JPH0481966B2 - - Google Patents
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- JPH0481966B2 JPH0481966B2 JP60025494A JP2549485A JPH0481966B2 JP H0481966 B2 JPH0481966 B2 JP H0481966B2 JP 60025494 A JP60025494 A JP 60025494A JP 2549485 A JP2549485 A JP 2549485A JP H0481966 B2 JPH0481966 B2 JP H0481966B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- carnosine
- mice
- acid
- reaction
- administration
- Prior art date
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- Expired - Lifetime
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-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
産業上の利用分野
本発明はＬ−カルノシンまたはその塩を有効に
成分として含有する免疫調節剤に関する。 従来の技術 免疫機能の変調にもとづく諸種の疾患の治療の
ため、免疫調節剤と総称される各種の薬剤が開発
されつつあるが、本明細書で言う免疫調節剤とは
免疫反応の異常低下を回復し、過度の昂進を抑制
して正常機能維持に作用する薬剤を言う。この範
ちゆうに属する薬剤としてレバミゾール（アルド
リツチ社）を代表する種々の薬剤が開発されてき
た。しかしながらこれらの従来の免疫調節剤は生
体物質ではない化学物質であるため、副作用に対
する懸念を完全に払拭することはできず、事実或
る免疫調節剤については注目すべき副作用が報告
されている。 発明が解決しようとする問題点 免疫調節作用は本来、恒常性維持の生理機能で
あるから、その生理機能は生体中に含まれる生理
活性物質によつて調節されていることが推測され
る。したがつて、本発明は従来の化学物質に代
り、副作用の少ない生理活性物質による免疫調節
剤を調整することを目的とする。 問題を解決するための手段 本発明者らは多年にわたる、生体中に含まれれ
るω−アミノ酸の生理活性作用の研究中にその誘
導体で生理活性物質であるＬ−カルノシンに免疫
調節作用があることを免疫学的に確認して本発明
を完成させた。これまでは上に定義されたような
免疫機能を調節する生理活性物質は発見できなか
つたことは言うまでもないが、Ｌ−カルノシンが
免疫調節作用を有することは全く知られていなか
つた。 Ｌ−カルノシンすなわちβ−アラニル−Ｌ−ヒ
スチジンは1900年グレウイツチ（Gulewitsch）
によつてリービツヒの肉エキス中から発見され
た、Ｌ−ヒスチジンとβ−アラニンよなるジペプ
タイドであつて、哺乳動物の骨格筋中に多量に含
有されている。 発見以来その生理学的存在意義あるいは薬理的
有用性について数多くの研究者によつて研究が行
なわれたが、今日まで未解決のままであつた。 Ｌ−カルノシンは融点250℃（分解）、〔α〕20 D＝
＋20.0°（H2O）で、無味、無臭の水に溶け易い白
色結晶性粉末である。つぎの構造式 で表わされ、その水溶液のPHは8.0〜8.5である。 Ｌ−カルノシンは諸種の哺乳動物の、主として
骨格筋に多量（約0.1〜0.3％）に存在する物質
で、日常食肉類より食品として摂取され必須アミ
ノ酸Ｌ−ヒスチジンの供給源である。またＬ−ヒ
スチジンとβ−アラニンとから生合成される。摂
取されたＬ−カルノシンは吸収後カルノシナーゼ
によりＬ−ヒスチジンとβ−アラニンに分解され
て栄養素となり、一部はＬ−カルノシンに再合成
される〔Ｌ−カルノシン生合成の中間物質として
β−アラニル−１−メチル−ヒスチジン
（Anserine）がある〕。 上記のごとくＬ−カルノシンは食品類似の安全
性の高い物質であり、吸収後は諸臓器中に存在す
るカルノシナーゼにより分解されるので、他の多
くの医薬品が肝臓で代謝され、肝機能の負担とな
るとは全く異なる物質である。 つぎにＬ−カルノシンの急性毒性について述べ
る。 急性毒性 マウスを１群10匹とした種々の容量のＬ−カル
ノシンを腹腔内ならびに経口的に投与し、投与後
５時間の急性中毒症状を観察した。LD50は72時
間後の死亡数よりフアンデアヴエルデン
（Vander Waerden）法により算出した。Ｌ−カ
ルノシンは投与液量が0.1〜0.3ml／10ｇになるよ
うに生理食塩液に溶解した。 Ｌ−カルノシンの中毒症状としては15000mg／
Kg腹腔内投与（LD100）後約30分頃より自発運動
の低下を招き腹位をとり呼吸数は減少して不整と
なるが、正向反射あるいは逃避反射の消失はみら
れず、時々挙尾反応を示したり間代性痙れんの発
現をみるものが半数にみられた。さらに症状が進
むと横転を繰り返し、接触刺激に対して反射亢進
し痙れんの誘発がみられるようになり、強直性痙
れんに移行し死に至つた。１時間30分後に半数、
２時間後に80％、５時間後には全例が死亡した。
15000mg／Kgの経口投与後には殆んど影響を示さ
なかつたが、12時間後に10例中１例の死亡を認め
た。
成分として含有する免疫調節剤に関する。 従来の技術 免疫機能の変調にもとづく諸種の疾患の治療の
ため、免疫調節剤と総称される各種の薬剤が開発
されつつあるが、本明細書で言う免疫調節剤とは
免疫反応の異常低下を回復し、過度の昂進を抑制
して正常機能維持に作用する薬剤を言う。この範
ちゆうに属する薬剤としてレバミゾール（アルド
リツチ社）を代表する種々の薬剤が開発されてき
た。しかしながらこれらの従来の免疫調節剤は生
体物質ではない化学物質であるため、副作用に対
する懸念を完全に払拭することはできず、事実或
る免疫調節剤については注目すべき副作用が報告
