JPH04505768A

JPH04505768A - サイトメガロウイルス感染の予防および治療のための方法および組成物

Info

Publication number: JPH04505768A
Application number: JP3506183A
Authority: JP
Inventors: スキーアー，デイヴィッド・アイ
Original assignee: ヴィラケム・インコーポレーテッド
Priority date: 1990-03-06
Filing date: 1991-03-06
Publication date: 1992-10-08
Also published as: EP0471057A4; WO1991013549A1; US6080746A; CA2053849A1; EP0471057A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】サイトメガロウィルス感染の予防および治療のための方法および組成物光盟Ω技歪盆驚本発明は、補乳動物でのサイトメガロウィルス（ＣＭＶ）感染の予防法および治療法に関し、更に詳しくは、サイトメガロウィルス感染の予防法および治療法でのプリンヌクレオシドおよびピリミジンヌクレオシドの炭素環状類似体の使用に関する。

サイトメガロウィルス感染は、（臓器移植受容者の場合のような）免疫抑制の結果としてかまたは後天性免疫不全症候群の結果として細胞媒介性免疫の抑制に苦しむ（新生児を含む）多数の患者で観察された。この種の感染は主に、サイトメガロウィルス（ＣＭＶ）によって引起こされる眼の内部の感染、例えば脈絡網膜炎であるが、このウィルスによって引起こされる他の臓器の感染、例えば肝炎、食道炎、胃炎、肺炎または脳炎も観察された。

多数の抗ウィルス薬、例えばアサイクロヴイア（ａｃｙｃ　Ｉ　ｏｖｉ　ｒ）、 α−インターフェロンおよびビダラビンは周知であるが、そして少なくともアサイクロヴイアは広範囲に好ましいとされ且つ播種性ヘルペスの単純ウィルス感染の治療に用いられるが、ローズカン（Ｒｏｓｅｃａｎ）らのＡｍ、Ｊ。

Ｏｔｈａ１ｍｏ！、　、１０１巻、４０５〜４１８頁（１９８６）により、これらの抗ウィルス薬を用いてサイトメガロウィルス網膜炎を治療する試みが不成功であったことが報告された。広範囲の抗生物質、コルチコステロイドおよび抗真菌性薬も、この疾患に対する治療効果がないことが報告された。抗ウィルス薬である非環式ヌクレオシドのガンシクロヴイア（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ）（ジヒドロキシプロポキシメチルグアニン）（ＤＨＰＧ）は、ＣＭｖＩＩ／４！ｌ！炎に対して有効であることが報告されたが、その有効性は限定されたものであり且つ用量制限毒性と関係している。その活性はデクラーク（Ｄｅｃｌｅｒｃｑ）ら、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ　Ｒｅ５ｅｒｃｈ、３巻、１７〜２４頁（１９８３）および同４巻、１１９〜１３３頁（１９８４）に記載されている。

一般的には、アサイクロヴイアはＣＭＶ感染に対する予防薬として用いられてきたが、慢性の全身性ＣＭＶ感染に対して並びにＣＭＶ網膜炎に対して効果がないことが報告された。

穴明Ω！幻本発明は、ヒトなどの補乳動物でのＣＭＶｒｆＡ染の予防および治療のための組成物および方法であって、抗ウイルス有効量の、式［式中、ＲおよびＲ４は、独立して水素、ヒドロキシル、アシルオキシであるかまたは互いに結合しており；Ｒ２は、水素、アシルオキシおよびヒドロキシルから成る群より選択さ九：Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、アシルオキシおよび０几６から成る群より選択され；Ｒは、水素、Ｃ１，６アルカノイル基およびアロイル基から成る群より選択され；Ｒは、水素、Ｃ１，６アルカノイル基およびアロイル基から成る群より選択され；Ｒ７は、Ｒ８が水素である場合、二重結合を介して６位の炭素に結合した酸素および硫黄から成る群より選択され：またはＲ８が６位の炭素に結合して１位の窒素および６位の炭素間に１個の二重結合を形成している場合、ハロゲン、アミノ基、アルキルチオ基から成る群より選択され；Ｙは、ＣＨおよび窒素（Ｎ）から成る群より選択され：Ｒ９は、水素およびアミノから成る群より選択され；Ｒ１０は、Ｒ１１が水素である場合は、二重結合を介して４位の炭素に結合した酸素；およびＲ１１が４位の炭素に結合して３位の窒素および４位の炭素間に１個の二重結合を形成している場合は、ＮＲ１２Ｒ１３；から成る群より選択され：Ｒ１２およびＲ１３は、独立して水素または０１〜６アルキル基であり；Ｘｌは、水素、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）、０１〜６アルキル基およびＮ）（Ｒ”（但し、Ｒ１４は０１〜６アルキル基であるンから成る群より選択され；Ｒ１５は、水素、０１〜６アルキル基またはハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）から成る群より選択される］から成る群より選択される化合物を特徴とする前記の組成物および方法に関する。

