JPH04217626A - 口腔用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、歯周病の予防および治
療に有用なノルジヒドログァヤレチック酸を含有する口
腔用組成物であり更に詳しくは、ヒト由来コラゲナーゼ
阻害活性および歯周病原因菌に対する抗菌活性を有する
口腔用組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】歯周病は、歯周組織における種々の病態
を含む炎症性疾患の総称であるが、一般に炎症が歯肉部
分に限定される歯肉炎と、歯槽骨に達して慢性化する歯
周炎とに大別される。歯周炎は歯槽膿漏とよばれていた
が、慢性化に伴い歯肉及び歯槽骨の破壊をきたし歯の脱
落にいたる。歯を失う原因の５０％が歯周病であり、中
高年にかけては約８０％の人が罹患している。

【０００３】歯周病の原因として、歯周ポケットのプラ
ーク中の特定の細菌群、中でも黒色色素産生性のバクテ
ロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）菌群病原説が有力
視されている（例えば、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌｉ
ｎｉｃａｌ　Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌｏｇｙ、１３巻、
９１２　頁、１９８６年参照）。その歯周組織破壊作用
としては、細菌由来の直接作用因子（酵素やエンドトキ
シン等）や間接作用因子（宿主の免疫応答を介するもの
）が関与していると考えられているが、何れにせよ結果
的に歯肉および歯槽骨のコラーゲンが分解・吸収される
点は共通である（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　
ｏｆ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ　、９２巻、５０９　頁、１
９７８年参照）。

【０００４】歯周病に関わるコラーゲン分解酵素（コラ
ゲナーゼ）としては、バクテロイデス由来のものと歯肉
の線維芽細胞由来のものが注目されている。前者は最近
部分精製された、金属とチオールを同時に要求する珍し
い酵素であるが、まだ不明な点が多い（Ｊｏｕｒｎａｌ
　ｏｆ　Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　
、２３巻、２５８　頁、１９８８年参照）。一方、線維
芽細胞由来間質型コラゲナーゼ（以下断りの無い限りコ
ラゲナーゼと呼ぶ）は詳細に解明され、１次構造も明ら
かにされている（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉ
ｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　、２６１　巻
、６６００頁、１９８６年参照）　。

【０００５】コラゲナーゼは、結合組織中の間質型コラ
ーゲン（Ｉ型、ＩＩ型、およびＩＩＩ型コラーゲン）を
分解する際の律速酵素であり、コラーゲンの代謝に重要
な役割を果たしている。炎症の存在する歯肉ではコラゲ
ナーゼ活性が上昇すること（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐ
ｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１６巻、４
１７　頁、１９８１年参照）、またコラーゲンが歯肉炎
の初期の段階から減少していること（Ａｒｃｈｉｅｖｅ
ｓ　ｏｆ　Ｏｒａｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ、１８巻、８９９
　頁、１９７３年参照）　を考慮すると、歯肉のコラゲ
ナーゼが歯周病の進行に深く関わっていると考えられる
。

【０００６】従来、歯周病の予防や治療には、スケーリ
ングやルートプレーニングによる歯周ポケット内のプラ
ークや歯石の除去、歯周ポケットの除去（歯肉切除）等
が用いられていた。

【０００７】また、最近薬物療法として抗菌剤ミノサイ
クリンを配合した治療剤が開発された。ミノサイクリン
には、抗菌活性のみならずバクテロイデスおよび好中球
由来コラゲナーゼをイン・ビトロで阻害する活性を有す
ることが報告されている（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈ
ｅ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ
　Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌｏｇｙ　、３０巻、１８２　
頁、１９８８年参照）。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】上記公知の方法は、医
師の指示に従った物理的、外科的、あるいは薬剤による
治療に基づくものである。しかし、歯周病は日常的で罹
患率の高い疾病であり、また、医師による治療に至るま
でに病状が悪化し易いことを考慮すると、ガム、飴、飲
料のような食品や、歯磨剤、洗口剤のような口腔用組成
物として、前記の病因を除去し歯周病の予防や治療に役
立つ安全性の高い物質を利用することが望まれる。

【０００９】従って本発明の目的は、歯周病の予防・治
療効果が期待でき、しかも安全性の高い、口腔用組成物
を提供することにある。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、歯周病の
上記病因のうち、歯肉や歯槽骨コラーゲンの分解・吸収
の制御に重要な役割を担うコラゲナーゼの活性を阻害す
ることが歯周病の予防や改善に有効である点に注目し、
広く植物由来素材の中からコラゲナーゼ阻害物質を求め
て研究を重ねた。