されている。 発明が解決しようとする問題点 免疫調節作用は本来、恒常性維持の生理機能で
あるから、その生理機能は生体中に含まれる生理
活性物質によつて調節されていることが推測され
る。したがつて、本発明は従来の化学物質に代
り、副作用の少ない生理活性物質による免疫調節
剤を調整することを目的とする。 問題を解決するための手段 本発明者らは多年にわたる、生体中に含まれれ
るω−アミノ酸の生理活性作用の研究中にその誘
導体で生理活性物質であるＬ−カルノシンに免疫
調節作用があることを免疫学的に確認して本発明
を完成させた。これまでは上に定義されたような
免疫機能を調節する生理活性物質は発見できなか
つたことは言うまでもないが、Ｌ−カルノシンが
免疫調節作用を有することは全く知られていなか
つた。 Ｌ−カルノシンすなわちβ−アラニル−Ｌ−ヒ
スチジンは1900年グレウイツチ（Gulewitsch）
によつてリービツヒの肉エキス中から発見され
た、Ｌ−ヒスチジンとβ−アラニンよなるジペプ
タイドであつて、哺乳動物の骨格筋中に多量に含
有されている。 発見以来その生理学的存在意義あるいは薬理的
有用性について数多くの研究者によつて研究が行
なわれたが、今日まで未解決のままであつた。 Ｌ−カルノシンは融点250℃（分解）、〔α〕20 D＝
＋20.0°（H2O）で、無味、無臭の水に溶け易い白
色結晶性粉末である。つぎの構造式 で表わされ、その水溶液のPHは8.0〜8.5である。 Ｌ−カルノシンは諸種の哺乳動物の、主として
骨格筋に多量（約0.1〜0.3％）に存在する物質
で、日常食肉類より食品として摂取され必須アミ
ノ酸Ｌ−ヒスチジンの供給源である。またＬ−ヒ
スチジンとβ−アラニンとから生合成される。摂
取されたＬ−カルノシンは吸収後カルノシナーゼ
によりＬ−ヒスチジンとβ−アラニンに分解され
て栄養素となり、一部はＬ−カルノシンに再合成
される〔Ｌ−カルノシン生合成の中間物質として
β−アラニル−１−メチル−ヒスチジン
（Anserine）がある〕。 上記のごとくＬ−カルノシンは食品類似の安全
性の高い物質であり、吸収後は諸臓器中に存在す
るカルノシナーゼにより分解されるので、他の多
くの医薬品が肝臓で代謝され、肝機能の負担とな
るとは全く異なる物質である。 つぎにＬ−カルノシンの急性毒性について述べ
る。 急性毒性 マウスを１群10匹とした種々の容量のＬ−カル
ノシンを腹腔内ならびに経口的に投与し、投与後
５時間の急性中毒症状を観察した。LD50は72時
間後の死亡数よりフアンデアヴエルデン
（Vander Waerden）法により算出した。Ｌ−カ
ルノシンは投与液量が0.1〜0.3ml／10ｇになるよ
うに生理食塩液に溶解した。 Ｌ−カルノシンの中毒症状としては15000mg／
Kg腹腔内投与（LD100）後約30分頃より自発運動
の低下を招き腹位をとり呼吸数は減少して不整と
なるが、正向反射あるいは逃避反射の消失はみら
れず、時々挙尾反応を示したり間代性痙れんの発
現をみるものが半数にみられた。さらに症状が進
むと横転を繰り返し、接触刺激に対して反射亢進
し痙れんの誘発がみられるようになり、強直性痙
れんに移行し死に至つた。１時間30分後に半数、
２時間後に80％、５時間後には全例が死亡した。
15000mg／Kgの経口投与後には殆んど影響を示さ
なかつたが、12時間後に10例中１例の死亡を認め
た。
【表】
DDY系雄マウスに対する急性毒性（72時間値）
は表に示す通りであり、Ｌ−カルノシンは極めて
毒性の低い化合物といえる。 またＬ−カルノシンはすでに約10年以前よりス
ペイン国のリサ社において食欲不振治療剤として
製薬化されているように、既に安全性の確認され
ている物質である。またＬ−カルノシンの移植癌
に対する有効量はマウス当り１mg、すなわち50
mg／Kgであるが、これは上記のような腹腔内投与
による急性毒性LD50、9087mg／Kgの1/181に相当
することからもＬ−カルノシンの安全性は充分に
推測される。 Ｌ−カルノシンの合成法は公知であり
（Jourmal of Biological Chemistry、108、753、
1935）、カルボベンズオキシβ−アラニンを五塩
化リンでクロライドとし、メタノールでメチルエ
ステルに導き、ヒドロアザイドを経てアザイドと
なし、Ｌ−ヒスチジンメチルエステルとカツプリ
ングし、最後に接触還元によつてカルボベンズオ
キシ基をはずすことによつてＬ−カルノシンを得
ることができる。本発明のＬ−カルノシンの塩か
らなる治療剤をも包含するが、Ｌ−カルノシンの
塩としてはカルボン酸基に基づく塩と、アミノ基
にもとづく、薬理学上許容される酸との酸付加塩
があり、またカルボン酸基とアミノ基の双方にも
とづく塩がある。カルボン酸基にもとづく塩には
ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウ
ム、亜鉛およびアルミニウムのような金属との
塩、アンモニウム塩および置換アンモニウム塩、
たとえばトリエチルアミンのようなトリアルキル
アミンその他のアミンとの塩があり、アミノ基に
もとづく塩には塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、プロ
ピオン酸、乳酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、
マレイン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスル
ホン酸などの無機酸、有機酸との塩があるが、こ
れらはそれ自体公知の方法により、遊離のＬ−カ
ルノシンを科学量論的に計算された量の、選択さ
れた酸または塩基と反応させることによつて製造
することができる。 つぎに実験例をあげてＬ−カルノシンの優れた
免疫調節作用を説明する。 実験方法 マウスを用い溶血プラツク法（PFC）法、血
球凝集反応（Hemagglutination test）および遅
延型過敏症反応（Delayed Hypersensitivity
Reaction）により免疫調節作用を調べた。 (1) 溶血プラツク法（PFC法） カニンガム（Canningham）法を改良した液
