JPH0453519B2 - - Google Patents

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JPH0453519B2
JPH0453519B2 JP59173461A JP17346184A JPH0453519B2 JP H0453519 B2 JPH0453519 B2 JP H0453519B2 JP 59173461 A JP59173461 A JP 59173461A JP 17346184 A JP17346184 A JP 17346184A JP H0453519 B2 JPH0453519 B2 JP H0453519B2
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lactobacillus
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Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 ヒトの組織はトランスアミナーゼのグルタメー
ト／ピルベート−トランスアミナーゼ（GPT）
EC2.6.1.2及びグルタメート／オキサロアセテー
ト−トランスアミナーゼ（GOT）EC2.6.1.1を筋
肉、血清及び器管中に含有する。特に血清中の
GPT含量の測定は、肝疾患と心疾患とを区別す
るための１つの重要な臨床上のパラメータであ
る。
たいていの場合、GPTは専ら肝中に現出し、
そこでは実質細胞の細胞質中にのみ存在してお
り、一方GOTは細胞質及びミトコンドリア中に
それぞれ約50％ずつ存在する。両方のトランスア
ミナーゼのこの局在化から種々の肝疾患で有用な
診断上の示唆が得られる。より高いGOT値は重
症の肝実質細胞疾患を表わす。
急性肝炎では血清中のGOT及びGPTは高ま
り、無黄疽症の場合もそうである。しばしば、既
に黄疽の症状の前に酵素活性度上昇を検出するこ
とができる。
慢性肝炎及び肝硬変ではGOT及びGPTはビー
ルス性肝炎の場合よりも低い。それらの測定は慢
性肝炎の場合、とりわけ疾患の進行及び治療の観
察に有用である。
それと共にGOTの測定は、心筋疾患の診断に
も使用される。
従来の技術 GPTもしくはGOTを測定するための常用のか
つ使われる多くの方法は、これらの酵素により接
触されかつグルタミン酸とピルベートもしくはオ
キサロアセテートを形成するアラニンもしくはア
スパルテートとα−ケトグルタル酸とのアミノ基
転移を適用する。ピルベートもしくはオキサロア
セテートはラクテートデヒドログナーゼ（LDH）
及び場合によりMDHの存在においてNADHで還
元することによりラクテートもしくはマレート及
びNAD+に変換され、その際にNAD+を公知方法
により直接UV中で又は後続の呈色反応により測
定する。
発明が解決しようとする問題点 この方法の基本的な欠点は、LDH自体が非特
異性（副活性）を有することであり、これはα−
ケト酸、特にα−ケトグルタル酸をα−ヒドロキ
シグルタル酸の形成下に変換させかつα−ヒドロ
キシグルタレートデヒドロゲナーゼ活性として表
わすことができる。
更に、この非特異性は、この公知方法を実施す
るための相応する試薬が不十分な安定性しか有し
ていないという結果をもたらす。それというのも
α−ヒドロキシグルタレートの形成の際に
NADHがNADに酸化されるからである。これは
潜行反応を惹起する。
問題点を解決するための手段 本発明はこの問題を解決するという課題に基ず
く。
本発明により、この課題は相応するアミノ酸と
α−ケトグルタル酸とを反応させてグルタミン酸
と、使用したアミノ酸に相応するα−ケト酸に変
換しかつ形成したα−ケト酸を、ラクテートデヒ
ドロゲナーゼ（LDH）及び場合によりマレート
デヒドロゲナーゼ（MDH）の存在において
NAD+及びα−オキシ酸の形成下にNADHで還
元して、測定することによりトランスアミナーゼ
を測定する方法において、乳酸菌のＤ−LDHを
使用することを特徴とする方法により解決され
る。
本発明は、乳酸菌のＤ−LDHがNADHの存在
においてもα−オキソグルタル酸を還元しないと
いう驚異的な発見に基ずいている。それ故、本発
明により前記の方法において従来常用の豚の心臓
からのLDHを乳酸菌のＤ−LDHに代える場合
に、妨害的な潜行反応は起らずかつその貯蔵安定
