JPH0471179B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

［発明の分野］ 本発明は、電気泳動用媒体材料に関するもので
あり、さらに詳しくは特に蛋白質等の生体高分子
成分の電気泳動分析に使用するのに適した電気泳
動用媒体材料に関するものである。 ［発明の背景］ 電気泳動分析の代表的に態様としては、ガラス
板支持体に寒天、セルロース、セルロースアセテ
ート、デンプン、シリカゲル、ポリアクリルアミ
ド等の膜形成材料を塗布または流延して製造した
電気泳動膜に緩衝液をしみこませ、この上に分析
対象の物質を付着させ、支持体の両端に電圧をか
け、支持体の上または内部で展開（移動）させた
のち、染色し、この染色した試料の光学濃度を測
定して物質の各成分の定量分析を行なう態様を挙
げることができる。 このような電気泳動分析および電気泳動膜の詳
細については、電気泳動学会編「電気泳動実験法
（改訂版５版）」（文光堂、1975年発行）、青本、永
井編著「最新電気泳動法」（広川書店、1973年発
行）等に記載されている。 近年において、電気泳動法は生体成分の分析に
多用されており、特に蛋白分析は病気診断のため
の生化学検査において頻繁に用いられている。 電気泳動用膜またはシートとしては古くから瀘
紙が用いられていたが、上述のように性能上の面
から最近はアガロース膜やポリアクリルアミドゲ
ル膜が用いられるようになり、特に分子ふるい効
果を有するポリアクリルアミドゲル膜は現在最も
多く利用されている。 ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミド
のような単量体を、重合触媒の存在下、Ｎ，
N′−メチレンビスアクリルアミドのような二官
能性の架橋剤で酸素不存在条件下で重合架橋させ
ることによつて得られている。 なお、ポリアクリルアミドゲル膜の製造に際し
ては変性剤として陰イオン界面活性剤が添加され
ることが多いが、蛋白質分析用ゲル膜の製造にお
いては、変性剤の必要量が少ないため、湿潤ゲル
膜に変性剤水溶液を塗布する方法、ゲル膜を変性
剤水溶液に浸漬する方法等によりゲル膜内に変性
剤を含浸させることができる。 上記のようにポリアクリルアミド形成の重合反
応はラジカル架橋重合である。酸素の影響により
架橋重合が阻害される。従つて、ポリアクリルア
ミドゲル膜は酸素を遮断した状態で作成する必要
がある。このため、一般にポリアクリルアミドゲ
ル膜は、二枚のガラス板から構成されたセル（一
定の空間、たとえば0.3mm〜１mm）の中にゲル形
成液を注入したのち酸素を遮断し架橋重合させて
ゲル化させることにより形成されている。しかし
ながら、二枚のガラス板の間でゲル膜を形成する
作業は、ガラスが割れやすく、かつ重い等の欠点
があり、またガラスに挟まれたゲル膜は持ち運び
に不便で取扱い性が悪いため、ゲル膜を量産する
には多大の困難を伴う。 更に従来では、ガラス板に挟まれたポリアクリ
ルアミドゲル膜を用いて、所定条件で一定時間水
平あるいは垂直スラブ電気泳動を行なつたのち、
ゲル膜を染色（例えば、ポンソ3R染色、クマシ
ーブリリアントブルーＧ−250染色、銀染色等が
ある）処理し、生体成分の分析を行なうような操
作が行なわれているが、ガラス板と湿潤状態のゲ
ル膜との接着性が悪いためこの染色工程において
ゲル膜がガラス板より剥離しやすく、その作業に
は高度の熟練した技術が必要となる。 前記の取り扱い性の難点を解決するためにガラ
ス支持体の代りに、軽いプラスチツク支持体に設
けたポリアクリルアミドゲル膜の開発が望まれて
いる。このような目的に用いられるプラスチツク
