JPH0525883B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規なリン脂質から誘導された重合体
に関する。更に詳しくは、生物学的適合性表面の
製造において使用されるリン脂質の重合体に関す
る。 少なくともたとえば人工器官の表面及び血液透
析装置の構成部品を形成するのに生物学的適合性
の重合体を使用するのは普通に実施されているこ
とである。しかしながら、これらの材料は完全な
ものではなく、生きている組織との反応は問題を
残している。たとえば表面に誘発される血栓症
は、特に大量の血液が人工肺及び人工腎臓におけ
る如き異質の表面（foreign surfaces）と接触す
る場合には依然として大きな困難である。人工器
官におけるクロツトの形成は、もしクロツトが人
工表面を破壊し（break off）そして宿主血管内
に止まるならば体外システムの血液流路の閉塞及
び閉塞症を包含する有害な又は破局的ですらある
作用を及ぼす。最近、表面凝塊形成性
（surfacethrombgenacaty）は長期保存人工心臓
を使用せんとする試みを挫折させた。人工心臓に
より支持された動物に起こる死の多くは人工心臓
の機械的破損によつて引起されるのではなくてク
ロツト形成により引越こされる。透析膜、代用血
液（blood substitutes）及び人工肺はすべてこ
の問題を共有する。 一般的な生物学的適合性に対して医薬用途に使
用される材料は望ましくは、 (a) 純粋な物質として再生可能な製品であること
ができ、 (b) 劣化したり不利に変化することなく製造する
ことができ、 (c) 特定の機能に対して必要な機械的特性及び透
過性特性を有し、 (d) 機械的透過性又は表面特性が不利に変化する
ことなく滅菌可能であり、 (e) 生物学的環境によつて有害な方法で作用され
ず、 (f) 発癌性でないことが望ましい。 血液と直接の接触を包含する用途において制約
がある。物質は(i)問題となる程の血栓症を誘発す
るべきではなく、正常なクロツテイング機構を妨
害するべきではなく、(ii)細胞要素又は血液の可溶
性成分に問題となる程の損傷を引起すべきではな
い。生物学的適合性の特に血液適合性の表面、即
ち、血液凝固プロセスを活性化せずそして血栓形
成を促進しない表面を製造する多くの試みがなさ
れた。かかる試みの例はアニオン性重合対又は適
当に配向したエレクトレツト重合体の如き負に帯
電した表面、天然の抗凝固剤ヘパリン又は合成ヘ
ペリン類似体、固有に低い表面自由エネルギーを
有する荷電した表面、アルブミン被覆した表面、
及び血液から優先的にアルブミンを吸収すると考
えられるある種のポリメタンの如き表面を包含す
る。しかしながらすべては限界を有している。 表面の性質の一般的事項としてその問題を考察
すると、生物学的膜は体のすべての区域において
重要であるということは重大な意義があるとの印
象をうけた。すべての生きている細胞は外側の膜
を有し、細胞内には、種々の細胞器官、たとえ
ば、ミトコンドリア、核及び内質細網
（endoplasmicreticulum）を区分するように作用
する膜がある。様々な細縫膜が極性脂質（たとえ
ばリン脂質）のマトリツクスから構成される。か
くして赤血球は、たとえば、リン脂質二重膜のマ
トリツクス上に構成された細胞壁を有する。脂質
は細胞壁の外側表面上にリン脂質レシチン（ホス
フアチジルコリン）及びスフインゴミエリンと対
称に、そして細胞壁の内側面上にホスフアチジル
セリン及びホスフアチジルエタノールアミンと対
称に配置されている。後者は正味の負の荷電を有
しそしてそれ自身の上に血液凝固を引起すことが
知られている。前者は双性イオン構造を有し、細
胞壁の外側表面を形成する。 本発明は、リン脂質が体全体にわたり生物学的
膜の必要の構成成分であるので、生きている組織
と接触するべき異質物の表面におけるリン脂質に
よりこれらの膜に与えられた表面の膜造物（イミ
テーシヨン）がそれらを生物学的適合性ならしめ
ることの実現に基づくものである、 これが実際にそのようであり、そして本出願人
の提案の必須事項は含リンオキシ酸（phospho−
