JPH0441155B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ペプチド系甘味料として有用なα−
Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチル
エステル（α−APM）又はその塩酸塩の製造方
法に関するものである。

α−APMの製造法に関しては数々の方法があ
ることが知られている。

それらの方法を見ると、ほとんどの方法がＬ−
アスパラギン酸（Ｌ−Asp）アミノ基を、例え
ば、カルボベンゾキシ基、ホルミル基、ハロゲン
化水素など何らかの方法で保護した後、無水物化
し、Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル
（PM）と縮合させてアスパルチル−フエニルア
ラニンメチルエステル骨格を合成し、脱保護を行
い目的のα−APMを得ている。しかし、このよ
うな方法によるかぎりβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フエニルアラニンメチルエステル（β−APM）
の副成を避けられないから、Ｌ−Asp或いはＬ−
フエニルアラニン（Ｌ−phe）からのα−APM
の合成収率には自ら限界がある。更に、このため
にはα，β−APM混合物からα−APMのみを分
離する操作が必要である。

一方、化学的に純粋にα−APMのみを合成す
る方法としてＬ−AspのNTA（Ｎ−チオカルボキ
シ酸無水物）とPMとを縮合させる方法が発表さ
れているが（特開昭56−73054）生成するAPMに
臭気をともなうなど工業的規模での実施には難点
がある。又、Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−Aspの
β−ベンジルエステルのNCA（Ｎ−カルボキシ酸
無水物）をPMと縮合した後接触還元で脱保護し
て、α−APMのみを得る方法（特開昭48−
96557）が発表されているが、この方法も、工業
的にはコストその他から実施には難点がある。こ
の他にもいくつかのβ−APMを副成しないα−
APMの製造法が知られているが、いずれも、実
験室的には可能であつても工業的にはコストの
点、副原料の点などで実施困難であると考えられ
る。

本発明者は、別にＬ−Aspのβ−メチルエステ
ルのNCAとＬ−pheとを縮合させてα−Ｌ−アス
パルチル−Ｌ−フエニルアラニン−β−メチルエ
ステル（α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルア
ラニンのアスパラギン酸残基のβ−カルボキシル
基のメチルエステル化物）を製造する方法を発明
し特許出願した。このジペプチドはその合成ルー
トから必然的に、Ｌ−AspとＬ−pheとのβ−結
合体を含まない。

本発明者は、例えば上記の方法で合成したジペ
プチドを用いてα−APMを容易に収率よく合成
する本願方法を発明した。

本発明者は、先に、α−APMをメタノール
（MeOH）〜塩酸の混合溶媒に溶解するとα−
APM塩酸塩が析出すると同時に溶液中にはα−
Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニン−β−
メチルエステルが少量副成している事を見い出し
た。これは、α−APMが上記混合溶媒中でエス
テル交換をうけて上記のβ−メチルエステルを生
ずることによるものと推測された。因みに、これ
らの化合物は平衡関係にあると考えられる。

そこで、本発明者は、これらの知見に基づき更
に研究の結果、α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエ
ニルアラニン−β−メチルエステルを特定の割合
のMeOH〜濃塩酸〜水混合溶媒、即ちMeOH10
〜20％、濃塩酸（conc HCl、35％塩酸水溶液）
８〜55％を含み、残りは水（いずれも容量％）で
ある組成の混合溶媒に、濃度0.01モル／dlから0.3
モル／dlになる様に溶解し、０〜60℃に保てば分
子内エステル交換が起り、α−APMが生じ、こ
れはつづいてα−APM塩酸塩として析出する為、
平衡がずれて究極的には高収率（約85％）で原料
α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニン−
β−メチルエステルはα−APM塩酸塩に変換さ
れることを見出し、本発明を完成した。このよう
に分子内エステル交換反応を用いてα−APMを
合成する方法は今までなされていない。

本発明の方法において、溶媒として一定濃度の
塩酸を使用し、これに更にMeOHを加えてもよ
い。その組成は、塩酸濃度を濃塩酸に換算して表
せば、前記のように、MeOH10〜20％、
concHCl8〜55％、残りは水（いずれも容量％）
の組成となる。塩酸濃度が高すぎるとペプチド結
合が切断され易いし低過ぎるとα−APM塩酸塩
の形で晶析しない。MeOH0％、すなわちMeOH
を加えぬときはエステルの加水分解が進行し、
MeOHの使用量の多過ぎるときはジエステル化
が進行する。

