−［０−アセ
デル−（Ｄ）Ｓｅｔ］’−シクロスポリン［式１．Ｘ−
−ＭｅＢｍｔ−１Ｙ＝−Ｎｖａ−１Ｚ＝−Ｎｖａ　−Ｑ
　−−０−アセチル−（Ｄ）Ｓｃｒｌ：［α］２０＝−
１９６，９’　（ｃ＝１．０１ＣＨＣＩ３）：および ２．７　［’ｒｈｒ］２−［ｏ−アセチル−（Ｄ）Ｓｃ
ｒｌ８−ツクロスボリン［式１：Ｘ＝−ＭｅＢｍｔ−１
Ｙ−−Ｔｈｒ−１Ｚ＝−Ｖａｌ−１Ｑ−一〇−アセデル
−（Ｄ）Ｓｅｔ−］：［（Ｚ］”＝　−２５１’（ｃ＝
０．８６、ＣＨＣｌ３）／−１７４°（ｃ−〇　８１、
ＣＨ２ＯＨ）＋　ｍ＋）＝　１　４３−１　４６°ｃ。

実施例３ ［ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ］’−［０−アセチル−（Ｄ）
Ｓ　ｅｒａ８−ツクロスボリンの合成し式Ｉ　Ｘ−シヒ
）”ローＭｅＢｍｔ−１Ｙ＝−αＡｂｕ−１Ｚ＝−Ｖａ
ｌ−１Ｑ−−０−アセチル−（Ｄ）Ｓｅｔ−］。

エタノールｌＯ＋ｎＪｌに溶かした［（０−アセチル）
−（Ｄ）Ｓｅｒ］ｅ−シクロスポリン５４　ｍｇを、室
温常圧でパラジウム／炭素（１０％）ＩＯｍｇを用い水
素化する。２０時間後得られた反応溶液を薄層タルクに
通して濾過し、エタノールを減圧留去する。

高度真空下さらに乾燥後標記化合物を得る。

［ｆｆ］５’＝　２０５　、８°（ｃ＝１．０２、ＣＨ
ＣＪｌ　＝１）。

実施例４ 対応する非アノル化ツクロスボリンから出発して実施例
１と同様にするか、または実施例２で記載した対応する
ツクロスボリンの水素化により実施例３と同様にして下
記化合物を製造する。

４．１　［ジヒドロ−ＭｅＢｍＬ］’　−［Ｎｖａｌ’
　−［’Ｏ−アセデルー（Ｄ）Ｓｃｒｌ８−シクロスポ
リン［式１式％ （） ） ［０ セヂルー（Ｄ）Ｓｃｒｌ８−ツクロスボリン［式１：Ｘ
＝−ンヒＦ　ａ　−ＭｅＢｍＬ　−、Ｙ＝　−Ｖａｌ−
１Ｚ＝−Ｖａｌ−１Ｑ＝−０−７セチ７１／−（Ｄ）Ｓ
ｅｒ−１：［α］”＝　−２１０°（ｃ＝０．８５、Ｃ
ＨＣｌ３）；および ４．３　［ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ］’−［Ｔｈｒ］”−
［０−アセチル−（Ｄ）Ｓｃｒｌ”−シクロスポリン［
式１式％ （１）） 出発原料の製造 実施例５ 実施例２．２から２７までの化合物の製造に必要な出発
原料である下記化合物を、公知化合物［（Ｄ、）Ｓｃｒ
ｌ８−シクロスポリンと同様にして製造するが、その製
法はヨーロッパ特許第００５６７８２号の実施例１で記
載されており、この特許の実施例１ａへのフローチャー
トに記載された工程順序において２および／または５お
よび／または８位の適当な残基を置換して行なう。

５　、１　［（Ｄ）Ｔｈｒ］８−シクロスポリン［式１
１１ａ＋　Ｘ’＝−ＭｅＢｍｔ−１Ｙ’＝−αＡｂｕ−
１Ｚ′−−Ｖａｌ−１ｗ’　＝−（Ｄ）Ｔｈｒ−］：［
α］”＝−２４８，７°（Ｃ＝１．０．ＣＨＣｌ３）。

５．２　［Ｎｖａ１２−［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シクロス
ポリン［式１１１ａ：Ｘ’　＝−Ｍｅ１３ｍｔ−１Ｙ’
＝−Ｎｖａ−１７、’−−Ｖａｌ−１Ｗ’　＝　−（Ｄ
）Ｓｅｒ−］：ｍｐ＝　１　５　０−１　５　３°Ｃ１
［αコ”＝−２６２°　（ＣＤ −＝０．７１．　ＣＨＣｌ３）／　Ｉ　９１’　（ｃ＝
０゜７３　、ＣＨ３０Ｈ）； ５．３　１Ｖａｌ］２−［（Ｄ）Ｓｅｒ］Ｒ−ツク［１
スポリン［式％式％ ］： ） ） ５．４　［Ｎｖａ］′［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シクロスポ
リン［式ｌ１１ａ：Ｘ’　＝−ＭｅＢｍＬ−１Ｙ’＝−
αＡｂｕ−１Ｚ’＝−Ｎｖａ−１Ｗ’　−−（Ｄ）Ｓｅ
ｒ−コ［α］”−−２１２°（Ｃ＝　１．０、ＣＨＣ１
３）；５．５　［Ｎｖａ］２−［Ｎｖａ］５［（Ｄ）Ｓ
ｅｒ］８−ツクロスボリン１式ｌ１１ａ：Ｘ’　＝−Ｍ
ｅＢｍｔ−１Ｙ’　−−Ｎｖａ−−１Ｚ’　＝’−Ｎｖ
ａ−、Ｗ’　＝−（Ｄ）Ｓｅｔ−−］＋［α］”−＝　
−２１７°　（Ｃニー　１．０　、ＣＩ−Ｉ　Ｃ１，）
および ５．６　［Ｔｈｒコ２　［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シクロス
ポリン［式％式％ ］ ） ）：） 実施例５２の化合物を別法として以下のように微生物学
的に製造してもよい。

ａ）　１リットル当り麦芽糖５０ｇ、（ＤＬ）−ノルバ
リン５ｇ、ＣＤ）−セリン８ｇ、　ＫＨｔＰ　０４　０
　。

７５ｇ、Ｍｇ５Ｏ，・７Ｈ２０−０，５ｇ、Ｃａ（４２
・６Ｈ，００，１ｇおよびカゼインペプトン８ｇの割合
で含有する栄養培地ＩＯリットルに３日間の予備培養か
ら採取した菌株ＮＲＲＬ　８０４４のコニディア（分生
子、ｃｏｎｉｄｉａ）およびミセリア（菌糸体、ｍｙｃ
ｅｌ　ｉａ）の懸濁液１リツトルを接種する。

接種された生産媒質を１００Ｊずつに分割し、１００本
のエルレンマイヤーフラスコに満たし、次いて＋８Ｏｒ
ｐｍて回転するアジテータ−」−２７゜で１４日間イン
キコヘートする。項五媒質から菌糸を分離し、９０％メ
タノール３リツトルで３回粉砕撹拌することによりトウ
ラックツ（Ｔ　ｕｒｒａｘ）装置で抽出する。粉砕され
た菌糸を吸引シ濾過により溶媒から分離し、シ戸液を合
わせ、蒸気かはとんと水だ（Ｊになるまで４０℃の温度
で減圧濃縮する。

