JPH05279256A

JPH05279256A - 血小板凝集抑制剤

Info

Publication number: JPH05279256A
Application number: JP4081948A
Authority: JP
Inventors: Takafumi Fujioka; 孝文藤岡; Shuji Teramoto; 修二寺本; Michiaki Tominaga; 道明富永; Yoichi Yabuuchi; 洋一薮内
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1991-04-03
Filing date: 1992-04-03
Publication date: 1993-10-26
Also published as: DE69205106T2; EP0531548B1; US5401754A; EP0647447B1; EP0531548A1; EP0531548A4; DE69205106D1; DK0531548T3; KR930700106A; WO1992017178A1; TW201305B; EP0647447A1; DE69233356D1; US5532253A

Abstract

(57)【要約】【目的】本発明は、血小板凝集抑制剤等の提供を目的と
する。【構成】本発明によれば、一般式【化１】〔式中Ｒ¹は水素原子又は置換基として水酸基を有する
ことのある低級アルキル基を示す。Ｒ²はフェニル環上
に置換基として低級アルコキシ基及びハロゲン原子なる
群より選ばれた基を１〜３個有することのあるフェニル
低級アルキル基、ピリジル低級アルキル基又は基−Ａ−
ＮＲ³Ｒ⁴（ここでＡは低級アルキレン基、Ｒ³及びＲ
⁴は、同一又は異なって、低級アルキル基又はフェニル
基）を示す。〕で表わされるカルボスチリル誘導体及び
その塩からなる群から選ばれた少くとも１種を含有する
血小板凝集抑制剤等が提供される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、血小板凝集抑制剤に関
する。

【０００２】

【従来技術とその課題】一般式（１）

【０００３】

【化２】

【０００４】〔式中Ｒ¹は水素原子又は置換基として水
酸基を有することのある低級アルキル基を示す。Ｒ²は
フェニル環上に置換基として低級アルコキシ基及びハロ
ゲン原子なる群より選ばれた基を１〜３個有することの
あるフェニル低級アルキル基、ピリジル低級アルキル基
又は基−Ａ−ＮＲ³Ｒ⁴（ここでＡは低級アルキレン
基、Ｒ³及びＲ⁴は、同一又は異なって、低級アルキル
基又はフェニル基）を示す。〕で表わされるカルボスチ
リル誘導体及びその塩は、公知の化合物であり、例えば
ＥＰ公開第３５５５８３号明細書に開示されている。本
発明者は、斯かるカルボスチリル誘導体及びその塩につ
き、更に研究を重ねた結果、該化合物が優れた血小板凝
集抑制作用、ホスホジエステラーゼ阻害作用、脳血流増
加作用及び血小板塊解離作用を有していることを見い出
し、ここに本発明を完成するに至った。

【０００５】

【課題を解決するための手段】即ち、本発明は、上記一
般式（１）で表わされるカルボスチリル誘導体及びその
塩からなる群から選ばれた少くとも１種を含有する血小
板凝集抑制剤、ホスホジエステラーゼ阻害剤、脳循環改
善剤並びに血小板塊解離剤に係る。

【０００６】本発明のホスホジエステラーゼ阻害剤は、
サイクリック・アデノシンモノホスフェート（以下「Ｃ
−ＡＭＰ」という）を分解するホスホジエテラーゼに対
し、特異的に阻害活性を有するものである。

【０００７】Ｃ−ＡＭＰ分解酵素であるホスホジエステ
ラーゼ（以下「ＰＤＥ」という）阻害活性を示す物質
は、例えばアニュアル・リビュー・オブ・ファーマコロ
ジイ・アンド・トキシコロジイ（ＡｎｎｕａｌＲｅｖ
ｉｅｗｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄＴ
ｏｘｉｃｏｌｏｇｙ）第１７巻，第４４１〜４７７頁
（１９７７年）に記載されている通り、上記Ｃ−ＡＭＰ
の代謝異常によりその低下の認められる各種疾病の予防
又は治療に有用なものである。即ち、一般に、細胞内Ｃ
−ＡＭＰは交感神経系伝達物質であるカテコールアミン
及び種々のペプタイドホルモンによって、アデニレート
サイクレースを介して、アデノシントリホスフェート
（以下「ＡＴＰ」という）から生成され、ＰＤＥによっ
て分解される生体成分であることが知られている。そし
て該Ｃ−ＡＭＰは生体アミン及びペプタイドホルモンの
作用を細胞内に伝達するのみならず、細胞分裂、受精・
受胎の成長及び分化、平滑筋の緊張、心臓の収縮及び代
謝、中枢及び自律神経系の機能、免疫反応、生殖機能、
インシュリン、ヒスタミン、セロトニン等の細胞内貯蔵
顆粒に含まれる物質の遊離、リソゾーム酵素系等に影響
を及ぼすものであり、該Ｃ−ＡＭＰの代謝異常（低下）
は、例えば癌発症、気管支喘息、糖尿病、動脈硬化、循
環不全、高血圧、精神病、乾癬等の各種疾病と密接な関
連があり、該Ｃ−ＡＭＰに特異的なＰＤＥ阻害剤の使用
は、これら各種疾病の治療又は予防に有効である。殊に
ＰＤＥ阻害物質の中でも上記Ｃ−ＡＭＰに特異的作用を
及ぼすものが有効であることは、例えばモレキュラー・
ファーマコロジイ（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｈａｒｍａ
ｃｏｌｏｇｙ）第１３巻，第４００〜４０６頁（１９７
６年）に記載されている。