【００１１】その結果、クレオソートブッシュなどの樹
脂成分であるノルジヒドログァヤレチック酸が強いコラ
ゲナーゼ阻害活性を有することを見出し、更に驚くべき
ことに、歯周病の発症と進行に深く関わっているとされ
ている、バクテロイデス　　アクチノバシラス，および
フゾバクテリウム属の細菌（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔ
ｈｅ　ＪａｐａｎｅｓｅＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ
　Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌｏｇｙ、２９巻、４６３頁、
１９８７年参照）の増殖を抑制する活性のあることを見
出し、本発明を完成させるに至った。

【００１２】ノルジヒドログァヤレチック酸はクレオソ
ートブッシュなどの他多くの植物の樹脂成分として存在
する公知の化合物である。抗酸化剤としてバター・油脂
類に限って使用することが認められているが、その他の
食品や歯磨類には使用されていない。

【００１３】本発明で用いるノルジヒドログァヤレチッ
ク酸の製造方法は、特に限定されるものではなく、通常
用いられている方法でよい。

【００１４】本発明の口腔用組成物には、その種類に応
じて通常使用される公知の成分を任意に配合することが
できる。

【００１５】本発明の口腔用組成物は、液剤，固形剤，
半固形剤のいずれであってもよく、好ましい組成物とし
てチューインガム，飴類，飲料等の食品，あるいは、歯
磨剤，洗口剤，トローチ剤，塗布液剤等があげられる。

【００１６】これらの口腔用組成物を製造するのに使用
される賦形剤または補助剤は、通常同目的に使用される
ものから剤形に応じて適宜選択すればよく、特に限定さ
れるものではないが、例えば乳糖，ステアリン酸マグネ
シウム，ソルビット，マンニット，カルボキシメチルセ
ルロース，ハイドロキシプロピルセルロース，ハイドロ
キシプロピルメチルセルロース，サッカリン，ラウリル
硫酸ナトリウム，ラウロイルサルコシンナトリウム，グ
リセリン，ポリエチレングリコール，ポリビニルアルコ
ール，カラギナン，アラビアゴム，エタノール，メント
ール，脂肪酸，クエン酸，無水ケイ酸，第二リン酸カル
シウム，ハイドロキシアパタイト、炭酸カルシウム，二
酸化チタン等が使用される。

【００１７】上記の組成物に、通常食品に用いられる甘
味料，着色料，香料，保存料などを適宜使用することも
できるし、クロルヘキシジンなどの殺菌剤，アンピシリ
ンなどの抗生物質を配合し、歯周病の予防や改善効果を
高めることもできる。

【００１８】この様にして製造される歯周病の予防およ
び治療に有用な口腔用組成物中に占めるノルジヒドログ
ァヤレチック酸の量は剤形により異なるが、通常０．０
００５〜２．Ｏ重量％、好ましくは０．００５〜１．０
重量％であることが望ましい。

【００１９】

【発明の効果】本発明の口腔用組成物は、ノルジヒドロ
グァヤレチック酸を配合している為に、歯周病における
歯肉および歯槽骨のコラーゲン吸収の原因であるコラゲ
ナーゼに対し優れた阻害活性を有するのみならず、歯周
病の発症と進行に深く関わっているとされている、バク
テロイデス　　アクチノバシラス，およびフゾバクテリ
ウム属の細菌の増殖を抑制する為、歯周病の予防および
治療に有用で、且つ配合量の多少に関わらず使用上の安
全性も極めて高いものである。

【００２０】

【実施例】

（試験例−１）ノルジヒドログァヤレチック酸のコラゲ
ナーゼ阻害作用

【００２１】 １．　試験薬 ノルジヒドログァヤレチック酸（シグマ社製Ｎ−４２６
８）を用いた。

【００２２】 ２．　コラゲナーゼ コラゲナーゼとしては、ヒト線維肉腫細胞由来の足場非
依存性細胞に、無血清無蛋白質培地中で産生させたヒト
プロコラゲナーゼを、ＣＭセファロース（ファルマシア
社製）及び亜鉛キレーティングセファロース（ファルマ
シア社製）により精製して緩衝液に溶解し、これに活性
化剤としてトリプシン（シグマ社製，Ｔｙｐｅ１２）を
添加して、３５℃にて５分間インキュベートした後、ダ
イズトリプシン　　インヒビター（メルク社製）を添加
してトリプシンを失活させたものを用いた（特願平１−
２３８９４１号公報参照）。

