JPH0523746B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH0523746B2 JPH0523746B2 JP1308167A JP30816789A JPH0523746B2 JP H0523746 B2 JPH0523746 B2 JP H0523746B2 JP 1308167 A JP1308167 A JP 1308167A JP 30816789 A JP30816789 A JP 30816789A JP H0523746 B2 JPH0523746 B2 JP H0523746B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- oils
- fats
- lipase
- immobilized lipase
- chitosan
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、固定化リパーゼ、および固定化リパ
ーゼを用いた油脂の加水分解方法に関する。
ーゼを用いた油脂の加水分解方法に関する。
従来のリパーゼによる油脂の加水分解は、リパ
ーゼ水溶液と油脂とを混合撹拌するか、または両
者を混合乳化したスラリー状態で反応させる方法
により行われている。また酵素の再利用によるコ
スト低減を目的として酵素を固定化することが試
みられ、イソメラーゼ等においては既に実用化さ
れている。
ーゼ水溶液と油脂とを混合撹拌するか、または両
者を混合乳化したスラリー状態で反応させる方法
により行われている。また酵素の再利用によるコ
スト低減を目的として酵素を固定化することが試
みられ、イソメラーゼ等においては既に実用化さ
れている。
しかしながら、前記イソメラーゼの場合の反応
は水溶系であつて、これに対し、リパーゼの場合
には基質となる油脂が水不溶性であるため、固定
化リパーゼを基質中に充分に分散することができ
ず、このため充分な加水分解率が得られずにリパ
ーゼによる油脂の工業的製造の難点となつてい
る。
は水溶系であつて、これに対し、リパーゼの場合
には基質となる油脂が水不溶性であるため、固定
化リパーゼを基質中に充分に分散することができ
ず、このため充分な加水分解率が得られずにリパ
ーゼによる油脂の工業的製造の難点となつてい
る。
本発明者は、かかる欠点を改良すべく鋭意研究
を重ねた結果、塩基性多糖類であるキトサンのア
ミノ基、水酸基の一部にアルキル基またはベンジ
ル基を導入してキトサンの疎水性をある程度高
め、マクロポーラスな担体とともにこれを用いて
フロツクを形成させ、さらにリパーゼを吸着させ
ることにより、油脂の加水分解を良好に達成でき
る固定化リパーゼの作成に成功した。
を重ねた結果、塩基性多糖類であるキトサンのア
ミノ基、水酸基の一部にアルキル基またはベンジ
ル基を導入してキトサンの疎水性をある程度高
め、マクロポーラスな担体とともにこれを用いて
フロツクを形成させ、さらにリパーゼを吸着させ
ることにより、油脂の加水分解を良好に達成でき
る固定化リパーゼの作成に成功した。
すなわち、本発明の固定化リパーゼは、キトサ
ンのアミノ基、水酸基の一部にアルキル基または
ベンジル基を導入し、これにフロツクを形成させ
た後リパーゼを吸着させたことを特徴とし、また
本発明は併せて、前記固定化リパーゼを用いて油
脂を加水分解することを特徴とする固定リパーゼ
による油脂の加水分解方法を提供する。第３請求
項は、固定化リパーゼを油脂中に分散させて油脂
を加水分解すること、第４請求項は、固定化リパ
ーゼを充填したカラム中に油脂を通液して油脂を
加水分解することを特徴とする。
ンのアミノ基、水酸基の一部にアルキル基または
ベンジル基を導入し、これにフロツクを形成させ
た後リパーゼを吸着させたことを特徴とし、また
本発明は併せて、前記固定化リパーゼを用いて油
脂を加水分解することを特徴とする固定リパーゼ
による油脂の加水分解方法を提供する。第３請求
項は、固定化リパーゼを油脂中に分散させて油脂
を加水分解すること、第４請求項は、固定化リパ
ーゼを充填したカラム中に油脂を通液して油脂を
加水分解することを特徴とする。
リパーゼの固定化については種々の方法が提案
されている。すなわち、寒天由来のアガロースを
アルキル化、フエニル化またはトリチル化した多
種類ゲルにリパーゼを固定化した例（特開昭58−
146284号）もあるが、本発明の固定化リパーゼ
は、ゲルとは異り、親水性および疎水性の両基を
有するフロツクを用いて構成されているため、油
脂、水の両方とも簡単に固定化リパーゼ中に浸潤
することが可能である。また油脂の加水分解に際
して油脂を乳化する必要がなく、この固定化リパ
ーゼを油脂と緩衝液を含む反応液中に加えて撹拌
するか、または固定化リパーゼを充填したカラム
中に油脂と緩衝液との混合液を通液するなどの方
法により容易に油脂の加水分解を実施することが
できる。
されている。すなわち、寒天由来のアガロースを
アルキル化、フエニル化またはトリチル化した多
種類ゲルにリパーゼを固定化した例（特開昭58−
146284号）もあるが、本発明の固定化リパーゼ
は、ゲルとは異り、親水性および疎水性の両基を
有するフロツクを用いて構成されているため、油
脂、水の両方とも簡単に固定化リパーゼ中に浸潤
することが可能である。また油脂の加水分解に際
して油脂を乳化する必要がなく、この固定化リパ
ーゼを油脂と緩衝液を含む反応液中に加えて撹拌
するか、または固定化リパーゼを充填したカラム
中に油脂と緩衝液との混合液を通液するなどの方
法により容易に油脂の加水分解を実施することが
できる。
本発明の特徴とするところは上述したようにフ
ロツクの形成とキトサンへのアルキル基またはベ
ンジル基の導入である。すなわち塩基性多糖類で
あるキトサンは酢酸、蟻酸などの稀有機酸に溶解
するが、アルカリ性にすることにより糸状の塊で
あるフロツクを形成する。こんフロツクはリパー
ゼを良く吸着し、リパーゼを固定化することがで
きるが、この固定化リパーゼでは充分な酵素活性
を発揮させることは困難である。そこで上述した
ようにキトサンにアルキル基またはベンジル基を
導入することによつて酵素活性を高めることがで
きた。
ロツクの形成とキトサンへのアルキル基またはベ
ンジル基の導入である。すなわち塩基性多糖類で