体室−スライド法（橋本他：免疫実験操作法
Ａ、第491〜494頁、1972年、日本免疫学会編）
により、プラツク生成細胞（PFC.Plaque
forming cell）を計測し、抗体産生能を調べ
た。感作には羊の赤血球細胞（SRBC、
Sheepred blood cell、静岡県実験動物共同組
合より入手）を用い、原則として、これをリン
酸塩生理食塩水緩衝液（PBS.Phosphate
buffered saline）で１ml中12.5×108個の
SRBCを含む溶液を調製し、その0.2ml（2.5×
108個）をDDYマウス（静岡県実験動物共同組
合より入手、５週令、雄性）の尾静脈から注入
した。反応培地は10％の牛胎児血清（FCS）を
含むイーグルMEM培地（日水製薬株式会社）
を用い、これに４日後に取り出した脾臓細胞４
×107／mlを0.1ml、１ml中2.5×109個のSRBC
を含む溶液0.5ml（12.5×108個）および1/4希釈
補体用モルモツト血清を0.4ml混合した溶液を
チエンバー内に封入し、37℃で１時間保温し
た。この方法で約0.02mlのチエンバー内で50〜
150個のPFCが検出できる。 (2) 血清抗体値の測定 PFC反応の際マウス１群５匹の血液を頚動
脈採血により集め、常法に従つて血清を分離
し、血球凝集反応値（HAtiter）を求めた。常
法に従つて正常なうさぎの血清を0.5〜１％添
加したリン酸塩生理食塩水緩衝液（PBS）で
被検血清を希釈し、SRBCを用いて測定した。
陽性反応を示す最大希釈倍数を2Nで表示し、Ｎ
を抗体値とした。 (3) 遅延型過敏症反応（夏梅他：免疫実験操作法
Ａ、第614〜620頁、1972年、日本免疫学会編） DDYマウスの雄性、体重20ｇ前後、５週齢
のものを用い2.4.6−トリニトロクロロベンゼ
ン（塩化ピクリル、東京化成工業株式会社）に
よる接種型皮膚炎にて検出した。１％塩化ピク
リルのエタノール溶液に湿した４枚重ねのガー
ゼ片（１×１cm）を剃毛したマウスの腹部に10
秒間接触させて一次時感作を行つた。テスト用
二次感作は７日間目に１％の塩化ピクリルのオ
リーブ油溶液を耳の表裏に絵筆を用いて塗布す
ることにより行つた。反対側の耳にはオリーブ
油を塗り対照値とした。24時間後マウスをエー
テル麻酔し、1/1000mmまで測定可能なマイクロ
ゲージにより耳の厚さを1/100mmまで測定した。
遅延型過敏症反応の値は次式のようにして求め
た。 （24時間後の塩化ピクリル塗布耳の厚さ−塗
布前の耳の厚さ）−（24時間後のオリーブ油塗布
耳の厚さ−塗布前の耳の厚さ） (4) Ｌ−カルノシンの免疫調節作用の実験は抗原
量2.5×108個のSRBC、５週令のマウスを基準
として抗原量、Ｌ−カルノシンの投与量、動物
の週齢の条件をかえてつぎのように行つた。 (a) 抗原量をかえた場合 感作抗原量を５×107〜2.5×109個のSRBC
とし、Ｌ−カルノシン100mg／Kg投与による
影響をみた。 (b) マウスの週齢をかえた場合 ２週齢未成熟マウスから30週齢以上の老齢
マウスまでの使用し、Ｌ−カルノシン100
mg／Kg投与による影響をみた。 (c) Ｌ−カルノシンの量をかえてPFC反応、
血球凝集反応値、遅延型過敏症反応がどのよ
うな影響を受けるのかを検討した。 実験結果 実験結果を整理するとつぎのように表示され
る。
は表に示す通りであり、Ｌ−カルノシンは極めて
毒性の低い化合物といえる。 またＬ−カルノシンはすでに約10年以前よりス
ペイン国のリサ社において食欲不振治療剤として
製薬化されているように、既に安全性の確認され
ている物質である。またＬ−カルノシンの移植癌
に対する有効量はマウス当り１mg、すなわち50
mg／Kgであるが、これは上記のような腹腔内投与
による急性毒性LD50、9087mg／Kgの1/181に相当
することからもＬ−カルノシンの安全性は充分に
推測される。 Ｌ−カルノシンの合成法は公知であり
（Jourmal of Biological Chemistry、108、753、
1935）、カルボベンズオキシβ−アラニンを五塩
化リンでクロライドとし、メタノールでメチルエ
ステルに導き、ヒドロアザイドを経てアザイドと
なし、Ｌ−ヒスチジンメチルエステルとカツプリ
ングし、最後に接触還元によつてカルボベンズオ
キシ基をはずすことによつてＬ−カルノシンを得
ることができる。本発明のＬ−カルノシンの塩か
らなる治療剤をも包含するが、Ｌ−カルノシンの
塩としてはカルボン酸基に基づく塩と、アミノ基
にもとづく、薬理学上許容される酸との酸付加塩
があり、またカルボン酸基とアミノ基の双方にも
とづく塩がある。カルボン酸基にもとづく塩には
ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウ
ム、亜鉛およびアルミニウムのような金属との
塩、アンモニウム塩および置換アンモニウム塩、
たとえばトリエチルアミンのようなトリアルキル
アミンその他のアミンとの塩があり、アミノ基に
もとづく塩には塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、プロ
ピオン酸、乳酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、
マレイン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスル
ホン酸などの無機酸、有機酸との塩があるが、こ
れらはそれ自体公知の方法により、遊離のＬ−カ
ルノシンを科学量論的に計算された量の、選択さ
れた酸または塩基と反応させることによつて製造
することができる。 つぎに実験例をあげてＬ−カルノシンの優れた
免疫調節作用を説明する。 実験方法 マウスを用い溶血プラツク法（PFC）法、血
球凝集反応（Hemagglutination test）および遅
延型過敏症反応（Delayed Hypersensitivity
Reaction）により免疫調節作用を調べた。 (1) 溶血プラツク法（PFC法） カニンガム（Canningham）法を改良した液
体室−スライド法（橋本他：免疫実験操作法