rus oxy−acid）／−窒素双性イオン基が分子構
造の外側面に存在している人工的生物学的適合性
の表面を有する物品又は物体を与えることである
ことを見出した。 その最も広い観点において、本発明は下記一般
式の共役ジーイン： 式中、B₁及びB₂の少なくとも一つは式 −（CO）_p−X₁−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Y₁ 式中ｐは０又は１であり、X₁は直接の結合又
は二価の脂肪族又は環状脂肪族基であり、Y₁は
Ｈ又は一価の脂肪族又は環状脂肪族基であり、各
B₁及び／又はB₂におけるX₁及びY₁の炭素原子の
総数は８乃至26であり、B₁及びB₂の他方は(a)式 −（CO）_p−X₁−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Y₁ の同一又は相異なる基であるか或いは(b)少なくと
も８個の炭素原子を含有する脂肪族又は環状脂肪
族基であり、ｎは０又は１であり、ｍは２、３又
は４であり、各Ｒは独立に１〜４個の炭素原子を
含有するアルキル基を表わす。 を架橋することにより得られた重合体を提供す
る。 これらの重合体の構造は、下記式 式中、Z₁、Z₂、Z₃及びZ₄の二つは前記した如き
Y₁を表わし、Z₁、Z₂、Z₃及びZ₄の他の二つは
各々−X₁−（CO）_p−Ｇを表わし、ここでX₁及び
ｐは前記した通りであり、Ｇは を表わし、式中、ｎ、ｍ及びＲは前記した通りで
あり、架橋した鎖は同一又は相異なるＧ残基に結
合している、の繰返し単位を通常含有する。 式の共役ジーインは好ましくは双性イオン性
基が天然のリン脂質レシチン及びスフインゴミエ
リンのホスフエート結合した基、即ち、コリンホ
スフエート基： 又は関連したホスフイン結合した基： であるところの共役ジーインである。 好ましい双性イオン性基はｍが２であるがｍが
３又は４であることもできる天然に存在する生成
物の類似体であり、そして各Ｒ基は天然に存在す
る生成物においてはそうであるが、メチルである
ことが好ましいが、しかしＲはエチル、プロピル
又はブチルであることもでき、そして双性イオン
性基は四級窒素において非対称に置換されていて
もよい。 本発明の共役ジーインにおいては、両B₁及び
B₂は各々式 −（CO）_p−X₁−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Y₁ の基を表わすことも好ましい。 実際問題として、対称化合物は合成するのが最
も容易な化合物、即ちB₁及びB₂においてｐ、X₁
及びY₁が同一である化合物である。しかしなが
ら、かかる対称性は本発明に従えば必須ではな
く、そして各X₁及びY₁が同一又は相異なる場合
にB₁及びB₂の一つにおいてｐが０であり、B₁及
びB₂の他方においてｐが１である化合物を使用
することが可能である。しかしながら、かかる物
質を合成することはより困難である。 本発明の理論的基礎に関する限り、B₁及びB₂
における共役ジーイン系の位置は重要ではない。
たとえば、X₁は共役ジーインがカルボン酸エス
テル又はエーテルにすぐ隣接しているように直接
結合であることができ、そしてかかる場合にY₁
は少なくとも８個の炭素原子を含有する必要があ
るであろう。共役ジーイン系が、Y₁が水素であ
り、X₁が少なくとも８個の炭素原子を含有する
ようにカルボン酸エステル又はエーテル基から遠
い疎水性鎖のその端部にあることも同じく可能で
ある。しかしながら、以下に更に詳細に論議する
理由によつて、共役ジーイン系がX₁及びY₁にお
いてほぼ同じ数の炭素原子があるように疎水性基
の中心に向かつて位置するように配置されている
のが最も便利であることが通常見出される。 X₁及びY₁は各々好ましくは脂肪族又は環状脂
肪族基である。本発明者の初期の実験は脂肪族又
は環状脂肪族基が未分岐炭化水素基である化合物
に集中されているけれども、脂肪族又は環状脂肪
族基が分岐状炭化水素基であるべきではない理由
又は炭化水素鎖上に置換基、たとえばアルコキシ
置換基又はハロゲンを含有すべきであるという理
由は何もない。下記説明において明らかとなる理