叱盟Ω紅岨望戊盟本発明は、サイトメガロウィルスによって引起こされる感染、特に眼の硝子体内（ｉｎｔｒａｖｉｔｒｅａｌ）感染の予防および治療のための新規な方法および組成物を提供する。特に、本発明は、ヌクレオシドのある種の炭素環状類似体を特徴とする方法および組成物を用いるＣＭＶ感染の治療法および予防法に関する。

「ヌクレオシドの炭素環状類似体」という用語は、類似したヌクレオシドのテトラヒドロフラン環の代わりにシクロペンタン環を有する化合物を意味する。テトラヒドロフラン残基の代わりにシクロペンテンを置換すると、分解酵素の作用に対するヌクレオシドの炭素環状類似体の耐性を増加させると考えられるし、更に、それらの生物活動の選択性を増大させることができる。

米国特許第４，３９６，６２３号明細書［シーソ（Ｓｈｅａｌｙ）ら］に、ＤＮＡウィルス、例えば単純庖疹ウィルスによって引起こされる種々のヒトおよび動物疾患の治療のためのウラシルヌクレオシドのある種の炭素環状類似体の使用が言及されている。米国特許第４，１７７．３４８号明細書（シーソ、ら）および同第４，２３２，１５４号明細書（シーりら）に、シトシンヌクレオシドの炭素環状類似体並びにＤＮＡウィルス、例えば単純庖疹ウィルス１型およびワクシニアウィルスと、ＲＮＡウィルス、例えばライノウィルスＩＡ型およびインフルエンザウィルスに対するそれらの活性が言及されている。米国特許第４．５４３゜２５５号明細書（シーりら）および同第４．７２８，７３６号明細書（シーソら）に、プリン２′−デオキシリボフラノシドおよびリボフラノシドそれぞれの炭素環状類似体並びに単純庖疹ウィルス１型および２型によって例示されるＤＮＡウィルスに対するそれらの活性が言及されている。

［式中、ＲおよびＲ４は、独立して水素、ヒドロキシル、アシルオキシであるかまたは互いに結合しており（ＲおよびＲ４が互いに結合する場合２式ＡおよびＢにおいてＲ１およびＲ４を結合しているシクロペンタン環の炭素間に１ｍの二重結合が形成される）；Ｒ２は、水素、アシルオキシおよびヒドロキシルから成る群より選択され；Ｒは、水素、ヒドロキシル、アシルオキシおよびＯＲ６から成る群より選択され；Ｒ５は、水素、Ｃアルカノイル基およびアロイル基から成る群より選択１〜６され；Ｒ６は、水素、Ｃアルカノイル基およびアロイル基から成る群より選択１〜６され；Ｒ７は、Ｒ８が水素である場合、二重結合を介して６位の炭素に結合した酸素および硫黄から成る群より選択され：またはＲ８が６位の炭素に結合して１位の窒素および６位の炭素間に１個の二重結合を形成している場合、ハロゲン、アミノ基、アルキルチオ基から成る群より選択され；Ｙは、ＣＨおよび窒素（Ｎ）から成る群より選択され；Ｒ９は、水素およびアミノから成る群より選択され；Ｒ１０は、Ｒ１１が水素である場合は、二重結合を介して４位の炭素に結合した酸素；およびＲ１１が４位の炭素に結合して３位の窒素および４位の炭素間に１個の二重結合を形成している場合は、ＮＲ１２Ｒ１３；から成る群より選択され：Ｒ１２およびＲ１３は、独立して水素または０１〜６アルキル基であり；Ｘｌは、水素、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）、０１〜６アルキル基およびＮＨＲ”（但し、Ｒ１４はＣ１〜６アルキル基である）から成る群より選択され；Ｒ１５は、水素、Ｃアルキル基またはハロゲン（フッ素、塩素、臭素また１〜６はヨウ素など）から成る群より選択されるコを有する化合物を特徴とする。