【０００８】而して、本発明のＰＤＥ阻害剤は、以下の
ような各種疾病の予防及び／又は治療薬として有用であ
る。

【０００９】アドバンス・イン・サイクリック・ヌクレ
オタイド・リサーチ（ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＣｙｃ
ｌｉｃＮｕｃｌｅｏｔｉｄｅＲｅｓｅａｒｃｈ）第
１巻，第１７５頁（１９７２年）及びモレキュラー・フ
ァーマコロジイ第６巻，第５９７頁（１９７０年）に
は、血管平滑筋にＰＤＥ阻害剤を作用させると、そのＣ
−ＡＭＰ含量が増加する結果、該平滑筋の拡張が起り血
液流動状態が改善できることが記されている。このこと
からＰＤＥ阻害剤は循環改善薬、殊に脳循環改善薬とし
て有用であることが判る。

【００１０】自然発生高血圧ラット（以下「ＳＨＲ」と
いう）では、病態の動脈においてＣ−ＡＭＰ含量が低下
しており、これはＰＤＥ活性の増大及び血管拡張性の刺
激に対するアデニレートサイクラーゼ活性の減弱に起因
するという報告〔サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）第１７
９巻，第８０７頁（１９７３年）〕がある。これが血管
平滑筋の弛緩反応を悪化させていると考えられる。それ
故、ＰＤＥを阻害し、Ｃ−ＡＭＰを増加させることによ
り血管抵抗性を減弱させ、高血圧を治療することができ
る。

【００１１】更にまた、腎性の高血圧等では利尿剤を用
いることにより総血液量を減少させ降圧作用を発現す
る。公知の利尿剤ベンゾチアジド誘導体は、ＰＤＥの阻
害作用を有し〔アナルス・オブ・ニューヨーク・アカデ
ミイ・オブ・サイエンス（ＡｎｎａｌｓｏｆＮｅｗ
ＹｏｒｋＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ）
第１５０巻，第２５６頁（１９６８年）を参照〕、ま
た、Ｃ−ＡＭＰの上昇が利尿作用を亢進させる〔ジャー
ナル・オブ・クリニカル・インベスティゲイション（Ｊ
ｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＩｎｖｅｓｔ
ｉｇａｔｉｏｎ）第４１巻，第７０２頁（１９６８年）
を参照〕との報告がある。このようにＰＤＥ阻害剤は高
血圧治療薬及び利尿剤として有用である。

【００１２】プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナ
ル・アカデミイ・オブ・サイエンス・オブ・ユナイテッ
ド・ステーツ・オプ・アメリカ（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ
ｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙ
ｏｆＳｃｉｅｎｃｅｏｆＵｎｉｔｅｄＳｔａｔ
ｅｓｏｆＡｍｅｒｉｃａ）第６８巻，第４２５頁
（１９７１年）に記載されている通り、公知のＰＤＥ阻
害剤であるテオフィリンは、癌化され、また腫瘍化され
た細胞を正常化させる作用を有しており、このことから
本発明のＰＤＥ阻害剤は癌治療薬として有効であること
が判る。