由で、共役ジーイン系が疎水性鎖における唯一の
炭素−炭素不飽和を表わすが、もし追加の架橋結
合が所望されるならば、更なる炭素−炭素不飽和
が基X₁及びY₁に存在することができることが好
ましい。 各疎水性鎖が総数12〜30個の炭素原子を含有す
るように各基B₁及びB₂におけるX₁及びY₁におけ
る炭素原子の総数が８〜26であることは重要であ
る。もし基B₁及び／又はB₂が12個より少ない炭
素原子を含有するならば得られる物質は非常に低
い温度の場合を除いて重合するのが困難であるこ
とを見出した。実験問題として、基B₁及び／又
はB₂に16乃至26個の炭素原子がある場合は、特
に鎖が22又は24個の炭素原子を含有する場合に最
も満足すべき結果が得られることを見出した。 X₁及びY₁における炭素原子の正確な構造配置
は本発明にとつて重要ではなく、それらの主要な
機能は該化合物に正しい程度の疎水性を付与し、
そして都合の良い温度で重合を許容することであ
るが、炭素原子が直鎖又は分岐構造内にあるが
X₁及びY₁は環状脂肪族配置中に３〜８個又は更
に多くの炭素原子を含有する環状脂肪残基を含む
こともできることは必須ではない。 共役ジーインの重合に関しての下記の説明から
明らかになる理由によつて、両B₁及びB₂は共役
ジーイン系が分子内及び分子間重合に参加するこ
とができるように共役ジーイン系を含むことは好
ましい。しかしながら、単に分子間重合によつて
十分な程度の架橋を得ることができ、その場合
に、基B₁及びB₂の一つは共役ジーイン系を含有
することのみが必須である。B₁及びB₂の１つの
みが共役ジーイン系を含有する場合に、B₁及び
B₂の他方は脂肪族又は環状脂肪族残基、好まし
くは炭化水素残基であることができ、これは飽和
されていてもよく又は、弧立もしくは共役ジーイ
ン系と共役していてもよいオレフイン又は多分単
一のアセチレン性不飽和を含有していてもよい。
かかる基はやはりエステル又はエーテル基を介し
てグリセロール残基に結合しており、そして少な
くとも12個の炭素原子をやはり含有するべきであ
る。 本発明の共役ジーインはそれ自体公知の方法に
よつて製造することができる。故に、双性イオン
性基は適当なホスホン酸又はホスフイン酸或いは
そのエステル化可能な誘導体をグリセロール又は
そのエステル化可能な誘導体との反応に付しそれ
によりグリセロールのα−ヒドロキシ基を反応さ
せて必要なリンエステル基を形成することにより
導入することができる。基B₁及びB₂は、カルボ
ン酸B₁COOHもしくはアルコールB₁OH又は対応
するB₂COOHもしくはBOH物質或いは上記カル
ボン酸又はアルコールの一つのグリセロール又は
そのエーテル形成性もしくはエステル形成性誘導
体とのエステルもしくはエーテル形成性誘導体を
使用するエステル化又はエーテル化により分子中
に導入することができる。これらの反応は一方で
はグリセロール又はその誘導体と、他方カルボン
又はアルコール及びリンエステルとの間で同時に
又はいずれかの順序で引続いて行なうことができ
る。本発明の好ましい化合物である対称リン脂質
の製造に対して、我々は、実際上は選ばれた含リ
ン酸又はリン酸との必要なグリセロールモノエス
テルを形成し、次いでこのモノ−リンエステルを
選ばれた共役ジーインカルボン酸の無水物（上記
酸をジシクロヘキシル−カルボジイミドと処理す
ることによつて得られた）と反応させ、次いでグ
リセロールモノエステルを有機溶媒中で且つ有機
塩基の存在下に無水物と反応させるのが便利であ
ることがわかつた。 エステル基の形成のための他の既知の方法も等
しく使用することができる。ｐが０である化合物
を製造することが望まれる場合には、対応する常
用のエーテル形成性プロセスと使用することがで
きる。 本発明の共役ジーインは、それらを化学活性線
放射し（actinic radiation）、普通は＜300nｍの
範囲の波長の紫外線放射にさらすことにより重合
することができる。かかる照射は隣接鎖の共役ジ
ーイン系間の架橋を生成する。これは下記構造の
繰返し単位を含有する重合体を生じる。 式中、Z₁、Z₂、Z₃及びZ₄は前記した通りであ