支持体の好ましい材料としては、たとえばポリエ
チレンテルフタレート（PET）のように、取扱
い性がよく、かつ各種性能の優れたプラスチツク
が想定されるが、これらのプラスチツクは一般に
疎水性であり、このためゲル膜と支持体との間の
接着性が乏しいとの問題がある。また疎水性プラ
スチツクシートの表面を親水性にしたとしても、
あるいは親水性のプラスチツクシートを用いたと
しても、ゲル膜と支持体との接着性は必ずしも満
足できるレベルには達しない。 ［発明の要旨］ 従つて、本発明は、プラスチツク支持体層と電
気泳動用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜）と
からなる電気泳動用媒体材料であつて、取り扱い
性、および湿潤状態での電気泳動用媒体層と支持
体との間の接着性が優れた電気泳動用媒体材料を
提供することを目的とするものである。 本発明はまた、電気泳動後の染色工程ないし染
色処理後の乾燥工程などにおいても電気泳動用媒
体層（ポリアクリルアミドゲル膜）が支持体から
剥離することのない電気泳動用媒体材料を提供す
ることもその目的とするものである。 本発明は、下記の各層が順次積層されてなる三
層構造を含む電気泳動用媒体材料からなるもので
ある： [] プラスチツク支持体層； [] セルロース誘導体を含有する接着層； および、 [] アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存
在下で架橋重合してなり、変性剤として陰イオ
ン界面活性剤を含むポリアクリルアミド系水性
ゲル電気泳動用媒体層。 本発明の電気泳動用媒体材料は、上記のように
支持体層と電気泳動用媒体層とをセルロース誘導
体を含有する接着層により接合してなる三層構造
を含むものであり、前述の電気泳動用媒体層（ポ
リアクリルアミドゲル膜）の染色工程における各
種の操作によつても、その三層構造が分離しにく
いため、作業上非常に有利となる。さらに、本発
明の電気泳動用媒体材料は、水平に置いた支持体
の上にセルロース誘導体を含有する接着層を形成
し、次いで電気泳動用媒体層をその上に形成する
方法によつても製造することが可能であるため、
電気泳動用媒体材料の量産化にも大きく寄与する
ものである。 ［発明の詳細な記述］ 本発明の電気泳動用媒体材料の支持体としては
各種のプラスチツクシートを用いることができ
る。このプラスチツクシートとしては、任意のプ
ラスチツクから形成したものを用いることができ
る。好ましいプラスチツクシートの例としては、
親水性ポリマーまたは公知の表面処理により表面
を親水化したポリマー（例、ポリエチレンテレフ
タレート、ビスフエノールＡのポリカルボネー
ト、ポリ塩化ビニル、塩化ビニリデン・塩化ビニ
ルコポリマー、ポリメチルメタアクリレート、ポ
リエチレン、ポリプロピレン、セルロースアセテ
ート類、セルロースアセテートプロピオネート
等）のシート（フイルム、板状物も含む）等を挙
げることができる。なおプラスチツクシートの表
面を親水化するための処理としては、紫外線照
射、グロー放電処理、コロナ放電処理、火焔処
理、電子線照射、ケミカルエツチング、電解エツ
チング等の公知の方法を適用することができる。 ただし、支持体表面の親水化は必須ではなく、
前述のプラスチツクシートをそのまま支持体とし
て用いることができる。 本発明において支持体の上にはセルロース誘導
体を含有する接着層が設けられる。セルロース誘
導体としては、ジアセチルセルロース、トリアセ
チルセルロース、ニトロセルロースなどが好まし
いが、他のセルロース誘導体も膜形成性である限
り用いることが可能である。これらのセルロース