前記の組成物および方法は、ＣＭＶ感染を治療することまたは予防することにおいて有用であるのに加えて、意外にも、現在利用可能な薬剤および方法よりも有益である。第一に、本発明の炭素環状類似体が宿主ｍ胞ＤＮＡに有意に取込まれることは観察されなかった３本発明の方法および組成物は有効性が高く、宿主細胞ＤＮＡに取込まれ且つ染色体損傷を引起こすことがある化合物を用いる従来の方法および組成物よりも有益である。更に、本発明の方法および組成物は血漿由来ではないので、それらは感染および感染源が血清に運ばれる危険をもたらすことがない。

本発明の更に好ましい方法および組成物では、抗ウイルス有効量の式■〜ＸＩを有する化合物が用いられ、式中、Ｙは、ＮまたはＣＨであり、式！、式■、式Ｖ、式■および式■のＸは、水素、アミン基、アルキルアミノ基、アルコキシ基またはアルキルチオ基であり、そして式■、式■、式■、式■、式Ｘおよび式ＸＴのＸは酸素または硫黄である。

式Ｉ　式■　弐■ 式■　式Ｖ　式■ 式■　式■　式■ 上記の式Ｔ−ＸＩの全部の構造において、Ｘは前記に記載した構造ＡのＲ７部分である。

式Ｉ〜ＸＩで表わされる化合物は、種々のヌクレオシドの炭素環状類似体である。

式Ｉおよび式■：２−アミノ−６−置換プリンのりボフラノシドの炭素環状類似体：式■および式Ｉｖ：２−アミノ−６−ｉ！ｉ！換−８−アザプリンのりボフラノシドの炭素環状Ｍ鎖体：式Ｖおよび式■：２−アミノ−６−置換プリンの２′−デオキシリボフラノシドの炭素環状類似体：式■および式■：２−アミノ−６−置換−８−アザプリンの２′−デオキシリボフラノシドの炭素環状Ｍ似＃：式■および式Ｘ（ＹがＣＨである）：２−アミノ−６−置換プリンの３′−デオキシリボフラノシドの炭素環状類似体：式■および式Ｘ（ＹがＮである）：２−アミノ−６−置換アザ１リンの３′−デオキシリボフラノシドの炭素環状類似体：式ＸＩ：２−アミノ−６−置換プリン２′、３′〜ジデヒドロ−２′、３′−ジデオキシヌクレオシドの炭素環状Ｗ４４位。

最も好ましくは、本発明の方法および組成物において有用な炭素環状類似体は、２゛−デオキシグアノシン（ｒ２′−ＣｄＧＪ　）、すなわち、ＸがＯである式 ■を有する化合物である。

更に、極めて好ましいのは、２′−ＣｄＧのプロドラッグ、すなわち、生体内で２’−ＣｄＧに代謝されるこれらの薬剤であり、例えば式Ａを有し、式中、Ｒ８が水素である場合、二重結合を介して６位の炭素に結合した酸素でありまたはＲ８が６位の炭素に結合して１位の窒素および６位の炭素間に１個の二重結合を形成している場合、Ｒは、アルコキシ（好ましくは、Ｃ１〜６アルコキシ）であり、そしてＲ９はアミノであるこれらの化合物である。

好ましくは、本発明にしたがって、前記の化合物をＣＭＶ感染に対して用い、更に詳しくは、前記の好ましい化合物、最も好ましくは２′−ＣｄＧをＣＭＶ感染に対する本発明の方法および組成物で用いる。