る。架橋に関与する共役ジーイン系は非対称に置
換されたジーインである。架橋は共役ジーインの
４個の炭素原子の鎖のC₁及びC₄に関与するが、
C₁及びC₄は非対称置換の故に相互に同等ではな
いので架橋が各鎖のC₁及びC₁間で又はC₁及びC₄
間又はC₄及びC₄間で起こるかどうかに依存して
種々の架橋した生成物が生じ得るたとえば、もし
架橋がC₁及びC₄間に起こるならば、繰返し単位
は である。 重合体に関する我々の構造研究は架橋した重合
体が一つ又は一つより多くの可能な架橋した生成
物を含有しているかいないかを未だ確立していな
いが、それらがすべての架橋した構造に共通であ
る共役系

【式】 を含有することを確立した。 B₁及びB₂は両方共共役ジーイン系を含有する
場合には、本発明の重合体の大抵の用途に対して
望ましい分子内及び分子間架橋の両方が存在する
であろう。この理由で、B₁及びB₂は両方共共役
ジーイン系を含有することが好ましく、そして分
子内架橋を最適にするために、B₁及びB₂の共役
ジーイン系の相対位置がほぼ同じであること、換
言すれば共役ジーイン系をグリセロール残基に接
続する炭素鎖は長さにおいて炭素原子が２個より
多く異なるべきではないことが好ましい。 本発明の重合体の意図する生物医学的用途の点
から、重合は化学活性線、普通は可視線の波長よ
り短い波長を有する化学活性線に曝露することに
よつて最も良く誘発されるが、原理的に共役ジー
イン系の重合を誘発することができることが知ら
れた任意の方法を本発明の重合体の製造に対して
て使用することができる。共役ジーインは種々の
状態で、たとえば水上の単層として、疎水性基体
たとえばテフロン上の多層として、リポソーム
（liposome）として又はKBr円板内の固体の状態
で重合することができる。 本発明の重合体は主要な用途の一つは、基体、
特に血液又は他の体液又は内部体表面と後に直接
接触せしめられるこれらの基体上への表面被覆を
与えることである。かかる表面被覆は、実際上、
本発明の共役ジーインで基体を被覆し、次いで化
学活性線に曝露することによつてその場で共役ジ
ーインを重合することによつて普通は最も良く導
入される。本発明の共役ジーインは無色の物質で
あるが、重合が進むにつれて、共役ジーインが中
間体カルベンに先ず転化されると先ず青色範囲に
わたつて進行するきわだつた色の変化があり、次
いでこの遷移状態カルベン中間体は赤色又は紫色
の着色を有する最終重合体分子に転化される。結
果として、基体上の重合は目で視て追うことがで
きる。基体はたとえば重合体、金属、ガラス、セ
ラミツク及び多くの他のものであることができ、
重合体の例はセロフアン、ポリ塩化ビニル、ポリ
カーボネート、ポリメチルメタクリレート、ポリ
エチレン、ポリテトラフルオロエチレン及びシリ
コーンゴムである。かかる被覆された基体は人工
器官移植組織（prosthetic implants）、目移植組
織（eye impjants）及びコンタクトレンズ、診
断装置、人工肺（lung machine）人工腎臓、縫
合糸、人工レンズ、随意に使用できる組織、培養
容器及び他の外科器具、手袋、カテーテル、恒久
的入口ポート（entry port）医薬送給システム、
注射器、子宮内器具、を包含する避妊装置、及び
包帯に使用することができる。 本発明は角膜内皮損傷（corneal endothelial
damage）を減少させるのに眼内レンズ上に表面
被覆を与えるために特に好適である。 眼内レンズの最初の移植は白内障抽出と関連し
た皮内細胞損失（endothelial cell loss）及び損
傷を問題となる程増加させることができる。この
損傷はもしレンズが角膜内皮に接触するならば内
皮表面へのレンズ材料、ポリメチルメタクリレー
ト（PMMA）の瞬間的付着により引起こされる
ように見える。 電子顕微鏡を使用して、カウフマン
（Kaufman）及びカツツ（Katz）はPMMAから
つくられたレンズと角膜内皮細胞との間の瞬間的
接触ですら細胞膜がIOL表面への付着からの引離
しを生じたことを示した。 ときどき起るレンズ−内皮接触におけるかかる
細胞損傷を減じたり防止したりするポリメチルメ