誘導体は単独で使用しても、併用してもよい。ま
た、層形成成分の50重量％以内である限り他の高
分子物質や添加物を含むことができる。このよう
な高分子物質および添加剤の例としては、ゼラチ
ン、デキストラン、ポリメチルメタクリレート、
ポリアクリルアミド、ポリアクリル酸、ポリビニ
ルアルコール、ｐ−クロロフエノール、レゾルシ
ン、グリセリン、エチレングリコール等を挙げる
ことができる。 セルロース誘導体を含有する接着層はセルロー
ス誘導体を80重量％以上含むことが望ましく、特
に実質的にセルロース誘導体のみからなる層であ
ることが望ましい。また、この接着層は単一層で
あつても複合層であつてもよく、複合層の場合に
は、そのセルロース誘導体を含む層以外は他の重
合体層であつてもよい。そのような他の重合体層
の例としては、ゼラチン、ポリメチルメタアクリ
レート、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコ
ール、ポリ塩化ビニリデンなどからなる層を挙げ
ることができ、これらの重合体層はセルロース誘
導体を含む層の下側に設けることができる。 次に電気泳動用媒体層（以下においてゲル媒体
層、ポリアクリルアミドゲル膜あるいは単にゲル
膜ともいう）について説明する。 ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミド
系化合物と架橋剤とを、水溶液または水分散液と
して水中に溶解または分散させてゲル形成液を調
製したのち、液中で両者を架橋重合させて架橋重
合した水性ゲル膜として形成することにより得る
ことができる。本明細書においては、特にことわ
らない限り、（水中に）溶解と（水中に）分散の
両者を含めて単に（水中に）溶解といい、水溶液
と水分散液の両者を含めて単に水溶液という。ま
た溶媒または分散媒としては、所望により加えら
れる有機溶媒と水の混合物をも包含する。 ポリアクリルアミドゲル膜の製造に用いること
ができるアクリルアミド系化合物としては、アク
リルアミド、Ｎ−メチルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ
−ジメチルアクリルアミド、Ｎ−（ヒドロキシメ
チル）アクリルアミド、ジアセトンアクリルアミ
ド等のアクリルアミドホモログやメクリルアミド
のようなメクリルアミド系化合物があげられ、こ
れらの化合物は単独で、あるいは二種以上を併用
して用いることができる。これらのアクリルアミ
ド系化合物のうちではアクリルアミドが最も好ま
しく、またアクリルアミドと他のアクリルアミド
系化合物の一種以上の併用も好ましい。 架橋剤としては「Electrophoresis」1981、２、
220−228等に記載の公知の化合物（一種または二
種以上の組合せ）を用いることができる。架橋剤
の具体例としては、Ｎ，N′−メチレンビスアク
リルアミド（BIS）；Ｎ，N′−プロピレンビスア
クリルアミド（PBA）；ジ（アクリルアミドメチ
ル）エーテル（またはＮ，N′−オキシジメチレ
ンアクリルアミド）；１，２−ジアクリルアミド
エチレングリコール；１，３−ジアクリロイルエ
チレンウレア；エチレンジアクリレート
（EDA）；Ｎ，N′−ジアリルタータルジアミド
（Ｎ，N′−diallyltartardiamide、DATD）；Ｎ，
N′−ビスアクリリルシスタミン（Ｎ，N′−
bisacrylylcystamine、BAC）等の二官能性化合
物があげられる。 架橋剤は、単量体と架橋剤の総重量に対して約
２重量％から約30重量％、好ましくは約３重量％
から約10重量％の範囲の量で用いることができ
る。 ゲル濃度としては、S.Hjerten：「Arch.
