JPH04500213A - 合成して製造された９―ベータ―ｌ（＋）アデノシンを用いる植物の生長促進法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 合成して製造された９−ベーターＬ（＋）アデノシンを用いる植物の生長促進法 この発明は化学的に製造された（合成）９−ベーターＬ（＋）アデノシンを、植 物の生長を促進するために利用する方法に関するものである。特にこの発明は、 上記目的のために極く少量の化学的に製造された９−ベーターＬ（＋）アデノシ ンを用いる方法に係る。

（２）、先行技術 Ｃ！。の第一アルコールで植物ロウ（ｐｌａｎｔ　ｗａｘ）の天然成分であるト リアコンタノール（ＴＲＩＡ）が数多くの作物種の生長を増進し、ときには収量 を増すことはリース（Ｒｉｅｓ）等の米国特許Ｎａ　４，１５０，９７０　；　 Ｒｉｅｓ、　Ｓ。

Ｋ、：　Ｃｒ１ｔｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ　ｉｎ　Ｐｌａｎｔ　５ｃｉｅｎｃ ｅｓ　２　、　２３９−２８５　（１９８５）、及びＲｉｅｓ、　Ｓ、　Ｋ　、 　Ｗｅｒｔ、　Ｖ、　Ｆ、　、　Ｓｗｅｅｌｅｙ、　Ｃ，Ｃ，ａｎｄ　Ｌｅａｖ ｉｔｔ、　Ｒ，Ｈ，：５ｃｉｅｎｃｅ　１９５　、　１３３９−１３４１　（１ ９７７）に述べられている。またトリアコンタノールはＡｂｓｔｒａｃｔｓ、　 Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ　ｏｎ　Ｔｒｉａｃｏｎｔａ ｎｏｌ。

Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２５−２８　、Ｚｈｅｎｊｉａｎｇ、　Ｃｈｉｎａ、　Ｓｈ ａｎｇｈａｉ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ、 　Ａｃａｄｅｍｉａ　５ｉｎｉｃａ（１９８７）　；　Ｌｉｍ、　ｕｎｇ−Ｃ， 、Ｂａ５ｋａｒａｎ、　Ｓ、　、ａｎｄ　Ｍｕｋｅｒｊｅｅ、Ｓ、Ｋ、　：　Ｉ ｎｄｉａｎ　Ｊ　、Ａｇｒ。

Ｓｃｉ、５６．７４４−７４７（１９８６）に記載されているようにアジアにお き毎年、数百万ニーカーの茶、野菜及び農耕作物において収量を増すために使用 されている。

トウモロコシ及びイネの実生に対しＴＲＩＡを施用して４０以内−こ葉面積、全 ケルダール窒素、水溶性タンパク質、還元糖、及び遊離アミノ酸の増大が測定さ れたことが、上で引用したＲｉｅｓ、　Ｓ、　Ｋ　：　Ｃｒ１ｔｉｃａｌ　Ｒｅ ｖｉｅｗｓｉｎ　Ｐｌａｎｔ　５ｃｉｅｎｃｅｓ　（１９８５）　、及びＲｉｅ ｓ、　Ｓ、　Ｋ　ａｎｄ　Ｗｅｒｔ。

Ｖ、　Ｆ、　：　Ｊ、　Ｐｌａｎｔ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　１ 　、１１７−１２７　（１９８２）に述べられている。Ｃａ’＋及びＭｇ２＋の 両者に依存するＡＴＰアーゼ活性が、オオムギ（Ｈｏｒｄｅｕｍ　４）の根から のセル−フリー抽出液に対し２．３ｎｍのＴＲＩＡを添加して３０分以内に４０ −６０％増大したことがＬｅｓｎｉａｋ、　Ａ、　Ｐ、ａｎｄ　Ｒｉｅｓ、　Ｓ 、　Ｋ、　：　Ｐｈｙｓｉｏｌ、Ｐｌａｎｔ、６８　。