得られた混合物を各抽出物に対す０．５リツトルの１．
２−ツク四ロエタンを用いて４回抽出し、１．２−ジタ
ロロエタン溶液を合わせ、４０℃の温度で減圧蒸発によ
り濃縮する。

得られた残留物をメタノールを用いてセファデックス（
Ｓｅｐｈａｄｅｘ）　ＬＨ−２０（１，４ｋｇ、ファル
マシア）上ケル濾過に付し、２８Ｏｍｆｌずつのフラク
ションに集めろ。ツクロスボリン混合物を含有するフラ
クション９〜１１を合わせ、次いで溶離剤として水飽和
酢酸エチルを用いノリ力ゲルカラムクロマトグラフィ＝
［シリカゲル１ｋｇ、粒径００６３−０．２ｍｍ“メル
ク”（Ｍｅｒｃｋ）］で分離する（５００Ｊのフラクシ
ョン）。極性の強さにしたがいまず［Ｎｖａ］２−シク
ロスポリンが溶離しくフラクション７〜９）、次に［Ｎ
ｖａ］’　ｒ（Ｄ）Ｓｅｒ］’−ツクロスボリンとシク
ロスポリンから成る混合物か溶離する。溶離剤としてク
ロロホルム／メタノール（９８：２）を用い、シリカゲ
ルクロマトグラフィー（２８０ｇ１メルク、０．６３〜
０．２ｍｍ）により［Ｎｖａコ’　［（Ｄ）Ｓｅｒコ８
−シクロスポリンとシクロスポリンを分離する（１００
ｍＲ，のフラクション）。粗［Ｎｖａ］”　−［（Ｄ）
Ｓｅｒ１８−ツクロスボリンを含有するフラクション２
０〜３０を、溶離剤としてメタノール／水（８５：１５
）を用い逆相シリカゲルカラム（“メルク”リクロペプ
（Ｌ　１Ｃｈｒｏｐｅｐ）　ＲＰ　１８．２６０ｇ、粒
径０．０４＝０　０６３闘）上、中圧クロマトグラフィ
ーでさらに精製し、２５Ｊのフラクションで集めろ。

フラクション４５〜５５を合わＵ−１純［Ｎ　ｖａ］　
２［（Ｄ）Ｓｅｒ］８〜ンクロスボリンを無定形白色粉
末として回収する。

前記工程に必要な前培養を以下のようにして得ｂ）接種
に用いる胞子および菌糸懸濁液を、脱イオン水１リット
ル当り麦芽エキス２０ｇ、寒天２０ｇ、酵母エキス４ｇ
を含有する寒天培地上２７℃で２１日間培養した最初に
分離された株ＮＲＲＬ８０４４の培養物から生成する。

この培養物の胞子を生理的ＮａＣ兇溶液にとって最終濃
度５×１０６胞子／　ｍ　ｆｌにする。（Ｄ）−セリン
と（ＤＬ）−ノルバリン成分は除外して実施例６ａの培
地と同じ組成を有する栄養液ｌリットルに接種するため
に前５己懸濁液１０ｍ、Ｊを用い、２７°で３日間回転
振盪器（２０Ｏｒｐｍ）上で培養する。この培養物を生
産性培養物の接種物として用い、［ＮＶａ］２−［（Ｄ
）Ｓｅｒ］８−　シクロスポリンを次のように発酵スケ
ールで生産する。

ｃ）ＮＲＲＬ８０４４菌株の寒天斜面から約１０９個の
胞子を採取し、予め１２０℃で２０分間殺菌した下記成
分からなる前培養培地２０リツトルを入れたステンレス
スチール発酵槽に移す：フルクト一ス　７５　ｇ アンバーＥＨＣ２５ｇ ＫＨ２ＰＯ４５ｇ ＫＣ克　２．５ｇ 蒸留水　全１リツトル （ｐＨ＝５．５） 培養条件としては、温度は２７℃、０５バールの過圧で
１６克／分の気流および２０　Ｏｒｐｍの撹拌回転速度
が好ましい。発育する前培養を６日間培養し、次いて１
５リツトルを予め＋２０’（：で２０分間殺菌した下記
成分からなる生産培地３００リツトルを入れたステンレ
ススチール発酵槽に移す。

麦芽糖　７５　ｇ アンバーＥｔｃ　２５　ｇ ＫＨ２Ｐ０．　５　ｇ ＫＣ４’　２．５ｇ （ＤＬ）−ノルバリン　５ｇ （Ｄ）−セリン　８ｇ 蒸留水　全１リツトル （ｐＨ＝５．５） 培養物を温度２７℃に保持し、０．５バールの過圧て１
２０リットル／分で通気し、７０　ｒｐｍで撹拌する。

シリコーン乳液を加えて泡沫抑制をずろ。

１４日間培養して全容量２７５リツトルとなった培養物
を１０℃に冷却し、ウエストファリア分離器を用いて菌
糸を除去する。炉液を酢酸エチルで２回撹拌抽出し、抽
出物を少量の水で洗浄し、合わせて真空乾燥する。菌糸
をメタノールと合イっ廿、ホモノネート化して濾過する
。９０％メタノールを用いて２回繰り返し抽出する。メ
タノール抽出物を合計て、水を加え、減圧濃縮ずろ。残
留水性濃縮液を酢酸エチルで２回抽出し、抽出物を少量
の水で洗浄し、合わせて減圧濃縮する。抽出されノこ水
相を酢酸エチル／イソプロパツール（８，２）で２回再
抽出する。これらの抽出物を合わせ、再び減圧濃縮する
。

菌糸と炉液の抽出物を、溶離剤として５０倍量のセファ
デックスＬｌ（−２０とメタノールを用いて濾過する。

次いてピークフラクションを、溶離剤として水飽和酢酸
エチルを用い、１００倍量のシリカゲル６０（粒径−０
，０４〜０．０６３ｍｍ）を用いてクロマトグラフィー
に付して精製する。まず初めに［Ｎ　ｖａ］　２−シク
ロスポリンが溶離し、次にツクロスボリンおよび［Ｎｖ
ａｌ’　−［（Ｄ）　−Ｓｅｒ］８−シクロスポリンが
溶離する。後者のフラクションをさらに１４０倍量のシ
リカゲル６０（粒径００６３〜０．２０ｍｍ）と溶離剤
としてりａａポ／ｌ／ム／メタノール（９８：２）を用
いてクロマトグラフィー精製に付し、純粋な［Ｎｖａ］
２−［（Ｄ）Ｓｅｒｌ’−シクロスポリンを回収する。

実施例７ 実施例５．３の化合物もまた、実施例６ａ）と同様の手
順で微生物学に製造されるが、下記の修正を行なう。

ａ）栄養培地において、−（ＤＬ）−ノルバリンヲ（Ｌ
）−／（リン１０ｇと置き換える。培養培地から菌糸を
分離した後−次のように抽出する：吸引濾過により粉砕
した菌糸を溶媒から分離し、濾液を合わせ、蒸気が主と
して水だけになるまで４０°Ｃの温度で減圧蒸発により
（水を滴下しながら）濃縮する。得られた混合物を３回
それぞれ５リツトルの酢酸エチルを用いて抽出し、酢酸
エチル溶液を合わせ、４０℃の温度で減圧蒸発により濃
縮する。