【００１３】ジャーナル・オブ・クリニカル・インベス
ティゲイション第５２巻，第４８頁（１９７３年）に
は、気管支平滑筋の弛緩が、交感神経伝達物質であるカ
テコールアミンのβ−作用によるＣ−ＡＭＰ含量の上昇
により惹起され、また気管支喘息患者の気管支平滑筋中
のＣ−ＡＭＰ含量は総じて低下の傾向を示すことが記さ
れている。ＰＤＥ阻害剤は、Ｃ−ＡＭＰの分解を抑制す
ることにより、該Ｃ−ＡＭＰ含量の上昇及びそれによる
気管支平滑筋の弛緩を可能とする。事実、公知のＰＤＥ
阻害剤であるテオフィリンは、このような作用機序によ
り気管支喘息の治療薬として知られている。従って、本
発明のＰＤＥ阻害剤も気管支喘息の治療薬として有用で
ある。

【００１４】ジャーナル・オブ・イムノロジイ（Ｊｏｕ
ｒｎａｌｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）第１０８巻，
第６９５頁（１９７２年）に報告されている通り、アレ
ルギー性喘息患者は、一般に化学伝達物質であるヒスタ
ミンの肥満細胞等からの遊離に基づいて気管支平滑筋の
収縮が認められる。上記ヒスタミンの肥満細胞からの遊
離は、Ｃ−ＡＭＰの減少によって起るものであり、従っ
てＰＤＥ阻害剤により該Ｃ−ＡＭＰ含量を増加すれば、
上記ヒスタミン遊離を抑制できる結果アレルギー性喘息
の治療又は予防に効果がある。

【００１５】サイクリック・ヌクレオタイド・イン・デ
ィジーズ（ＣｙｃｌｉｃＮｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｉ
ｎＤｉｓｅａｓｅ，Ｂｏｌｔｉｍｏｒｅ，Ｕｎｉｖ．
Ｐａｒｋｐｒｅｓｓ）第２１１頁（１９７５年）に示さ
れる通り、血糖を降下させる最も重要なホルモンはイン
シュリンである。該インシュリンは、グルコース、カテ
コールアミン、グルカゴン等によってその分泌が亢進さ
れるが、この分泌に先立ちＣ−ＡＭＰの上昇が起こる。
膵臓におけるＣ−ＡＭＰの上昇は、インシュリン分泌亢
進降下を奏し得る。従って、ＰＤＥ阻害剤の利用はＣ−
ＡＭＰの上昇、インシュリン分泌亢進及びこれによる糖
尿病治療に有効である。

【００１６】ジャパニーズ・ハート・ジャーナル（Ｊａ
ｐａｎｅｓｅＨｅａｒｔＪｏｕｒｎａｌ）第１６
巻，第７６頁（１９７５年）には、動脈硬化を起こして
いる血管内皮細胞ではＣ−ＡＭＰ含量の減少が認めら
れ、逆にＣ−ＡＭＰ含量の増加は脂肪分解作用を亢進す
る。ＰＤＥ阻害剤はＣ−ＡＭＰ含量を増加せしめ、血管
内皮細胞の脂肪分解を促進する結果、動脈硬化の予防に
有効である。

【００１７】フェデレーション・プロシーディングス
（ＦｅｄｅｒａｔｉｏｎＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ）第
３０巻，第３３０頁（１９７１年）に述べられているよ
うに、薬理学的精神病薬は、主たる作用部位である中枢
神経系のＣ−ＡＭＰ含量を変化させる。例えば、フェノ
チアジン類抗精神病薬は脳においてカルシウム依存性の
アクチベータープロテインによるＰＤＥの活性化を阻害
して細胞内Ｃ−ＡＭＰ濃度を上昇させ、また三環式抗う
つ病薬であるベンゾジアゼピン類は脳におけるＰＤＥ阻
害作用を有し、これにより精神病治療に有効である。従
って、ＰＤＥ阻害剤はこれらの精神病薬と同様にＣ−Ａ
ＭＰ濃度低下に起因する精神病の治療に利用できる。

【００１８】ジャーナル・オブ・インベスティゲイティ
ブ・デルマトロジイ（ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｖｅ
ｓｔｉｇａｔｉｖｅＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ）第６４
巻，第１２４頁（１９７５年）に述べられているよう
に、乾癬は皮膚で急速に広がり、この乾癬病巣ではＣ−
ＡＭＰ含量が低下し、ＰＤＥ活性が正常値の約３倍増大
し、且つサイクリック・グアニン・モノホスフェート
（以下「Ｃ−ＣＭＰ」という）含量が上昇している。更
にグリコーゲンの貯留も認められる。Ｃ−ＡＭＰは細胞
増殖分化を抑制し、グリコーゲン分解を促進する。この
乾癬の治療には臨床的に公知のＰＤＥ阻害剤であるパパ
ベリンが実際に利用されており、ＰＤＥ阻害剤がこの治
療薬として有効であることが判る。