性の点で著しく改良された試薬が得られる。
本発明による有利な結果は乳酸菌からのすべて
のＤ−LDHにより得られる。Ｄ−LDHを形成す
る乳酸菌は、主にラクトバチルス属
（Lactobacillus）、ペジオコツクス属
（Pediococcus）ロイコノストツク属
（Leuconostoc）に含まれる〔Antonie nan
Leeuwenhoek、49巻、210頁（1983年）〕。乳酸菌
がＬ−LDHを形成する場合は好適ではない。菌
株がＤ−LDHもＬ−LDHも形成する場合、両方
の酵素の分離を行なうべきである。それ故、Ｄ−
LDHだけを含有する菌株からのＬ−DDH製剤が
優れている。特に良好な結果は、ラクトバチル
ス・ライヒマンニイ（Lactobacillus
leichmannii）DSM2699からのLDHにより得ら
れ、これはＤ−LDHに該当する。他の優れた菌
株はラクトバチルス・ラクチス（Lactobacillus
lactis）DSM20072、ラクトバチルス・プランタ
ルム（Lactobacillus plantarum）DSM20174、
ロイコノストツク・メセンテロイヂス
（Leuconostoc mesenteroides）DSM20193又は
ペジオコツクス・ペントサセウス（Pediococcus
Pentosaceus）DSM20280である。
本発明方法をグルタメート／ピルベードトラン
スアミナーゼ（GPT）の測定に使用する場合、
アミノ酸としてアラニンを使用し、これはピルベ
ートに脱アミノ反応しかつその後でラクテートに
還元される。グルタメート／オキサロアセテート
−トランスアミナーゼ（GOT）を測定する場合、
アミノ酸としてアスパルテートを使用し、これは
オキサロアセテートに脱アミノ反応し、その後で
マレートに還元される。
それ故、LDH、α−オキソグルタレート、相
応するアミノ酸、NADH、緩衝物質（PH6.5〜
8.5）及び場合によりMDHからなるトランスアミ
ナーゼを測定するための本発明による試薬は
LDHが乳酸菌のＤ−LDHであることを特徴とす
る。
GPT測定の場合は試薬のアミノ酸はアラニン
である。GOT測定の場合は試薬のアミノ酸はア
スパルテートであり、更にマレートデヒドロゲナ
ーゼ（MDH）である。
優れた実施形ではGPTを測定するための本発
明による試薬は、 乳酸菌からのＤ−LDH 250〜20000U／ α−オキソグルタレート2.5〜100ミリモル／ アラニン 50〜1000ミリモル／ NADH 0.01〜0.25ミリモル／ 及び 緩衝物質（PH6.5〜8.5） 10〜500ミリモル／ からなる。
他の優れた実施形ではGOTを測定するための
本発明による試薬は、 乳酸菌からのＤ−LDH 250〜20000U／ α−オキソグルタレート2.5〜100ミリモル／ アスパルテート 20〜10000ミリモル／ NADH 0.01〜0.25ミリモル／ NDH 100〜20000U／ 及び 緩衝物質（PH6.5〜8.5） 10〜500ミリモル／ をからなる。
本発明範囲においてGPT試薬の各成分の特に
優れている最終濃度はLDH1000〜1400U／、
アラニン600〜800ミリモル／、NADH0.10〜
0.20ミリモル／、α−オキソグルタレート10〜
25ミリモル／及び緩衝物質（PH7.3〜7.5）50〜
100ミリモル／である。
GOT試薬の場合相応する濃度に関する数値は、
LDH1000〜1400U／、MDH500〜1000U／、
NADH0.10〜0.20ミリモル／、アスパルテート
150〜250ミリモル／及びα−オキソグルタレー
ト10〜20ミリモル／及び緩衝物質（PH7.3〜
7.5）50〜100ミリモル／である。
緩衝物質としては記載のPH範囲で有効な緩衝物
質が該当する。優れているのはトリス緩衝剤、ト
ラ緩衝剤（トリエタノールアミン）及びホスフエ
ート緩衝剤である。
本発明により達成される効果は、添付図面から
明らかである。添付図面には、貯蔵時間（時間）
に対する開始吸光度の低下率（％）を公知方法も
しくは試薬と本発明方法もしくは試薬とを比較し
て示す。その測定に当つては、“モノテスト
ア・ALAT／ALT／GPH（Monotest ａ・
ALAT／ALT／GPT）”という名前で市販され
ているベーリンガー・マンハイム社
（Boehringer Mannheim GmbH）製のGPTを測
定するための試薬を本発明による試薬と比較し