得られた残留物をメタノールを用いてセファデックス（
Ｓ　ｅｐｈａｄｅｘ）Ｌ　Ｈ−２０（１、４ｋｇ：ファ
ルマンア）」ニゲル濾過に付す。ツクロスポリン混合物
を含有ずろこれらのフラクションを合わせ、次いて溶離
剤として水飽和酢酸エチルを用いてシリカゲルカラムク
ロマトグラフィー（シリカゲル３ｋｙ、粒径０．０２０
−０．０４５ｍｚ、′クルイス（Ｇｒａｃ、ｅ）”）に
より分離する。極性の強さにしたがい初めに［Ｖａｌ］
２−シクロスポリンが溶離し、次いて主成分として［Ｖ
ａｌ］２−　［（Ｄ）、Ｓｅｔ］８−シクロスポリンを
含有する混合物が溶離する。さらに溶離剤としてアセト
ン／ヘキサン（１：１）を用いてシリカゲルクロマトグ
ラフィー（８０ｇ、“ブレイス”、００２０−０．００
４５ｉｘ）により［Ｖ　ａ！コ”−［（Ｄ）Ｓｅｒ］８
−７クロスポリンを精製する。粗［Ｖａｌ］’−［（Ｄ
）Ｓｅｒ］６−シクロスポリンを含有するこれらのフラ
クションを、さらに溶離剤としてメタノール／水（８０
：２０）を用い逆相シリカゲルカラム（“メルク”リク
ロプレプ（Ｌ　１Ｃｈｒｏｐｒｅｐ）ＲＰ　１８．１６
０９、粒径０．０４−０．０６３關）上、中圧クロマト
グラフィーにより精製し、無定形白色粉末として純粋な
［Ｖａｌ］２−［（Ｄ）Ｓｅｒ１８−シクロスポリンを
得る。

ｂ）必要な前培養は実施例６ｂ）と同様にして得られる
。

実施例６ｃ）と同様の発酵スケールで［Ｖａｌ］２−［
（Ｄ）Ｓｅｒ１８−シクロスポリンを製造するがただし
次の修正を加える： Ｃ）生産培地において、−（ＤＬ）−ノルバリンを（Ｉ
、）−バリン１０ｇと置き換える。菌糸をメタノールと
合わせ、ホモジネート化し、濾過（９０％メタノールを
用いて２回繰り返す）しだ後−さらに以下のように処理
する： メタノール抽出物を合わせ、水を加え、減圧濃縮する。

残留水性濃縮液を酢酸エチルで３回抽出し、抽出物を少
量の水で洗浄し、合わせて減圧濃縮する。

菌糸と濾液抽出物を、溶離剤としてメタノールと５０倍
量のセファデックスＬＨ−２０を用いて濾過する。次い
てピークフラクションを、溶離剤として水飽和酢酸エチ
ルを用い、４０倍量のシリカゲル６０（粒径０．０４−
０．０６３１１１屑）を用いてクロマトグラフィー精製
する。初めに［Ｖａｌ１２−ツクロスポリンが溶離し、
次いでシクロスポリンおよび［Ｖａｌ１２−　［（Ｄ）
Ｓｅｒ１８−シクロスポリンが溶離する。さらにこの後
者のフラクションを１００倍量のシリカゲル６０および
溶離剤としてアセトン／ヘキサン（１・１）を用いてク
ロマトグラフィー精製し、逆相シリカゲル（“メルク”
リクロプレプＲＰ１８、粒径０．（１４−０，０６３ｍ
ｍ）Ｉｔ、中圧クロマトクラフィーに付し、純粋な［Ｖ
ａｌ１２−［（Ｄ）Ｓｅｒ］’−ツクロスポリンを得る
。

実施例８ 実施例５６の化合物はまた、実施例６と同様にして微生
物学的に製造されるか、ただし次の修正を加える。

ａ）栄養培地において−（ＤＬ）−ノルバリンを（Ｌ）
−スレオニン５ｇと置き換える。培養した後−以下のよ
うに抽出する。

菌糸を培地から分離し、３回それぞれ９０％メタノール
９リツトルを用いて粉砕撹拌しながらレンラックス装置
において抽出する。粉砕された菌糸を、吸引濾過により
溶媒から分離し、濾液を合わせて蒸気が主として水たけ
となるまで４０°Ｃの温度で減圧蒸発により（水を加え
て）ａ縮ずろ。得られた混合物を３回それぞれ５リツト
ルの酢酸エチルを用いて抽出し、酢酸エチル溶液を合わ
せ、４０℃の温度で減圧蒸発により濃縮ずろ。

得られた残留物をメタノールを用いてセファデックスＬ
ｌ−Ｔ　−２０（２ｋｈ；ファルマンア）１−ケル濾過
に付す。シクロスポリン混合物を含有するこれらのフラ
クションを合わせ、次いて溶離剤として水飽和酢酸エチ
ルを用い、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリ
カゲル２ｋｇ、粒径０．０２−００４５ｍｍ、“ブレイ
ス”）により分離する。極性の違いにより最初にツクロ
スポリンが溶離し、続いて［（Ｄ）Ｓ（！ｒ１８−ツク
ロスボリン、次ぎに［Ｔｈｒ］２−ツタ１１スボリノ、
最後に［Ｔｈｒ］２−　［（Ｄ）Ｓｅｒ］’−ツクロス
ポリンか粗製形て溶離する。さらに溶離剤としてアセト
ン／ヘキサン（２１）を用い、ノリ力ゲルタロマトグラ
フイー（５０ｇ、“ブレイス”、０．０２−０．４５ｍ
ｍ）により［Ｔ　ｈｒ］　’　−［（Ｄ　）Ｓｅｒ］０
−ツクロスポリンを精製し、無定形白色粉末として純粋
な［Ｔ１１ｒ］２−［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−ツクロスボリ
ンを得る。

ｂ）必要な前培養を実施例６ｂ）と同様にして得る。

実施例６ｃ）と同様の発酵スケールで［Ｔｈｒ１２−［
（Ｄ）Ｓｅｒ］８−ツクロスボリンを製造するが、ただ
し次の修正を加える。

Ｃ）生産培地において−（ＤＬ）−ノルバリンを（Ｌ）
−スレすニン５ｇと置き換える。培養およびウエストフ
ァリア分離器を用いて菌糸の除去をした後−さらに次の
ように処理する。

菌糸をメタノールと合わせ、ホモジネート化して濾過す
る。９０％メタノールを用いて２回この抽出を繰り返す
。メタノール抽出物を合わせ、水を加え、減圧濃縮する
。残留水性濃縮液を酢酸エチルで３回抽出し、抽出物を
少量の水で洗浄し、合わせて減圧層線する。

菌糸抽出物を溶離剤としてのメタノールおよび５０倍の
セファデックスＬｌ（−２０を用いて濾過する。次いで
ピークフラクションを、溶離剤として水飽和酢酸エチル
を用い３０倍量のノリカゲル６０（粒径０．０４−０．
０６３πｎ）を用いてクロマトグラフィー精製する。最
初にツクロスポリン、次いて［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シク
ロスポリン、次いで［Ｔｈｒ］２−ツクロスポリン、最
後に［Ｔｈｒ］２−　［（Ｄ）Ｓｅｒ］　８−ツクロス
ボリンが溶離する。さらにこれら後者のフラクションを
、２５０倍量のンリカゲル６０（粒径０．０２−０．０
４５屑ｎ）および溶離剤としてアセトン／ヘキサン（２
＋１）を用いてクロマトグラフィー精製に付し、純粋な
［Ｔｈｒ］’　−［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シクロスポリン
を得る。

