JPH0528117B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPH0528117B2 JPH0528117B2 JP18116486A JP18116486A JPH0528117B2 JP H0528117 B2 JPH0528117 B2 JP H0528117B2 JP 18116486 A JP18116486 A JP 18116486A JP 18116486 A JP18116486 A JP 18116486A JP H0528117 B2 JPH0528117 B2 JP H0528117B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- propanediol
- halogeno
- manufacturing
- genus
- optically active
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
（産業上の利用分野）
本発明は光学活性３−ハロゲノ−１，２−プロ
パンジオールの製造法に関する。 光学活性３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ
ールは種々の医薬品や光学活性な生理活性物質の
合成原料として有用な物質である。たとえば(R)−
３−クロロ−１，２−プロパンジオールはＬ−カ
ルニチンの合成に利用されている（特開昭57−
165352）。 （従来の技術と問題点） (R)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオール
の製法に関しては、Hayden F.Jonesによりメチ
ル−５−クロロ−５−デオキシ−α−Ｌ−アラビ
ノフラノシドより得る方法〔ケミストリー・アン
ド・インダストリー（Chemistry and Industry）
P.538、15July、1978〕、又H.Jacksonらにより
１，２，５，６−ジアセトニル−Ｄ−マンニトー
ルより得る方法〔ケミストリー・アンド・バイオ
ロジカル・インターアクシヨンズ（Chem.−
Biol.Interactions）、13、193（1976）〕、同様にY.
Kawakamiらの方法〔ジヤーナル・オブ・オー
ガニツク・ケミストリー（Journal of Organic
Chemistry、47、3581（1982）〕などが知られてい
る。又(S)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ
ールの製法に関しては、H.F.Jonesによるメチル
−６−クロロ−６−デオキシ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシドより得る方法（西独特許第2743858号）、
Porter K.E.らによる１，２，５，６−ジアセト
ニル−Ｄ−マンニトールより得る方法〔Chem.−
Biol.Interactions.41、95（1982）〕などが知られ
ている。 しかしながらこれらの方法は原料物質が入手し
にくかつたり、工程が複雑であつたりして工業的
製法とはいいがたく、工業的に有利な光学活性３
−ハロゲン−１，２−プロパンジオールの製造が
望まれていた。 本発明者らは従来高価な原料を用い複雑な反応
によつて得ていた光学活性３−ハロゲノ−１，２
−プロパンジオールの工業的生産を目指して研究
した結果、安価な（Ｒ，Ｓ）−３−ハロゲノ−１，
２−プロパンジオールに微生物を作用させること
により(S)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ
ールを選択的に代謝させ、(R)−３−ハロゲノ−
１，２−プロパンジオールを残存させうること
（特願昭60−264568、特願昭61−000409）、又は(R)
−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオールを選
択的に代謝させ、(S)−３−ハロゲノ−１，２−プ
ロパンジオールを残存させうること（特願昭60−
264567）を既に見い出している。 （問題点を解決するための手段） 本発明者らは、微生物反応利用による光学活性
３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオールの生産
性をたかめるため鋭意研究した結果、SH基含有
化合物を反応液中に添加することにより基質濃度
を高め、生産性向上につなぎうることを見い出
し、本発明を完成するに至つた。 本発明に使用しうるSH基含有化合物としては
ジチオスレイトール、ジチオエリトリトール、グ
ルタチオン、システイン、メルカプトエタノー
ル、チオグリセリン、２，３−ジメルカプトプロ
パノール、チオ酢酸、ジメルカプトコハク酸、２
−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロ
ピオン酸、チオグリコール酸、tert−ブチルメル
カプタン、水硫化ナトリウム、水硫化カリウムな
どがある。 光学活性(S)−３−ハロゲノ−１，２−プロパン
ジオールのみを選択的に代謝し、(R)体を蓄積させ
る場合には、微生物としてブレタノミセス
（Brettanomyces）属、キヤンデイダ（Candida）
属、エンドミセス（Endomycea）属、ゲオトリ
カム（Geotrichum）属、ナドソニア
（Nadsonia）属、パシソレン（Pachysolen）属、
ロドスポリデイウム（Rhodosporidium）属、サ
ツカロミコプシス（Saccharomycopsis）属、ス
ポリデイオポラス（Sporidiobolus）属、トルロ
プシス（Torulopsis）属、バチルス（Bacillus）
属、エンテロバクター（Enterobacter）属、エ
シエリキア（Escherichia）属、クレブシエラ
（Klebsiella）属、アースロバクター
（Arthrobacter）属、アスペルギラス
（Aspergillus）属、ポーベリア（Beauveria）
属、カロネクトリア（Calonectoria）属、コニカ
エテイデイウム（Conichaetidium）属、バツク
セラ（Backusella）属、クラドボツリウム
（Cladobotryum）属、クロリデイウム
（Chloridium）属、コルテイシウム（Corticium）