２０−２６　（１９８６）に記載されている。Ｊｏｎｅｓ、　Ｊ、　。

Ｗｅｒｔ、　Ｖ、　Ｆ、及びＲｉｅｓ、　Ｓ、　Ｋ、：　Ｐｌａｎｔａ　１４４ 　、２７７−２９２　（１９７９）に述べられているように等モル濃度のオクタ コサノール（ＯＣＴＡ、Ｃ２，の第一アルコール）並びに他の長鎖アルコール類 はＴＲＩＡの活性の阻害し、このことは先に引用したＲｉｅｓ、　Ｓ、　Ｋ、： Ｃｒ１ｔｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ　ｉｎ　Ｐｌａｎｔ　５ｃｉｅｎｃｅｓ　（ １９８５）及び同じく先に引用したＪｏｎｅｓ、　Ｊ、　、　Ｗｅｒｔ、　Ｖ、 Ｆ、　ａｎｄ　Ｒｉｅｓ、　Ｓ、　Ｋ、：Ｐｌａｎｔａ　（１９７９）に述べら れているように、２種の化学物質を幼芽及び根に対し分けて施した場合にだけで なくＴＲＩＡの施用前に長鎖アルコールを施用した場合もそうであった。

リース（Ｒｉｅｓ）等の米国特許Ｎ（１４，１５０，９７０で述べられているよ うにトリ了コ〕ツタノール（ＴＲＩＡ）は、１．０ａｇ　／Ｒを施用１７て１０ 分以内にイネ（９屈肌却り、）：　Ｃｒ１ｔｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ　ｉｎ　 Ｐｌａｎｔ　５ｃｉｅｎｃｅｓ　（１９８５）　も参照されたい。）。ＴＲＩＡ を施用する１分前にイネの根または幼芽に対し実生の逆の側で０ＣＴＡを施用す ると上述の効果が阻害されるのは、先に引用したＲｉｅｓ　Ｓ。

Ｋ、　：　Ｃｒ１ｔｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ　ｉｎ　Ｐｌａｎｔ　５ｃｉｅｎ ｃｅｓ　（１９８５）及び同じく先に引用したＪｏｎｅｓ、　Ｊ、　、　Ｗｅｒ ｔ、　Ｖ、　Ｆ、　ａｎｄ　Ｒｉｅｓ、　Ｓ。

Ｋ、：　Ｐｌａｎｔａ（１９７９）で論じられている通りである。

リース（Ｒｉｅｓ）の米国特許ＮＣＬ　４．７４１．７５４に記載されているよ うにＴＲＩＡはＴＲＩＭと称される第２のメツセンジャーを迅速に誘発し、この ＴＲＩＭが植物の全体を速やかに移動して生長の促進（乾燥重量の増加）及び種 水の促進をもたらす。０ＣＴＡも第２のメツセンジャー　（ＯＣＴＡＭ）を生じ させ１．＝のＯＣＴＡＭはＴＲＩＡの活性を阻害するがＴＲＩＭの活性は阻害し ない。ＴＲＩＭを抽出するのに使用したのと同じ方法をＴＲＩＡで処理されてい ない対照植物に対し用いると、植物の成長に影響を与えない化合物が産生された 。融点、赤外線（ＩＲ）、質量分析（Ｍ　Ｓ　’）及び核磁気共鳴分析（ＮＭＲ ）により、ＴＲ４Ｍと獣脂アルキル硫酸塩（ｔａｌｌｏｗ　ａｌ）ｃｙｌ　５ｕ ｌｆａｔｅ、　ＴＡＳ　）との両者は一致するらしいという結果が得られた。し かしこれらの化合物は生物活性において顕著な相違を示した。長い間ＴＲＩＭに ついて活性成分の化学的同定及び合成を行ないえなかった。

リース（Ｒｉｅｓ）の米国特許Ｎα４．７４１．７５４に記載されているように ＴＲＩＭは、植物に対するＴＲＩＡの施用後に植物体から極く少量しか抽出及び 精製されない。

経済的なレベルで植物の生長を促進するために必要である量から考えて合成的に 得られる純物質が必要である。

目　的 したがってこの発明の目的とするところは、天然で得られるＴＲＩＭと少なくと も同等に有効であり成る場合にはより大きく有効である合成して製造された９− ベーターＬ（＋）アデノシンを用いる植物の生長促進法を提供するにある。本目 的及び他の目的は、以下の記述と図面を参照することによって当業者に明白に理 解される。