本発明の治療法で用いられる化合物は、既知の且つ容易に入手可能な物質から周知の通常の方法によって合成することができる。

例えば、式Ｉ〜■で表わされるヌクレオシドの炭素環状類似体の合成は、下記の出版物に記載されている。

ワイ・エフ・シーソ（Ｙ、Ｆ、５ｈｅａｌｙ）　、ジェイ・ディー・クレイトン（Ｊ、Ｄ、Ｃ１ａｙｔｏｎ）　、ジー・アーネット（Ｇ、Ａｒｎｅｔｔ）およびダブリュー・エム・シャツ７（Ｗ、Ｍ、５ｈａｎｎｏｎ）、「２−アミノ−６− 置換プリンおよび２−アミノ−６−置換−８−アザプリンのりボフラノシドの炭素Ｎ状類似体の合成並びに抗ウイルス性の評価（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄＡｎｔｉｖｉｒａｌ　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣａｒｂｏｃｙｃｌｉｃＡｎａｌｏｇｕｅｓ　ｏｆ　Ｒｔｂｏｆｕｒａｎｏｓｆｄｅｓ　ｏｆ　２−Ａｍ１ｎｏ−６−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ−ｐｕｒｉｎｅｓ　ａｎｄ　ｏｆ　２−Ａｍ１ｎｏ−６−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ−８−Ａｚａｐｕｒｉｎｅｓ）Ｊ、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒ　、２７巻、６７０〜７４頁（１９８４ン；ワイ・エフ・シーソおよびジエイ・ディー・クレイトン、米国特許第４，７２８．７３６号明細書、１９８８年３月１日ニゲアノシンの炭素環状類似体の合成は、ワイ・エフ・シーりおよびジエイ・ディー・クレイトン、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ、６２巻、１４３２〜３４頁（１９７３＋に記載されている。

式Ｖ〜■で表わされるヌクレオシドの炭素環状類似体の合成は、下記の出版物に記載されている。

ワイ・エフ・シーソ、シー・エイ・オーデル（Ｃ，Ａ、Ｏ′Ｄｅｌ　１）＝ダブリニー・エム・シャノンおよびジー・アーネット、「２−アミノ−６−置換プリンおよび２−アミノ−６−置換−８−アザプリンの２′−デオキシリボフラノシドの炭素環状類似体の合成並びに抗ウィルス活性（Ｓｙ’ｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄＡｎｔｉｖｉｒａｌ　Ａｃｔｊｖｉｔｙ　ｏｆ　ＣａｒｂｏｃｙｃｌｉｃＡｎａＪｏｇｕｅｓ　ｏｆ　２′−Ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｆｕｒａｎｏｓｉｄｅｓｏｆ　２−Ａｍ１ｎｏ−６−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ−ｐｕｒｉｎｅｓ　ａｎｄｏｆ　２−Ａｍ１ｎｏ−６−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ−８−ａｚａ−ｐｕｒｉｎｅｓ）」、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒ　、２７巻、１４１６〜２１頁（１９８４）；ワイ・エフ・シー９およびシー・エイ・オーデル、米国特許第４．５４３，２５５号明細書、１９８５年９月２４日；式■および式Ｘで表わされるヌクレオシドの炭素環状類似体の合成は、ワイ・エフ・シー９、シー・エイ・オーデル、およびジー・アーネットによる論文である「２− アミノ−６−置換プリン３′−デオキシリボフラノシドの炭素環状類似体の合成並びに抗ウイルス性の評価（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄＡｎｔｉｖｉｒａｌ　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣａｒｂｏｃｙｃｌｃＡｎａｌｏｇｕｅｓ　ｏｆ　２−Ａｍ１ｎｏ−６−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ−ｐｕｒｉｎｅ　３′−Ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｆｕｒａｎｏｓｉｄｅｓ）」、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒ　、３０巻、１０９０〜９４頁（１９８７）に記載されている。

２’　、３′−ジデヒドロ−２′、３′−ジデオキシグアノシドの炭素環状類似体［カルボヴイア（ｃａｒｂｏｖｉ　ｒ）］の合成は、アール・ヴインス（Ｒ。

Ｖｉｎｃｅ）らの「第二回抗ウイルス研究国際会議（ＳｅｃｏｎｄＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｎ　Ａｎｔｉ−ｖｉｒａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）、１９８８年、バージニア州、ウィリアムスバーグ、」抄録、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、９巻、１２０頁（１９８８）に報告された。