Biochem.Biophys.」１（Suppl.）、147（1962）に
記載の定義に従つて表示して、単量体、架橋剤お
よび水からなるゲル媒体の容積に対して、単量体
と架橋剤の量が3w／ｖ％から約30w／ｖ％の範
囲で好ましく用いられる。 本発明の電気泳動用媒体材料は、主として蛋白
質または複合蛋白質（たとえば、リポプロテイ
ン、糖プロテインなど）の分析に有利に用いられ
るものであり、電気泳動用媒体層には、変性剤と
して陰イオン性界面活性剤を含有させる。分析試
料が蛋白質または複合蛋白質（例えばリポ蛋白
質、糖蛋白質など）の場合には陰イオン界面活性
剤を含ませることが有利である。 陰イオン界面活性剤を電気泳動用媒体層に含有
させることにより、蛋白質または複合蛋白質の効
率的な分離およびそれらの分子量測定が可能とな
る。 陰イオン性界面活性剤の例としてはアルキル硫
酸塩が挙げることができ、特に炭素原子数10以上
の長鎖アルキル基を有するアルキル硫酸塩が好ま
しく用いられる。塩を形成する陽イオンとして
は、ナトリウムイオン、カリウムイオン、リチウ
ムイオン等のアルカリ金属イオンが一般的であ
り、これらのうちではナトリウムイオンが用いや
すい。アルキル硫酸塩のうちではドデジル硫酸塩
（ナトイウム塩、カリウム塩、リチウム塩等）が
好ましく、なかでもドデシル硫酸ナトリウム
（SDS）が最も好ましい。SDSを本発明のゲル媒
体層に含有させることにより蛋白質または複合蛋
白質の効率的な分離およびそれらの分子量測定が
可能となる。 変性剤としての陰イオン界面活性剤の含有量は
ゲル形成液に対して約0.05w／ｖ％から約2.0w／
ｖ％、好ましくは約0.1w／ｖ％から約1.5w／ｖ
％の範囲である。 ポリアクリルアミドゲル膜には、必要に応じて
抗酸化剤を含有させることができる。抗酸化剤と
しては、ポリアクリルアミドゲル膜に配合しうる
ことが知られている種々の化合物を用いることが
できる。抗酸化剤の具体例としては、ジチオスレ
イトール、２−メルカプトエタノールを挙げるこ
とができる。 またポリアクリルアミドゲル膜には、場合によ
つて水溶性ポリマーが添加される。水溶性ポリマ
ーとしては、付加重合型または縮重合型の水溶性
ポリマーを用いることができる。付加重合型ポリ
マーの具体例としては、ポリビニルアルコール、
ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド等の
非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。また縮
重合型ポリマーの具体例としては、ポリエチレン
グリコール、ポリプロピレングリコール等の非イ
オン性水溶性ポリアルキレングリコールが挙げら
れる。これらの水溶性ポリマーのうちでは、ポリ
アクリルアミドとポリエチレングリコールが好ま
しい。 水溶性ポリマーの分子量は約１万から約100万
の範囲のものが好ましい。水溶性ポリマーは単量
体と架橋剤の合計重量に対して、約２重量％から
約100重量％の範囲、そして好ましくは約５重量
％から約50重量％の範囲で用いられる。 水溶性ポリマーの添加によりポリアクリルアミ
ドゲル膜が可塑性を有するようになり、裁断加工
時に壊れることがなくなり、またゲル膜は乾燥時
にも可塑性も有するようになり、もろさが改良さ
れ壊れにくくなるとの利点がある。また、水溶性
ポリマーの分子量および添加量を選択することに
より、ゲル膜の粘度をコントロールすることもで
きる。ポリアクリルアミドゲル膜は、さらにアガ
ロースを含有することが好ましい。アガロースと
しては任意のものを使用することができ、低電気
浸透性、中電気浸透性、高電気浸透性アガロース
のいずれをも用いることができる。用いることが
できるアガロースの例としては、特開昭55−5730
号、特開昭55−110946号、特表昭57−502098号等
の各公報に開示のアガロース等がある。アガロー
スは、単量体と架橋剤を含む水性ゲルの容積に対
して約0.2w／ｖ％から約2w／ｖ％、好ましくは
約0.3w／ｖ％から約1.2w／ｖ％の割合で用いら
れる。 ポリアクリルアミドゲル膜がアガロースを含有
する場合には、ゲル形成用溶液の温度を変化させ
ることにより適当な液粘度にコントロールするこ
とが可能となるため、その流動性を止めることが
でき、またゲル膜を成形する操作において成形し
やすくなるとの利点がある。 ゲル媒体層にはPH緩衝剤を含有させることもで
きる。緩衝剤としては、電気泳動分析される試料
に応じて、PH2.5から10.0の範囲内のPH値に緩衝
できる公知の緩衝剤から適宜選択して用いること
ができる。 用いうる緩衝剤としては、日本化学会編「化学
便覧 基礎編」（東京、丸善(株)1966年発行）1312
−1320ページ；青木、永井編「最新電気泳動法」
（東京、広川書店、1973年発行、320−322ペー
ジ；「Data for Biochemical Research」（R.M.
