JPH0510355B2

JPH0510355B2 -

Info

Publication number: JPH0510355B2
Application number: JP15188484A
Authority: JP
Inventors: Takeo Yoshioka; Yoshiharu Maeda; Rokuro Okamoto; Yasutaka Shimauchi; Tomoyuki Ishikura; Tsutomu Sawa; Tomio Takeuchi; Hamao Umezawa
Original assignee: MERUSHAN KK
Current assignee: MERUSHAN KK
Priority date: 1984-07-20
Filing date: 1984-07-20
Publication date: 1993-02-09
Also published as: JPS6130596A

Description

【発明の詳細な説明】

〔産業上の利用分野〕本発明は、マクロライド系抗生物質タイロシン
の新規誘導体に関し、特に化学的方法により製造
される新タイロシン誘導体に関する。〔従来の技術〕タイロシンは、マクロライド系抗生物質とし
て、最も古い部類に属し、動物の感染治療薬、飼
料添加物として、広汎に用いられている。そし
て、近年その抗菌活性を高めると同時に、生体内
での吸収排泄能を高めるべく、化学的又は生物学
的変換法により、各種の誘導体が提案されてい
る。前者に属するものとしては、殊に、タイロシン
の4″位水酸基の各種アシル誘導体、例えば、特開
昭53−137982号公報、同昭54−66692号公報、同
昭54−70291号公報等、後者に属するものとして
は、例えば、特公昭55−23272号公報等が挙げら
れる。〔発明が解決しようとする問題点〕上記公知タイロシン誘導体は、いずれもタイロ
シンに比し、試験管内試験において各種の病原菌
に対する抗菌活性が向上し、かつ、生体内での薬
剤の吸収排泄能が改良されている。しかし、抗菌活性が高いものは、薬剤の体内安
定性が劣り（例えば、哺乳類の肝臓ホモジネート
により容易に分解されるなど）、逆にその体内安
定性が改良されたものは、特定の臨床分離薬剤耐
性菌に対する抗菌活性が低いなどの理由により、
感染治療薬としての用途が限定される欠点があ
る。そこで、本発明は、該薬剤耐性菌に対し、強い
抗菌活性を示すと共に、マウスの肝臓ホモジネー
トでの分解に対して安定性を有する新タイロシン
誘導体を提供するものである。〔問題点を解決するための手段〕本発明者らは、タイロシンの各種誘導体の製造
とそれらの薬剤耐性菌株に対する抗菌活性との相
関性について、鋭意研究を重ねた結果、タイロシ
ン及びその３位−０−アシル誘導体の4″0−アシ
ル誘導体のうち、アシル基、フツソ原子によつて
置換された核置換フエニアアセチル基及びベンジ
ルスルホニル基を有する4″−側鎖化合物が、感受
性菌はもとより、薬剤耐性菌株に対しても強い抗
菌活性を示すと共に、マウスの肝臓ホモジネート
による分解に対して安定性を有することを見い出
し、本発明を完成したものである。しかして、本発明、下記式式中、Ｒは水素原子、アセチル基又はプロピニ
オル基を表わし、Ｙは基−CO−又は−SO₂−を
表わし、Ｚはベンジル基の２若しくは４位に結合
するフツソ原子又はアセチル基を表わす、で示されるタイロシン誘導体を提供するものであ
る。そして該誘導体の具体的なものとしては、タイ
ロシンのアグリコン部の３水酸基の水素原子がア
セチル基又はプロピニオル基で置換されたものを
含むタイロシンの4″位の水酸基の水素原子が４−
アセチルフエニルアセチル基、２−アセチルフエ
ニルアセチル基、４−フルオロフエニルアセチル
基、２−フルオロフエニルアセチル基、４−アセ
チルベンジルスルホニル基、２−アセチルベンジ
ルスルホニル基、４−フルオロベンジルスルホニ
ル基及び２−フルオロベンジルスルホニル基で置
換されたタイロシン誘導体を挙げることができ
る。これらの誘導体は、各種のグラム陽性細菌、グ
ラム陰性細菌、マイコプラズマ等の病原微生物に
対して強い抗菌力を示し、就中、スタフイロコツ
カス・アウレウス（Staphylococcus aureus）の
薬剤耐性菌株に対しても感受性菌に対するのに同
様の活性を有するだけでなく、マウスの肝臓ホモ
ジネートによる分解に対して安定性を示すことよ
り、医薬、動物薬、飼料添加剤等として有用であ
る。その活性は以下の試験により示される。抗菌活性ブレーン・ハート・インフユージヨン・ブロス
（PH7.5）を培地としたチユーブ・ダイリユーシヨ
ン法によつて測定した結果を下記の第１表に示
す。

