JPH0455677B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH0455677B2 JPH0455677B2 JP57019468A JP1946882A JPH0455677B2 JP H0455677 B2 JPH0455677 B2 JP H0455677B2 JP 57019468 A JP57019468 A JP 57019468A JP 1946882 A JP1946882 A JP 1946882A JP H0455677 B2 JPH0455677 B2 JP H0455677B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sam
- medium
- producing
- present
- amount
- Prior art date
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- Expired - Lifetime
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
本発明は醗酵法によるＳ−アデノシルメチオニ
ンの製造方法に関し、更に詳しくは、メチオニン
含有液体培地中で微生物を培養することによりＳ
−アデノシルメチオニンを高度に含有する微生物
菌体を製造する方法に関する。 Ｓ−アデノシルメチオニン（以下、SAMと略
称する）は生体内において脂肪、蛋白質、糖類な
どの代謝に関与する重要な生理活性物質である。
而して近時かかるSAMに肝血症、過度脂血症、
動脈硬化症、抑うつ病および神経病型の精神病発
現、変性関節症神経病痛覚、不眠症などに対する
治療効果のあることが見い出されており、その大
量生産が期待されている。 従来、SAMの製造方法としては、メチオニン
含有培地でサツカロマイセス属、ピキア属、キヤ
ンデイダ属、ハンゼヌラ属、ロドトルラ属などに
属する酵母や、ムコール属、リゾープス属、アス
ペルギルス属、ペニシリウム属などに属する糸状
菌を培養し、菌体内や培養液中にSAMを生成蓄
積せしめる方法が報告されている〔例えば
AminoAcids No.４、95頁（昭和36年）、特公昭
52−17118号、特公昭47−37038号、Journal of
Bacteriology、Vol. 121、267頁（1975年）な
ど〕。 しかしながらこれらの方法では、生成した
SAMの相当量が培地中に流出するため菌体中の
SAM含量が低く、その結果として精製工程に於
いて多量の培地を処理する必要があり、しかも培
地中に蓄積したSAMは熱に対して不安定なため
精製が難しいという欠点があつた。 そこで本発明者らはSAMを高度に含有する微
生物菌体を得る方法に関し鋭意検討を加えた結
果、サツカロマイセス・セレビジエに属する
SAM生産能を有する微生物をメチオニン含有培
地で培養する際に、該培地中に特定の物質を添加
することが極めて効果的であることを見い出し本
発明を完成した。 すなわち本発明の目的はSAMを高度に含有す
る微生物菌体の製造方法を提供することにあり、
かかる本発明の目的は、SAM生産能を有するサ
ツカロマイセス・セレビジエに属する酵母をメチ
オニン含有培地で培養してSAMを製造する方法
において、培地中に有機酸アンモニウム塩を0.2
〜２ｇ／dlの濃度で存在せしめることにより達成
される。 従来からサツカロマイセス・セレビジエをメチ
オニン含有培地中で培養しSAMを製造する方法
は公知である。而して、かかる公知技術において
は一般に窒素源として硫酸アンモニウム、塩化ア
ンモニウムなどの無機塩が用いられているが、本
発明においては窒素源として有機酸アンモニウム
塩を所定量以上使用することが必須の要件であり
それによつて菌体内にSAMを高濃度に蓄積させ
ることが可能となり、それと同時に菌の生育をも
促進させることができる。 本発明で用いられる有機酸アンモニウム塩の具
体例としては、例えばコハク酸アンモニウム、酒
石酸アンモニウム、乳酸アンモニウム、クエン酸
二アンモニウム、クエン酸三アンモニウム、シユ
ウ酸アンモニウム、アジピン酸アンモニウムなど
のごときモノー、ジーまたはトリカルボン酸アン
モニウムが例示される。かかる有機酸アンモニウ
ム塩は培地中に0.2〜２ｇ／dlの濃度で存在せし
める。 本発明において用いられる微生物はサツカロマ
イセス・セレビジエに属し、メチオニン含有培地
中でSAMを蓄積する能力を有するものであれば
いずれでもよく、その具体例としてIFO 2342、
IFO 2343、IFO 2345、IFO 2346、IFO 2347、
IFO 2376などが例示される。またこれらの菌株
の天然及び人工変異菌もSAM生産能を有するか