Ａ、第491〜494頁、1972年、日本免疫学会編）
により、プラツク生成細胞（PFC.Plaque
forming cell）を計測し、抗体産生能を調べ
た。感作には羊の赤血球細胞（SRBC、
Sheepred blood cell、静岡県実験動物共同組
合より入手）を用い、原則として、これをリン
酸塩生理食塩水緩衝液（PBS.Phosphate
buffered saline）で１ml中12.5×108個の
SRBCを含む溶液を調製し、その0.2ml（2.5×
108個）をDDYマウス（静岡県実験動物共同組
合より入手、５週令、雄性）の尾静脈から注入
した。反応培地は10％の牛胎児血清（FCS）を
含むイーグルMEM培地（日水製薬株式会社）
を用い、これに４日後に取り出した脾臓細胞４
×107／mlを0.1ml、１ml中2.5×109個のSRBC
を含む溶液0.5ml（12.5×108個）および1/4希釈
補体用モルモツト血清を0.4ml混合した溶液を
チエンバー内に封入し、37℃で１時間保温し
た。この方法で約0.02mlのチエンバー内で50〜
150個のPFCが検出できる。 (2) 血清抗体値の測定 PFC反応の際マウス１群５匹の血液を頚動
脈採血により集め、常法に従つて血清を分離
し、血球凝集反応値（HAtiter）を求めた。常
法に従つて正常なうさぎの血清を0.5〜１％添
加したリン酸塩生理食塩水緩衝液（PBS）で
被検血清を希釈し、SRBCを用いて測定した。
陽性反応を示す最大希釈倍数を2Nで表示し、Ｎ
を抗体値とした。 (3) 遅延型過敏症反応（夏梅他：免疫実験操作法
Ａ、第614〜620頁、1972年、日本免疫学会編） DDYマウスの雄性、体重20ｇ前後、５週齢
のものを用い2.4.6−トリニトロクロロベンゼ
ン（塩化ピクリル、東京化成工業株式会社）に
よる接種型皮膚炎にて検出した。１％塩化ピク
リルのエタノール溶液に湿した４枚重ねのガー
ゼ片（１×１cm）を剃毛したマウスの腹部に10
秒間接触させて一次時感作を行つた。テスト用
二次感作は７日間目に１％の塩化ピクリルのオ
リーブ油溶液を耳の表裏に絵筆を用いて塗布す
ることにより行つた。反対側の耳にはオリーブ
油を塗り対照値とした。24時間後マウスをエー
テル麻酔し、1/1000mmまで測定可能なマイクロ
ゲージにより耳の厚さを1/100mmまで測定した。
遅延型過敏症反応の値は次式のようにして求め
た。 （24時間後の塩化ピクリル塗布耳の厚さ−塗
布前の耳の厚さ）−（24時間後のオリーブ油塗布
耳の厚さ−塗布前の耳の厚さ） (4) Ｌ−カルノシンの免疫調節作用の実験は抗原
量2.5×108個のSRBC、５週令のマウスを基準
として抗原量、Ｌ−カルノシンの投与量、動物
の週齢の条件をかえてつぎのように行つた。 (a) 抗原量をかえた場合 感作抗原量を５×107〜2.5×109個のSRBC
とし、Ｌ−カルノシン100mg／Kg投与による
影響をみた。 (b) マウスの週齢をかえた場合 ２週齢未成熟マウスから30週齢以上の老齢
マウスまでの使用し、Ｌ−カルノシン100
mg／Kg投与による影響をみた。 (c) Ｌ−カルノシンの量をかえてPFC反応、
血球凝集反応値、遅延型過敏症反応がどのよ
うな影響を受けるのかを検討した。 実験結果 実験結果を整理するとつぎのように表示され
る。
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
実験結果の考察
１ 成熟マウスで抗原量を変えた場合のPFC反
応および血球凝集反応値（HAtiter）に及ぼす
影響 これらの試験法は免疫調節作用物質をスクリ
ーニングするときは標準的方法である。正常な
動物の脾臓では抗原量を少なくし抗体応答を低
く保つような条件ではこの反応を増強し、逆に
十分な抗原を与えて応答を高くした場合にはこ
れを抑制することが知られている。Ｌ−カルノ
シン100mg／Kgを６日間投与後それぞれ５×107
個、５×108個および2.5×109個のSRBCで感作
し、４日後のPFC反応、血球凝集反応値をみ
たのが第２表である。正常群では抗原量に比例
してPFCが増加しており、これに対してＬ−
カルノシン投与群では抗原量の少ない場合（５
×107SRBC）には30％増加させ、抗原量の多
い場合（５×108、2.5×109SRBC）には30％減
少させることがわかつた。この結果はSRBCに
対する血球凝集反応値でも裏づけられ、５×
108個のSRBCでは変わらないが５×107個の
SRBCでは３から４へ上昇し、2.5×109個の
SRBCでは10から８へと下降した。 ２ マウスの週齢を変えた場合のPFC反応およ
び血球凝集反応値に及ぼす影響 一般に未成熟マウスは成熟マウスに比して強
い免疫応答を示し加齢とともに低下することが
知られている。第３表はそれぞれ２、５、30週
齢のマウスに100mg／KgのＬ−カルノシンを９
日間投与して正常群と比較したものであるが成
熟マウス（５週齢）のPFC応答には影響を及
ぼさないが未成熟マウス（２週齢）の免疫応答
は抑制し、逆に老齢マウス（30週齢以上）の低
下したPFC応答はこれらを２倍にも増強させ
た。血球凝集反応値もこれを裏づけた。 ３ 免疫応答に及ぼすＬ−カルノシンの投与量の
影響 前述のようにＬ−カルノシンには免疫調節作
用があるが、免疫調節剤のもう一つの特徴とし
てその作用発現にはある至適用量のあることが
知られている。他の薬物のような正常な用量−
作用関係を示すのではなく、一定量以上投与す
るとその作用は強化されるどころか抑制的な現
象を現す。その機序についてはまだ不明である
が、Ｌ−カルノシンにおいてその点を調べてみ
た。PFC反応では2.5×108個のSRBCに対して
５週齢のマウスで行つた結果、50、250mg／Kg
６日間投与で増強作用を示し、500mg／Kg以上
でその反応が鎮静することが観察された。血球
凝集反応値でも同じく500mg／Kg以上で鎮静さ
れた（第４表）。１％塩化ピクリルに対する
DHRでは50、250、500mg／Kgと投与量に従つ
て反応が増強された（第５表）。このように
DHRを増強させることからもＬ−カルノシン