【００２３】 ３．　コラゲナーゼ阻害活性の測定 コラゲナーゼに対するノルジヒドログァヤレチック酸の
阻害活性の測定は、以下の通り行う。先ず、ノルジヒド
ログァヤレチック酸をジメチルスルホキシドにて溶解し
て８重量％溶液を得、ついで測定用緩衝液｛０．２Ｍ食
塩，５ｍＭ塩化カルシウム，０．０５容量％Ｂｒｉｊ−
３５　（ＩＣＩ社製ポリオキシエチレン（２３）ラウリ
ルエーテル），および０．０２容量％アジ化ナトリウム
を含有する５０ｍＭトリス塩酸緩衝液，ｐＨ７．５　｝
にて２００〜６６００倍希釈する。

【００２４】本希釈溶液と、既知量（０．７単位；なお
１単位は、３５℃で１分間に１μｇのＩ型コラーゲンを
分解する酵素量を示す）の上記標準コラゲナーゼ溶液と
を等量混合し、フルオレッセインイソチオシアネートで
標識されたＩ型コラーゲン（コスモバイオ社製）を基質
として、永井らの方法（Ｊａｐａｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎ
ａｌ　ｏｆ　Ｉｎｆｌａｍａｔｉｏｎ　、４巻、１２３
　頁、１９８４年参照）に準じコラゲナーゼ活性を測定
することにより、％阻害活性を求める。

【００２５】 ４．　試験結果 表１に結果を示す。ノルジヒドログァヤレチック酸に用
量依存的なコラゲナーゼ阻害活性がみられ、ＩＣ５０値
は約８μｇ／ｍｌ（約２６μＭ）であった。 表１ ───────────────────試薬終濃度　
　　　　　コラゲナーゼ阻害率（μｇ／ｍｌ）　　　　
　　　　　　　（％）　　　　　　　　───────
────────────　　１００　　　　　　　　
　　　　　　９１．４３０．０　　　　　　　　　　　
７９．５１０．０　　　　　　　　　　　５３．９３．
０　　　　　　　　　　　３２．４─────────
──────────

【００２６】 （試験例−２）ノルジヒドログァヤレチック酸の抗菌活
性

【００２７】 １．　試験薬 試験例−１と同じノルジヒドログァヤレチック酸を用い
た。

【００２８】 ２．抗菌活性試験方法 ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で、２倍段階希釈に
よって０．６３〜２０ｍｇ／ｍｌに調製したノルジヒド
ログァヤレチック酸を、変法ＧＡＭ寒天培地（日水製薬
製）で１０倍希釈し、０．０６３　〜２ｍｇのノルジヒ
ドログァヤレチック酸含有培地を調製した。

【００２９】これに、予めＧＡＭブイヨン培地（日水製
薬製）にて３７℃、２４時間嫌気培養した被検菌を１白
金耳摂取し、３７℃で５日間嫌気培養した後、菌の生育
の有無を肉眼で判定した。

【００３０】完全に生育が阻止されている培地に含まれ
ている試料濃度の最低値を以て、最小生育阻止濃度とし
た（ＭＩＣ，ｍｇ／ｍｌ）。

【００３１】 ３．被検菌 バクテロイデス・ジンジバリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅ
ｓ　ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ　ＡＴＣＣ３３２７７）　、
バクテロイデス・インターメディウス（Ｂ．ｉｎｔｅｒ
ｍｅｄｉｕｓ　ＡＴＣＣ１５０３２）、バクテロイデス
・メラニノジェニカス（Ｂ．ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉ
ｃｕｓ　ＡＴＣＣ２５８４５）、フゾバクテリウム・ヌ
クレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｎｕｃｌｅ
ａｔｕｍ　ＡＴＣＣ１０９５３）　、およびアクチノバ
シラス・アクチノマイセテムコミタンス（Ａｃｔｉｎｏ
ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍ
ｉｔａｎｓ　　ＡＴＣＣ２９５２２）の嫌気性菌株５種
を使用した。

【００３２】 ４．　結果 総ての菌株について、０．１２５ｍｇ／ｍｌでは増殖が
認められたが、表２に示した様に、０．２５ｍｇ／ｍｌ
でどの菌株も増殖は完全に抑制された。