ぎり同様に使用することができる。 本発明においては前記のごとき特定な化合物を
培地中に存在せしめること以外、常法に従つて培
地が調整される。例えば炭素源としては、グルコ
ース、シユクロース、フラクトースなどの糖類；
エタノール、グリセリンなどのアルコール類；更
にはこれらを含有する澱粉加水分解液、糖蜜、大
豆ホエー、果汁廃液、魚加工廃液、発酵廃液、パ
ルプ廃液なども使用できる。更に無機塩、有機微
量栄養素などが必要に応じて使用される。 本発明における培養は好気的条件下で行うのが
好ましく、通常培地のPHを３〜８、好ましくは４
〜７に制御しつつ、15℃〜45℃、好ましくは20℃
〜35℃の範囲で２日から10日間、培養することに
より微生物菌体中に著量のSAMが生成蓄積され
る。 生成蓄積されたSAMの採取は常法に従つて行
うことができ、例えばSAM含有菌体を過塩素酸
で抽出し、抽出液を氷冷下に炭酸水素カリウムで
中和したのち、強酸性カチオン交換樹脂に接触さ
せ、次いでSAMを吸着したのち硫酸で溶出し、
溶出液にリンタングステン酸を加えてSAMを沈
澱させることによつて単離することができる。 以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明する。なお、実施例におけるSAMの定量及
び乾燥菌体重量の測定は次の様にして行つた。 (1) SAM定量：培養終了後、遠心分離にて菌体
と培養液を分離し、菌体を約５倍量の1.5N過
塩素酸で抽出した。次いで得られた抽出上澄液
をペーパークロマトグラフイー（展開溶媒：エ
タノール／１−ブタノール／水／酢酸／１％ピ
ロリン酸ナトリウム水溶液：35／30／30／１／
１）で分離し、紫外線検出器でSAM相当のス
ポツトを検出し、これを0.1N塩酸で抽出して、
その260nｍの吸光度より試料中のSAM量を算
出した。 (2) 乾燥菌体重量の測定 培養終了後、培養液の濁度を日立光電比色計
をもちい波長領域610nｍで測定し、予め求め
ておいた乾燥菌体重量と濁度との検量線より培
養液中の乾燥菌体重量を求めた。 実施例 １ グルコース５ｇ／dl、ポリペプトン0.5ｇ／dl、
KH2PO40.4ｇ／dl、K2HPO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.02ｇ／dl、酵母エキス0.2ｇ／
dl、寒天２ｇ／dlからなる寒天斜面培地（PH6.0）
に28℃で２日間生育させたサツカロマイセス・セ
レビジエIFO 2346の１白金耳を、シユクロース
10ｇ／dl、カザミノ酸１ｇ／dl、トリプトン
（Bacto tryptone）１ｇ／dl、KH2PO40.4ｇ／
dl、K2HPO41ｇ／dl、MgSO4・7H2O0.04ｇ／
dl、Ｌ−メチオニン0.75ｇ／dl及び第１表に示す
各種添加剤0.5ｇ／dlからなりPH6.0に調整、加熱
滅菌した培地５mlに植菌し、28℃で５日間振盪し
た。次いでSAMの蓄積量及び乾燥菌体重量を測
定し、結果を第１表に示した。
ンの製造方法に関し、更に詳しくは、メチオニン
含有液体培地中で微生物を培養することによりＳ
−アデノシルメチオニンを高度に含有する微生物
菌体を製造する方法に関する。 Ｓ−アデノシルメチオニン（以下、SAMと略
称する）は生体内において脂肪、蛋白質、糖類な
どの代謝に関与する重要な生理活性物質である。
而して近時かかるSAMに肝血症、過度脂血症、
動脈硬化症、抑うつ病および神経病型の精神病発
現、変性関節症神経病痛覚、不眠症などに対する
治療効果のあることが見い出されており、その大
量生産が期待されている。 従来、SAMの製造方法としては、メチオニン
含有培地でサツカロマイセス属、ピキア属、キヤ
ンデイダ属、ハンゼヌラ属、ロドトルラ属などに
属する酵母や、ムコール属、リゾープス属、アス
ペルギルス属、ペニシリウム属などに属する糸状
菌を培養し、菌体内や培養液中にSAMを生成蓄
積せしめる方法が報告されている〔例えば
AminoAcids No.４、95頁（昭和36年）、特公昭
52−17118号、特公昭47−37038号、Journal of
Bacteriology、Vol. 121、267頁（1975年）な
ど〕。 しかしながらこれらの方法では、生成した
SAMの相当量が培地中に流出するため菌体中の
SAM含量が低く、その結果として精製工程に於
いて多量の培地を処理する必要があり、しかも培
地中に蓄積したSAMは熱に対して不安定なため
精製が難しいという欠点があつた。 そこで本発明者らはSAMを高度に含有する微
生物菌体を得る方法に関し鋭意検討を加えた結
果、サツカロマイセス・セレビジエに属する
SAM生産能を有する微生物をメチオニン含有培
地で培養する際に、該培地中に特定の物質を添加
することが極めて効果的であることを見い出し本