【００１９】広島大学医学雑誌第３６巻，第６号，第６
８８〜６８９頁（１９８８年）に述べられているよう
に、毛模体上皮のＣＡＭＰ濃度を上昇させる物質は、毛
模体上皮からの房水産生量を減少させ、眼圧を下げると
言われている。ＰＤＥ阻害剤の投与により眼圧下降が得
られており、ＰＤＥ阻害剤が眼圧低下剤として有効であ
ることが判る。

【００２０】上記一般式（１）で表わされるカルボスチ
リル誘導体及びその塩は、優れた血小板凝集抑制作用、
ホスホジエステラーゼ阻害作用、脳血流増加作用、血小
板塊解離作用、スロンボキサンＡ₂拮抗作用等を有して
いる。従って、該カルボスチリル誘導体及びその塩は、
脳卒中、脳梗塞、心筋梗塞等の血栓症予防及び治療剤、
脳循環改善剤、ホスホジエステラーゼ阻害剤、緑内障治
療剤として最適に使用され得る。

【００２１】上記一般式（１）に示される各基はより具
体的にはそれぞれ次の通りである。低級アルキル基とし
ては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピ
ル、ブチル、tert−ブチル、ペンチル、ヘキシル基等の
炭素数１〜６の直鎖又は分枝鎖状アルキル基を挙げるこ
とができる。

【００２２】フェニル環上に置換基として低級アルコキ
シ基及びハロゲン原子なる群より選ばれた基を１〜３個
有することがあるフェニル低級アルキル基としては、例
えばベンジル、２−フェニルエチル、１−フェニルエチ
ル、３−フェニルプロピル、４−フェニルブチル、１，
１−ジメチル−２−フェニルエチル、５−フェニルペン
チル、６−フェニルヘキシル、２−メチル−３−フェニ
ルプロピル、ジフェニルメチル、２，２−ジフェニルエ
チル、２−（３−メトキシフェニル）エチル、１−（４
−メトキシフェニル）エチル、２−メトキシベンジル、
３−（２−エトキシフェニル）プロピル、４−（３−エ
トキシフェニル）ブチル、１，１−ジメチル−２−（４
−エトキシフェニル）エチル、５−（４−イソプロポキ
シフェニル）ペンチル、６−（４−ヘキシルオキシフェ
ニル）ヘキシル、３，４−ジメトキシベンジル、３，
４，５−トリメトキシベンジル、２，５−ジメトキシベ
ンジル、２−クロロベンジル、２−（３−ブロモフェニ
ル）エチル、１−（４−クロロフェニル）エチル、３−
（４−フルオロフェニル）プロピル、４−（２，３−ジ
クロロフェニル）ブチル、１，１−ジメチル−２−
（２，４−ジブロモフェニル）エチル、５−（３，４−
ジフルオロフェニル）ペンチル、６−（２，４，６−ト
リクロロフェニル）ヘキシル、２−メチル−３−（２−
フルオロフェニル）プロピル、２−クロロ−４−メトキ
シベンジル、３−メトキシベンジル、４−メトキシベン
ジル、３−クロロベンジル、４−クロロベンジル基等の
アルキル部分の炭素数が１〜６の直鎖又は分枝鎖状アル
キル基であり、且つフェニル環上に炭素数１〜６の直鎖
又は分枝鎖状アルコキシ基及びハロゲン原子なる群より
選ばれた基を１〜３個有することのあるフェニルアルキ
ル基を挙げることができる。

【００２３】ピリジル低級アルキル基としては、例えば
（３−ピリジル）メチル、（２−ピリジル）メチル、２
−（４−ピリジル）エチル、１−（２−ピリジル）エチ
ル、３−（２−ピリジル）プロピル、４−（２−ピリジ
ル）エチル、１，１−ジメチル−２−（３−ピリジル）
エチル、５−（２−ピリジル）ペンチル、６−（４−ピ
リジル）ヘキシル基等のアルキル部分の炭素数が１〜６
の直鎖又は分枝鎖状アルキル基であるピリジルアルキル
基を挙げることができる。

【００２４】低級アルキレン基としては、例えばメチレ
ン、エチレン、トリメチレン、２−メチルトリメチレ
ン、２，２−ジメチルトリメチレン、１−メチルトリメ
チレン、メチルメチレン、エチルメチレン、テトラメチ
レン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン基等の炭素数１
〜６の直鎖又は分枝鎖状アルキレン基を挙げることがで
きる。