図面の簡単な説明 第１図及び第１ａ図はそれぞれ、天然産の９−ベーターＬ（＋）アデノシン（Ｔ ＲＩＭ）及び９−ベーターＤ（−）アデノシン（ＴＡＳ）の’ＨＮＭＲスペク） ル（３００ＭＨ２，ＣＤ３０Ｄ）　である。ＴＲＩＭについての類似のスペクト ルを、合成して得られた９−ベーターＬ（＋）アデノシンについても得た。

第２図は天然産のＴＲＩＭの化学的イオン化質量分析図（ＭＳ）である。類似の ＭＳスペクトルを天然産のＴＡＳ、合成して製造された９−ベーターＤ（−）ア デノシン、及び合成して製造された９−ベーターＬ（＋）アデノシンについても 得た。

第３ａ−３ｈ図は有効性を阻害する不純物としての９−ベーターＤ（−）アデノ シンを除去するようにアデノシンデアミナーゼを用いて精製した、及び同精製を 行なっていないところの天然産のＴＡＳ、天然産のＴＲＩＭ及び合成して製造さ れた９−ベーターＬ（＋）アデノシンの円偏光二色性（ＣＤ）を示している。第 ３ａ、３ｈ図は精製した９−ベーターＬ（＋）アデノシンについてのものである 。第３Ｃ図はアデノシンデアミナーゼを用いて精製後のＴＲＩＭについてのもの である。第３ｄ図はアデノシンデアミナーゼを用いて処理する以前のＴＲＩＭに ついてのものである。第３ｅ図はアデノシンデアミナーゼを用いて処理した上で 再精製した不純９−ベーターＤ（−）アデノシンについてのものである。

第３ｆ、３ｇ図はアデノシンデアミナーゼを用いる処理後及び処理前のＴＡＳに ついてのものである。

一般的な説明 この発明は植物の生長を促進する方法に係り７、同方法は合成して製造された９ −ベーターＬ（＋）アデノシンの有効量を植物に対しその生長を促進するために 施用することを特徴としてなる。用いるアデノシンは、植物の生長促進を阻害す る他の化合物を実質的に含まないものとできる。使用する量は、植物（根、幼芽 または葉）に対し表面を濡らすように施用される水溶液中で１１当り約０．Ｏｌ −１００μｇの間とするのが望ましい。

リース（Ｒｉｅｓ）の米国特許Ｎ（１４，７４１，７５４においてはＴＲＩＭが 化学的に同定されておらず、抽出するのが高価についていた。本発明はしたがっ て活性化合物を同定し、その合成法を提供するものである。米国特許Ｎα４，７ ４１，７５４に示されているように幼芽に対し１．０μｇ／ｌのＴＲＩＡを散布 された１　３−１８日齢のイネ植物の根から少量抽出された水溶性のＴＲＩＭは 非処理植物からの同様の抽出物と比較して、イネの実生の生長を施用後の２４時 間以内に約５０％、増進させた。

０ＣＴＡ及びＯＣＴＡＭ（７）両者がＴＲＩＡ（７）活性を阻害したが、ＴＲＩ Ｍの活性は阻害しなかった。ＴＲＩＭはＴＲＩ：Ａを葉に対し施用後の１分以内 にイネの根から分離され、切断された幼根に対し４ｍｍの水柱（ラテックス管− １ａｔｅｘ　ｔｕｂｉｎｇ　）により連らなるイネ機中に見出された。ＴＲＩＭ はＴＲＩＡ処理植物の切断された茎を浸漬した水からも少量回収されたが、非処 理或は表面活性剤処理の切断茎を浸漬した水中からは回収されなかった。

本明細書でＴＲＩＭ及びＴＡＳといった術語は、天然産の物質を指す。合成して 製造されたものはその旨を附記する。

合成された９−ベーターＬ（＋）アデノシンは農業上で受容できる非干渉性の様 々な担体、特に水、表面活性剤及び他の有機物質を含む水、及び／または混合物 の中に混入して用いることができる。このような担体は当業者によく知られてお り、例えば粉状粘土、ケイ酸塩、セルロース等がある。担体に混入してなる製品 は植物上に散布して施すことができる。長期間にわたって９−ベーターＬ（＋） アデノシンを放出する徐放出錠剤ないしペレットの形とするのも好ましい。米国 特許＆　４．７４１．７５４には種々の形式のものが記載されている。