発明を完成した。 すなわち本発明の目的はSAMを高度に含有す
る微生物菌体の製造方法を提供することにあり、
かかる本発明の目的は、SAM生産能を有するサ
ツカロマイセス・セレビジエに属する酵母をメチ
オニン含有培地で培養してSAMを製造する方法
において、培地中に有機酸アンモニウム塩を0.2
〜２ｇ／dlの濃度で存在せしめることにより達成
される。 従来からサツカロマイセス・セレビジエをメチ
オニン含有培地中で培養しSAMを製造する方法
は公知である。而して、かかる公知技術において
は一般に窒素源として硫酸アンモニウム、塩化ア
ンモニウムなどの無機塩が用いられているが、本
発明においては窒素源として有機酸アンモニウム
塩を所定量以上使用することが必須の要件であり
それによつて菌体内にSAMを高濃度に蓄積させ
ることが可能となり、それと同時に菌の生育をも
促進させることができる。 本発明で用いられる有機酸アンモニウム塩の具
体例としては、例えばコハク酸アンモニウム、酒
石酸アンモニウム、乳酸アンモニウム、クエン酸
二アンモニウム、クエン酸三アンモニウム、シユ
ウ酸アンモニウム、アジピン酸アンモニウムなど
のごときモノー、ジーまたはトリカルボン酸アン
モニウムが例示される。かかる有機酸アンモニウ
ム塩は培地中に0.2〜２ｇ／dlの濃度で存在せし
める。 本発明において用いられる微生物はサツカロマ
イセス・セレビジエに属し、メチオニン含有培地
中でSAMを蓄積する能力を有するものであれば
いずれでもよく、その具体例としてIFO 2342、
IFO 2343、IFO 2345、IFO 2346、IFO 2347、
IFO 2376などが例示される。またこれらの菌株
の天然及び人工変異菌もSAM生産能を有するか
ぎり同様に使用することができる。 本発明においては前記のごとき特定な化合物を
培地中に存在せしめること以外、常法に従つて培
地が調整される。例えば炭素源としては、グルコ
ース、シユクロース、フラクトースなどの糖類；
エタノール、グリセリンなどのアルコール類；更
にはこれらを含有する澱粉加水分解液、糖蜜、大
豆ホエー、果汁廃液、魚加工廃液、発酵廃液、パ
ルプ廃液なども使用できる。更に無機塩、有機微
量栄養素などが必要に応じて使用される。 本発明における培養は好気的条件下で行うのが
好ましく、通常培地のPHを３〜８、好ましくは４
〜７に制御しつつ、15℃〜45℃、好ましくは20℃
〜35℃の範囲で２日から10日間、培養することに
より微生物菌体中に著量のSAMが生成蓄積され
る。 生成蓄積されたSAMの採取は常法に従つて行
うことができ、例えばSAM含有菌体を過塩素酸
で抽出し、抽出液を氷冷下に炭酸水素カリウムで
中和したのち、強酸性カチオン交換樹脂に接触さ
せ、次いでSAMを吸着したのち硫酸で溶出し、
溶出液にリンタングステン酸を加えてSAMを沈
澱させることによつて単離することができる。 以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明する。なお、実施例におけるSAMの定量及
び乾燥菌体重量の測定は次の様にして行つた。 (1) SAM定量：培養終了後、遠心分離にて菌体
と培養液を分離し、菌体を約５倍量の1.5N過
塩素酸で抽出した。次いで得られた抽出上澄液
をペーパークロマトグラフイー（展開溶媒：エ
タノール／１−ブタノール／水／酢酸／１％ピ
ロリン酸ナトリウム水溶液：35／30／30／１／
１）で分離し、紫外線検出器でSAM相当のス
ポツトを検出し、これを0.1N塩酸で抽出して、
その260nｍの吸光度より試料中のSAM量を算
出した。 (2) 乾燥菌体重量の測定 培養終了後、培養液の濁度を日立光電比色計
をもちい波長領域610nｍで測定し、予め求め
ておいた乾燥菌体重量と濁度との検量線より培
養液中の乾燥菌体重量を求めた。 実施例 １ グルコース５ｇ／dl、ポリペプトン0.5ｇ／dl、
KH2PO40.4ｇ／dl、K2HPO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.02ｇ／dl、酵母エキス0.2ｇ／
dl、寒天２ｇ／dlからなる寒天斜面培地（PH6.0）
に28℃で２日間生育させたサツカロマイセス・セ
レビジエIFO 2346の１白金耳を、シユクロース
10ｇ／dl、カザミノ酸１ｇ／dl、トリプトン
（Bacto tryptone）１ｇ／dl、KH2PO40.4ｇ／
dl、K2HPO41ｇ／dl、MgSO4・7H2O0.04ｇ／
dl、Ｌ−メチオニン0.75ｇ／dl及び第１表に示す
各種添加剤0.5ｇ／dlからなりPH6.0に調整、加熱
滅菌した培地５mlに植菌し、28℃で５日間振盪し
た。次いでSAMの蓄積量及び乾燥菌体重量を測
定し、結果を第１表に示した。
【表】
この結果から、有機酸アンモニウム塩を添加す
