JPH0521088B2

JPH0521088B2 -

Info

Publication number: JPH0521088B2
Application number: JP16842285A
Authority: JP
Inventors: Shigeru Taniguchi; Yoshinobu Myashita; Tamio Ueyama; Hiroshi Nakagawa; Kazuo Matsumoto; Joji Hirase
Original assignee: SHINNIPPON YAKUHIN KK
Current assignee: SHINNIPPON YAKUHIN KK
Priority date: 1985-07-29
Filing date: 1985-07-29
Publication date: 1993-03-23
Also published as: JPS6229522A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、無置換またはアルキル置換−１，３
−ベンゾジオキソールを必須成分とする肝臓疾患
治療剤に関する。発明の背景肝臓は人間の身体の中の最大の臓器で、その機
能は多岐にわたり、しかも極めて重要な役割を果
たしている。この臓器は、例えば三大栄養素であ
る炭水化物、蛋白質並びに脂肪の同化、体内で生
成した毒素の解毒、および胆汁の生成、分泌など
を行い、生命維持の中心を司つている。肝臓は強靭な臓器であるが、時によつて体外か
ら侵入したウイルスや有害物質によつて障害を受
け、急性肝炎、慢性肝炎、肝硬変および黄だんな
どの疾病を生じることがある。従来、これら肝臓
疾患の治療薬として、甘草の成分であるグリチル
リチン、ある種のビタミン剤およびホルモン剤な
どが使われているが、その効果は到底満足すべき
ものではなく、真の肝臓疾患治療剤の開発が望ま
れている。最近、前田らは五味子成分の薬理学的研究の結
果、分子中のメチレンジオキシ基が肝障害抑制作
用の活性基となり得るのではないかと推論してい
る［薬学雑誌、102巻、579−588頁（1982）］。し
かしながら、上記の推論の根拠となつた化合物で
あるサフロール［後記式（）においてR¹が５
位のアリル基、R²が水素である不飽和アルキル
ベンゼン誘導体］自体は、肝障害抑制作用を有す
るものの、変異原性が有り、実用に供し得ない
［ミユーテーシヨン・リサーチ（Mutation
Research）、57巻、115−121頁（1978）参照］。
かかる知見を背景にして、あるいは独自の研究に
基づいて、多くの研究者が肝臓疾患治療薬の開発
にとりくんでいるが、分子中にメチレンジオキシ
基を有し、臨床に供し得る肝臓疾患治療薬として
開発に成功した、あるいは現在開発されつつある
化合物には、ゴミシンＡ［GomisinA、薬学雑誌、
前掲］（）、デスオキシポドフイロトキシン［ケ
ミカル・アンド・フアーマシウチカル・ブリチン
（Chem.Pharm.Bull.）、30巻、3817−3821頁
（1982）］（）およびトリトクアリン［応用薬理、
29巻、381−389頁（1985）］（）が挙げられる。
これらの化学物の構造を以下に示す。これらの化合物は、実用に供し得る肝臓疾患治
療剤とし有用なものであるが、治療活性はそれ程
強くなく、かつ、構造が複雑である為、合成が容
易でないという欠点をも有する。発明の目的本発明者らは、上記の先行技術およびその他の
情報に基づき、分子中にメチレンジオキシ基を有
する各種の化合物について鋭意検討を重ねた結
果、意外にも、メチレンジオキシ基で置換された
ベンゼン、即ち１，３−ベンゾジオキソール自
体、およびその低級飽和アルキル置換体が、前記
の複雑な構造を有する既知化合物群よりも遥かに
強い肝臓疾患治療活性を有し、かつ、サフロール
に見られる様な変異原性を示さない事実を見出し
た。本発明は、かかる知見に基づき完成されたも
のである。即ち、本発明は式（）：［式中、R¹およびR²は互いに独立して水素また
は炭素原子数１〜５の直鎖状または分枝状の飽和
アルキル基を表わす］で示される無置換またはアルキル置換−１，３−
ベンゾジオキソールを必須成分として含有する肝
臓疾患治療剤を提供するものである。式（）で表わされる化合物は、大部分が既知
の化合物であり、R¹およびR²の少なくとも一方
がアルキルである化合物（）は、例えば以下に
示す合成経路に従つて製造することができる。［上記式中、R¹′とR²′は炭素数１〜５の直鎖状又
は分枝状のアルキル基を示す。R³は炭素数１〜
４の直鎖状又は分枝状のアルキル基を、R⁴は水
素原子、メチル基またはエチル基を示す。ただし
R³とR⁴の炭素数の和は４を越えない。Ｘはハロ
ゲン原子を表わす］。この合成経路に従つて式（）の化合物を製造
するには、公知の方法［例えば、欧州特許出願
（Eur.Pat.Appl.EP）82、681やジヤーナル・オ
ブ・アメリカン・ケミカル・ソサイアテイ（J.
Am.Chem.Soc.）、103巻、3173−3177頁（1981）
により合成した４−あるいは５−ブロモー１，３
−ベンゾジオキソールと金属マグネシウムを反応
させてグリニヤール試薬とし、次いでこのグリニ
ヤール試薬とハロゲン化アルキルを反応させる
か、あるいはグリニヤール試薬とアルデヒド又は
ケトンを反応させて得られるアルコールを水素化
分解する。また、アルキル置換カテコールとジハ
ロゲノメチレンを塩基の存在下に反応させること
によつても式（）に相当する化合物が得られ
る。このものをさらにハロゲン化した後、グリニ
ヤール試薬を調製し、前記と同様の反応を行うこ
とによつてビスアルキル置換−１，３−ベンゾジ
オキソール（）を得ることができる。式（）で表わされる化合物の代表例を示せば
次の通りである。