９−ベーターＬ（＋）アデノシンはアントニン・ホリー　（Ａｎｔｏｎｉｎ　Ｈ ｏ１ｙ　）法（Ｎｕｃｌｅｉ　Ａｃ１ｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　Ｊ、Ｗｉｌｅｙ ＆　５ｏｎｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　Ａｒｔｉｃｌｅ　Ｎａ　９２．　ｐａｒ ｔ　１　：　５２７−５３２（１９７８）　）によって純粋な形で大量に合成し て製造可能である。Ｃｕ５ａｋ、　Ｎ、　Ｊ、　Ｈｉｃｋｍａｎ、　Ｍ、　Ｅ、 　ａｎｄ　Ｂｏｒｎ。

Ｇ、　Ｖ、　Ｒ，：Ｓｏｃ、　Ｌｏｎｄｏｎ、　Ｓｅｒ、　Ｂ　２０６　（１１ ６３）１３９−１４４　（１９７９）も、この化合物を製造する方法を記載して いる。アデノシンデアミナーゼは、イノシンを形成する９−ベーターＤ　（−） アデノシンを除去するために用いられる。

明細な説明 実施例１及び２はＴＲＩＭの単離と精製、及び９−ベーターＬ（＋）アデノシン としての精製化合物の特性化に係る。９−ベーターＬ（＋）アデノシンは合成し て得られた化合物として市販されているが、一般に不純物を除去するための精製 を必要とする。試験によって合成された純９−ベーターＬ（＋）アデノシンがＴ ＲＩＭよりも有効であることが示される。比較実施例３はイネ植物に対する合成 ９−ベーターＤ（−）アデノシン及び他の化学物質の影響を、ＴＲＩＭと対比し て示すものである。実施例４はトウモロコシの処理に係り、実施例５はキュウリ の処理に係る。

以下の実施例１−３ではイネ（ｃｖ　Ｍ　−１０１，Ｕ　ｏｆＣａｌｉｆ、　） 植物を、リース（Ｒｉｅｓ）の米国特許Ｎ（Ｌ　４．７４Ｌ　７５４に記載され ているようにして育生した。活性に関する各試験のために実生を、０．５強度の 栄養溶液（２０ｍｌ）を含む試験管（１４，５ａｏ　Ｘ　２．４ｃｍ　）中で２ ４時間、昼間温度を３０℃、夜間温度を２５°Ｃとし１６時間の光照射期間（Ｐ ＡＲ３００−３５０ｍｏｌＳ−’　ｍ−’）　ヲ与えて育成した。植物寸法によ る観察された分散を実験計画上の区分とした。全ての処理物は散布及び育成室へ の戻しの前後に、乱数表を用いて区分内がら任意抽出した。全てのデータは傾向 分析し、傾向効果に対するＦ検定（分散比検定）法或は平均分散に関するＬＳＤ 寸法を用いて比較した。

実施例１ 化学的同定を行なうための精製されたＴＲＩＭを得るために２１−２４日齢のイ ネの実生に、Ｌａｕｇｈｌｉｎ、　ＲＧ、　、　Ｍｕｎｙｏｎ、　Ｒ，Ｌ、　、 　Ｒｉｅｓ　、　Ｓ、　Ｋ、　ａｎｄ　Ｗｅｒｔ、　Ｖ、　Ｆ、、　：５ｃｉｅ ｎｃｅ　２１９　、１２１９−１２２１　（１９８３）に記載されているように コロイド系の形に調製したＴＲＩＡ　（１，０μｇ／Ａ）を散布した。調製にお いて用いた表面活性剤の濃度に合せて獣脂アルキル硫酸塩０．０１μｇ／Ａを対 照実生に散布した。１００分後に根を除去し、秤量し抽出前まで凍結しておいた 。凍結した根をメタノールを用いてソックスレー抽出器中で抽出処理（２時間で １５０ｍ１）し、抽出物を真空乾燥した。残渣を水（２０ｍｔ）に再溶解し、遠 心分離（７９００ｒｐｍ）Ｌ、上澄液を減圧下で蒸発乾固した。この抽出物の一 次精製をフラッシュカラム（３５ｃｍｘ２０ｍｍ１ＣＩａ結合シリカゲル、４０ 　μｍ）を用い、溶離液としてＭｅＯＨを用いて２ｍｌ／分の流量で実施した。