実施例９ 実施例４．１〜４．３の化合物の製造の際の出発原料と
して用いろ下記化合物は、実施例３と同様にして実施例
５〜７の特定のツクロスポリンから製造されろ。

９１　［ジヒドａ　−ＭｅＢｍｔｌ　’　−［Ｎｖａ］
　２−　［（Ｄ）　Ｓ　ｅｒａ８−ツク［７スボリン［
式ｌｌＴａ：　Ｘ’　＝−シヒドａ　−Ｍ　ｅ１３　ｍ
ｔ−１Ｙ’＝−Ｎｖａ−１Ｚ′＝−Ｖａｌ−１Ｗ′−−
−（Ｄ）Ｓｅｒ−］−実施例５．２または６の生成物か
ら製造する　・［α］２Ｏ−２５１０（Ｃ＝１２３、Ｃ
ＦＩＣ１３）／−１７９°（ｃ＝１．１６、ＣＨｉＯＨ
）：ｍｔ）＝’１５５−１５７°Ｃ０ ９２「ノヒドａ　’−ＭｅＢｍｔｌ　’　−［Ｖａｌ１
２−　［’（Ｄ）　Ｓ　ｅｒ１８−ツクロスポリンＩＪ
：　ＩＩＩ　ａ　：　Ｘ　’　−ジヒドロ−ＭｅＢｍＬ
−１Ｙ’　−−Ｖａｌ−１ｚ’　＝−■ａｌ−１Ｗ’　
−−（Ｄ）Ｓｅｒコー実施例５３または７の生成物から
製造する。

［α］２０＝　−２２４°（ｃ＝１．ｏ、ＣＨＣ１３）
。

９３　［ノヒドａ−ＭｅＢｍＬ］’−［Ｔｈｒ］２−　
［’（Ｄ）Ｓｅｒ］８−ツクロスポリン［式ＩＩＩ　ａ
　：　Ｘ　’　＝−ジヒドロ−Ｍｅｒ３ｍｔ−１Ｙ’＝
−Ｔｈｒ−１ｚ’　−−Ｖａｌ−１Ｗ’　−−（Ｄ）Ｓ
ｅｒ−］一実施例５６または８の生成物から製造する ［α］”−−２６２°（ｃ＝０．７３、ＣＨＣｌ３）／
−１７３°（ｃ＝０．７９、ＣＩ−１３０１−１）　：
ｎ＋ｐ＝１５６−１５８℃。

最終生産物であるツクロスポリン類、例えは前記式（Ｉ
）の生産物は、下記試験方法により示し得る薬理活性を
示す。

（ｌ　免疫抑制活性） １．１．ゲル中てのインビトロ局所溶血［ミノエルおよ
びダットン、ンヤーナル・オブ・エクスペリメンタル・
メデイシン（Ｊ　、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ。

）１２６巻４２３〜４４２頁（１９７６年）］。

この発明の式（１）て示されるツクロスボリン類は、非
処理対照と比較すると、０．Ｏ１〜１０．０μｇ／ｍｆ
の濃度で溶血ゾーンを阻止する。

１．２．シャツシーおよびグリーブスによるリンパ球刺
激試験。　［クリ壬カル・アンド・エクスペリメンタル
・イムノロジー（ＣＩｉｎ、　ＥＸｐ。

Ｉ　ｍｍｕｎｏｌ　、）　９巻４８３頁（１９７１年）
および１０巻５２５頁（１９７２年）］。この発明の式
（１）で示されるシクロスポリンは、非処理対照と比較
すると、０．００１−１０．０ｔｔｇ／ｍｌの濃度てマ
ウス牌臓リンパ球におけるコンカナバリン（ｃｏｎｃａ
ｎａｖａｌｉｎ）Ａ刺激ＤＮＡ合成を阻止しくデミノン
取入れ阻止）、細胞増殖および胚子発生を阻止する。

１．３．混合リンパ球反応［バッハ等、ジャーナル・オ
ブ・エクスペリメンタル・メデインン（Ｊ　、　Ｅｘｐ
、　Ｍｅｄ、　）１３６、Ｉ４３０頁（１９７２年）］
。照射マウス（ＣＢＡセ　）からの異型的婢臓細胞と５
日間共培養した場合のリンパ球［マウス（バルブ／Ｃ系
）牌臓細胞］の反応を、試験物質の存在下および不存在
下に測定した。試験物質不存在下の反応を対照に用い、
１００％とした。試験物質存在下の反応を１００％の対
照反応と比較し変化％として示した。この発明の式（１
）で示されるシクロスポリン類を００１ないし１０　、
０　ｐ　ｇＩｎ’ｉ、”　’の濃度で用いたとき阻止反
応が観察された。

ｌ　４．臓器拒絶の抑制 ドナーラット（Ｆ　３４４系、雌）の腎を受容動物（ｒ
ｅｃｉｐｉｅｎｔ、ウィスター・ファース系、雌）ラッ
トに移植した。試験物質を１４日間受容動物に経口投与
し、その後処置を中止した。試験動物は移植７日後両側
腎の外科的除去に付した。試験動物の生命は移植−器の
受容と機能に依存するので、プラセボのみを投与した対
照動物に較べた生存期間の延長が試験物質の効果を示す
パラメータになる。上記試験方法において、この発明の
式（Ｉ）で示されるシクロスポリン類を２．５〜１０ｍ
ｇ／ｋｇの用量で経口投与した動物は、非処理対照が臓
器拒絶のため約９〜ｌＯＢ間で全部死亡したのに対して
〉６０ないし＞２５０日の生存期間を示した。

（２，抗炎症活性） 抗炎症活性は、ラットにおけるアノコバノド関節炎試験
により示すことかできる。この試験で（Ｊ、アノコバノ
ド関節炎をピアソンおよびウッド、［アースリヂス・ア
ンド・リューマヂスムＫＡｒｔｈｒｉｔｉｓ　ａｎｄ　
Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ）２巻４４０頁（３９５９年）の
方法にしたがって誘発した。この発明の式（１）で示さ
れるシクロスポリン類は、この試験においてｌＯ〜３０
　ｍｇ／　ｋｇ／日の経口用量で関節炎の発症および既
存関節炎に対して有効であった。

（３尻重生物活性） レーン、「ケモセラピー・アンド・トランク・レジスタ
ンス・イン・マラリアＪ（Ｃｈｅｍ。

ｔｈｅｒａｐｙ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｒｅ５ｉｓｔａｎ
ｃｅ　ｉｎＭａｌａｒｉａ）ピータースにューヨーク、
アカデミツクプレス、１９７０年）による抗マラリア試
験。第０日に、マウス（ＯＦＩ系、雄）にプラスモジウ
ム・ベルブヘイ（Ｐ　ｌａｓｍｏｄｉｕｍｂｅｒｇｈｅ
ｉ）種（ＮＫ６５株）の寄生性細胞１０’を含む懸澗液
０．２＋ｎ４を腹腔的注射した。試験物質は、第３日に
種々の用量を５〜ｌＯマウス／用量を用いて皮下投与し
た。生存切間を記録し、非処理対照の生存期間と比較し
て計算した最低有効用ｆｆｌ（ＭＥＤ）を計算した。