C.Dawson et al.編、第２版、Oxford at the
Clarendon Press、1969年発行）476−508ペー
ジ；「Biochemistry」５、467（1966）、
「Analytical Biochemistry」104、300−310
（1980）等に記載の緩衝剤が挙げられる。 緩衝剤の例としては、バルビタールを含む緩衝
剤、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
（Tris）を含む緩衝剤、燐酸塩を含む緩衝剤、ホ
ウ酸塩を含む緩衝剤、酢酸または酢酸塩を含む緩
衝剤、クエン酸またはクエン酸塩を含む緩衝剤、
乳酸または乳酸塩を含む緩衝剤、グリシンを含む
緩衝剤、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）
グリシン（Bicine）、Ｎ−２−ヒドロキシエチル
ピプラジン−N′−２−ヒドロキシプロパン−３
−スルホン酸（HEPPSO）またはその塩、Ｎ−
２−ヒドロキシエチルピペラジン−N′−３−プ
ロパンスルホン酸（EPPS）またはその塩、Ｎ−
〔トリス（ヒドロキシメチル）］−３−アミノプロ
パンスルホン酸（TAPS）またはその塩等をおよ
び、これらのいずれかと必要により組合せられる
酸、アルカリ、または塩等を挙げることができ
る。好ましい緩衝剤の具体例としては、燐酸二水
素カリウム−燐酸水素二ナトリウム、Tris・ホ
ウ酸ナトリウム、Tris・ホウ酸ナトリウム・
EDTA2Na塩、Tris・クエン酸、バルビタール
ナトリウム・酢酸ナトリウム、バルビタールナト
リウム・塩酸、バルビタール・バルビタールナト
リウム、酢酸・酢酸ナトリウム、乳酸・乳酸ナト
リウム、クエン酸−燐酸水素二ナトリウム、ビシ
ン（Bicine）、HEPPSO、HEPPSOナトリウム
塩、EPPS、EPPSナトリウム塩、TAPS、
TAPSナトリウム塩等を挙げることができる。 本発明の電気泳動用媒体材料における電気泳動
用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜）は、上記
のようにアクリルアミドに代表される単量体、二
官能性のアリル（allyl）化合物またはアクリル
化合物（架橋剤）、水溶性ポリマー、およびアガ
ロースを、実質的に均一な水溶液中で単量体と架
橋剤とをラジカル架橋重合させて得られるもので
あり、単量体と架橋剤から形成された三次元架橋
重合体に水溶性ポリマーとアガロースが実質的に
分散されて、後二者のポリマー鎖が三次元架橋重
合体とからみあつている構造を有すると推定され
る。 上記のラジカル架橋重合反応は分子状酸素の不
存在下で過酸化物の存在および／または紫外線照
射等公知の方法により発生させることができる。
さらに、この架橋重合反応は加熱または紫外線照
射により加速することもできる。 ラジカル架橋重合用触媒としては、
「Electrophoresis」1981、２、213−219、同
1981、２、220−228；青木、永井編「最新電気泳
動法」（1973年発行）等に記載の公知の低温ラジ
カル重合開始剤のうちから適宜選択して用いるこ
とができる。好ましいラジカル重合開始剤の具体
例としては、β−ジメチルアミノプロピオニトリ
ル（DMAPN）・ペルオクソ二硫酸アンモニウム
混合物、Ｎ，Ｎ，N′，N′−テトラメチルエチレ
ンジアミン（TEMED）・ペルオクソ二硫酸アン
モニウム混合物、TEMED・リボフラビン混合
物、TEMED・リボフラビン・過酸化水素混合物
と紫外線照射の組合せ等が挙げられる。ラジカル
重合開始剤の含有量は、単量体と架橋剤の合計重
量に対して約0.3重量％から約５重量％、そして
好ましくは約0.5重量％から約３重量％の範囲で
ある。 ゲル媒体層は、平滑表面を有する支持体の上に
設けられた前述の接着層の上にゲル形成液を公知