５　ｍ１部の２０の画分を収集した。イネ植物についての生物検定により画分６ −１４中にのみ活性が示された。

活性化合物ＴＲＩＭを含むこれらの画分を一緒にして、蒸発乾固した。対照（Ｔ ＡＳ）からの抽出物の同様のフラッシュカラム精製を行なって得た画分に関する イネ生物検定によっては活性が何ら示されなかった。

上記画分子ＲＩＭ及びＴＡＳを分取Ｃ＝ｓＣＮ　Ｈ２０（８０：　２０　ｖ／ｖ 、　２ｍｌ／分）上で６０°ＣにおきＨＰＬＣ法で精製した。２２．１分で溶出 した両分を再び、Ｔ’ＲＩＭ及びＴＡＳについて同じ溶剤中で上述のように精製 した。最終のＨＰＬＣ精製を同一カラム上で、ＣＨ３０ＨＨ２Ｏ（３０：　７０ 　ｖ／　Ｖ、４　ｍ１７分）を用い２５℃で行なった。１９．４分で収集した画 分を真空中で蒸発乾固した。得られた物質は実験に用いた根からのものがＴＲＩ Ｍ、対照の根からの不活性化合物がＴＡＳであると、同定された。

精製したＴＲＩＭ及びＴＡＳをＭｅＯＨから再結晶させて、一致する融点２３０ −２３４°Ｃ（Ｋｏｆｌｅｒ熱鏡台装置熱鏡窓装置正せず。）を有する無色の結 晶を得た。

再化合物は一致した１Ｈ−（第１図）及び”Ｃ−ＮＭＲスペクトルを与えた。Ｔ ＲＩＭとＴＡＳの混合’Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、個別の陽子スペクトルに重ね 合せ可能であった。一致するＣＩ及びＦＡＢＭＳ（第２図）が精製ＴＲＩＭ及び ＴＡＳに関しｍ／　ｚ　２６８（Ｍ＋Ｈ）を与え、ＮＭＲのデータと合致した。

これらの結果はＴＲＩＭを同定することを困難とした。

Ｔ　ＲＩ　Ｍ及びＴＡＳは最終的に、９−ベータ　アデノシンを含むものである と一定された４ＲＴＨ，ｒとＴＡＳ間の唯一の分析上の差異は、ＪＡＳＣＯＭｏ ｄｅｌ　Ｊ　６００分光光度計上で得られた円偏光二色性（ＣＤ）において存在 した（第３ａ−３ｈ図）。市販の９−ベーターＤ（−）アデノシンと精製したＴ ＲＩＭ及びＴＡＳとのスペクトル対比により、精製ＴＲＩＭ及び精製ＴＡＳの構 造がそれぞれ９−ベーターＤ（−）アデノシン及び９−ベーターＬ（＋）アデノ シンであることを確認した。

精製ＴＲＩＭ及び先に引用したＣｕ５ａｃｋ、　Ｎ、　Ｊ、　、　Ｈｉｃｋｍａ ｎ。

Ｍ、Ｅ、ａｎｄ　Ｂｏｒｎ、　Ｇ、Ｖ、Ｒ，：　Ｐｒｏｃ、Ｒ，Ｓｏｃ、Ｌｏｎ ｄｏｎ（１９７９）に記載の方法で製造しアデノシンデアミナーゼで処理した合 成９−ベーターＬ（＋）アデノシンは、次の第１表に示すようにイネ植物に対す る生物活性を含む多くの点で一致していた。

