JPH05178758A - トリペプチドを有効成分とする骨疾患の予防および治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 骨粗鬆症をはじめとする骨吸収性骨疾患に
対する、予防および治療法を提供する。 【構成】 一般式(1) Ｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｘａａ−Ｈ (1) （式中、Ｒはアセチル基又はベンジルオキシカルボニル
基を示し、Ｌｅｕはロイシン残基を示し、Ｘａａはメチ
オニン残基、ロイシン残基又はノルロイシン残基を示
し、ＨはペプチドのＣ末端カルボキシ基がアルデヒドに
還元されていることを示す。）で表される化合物を有効
成分として、通常成人１日当たり０．１〜１０００ｍｇ
／ｋｇを１〜３回に分けて経口または非経口に投与する
ための、悪性高カルシウム血症、骨ページェット病また
は骨粗鬆症の予防または治療剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は骨疾患、たとえば悪性高
カルシウム血症、骨ページェット病および骨粗鬆症等の
骨疾患の予防または治療剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】近年、高齢者人口の急激な増加と共に所
謂老人病が増加している。中でも、骨粗鬆症をはじめと
する骨疾患は、骨折を多発し、寝たきり老人につながる
疾病として、その予防と治療法の開発が望まれている。

【０００３】骨は一旦形成された後は全く変化しない構
築物ではなく、常に造られては壊され、骨形成と骨吸収
のバランスの上にその構造および量は維持されている。
従って、加齢あるいはその他の原因によりそのバランス
が崩れると、種々の骨疾患を発症する。骨吸収の異常亢
進によって起こる疾患としては、骨髄腫やリンパ腫など
が原因で起こる悪性高カルシウム血症、局所性骨吸収に
よりもたらされる骨ページェット病、原因は不明である
が加齢により骨量が減少する骨粗鬆症などが挙げられ
る。

【０００４】骨は主に有機質であるコラーゲン線維と無
機質であるカルシウム塩からなり、この両者が結びつい
て、張力にも圧力にも強い強固な構築物である骨が形成
される。とりわけ、カルシウム塩は全骨重量の７０％を
占めるが、骨疾患においてはその進行とともにカルシウ
ム塩が骨から血液中に溶け出して徐々に失われる。この
ような疾患の予防または治療には、これまでカルシウム
を補うかあるいは維持する療法が採用され、活性型ビタ
ミンＤ₃ 製剤およびカルシウム製剤などが用いられてき
た。また、骨からの脱灰を抑制する目的でエストロゲン
製剤およびカルシトニン製剤のようなホルモン剤が用い
られてきた。

【０００５】このようなカルシウム塩の減少防止の観点
に基づく治療に加えて、最近、骨疾患におけるコラーゲ
ン線維の減少防止の重要性も着目されつつある。即ち、
骨の支持体として存在するコラーゲンはＩ型であり、こ
の型のコラーゲンは通常のコラゲナーゼでは分解されな
いが、最近の研究からリソゾーム中のチオールプロテア
ーゼの一種であるカテプシンＬにより分解されることが
明らかにされている（勝沼信彦、第１１回メディシナル
ケミストリーシンポジウム講演要旨集 １２８頁 １９
９０年）。カテプシンＬが関節軟骨を構成するコラーゲ
ンのタイプII型、IX型およびXI型を中性領域で分解する
ことも報告されている（フェブス・レターズ (FEBS Let
ters) ２６９巻１号 １８９〜１９３頁 １９９０
年）。また、システインプロテアーゼの阻害剤が骨吸収
を抑制することも報告されている（バイオケミカル・ジ
ャーナル (Biochemical Journal), １９２巻 ３６５〜
３６８頁 １９８０年：バイオケミカル・アンド・バイ
オフィジカル・リサーチ・コミュニケーションズ (Bioc
hemical and Biophysical Research Communications),
１２５巻２号 ４４１〜４４７頁 １９８４年：ボーン
(Bone),８巻 ３０５〜３１３頁 １９８７年）。