タクリレートの表面変性に関する研究は、この重
合体が問題になる程の短期又は長期の劣化を示す
ことなく眼内で十分に耐性であることが既に示さ
れたので実際的方法であるように思われる。新規
物質を導入する変法は同様に広範な安全及び有効
性試験の繰返しを必要とするであろう。 この分野における従来の研究はレンズと内皮と
の間の付着が疎水性ポリメチルメタクリレートと
親水性眼内組織との間の相互作用であるという考
えに基づいていた。ポリメチルメタクリレート表
面を移植に先立ちポリビニルピロリドン（PVP）
又はメチルセルロース溶液中に浸漬することによ
つて該ポリメチルメタクリレート表面を親水性に
すると、内皮損傷の臨床発生率
（clinicalincidence）を減少させることが示され
た。これらの眼内レンズ表面を一時的に変えよう
とする同様な試みにおいてPVP、シリコーン油
及び血清の浸漬溶液が使用された。しかしなが
ら、これらのレンズを手術のすぐ前に溶液に浸漬
することは面倒で且つ不便であり、滅菌性
（sterility）及び再生可能性の新しい問題が起こ
る。 本発明の物質は、本発明の物質のそれらの極性
基が細胞外液（extra cellular fluids）に面する
ように眼内レンズを被覆するのに使用される。こ
れは生きている組織及び体液との短い又は長い接
触に対してそれを好適ならしめそして皮内細胞膜
の引裂きを減じるであろう。次いで共役ジーイン
は安定化されて表面が親水性であり同時に生きて
いる組織に生物学的に適合性の重合体被覆を形成
する。 眼内レンズ又は他の支持体表面は、様々な方
法、たとえば溶液又はエマルジヨン被覆又はラン
グミアープロジエツト（Langmu ir−Blodgett）
多層浸漬方法によつて被覆することができ配向し
た層を得そして不規則な表面を処理することを可
能とする。 被覆の付着（attachment）は、たとえば被覆
されるべき重合体又は他の物質又はたとえば溶媒
処理の後それにより吸収された物質と反応性であ
る基を脂肪酸の鎖内又は鎖の末端に有する脂質を
使用して該表面への共有結合により改良すること
ができる。別法として、たとえば重合体基体を低
分子量溶媒によつて膨潤させて脂肪酸残基の脂肪
鎖が重合体構造中にその後に吸収を生じることに
よつて被覆の物理的付着が起こり得る。 本発明の共役ジーインの他の重要な用途はリポ
ソーム（liposome）の製造にある。かかるリポ
ソームは生理学的に活性な物質を支持し、その故
にたとえば非代謝性医薬品又は酵素を体へ持続放
出させる生物学的適合性処方を与えることができ
るからである。 かかるリポソームは水性媒体中に共役ジーイン
を分散させ、分散液の温度をリポソームの生成が
起こる温度である脂質又はチヤツプマン転移温度
（lipid or chapman trancition temperature）
より高い温度に分散液の温度を上昇させ、次いで
分散液を周囲温度に冷却することにより製造する
ことができる。もし生理学的に活性な物質がリポ
ソーム生成期間中水性媒体中に存在するならば、
リポソームは活性物質を含有し、そしてリポソー
ム膜構造の代謝の結果として長期にわたり活性物
質をゆつくりと放出する。かかる取合わせの実際
上の利点の一つは、このようにして水溶性及び水
不溶性活性物質を処方し、又は所望により水溶性
及び水不溶性物質を同じ処方内に、水不溶性物質
を脂肪中に先ず配合することによつて処方するこ
とが可能であるということである。 本発明の共役ジーインリン脂質又はリポソーム
の膜を形成するそれらの重合体はリポソーム内に
導入された多くの生理学的に活性な物質の補助薬
として作用することがしばしば見出される。 リポソーム形成期間中水酸化アルミニウム又は
他の補助薬を水性媒体中に導入することによつて
これらの処方に水酸化アルミニウム又は他の補助
薬を配合して生理学的に活性な物質の活性を強化
することも可能である。 リポソーム形成は多層ラメラ構造を生じるよう
に既知の方法によつて行なうことができる。小さ
な直径の単一ラメラリポソームは多重ラメラリポ
ソーム（muliti−lamellar liposomes）を超音波