第　１　表 ＴＡＳ対照、９−ベーターＤ（−）アデノシン、精製ＴＲＩＭ（９−ベーターＬ （＋）アデノシン）、合成９−ベーターＤ（−）アデノシン及び合成９−ベータ ーＬ（＋）アデノシンに対する１７日齢イネ実生の応動２４時間での増大 対照（非処理）　７．００　４．４８ ＴＡＳ対照　７．２４　４．７７ 精製ＴＲＩＭ　１３．４４　５．１８ 酵母より得た９−ベーター Ｄ（−）アデノシン（注１）　７，６０　４．８４合成９−ベーターＬ（＋） アデノシン（注１）　１３．４４　５．２０ＬＳＤ　５％　１，９１　０．２８ ＬＳＤ　１％　２，５８　０．３８ （注１）：アメリカ合衆国、ミズーリ州、セント・ルイスのＳｉｇｍａ　Ｃｈｅ ｍｉｃａｌｓ製 第１表の組成物を、ＴＲＩＭを１００μｇ／！（第１表での１０倍）で葉に対し 施用するイネ生物検定によって試験したとき、ＴＲＩＭ及び９−ベーターＬ（＋ ）アデノシンは２０時間後に種水量と乾燥重量を有為に増大した。正味の乾燥重 量利得は対照、ＴＡＳ及びＴＲＩＭについてそれぞれ８．４５．６９８及び１３ ．０４■／全植物体であり、試験開始時の全植物体の乾燥重量は３８．７０■で あった。合成９−ベーターＬ（＋）アデノシンは均等する結果を生じさせた。Ｔ ＲＩＭを他の２つの処理物と対比してみたＦ値は１％のレベルで有為であった。

処理及び対照植物の異なった組についての３つの抽出型において、２１−２４日 齢植物のイネ根からの精製ＴＲＩＭの平均収量は根の乾燥重量１ｇ当り約１２４ μｇであった。ＴＡＳ　（対照）植物からのアデノシンの収量は根の乾燥重量１ ｇ当り約９６μｇであった。したがって極く少量のＴＲＩＭを生成させるのに多 数の植物を抽出処理することが必要である。合成して得られる物質は大量に製造 可能である。

実施例２ 種々の起源からの９−ベーターＬ（＋）アデノシンを、９−ベーターＤ（−）ア デノシンと選択的に反応してＤ−イノシンを生成するアデノシンデアミナーゼと 反応させることにより純度について調べた。９−ベーターＬ（斗）アデノシンは 上記酵素により影響を受けなかった。結果を第２ａ表に示す。

第２ａ表 異なった起源のアデノシンを９−ベーターＤ（−）アデノシンに対し特異的であ るアデノシンデアミナーゼで処理した後、ＨＰＬＣ分析で残留する９−ベータ− 無し　８．１６ 非処理の栴　７．６６　９４ ＴＡＳ対照　８．７８　１１０ ８ＴＲ１＋、３，６９　１００ 合成Ｌ（−１）７デノＳ、パフ’　１３．８０　１５９市販（Ｄ−）−ｙデノパ ・′”／′。　１ム、６０　ト↓：・ピ（７ｆ、／シニデアミノーーゼユー 貝に萱牛） ｆ−１Ｓに）　５　？４１ｉ　１　、９　（）′、−れは市販品が残留するｒ、 （＋＞　アゾ、′シ〕・を叩当量、′１ん゛でいうことを示し、ている、シ！し 較実施例３ 一↑“−ア２し・／へ：硫酸塩１．・１ノシ；”’　９−　・（−クーＤ−−ア →）、゛ノ＋・ンノ゛Ｓ・ド　”１”’　：）ｆ’ノシンー　、）′−パ：ｔス ポ″゛・ｔ−１−人′ツカ’ｌ　：、ム、−Ｊ’　ｙ’、；”　、ｉ”−／　’ 、：ｉ’−、’、、ｊ　’−１１’、、、酸、−、ドーー”；−３’−１）：、 、、４ｉ’ｉｖ−一水ｆ［’１％４．・１、ア、パ”２）゛・−一ら一−−二　 ＋ｌ　：、、ｉ　Ｑ９　１λ１・　ひ　−゛　パ　２・　ノ　−　３’　、　５ 　−−　’ｔ　”、へな−２−１・　リウ７′、％ｊ；ｙ、　（：、〉ビｌ＼１ ！：・ｉ−：　ｉ　ＣＯｌｉ掴、・′Ｃの濃度−τ−イＡ゛・牛物検、宅にＪｊ ）　ｉハ１丁不１′古↑、ｊ、−０ち４・１、精製’−１’　ＲＩさ・１及び１ ゛八５．１：共］１．りｌ：Ｊマトグ″７−ノ２１−分熱されるこ、−二はノー 、：ｒ）つブこ。