【０００６】さらに、ある種のシステインプロテアーゼ
阻害剤は、カルシウム塩とコラーゲン線維の減少を同時
に抑制しうる物質として、吸収性骨疾患の治療に用いる
ことが提案されている（特開昭６３−２８４１２７、特
開平２−２１８６１０）。しかしながら、その研究は緒
についたばかりで実際に患者を治療した例は報告されて
おらず、実用的な治療剤の提供には至っていない。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、悪性
高カルシウム血症、骨ページェット病および骨粗鬆症等
の吸収性骨疾患の予防または治療に有用な治療剤を提供
することにある。より詳細には、吸収性骨疾患におい
て、カルシウムを補給または維持する従来の療法に代え
て、骨中のカルシウム塩の減少を抑制することにより根
本的な予防および治療を可能にする治療剤を提供するこ
とにある。

【０００８】本発明はまた、吸収性骨疾患において骨中
カルシウム塩の減少の抑制と同時に、コラーゲン線維の
減少も抑制して、より効果的な予防および治療を可能と
する骨疾患治療剤を提供することも目的とする。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
の解決のために、ＰＴＨｒｐ（１−３４）により惹起さ
れたラットの高カルシウム血症をモデルとして用い、そ
の血中カルシウム濃度を正常化する能力に基づいて、各
種化合物をスクリーニングした結果、一般式(1) Ｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｘａａ−Ｈ (1) （式中、Ｒはアセチル基又はベンジルオキシカルボニル
基を示し、Ｌｅｕはロイシン残基を示し、Ｘａａはメチ
オニン残基、ロイシン残基又はノルロイシン残基を示
し、ＨはペプチドのＣ末端カルボキシル基がアルデヒド
に還元されていることを示す。）で表される化合物が、
経口投与または静脈注射等の非経口投与により血中カル
シウム濃度の低下作用を有し、骨疾患の予防または治療
剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。

【００１０】上記ＰＴＨｒｐ（１−３４）は、ヒトの悪
性高カルシウム血症惹起因子であるＰＴＨｒｐ（副甲状
腺ホルモン関連蛋白）の１〜３４番目のアミノ酸残基よ
りなる活性フラグメントであり、ラットに投与すると、
高カルシウム血症を惹起し、またイン・ビトロでの骨吸
収促進作用が示されているので（ジャーナル・オブ・ク
リニカル・インベスティゲーション (Journal of Clini
cal Investigation)８１巻２号 ５９６−６００頁 １
９８８年：エンドクリノロジー (Endocrinology) １２
３巻 ２８４１−２８４８頁 １９８８年）、骨粗鬆症
のモデルを組み立てるために用いられた。

【００１１】このモデルを用い、ウイスター系ラットに
一般式（１）の化合物投与後、ＰＴＨｒｐ（１−３４）
を投与し、血中カルシウム濃度を測定したところ、ＰＴ
Ｈｒｐ（１−３４）のみの処理群に較べて有意に血中カ
ルシウム濃度を低下させることが判明した。したがっ
て、一般式（１）の化合物は骨疾患の予防または治療剤
として有効である。

【００１２】これらの有効成分のうち、一般式(2) Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｘａａ−Ｈ (2) （式中、Ａｃはアセチル基を示し、Ｌｅｕはロイシン残
基を示し、Ｘａａはメチオニン残基、ロイシン残基また
はノルロイシン残基を示し、ＨはペプチドのＣ末端カル
ボキシル基がアルデヒドに還元されていることを示
す。）で表される化合物は、本発明者らによって、シス
テインプロテアーゼ阻害剤としてその化学合成法と共に
特開昭６１−１０３８９７号公報に開示されている。

【００１３】 また、本発明の有効成分のうち、一般式(3) Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｘａａ−Ｈ (3) （式中、Ｚはベンジルオキシカルボニル基を示し、Ｌｅ
ｕはロイシン残基を示し、Ｘａａはノルロイシン残基ま
たはロイシン残基を示し、ＨはペプチドのＣ末端カルボ
キシル基がアルデヒドに還元されていることを示す。）
で表される化合物は、神経細胞突起伸長物質として、そ
の化学合成法と共に特開平２−２６８１９６号公報に開
示されている。