た。試験における濃度は次の通りであつた： LDH 1200U／ NADH 0.180ミリモル／ α−オキソグルタレート 15ミリモル／ アラニン 500ミリモル／ トリス緩衝液（PH7.5） 100ミリモル／ 公知の試薬のLDHは豚心からのLDHであり、
本発明よる試薬のLDHはラクトバチルス・ライ
ヒマンニイDSM2699からのＤ−LDHであつた。
添付図面から公知の試薬の場合水浴中25℃で約
34時間後には全NADHが消失し（曲線１）、本発
明による試薬の場合水浴中25℃で120時間後も開
始吸光度の約71％が測定される（曲線３）ことが
明らかである。４℃（氷浴）及び120時間の貯蔵
時間の相応する数値は公知の試薬では残留吸光度
30％（曲線２）、本発明による試薬では90％であ
る（曲線４）。豚心からのLDHの代りに、L.カゼ
イ（L.casei）、L.キシロスス（L.xylosus）、B.ス
テアロテルモフイルス（B.Searothermophilus）
又は、L.プランタルム（L.Plantarum）からのＬ
−LDHを使用する場合にも豚心−LDHの場合と
同様の結果が得られる。
GPT測定するための前記の市販の試薬の代り
に“モノテスト アASAT／AST／GOT
（Monotest aASAT／AST／GOT）”の名前で
市販されているGOT測定用の相応する試薬を使
用する場合にも同一の曲線が得られる。この場
合、試験における濃度は次の通りであつた。
LDH 600U／ MDH 420U／ NADH 0.180ミリモル／ α−オキソグルタレート 12ミリモル／ アスパルテート 240ミリモル／ トリス緩衝物質（PH7.8） 80ミリモル／ この試薬では、それぞれの試料が内生ピルベー
ト及び一般には内生LDHも含有するのでLDHを
含有する必要がある。これにより、ピルベートの
緩慢な分解による潜行反応が惹起される。この分
解は本発明で使用される過剰量のLDHの添加に
より短時間で進行する。
この“副反応”は明らかにGPT測定でも同様
に起るが、この場合にはα−ヒドロキシグルタレ
ートヒドロゲナーゼ活性という更に大きな問題が
重なつている。しかし本発明により両方の問題は
同時に解決される。
それ故、本発明により何倍もの貯蔵安定性が達
成されることが明らかである。
本発明に好適なラクトバチルス・ライヒマンニ
イDSM2699からの酵素製剤は微生物LDHを取得
するための公知方法により、例えば“ジヤーナ
ル・オブ・ジエネラル・マイクロバイオロジー
（J.of General Microbiology）”、62巻、243頁
（1970年）に記載の方法により製造することがで
きる。原理的に、この方法は次のように行なう： 0.5モル−リン酸カリウム緩衝液（PH７）中に
懸濁したラクトバチルスの超音波による細胞崩
壊、遠心及び細胞カスの廃棄。
得られた微生物粗製エキスを酢酸でPH5.5にし、
硫酸プロタミンを加えて0.3％Ｗ／Ｖにしかつ沈
殿を遠心分離する。上澄みをPH７に調節しかつ硫
酸アンモニウムで50〜85％飽和で沈殿するフラク
シヨンを取得する。このフラクシヨンを緩衝液
（PH７）中で弱いアニオン交換体（DEAE−
Sephadex A50）を介してクロマトグラフイ処
理しかつNaCl傾斜液で溶離する。
約25％の収率でLDH剤が得られ、これは粗製
エキスに比べて30倍又はそれ以上精製されてい
る。この方法は、ラクトバチルス属及びロイコノ
ストツク属の他の菌株、例えばL.ラクチス
DSM20072、L.プランタルムDSM2017及びロイ
コノストツク・メセンテロイデスDSM20193にも
好適である。ペジオコツクス菌株の場合は“ジヤ
ーナル・オブ・バクテリオロジー（J.of
Bacteriology）”、121巻、602頁による方法を適
用する。
実施例 次に本発明を実施例により詳説する。
例 １ GPT活性の測定（ホスフエート緩衝液を用い
る） 試料物質：血清、ヘパリン−又はEDTA−原
形質 試薬（試験における最終濃度）： ホスフエート緩衝液（PH7.4）
80ミリモル／ Ｌ−アラニン 800ミリモル／ LDH 1200U／ NADH 0.18ミリモル／ α−ケトグルタレート 18.0ミリモル／ 測定条件 波長：Hg365nm、340nm又334nm キユベツト：層厚１cm 測定温度：25℃ 空気に対して測定（吸光度低下）アナログ表