対照の生存期間は約７日間であった。ＭＥＤは生存期間
が２倍になる用量である。この発明の式（Ｉ）て示され
るシクロスポリン類は、この試験において、２５〜Ｉ　
ＯＯｍｇ／ｋｇ／日の皮下投与用量で有効であった。

最終生産物であるシクロスポリン類、例えば式（Ｉ）の
ツクロスボリン類は、免疫抑制活性を有するので、免疫
応答の低下を必要とする疾病および症状の予防および処
置、例えばリンパ球および免疫細胞の増殖抑制、例えば
自己免疫病の処置、または例えば皮膚、肺臓、心臓、心
・肺、骨髄、腎臓、牌臓および角膜移植等におりる移植
拒絶の防止に対する使用が適応する。

式（１）のツクロスボリン類か適応となる特異的自己免
疫病には、シクロスポリンによる処置か提案または使用
されて来たあらゆる疾病が含まれ、例えば再生不良性貧
血、純赤血球貧血、特発性血小板減少症、全身性紅斑性
狼癒、多発性軟骨炎、強皮症（ｓｃｌ（Ｉｒｏｄｏｍａ
）、ウニブナ−肉芽腫症、慢性活動性肝炎（ａｃｔｉｖ
ｔ＋　ｈｅｐａｔＨ：ｉｓ）、重症筋無力症、乾癖、ス
ヂブン・ノョンソン症候群、特発性スプルー（ｓｐｒｕ
ｅ）、クローン病、クレイラス病、サルコイト−ノス、
多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、原発性若年型糖尿
病、後部くｂ脱炎、間質性肺線維症および乾癖性関節炎
が含まれろ。

また、最終生産物であるツクロスボリン類、例えば式（
１）のツクロスボリン類は、抗炎症活性を有するので、
炎症性症状、特に自己免疫性構成要素を一員としまたは
包含する病因による炎症性症状の処置、例えば進行性慢
性多発性関節炎のような、関節炎およびリューマチ性疾
患の処置に対オろ使用か適用する。

さらに、最終生産物であるシクロスポリン類、例えば式
（１）のツクロスボリン類は、尻重生物活性を有するの
で、尻重生物剤として、すなわち種々の型の寄生物感染
症の処置、特に原生動物並ひにトレマト−ダおよびネマ
トーダ性寄生物感染症の処置に対する使用が適応する。

寄生物感染症の具体的な型としては、住血吸虫症、フィ
シリア症、リーシュマニア症、コクノノオイデス症、お
よび特にマラリアを含めて、従来シクロスポリンによる
処置が文献上提案されたあらゆる型が包含されろ。

」二記の用途において、指示１日用量は約７５〜５００
０友９の範囲、好ましくは約２０００晃９以下、最も好
ましくは約１５００ｍｇ以下てあり、好適には１日１０
または２〜３０の分割用量として投与する。単位用量形
態、例えば経口投与用のものは、好適には約２５〜約２
５００６、好ましくは約１０００ｍｇ以下、最も好まし
くは約８００哩の式（Ｉ）で示されるツクロスポリンを
、医薬的に許容される希釈剤または担体と混合して含む
ものである。

特定の適応に対する特定のシクロスポリン（Ｉ）の適当
な１日用量は、勿論特に適応、例えば処置すべき症状に
関連する相対効力により異なる。好ましい式（１）のシ
クロスポリンは実施例１の生成物（［ｏ−アセチルー（
Ｄ）Ｓｅｒコ８−シクロスポリン）である。この化合物
で得られた上記試験の結果は次の通りである。

注）ＩＣ１゜−非処置対照と比較して５０％阻害をもた
らす濃度 ＰＴ−予防処置 ＴＴ−治療処置 Ｍ　Ｅ　Ｉ）−最低有効用量 最終生産物であるツクロスボリン類、例えば式（１）で
示されるシクロスポリン類は、任意の常用経路、特にツ
クロスポリンの投与に関して現在行なわれている手段、
例えば臓器移植、移植１ｉｉｊおよび直後、並びに他の
方法では吸収が不良となる胃腸障害エピソードの場合に
は特に静脈内注入により、また例えば経口用溶液の形で
経口的に、投与することができる。

したがって、この発明はまた以下のものを提供するもの
である。

ｌ）前記式（Ｉ）で示されるシクロスポリンを医薬的に
許容される希釈剤または担体と共に含有してなる医薬組
成物。

２）医薬として使用する、すなわち手術または治療によ
る処置に使用する、特に免疫抑制剤または抗炎症剤また
は抗寄生物剤として使用する、前記式（１）で示される
シクロスポリン。

３）処置を必要とする対象に前記式（１）で示されるシ
クロスポリンの有効量を投与オろことからなる、」−記
対象におけろ免疫抑制の誘発、炎症の処置または寄生物
感染症の処置方法。

Ｍ記のように、式（ｌｌｌａ）で示されるシクロスポリ
ン類らまた新規であり、中間体としての用途を有する以
外に、薬理活性および／または特性、特に免疫抑制活性
に関する、および特に移植拒絶の防止上における用途に
関する活性を示し、これが例えばヨーロッパ特許第００
５６７８２号に具体的記載のある他の７クロスポリン類
との関連において特に興味あるものとしている。式（Ｉ
ｎａ）で示されるシクロスポリン類の薬理活性は、例え
ば上記試験方法１．Ｉ、１．２．１．３．２または３に
より示すことができる。すなわち、この発明の式（Ｔｌ
ｌａ）で示されるシクロスポリン類は、上記試験１１で
は０．０１−１０μｇ／ＩＩＩＱの濃度、上記試験１．
２では０．００１−１０　ｕ９／ｍＱの濃度、上記試験
１３ではＯ，、ＯＯ１〜１０μ９ＩＲＱの濃度、上記試
験２では１０〜３０　ｒｔｒ９／　ｋｇ／日の経口用量
、上記試験３では５０〜１（ｌ　Ｏｍ９／に９／日の皮
下ｍｍで有効である。

式（Ｉ［ａ）で示されろシクロスポリン類は、免疫抑制
活性を有するので、免疫応答の低下を必要とする疾病お
よび症状の予防および処置、例えばリンパ球および免疫
細胞の増殖抑制、例えば自己免疫病の処置、例えば式（
Ｉ）のシクロスポリン類の用途に関して引用した具体的
な自己免疫疾患の処置、または例えば式（１）のシクロ
スポリン類の用途に関して引用した種々の具体的な型の
移植拒絶の防止に対する使用が適応する。

また、式（ＩＩＩａ）で示されるシクロスポリン類は、
抗炎症活性を有するので、炎症性症状、特に自己免疫性
構成要素を一員としまたは包含する病因による炎症性症
状の処置、例えば進行性慢性多発性関節炎のような、関
節炎およびリューマチ性疾患の処置に対する使用が適応
する。

さらに、式（Ｉ［［ａ）で示されるシクロスポリン類は
、尻重生物活性を有するので、抗寄生物剤として、すな
わち種々の型の寄生物感染症の処置、特に式（Ｉ）のシ
クロスポリン類の用途に関して記載した感染症の処置に
対する使用が適応する。

」−記の用途において、指示１日用量は約７５〜５００
０ｍｇの範囲であり、好適には１日１回または２〜３回
の分割用量として投与する。単位用量形態、例えば経口
投与用のらのは、好適には例えば約２５〜約２５００ｍ
ｇの式（ＩＩ［ａ）のツクロスボリンを、医薬的に許容
される希釈剤または担体と混合して含むものである。