【００１４】しかしながら、上記いずれの公報中にも、
開示された化合物が骨疾患に対して有効であるとの記載
はなく、これらの化合物を骨疾患の予防または治療剤と
して用いることは、本発明者らにより初めて見出された
ものである。またこれらの化合物は強力なシステインプ
ロテアーゼ阻害剤であり、カテプシンの作用を阻害する
ことから、骨疾患におけるカルシウムの減少抑制と同時
にコラーゲンの減少の抑制効果も期待できる。さらに、
カテプシンＬが関節軟骨を構成するコラーゲンのタイプ
II型、IX型およびXI型を中性領域で分解することが報告
されているので（フェブス・レターズ (FEBS Letters)
２６９巻１号 １８９〜１９３頁 １９９０年）、カテ
プシンの強力な阻害剤である本発明の治療剤は、カテプ
シンＬ活性の異常亢進を伴う骨疾患である骨関節炎ある
いはリウマチ性関節炎に対しても有効であると期待でき
る。

【００１５】一般式(1) の化合物のうち、前記二つの公
報に記載されていないものも、これらの公報に開示され
た合成法に従って合成可能である。

【００１６】本発明の治療剤に用いられる好ましい化合
物としては、例えば N-アセチル-ロイシル-ロイシル-ロイシナール （化合物１） N-アセチル-ロイシル-ロイシル-メチオニナール （化合物２） N-アセチル-ロイシル-ロイシル-ノルロイシナール （化合物３） N-ベンジルオキシカルボニル-ロイシル-ロイシル-ノルロイシナール （化合物４） が例示される。

【００１７】なお、本発明において一般式（１）の化合
物は、そのアセタール誘導体のように生体内でＣ末端ア
ルデヒドに変換される誘導体として、治療剤中に含める
こともできる。

【００１８】本発明の有効成分は、常法に従って種々の
剤型での投与が可能である。例えば経口投与剤として
は、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、シロップ剤、
ドライシロップ剤等が例示でき、非経口投与剤として
は、注射剤の他、坐薬、膣坐薬等の坐剤、噴霧剤等の経
鼻投与剤、軟膏、経皮吸収性テープ等の経皮吸収剤が例
示される。

【００１９】本発明の対象となる骨疾患とは、吸収性骨
疾患を意味し、具体的には、悪性高カルシウム血症、骨
ページェット病、骨粗鬆症が例示される。これらの疾患
の患者に投与する有効成分の量の目安としては、通常成
人１日当たり０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重（好まし
くは１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは５〜５
０ｍｇ／ｋｇ体重）を１〜３回に分けて経口または非経
口で骨疾患の患者に投与すればよい。この投与量は、患
者の年齢、症状等により適宜増減することが可能であ
り、下記安全性のデータから判断して効果が認められる
限り投与量を高めることができると思われる。

【００２０】一般式（１) の化合物は、低分子量のペプ
チド誘導体であるため、その毒性は無視できる程度であ
る。例えば、化合物３の急性毒性を調べるため、ラット
に１ｇ／ｋｇを経口投与しても一般症状に何ら変化がな
く、また死亡動物も認められなかった。

【００２１】

【実施例】次に実施例によって本発明をさらに説明する
が、本発明の範囲はこれらのみに限定されるものではな
い。

【００２２】実施例１ＰＴＨｒｐ（１−３４）により惹起されたラットの高カ
ルシウム血症に対する本発明の予防および治療の効果 ウィスター系ラット（５週齢、雄、７０〜９０ｇ、一群
５匹）に、化合物２、化合物３又は化合物４を４０ｍｇ
／ｋｇ体重及び８０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で経口投与
し、４時間後にＰＴＨｒｐ（１−３４）を５ｎｍｏｌｅ
／ｋｇ静脈内投与した。

【００２３】ＰＴＨｒｐ（１−３４）投与１時間後に採
血し、血中カルシウム濃度をオクトクレゾールフタレイ
ンコンプレキソン法で測定した。

【００２４】なお、参考として特開昭６３−２８４１２
７号公報記載の化合物であるＥ−６４を、４０ｍｇ／ｋ
ｇ体重及び８０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で経口投与し、同
様に評価した。