ウラシルヌクレオシドの炭素環状類似体の合成は、下記の出版物に記載されている。

ワイ・エフ・シーりおよびシー・エイ・オーデル、「ウラシルヌクレオシドの炭素環状類似体の合成（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅＣａｒｂｏｃｙｃｌｉｃ　Ａｎａｌｏｇｓ　ｏｆ　ＵｒａｃＬＩＮｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ）」、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｔｅｒｏ−ｃ　ｃｌｔｃ　Ｃｈｅｍｔｓｔｒ　、１３巻、１０１５〜２０頁（１９７６）；ワイ・エフ・シーりおよびシー・エイ・オーデル、「アルコキシアクリロイル尿素の２．４　（ＩＨ，３Ｈ）ピリミジンジオンへの酸触媒環化（Ａｃｉｄ−Ｃａｔａｌｙｚｅｄ　Ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｌｋｏｘｙ　−ａｃｒｙｌｏｙｌｕｒｅａｓ　ｔｏ　２．４（ＩＨ，３Ｈ）ｐｙｒｉｍｉｄ−ｉｎｅｄｉｏｎｅｓ）」、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｔｅｒ、ｏｃ　ｃｌｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒ　、１３巻、１０４１〜４７頁（１９７６）；ワイ・エフ・シー９、シー・エイ・オーデル、ダブりニー・エム・シャノンおよびジー・アーネット、「５−置換ウラシルヌクレオシドの炭素環状類似体（Ｃａｒｂｏｃｙｃｌｉｃ　Ａｎａｌｏｇｕｅｓ　ｏｆ　５−３ｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ　ＵｒａｃＬＩ　Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）：合成および抗ウィルス活性（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ＡｎｔｉｖｉｒａｌＡｃｔｉｖｉｔｙ）Ｊ、Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、、２６巻、１５６〜６５頁（１９８３）；米国特許第４，３９６，６２３号明細書（ワイ・エフ・シー９、シー・エイ・オーデルおよびダブりニー・エム・シャノン）：シトシンヌクレオシドの炭素環状類似体の合成は、下記の出版物に記載されている。

米国特許第７．１７７．３４８号明細書および同第４，２３２．１５４号明細書（ワイ・エフ・シー９およびシー・エイ・オーデル）：ワイ・エフ・シーりおよびシー・エイ・オーデル、「シチジンの炭素環状類似体、合成および抗履瘍活性（Ｔｈｅ　Ｃａｒｂｏｃｙｃｌｉｃ　Ａｎａｌｏｇｏｆ　Ｃｙｔｉｄｉｎｅ、５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　Ａｎｔｉ−ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ）」、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＨｅｔｅｒｏｃ　ｃｌｉｃ　Ｃｈｅｍｏ、１３巻、１３５３〜５４頁（１９７５）；ワイ・エフ・シーりおよびシー・エイ・オーデル、Ｊ、ｏｆ　Ｈｅｔｅｒｏ−ｃ　ｃｌｉｃ　Ｃｈｅｍ、、１７巻、３５３〜５８頁（１９８０）：チミンヌクレオシドの炭素環状類似体の合成は、下記の出版物に記載されている。

ワイ・エフ・シー９、シー・エイ・オーデルおよびエム・シー・トープ（Ｍ。

Ｃ，Ｔｈｏｒｐｅ）、「チミンヌクレオシドの炭素環状類似体および関連した１ −置換チミン（Ｃａｒｂｏｃｙｃｌｉｃ　Ａｎａｌｏｇｓ　ｏｆＴｈｙｍｉｎｅ　Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ　ａｎｄ　Ｒｅ１ａｔｅｄ　１−８ｕｂｓ、ｔｉ　ｔｕｔｅｄ　Ｔｈｙｍｉｎｅ）Ｊ　Ｊ、Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃ　Ｉ　ｉｃＣｈｅｍ、、１８巻、３８３〜８９頁（１９８１）；通常、硝子体内注射、（ＣＭＶに誘発される角結膜炎などの限局性感染の場合）局所、経口または非経口のいずれかであることができる投与経路に応じて、その化合物は固体、半固体、液体、油、摂取可能なカプセル若しくはリポソームの形態またはマイクロカプセル化した網形であってもよいし、元の化合物として存在するかまたは適当な薬剤担体、特に水および規定生理食塩水などとの若しくは担体不含の薬学的に容認可能な塩の形態であってもよい。

本発明にしたがって用いて予防法および治療法を提供する化合物の抗ウイルス有効投与量は、当該技術分野で既知の方法によって決定することができる。水または規定生理食塩水中１００μｇ／ｋｇの２′−ＣｄＧを４８時間毎に１週間硝子体内に注射される場合は十分に許容され且つ抗ウイルス有効性であるので、−日当り１０μｇ／ｋｇと同程度に少ないまたは１０ｍｇ／ｋｇと同程度に多い用量を、投与方式に応じておよび予防法または治療法にｔｌＩましいかということに応じて用いることができる。有効量は、特効性網形でも投与することができる。