が免疫調節作用を有することが証明された。 推定できる臨床投与量 溶血プラツク法（PFC）および遅延型過敏症
反応（DHR）の動物実験の結果からＬ−カルノ
シンの100mg／Kg／日（皮下投与）が免疫調節作
用の至適用量であり、これから50Kgの成人で５
ｇ／日という値が得られる。Ｌ−カルノシンの構
成成分はβ−アラニンとＬ−ヒスチジンという生
体内アミノ酸であり、したがつてＬ−カルノシン
は免疫調節剤として安全性も高く、副作用等の心
配なしに使用することができる。 臨床適用が予想される免疫疾患 Ｌ−カルノシンは免疫異常の関与する疾患に非
特異的に用いられるものでその疾病の一部を代表
として挙げれば次のとおりである。 血清病、エリテマトーデス、諸種のリウマチ、
混合型のクリオグロブリン血症、混合型結合組織
病、HBV（Ｂ型肝炎ウイルス）抗原抗体複合体
病、免疫芽球性リンパ節症、硬皮症、間葉失調症
候群、重症筋無力症、橋本病、バセドー病、アミ
ロイド症、ベーチエツト病、免疫不全症候群、ホ
ジキン病、多発性硬化症、臓器特異性自己免疫疾
患。 その他臓器移植時の免疫調節作用物質として最
適であると考えられる。 本発明の免疫調節剤は上記のような免疫異常の
関与する種々の疾患に対するＬ−カルノシンの経
口投与また非経口投与が都合よく行われるもので
あればどんな剤形のものであつてもよく、例えば
注射液、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、腸
溶剤、吸入剤、トローチ、軟膏剤などの種々の剤
形をあげることができるが、これらを症状に応じ
てそれぞれ単独で、または組合わせて使用する。
投与量は投与経路、剤形、症状などにより大きく
変ることは当然であるが、本発明の治療剤の典型
的な剤形、投与量および投与方法を例示するとつ
ぎのとおりである。
応および血球凝集反応値（HAtiter）に及ぼす
影響 これらの試験法は免疫調節作用物質をスクリ
ーニングするときは標準的方法である。正常な
動物の脾臓では抗原量を少なくし抗体応答を低
く保つような条件ではこの反応を増強し、逆に
十分な抗原を与えて応答を高くした場合にはこ
れを抑制することが知られている。Ｌ−カルノ
シン100mg／Kgを６日間投与後それぞれ５×107
個、５×108個および2.5×109個のSRBCで感作
し、４日後のPFC反応、血球凝集反応値をみ
たのが第２表である。正常群では抗原量に比例
してPFCが増加しており、これに対してＬ−
カルノシン投与群では抗原量の少ない場合（５
×107SRBC）には30％増加させ、抗原量の多
い場合（５×108、2.5×109SRBC）には30％減
少させることがわかつた。この結果はSRBCに
対する血球凝集反応値でも裏づけられ、５×
108個のSRBCでは変わらないが５×107個の
SRBCでは３から４へ上昇し、2.5×109個の
SRBCでは10から８へと下降した。 ２ マウスの週齢を変えた場合のPFC反応およ
び血球凝集反応値に及ぼす影響 一般に未成熟マウスは成熟マウスに比して強
い免疫応答を示し加齢とともに低下することが
知られている。第３表はそれぞれ２、５、30週
齢のマウスに100mg／KgのＬ−カルノシンを９
日間投与して正常群と比較したものであるが成
熟マウス（５週齢）のPFC応答には影響を及
ぼさないが未成熟マウス（２週齢）の免疫応答
は抑制し、逆に老齢マウス（30週齢以上）の低
下したPFC応答はこれらを２倍にも増強させ
た。血球凝集反応値もこれを裏づけた。 ３ 免疫応答に及ぼすＬ−カルノシンの投与量の
影響 前述のようにＬ−カルノシンには免疫調節作
用があるが、免疫調節剤のもう一つの特徴とし
てその作用発現にはある至適用量のあることが
知られている。他の薬物のような正常な用量−
作用関係を示すのではなく、一定量以上投与す
るとその作用は強化されるどころか抑制的な現
象を現す。その機序についてはまだ不明である
が、Ｌ−カルノシンにおいてその点を調べてみ
た。PFC反応では2.5×108個のSRBCに対して
５週齢のマウスで行つた結果、50、250mg／Kg
６日間投与で増強作用を示し、500mg／Kg以上
でその反応が鎮静することが観察された。血球
凝集反応値でも同じく500mg／Kg以上で鎮静さ
れた（第４表）。１％塩化ピクリルに対する
DHRでは50、250、500mg／Kgと投与量に従つ
て反応が増強された（第５表）。このように
DHRを増強させることからもＬ−カルノシン
が免疫調節作用を有することが証明された。 推定できる臨床投与量 溶血プラツク法（PFC）および遅延型過敏症
反応（DHR）の動物実験の結果からＬ−カルノ
シンの100mg／Kg／日（皮下投与）が免疫調節作
用の至適用量であり、これから50Kgの成人で５
ｇ／日という値が得られる。Ｌ−カルノシンの構
成成分はβ−アラニンとＬ−ヒスチジンという生
体内アミノ酸であり、したがつてＬ−カルノシン
は免疫調節剤として安全性も高く、副作用等の心
配なしに使用することができる。 臨床適用が予想される免疫疾患 Ｌ−カルノシンは免疫異常の関与する疾患に非
特異的に用いられるものでその疾病の一部を代表
として挙げれば次のとおりである。 血清病、エリテマトーデス、諸種のリウマチ、
混合型のクリオグロブリン血症、混合型結合組織
病、HBV（Ｂ型肝炎ウイルス）抗原抗体複合体
病、免疫芽球性リンパ節症、硬皮症、間葉失調症
候群、重症筋無力症、橋本病、バセドー病、アミ
ロイド症、ベーチエツト病、免疫不全症候群、ホ
ジキン病、多発性硬化症、臓器特異性自己免疫疾
患。 その他臓器移植時の免疫調節作用物質として最
適であると考えられる。 本発明の免疫調節剤は上記のような免疫異常の
関与する種々の疾患に対するＬ−カルノシンの経
口投与また非経口投与が都合よく行われるもので
あればどんな剤形のものであつてもよく、例えば
注射液、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、腸
溶剤、吸入剤、トローチ、軟膏剤などの種々の剤
形をあげることができるが、これらを症状に応じ
てそれぞれ単独で、または組合わせて使用する。
投与量は投与経路、剤形、症状などにより大きく