合成しこ得たε）−ベー・・ターＤ　（−）アデノシンは数回のイネ生物検定に おいて活性であった（乾燥重量を増加させた。）。しかし本アデノシシ・ば全３ 種を同一−試験で比較したとき精製したＴ　ＲＩ　Ｍ　（１、Ｏｆ１ｇ／ｊｌり はど、或は同Ｔ　Ｒｒ　Ｍはと低濃度で、生長を増大させなかった。ＴＡＳ（対 照植物）からの９−ベーター１）（−）ア゛デノ′シソが第３表に示すようにＴ ＲＩＭの製産の１００倍施用し、たとさ・にさえ有為の活性を示さず１、合Ｉ戊 ９−ベータ〜］〕（）アデノシンが決つし“ｒＴＲＨＭはと活性７′はなかった ことから１，１．。結果は疑しい４．′ム施例２ノ）■・判るよ−“ｌ（こ合成 ０−ベーターＤ（−）７・ゲ′：／゛＞’　７．、、−は、い＜Ｃ１，かの９− ベータ〜Ｌ　（−Ｌ）　？デ）　ミ、１′鏡’ａ異性体を含んでいることを見出 し八。

第　３　表 事行則１７ｐ八：３．９−＝＝ベーターＩ）　（−＞　７デノシ′ン及びＴＲＮ 　ＭＴ？処Ｐ１盪１．た１５Ｆ１齢イネＣチモ生の生長ＴＲＴｋ’ｉ　１０　８ ．４４　（ａ）（ａ）１％しベルＣ”Ｋ為である他の処理噌・Ｉ比１．Ｔ：Ｏ） Ｆ値（Ｆ＝１２．４）ＴＲＩＭと均等した結果は本試験において、合成して得た ９−ベーターＬ（＋）アデノシンを用いても達成される。第４表は、アデノシン デアミナーゼを用いて処理したことで実質的に純粋である９−ベーターＬ（＋） アゾ、′ジンを用い、それどＴ　ＲＩ　Ｍとを比較したイネ実生に対する効果を 示している。

第４表 異なった濃度の合成９−ベーターＬ（＋）アデノシンとＴＲＩＭに対する１７日 齢イネ実生の応動性の比較。

試験結果はそれぞれ５回反復した２つの実験の平均値で示す。時間零での平均乾 燥重量はＴＲＩＭについては３３．５５■、合成９−ベーターＬ（＋）アデノシ ンについては３３．３６■であった。

１００．００　１１．３４　６３　９．０８　５５結果は、ＩＩ！当り約０．０ ００１から１．０μｇの間の濃度で合成した純アデノシンがＴＲＩＭよりもずっ と効果的であることを明白に示している。

実施例４ 第５表はＬ（＋）アデノシンに対するｒ３７８０Ｊトウモロコシの応動性を示し ており、アデノシンは播種後１週間目に施用し、温室で６日間育生した後に収穫 したものについてである。

第　５　表 この試験は対照と対比しての９−ベーターＬ（＋）アデノシンの使用、特に極く 低濃度での使用による有為の増大を示している。

実施例５ 第６表はキュウリを温室内で２種の光強度で育成した場合についてのしく＋）ア デノシン２回施用に対するキュウリの応動性を示しており、アデノシンと対照は ６モルの尿素と共に散布した。アデノシンは細菌性分解を阻止するために尿素中 に溶解した。播種後１２日目と１７日目に散布を行ない、２２日目に幼芽を収穫 した。

第　６　表 光強度（モル／イ／秒） この試験は、対照と対比しての９−ベーターＬ　（＋）アデノシンの使用による 有為の増大を示している。種々の公知の抗菌剤を、それが生長の促進に対し干渉 しない限り組成中に含ませて使用できる。