因旌医ラセミ体の２’　−ＣｄＧ　（±２’−ＣｄＧ）および式Ｖの、式中Ｘがアミンである構造を有する２、６−ジアミツプリンー２′−デオキシリボフラノシドのラセミ体の炭素環状類似体く土Ｃ−２，６′−ＤＡＰｄＲ）を、シーりらの米国特許第４．５４３．２５５号明細書に記載されたように調製し、そしてヒトの肺の二倍体胚細胞（ＭＲＣ５）で複製するヒトサイトメガロウィルス（ＡＤ１６９菌株）の阻害についてプラーク減少検定法によって評価しな、更に、先行技術薬剤であるＡｒａ−Ａおよびガンシクロヴイア（ＤＨＰＧ）を同一条件下で評価した。

それぞれの場合において、薬剤処理は感染後０時間で開始した。結果を下記の表１に示す。

虹採取時のＣＰＥ　薬剤細胞毒性　ＣＭＶ収量３２μｓ／ｍｌ　ｌ性　− １０１００（ｉかに毒性　０３．２　１００　＠めて僅かに毒性　１．０１、　Ｏ９５０３，６０、３２２００４，５０、１００５，００、０３２００５，４０（対照ウィルス）５．５十〇−２，６′−ＤＡＰｄＲ３２μｇ／ｍｌ　ｌ性　− ｉｏ　ｉｏｏ　ｍかに毒性　０３．２　１００　傷めて僅かに毒性　０１、０　９５　０　３．４０、３２　２５　０　４．００（対照ウィルス）５．５採取時のＣＰＥ　薬剤細胞毒性　ＣＭＶ収量１１００ｕ／ｍ１　１００　部分毒性　０ＣＰＥ識別可能３２　＞９５　ｆｆｌかに毒性　０．６１０　９０　０　３、４０、３２　０　０　５．２０（対照ウィルス）５．５ＤＨＰＧ３２０μｇ／ｍｌ　１００　僅かに毒性　０１０　９５　０　１、０レス　。

ＩＭＪ胞変性効果：顕微鏡で見られる宿主の形態的変化２５０％の阻害に達する細胞培養物阻害用量レス　ム　（：、　−（ｍｇ／ｍｌ） ±２′−ＣｄＧ　０．１１＋Ｃ−２，６′−ＤＡＰｃｉＲ０，０５Ａｒａ−Ａ１．３３ＤＨＰＧ　０．０７１ウイルス複製を５０％阻害するのに必要とされる半数阻害濃度更に、２，６− ジアミツプリンーリボフラノシド（ＤＡＲＰ＞のラセミ体炭素環状類似体は、同 −条件下で試験された場合、Ｍ■Ｃ５ｏが８．７μｇ／ｍｌであり治療係数が４０であることが見出され、そしてラセミ体炭素環状類似体である２−アミノ−６ −メドキシプリンー２′−デオキシリボフラノシド（ＡＭＰｄＲ）では、同一条件下で試験された場合、ＭＩＣ５ｏは０．９μｇ／ｍ１未満であり、治療係数は１０５を上回った。Ｄ−２′−デオキシグアノシン−５′−０−吉草酸塩は、ヒトＣＭＶに対するプラーク減少検定法で、０．９μｓ／ｍｌのＥＤ５ｏを示し、ラセミ体２′〜デオキシグアノシン−３′、５′−〇−ジイソブチレートは３．９μｇ／ｍｌのＥＤ５ｏを示した。

下記の表２に示すように、ラセミ体の２’　−ＣｄＧおよびＤＨＰＧの混合物を評価することによって同様の結果が得られた。

±１ＭＲＣ５細胞でのＨＣＭＶ複製に対する（±）−２′−ＣｄＧおよびＤＨＰＧによる併用処理　の効果（ウィルス収量減少検定法）ＣＭＶＫ１１ノ減少（１００１ｏＰＦＬＩ／１４１）　”（±）−２′−ＣｄＧ　ＤＨＰＧ濃度（マイクロモル）Ｓ　々ｉ　し　、、。

０　０　０．５　１．３　１．８０．１　０．１　０．５　１．３　１．９０．３２　０．５　０．７　１．１　２．１１．０　０．６　０．７　１．７　２．１３．２　１．０　１．２　２．０　２．７下記の結果は同−条件下でラセミ体２′−ＣｄＧおよびパバベリンの混合物を試験して得られた。