上記組成の混合溶媒に対するα−Ｌ−アスパル
チル−Ｌ−フエニルアラニン−β−メチルエステ
ルの使用量は、0.01〜0.3モル／dlである。少量に
過ぎるときは生成するα−APM塩酸塩が晶析し
ない。又多量に過ぎるときは上記組成の混合溶媒
に溶解しない。

分子内エステル交換反応は、０〜60℃で行う。
この範囲であれば、温度は一定であつても、経時
的に変化させてもよい。低温に過ぎるときはエス
テル交換速度が遅い。又、高温に過ぎるときはペ
プチド結合が切断され易い。

このような条件下では、２日〜14日でエステル
交換反応はほぼ完了する。

エステル交換反応液中には、α−APMが塩酸
塩の形で晶出するので、これを適当な方法で分離
し、必要により中和して遊離のα−APMとする。

α−APM塩酸塩を過などにより分離した後
の母液は、その溶媒組成をMeOH、塩酸、水を
適宜用いて再び上記の比率になる様に調節し、α
−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニン−β
−メチルエステルを更に添加すれば、定量的に無
駄なく使用した原料β−メチルエステルをα−
APM塩酸塩へ変換できる。

尚、α−APM塩酸塩を、必要に応じて、適当
なアルカリなどで中和するなど適宜な方法により
α−APMに変換でき、これを結晶として得るこ
とができるのはもちろんである。

以上、本発明により、はじめて化学的に安価に
α−APMのみを合成することが可能になつた。

実施例 １ MeOH1.0ml（混合溶媒に対し10.5容量％）、
concHCl3.4ml（混合溶媒に対し35.8容量％）お
よび水5.1mlを混合し、このものから７mlをとり、
α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニン−
β−メチルエステル4.2ｇ（混合溶媒に対し
0.2mol／dl）を溶解し、25℃に保つた。経時的に
α−APM塩酸塩が析出しはじめ８日後にα−
APM塩酸塩2.93ｇ（収率、約62％）を取でき
た。

同様の実験を繰返して14日後には3.8ｇ（収率
81％）のα−APM塩酸塩を取できた。

実施例 ２ MeOH1.3ml（混合溶媒に対し13.3容量％）、
concHCl3.4ml（混合溶媒に対し34.7容量％）お
よび水5.1mlの混合溶液から6.4mlをとり、α−Ｌ
−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニン−β−メ
チルエステル4.2ｇ（混合溶媒に対し、0.22mol／
dl）を溶解し、25℃に保つた。実施例１と同様に
α−APM塩酸塩が析出しはじめ、８日後にα−
APM塩酸塩3.3ｇ（収率70％）を取できた。

同様の実験を繰返して、11日後にはα−APM
塩酸塩4.1ｇ（収率87％）を取できた。

実施例 ３ 実施例２で得られた母液にconc HCl1.2mlを加
え（混合溶媒に対しMeOH13.1容量％、conc
HCl35.6容量％）、α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−
フエニルアラニン−β−メチルエステルを4.2ｇ
（混合溶媒に対し、0.22mol／dl）溶解し、30℃に
保つた。

８日後に4.6ｇのAPM塩酸塩を得た。収率97
％。

実施例 ４ MeOH1.2ml（混合溶媒に対し12.0容量％）、
concHCl3.0ml（混合溶媒に対し30.0容量％）お
よび水5.8mlの混合溶媒から７mlとり、α−Ｌ−
アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニン−β−メチ
ルエステル4.2ｇ（混合溶媒に対し、0.2mol／dl）
を溶解し、最初40℃に１日保ち、ついで25℃に５
日保つた。

α−APM塩酸塩が3.4ｇ析出した。収率72％。

参考例 α−APM塩酸塩４ｇを水100mlに溶解し、Na₂
Co₃の飽和水溶液を用いて冷却しつつ、PH4.8に中
和した。このものを５℃に一夜保つた。

析出した結晶を取し、乾燥したところ、2.65
ｇのα−APMを得た。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニ
   ン−β−メチルエステルをメタノール10〜20％、
   濃塩酸８〜55％を含み残りが水（いずれも容量
   ％）である組成の混合溶媒に濃度0.01モル／dlか
   ら0.3モル／dlになるように溶解し、０〜60℃に
   保つことで分子内エステル交換を行なわしめ、生
   成するα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラ
   ニンメチルエステルを塩酸塩として析出させ、こ
   れを単離し、必要によりアルカリで中和して遊離
   のエステルにすることを特徴とするα−Ｌ−アス
   パルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル
   又はその塩酸塩の製法。