示板を備えた光度計で0.500を上廻る開始吸光
度を縦続接続により補正する。
キユベツト中にピペツト装入し、試薬混合物
（25℃）2.5mlと試料0.5mlを混合する。約１分後
に吸光度を読み取り、同時にストツプウオツチを
始動させる。更に正確に１分後、２分後及び３分
後に読み取る。
吸光度差／分（△Ｅ／分）0.06〜0.08
（Hg365nm）もしくは0.11〜0.18（Hg334及び
340nm）の場合、最初の２分間の測定だけを考慮
する（１分間は恒温保持しかつ２分間は測定す
る）。
吸光度差／（△Ｅ／分）から平均値を計算しか
つこれを次の計算式に入れる。
計算：試料中のGPTの活性は次式により計算
する。
Ｕ／（25℃）＝1765×△E365on／分 Ｕ／（25℃）＝952×△E340on／分 Ｕ／（25℃）＝971×△E334on／分 例 ２ GOT活性の測定（トリス緩衝液を用いる） 試料物質：血清、ヘパリン−又はEDTA−原
形質 試薬（試験における最終濃度）： トリス緩衝液（PH7.5） 100ミリモル／ NADH 0.18ミリモル／ MDH 600U／ LDH 1200U／ α−ケトグルタレート 12ミリモル／ Ｌ−アスパルテート 200ミリモル／ 測定条件： 波長：Hg365nm、340nm又334nm キユベツト：層厚１cm 測定温度：25℃ 空気に対して測定（吸光度低下） 試薬溶液（25℃）2.5mlと試料0.5mlを混合し、
溶液をキユベツト中に装入する。約１分後に吸光
度を読み取りかつ同時にストツプウオツチを始動
させる。更に正確に１分後、２分後及び３分後に
読み取る。
吸光度差／分（△Ｅ／分）から平均値を出しか
つ計算式に入れる。
計算：試料中のGOTの活性は次式から計算す
る。
Ｕ／（25℃）＝2059×△E365on／分 Ｕ／（25℃）＝1111×△E340on／分 Ｕ／（25℃）＝1133×△E334on／分
【図面の簡単な説明】
添付図面は、貯蔵時間に対する開始吸光度低下
率を公知の方法もしくは試薬と本発明による方法
もしくは試薬とを比較して示す図表である。 曲線１：市販の試薬、25℃で（水浴）、曲線
２：市販の試薬、４℃で（氷浴）、曲線３：本発
明による試薬、25℃で（水浴）、曲線４：本発明
による試薬、４℃で（氷浴）。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ 相応するアミノ酸とα−ケトグルタル酸とを
    反応させてグルタミン酸と、使用したアミノ酸に
    相応するα−ケト酸に変換しかつ形成したα−ケ
    ト酸を、ラクテートデヒドロゲナーゼ（LDH）
    及び場合によりマレートデヒドロゲナーゼ
    （MDH）の存在においてNAD+及びα−オキシ
    酸の形成下にNADHで還元して測定することに
    よりトランスアミナーゼを測定する方法におい
    て、乳酸菌のＤ−LDHを使用することを特徴と
    するトランスアミナーゼの測定法。 ２ ラクトバチルス属、ペジオコツクス属及び／
    又はロイコノストツク属の微生物からのＤ−
    LDHを使用する特許請求の範囲第１項記載の方
    法。 ３ グルタメート／ピルベート−トランスアミナ
    ーゼ（GPT）を測定し、かつアミノ酸としてピ
    ルベートに脱アミノ反応しかつラクテートに還元
    されるアラニンを使用する特許請求の範囲第１項
    又は第２項記載の方法。 ４ グルタメート／オキサロアセテート−トラン
    スアミナーゼ（GOT）を測定し、かつアミノ酸
    としてオキサロアセテートに脱アミノ反応しかつ
    マレートに還元されるアスパルテートを使用する
    特許請求の範囲第１項又は第２項記載の方法。 ５ ラクトバチルス・ライヒマンニイDSM2699、
    ラクトバチルス・ラクチスDSM20072、ラクトバ
    チルス・プランタルムDSM20174、ロイコノスト
    ツク・メセンテロイデスDSM20193又はペジオコ
    ツクス・ペントサセウスDSM20280からのＤ−
    LDHを使用する特許請求の範囲第２項から第４
    項までのいずれか１項記載の方法。 ６ LDH、α−オキソグルタレート、相応する
    アミノ酸、NADH、緩衝物質（PH6.5〜8.5）及び
    場合によりMDHからなるトランスアミナーゼ測
    定試薬において、LDHが乳酸菌のＤ−LDHであ