ＭＲＣ５４Ｂ胞でのＨＣＭＶ複製に対するパパベリンおよび（±）−２′−ＣｄＧによる併用処理８の効果（ウィルス収量減少検定法）ＣＭＶ収量の減少（１０ｇ１ｏＰＦＵ／ＭＬ）　ｂ（±）−２′−ＣｄＧ　パパベリン濃度（マイクロモル）０　０　０　０．２　０．６　１．４０．３２　０．７　１．１　１．７　２．７　４．９１．０　１．０　２．０　２．１　３．９　４．６３．２　１．７　２．２　３．１　４．３　５．２１０．０　２．７　２．９　３．８　４．６　４．６８薬剤処理はウィルス吸着時間（１１／２時間）俊速やかに開始した。

ｂＰＦＵ：プラーク形成単位因旌泗２２′−ＣｄＧのＤおよびＬｆｌｌ＠異性体を、セフリスト（Ｓｅｃｒｆｓｔ）らのＪ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、　、３０巻、７４６〜９頁（１９８７）に記載の酵素法によってラセミ体Ｃ−２，６−ＤＡＰｄＲから調製した。ラセミ体Ｃ−２，６ −ＤＡＰｄＲに、リンａ緩衝液（ｐＨ７，４）中０．５単位／マイクロモルの商業的に入手可能なアデノシンデアミナーゼを２５℃±２℃で１．５〜２時間作用させ、次に、その溶液を沸騰させて酵素を失活させ、そして濃縮した後、Ｄ−２ ′−ＣｄＧを溶液から晶出させた。（２分の１のラセミ体Ｃ−２，６−ＤＡＰｄＲからの理論収量基準で）収率は７０〜８０％であった。残りの未変換Ｃ−２，６−ＤＡＰｄＲをそのｒ液から単離し且つアデノシンデアミナーゼの濃度を４単位／マイクロモルまで増加させ、温度を３７℃まで上昇させ、そして反応時間を３日間に延長することによって同様にＬ−２′−ＣｄＧに変換させた。

ＭＲＣ５細胞単層培養物でのＣＭＶ収量に対するラセミ体の２′−ＣｄＧおよびＤ−２′−ＣｄＧの有効性をプラーク検定法によって測定し、その結果を表４および表５に示した。

ＭＲＣ５細胞の細胞単層培養物でのＣＭＶ収量に対する（±）−２′−ＣｄＧの炭素環状類似体およびデオキシグアノシン（±）−２′−ＣｄＧの効果（＋）− ２′−ＣｄＧａ採取時ノＣｄＧ　ニョＣＭＶ［ｊｌ、　薬剤Ｉｉ１１ｍｌＮ’！１０　１００　０　１ｍかに毒性３．２　１００　１．０　極めて僅かに毒性０、０３２　０　５．４　００（対照ウィルス）　−５，５− 飢ＭＲＣ５ｍ胞の細胞単層培養物でのＣＭＶ収量に対するＤ−２’　−ＣｄＧの炭素環状類似体およびデオキシグアノシンＤ−２′−ＣｄＧの効果Ｄ−ＣｄＧ　ウィルス採取時の　ＣＭＶ収量　薬剤細胞毒性Ｄ−２′−ＣｄＧによ　（ＩＯｇｌｏ）　（全体の形態）１００　５０　０　僅かに毒性３２　５０　０　極めて１かに毒性１０　２５　２　刈０　１．３　０３．２　１０　ｇ、４ｘｌＯ２２，９０１，０１０５，４刈０３３．７　ＱＯ，３２０１，４ｘ１０’　４．１　００．１　０　３．８ｘ１０’　４．６　００（対照ウィルス）−１，ｌＸ１（１５５，１−８薬剤処理はウィルス吸着時ｒＲ（１１／２時間）俊速やかに開始した。

Ｄ−２′−ＣｄＧのＭＩＣ５ｏ（く０．０２９μｇ／ｍｌ）は、ＭＲＣ５細胞の同一条件下で測定されたＤＬ−２’−ＣｄＧのＭＩＣ５ｏ（０，０６９μｇ／ｍｌ）の約２分の１（または未満）であった、ＥＤＳｏ値（ＣＭＶに対して５０％の抗ウイルス有効性を生じる半数用量）は、ヒト包皮繊維芽細胞において、Ｄ− ２′−ＣｄＧについては０．０６μｇ／ｍｌおよびＤＨＰＧについては０．２０ μｇ／ｍｌであった。