振動に付することによつて発生させることができ
る。より大きな単一ラメラリポソームは共役ジー
インをアルコール中に溶解し、次いでこの溶液を
注射器を通して水性媒体中に注入することにより
発生させることができる。これらの単一ラメラ物
質は或るときは微小小胞（microue−sicles）と
して知られている。 単一ラメラであるか又は多層ラメラであり、そ
して普通は生理学的活性物質及び場合により補助
薬を含む得られるリポソームは前記した如き化学
活性線に曝露することによつて共役ジーイン系を
架橋することにより安定化することができる。か
かる照射は分予間で起こり、そして共役ジーイン
の構造、多分分子内架橋に依存して、本発明の重
合体を含んで成るリポソーム分散液を与える。本
発明の共役ジーインの架橋の前又は後に本発明の
リポソーム分散液中に他のリン脂質のリポソーム
を含ませることも可能である。 リポソーム形態にある本発明の重合体を処方す
ることは普通最も便利であるが、共役ジーインを
大量に重合し、次いで重合体を押出してリン脂質
重合体カプセルを与えることも可能である。或い
は、本発明のリン脂質重合体は他のリン脂質をベ
ースとするリポソーム系内に含ませることもでき
る。 抗原物質、ホルモン、酵素及び抗炎症剤の如き
医薬を含む広範に種類の生理学的に活性な物質を
本発明のリポソーム分散液内に処法することがで
きる。リポソーム中のインフルエンザビールス又
はそのフラグメント、ジフテリアトキシン、破傷
風トキシン及びリポソームにおけるウイルス源又
はバクテイア源から導かれた他の抗原性物質の配
合は、インシユリンの如きホルモン、抗炎症性ス
テロイドたとえばコルチコステロイド、たとえば
コルチゾン、コルチゾーン及びそれらの△′−デ
ヒドロ−及び−９−フルオロ誘導体；抗炎症性非
ステロイド、たとえばペプチド、免疫抑制性化合
物、たとえばメソトレキセート、サリチレート、
フエニルブタゾン、及び加水分解性酵素に対する
抑制剤と同じく現在では文献に十分に記載されて
いる。これらの及び他の生理学的活性な物質がい
かにしてリポソーム組成物内に導入され得るかに
ついては、たとえば米国特許第4177113号及び第
4199565号及び西ドイツ公開公報第2249552号、第
2528411号、第2643641号、第2712030号及び第
2712031号を参照することができる。これらの物
質は本発明のリポソームに編入することができる
生理学的に活性な物質の典型的なものである。 下記実施例により本発明を説明する。 以下の実施例において、ジアセチレンリン脂質
は下記の一般的方法に従つて製造された： Ａ 材料 (1) 長鎖ジアセチレン性脂肪酸（例えばエイコ
サン酸−10、12−ジイン、トリコサン酸−
10、12−ジイン、ペンタコサン酸−10、12−
ジイン、ヘプタコサン酸−10、12−ジイン、） (2) １，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド
（DCC） (3) 無水sn−グリセロ−３−ホスホリルコリン
塩化カドミウム錯体（GPC.CdCl₂） (4) Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン (5) 無水クロロホルムと四塩化炭素 Ｂ 反応条件（一般法） 脂肪酸（0.1モル）を無水四塩化炭素（150〜
200ml）に溶解しそしてDCC（0.055モル；無水
四塩化炭素25mlに溶解した）で処理した。混合
物を振とうしそして15分間放置した。ジシクロ
ヘキシル尿素の不溶性沈澱を濾別した。濾液か
ら溶媒を除去して脂肪酸無水物を取得した。こ
の工程では定量的収量が得られた。 脂肪酸無水物を無水クロロホルム（100ml）
中に溶解し、GPC.CdCl₂（0.02モル）を加え、
次いでＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンを加え
た。反応フラスコを乾燥窒素で置換し、シール
して光から保護した。次いで混合物を30〜48時
間撹拌しその後蒸発乾固せしめた。残渣を沸騰
アセトン（150ml）と混合し、室温まで冷却し