の方法により塗布して設けたのち、ゲル形成液を
架橋重合させることにより、層状に成形すること
ができる。 ゲル形成液を支持体の表面で架橋重合させる場
合には、ゲル形成液の上を更にカバーフイルム、
シートまたは板などの被覆材料でおおうことがで
きる。この目的に使用されるカバーフイルム、シ
ート、または板としては前記支持体と同様な素材
からなるものを用いることができる。この被覆材
料の厚さは300μｍ以下であり、実用的に好まし
い範囲としては約4μｍ〜約200μｍ、特に好まし
い範囲としては約4μｍ〜約100μｍである。 なお、ポリアクリルアミドゲル膜には、湿潤剤
としてグリセリン、エチレングリコール等のポリ
オール化合物を含有させることもできる。ポリオ
ール化合物の含有量は、ゲル膜の容積に対して約
5w／ｖ％から約40w／ｖ％の範囲から選ばれる。
これらのうちではグリセリンが特に好ましい。湿
潤剤を配合することによりゲル膜の保存時の極端
な水分の蒸発による乾燥を防ぐことが可能とな
り、また極端な乾燥に起因するもろさの発生を防
ぎ、ひびわれを防ぐ等のゲル膜の物性が改善され
るとの利点がある。 本発明の電気泳動用媒体材料における電気泳動
用媒体層（ポリアクリルアミドゲル膜）は支持体
との接着性が高い（接着力が大きい）ため、通常
の工程においては電気泳動用媒体層と支持体とは
常に一体として処理することができる。従つて、
本発明の電気泳動用媒体材料を用いることによつ
て、特に蛋白質または複合蛋白質の電気泳動操作
において従来必要とされていた複雑な操作工程の
省略が可能になり、また支持体上に電気泳動用媒
体層（ポリアクリルアミドゲル膜）をのせたまま
で、電気泳動操作および染色操作を実施すること
が可能となる。 次に本発明の実施例を示す。 実施例 １ 紫外線照射処理により表面を親水性にした厚さ
180μｍのポリエチレンテレフタレート（PET）
シート（支持体）上に約0.5μｍの厚み（固形分）
になるように第１表記載のセルロース誘導体をア
セトンに溶解して得た塗布液を塗布し、約110℃
で乾燥してセルロース誘導体接着層を形成した。

【表】 まず、PETシート（支持体）と接着層との間
の接着性をクロスカツト法により評価した。その
結果、試料１〜３（本発明に従う試料）は接着性
が良好であつた。 支持体上に設けられた各接着層の上に、アクリ
ルアミド9.5ｇ、BIS0.5ｇ、リン酸水素二ナトリ
ウム・十二水素3.58ｇ、リン酸二水素ナトリウ
ム・二水塩0.33ｇ、およびSDS0.10ｇを含有する
100mlの溶液に重合開始剤としてペルオクソ二硫
酸アンモニウム（５重量％）1.3ml、TEMED33μ
を加えたものを0.5mmの厚みで成形し、ポリア
クリルアミドゲル膜を形成させた。 また別にセルロース誘導体接着層を設けなかつ
た以外は同様にしてPETシート上にポリアクリ
ルアミドゲル膜を形成させ比較試料を調製した。 得られたゲル膜を指で押さえ、ゲル膜と支持体
間の接着性を評価した。その結果、試料１〜３
（本発明に従う試料）を装着層としたものは装着
性が優れていたが、比較試料は接着性が劣つてい
た。 実施例 ２ 実施例１の第１表と同じセルロース誘導体接着
層が形成されたPETシートを作成し、この接着
層の上にアクリルアミド9.5ｇ、BIS0.5ｇ、アガ
ロース1600（和光純薬(株)製）0.3ｇ、ポリアクリル
アミド2.5ｇ、リン酸水素二ナトリウム・十二水
塩3.58ｇ、リン酸二水素ナトリウム・二水塩0.33
ｇ、およびSDS0.10ｇからなる100mlの溶液に重
合開始剤として過硫酸アンモニウム（５重量％）
1.3ml、TEMED33μを加えたものを0.5mmの厚
みで成形しポリアクリルアミドゲル膜を形成させ
て三種類の試料（試料１〜３）を得た。 また、PET上に直接上記のポリアクリルアミ
ドゲル膜を形成させることにより比較試料も調製
した。 このゲル膜を使用して、標準蛋白質の電気泳動