    ることを特徴とするトランスアミナーゼを測定す
    る試薬。 ７ アミノ酸がアラニンである特許請求の範囲第
    ６項記載の試薬。 ８ アミノ酸がアスパルテートである特許請求の
    範囲第６項記載の試薬。 ９ 乳酸菌からのＤ−LDH 250〜20000U／ α−オキソグルタレート2.5〜100ミリモル／ アラニン 50〜1000ミリモル／ NADH 0.01〜0.25ミリモル／ 及び 緩衝物質（PH6.5〜8.5） 10〜500ミリモル／ からなる特許請求の範囲第７項記載の試薬。 １０ 乳酸菌からのＤ−LDH 250〜20000U／ α−オキソグルタレート2.5〜100ミリモル／ アスパルテート 20〜1000ミリモル／ NADH 0.01〜0.25ミリモル／ MDH 100〜20000U／ 及び 緩衝物質（PH6.5〜8.5） 10〜500ミリモル／ からなる特許請求の範囲第８項記載の試薬。 １１ LDHがラクトバチルス属、ペジオコツク
    ス属及び／又はロイコノストツク属の微生物から
    のＤ−LDHである特許請求の範囲第６項から第
    １０項までのいずれか１項記載の試薬。 １２ LDHがラクトバチルス・ライヒマンニイ
    DSM2699、ラクトバチルス・ラクチス
    DSM20072、ラクトバチルス・プランタルム
    DSM20174、ロイコノストツク・メセンテロイデ
    スDSM20193又はペジオコツクス・ペントサセウ
    スDSM20280からのＤ−LDHである特許請求の
    範囲第１１項記載の試薬。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0387697A3 (en) * 1989-03-13 1991-11-13 Abbott Laboratories Determination of aminotranferases
JPH05505108A (ja) * 1990-03-01 1993-08-05 バクスター、ダイアグノスティックス、インコーポレイテッド 反応副生成物を酵素アッセイのための校正試薬として使用する方法
DE4427492A1 (de) * 1994-08-03 1996-02-08 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur Analyse einer medizinischen Probe unter Vermeidung von Störbeiträgen aufgrund von Hämolyse
JP6339789B2 (ja) * 2013-10-23 2018-06-06 株式会社カイノス Ａｌｔ活性測定試薬およびその試薬を用いたアラニンアミノトランスフェラーゼ活性の測定方法。

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3527332A (en) * 1966-06-30 1970-09-08 Calbiochem Method for assaying glutamate pyruvate transaminase
BE786291A (fr) * 1971-07-20 1973-01-15 Technicon Instr Compositions de diagnostic pour determination de la glutamate-oxalate-transaminase (got) et de la glutamate-pyruvate-transaminase (gpt)
IT1162349B (it) * 1979-07-17 1987-03-25 Biodata Spa Metodo per la determinazione delle transaminasi e relativo kit diagnostico

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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BIOCHEMICALS ENZYMES COENZYMES SUBSTRATES MARKERS INHIBITORS=S57 *
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