【表】の測定値を示す。
式（）で表わされる化合物を肝臓疾患治療剤
として使用するには、当該化合物を単独で、又は
慣例に従つて製薬的に許容し得る賦形剤、希釈
剤、補助剤を用いて散剤、顆粒剤、錠剤、カプセ
ル剤、注射剤等を調製し、通常の方法によつて経
口的に、又は非経口的に適用する。式（）の化
合物の投与量は、患者の年令、性別、体重、症状
等によつて変動するが、経口投与の場合、体重１
Kg当たり１日に0.1〜50mg、好ましくは１〜10mg、
非経口投与の場合、体重１Kg当たり１日に0.05〜
25mg、好ましくは0.5〜５mgの範囲が有利である。
なお投与は１日量を数回に分けて投与するのが好
ましい。なお、症状によつては、この上限の薬用
量を超えて投与する必要の生ずることもあり得る
が、式（）の化合物のマウスにおける急性毒性
値（50％致死量）は経口投与で2500mg／Kg体重以
上、腹腔内注射で1300mg／Kg体重以上であつて、
その毒性は極めて低く、安全性に問題はない。以下に式（）で示される化合物の製造例、薬
理試験、毒性試験、製剤例を挙げ、本発明を更に
詳細に説明する。製造例１マグネシウム（削状）0.73ｇ（30ミリモル）と
無水テトラヒドロフラン10mlをとり、窒素雰囲気
下、５−ブロモ−１，３−ベンゾジオキソール約
１ｇを加える。反応が進行し始めたら、残りの５
−ブロモー１，３−ベンゾジオキソール［全量
6.03ｇ（30ミリモル）］を無水テトラヒドロフラ
ン20mlに溶かした液を攪拌しながらゆつくりと滴
下し、さらに90分間加熱還流する。冷却後、反応
液にヨウ化メチル5.11ｇ（36ミリモル）を攪拌下
に滴下し、攪拌しながら50℃付近で３時間加熱を
続ける。冷却後、反応液を氷水300mlに注ぎ、30
％硫酸でコンゴレツド酸性とした後、ベンゼン
300mlで抽出する。ベンゼン溶液を５％重炭酸ナ
トリウム水溶液および水で順次洗浄した後、無水
硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を留去した
後、残留物を減圧蒸留すると、無色油状の５−メ
チル−１，３−ベンゾジオキソール1.82ｇ（44.6
％収率）を得る。製造例２マグネシウム（削状）1.22ｇ（50ミリモル）と
無水テトラヒドロフラン10mlをとり、窒素雰囲気
下、５−ブロモ−１，３−ベンゾジオキソール約
１ｇを加える。反応が進行し始めたら、残りの５
−ブロモ−１，３−ベンゾジオキソール［全量
10.0ｇ（50ミリモル）］を無水テトラヒドロフラ
ン40mlに溶かした液を攪拌しながらゆつくりと滴
下し、さらに90分間加熱還流する。冷却後、反応
液にアセトアルデヒド2.20ｇ（50ミリモル）を滴
下し、そのまま１時間攪拌を続けた後、さらに攪
拌しながら30分間加熱還流する。冷却後、反応液
を飽和塩化アンモニウム水溶液100mlに注ぎ、エ
ーテル200mlで抽出する。エーテル溶液を水洗、
無水硫酸マグネシウムで乾燥した後溶媒を留去
し、粗製の１−（３，４−メチレンジオキシフエ
ニル）エチルアルコール7.4ｇを得る。このもの
をエタノール75mlに溶解し、10％パラジウム炭素
0.75ｇと濃塩酸約２mlを使用して常温常圧下で水
素化分解を行う。反応液を過し、液を濃縮し
た後、残留物をエーテル100mlに溶解する。エー
テル溶液を水洗後、無水硫酸マグネシウムで乾燥
する。溶媒を留去した後残留物を減圧蒸留する
と、無色油状の５−エチル−１，３−ベンゾジオ
キソール3.03ｇ（40.4％収率）を得る。上記製造例中のアセトアルデヒドにかえてプロ
パナール2.90ｇ（50ミリモル）、又はアセトン
2.90ｇ（50ミリモル）、又はｎ−ブチルアルデヒ
ド3.61ｇ（50ミリモル）、又はメチルエチルケト
ン3.61ｇ（50ミリモル）、又はペンタナール4.30
ｇ（50ミリモル）、又は３−ペンタノン4.30ｇ
（50ミリモル）を用いることにより、５−プロピ
ル−１，３−ベンゾジオキソール3.60ｇ（47.9％
収率）、５−イソプロピル−１，３−ベンゾジオ
キソール5.42ｇ（66.0％収率）、５−ｎ−ブチル
−１，３−ベンゾジオキソール4.51ｇ（50.6％収
率）、５−sec−ブチル−１，３−ベンゾジオキソ
ール5.47ｇ（61.4％収率）、５−ｎ−ペンチル−
１，３−ベンゾジオキソール5.52ｇ（57.4％収
率）、および５−（１−エチルプロピル）−１，３
−ベンゾジオキソール6.15ｇ（64.0％収率）をそ
れぞれ得る。製造例３３−メチルカテコール4.97ｇ（40ミリモル）、
臭化メチレン9.21ｇ（53ミリモル）、無水炭酸カ