にかけた。次いで、ゲル膜を、0.1％コーマシー
ブルー（Coomassie Blue）Ｒ−250（Color
Index Constitution Number 42660）に浸漬し、
染色を行ない、この染色工程における支持体とゲ
ル膜との接着状態を観察した。 比較試験では、ゲル膜は染色液につけると同時
に支持体から完全に剥離した。 一方、試料１〜３（本発明に従うもの）におい
ては、ゲル膜はいずれも染色工程において終始支
持体上に完全に接着していた。しかも電気泳動特
性にはいずれについても問題はなかつた。 実施例 ３ 実施例１の第１表と同じセルロース誘導体接着
層が形成されたPETシート上に実施例２と同様
にしてポリアクリルアミドゲル膜を形成させて三
種類の試料（試料１〜３）を調製した。また、実
施例２と同様にして比較試料も調製した。 このゲル膜を支持体ごと裁断加工したのち、ゲ
ル膜の切口を観察したところ、比較試料について
はゲル膜の剥離が一部観察されたのに対して、試
料１〜３（本発明）についてはいずれも裁断口の
接着性は良好で、支持体ごと裁断加工できること
がわかつた。 実施例 ４ 実施例１の第１表と同じセルロース誘導体接着
層が形成されたPETシート上にアクリルアミド
4.56ｇ、BISO0.24ｇ、ポリアクリルアミド1.2ｇ、
アガロース0.3ｇ、トリス（ヒドロキシメチル）
アミノメタン［CAS Registry No.77−86−１］
1.08ｇ、ホウ酸0.55ｇおよびEDTA・2Na塩93
mg、グリセリン20ｇを含有する100ml溶液に重合
開始剤として過硫酸アンモニウム（5wt％）1.3
ml、TEMED33μを加えたものを１mmの厚みで
塗布し、窒素雰囲気下で重合させポリアクリルア
ミド膜を形成させた。 大腸菌のプラスミドpBR−322を制限酵素AsuI
で処理し、上述のゲル膜にて電気泳動操作を行な
い、エチジウム染色によりDNAの分解パターン
を調べたところ正常な染色パターンを示した。 ゲル膜をカツターナイフを用いて裁断し、サン
プル注入口を形成させた、切口は鋭くカツトでき
た。更に分離されたDNAハンドを高い精度で分
取ることが出来ることもわかつた。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 下記の各層が順次積層されてなる三層構造を
   含む電気泳動用媒体材料： [] プラスチツク支持体層； [] セルロース誘導体を含有する接着層； および、 [] アクリルアミド系化合物と架橋剤が水の存
   在下で架橋重合してなり、変性剤として陰イオ
   ン界面活性剤を含むポリアクリルアミド系水性
   ゲル電気泳動用媒体層。 ２ 上記媒体層がさらに水溶性ポリマーおよびア
   ガロースを含むことを特徴とする特許請求の範囲
   第１項記載の電気泳動用媒体材料。 ３ 上記陰イオン界面活性剤がアルキル硫酸塩で
   あることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載
   の電気泳動用媒体材料。 ４ 上記陰イオン界面活性剤がドデシル硫酸ナト
   リウムであることを特徴とする特許請求の範囲第
   １項記載の電気泳動用媒体材料。 ５ 上記プラスチツク支持体層がポリエチレンテ
   レフタレートからなることを特徴とする特許請求
   の範囲第１項記載の電気泳動用媒体材料。 ６ セルロース誘導体を含有する接着層が、実質
   的にセルロース誘導体のみからなる層であること
   を特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳
   動用媒体材料。 ７ セルロース誘導体が、ジアセチルセルロー
   ス、トリアセチルセルロースおよびニトロセルロ
   ースからなる群より選ばれたものであることを特
   徴とする特許請求の範囲第１項もしくは第６項記
   載の電気泳動用媒体材料。