てそして溶媒をデカントした。触媒（Ｎ，Ｎ−
ジメチルアミノピリジン）の未反応脂肪酸無水
物をさらに除去するため、この方法を２度繰返
した。一緒にしたアセトン抽出物をリン脂質の
不存在のためTLCでテストした。残渣をクロ
ロホルム（200ml）に懸濁させそして氷冷した
塩酸（５％；100ml×２）で抽出した。明澄な
クロロホルム層を集めそして一緒にした塩酸層
をクロロホルム（100ml）で一回抽出して上記
主クロロホルム抽出物と混合した。それを乾燥
するまで蒸発させ、クロロホルム（25ml）に再
度溶解せしめそしてシリカゲル（キーゼルゲル
60、70−230メツシユ；イー、メルク：500ｇ）
のカラムを通した。クロロホルム：メタノー
ル：水の混合物（70：30：５）を用いて溶離を
行つた。溶離物（各々200〜250ml）の部分を集
め、約20mlまで蒸発させ、そしてTLCでテス
トした（デイツトマーモリブデンブルー試薬で
見えるようにした）。 ジアセチレンリン脂質を含有する部分を一緒
にし、蒸発させて乾燥させそして最後にベンゼ
ン溶液で凍結乾燥した。 これとは別に、全反応混合物を、アセトン抽
出の変りに、分離ロートに移り、さらにクロロ
ホルム（150−200ml）で希釈しそして氷冷した
塩酸（２×150ml；５％）で抽出し、溶媒を蒸
発させ、残渣をクロロホルム（25ml）に溶解さ
せそして上記と同様にしてシリカゲルカラムを
通して分画した。 Ｃ 収率は使用したGPC.CdCl₂の量に基づいて40
〜60％。 Ｄ Rf値は鎖長に依存して0.490〜0.500（上記し
た溶媒；カラム中で使用）。 参考例 １ 共役ジ−インリン脂質の製造 (a) ジアセチレン酸の合成 この合成の概略を以下に示す。 (1) H₂C＝CH（CH₂）₈CO₂H1.＋Br₂ ――――――→ 2.−2HBr HC≡Ｃ（CH₂）₈CO₂H(A) (2) H₂C＝CH（CH₂）_oCH₃1.＋Br₂ ――――――→ 2.−2HBr HC≡Ｃ（CH₂）_oCH₃ ｎ＝９、11 3.＋CH₃CH₂MgBr ――――――――――→ BrMgC≡Ｃ（CH₂）_oCH₃ 4.＋I₂ ―――→ IC≡（CH₂）_oCH₃(B) (3) (A)＋(B)CuCl、HON⁺H₃Cl^- ――――――――――――→ CH₃CH₂NH₂ CH₃（CH₂）Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ −（CH₂）₈CO₂H(4) (4) ２(C)Ｒ−Ｎ＝Ｃ＝Ｎ−Ｒ ―――――――――――→ アルケン及びアルケン酸を１モル当量の臭素
をゆつくりと加えることによつて石油エーテル
中において臭素化した。ジブロモ誘導体をエタ
ノール中で過剰のKOHと還流することによつ
てジブロ誘導体をただちに脱臭化水素化した。
アルコールを留去しそして希HClを加えた後、
アルキンをエーテル抽出により単離しそして真
空蒸留（10^-3mmHg）により精製した。 非対称性コドキーヴイクツ カツプリング
（Chodokiewicz coupling）のため、反応成分
の一つはヨウ化しなければならない。故に１−
アルキンを乾燥ジエチルエーテル（CaH₂−処
理した）中の僅かに過剰の臭化エチルマグネシ
ウムに加えた。生成したアセチレン性グリニヤ
ー試薬を添加したI₂と直接に反応させて所望の
ハロ誘導体を得た。反応フラスコの内容物を過
剰の希酢酸中に注ぎそしてヨ−化アセチレンを
ジエチルエーテル中に抽出した。未反応のI₂を
チオ硫酸塩洗浄により除去し、そしてジエチル
エーテルを蒸発させた後真空蒸留により精製を
達成した。 アセチレンカツプリング反応の詳細は広範に
検討されている。希KOH溶液に溶解した酸に
痕跡量のヒドロキシル塩酸塩及び水性エチルア
ミン中に溶解した0.25モル当量のCu₂Cl₂を加え
た。次いでヨウ化アルキン（１モル当量）一時
に少量ずつを加えた。始めから黄色の溶液は緑
色に変わつた。アルキンの次の添加前に数滴の
10％ヒドロキシルアミン溶液を加えることによ
つて回復した。最後に、反応混合物を酸性に
し、そして生成物をジエチルエーテル中に抽出
した。ジイン酸を40−60℃の石油エーテルから