変ることは当然であるが、本発明の治療剤の典型
的な剤形、投与量および投与方法を例示するとつ
ぎのとおりである。
【表】
なお、ここで記述した用法、用量は単なる目安
であり、Ｌ−カルノシンは前述のように極めて安
全な物質であるから患者の症状により適宜増減す
ることは何ら差し支えない。 Ｌ−カルノシンは水に易溶であるため、無菌的
操作のもとに容易にＬ−カルノシンの例えば0.3
％、0.5％または1.0％の等張溶液をつくることが
できる。これを不活性ガス気流下にアンプルに封
入したものを普通の注射器によつて注射する。ま
た予め無菌的操作によりアンプルまたはバイアル
瓶に凍結乾燥して封入したＬ−カルノシン粉末を
注射直前に0.3％、0.5％または1.0％の等張溶液と
して直ちに注射に使用してもよい。 経口投与の粉末剤、顆粒剤、錠剤またはカプセ
ル剤は結合剤例えばシロツプアラビアゴム、ゼラ
チン、ソルビツト、トラガントまたはポリビニル
ピロリドン、賦形剤例えば乳糖、とうもろこしデ
ンプン、リン酸カルシウム、ソルビツトまたはグ
リシン、潤滑剤例えばステアリン酸マグネシウ
ム、タルク、ポリエチレングリコール、ヒドロキ
シプロピルメチルセルロースまたはシリカ、崩壊
剤例えば馬鈴薯デンプン、或は湿潤剤例えばラウ
ルル硫酸ナトリウムなどを使用し、当業界では慣
用の方法で製剤する。錠剤は当業界において周知
の方法でコーテイングしてもよい。 軟膏剤を製造するには、製剤界に公知の技術に
したがい、所望濃度の軟膏となる量のＬ−カルノ
シンの微粉末を軟膏基剤例えばサラシ密ロウ、鯨
ロウ、脱水ラノリン、白色ワセリン、高級アルコ
ール、マクロゴール類あるいはプラスチベース
（大正製薬K.K.製ハイドロカーボンゲル軟膏基
剤）、日本薬局方収載の親水性軟膏、吸水軟膏ま
たはこれらの混和物として混和し、これに必要に
応じゴマ油、落花生油、オリーブ油等の油類、樹
脂類、グリセリン、プロピレングリコール、界面
活性剤、殺菌剤、防黴剤、酸化防止剤等を添加
し、均質となるまで十分にかきまぜて練り合わせ
る。 つぎに本発明の免疫調節剤の実施例を挙げる。 実施例 １ （注射剤） 無菌的操作のもとに、合成したＬ−
カルノシンを0.3％、0.5％または1.0％（いずれも
Ｌ−カルノシンとして）の等張溶液としてアンプ
ルに充填した。 実施例 ２ 合成したＬ−カルノシンを用いて下記処方 Ｌ−カルノシン 0.2ｇ 乳 糖 0.34ｇ とうもろこしデンプン 0.45ｇ ヒドロキシプロピルメチルセルロース 0.01ｇ 顆粒剤 1.00ｇ で顆粒剤を製造した。 実施例 ３ （軟膏剤） 合成したＬ−カルノシンを用い、ハイドロカー
ボンゲル軟膏剤を基剤として下記処方 Ｌ−カルノシン 1.0ｇ ハイドロカーボンゲル軟膏剤 99.0ｇ 軟膏剤 100.0ｇ で１％軟膏剤を製造した。
であり、Ｌ−カルノシンは前述のように極めて安
全な物質であるから患者の症状により適宜増減す
ることは何ら差し支えない。 Ｌ−カルノシンは水に易溶であるため、無菌的
操作のもとに容易にＬ−カルノシンの例えば0.3
％、0.5％または1.0％の等張溶液をつくることが
できる。これを不活性ガス気流下にアンプルに封
入したものを普通の注射器によつて注射する。ま
た予め無菌的操作によりアンプルまたはバイアル
瓶に凍結乾燥して封入したＬ−カルノシン粉末を
注射直前に0.3％、0.5％または1.0％の等張溶液と
して直ちに注射に使用してもよい。 経口投与の粉末剤、顆粒剤、錠剤またはカプセ
ル剤は結合剤例えばシロツプアラビアゴム、ゼラ
チン、ソルビツト、トラガントまたはポリビニル
ピロリドン、賦形剤例えば乳糖、とうもろこしデ
ンプン、リン酸カルシウム、ソルビツトまたはグ
リシン、潤滑剤例えばステアリン酸マグネシウ
ム、タルク、ポリエチレングリコール、ヒドロキ
シプロピルメチルセルロースまたはシリカ、崩壊
剤例えば馬鈴薯デンプン、或は湿潤剤例えばラウ
ルル硫酸ナトリウムなどを使用し、当業界では慣
用の方法で製剤する。錠剤は当業界において周知
の方法でコーテイングしてもよい。 軟膏剤を製造するには、製剤界に公知の技術に
したがい、所望濃度の軟膏となる量のＬ−カルノ
シンの微粉末を軟膏基剤例えばサラシ密ロウ、鯨
ロウ、脱水ラノリン、白色ワセリン、高級アルコ
ール、マクロゴール類あるいはプラスチベース
（大正製薬K.K.製ハイドロカーボンゲル軟膏基
剤）、日本薬局方収載の親水性軟膏、吸水軟膏ま
たはこれらの混和物として混和し、これに必要に
応じゴマ油、落花生油、オリーブ油等の油類、樹
脂類、グリセリン、プロピレングリコール、界面
活性剤、殺菌剤、防黴剤、酸化防止剤等を添加
し、均質となるまで十分にかきまぜて練り合わせ
る。 つぎに本発明の免疫調節剤の実施例を挙げる。 実施例 １ （注射剤） 無菌的操作のもとに、合成したＬ−
カルノシンを0.3％、0.5％または1.0％（いずれも
Ｌ−カルノシンとして）の等張溶液としてアンプ
ルに充填した。 実施例 ２ 合成したＬ−カルノシンを用いて下記処方 Ｌ−カルノシン 0.2ｇ 乳 糖 0.34ｇ とうもろこしデンプン 0.45ｇ ヒドロキシプロピルメチルセルロース 0.01ｇ 顆粒剤 1.00ｇ で顆粒剤を製造した。 実施例 ３ （軟膏剤） 合成したＬ−カルノシンを用い、ハイドロカー
ボンゲル軟膏剤を基剤として下記処方 Ｌ−カルノシン 1.0ｇ ハイドロカーボンゲル軟膏剤 99.0ｇ 軟膏剤 100.0ｇ で１％軟膏剤を製造した。
Claims (1)
- １ Ｌ−カルノシンまたはその塩を有効成分とし
て含有する免疫調節剤。
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60025494A JPS61186322A (ja) | 1985-02-13 | 1985-02-13 | 免疾調節剤 |
| US06/792,157 US4717716A (en) | 1985-02-13 | 1985-10-28 | Immuno-regulator |
| SE8505121A SE466787B (sv) | 1985-02-13 | 1985-10-30 | Anvaendning av l-karnosin som immunoregulator foer behandling av immunsjukdomar |