特定の適応に対する特定のシクロスポリン（ＩＩｌａ）
の適当な１日用量は、勿論特に適応、例えば処置すべき
症状に関連する相対効力により異なる。好ましい式（Ｉ
［ａ）のシクロスポリンは、Ａ、［（Ｄ）Ｔｈｒ’］’
−ツクロスボリン（実施例５．１参照） Ｂ、　［Ｎｖａコ”−［（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シクロスポ
リン（実施例５２および６参照） Ｃ，［Ｎｖａ３２−［Ｎｖａ１５−［（Ｄ）Ｓｅｒ］”
−シクロスポリン（実施例５５参照） である。これらの化合物で得られた」−記試験の結果は
次の通りである。

式（Ｉｌｌａ）で示されろフクロスポリン類は、任意の
常用経路、特にツクロスボリンの投与に関して現在行な
われている手段、例えば臓器移植、移植前および直後、
並びに他の方法では吸収が不良となる胃腸障害エピソー
ドの場合には特に静脈内注入により、また例えば経口用
溶液の形で経口的に、投与することができる。

したかって、この発明はまた以下のものを提供するもの
である。

１）前記式（Ｈｌａ）で示されろツクロスボリンを医薬
的に許容される希釈剤または担体と共に含有してなる医
薬組成物。

２）医薬として使用する、すなわち手術または治療によ
る処置に使用する、特に免疫抑制剤または抗炎症剤また
は尻重生物剤として使用する、前記式（ＩＩｌａ）て示
されるツクロスボリン。

３）処置を必要とする対象に前記式（Ｉｌｌａ）で示さ
れるツクロスボリンの有効量を投与することからなる、
上記対象における免疫抑制の誘発、炎症の処置または寄
生物感染症の処置方法。

（なお、アミノ酸誘導体の記号につ０て番よ、「何機化
学・生化学命名法」下、８３−９１頁（１９８１年３月
１０日南圧堂発行）に記載さλｔてしする。）特許出願
人　サンド・アクチェンゲゼルシャフト代理人弁理士青
山葆　他１名 第１頁の続き ■Ｉｎｔ、ＣＩ、’　識別記号　庁内整理香料優先権主
張　［相］１９８４５月１０日［相］イギリス（ＧＢ）
■ｏａ　間者　ハンス・ホフマン　スイス国゛ンストラ
ツ十 ）８４１１９２２ ニーバー−４１０７エツテインゲン、ボトミンゲル・３
１番 手続補正書（。、。

昭和６０年４　月　１日 特許庁長官　殿 昭和６０年３月２２日付提出の特許願 ２発明の名称 新規シクロスポリン類 ３補正をする者 事件との関係　特許出願人 住所　スイス国バーゼルｃ番地の表示なし）名称　サン
ド・アクチェンゲゼルシャフト４代理人 特許請求の範囲　０別紙３ （１）　８位のアミノ酸残基が（Ｄ）−アンルオキシー
α−アミノ酸残基である、シクロスポリン。

（２）　８位のアミノ酸残基が（Ｄ）−β〜ルアノルオ
キシーα−アミノ残基である、特許請求の範囲第１項記
載のシクロスポリン。

（３）　８位のアミノ酸残基が０−アンルー（Ｄ）−セ
リル残基である、特許請求の範囲第１項記載のツクロス
ボリン。

（４）　８位のアミノ酸残基が０−アンルー（Ｄ）−ス
レオニル残基である、特許請求の範囲第１項記載のシク
ロスポリン。

（５）式（１） （１） 式中、Ｘは−ＭｅＢｍｔ−またはジヒトｏ　−ＭｅＢｍ
ｔ−１Ｙは−αＡｂｕ−１−Ａｌａ−１−Ｔｈｒ−１−
Ｖａｌ−または−Ｎｖａ−１ Ｚは一■ａｌ−または−Ｎｖａ−１ Ｑ一式（ＩＩ） Ｒ７ 唱 Ｒ，−ＣＯ−０−ＣＨ（ＩＩ） □ −ＮＨ−Ｃ１４−ＣＯ− （Ｄ） （式中、Ｒ１は水素、Ｃ５−４アルキルまたはフェニル
、Ｒ９は水素またはメチルを意味する） で示される残枯を意味する］ て示される化合物である、特許請求の範囲第１項記載の
７クロスボリン。

（６）［０−アセデル−（Ｄ）Ｓｅｒｆ８−ツクロスボ
リンである、特許請求の範囲第１項記載ののツクロスボ
リン。

（７）　［Ｎｖａ］２−　［０−アセデル−（Ｄ）Ｓｅ
ｒ］’−シクロスポリンである、特許請求の範囲第１項
記載のシクロスポリン。

（８）下記群 ［ジヒドｏ　−ＭｅＢ　ｍｌ］’　−［０−アセチル−
（Ｄ）Ｓｅｔ］８−ツクロスボリン、 ［０−ベンゾイル−（Ｄ）Ｓｅｒ］８−ツクロスボリン
、１ノヒドｏ−ＭｅＢｍｔ］’−［Ｎｖａ］２−［０−
アセチル−（Ｄ）Ｓｅｒ］８−ツクロスボリン、［Ｎｖ
ａ１５−［０−アセチル−（Ｄ　）　Ｓ　ｅｒ１８−シ
クロスポリン、 ［０−アセチル−（Ｄ）Ｔｈｒ］８−ツクロスボリン、
［Ｖａｌ］’−［０−アセチル−（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シ
クロスポリン、 レヒドａ−ＭｅＢｍｔｌ’−［Ｖａｌ］２−［０−アセ
チル（Ｄ）Ｓｅｒ１８−シクロスポリン、 ［Ｎｖａ］’−’［Ｎｖａ１５−　［０−アセチル−（
Ｄ）Ｓｅｒ１８−ノクロスボリン、 ［Ｔｈｒ］”−［０−アセチル−（Ｄ）Ｓｅｒ］８−ツ
クロスボリン、 ［ジヒドｏ−ＭｅＢｍｔコ’　−［Ｔｈｒ］’　−［０
−アセデル−（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シクロスポリン から選ばれた化合物である、特許請求の範囲第１項記載
のシクロスポリン。

（９）　８位のアミノ酸残基が（Ｄ）−アシルオキシ−
α−アミノ酸残基、例えは（Ｄ）−β−アアンオギンー
α−アミノ酸残基であるツクロスボリンの製造法、例え
ば特許請求の範囲第５項記載の式（＋）て示されるツク
ロスボリンの製造法において、ａ）　８位のアミノ酸残
基が（Ｄ）−ヒドロキシ−α−アミノ酸残基、例えば（
Ｄ）−β１ヒドロキシ−α−アミノ酸残基であるシクロ
スポリンをアシル化、例えば式（ＩＩＩ） （ＩＩＩ） １式中、Ｘ、ＹおよびＺは前記の意味、Ｗは式（１■）
ＨＯ−ＣＨ（ＩＶ） −ＮＨ−ＣＨ−Ｃ０− （Ｄ） （式中、Ｒ７は前記の意味） で示される残基を意味する］ で示されるシクロスポリンをアシル化し、基Ｒ，−ＣＯ
− （式中、Ｒ８は前記の意味） を上記式（１ｖ）で示される残基のβ位に導入するが、
または ｂ）１位のアミノ酸残基が−ＭｅＢｍｔ−であり、８位
のアミノ酸残基が（Ｄ）−アシルオキシルα−アミノ酸
残基、例えば（Ｄ）−β−アシルオキシーα−アミノ酸
残基であるシクロスポリンを還元して、１位の残基が−
ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ−である対応シクロスポリンを生
成、例えば上記式（ＤにおいてＸか７Ｗｉ　ｅ　Ｂ　ｍ
　ｔ−のシクロスポリンを還元して、Ｘが−ジヒドロ−
ＭｅＢｍｔ−である対応シクロスポリンを生成させるこ
と からなる方法。