【００２５】置換基として水酸基を有することのある低
級アルキル基としては、例えばメチル、エチル、プロピ
ル、イソプロピル、ブチル、tert−ブチル、ペンチル、
ヘキシル、ヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチル、
１−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、４−
ヒドロキシブチル、１，１−ジメチル−２−ヒドロキシ
エチル、５−ヒドロキシペンチル、６−ヒドロキシヘキ
シル、２−メチル−３−ヒドロキシプロピル基等の置換
基として水酸基を有することのある炭素数１〜６の直鎖
又は分枝鎖状アルキル基を挙げることができる。

【００２６】本発明の一般式（１）で表わされるカルボ
スチリル誘導体は、医薬的に許容される酸を作用させる
ことにより容易に酸付加塩とすることができる。該酸と
しては例えば、塩酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸等の無
機酸、シュウ酸、マレイン酸、フマール酸、リンゴ酸、
酒石酸、クエン酸、安息香酸等の有機酸を挙げることが
できる。

【００２７】また本発明の一般式（１）で表わされるカ
ルボスチリル誘導体のうち酸性基を有する化合物は、医
薬的に許容される塩基性化合物を作用させることにより
容易に塩を形成させることができる。該塩基性化合物と
しては例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸
化カルシウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム等を
挙げることができる。

【００２８】尚本発明は光学異性体も当然に包含するも
のである。

【００２９】一般式（１）の化合物は通常、一般的な医
薬製剤の形態で用いられる。製剤は通常使用される充填
剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑
沢剤等の稀釈剤或いは賦形剤を用いて調製される。この
医薬製剤としては各種の形態が治療目的に応じて選択で
き、その代表的なものとして錠剤、丸剤、散剤、液剤、
懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液
剤、懸濁剤等）等が挙げられる。錠剤の形態に成形する
に際しては、担体としてこの分野で従来公知のものを広
く使用でき、例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブド
ウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結
晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤、水、エタノール、プ
ロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼ
ラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、
メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリ
ドン等の結合剤、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウ
ム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、
炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸
エステル類、ウラリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モ
ノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステ
アリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、第
四級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸
収促進剤、グリセリン、デンプン等の保湿剤、デンプ
ン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸
等の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、
ポリエチレングリコール等の滑沢剤等が例示できる。更
に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖
衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティン
グ錠或いは二重錠、多層錠とすることができる。丸剤の
形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来
公知のものを広く使用でき、例えばブドウ糖、乳糖、デ
ンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の
賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エ
タノール等の結合剤、ラミナランカンテン等の崩壊剤等
が例示できる。坐剤の形態に成形するに際しては、担体
として従来公知のものを広く使用でき、例えばポリエチ
レングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アル
コールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等
を挙げることができる。注射剤として調製される場合に
は液剤及び懸濁剤は殺菌され、且つ血液と等張であるの
が好ましく、これら液剤、丸剤及び懸濁剤の形態に成形
するのに際しては、稀釈剤としてこの分野において慣用
されているものを全て使用でき、例えば水、エチルアル
コール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステア
リルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコー
ル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等
を挙げることができる。尚、この場合等張性の溶液を調
製するに充分な量の食塩、フドウ糖或いはグリセリンを
本発明の医薬製剤中に含有せしめてもよく、また通常の
溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。更
に必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤
等や他の医薬品を該医薬製剤中に含有せしめてもよい。

【００３０】本発明の医薬製剤中に含有されるべき一般
式（１）の化合物の量は特に限定されず広範囲に選択さ
れるが、通常全組成物中１〜７０重量％、好ましくは１
〜３０重量％である。

【００３１】本発明の医薬製剤の投与方法には特に制限
はなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条
件、疾患の程度等に応じた方法で投与される。例えば錠
剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤
の場合には経口投与される。また注射剤の場合には単独
で或いはブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して
静脈内投与され、更には必要に応じて単独で筋肉内、皮
内、皮下もしくは腹腔内投与される。坐剤の場合には直
腸内投与される。

【００３２】本発明の医薬製剤の投与量は、用法、患者
の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等により適宜選
択されるが、通常有効成分である一般式（１）の化合物
の量は１日当り体重１kg当り約０．１〜１０mgとするの
がよい、また、投与単位形態中に有効成分を１〜２００
mg含有するのがよい。