| DK500585A DK171288B1 (da) | 1985-02-13 | 1985-10-31 | Anvendelse af L-carnosin eller et salt deraf til fremstilling af et immunregulerende middel til behandling af immunsygdomme |
| GB08527243A GB2170707B (en) | 1985-02-13 | 1985-11-05 | An immuno-regulator |
| DE19853540632 DE3540632A1 (de) | 1985-02-13 | 1985-11-15 | Immun-regulator |
| FR858517573A FR2577138B1 (fr) | 1985-02-13 | 1985-11-28 | Immuno-regulateur a base de l-carnosine |
| NL8600112A NL8600112A (nl) | 1985-02-13 | 1986-01-20 | Immuno-regulator. |
| CH262/86A CH666188A5 (de) | 1985-02-13 | 1986-01-23 | Immuno-regulator in form einer pharmazeutischen zusammensetzung. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60025494A JPS61186322A (ja) | 1985-02-13 | 1985-02-13 | 免疾調節剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61186322A JPS61186322A (ja) | 1986-08-20 |
| JPH0481966B2 true JPH0481966B2 (ja) | 1992-12-25 |
Family
ID=12167607
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60025494A Granted JPS61186322A (ja) | 1985-02-13 | 1985-02-13 | 免疾調節剤 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4717716A (ja) |
| JP (1) | JPS61186322A (ja) |
| CH (1) | CH666188A5 (ja) |
| DE (1) | DE3540632A1 (ja) |
| DK (1) | DK171288B1 (ja) |
| FR (1) | FR2577138B1 (ja) |
| GB (1) | GB2170707B (ja) |
| NL (1) | NL8600112A (ja) |
| SE (1) | SE466787B (ja) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6314728A (ja) * | 1986-07-03 | 1988-01-21 | Zeria Shinyaku Kogyo Kk | 肝障害の予防、治療剤 |
| US4942530A (en) * | 1987-03-02 | 1990-07-17 | Mazda Motor Corporation | Control of vehicle automatic transmission |
| US5110600A (en) * | 1988-01-25 | 1992-05-05 | The Regents Of The University Of California | Method of treating viral infections with amino acid analogs |
| JPH0235057A (ja) * | 1988-04-26 | 1990-02-05 | Kinuko Nagai | 機能性食品 |
| JPH0717505B2 (ja) * | 1989-02-23 | 1995-03-01 | 絹子 永井 | 骨粗鬆症予防剤 |
| DE69232586T2 (de) * | 1991-07-05 | 2002-11-28 | Peptech Ltd., North Ryde | Giftigkeit von tnf und lps ausschaltende peptide |
| US5955080A (en) * | 1991-07-26 | 1999-09-21 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Self-adjuvanting peptide vaccine delivery system and production thereof |
| AU660047B2 (en) * | 1991-09-09 | 1995-06-08 | King's College London | Method for the treatment of the complications and pathology of diabetes |
| CA2117199C (en) * | 1991-09-09 | 2004-12-28 | Jurgen Michaelis | Method for the treatment of the complications and pathology of diabetes |
| DE4307983A1 (de) * | 1993-03-13 | 1994-09-15 | Beiersdorf Ag | Wirkstoffe und kosmetische und dermatologische Zubereitungen |