【表】

【表】マウス肝臓ホモジネートに対する安定性試験 ICR系マウスの肝臓を５倍量の0.1M燐酸緩衝
液（PH7.2）と共にポツターホモゲナイザーによ
り（3000rpm，10min）ホモジネートとした。そ
の上清液（１ml）に被検体500μg／ml（10％メタ
ノール水）１mlを加え37℃で１時間反応させた後
100℃，３分間加熱後0.1M燐酸緩衝液（PH9.0）
１mlを加え酢酸エチル１mlにて抽出する。この有
機層のシリカゲル薄層クロマトグラフイー（クロ
ロホルム／メタノール／アンモニア＝15／1.2／
0.1）に付し、クロマトスキヤナー（283nm）に
て未変化体と加水分解体の生成比を求め、加水分
解物の生成を百分率で表わした。その結果を第２
表に示す。

【表】以上の結果より、本願発明の化合物は、マクロ
ライド感受性株及びその耐性菌に対して高い抗菌
活性を有し、かつ、哺乳類の肝臓ホモジネートに
よる加水分解試験において、高い安定性を有する
ため、優れた感染症治療薬となり得る。なお、本発明者らの先の提案（例えば、特開昭
53−137982号公報参照）によれば、マクロライド
耐性菌に最も有効なタイロシン誘導体として、
4″−Ｏ−フエニルチオアセチルタイロシンが挙げ
られる。しかし、該誘導体は、インビトロ
（invitro）での抗菌活性が高いにも拘わらず、生
体内（特に肝臓）でのエステラーゼにより4″−Ｏ
−位のフエニルチオアセチル基が100％加水分解
される如く、マウスにおける感染治療実験では、
満足する結果が得られていない。一方、上記肝臓
ホモジネートによる安定性試験で良好な結果を示
す、4″−Ｏ−位のフエニルアセチル誘導体は一般
に、耐性菌に対する抗菌活性が低いことが窺え
る。上記式（）で示される化合物は、タイロシン
又は３−Ｏ−アシルタイロシン（特公昭53−
13711号公報参照等）を出発原料として、例えば
前記特開昭53−137982号公報記載のそれ自体公知
の方法により、その３位、2′位及び／又は４位
の水酸基を保護した後、4″−Ｏ−位を所望のアシ
ル化剤によりアシル化し、次いで３位、2′位及
び／又は４位の水酸基保護基を部分加水分解に
より脱離せしめることによつて製造することがで
きる。また、より有利には、タイロシンの2′位（マイ
カミノースの２位）の水酸基をアセチルクロライ
ド又は酢酸無水物等を用いて選択的にアセチル化
した、下記式式中、Ｙは基−CO−又は−SO₂−を表わし、
Ｚはベンジル基の２若しくは４位に結合するフツ
ソ原子又はアセチル基を表わす、で示される酸の反応性誘導体と反応させて、2′−
Ｏ−アセチルタイロシンの4″−Ｏ−位及び４−
Ｏ−位に基

【式】を誘導せしめ更に部分加水分解により、2′−Ｏ−位のアセチ
ル基及び４−Ｏ−位の基

【式】を脱離せしめることにより製造することができる。この基

【式】の導入反応はそれ自体公知のアシル化法に従つて行うことがで
きる。例えば、該反応は溶媒の不在下に又は適当
な不活性溶媒、例えば、塩化メチレン、クロロホ
ルム、酢酸エチル、アセトン、ベンゼン、トルエ
ン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル等を用
い、一般に約−30℃乃至反応混合物の還流温度、
好ましくは−20〜60℃の温度において行うことが
できる。このとき、出発原料としてタイロシンを
用いるとき特にタイロシンの３位のＯ−アシル化
物の副生を避けるために室温以下の温度で反応さ
せることが望ましい。上記反応において、アシル化剤として使用され
る式（）の酸の反応性誘導体としては、ハライ
ド（特にクロライド）、酸無水物又は混合酸無水
物（例えば、式（）の酸とピバリン酸との無水
物）が挙げられる。かかる酸の反応性誘導体の使
用量は厳密には制限されるものではないが、一般
には2′−Ｏ−アセチルタイロシン１モル当り１〜
50モル、好ましくは２〜20モルの範囲内で使用す
ることができる。また、上記アシル化反応は必要に応じて酸結合
剤の存在下に行うことができる。使用しうる酸結
合剤としては、例えば、ピリジン、コリジン、Ｎ
−メチルピペリジン、トリエチルアミン、ジメチ
ルアニリン等の有機塩基を挙げることができる。
そして、該塩基の使用量としては、2′−Ｏ−アセ
チルタイロシン１モル当り一般に２〜50当量、好
ましくは２〜30当量であるが、ピリジン等の液状
塩基の場合にはそれらを大過剰に使用することに
より溶媒の代用とすることができる。かくして、2′−Ｏ−アセチルタイロシンの4″−
Ｏ−位及び４−Ｏ−位に基