【００３３】

【実施例】以下に薬理試験結果及び製剤例を掲げる。

【００３４】薬理試験１試験化合物の血小板凝集抑制作用は、ボーン（Born）ら
の方法〔J.Physiol.,London,１６２，６７，（１９６
２）〕により、血小板凝集計〔Platelet Aggregation T
racer,二光バイオサイエンス株式会社製〕を用いて測定
した。

【００３５】ヒトより採血した血液に、該血液９容に対
して３．８％クエン酸ナトリウムを１容となる割合で混
合し、この試料を１１００ｒｐｍ、１０分間遠心分離し
て多血小板血漿〔Platelet rich plasma（ＰＲＰ）〕を
得た。残りの試料を更に３０００ｒｐｍ、１５分間遠心
分離して乏血小板血漿〔Platelet poor plasma（ＰＰ
Ｐ）〕を得た。

【００３６】上記で得られたＰＲＰ中の血小板数を、コ
ールターカウンター（Coulter Counter,Coulter electr
onics inc.）を用いて測定し、該ＰＲＰの血小板数が３
０００００個／μｌとなるようにこれをＰＰＰで希釈し
てＰＲＰ液を調製した。

【００３７】試験化合物を予め定めた濃度で含有する溶
液１〜２μｌと、上記で調製したＰＲＰ液２００μｌと
を凝集測定用セルに入れ、３７℃で１分間加温し、次に
このセルにアデノシン・ジホスフェート（ＡＤＰ、シグ
マ社製）或いはコラーゲンの懸濁液（Collagen Reagent
Horm,Hormon-Chemie 社製）を加えて血小板の凝集を誘
発させ、その透過度の変化を測定し、血小板凝集曲線を
作成した。尚、上記ＡＤＰ及びコラーゲンの濃度はそれ
ぞれ最終濃度が１４〜１６μＭ及び１〜４μｇ／ｍｌと
なるように調製した。

【００３８】血小板の最大凝集率〔Maximum Aggregatio
n Rate（ＭＡＲ）〕を下式により血小板凝集曲線から算
出した。

【００３９】ＭＡＲ＝（ｂ−ａ）／（ｃ−ａ）×１００ここでａは同様の試験により求めたＰＲＰの透過度を、
ｂは上記試験における試験化合物及び凝集誘発剤を含有
するＰＲＰ液の最大変化時の透過度を、またｃは同様の
試験により求めたＰＰＰの透過度をそれぞれ示す。

【００４０】また、上記において試験化合物を加えない
対照についても同様にしてＭＡＲを算出し、この値を基
準として、上記試験における種々の濃度での各試験化合
物の血小板凝集の抑制率（％）を、下式により算出し
た。

【００４１】

【数１】

【００４２】薬理試験２本発明化合物のＣ−ＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作
用を、バイオケミカ・エ・バイオフィジカ・アクタ（Ｂ
ｉｏｃｈｉｍｉｃａｅｔＢｉｏｐｈｙｓｉｃａＡ
ｃｔａ）第４８４巻，第３９８〜４０７頁（１９７７
年）及びバイオケミカル・メディシン（Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ）第１０巻，第３０１〜３
１１頁（１９７４年）に記載の方法に準じて測定した。

【００４３】即ち、イヌ心臓を摘出し、４℃トリス−ア
セテート緩衝液（５０ミリモル）に２−メルカプトエタ
ノール（３．７５ミリモル）を加えた溶液（ｐＨ６）に
入れ、その中で血管等を除き、３倍量の緩衝液中でミン
スした後、ホモゲナイザーで磨砕し、次いで２回凍結融
解後、１０５０００×ｇにて遠心分離に付し、その上清
を粗酵素液として用いた。

【００４４】この粗酵素液１０ｍｌを、トリス−アセテ
ート緩衝液（５０ミリモル）に２−メルカプトエタノー
ル（３．７５ミリモル）を含む溶液（ｐＨ６）で緩衝化
したＤＥＡＥ−セルロースカラムに通し、同緩衝液３０
ｍｌで洗浄溶出した。これに酢酸ナトリウム−トリス−
ＨＣｌ緩衝液を用い、リニアグラディエント法にて０．
５ｍｌ／分の流速にて５ｍｌずつのフラクションに分け
て溶出した（総溶出液量、約３００ｍｌ）。これによ
り、１００マイクロモルの高いＣ−ＡＭＰ基質濃度で２
ナノモル／ｍｌ／分以下の弱い活性を有し、且つ０．４
マイクロモルの低いＣ−ＡＭＰ基質濃度で１００ピコモ
ル／ｍｌ／分以上の強い活性を有するフラクションを
得、これをＣ−ＡＭＰホスホジエステラーゼとして用い
た。