| RU2056852C1 (ru) * | 1994-03-18 | 1996-03-27 | Иван Николаевич Головистиков | Средство для лечения аутоиммунных заболеваний с иммунодефицитом супрессоров и способ лечения аутоиммунных заболеваний |
| RU2058553C1 (ru) * | 1994-03-18 | 1996-04-20 | Иван Николаевич Головистиков | Способ определения супрессорного звена иммунного статуса человека |
| US5576287A (en) * | 1994-04-29 | 1996-11-19 | Wake Forest University | Method for treating acute renal disease and failure |
| JPH0881371A (ja) * | 1994-09-09 | 1996-03-26 | Suntory Ltd | 造血機能亢進剤 |
| KR960010020A (ko) | 1994-09-09 | 1996-04-20 | 도리이 신이치로 | 조혈 기능 항진제 |
| JP3877807B2 (ja) * | 1996-07-03 | 2007-02-07 | ゼリア新薬工業株式会社 | 口内炎治療・予防剤 |
| JPH1029939A (ja) * | 1996-07-17 | 1998-02-03 | Zeria Pharmaceut Co Ltd | 創傷治癒促進剤 |
| EP2188015A2 (en) * | 2007-09-11 | 2010-05-26 | Mondobiotech Laboratories AG | Use of salusin beta alone or in combination with octreotide as a therapeutic agent |
| IT1391251B1 (it) * | 2008-10-15 | 2011-12-01 | Innovative Nutrition & Pharma Srl | Composizione per il trattamento delle patologie articolari |
| JP2012219080A (ja) * | 2011-04-12 | 2012-11-12 | Anbas:Kk | 経口投与により腫瘍の発生又は増殖を抑止する組成物 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4446149A (en) * | 1981-12-14 | 1984-05-01 | Kineshiro Nagai | Medicine for treatment of cervical erosion |
| JPS6016934A (ja) * | 1983-07-06 | 1985-01-28 | Kaneshiro Nagai | 抗腫瘍剤 |
-
1985
- 1985-02-13 JP JP60025494A patent/JPS61186322A/ja active Granted
- 1985-10-28 US US06/792,157 patent/US4717716A/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-30 SE SE8505121A patent/SE466787B/sv not_active IP Right Cessation
- 1985-10-31 DK DK500585A patent/DK171288B1/da not_active IP Right Cessation
- 1985-11-05 GB GB08527243A patent/GB2170707B/en not_active Expired
- 1985-11-15 DE DE19853540632 patent/DE3540632A1/de active Granted
- 1985-11-28 FR FR858517573A patent/FR2577138B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1986
- 1986-01-20 NL NL8600112A patent/NL8600112A/nl not_active Application Discontinuation
- 1986-01-23 CH CH262/86A patent/CH666188A5/de not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| CH666188A5 (de) | 1988-07-15 |
| FR2577138A1 (fr) | 1986-08-14 |
| DK500585A (da) | 1986-08-14 |
| DK171288B1 (da) | 1996-08-26 |
| DK500585D0 (da) | 1985-10-31 |
| DE3540632A1 (de) | 1986-08-21 |
| GB8527243D0 (en) | 1985-12-11 |
| FR2577138B1 (fr) | 1990-06-22 |
| GB2170707A (en) | 1986-08-13 |
| JPS61186322A (ja) | 1986-08-20 |
| SE8505121L (sv) | 1986-08-14 |
| SE8505121D0 (sv) | 1985-10-30 |
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| NL8600112A (nl) | 1986-09-01 |
| GB2170707B (en) | 1989-02-15 |
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