同様にしてダイズ、コムギ、モロコシ及びオオムギ、並びに他の穀類を約０．０ ｍ−１００μｇ　／１２の９−ベーターＬ（＋）アデノシンで処理して、乾燥重 量の増大を生じさせることができる。

ＴＲＩＡは細胞膜に作用して少量のＴ　ＲＩ　Ｍを生じさせる極めて親油性の化 合物であり、ＴＲＩＭは迅速に植物体中の全体に移動して一連の代謝現象をひき 起し、それからして観察された水溶性タンパク質、還元糖及び乾燥重量の増大が 結果することを、見出している。９−ベーターＬ（＋）アデノシンが未だ対照植 物中に見出されておらず文献に報告されてもいないことから、植物膜上に存在す るアデノシンは開鎖のリボース部分を含んでいると信じられる。これは膜結合酵 素に作用するＴＲＩＡにより９−ベーターＬ（＋）アデノシンに、そしてＴＲＩ Ａの不存在下では９−ベーターＤ　（−）アデノシンに、変化しうる。先に引用 したＲｉｅｓ、　Ｓ、　Ｋ、　：　Ｃｒ１ｔｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ　ｉｎ　 Ｐｌａｎｔ　５ｃｉｅｎｃｅｓ　（１９８５）において述べられているように植 物の反対側の部分に施用される他の長鎖アルコールも第２のメツセンジャーを生 じさせ、この第２のメツセンジャーが１分以内に９−ベーターＬ（＋）アデノシ ンの形成を停止させる。

したがってＴＲＩＡによつ”Ｃ誘発される９−ベーターアデノシンの９−ベータ ーＬ（＋）アデノシ〉・への鏡像異性体化と他の長鎖アルコールによる同活性の 阻害とは、植物中に以前知られていなかった生長調整系が存在していることを示 している。

本発明は１ニーカー当り生産される植物の量を大きく増大さぜる方法を提供する ものである。９−ベーターＬ（＋）アデノシンが植物中で活性であるといった事 実は、先に引用したＣｕ５ａｃｋ　６ｔ、　ａｔ及びＪｕｒｏｖｃｉｃｋ　ｅｔ 　ａｌ　：Ｆｅｂｓ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　１８　、　２７４−２７６　（１９７１ ）によって示されているように本化合物がホ乳動物及び細菌細胞中で不活性であ るといった事実からみて、予測されなかった。

全ての種類の植物を本発明の方法によって処理できる。処理の範囲は少なくとも ＴＲＩＡ及びＴＲＩＭ同様に広い。

本明細舎で用いて来た術語「合成」或は「合成した」（５ｙｎｔｈｅｔｉｃ）は 、９−ベーターＬ（＋）アデノシンが植物中での「生体内（インビボ）」プロセ スに対抗する意義での「管内（インビトロ）」プロセスで生産されることを意味 する。本プロセスないし方法は純粋に化学的な合成である場合も、特定の工程を 細胞により遂行させる生細胞を包含する合成である場合も含む。

これまで述べて来たところは本発明を例示的に説明するためだけのものであり、 本発明は以下に掲げる請求の範囲によってのみ限定されるべきである。

ＦＩＧ、　１ ＦＩＧ、　１ａ 国際調査報告

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. １．合成して製造された９−ベータ−Ｌ（＋）アデノシンを植物の生長を促進す るのに有効な量、植物に対し施用することを特徴としてなる植物の生長促進法。
2. ２．９−ベータ−Ｌ（＋）アデノシンが実質的に純粋なものである請求項１の生 長促進法。
3. ３．植物がイネの実生である請求項１の生長促進法。
4. ４．９−ベータ−Ｌ（＋）アデノシンを水溶液として施用する請求項１の生長促 進法。
5. ５．水溶液が１リツトル当り約０．００１から１００マイクログラムの９−ベー タ−Ｌ（＋）アデノシンを含むものである請求項４の生長促進法。
6. ６．９−ベータ−Ｌ（＋）アデノシンを、農業上で許容される担体と組合せて用 いる請求項１の生長促進法。
7. ７．抗菌剤を混合してあるアデノシンを用いる請求項１の生長促進法。