リウム12.0ｇおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミ
ド50mlを、攪拌しながら110℃付近で５時間加熱
する。冷却後、反応液に水250mlを加え、エーテ
ル400mlで抽出する。エーテル溶液を２％水酸化
ナトリウム水溶液および水で順次洗浄した後、無
水硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を留去した
後、残留物を減圧蒸留すると、無色油状の４−メ
チル−１，３−ベンゾジオキソール3.22ｇ（59.1
％収率）を得る。製造例４４−メチル−１，３−ベンゾジオキソール10.1
ｇ（74ミリモル）と氷酢酸70mlをとり、水冷下に
臭素11.8ｇ（74ミリモル）を攪拌しながらゆつく
りと滴下し、滴下終了後さらに20時間攪拌を続け
る。反応液に水200mlを加えた後、ベンゼン300ml
で抽出する。ベンゼン溶液を水洗した後、無水硫
酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を留去した後減
圧蒸留を行い、bp₃₀120℃付近の留分として、５
−ブロモ−４−メチル−１，３−ベンゾジオキソ
ール10.2ｇ（64.1％収率）を得る。この５−ブロ
モ−４−メチル−１，３−ベンゾジオキソール
6.45ｇ（30ミリモル）を用いて製造例１と同様の
反応を行い、４，５−ジメチル−１，３−ベンゾ
ジオキソール1.63ｇ（36.2％収率）を得る。薬理試験肝臓疾患治療剤としての効力判定は、通常、被
験物質および肝障害惹起物質を試験動物に投与
し、その肝障害抑制作用を調べることによつて行
われる。肝障害惹起物質としては四塩化炭素、ク
ロロホルム、チオアセトアミド、Ｄ−ガラクトサ
ミン等が知られているが、本試験に於ては、肝障
害の病態モデルを作るのに最も広く用いられてい
る四塩化炭素とＤ−ガラクトサミンを用いた。ま
た、被験物質の肝障害抑制作用は、肝細胞の壊死
を反映して上昇する血清中のグルタミツク・オキ
ザロアセチツクトランスアミナーゼ（GOT）活
性を指標として検索した。四塩化炭素またはＤ−
ガラクトサミンによつて肝障害を起こした場合、
肝細胞の壊死にともなつて細胞成分の逸脱が起こ
り、血清中のGOT活性が顕著に上昇するので、
四塩化炭素またはＤ−ガラクトサミンによる肝障
害のレベル並びに被験物質によるその障害の抑制
作用を知るには、血清中のGOT活性を測定する
この方法が最も適当である。薬理試験１試験に用いた動物はICR系の雄マウスで、１群
につき５匹を使用した。４週令、体重18〜22ｇの
ものを購入し、恒温恒湿（23±１℃、55±５％）
の飼育室で固型飼料（MF、オリエンタル酵母工
業製）および水を自由に与えて１週間予備飼育
し、その中で生育良好なものを選んで試験に供し
た。試験動物を予め19時間絶食したのち、被験物
質を経口投与又は腹腔内注射し、その30分後に四
塩化炭素を0.015ml／Kg体重［オリーブ油溶液
（10ml／Kg体重）として］の割合で腹腔内注射し、
更にその24時間後、腹大動脈より採血し、ついで
遠心分離（3000rpm、10分）により血清を分離
し、そのGOT活性を測定した。尚、被験物質は
５％アラビアゴム水溶液に懸濁させ、経口投与お
よび腹腔内注射のいずれの場合も、10ml／Kg体重
の投与液量で投与した。血清中のGOT活性はリ
ツピ（Lippi）らの酵素法［クリニカ・キミカ・
アクタ（Clinica Chimica Acta.）、28巻、431−
437頁（1970）］に従つて測定し、結果を表１およ
び表２に示した。薬理試験２試験に用いた動物はウイスター系の雄ラツト
で、１群につき５匹を使用した。４週令、体重80
〜100ｇのものを購入し、恒温恒湿（23±１℃、
55±５％）の飼育室で、固形飼料（MF：オリエ
ンタル酵母工業製）および水を自由に与えて１週
間予備飼育し、その中で成育良好なものを選んで
試験に供した。被験物質は、５％アラビアゴム水溶液に懸濁
し、100mg／10ml／Kgで強制経口投与した。その
30分後から、生理食塩水に溶解した塩酸Ｄ−ガラ
クトサミンを300mg（Ｄ−ガラクトサミンとして
250mg）／３ml／Kgの割合で、３時間毎に４回腹
腔内投与した。次いで、塩酸Ｄ−ガラクトサミン
最終投与の39時間後に腹大動脈から採血し、遠心
分離（300rpm、10分）により血清を分離し、そ
のGOT活性を測定した。なお、試験動物は被験
物質の投与19時間前から、塩酸Ｄ−ガラクトサミ
ンの最終投与まで絶食させた。各被験物質のＤ−
ガラクトサミンによる肝障害の抑制率を表３に示
す。