【式】が導入された化合物が製造できる。該化合物は、反応混合物よりそれ
自体公知での方法により分離することができ、分
離した後又は分離することなく、更に次に示す部
分加水分解に付する。即ち、該化合物の2′位−Ｏ
−位及び４−Ｏ−位のアシル基の選択的脱離は
水と混和性で、かつ、該化合物を溶解する有機溶
媒を用い、必要により水を溶媒中に該化合物を溶
解もしくは懸濁せしめた後、還流下で予め2′−Ｏ
−位アセチル基を脱離せしめた後、反応液を放冷
し、更に該反応液に塩基を添加して処理すること
により、４−Ｏ−位のアシル基を脱離せしめ
る。なお、本反応に用いる有機溶媒としては、メ
タノール、エタノール等の低級アルカノール類、
テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類
が好適なものとして挙げられる。また、反応液を放冷後添加する塩基としては、
アンモニア、メチルアミン、ジメチルアミン等が
用いられる。これらの塩基の添加量は、使用する
塩基の種類よつて異なり、臨界的でないが、塩基
の濃度を１〜10重量パーセントの範囲に定めるの
が脱離反応の選択性、反応操作の観点から有利で
ある。この４−Ｏ−位アシル基の脱離反応は−
10〜40℃、好ましくは０〜５℃の温度で、約１〜
48時間攪拌下に行うことができる。かくして製造
される式（）で示される本発明の誘導体は、反
応液よりそれ自体公知の各種のクロマトグラフイ
ー処理等によつて単離、精製できる。以下、本発明を実施例によつて、更に詳細に説
明する。なお、実施例において、式の大環状ラクトン部を

【式】と略記する。実施例１ 2′−Ｏ−アセチル−4″−４−Ｏ−ジ（４−フ
ルオロフエニルアセチル）タイロシン４−フルオロフエニル酢酸5.0ｇ（32mmol）、
トリエチルアミン4.5ml（32mmol）を塩化メチレ
ン50mlに溶解した。これを−15℃に冷却後、ピバ
リン酸クロリド4.0ml（32mmol）を５分間で滴下
し、さらに、15分間攪拌した。ピリジン９ml
（110mmol）および2′−Ｏ−アセチルタイロシン
5.0ｇ（5.2mmol）を加え、５℃で30時間攪拌し
た。反応液に炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、
有機層を塩化ナトリウム水溶液で洗浄後無水硫酸
ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮後再びトルエン
を加えて減圧濃縮し、ピリジンを除去した。残渣
をシリカゲル150ｇのカラムクロマトグラフイー
（ベンゼン／アセトン（7/1））に付し、ベンゼ
ン／アセトン（3/1）展開のシリカゲルTLCにて
Rf値0.47に硫酸呈色を示す溶出区分を減圧濃縮、
残渣をヘキサンで洗浄を行い、3.6ｇの標記化合
物を白色粉末として得た。（56％）

【表】実施例２ 4″−Ｏ−（４−フルオロフエニルアセチル）タ
イロシン 2′−Ｏ−アセチル−4″−４−Ｏ−ジ（４−フ
ルオロフエニルアセチル）タイロシン3.6ｇをメ
タノール100mlに溶解し、15時間還流した。反応
液を40mlまで濃縮後氷冷下17％アンモニア・メタ
ノール60ml、および水８mlを加え10℃で７時間攪
拌した。ベンゼン25mlを加えた後減圧濃縮し、残
渣に酢酸エチルを加えて、水を分離後、無水硫酸
ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮後残渣をシリカ
ゲル130ｇのカラムクロマトグラフイー（ベンゼ
ン／アセトン（3/1））に付し、ベンゼン／アセト
ン（3/2）展開のシリカゲルTLCにてRf値0.27に
硫酸呈色を示す溶出区分を減圧濃縮した。得られ
た白色粉末をベンゼン20mlに溶解し不溶物を濾別
した後、ヘキサン150ml中に低下して沈殿化を行
い、1.36ｇの標記化合物を白色粉末として得た。
（44％）