【００４５】各種濃度の試験化合物水溶液０．１ｍｌと
Ｃ−ＡＭＰ（トリチウムＣ−ＡＭＰ）０．４マイクロモ
ルを含むトリス−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ８．０、４０ミリ
モル、牛血清アルブミン５０μｇ及びＭｇＣｌ₂４ミリ
モルを含有）とを混合し、基質液０．２ｍｌを調製し
た。

【００４６】上記基質液に前記Ｃ−ＡＭＰホスホジエス
テラーゼ溶液０．２ｍｌを添加し、３０℃で２０分間反
応させ、トリチウムＣ−ＡＭＰをトリチウム５'-ＡＭＰ
に変えた。この反応液を沸騰水中に浸漬して反応を停止
させた後、氷水中で冷却した。これに蛇毒（１ｍｇ／ｍ
ｌ）０．０５ｍｌを加えて、３０℃で１０分間反応させ
てトリチウム５'-ＡＭＰを更にトリチウムアデノシンに
変え、この反応液を陽イオン交換樹脂に通し、トリチウ
ムアデノシンを吸着させ、蒸留水で洗浄し、３Ｎアンモ
ニア水１．５ｍｌで溶出した。この溶出液について、常
法により液体シンチレーションカウンターを用いて生成
トリチウムアデノシンを計測することにより、ホスホジ
エステラーゼ活性を測定した。

【００４７】この結果より、各濃度での試験化合物のホ
スホジエステラーゼ活性値（Ｖｓ）を求め、コントロー
ル（試験化合物を含まない水）の活性値（Ｖｃ）とか
ら、次式に従ってホスホジエステラーゼ阻害率（％）を
算出した。

【００４８】ホスホジエステラーゼ阻害率（％）＝（Ｖ
ｃ−Ｖｓ）／Ｖｃ×１００薬理試験３雑種成犬をペントバルビタール（３０ｍｇ／ｋｇｉ．
ｖ．）で麻酔し、人工呼吸下に開胸した。局所血流量
（ここでは小脳及び大脳血流量）は次のようにして求め
た。即ち、カラードマイクロスフェア（ｃｏｌｏｒｅ
ｄｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅ）を左心房から約６００万
個注入し、次いで試験化合物を各種の用量で３０分間静
脈内持続投与し、それぞれの用量投与後毎に、それぞれ
の用量で色分けしたカラードマイクロスフェアを左心
房から約６００万個注入した。その後小脳及び大脳を摘
出し、アルカリ処理して組織からカラードマイクロス
フェアを抽出、回収し、顕微鏡下に各色毎に計数し、動
脈血中のカラードマイクロスフェアとの流量比より、
局所血流量を次式に従い算出した。

【００４９】Ｑ_m＝（Ｃ_m×Ｑ_r）／Ｃ_r ここでＱ_mは局所血流量、Ｃ_mは組織１ｇ当りのマイクロ
スフェア数、Ｑ_rは動脈血の回収速度、Ｃ_rは動脈血中の
マイクロスフェア数である。

【００５０】血流量増加率（％）は、下記式に従い算出
した。

【００５１】血流量増加率（％）＝〔（Ｑ_md−Ｑ_mc）／
Ｑ_mc〕×１００ここでＱ_mdは試験化合物を投与した時の局所血流量であ
り、Ｑ_mcは試験化合物を投与しない時の局所血流量であ
る。

【００５２】薬理試験４上記薬理試験１と同様にして、得られたＰＲＰ液２００
μｌを凝集測定用セルに入れ、３７℃で１分間加温し、
試験化合物を添加せずにＡＤＰ又はコラーゲン懸濁液
（最終濃度はそれぞれ１４〜１６μＭ及び１〜４μｇ／
ｍｌ）を加えて、血小板の凝集塊を生じさせ、透過度が
安定したところでＭＡＲを求めた。このＭＡＲを「ＭＡ
Ｒ−１」とする。次に試験化合物を添加し、５分後の透
過度から再びＭＡＲを求めた。このＭＡＲを「ＭＡＲ−
２」とする。