再結晶した。 酸は容易に重合した。紫外線及び赤外分光法
はそれぞれ共役三重結合及びカルボン酸基の存
在を示した。 (b) リン脂質の合成 酸を塩化メチレン中に溶解し、0.55モルの当
量のジシクロヘキシルカルボジイミドを加える
ことによつて無水物に転化した。無水物は赤外
分光法により同定した。 リン脂質はグプタ等（Gupta et al）の方法
を使用して合成した。グリセロホスフアチジル
コリン−CdCl₂錯体（1.0モル当量）を乾燥クロ
ロホルム（P₂O₅処理した）中で30時間無水物
（2.5モル当量）及び４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミ
ノピリジン（2.0当量）と撹拌した。溶媒の除
去後、メタノール／クロロホルム／水（５：
４：１、Ｖ／Ｖ）に可溶な画分をレキシンＩ−
300（Rexyn Ｉ−300）樹脂のカラムを下へ通過
させた。今度はCdCl₂及びアミノ−ピリジンを
含まない生成物をセフアデツクスLH−20
（Cephadex LH−20）によるクロマトグラフ
イによつて精製した。出発アルケンを基準とす
る全収率は５％である。 生成物及びジパルミトイルホスフアチジルコ
リン〔ピユリス グレード（puriss grade）
Fluka〕を薄層クロマトグラフイ−〔メルク
シリカゲル プレート；溶媒、クロロホルム／
メタノール／水（65：35：４、Ｖ／Ｖ）〕及び
赤外分光法により比較した。Rf値及びスペク
トルは同一であつた。生成物はデイツトマー試
験（Dittmer reagent）で噴霧した場合に正の
試験（positine test）（青色に変つた）を与え
た。紫外線分光法による検査は共役した三重結
合が存在していることを示した。生成物はリン
脂質１，２−ジトリコサノイル（C₂₃）−及び
１，２−ペンタコサノイル（C₂₅）−10、12−ジ
イン−sn−グリセロ−３−ホスホリルコリンで
あつた。 これらのジアセチレンリン脂質（C₂₃及び
C₂₅）に対する転移温度及びエンタルピーは以
下に示される：

【表】 ピー
(k〓s〓mol^−１)

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 下式の繰返し単位を含有する重合体： 式中、 Z₁及びZ₂の一方は基Y₁を表わし、他の一方は
   基−X₁（―CO）_pＳ――Ｇを表わし； Z₃及びZ₄の一方は基Y₁を表わし、他の一方は
   基−X₁（―CO）_pＳ――Ｇを表わし； 基Y₁は、同一又は異なつて、各々水素又は１
   価の脂肪族又は環状脂肪族基であり、基−X₁（―
   CO）_pＳ――Ｇは同一又は異なつて、基X₁は同一又
   は異なる各々二価の脂肪族又は環状脂肪族基であ
   り、 ｐは０又は１であり、 基Ｇは各々下記式（Ia）の単量体から基B₁及
   び／又は基B₂が除かれた残基であり、 式中、B₁及びB₂の少なくとも一つは、下記式 −（CO）ｐ−X₁−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Y₁ ここに、X₁、Y₁及びｐは前記した通りである、 の同一又は異なる基であつて、B₁及び／又はB₂
   の各々におけるX₁及びY₁の炭素原子の総数は８
   乃至26であり；B₁及びB₂の他方は、(a)式 −（CO）ｐ−X₁−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Y₁ ここに、X₁、Y₁及びｐは前記した通りである、
   の基であるか又は(b)の少なくとも８個の炭素原子
   を有する脂肪族又は環状脂肪族基であり；ｎは１
   であり、ｍは２、３又は４であり、各Ｒは独立に
   １乃至４個の炭素原子を有するアルキルを表わ
   し、かつ前記繰返し単位中の基【式】 は上記式（Ia）の基B₁又は基B₂の共軛三重結合
   から誘導されたものである。 ２ 下式の繰返し単位を含有する特許請求の範囲
   第１項記載の重合体： 式中、X₁，Y₁，Ｇ及びｐは、特許請求の範囲
   第１項に記載した通りであり、 架橋した鎖は、同一又は異なる残基Ｇに結合し
   ている。