【表】

【表】以上の薬理試験から明らかなように、本発明化
合物は経口投与および腹腔内注射ともに12.5mg／
Kg体重以上の投与量で四塩化炭素による肝細胞壊
死の為に生じる著明な血清GOT活性の上昇を押
さえ、明らかな肝障害抑制作用を示した。また本
発明化合物は、Ｄ−ガラクトサミンにより惹起さ
れる肝障害をも著しく抑制することが明らかであ
り、肝疾患治療剤として高い有用性を有する。毒性試験試験に用いた動物はICR系の雄マウスで、１群
につき８匹を使用した。４週令、体重18〜22ｇの
ものを購入し、恒温恒湿（23±１℃、55±５％）
の飼育室で固型飼料（MF、オリエンタル酵母工
業製）および自由に与えて１週間予備飼育し、そ
の中で成育良好なものを選んで試験に供した。試
験動物はあらかじめ16時間絶食したのち被験物質
を経口投与または腹腔内注射した。被験物質は５
％アラビアゴム水溶液に懸濁させ、経口投与およ
び腹腔内注射のいづれの場合も、10ml／Kg体重の
投与液量で投与した。投与336時間後の死亡率か
ら50％致死量をフアンデベルデン（Van der
Waerden）法［伴義雄：医薬品研究法、101−
102頁、朝倉書店（1970）］により算出した。結果
を表４に示す。

【表】以上の毒性試験から明らかなように、本発明化
合物から急性毒性値（50％致死量）は経口投与の
場合2500mg／Kg体重以上、腹腔内注射の場合1300
mg／Kg体重以上で、その毒性は極めて低く、医薬
品としての利用に充分堪え得るものである。製剤例１散剤５重量部の本発明化合物を95部のラクトースと
均等に混和し、散剤とする。製剤例２顆粒剤５重量部の本発明化合物を93部のラクトースと
混合し、２部のヒドロキシプロピルセルロースを
結合剤として用いて常法に従つて顆粒とする。製剤例３錠剤５重量部の本発明化合物を91部のラクトースと
混合し、２部のヒドロキシプロピルセルロースを
結合剤として用いて常法に従つて顆粒とした後、
１部のタルクおよび１部のステアリン酸マグネシ
ウムを加え、圧縮成型して錠剤を得る。製剤例４カプセル５重量部の本発明化合物を93部のラクトースと
混合し、２部のヒドロキシプロピルセルロースを
結合剤として用いて常法に従つて顆粒とし、ハー
ドゼラチンカプセルに充填する。製剤例５注射剤１重量部の本発明化合物を2.5部のポリオキシ
エチレン硬化ヒマシ油および96.5部の生理食塩水
と共に加温混合した後、滅菌して注射剤とする。

Claims

【特許請求の範囲】１式（）：［式中、R¹およびR²は互いに独立して水素また
は炭素原子数１〜５の直鎖状または分枝状の飽和
アルキル基を表わす］で示される化合物を必須成分とする肝臓疾患治療
剤。２ R¹が炭素原子数２〜４の飽和アルキル基で
あり、R²が水素である式（）の化合物を必須
成分とする第１項に記載の治療剤。３ R¹が５位のプロピル基、１−メチルプロピ
ル基、または１−エチルプロピル基である第２項
に記載の治療剤。