【００５３】血小板塊解離率（％）は、下記式に従い算
出した。

【００５４】

【数２】

【００５５】上記試験に用いる試験化合物を以下に示
す。

【００５６】試験化合物No. １６−〔３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ベンジルアミノ）−
２−ヒドロキシプロポキシ〕カルボスチリル２６−〔３−（３−メトキシベンジル）アミノ−２−
ヒドロキシプロポキシ〕カルボスチリル・塩酸塩３６−〔３−（４−クロロベンジルアミノ）−２−ヒ
ドロキシプロポキシ〕カルボスチリル・塩酸塩４６−｛３−〔Ｎ−メチル−Ｎ−（２−ピリジルメチ
ル）アミノ〕−２−ヒドロキシプロポキシ｝カルボスチ
リル５６−〔３−｛Ｎ−メチル−Ｎ−〔２−（Ｎ−メチル
アニリノ）エチル〕アミノ｝−２−ヒドロキシプロポキ
シ〕カルボスチリル６６−〔３−（４−メトキシベンジルアミノ）−２−
ヒドロキシプロポキシ〕カルボスチリル・塩酸塩７６−〔３−（３，４−ジメトキシベンジル）アミノ
−２−ヒドロキシプロポキシ〕カルボスチリル８６−〔３−（３−クロロベンジル）アミノ−２−ヒ
ドロキシプロポキシ〕カルボスチリル９６−〔３−（３，４−ジエトキシベンジル）アミノ
−２−ヒドロキシプロポキシ〕カルボスチリル 10 ６−｛３−〔Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ−
（４−フルオロベンジル）アミノ〕−２−ヒドロキシプ
ロポキシ｝カルボスチリル薬理試験１で得られた結果を下記表１に、薬理試験２で
得られた結果を下記表２、薬理試験３で得られた結果を
下記表３に、薬理試験４で得られた結果を下記表４にそ
れぞれ示す。

【００５７】

【表１】

【００５８】

【表２】

【００５９】

【表３】

【００６０】

【表４】

【００６１】製剤例１６−〔３−（３−メトキシベンジル）アミノ−２−ヒドロキシプロポキシ〕カルボスチリル・塩酸塩５mg デンプン１３２mg マグネシウムステアレート１８mg 乳糖４５mg 計２００mg 常法により、１錠中に上記組成を含有する錠剤を製造し
た。

【００６２】製剤例２６−〔３−（３，４−ジメトキシベンジル）アミノ−２−ヒドロキシプロポキシ〕カルボスチリル５００mg ポリエチレングリコール（分子量：４０００）０．３ｇ塩化ナトリウム０．９ｇポリオキシエチレンソルビタンモノオレート０．４ｇメタ重亜硫酸ナトリウム０．１ｇメチル−パラベン０．１８ｇプロピル−パラベン０．０２ｇ注射用蒸留水１００ml 上記パラベン類、メタ重亜硫酸ナトリウム及び塩化ナト
リウムを攪拌しながら８０℃で上記の蒸留水に溶解し
た。得られた溶液を４０℃まで冷却し、本発明化合物、
ポリエチレングリコール及びポリオキシエチレンソルビ
タンモノオレートを順次溶解させ、次にその溶液に注射
用蒸留水を加えて最終の容量に調整し、適当なフィルタ
ーペーパーを用いて滅菌濾過して１mlずつアンプルに分
注し、注射剤を調製した。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式【化１】〔式中Ｒ¹は水素原子又は置換基として水酸基を有する
ことのある低級アルキル基を示す。Ｒ²はフェニル環上
に置換基として低級アルコキシ基及びハロゲン原子なる
群より選ばれた基を１〜３個有することのあるフェニル
低級アルキル基、ピリジル低級アルキル基又は基−Ａ−
ＮＲ³Ｒ⁴（ここでＡは低級アルキレン基、Ｒ³及びＲ
⁴は、同一又は異なって、低級アルキル基又はフェニル
基）を示す。〕で表わされるカルボスチリル誘導体及び
その塩からなる群から選ばれた少くとも１種を含有する
血小板凝集抑制剤。
【請求項２】請求項１に記載のカルボスチリル誘導体及
びその塩からなる群から選ばれた少くとも１種を含有す
るホスホジエステラーゼ阻害剤。
【請求項３】請求項１に記載のカルボスチリル誘導体及
びその塩からなる群から選ばれた少くとも１種を含有す
る脳循環改善剤。
【請求項４】請求項１に記載のカルボスチリル誘導体及
びその塩からなる群から選ばれた少くとも１種を含有す
る血小板塊解離剤。