あるキトサンは酢酸、蟻酸などの稀有機酸に溶解
するが、アルカリ性にすることにより糸状の塊で
あるフロツクを形成する。こんフロツクはリパー
ゼを良く吸着し、リパーゼを固定化することがで
きるが、この固定化リパーゼでは充分な酵素活性
を発揮させることは困難である。そこで上述した
ようにキトサンにアルキル基またはベンジル基を
導入することによつて酵素活性を高めることがで
きた。
本発明で用いるリパーゼはその起源を問わず、
微生物、動物臓器または植物種子を起源とする何
れのリパーゼをも固定化し得るものである。
微生物、動物臓器または植物種子を起源とする何
れのリパーゼをも固定化し得るものである。
〔実施例 １〕
キトサンへのベンジル基の導入を常法通りピリ
ジン中で塩化ベンジルを用いて行なつた。
ジン中で塩化ベンジルを用いて行なつた。
上記物質1.5gを稀酢酸に溶解し、セライトとと
もにアルカリ溶液中に投入しフロツクを形成せし
め、水洗し担体を調整した。これにリパーゼ2g
を吸着させ固定化リパーゼを作成した。第１図は
キトサンおよびベンジル化キトサンを用いて調整
した固定化リパーゼをカラムに充填しオリーブオ
イルを基質として酵素活性を比較したものであ
る。ベンジル基を導入したものはキトサンに比べ
高い活性を示し、また流速2ml／minにおける酵
素活性はキトサンの場合の0.5ml／minにおける
酵素活性と同程度を示し、加水分解効率としては
約４倍の活性が示された。図上、黒丸がベンジル
化キトサン、白丸がキトサンである。
もにアルカリ溶液中に投入しフロツクを形成せし
め、水洗し担体を調整した。これにリパーゼ2g
を吸着させ固定化リパーゼを作成した。第１図は
キトサンおよびベンジル化キトサンを用いて調整
した固定化リパーゼをカラムに充填しオリーブオ
イルを基質として酵素活性を比較したものであ
る。ベンジル基を導入したものはキトサンに比べ
高い活性を示し、また流速2ml／minにおける酵
素活性はキトサンの場合の0.5ml／minにおける
酵素活性と同程度を示し、加水分解効率としては
約４倍の活性が示された。図上、黒丸がベンジル
化キトサン、白丸がキトサンである。
〔実施例 ２〕
上記と同様に調整したカラムを用い、30〜60℃
までの各温度で酵素活性を測定した結果を第２図
に示した。50℃において最大活性を示したが、60
℃まで急激な酵素の失活は見られなかつた。ま
た、第３図はオリーブオイルと緩衝液との比を
種々変化させ酵素活性を比較したものである。流
速2ml／min、45℃で反応を行わせた。緩衝液の
多いものほど高い分解率を示したが、流速一定で
あるため緩衝液の量が少なくなるにつれ油脂の量
が増加するため加水分解量は、緩衝液が少なくな
るにつれて増加した。
までの各温度で酵素活性を測定した結果を第２図
に示した。50℃において最大活性を示したが、60
℃まで急激な酵素の失活は見られなかつた。ま
た、第３図はオリーブオイルと緩衝液との比を
種々変化させ酵素活性を比較したものである。流
速2ml／min、45℃で反応を行わせた。緩衝液の
多いものほど高い分解率を示したが、流速一定で
あるため緩衝液の量が少なくなるにつれ油脂の量
が増加するため加水分解量は、緩衝液が少なくな
るにつれて増加した。
第１図ないし第３図はそれぞれ固定化リパーゼ
の活性特性を示すグラフである。
の活性特性を示すグラフである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ キトサンのアミノ基、水酸基の一部にアルキ
ル基またはベンジル基を導入し、これにフロツク
を形成させた後リパーゼを吸着させたことを特徴
とする固定化リパーゼ。 ２ 請求項１の固定化リパーゼを用いて油脂を加
水分解することを特徴とする固定化リパーゼによ
る油脂の加水分解方法。 ３ 固定化リパーゼを油脂中に分散させて油脂を
加水分解することを特徴とする第２項記載の固定
化リパーゼによる油脂の加水分解方法。 ４ 固定化リパーゼを充填したカラム中に油脂を
通液して油脂を加水分解することを特徴とする第
２項記載の固定化リパーゼによる油脂の加水分解
方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1308167A JPH03168084A (ja) | 1989-11-28 | 1989-11-28 | 固定化リパーゼおよび固定化リパーゼによる油脂の加水分解方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1308167A JPH03168084A (ja) | 1989-11-28 | 1989-11-28 | 固定化リパーゼおよび固定化リパーゼによる油脂の加水分解方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03168084A JPH03168084A (ja) | 1991-07-19 |
| JPH0523746B2 true JPH0523746B2 (ja) | 1993-04-05 |
Family
ID=17977707
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1308167A Granted JPH03168084A (ja) | 1989-11-28 | 1989-11-28 | 固定化リパーゼおよび固定化リパーゼによる油脂の加水分解方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH03168084A (ja) |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59213390A (ja) * | 1983-05-19 | 1984-12-03 | Asahi Denka Kogyo Kk | 固定化酵素及びその製造方法 |
-
1989
- 1989-11-28 JP JP1308167A patent/JPH03168084A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH03168084A (ja) | 1991-07-19 |
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