（１０）特許請求の範囲第１項記載のシクロスポリンを
医薬的に許容される希釈剤または担体と共に含有してな
る、医薬組成物。

（１１）処置を必要とする対象に特許請求の範囲第１項
記載のツクロスボリンの有効量を投与することからなる
、上記対象における免疫抑制の誘発、炎症の処置または
寄生物感染症の処置方法。

（１２）式（Ｉｌｌａ） （ＩＩＩａ） ［式中、Ｙｏは−ａＡｂｕ−１−、’ｒｈｒ−１−Ｖａ
ｌ−１または−Ｎｖａ−１ Ｚｏは−Ｖａｌ−であるか、また材Ｙ′が一αＡｂｕ−
または−Ｎｖａ−のとき、−Ｎｖａ−１ Ｗｏは−（Ｄ　）　Ｓ　ｅｔ−であるか、またはＹｏか
一αＡｂｕ−でＺｏが−Ｖａｌ−の とき、（’Ｄ）Ｔｈｒ−１ Ｘｏは−ＭｅＢ　ｍｔ−であるか、またはＹｏか−Ｔｈ
ｒ−１−Ｖａｌ−または−Ｎｖａ−１Ｚ′が−Ｖａｌ−
でＷｏが−（Ｄ）Ｓｅｒ−のとき、−ノヒドローＭｅＢ
ｍｔ−を 意味する］ て示されるツクロスボリン。

（１３）　［（Ｄ）Ｔｈｒ］’−シクロスポリンである
、特許請求の範囲第１１項記載のシクロスポリン。

（１４）　［Ｎｖａ］２−［（Ｄ）Ｓｅｒコ８−シクロ
スポリンである、特許請求の範囲第↓す項記載のツクロ
スボリン。

（１５）　［Ｎｖａ］２−［Ｎｖａ］５−［（Ｄ）Ｓｅ
ｒ］０−シクロスポリンである、特許請求の範囲第Ｕ項
記載のシクロスポリン。

（１６）特許請求の範囲第１２項記載の式（Ｉｌｌａ）
で示されるシクロスポリンの製造法において、ｃ）　Ｏ
−保護形である前記式（Ｉｌａ）で示されるシクロスポ
リンを脱保護し、 ｄ）配列 いて定義した意味］ を含む直鎖ウンデカペプチド（このウンデカペプチドは
非保護形またはＯ−保護形である）を閉環させ、必要な
らば工程ａ）を実施し、 ｅ）式（Ｉｌｌａ）において、 Ｙｏは−Ｔｈｒ−１−Ｖａｌ−または−Ｎｖａ−１Ｚ゛
は−Ｖａｌ−であるか、またはＹｏか−Ｎｖａ−のとき
−Ｎｖａ−１ Ｗｏは−（Ｄ）Ｓｅｒ−１□ Ｘｏは−ＭｅＢｍｔ− であるツクロスボリンを製造するために、［、Ｔｈｒコ
２−シクロスポリン、［Ｖａｌ］２−ツクロスボリン、
−［Ｎｖａ］２−７クロスボリンまたは［Ｎ　ｖａ］　
’［Ｎｖａ］５−シクロスポリン生産性真菌株を（Ｄ）
−セリン含有栄養培地と接触させて培養し、得られた培
地から式（ｌｌｌａ）で示されるシクロスポリンを単離
し、 ｒ）式（ｌｌｌａ）においてＸｏが一ジヒドローＩＡｅ
Ｂｍｔ−であるシクロスポリンを製造するために、式（
Ｉｌｌａ）においてＸｏが−ＭｅＢｍｔ−である対応シ
クロスポリンを還元すること からなる方法。