【００３３】コントロールである、ＤＭＳＯのみを加え
た変法ＧＡＭ寒天培地（試料濃度，０ｍｇ／ｍｌ）では
、どの菌株も増殖が抑制されなかった。

【００３４】 表２ ──────────────────────菌株　
　　　　　　　　　　　　　　　最小生育阻止濃度＃　
──────────────────────Ｂ．　
ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ　　　　　　　　　　　　　　　
　０．２５Ｂ．　ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ　　　　　　
　　　　　　　　　０．２５Ｂ．　ｍｅｌａｎｉｎｏｇ
ｅｎｉｃｕｓ　　　　　　　　　　　０．２５Ｆ．　ｎ
ｕｃｌｅａｔｕｍ　　　　　　　　　　　　　　　　　
０．２５Ａ．　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔ
ａｎｓ　　　　　０．２５─────────────
─────────＃；ＭＩＣ，ｍｇ／ｍｌ

【００３５】以下に本発明の口腔用組成物についての実
施例を挙げる。

【００３６】実施例１（チューインガム）配合組成　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　重量％────
────────────────チューインガムベー
ス　　　　　　　　２０．０粉糖　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　５０．９９ブドウ糖　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０．０水飴（
水分１５％）　　　　　　　　　　１８．０ノルジヒド
ログァヤレチック酸　　０．０１香料　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．０────
────────────────

【００３７】４０℃
に保温した全量のチューインガムベースおよび全量の水
飴を、ニーダーに投入して１０分間混練し、粉糖の１／
３　量および全量のブドウ糖を投入して５分間、次いで
粉糖の１／３　量を投入して５分間混練した。次に、ノ
ルジヒドログァヤレチック酸と香料を残りの１／３　量
の粉糖に混合したものを投入し、５分間混練してガムミ
ックスを得た。

【００３８】実施例２（ヌガー）

【００３９】■を混合し泡立てる。■は１３０℃まで煮
詰める。■に■を少しづつ加え、更に泡立てる。これに
、■を加え混合しながら冷却盤上に広げ成型してヌガー
を得た。

【００４０】実施例３（練歯磨） 配合組成　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　重量％─────────────────────
─第２リン酸カルシウム　　　　　　　　　　４２グリ
セリン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１８
カラギナン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　０．９ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　　
　１．２サッカリン　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　１．０パラオキシ安息香酸ブチル　　　　
　　　　０．００５クロルヘキシジンジグルコネート　
　０．１香料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　０．１ノルジヒドログァヤレチック
酸　　　　０．１水　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　残量─────────
─────────────

【００４１】常法に従って
製造する。即ち、水，グリセリン，カラギナン，サッカ
リン，パラオキシ安息香酸ブチル，クロルヘキシジンジ
グルコネート，香料，およびノルジヒドログァヤレチッ
ク酸の処方量を計量し、混合して粘結剤を膨潤させたの
ち、第２リン酸カルシウム，ラウリル硫酸ナトリウムを
加え、更によく混合，脱泡したのちチューブに充填して
練歯磨剤を得る。

【００４２】 実施例４（練歯磨） ノルジヒドログァヤレチック酸の添加量が０．５重量％
である以外は実施例３と同様にして練歯磨剤を得る。

【００４３】実施例５（トローチ剤） 配合組成　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　重量％───────────────────
───ポリエチレングリコール６０００　　　　　　２
．０無水ケイ酸　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　１．０ステアリン酸マグネシウム　　　　　　
　　０．６タルク　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　０．３ハイドロキシプロピルセルロ
ース　　０．７ノルジヒドログァヤレチック酸　　　　
０．１マンニット　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　残量──────────────────
────

【００４４】常法に従い上記処方のトローチ剤
を製造する。

【００４５】実施例６（洗口剤） 配合組成　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　重
量％───────────────────エタノー
ル　　　　　　　　　　　　　　　　　　２０．０サッ
カリンナトリウム　　　　　　　　　　０．１香料　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
．０ショ糖脂肪酸エステル　　　　　　　　　　０．５
ノルジヒドログァヤレチック酸　　０．２水　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　残量
───────────────────常法に従い上
記処方の洗口剤を製造する。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】ノルジヒドログァヤレチック酸を含有する
   ことを特徴とする口腔用組成物