ることにより、菌体中のSAM蓄積量が増加し、
かつ菌の生育量も増加することが明らかである。 実施例 ２ グルコース５ｇ／dl、ポリペプトン0.5ｇ／dl、
KH2PO40.4ｇ／dl、K2HPO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.02ｇ／dl、酵母エキス0.2ｇ／
dl、寒天２ｇ／dlからなる寒天斜面培地（PH6.0）
に２日間生育させたサツカロマイセス・セレビジ
エIFO 2346の１白金耳を、シユクロース10ｇ／
dl、酵母エキス１ｇ／dl、KH2PO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.01ｇ／dl、Ｌ−メチオニン1.0
ｇ／dl、ZnSO4・7H2O0.25mg／dl、MnSO44〜
6H2O1.25mg／dl、及び第２表に示す所定量の各
種添加剤からなりPH6.0に調整、加熱滅菌した培
地５mlに植菌し、28℃で５日間振盪した。次いで
SAMの蓄積量及び乾燥菌体重量を測定し、結果
を第２表に示した。
ることにより、菌体中のSAM蓄積量が増加し、
かつ菌の生育量も増加することが明らかである。 実施例 ２ グルコース５ｇ／dl、ポリペプトン0.5ｇ／dl、
KH2PO40.4ｇ／dl、K2HPO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.02ｇ／dl、酵母エキス0.2ｇ／
dl、寒天２ｇ／dlからなる寒天斜面培地（PH6.0）
に２日間生育させたサツカロマイセス・セレビジ
エIFO 2346の１白金耳を、シユクロース10ｇ／
dl、酵母エキス１ｇ／dl、KH2PO40.4ｇ／dl、
MgSO4・7H2O0.01ｇ／dl、Ｌ−メチオニン1.0
ｇ／dl、ZnSO4・7H2O0.25mg／dl、MnSO44〜
6H2O1.25mg／dl、及び第２表に示す所定量の各
種添加剤からなりPH6.0に調整、加熱滅菌した培
地５mlに植菌し、28℃で５日間振盪した。次いで
SAMの蓄積量及び乾燥菌体重量を測定し、結果
を第２表に示した。
Claims (1)
- １ サツカロマイセス・セレビジエに属するＳ−
アデノシルメチオニン産生能を有する微生物をメ
チオニン含有液体培地で培養してＳ−アデノシル
メチオニンを調製する方法において培地中に有機
酸アンモニウム塩を0.2〜２ｇ／dlの濃度で存在
せしめることを特徴とするＳ−アデノシルメチオ
ニンの製造方法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1946882A JPS58138393A (ja) | 1982-02-09 | 1982-02-09 | Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法 |
| CH5083/82A CH648864A5 (en) | 1981-08-27 | 1982-08-26 | Process for the preparation of S-adenosylmethionine |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1946882A JPS58138393A (ja) | 1982-02-09 | 1982-02-09 | Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58138393A JPS58138393A (ja) | 1983-08-17 |
| JPH0455677B2 true JPH0455677B2 (ja) | 1992-09-04 |
Family
ID=12000147
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1946882A Granted JPS58138393A (ja) | 1981-08-27 | 1982-02-09 | Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58138393A (ja) |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS4975776A (ja) * | 1972-11-22 | 1974-07-22 |
-
1982
- 1982-02-09 JP JP1946882A patent/JPS58138393A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS58138393A (ja) | 1983-08-17 |
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