（１７）特許請求の範囲第１１項記載のシクロスポリン
を医薬的に許容される希釈剤または担体と共に含有して
なる、医薬組成物。

（１８）処置を必要とする対象に特許請求の範囲第１λ
項記載のシクロスポリンの有効量を投与することからな
る、上記対象における免疫抑制の誘発、炎症の処置また
は寄生物感染症の処置方法。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　８位のアミノ酸残清か（Ｄ）−アノルオキシー
   α−アミノ酸残基てあろ、ツクロスボリン。 （２）　８位のアミノ酸残箔が（Ｄ）−β−アシルオキ
   シ〜α−アミノ酸残基である、特許請求の範囲第１項記
   載のシクロスポリン。 （３）、８１ケのアミノ酸残基かＯ−アンルー（Ｄ）−
   セリル残コｉ（である、特許請求の範囲第１項記載のシ
   クロスポリン。 （４）　８位のアミノ酸残基が０−アノルー（Ｉ））−
   スレオニル残基である、特許請求の範囲第１項記載のツ
   クロスボリン。 （５）式（１） ［式中、Ｘは−ＭｅＢｍｔ−またはジヒｌ；’　ａ−Ｍ
   ｅＢｍｔ−１Ｙは−ａＡｂｕ−１−Ａｌａ−１−Ｔｈｒ
   −１−Ｖａｌ　−ま　）こは　−Ｎｖａ−、Ｚは−Ｖａ
   ｌ−または−Ｎｖａ−１ Ｑ一式（ＩＩ） ２ □ Ｒ，−ＣＯ−０−ＣＨ（ＩＩ） □ −Ｎｒ−１−ＣＩ（−Ｇ　Ｏ− （Ｄ） （式中、Ｒ１は水素、Ｃ＋’ｔアルギルまたはフェニル
   、Ｒ７は水素またはメチルを意味する） て示される残基を意味する１ て示される化合物である、特許請求の範囲第１項記載の
   ７クロスボリン。 （６）［０−アセデル−（Ｄ　）　Ｓ　ｅｒ］８−シク
   ロスポリンである、特許請求の範囲第１項記載ののシク
   ロスポリン。 （７）［Ｎｖａ］２−［０−アセチル−（Ｄ）Ｓｅｒ］
   ８−シクロスポリンである、特許請求の範囲第１項記載
   の７クロスボリン。 （８）下記群 ［ジヒドｏ−ＭｅＢｍｔｌ＝［Ｏ−アセチル−（Ｄ）Ｓ
   　ｅｒ］８−ツクロスボリン、 ［０−ベンゾイル−（Ｉ）　）　Ｓ　ｅｒ］”−シクロ
   スポリン、［ノヒトＵ　−Ｍｅ１３ｍｔｌ’　−［Ｎｖ
   ａ］２−［０−アセチル−（Ｄ）Ｓｅｒ］８−ツクロス
   ボリン、［Ｎｖａ１５−　［０−アセチル−（Ｄ）Ｓｅ
   ｒ１８−ツクロスボリン、 ［０−アセチル−（Ｄ）Ｔｈｒ１８−ツク［Ｊスポリン
   、１、’Ｖａｌ１２−　［０−アセチル−（Ｄ）Ｓｅｔ
   ］’−シクロスポリン、 ［ノヒドロ−Ｍｅ［３ｍＬ］１−［■ａｌ］２−［０−
   アセチル−（Ｄ）Ｓｅｒ１８−ツクロスボリン、［Ｎ　
   ｖａミコ−［Ｎｖａ］５−［０−アセチル−（Ｄ）Ｓｅ
   ｒ］６−シクロスポリン、 ［Ｔ　ｈｒコ’−ｃｏ−アセチル−（Ｄ）Ｓｅｒコ８−
   シクロスポリン、 Ｌノヒトｃ７−ＭｅＢｍＬ］’−［Ｔｈｒ１２−　［０
   −アセチル−（Ｄ）Ｓｅｒ］８−シクロスポリン から選ばれた化合物である、特許請求の範囲第１項記載
   のツクロスボリン。 （９）　８位のアミノ酸残基が（Ｄ）−アシルオキシ−
   α−アミノ酸残基、例えば（Ｄ）−β−アアノオキシー
   α−アミノ酸残基であろツクロスポリンの製造法、例え
   ば特許請求の範囲第５項記載の式（１）て示されるツク
   ロスポリンの製造法において、ａ）　８位のアミノ酸残
   基か（Ｄ）−ヒドロキシ−α−アミノ酸残基、例えば（
   Ｄ）−β−ヒドロキシ−α−アミノ酸残基であるツクロ
   スポリンをアソル化、例えば式（ＩＩＩ） （ＩＩＩ） ［式中、Ｘ１ＹおよびＺは前記の意味、Ｗは式（ＩＶ）
   １−１０−ＣＩＩ　（ｍ −Ｎｌ４−ＣＩＩ−ＣＯ− （１）） （式中、Ｒ２は前記の意味） て示されろ残基を意味するコ て示されるツクロスボリンをアノル化し、基［え、−Ｃ
   Ｏ− （式中、Ｒ１はｒｉｉｊ記の意味） を」−記式（１■）で示される残基のβ位に導入する力
   １、または ｂ）　１位のアミノ酸残基か−ＭｅＢｍｔ−てあり、８
   位のアミノ酸残基が（Ｄ）−アソルオキシーα−アミノ
   酸残基、例えば（Ｄ）−β−アシルオキシーα−アミノ
   酸残基であるツクロスボリンを還元して、１位の残基か
   一ンヒトローＭｅＢｍｔ−である対応ツクロスボリンを
   生成、例えば上記式（１）においてＸか−ＭｅＢｍｔ−
   のツクロスポリンを還元してＸが−ンヒトロ−ＭｅＢｍ
   ｔ−である対応ツクロスボリンを生成させること からなる方法。 （ｌＯ）特許請求の範囲第１項記載のツクロスポリンを
   医薬的に許容される希釈剤または担体と共に含有してな
   る、医薬組成物。 （１１）処置を必要とする対象に特許請求の範囲第１項
   記載のシクロスポリンの有効量を投与することからなる
   、上記対象における免疫抑制の誘発、炎症の処置または
   寄生物感染症の処置方法。 （１２）式（ｌｌｌａ） （Ｉ］Ｔａ） ［式中、Ｙ′は−ａＡｂｕ−１−Ｔｈｒ−１−Ｖａｌ−
   １または−Ｎｖａ−１ Ｚｏは−Ｖａｌ−であるか、またはＹ′か一αＡｂｕ−
   または−Ｎｖａ−のとき、−Ｎｖａ−１ Ｗｏは−（Ｄ　）　Ｓ　ｅｒ−であるか、またはＹ。 が−αＡｂｕ−でＺｏが−Ｖａｔ−の とき、−（Ｄ）Ｔｈｒ−１ Ｘｏは−ＭｅＢｍＬ　であるか、またはＹｏか一’Ｉ″
   ｈｒ−１−Ｖａｌ−または−Ｎｖａ−１Ｚ゛か−Ｖａｌ
   　てＷｏが−（ｒ））Ｓｅｒ−のとさ、−ジヒドロ−Ｍ
   ｅＢｍｔ−を 意味するコ て示されるツクロスボリン。 （１３）　ｒ（Ｄ）Ｔｈｒ］８−ツク〔ノスボリンであ
   る、特許請求の範囲第１３項記載のツクロスボリン。 （１４）　［Ｎｖａ］２−　［（Ｄ）Ｓｅｒｌ８−ツク
   ロスボリンである、特許請求の範囲第１３項記載のツク
   〔ノスボリン。 （１５）　ＬＮｖａ］’−［Ｎｖａ］５−［（Ｄ）Ｓｅ
   ｒｌ”ツクロスボリンである、特許請求の範囲第１３項
   記載のツクロスボリン。 （１６）特許請求の範囲第１３項記載の式（Ｉｌｌａ）
   て示されるツクロスボリンの製造法において、ｃ）　Ｏ
   −保護形である前記式（Ｉｌａ）て示されろツク〔１ス
   ポリンを脱保護し、 ｄ）配列 −ＩｐＪ　’　−１４ｅＬｅｕ−ＭｅＬ、ｅｕ−ＭｅＶ
   ａ　Ｉ−Ｘ　’　−Ｙ　’　−５ａｒ−ＭｅＬ　ｅｕ−
   ２’　−ＭｅＬｅｕ−Ａ　１　ａ−８９１０１１１２３
   ４５６７ ［ここで、Ｙｏ、Ｚｏ、ＷｏおよびＸｏは式（ｌｌｌａ
   ）について定義した意味］ を含む直鎖ウンデカペプチド（このウンデカペプチドは
   非保護形または〇−保護形である）を閉環させ、必要な
   らば工程ａ）を実施し、 ｅ）式（Ｉｌｌａ）において、 Ｙｏは−Ｔｈｒ−１−Ｖａｌ−または−Ｎｖａ−１Ｚ゛
   は−Ｖａｌ−であるか、またはＹｏが−Ｎｖａ−のとき
   −Ｎｖａ−１ Ｗｏは−（Ｄ）Ｓｅｒ−１ Ｘｏは−ＭｅＢｍｔ− であるツクロスボリンを製造するために、［Ｔｈｒ］２
   −ツクロスポリン、［Ｖａｌ］２−ツクロスボリン、−
   ［Ｎｖａ］２−シクロスポリンまたは［Ｎ　ｖａｌ　２
   −［Ｎｖａ］５−ツクロスボリン生産性真菌株を（Ｄ）
   −セリン含有栄養培地と接触させて培養し、得られた培
   地から式（Ｉｌｌａ）で示されるシクロスポリンを単離
   し、 ｒ）式（Ｉｌｌａ）においてＸｏが−ジヒトＣ７−Ｍｃ
   Ｂｍｔ−てあろツク［Ｊスポリンを製造するために、式
   （Ｉｌｌａ）においてＸ“が　ＭｅＢｍＬ−である対応
   ツクロスボリンを還元すること からなる方法。 （１７）特許請求の範囲第１３項記載のツクロスボリン
   を医薬的に許容される希釈剤または担体と共に含有して
   なる、医薬組成物。 （１８）処置を必要とする対象に特許請求の範囲第１３
   項記載のツクロスボリンの有効量を投与することからな
   る、Ｌ記対象における免疫抑制の誘発、炎症の処置また
   は寄生物感染症の処置方法。