【表】

【表】実施例３ 2′−Ｏ−アセチル−4″−Ｏ−（４−フルオロベ
ンジルスルホニル）−４−Ｏ−クロロアセチ
ルタイロシン 2′−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−クロロアセチル
タイロシン1.0ｇ（0.97mmol）を塩化メチレン５
mlおよびピリジン２mlに溶解し、ここに−20℃に
冷却下、４−フルオロベンジルスルホニルクロリ
ド350mg（1.6mmol）を加え、１時間攪拌した。
反応溶液を炭酸水素ナトリウム水溶液中に移し、
有機層は塩化ナトリウム水溶液で洗浄後無水硫酸
ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮後再びトルエン
を加えて減圧濃縮を行い、ピリジンを留去した。
残渣をシリカゲル30ｇのカラムクロマトグラフイ
ー（ベンゼン／アセトン（6/1））に付し、ベンゼ
ン／アセトン（3/1）展開のシリカゲルTLCにて
Rf値0.48に硫酸呈色を示す溶出区分を減圧濃縮
し、1.0ｇの標記化合物を白色粉末として得た。
（83％）実施例４ 4″−Ｏ−（４−フルオロベンジルスルホニル）
タイロシン 2′−Ｏ−アセチル−4″−Ｏ−（４−フルオロベ
ンジルスルホニル）−４−Ｏ−クロロアセチル
タイロシン1.0ｇをメタノール20mlに溶解し、24
時間還流した。反応液を減圧濃縮後シリカゲル30
ｇのカラムクロマトグラフイー（ベンゼン／アセ
トン（3/1））に付しベンゼン／アセトン（2/1）
展開のシリカゲルTLCにてRf値0.29に硫酸呈色
を示す溶出区分を集め、これをベンゼン・ヘキサ
ンから再沈殿を行い、492mgの標記化合物を白色
粉末として得た。（55％）

【表】 3.50 3H s 2〓OCH_３

【表】実施例５ 2′−Ｏ−アセチル−4″−Ｏ−（４−アセチルフ
エニルアセチル）−４−Ｏ−クロロアセチル
タイロシン４−アセチルフエニル酢酸485mg（2.7mmol）
を塩化メチレン７ml、トリエチルアミン0.38ml
（2.7mmol）に溶解し、−15℃に冷却下、ピバリン
酸クロリド0.33ml（2.7mmol）を滴下した。15分
間攪拌後、ピリジン0.8ml（10mmol）、2′−Ｏ−
アセチル−４−Ｏ−クロロアセチルタイロシン
900mg（0.87mmol）を加え７℃で３時間攪拌し
た。反応液中に炭酸水素ナトリウム水溶液を加
え、有機層は飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナト
リウムで乾燥した。減圧濃縮後再びトルエンを加
えて減圧濃縮しピリジンを除去した、残渣をシリ
カゲル30ｇのカラムクロマトグラフイー（ベンゼ
ン／アセトン（6/1））に付し、ベンゼン／アセト
ン（3/1）展開のシリカゲルTLCにてRf値0.30に
硫酸呈色を示す溶出区分を合わせて減圧濃縮し、
700mgの標記化合物を白色粉末として得た。（67
％）

【表】

【表】実施例６ 4″−Ｏ−（４−アセチルフエニルアセチル）タ
イロシン 2′−Ｏ−アセチル−4″−Ｏ−（４−アセチルフ
エニルアセチル）−４−Ｏ−クロロアセチルタ
イロシン700mgをメタノール15mlに溶解し10時間
還流した。反応液を濃縮後シリカゲル25ｇのカラ
ムクロマトグラフイー（クロロホルム／メタノー
ル（40/1））に付し、クロロホルム／メタノール
（10/1）展開のシリカゲルTLCにてRf値0.46に硫
酸呈色を示す溶出区分を減圧濃縮し、残渣の白色
粉末をイソプロピルエーテルで洗浄し、標記化合
物380mgを得た。（60％）

【表】

【表】実施例７ 2′−Ｏ−アセチル−4″−Ｏ−（２−フルオロフ
エニルアセチル）−４−Ｏ−クロロアセチル
タイロシン２−フルオロフエニル酢酸1.0ｇ（6.5mmol）
を塩化メチレン15mlに溶解、トリエチルアミン
0.9ml（6.5mmol）を加えた後−15℃に冷却下、
ピバリン酸クロリド0.8ml（6.5mmol）を滴下し
た。20分間攪拌した後、ピリジン1.8ml、2′−Ｏ
−アセチル−４

Claims

【特許請求の範囲】１式式中、Ｒは水素原子、アセチル基又はプロピオ
ニル基を表わし、Ｙは基−CO−又は−SO₂−を
表わし、Ｚはベンジル基の２若しくは４位に結合
するフツソ原子又はアセチル基を表わす、で示されるタイロシン誘導体。２式（）のＲが水素原子である特許請求の範
囲第１項記載のタイロシン誘導体。