客旌泗旦二ニー・シーラント産白ウサギで、ヒトＣＭＶを硝子体内接種後３〜４日以内に感染の再現性臨床症状が現れることが見出された。その症状としては、硝子体臭（ｖｉｔｒｉｔｉｓ）、虹彩炎、網膜病変（網膜表面の微量出血および巣状壊死）、角膜基質のかすみおよび血管新生並びに角膜内皮の色素沈着が挙げられた。

硝子体内注射によって、すなわち、硝子体液内部への直接注射によって４日目に開始する４８時間間隔のＤ−２′−ＣｄＧ　（滅菌水１００μ！中、１００μｇ）の投与は、網膜病変の発症を減少させること並びに硝子体臭および虹彩炎の苛酷さを減少させることにおいて、プラシーボを与えられたウサギと比較したところ有効であった。はとんどの場合、Ｄ−２′−ＣｄＧでの処置は、同一条件下でのガンシクロヴイア（ＤＨＰＧ）での処置よりも臨床的に優れていることが分かっな、硝子体内経路は眼内感染にかなり有意の利点を与え、例えば、（１）望ましい作用部分に最大濃度の薬剤を与えること：　（２）薬剤の持効性（すなわち、一層長い半減期、Ｔ１／２）の可能性が増大すること：および（３）全身毒性の潜在性が低下すること；が挙げられる。

医旌爵生ヒトＣＭＶ疾患のための動物モデルを、ヒトＣＭＶを着色ウサギに硝子体内注射で接種することによって調製した。被験動物は、接種後３〜４日目に、軽度から中程度の硝子体臭、巣状網膜微量出血および限局性網膜壊死をおこした。

４量４０μｇ／１００μｌの注射は、発病を抑制するのに適度に有効であった。

発病経過は軽度の硝子体臭（２＋）および巣状網膜出血についてのみ変化した。

網膜壊死は犠牲となった全被験動物で明らかであった。

投与量８０μｍの２′−ＣｄＧは、硝子体臭の発症（最大発症１〜２＋）を減少させることおよび観察された網膜病変の発症を変化させることにおいて有効であった。網膜血管のうつ積は明らかであったし、巣状微量出血は接種後３．４および５日目に現れた。中程度から苛酷な網膜壊死および（更に低濃度の２′−ＣｄＧ治療治療上びブラシーボ処置対照群で観察される）＠ＩＩ剥離の発症は見られなかった。８０μｇの治療群でのＨＣＭＶｆｆｌ内疾患の発症および消散は、下記に記載の１００μｇの治療群での発病と同様であった。

７頭の着色ウサギを硝子体内注射によってヒトＣＭＶに感染させた。接種ｆ＆３日目目間始して、これらの被験動物に、５０μｍ中１００μｇの２′−ＣｄＧを３回連続して接種後３．４．５日目に注射した。予備試験の結果により、この毎日の２′−ＣｄＧ治療法はヒトＣＭＶに誘発される硝子体臭および網膜病変の発症を減少させるのに有効であったことが示される。これらの被験動物の硝子体液内部は１〜２±（軽度）であったし、網膜病変は１〜２＋の水準（巣状出血および限局性網膜壊死の発症）まで減少した。接種後７日目までに、これらの被験動物では、プラシーボ群および２目間隔で２’−ＣｄＧを与えられる群で観察される進行性疾患が見られなかった。初期のウィルス回復検定法により、ヒトＣＭＶ力価が治療後２日目までにＯまたは１の対数まで減少したことが示される。

前記の試験結果から明らかであるように、本発明の化合物は、激痛ＣＭＶ感染の治療において高い有効性を示す。

要約書〔目的〕　哺乳動物のサイトロメガロウイルス感染を予防又は治療するための医薬組成物及び治療方法の提供を目的とする。

〔構成〕　メガロウィルスに感染したか又は感染の恐れのある哺乳動物に投与するための、抗ウイルス有効量の式％式％

Claims

【特許請求の範囲】

１．哺乳動物のサイトメガロウイルス感染を予防または治療するために、前記の哺乳動物に対して抗ウイルス有効量の式▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物を投与することを特徴とする哺乳動物のサイトメガロウイルス感染を予防または治療する方法。