【００２５】その結果は表１に示す通りであり、化合物
２、化合物３及び化合物４の４０ｍｇ／ｋｇ体重および
８０ｍｇ／ｋｇ体重投与群において血中カルシウム濃度
の上昇を有意に抑制した。また化合物４は８０ｍｇ／ｋ
ｇ体重投与群において、Ｅ−６４に比べて有意に血中カ
ルシウム濃度の上昇を抑制した。

【００２６】この結果、本発明の化合物は悪性体液性高
カルシウム血症を予防または抑制しうることが確認さ
れ、骨疾患の予防または治療剤として有用である。

【００２７】 表１ 高カルシウム血症に対する効果 ---------------------------------------------------------------------- 群 ＰＴＨｒｐ 薬物 投与量 Ｃａ濃度±標準誤差 処理 （ｍｇ／ｋｇ） （ｍｇ／ｄｌ） ---------------------------------------------------------------------- １ なし なし ０ ９．７６±０．０６ ２ あり なし ０ １０．３３±０．１３ ３ あり Ｅ−６４ ４０ ９．６９±０．２１* ４ あり Ｅ−６４ ８０ ９．６１±０．１２** ５ あり 化合物２ ４０ ９．７８±０．０８** ６ あり 化合物２ ８０ ９．６１±０．１３** ７ あり 化合物３ ４０ ９．４９±０．２０** ８ あり 化合物３ ８０ ９．５２±０．１１** ９ あり 化合物４ ４０ ９．５３±０．０８** １０ あり 化合物４ ８０ ９．２８±０．０６** # ---------------------------------------------------------------------- Ｅ−６４：L-トランス-エポキシスクシニル- L-ロイシ
ルアミド-(e-グアニド)-ブタン 血中カルシウム濃度平均値±標準誤差（ｎ＝５） * ： Ｐ＜０．０５ ｖｓ 第２群の血中カルシウム濃
度 **： Ｐ＜０．０１ ｖｓ 第２群の血中カルシウム濃
度 # ： Ｐ＜０．０５ ｖｓ 第４群の血中カルシウム濃
度 以上を混合し、この混合物を単発式打錠機にて打錠し
て、１錠中２００ｍｇの化合物３を含有する、直径９ｍ
ｍ、重量２５０ｍｇの錠剤を製造した。

【００２８】製剤例２ 直腸坐剤の製造 ウイテップゾールＨ−１５を加温融解し、これに化合物
３を濃度１２．５ｍｇ／ｍｌになるように加えて、均一
に混和し、次いでこれを直腸坐剤用金型に２ｍｌずつ注
入し、冷却して、１剤中２５ｍｇの化合物３を含有する
直腸坐剤を製造した。

【００２９】

【発明の効果】本発明の有効成分は、吸収性骨疾患のモ
デルであるＰＴＨｒｐ（１−３４）によるラット高カル
シウム血症において、血中カルシウム濃度を有意に低下
させ、骨疾患の予防または治療剤として有用である。

フロントページの続き (72)発明者 齊藤 雅之 大阪府三島郡島本町若山台１丁目１番１号 サントリー株式会社基礎研究所内 (72)発明者 橋本 昌樹 大阪府三島郡島本町若山台１丁目１番１号 サントリー株式会社基礎研究所内

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式(1) Ｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｘａａ−Ｈ (1) （式中、Ｒはアセチル基又はベンジルオキシカルボニル
   基を示し、Ｌｅｕはロイシン残基を示し、Ｘａａはメチ
   オニン残基、ロイシン残基またはノルロイシン残基を示
   し、ＨはペプチドのＣ末端カルボキシル基がアルデヒド
   に還元されていることを示す。）で表される化合物を有
   効成分とする骨疾患の予防または治療剤。
2. 【請求項２】 骨疾患が、悪性高カルシウム血症、骨ペ
   ージェット病または骨粗鬆症である、請求項１記載の予
   防または治療剤。