属、カニングハメラ（Cunninghamella）属、シ
リシネラ（Ciricinella）属、グリオクラデイウム
（Gliocladium）属、グリオセフアロトリカム
（Gliocephalotrichum）属、エキノポドスポラ
（Echinopodospora）属、ゲラシノスポラ
（Gelasinospora）属、デイコトモミセス
（Dichotomomyces）属、ピクノポラス
（Pycnoporus）属、ネオサルトリア
（Neosartorya）属、ペニシリウム
（Penicillium）属、タムノステイラム
（Thamnostylum）属、チゴリンカス
（Zygorhynchus）属、モナスカス（monascus）
属に属する微生物を挙げることができる。更に詳
しくはブレタノミセス・クステリアヌス
（Brettanomyces custerianus）IFO 1585、キヤ
ンデイダ・ユーテイリス（Candida utilis）IFO
0626、エンドミセス・マグヌスイ（Endomyces
magnusii）CBS 164.32、ゲオトリカム・キヤン
デイダム（Geotrichum candidum）CBS
187.67、ナドソニア・エロンガータ（Nadsonia
elongata）IFO 0665、パシソレン、タンノフイ
ラス（Pachysolen tannophilus）IFO 1007、ロ
ドスポリデイウム・トルロイデス
（Rhodosporidium toruloides）IFO 0871、サツ
カロミコプシス・リポリテイカ
（Saccharomycopsis lipolytica）IFO 0717、ス
ポリデイオボラス・ジヨンソニイ
（Sporidiobolus johnsonii）IFO 6903、トルロプ
シス・グロツペンギエセリ（Torulopsis
gropengiesseri）IFO 0659、バチルス・セレウ
ス（Bacillus cereus）IFO 3001、エンテロバク
ター・アエロゲネス（Enterobacter aerogenes）
IFO 13534、エシエリキア・コリ（Escherichia
coli）IFO 12734、クレブシエラ・ニユーモニア
（Klebsiella pneumoniae）IFO 12009、アース
ロバクター・シンプレツクス（Arthrobacter
simplex）IFO 12069、アスペルギラス・フイク
ム（Aspergillus ficuum）IFO 4034、ボーベリ
ア・バシアナ（Beaveria bassiana）IFO 8554、
カロネクトリア・ヘデラ（Calonectria
hederae）、コニカエテイデイウム・サボリ
（Conichaetidium savoryi）IFO 30424、バツク
セラ・サーシナ（Backusella circina）IFO
9231、クラドボツリウム・アピキユラタム
（Cladobotyryum apiculatum）IFO 7795、クロ
リデイウム・クラミドスポリス（Choridium
chlamydosporis）IFO 7070、コルテイシウム・
ロルフシイ（Corticium rolfsii）IFO 30071、カ
ニングハメラ・エキヌラータ（Cunninghamella
echinulata）IFO 4441、シリシネラ・シンプレ
ツクス（Circinella simplex）IFO 6412、グリオ
クラデイウム・デリケセンス（Gliocladium
deliguescens）IFO 6790、グリオセフアロトリ
カム・シリンドロスポラム
（Gliocephalotrichum cylindrosporum）IFO
9326、エキノポドスポラ・ジヤマイセンシス
（Echinopodospora jamaicensis）IFO 30406、
ゲラシノスポラ・セレアリス（Gelasinospora
cerealis）IFO 6759、デイコトモミセス・セジピ
イ（Dichotomomyces cejpii）IFO 8396、ピク
ノポラス・コシニウス（Pynoporus coccineus）
IFO 9768、ネオサルトリア・オウラータ
（Neosartorya aurata）、ベニシリウム・ジヤン
シネラム（Penicillium janthinellum）IFO
4651、タムノステイラム・ピリフオルメ
（Thamnostylum piriforme）IFO 6117、チゴリ
ンカス・チエレリ（Zygorhynchus moelleri）
HUT 1305、モナスカス・アンカ（Monascus
anka）IFO 5965がある。 一方、光学活性(R)−３−ハロゲノ−１，２−プ
ロパンジオールのみを選択的に代謝し、(S)体を蓄
積させる場合には、微生物としてピキア
（Pichia）属、トリコスポロン（Trichosporom）
属、コリネバクテリウム（Corynebacteriun）属
に属する微生物を挙げることができる。更に詳し
くはピキア・フアリノーサ（Pichia farinosa）
IFO 1003、トリコスポロン・フアーメンタンス
（Trichosporon・fermentans）CBS 2264、コリ
ネバクテリウム・アセトアシドフイラム
（Corynebacterium acetoacidophilum）ATCC
21476がある。 上記の如き微生物を培養する為の培地組成とし
ては、通常これらの微生物が生育しうる培地なら
何でも使用しうる。たとえば炭素源としてグルコ
ース、シユークロース、マルトースなどの糖類；
エタノール、グリセロール、１，２−プロパンジ
オールなどのアルコール類；酢酸、乳酸などの有
機酸類、又はこれらの混合物、窒素源として硫酸
アンモニウム、リン酸アンモニウム、尿素、イー
ストエキス、肉エキス、ペプトンなど、他に無機
塩、微量金属塩、ビタミン類など通常の培養に用
いられる栄養源を適宜混合して用いることができ
る。 上記微生物の培養は常法によればよく、例えば
培地PHを4.0〜9.5の範囲とし、培養温度を20〜45
℃の範囲にて好気的に10〜96時間培養するのが好
ましい。 （Ｒ，Ｓ）−３−ハロゲノ−１，２−プロパン
ジオールに微生物を作用させて光学活性３−ハロ
ゲノ−１，２−プロパンジオールを得る方法とし
て、前記の如く培養した培養液あるいはこの培養
液から遠心分離なとによつて得られる菌体の懸濁
液に基質を添加する方法、あるいは培地に基質を
添加し、培養と反応を同時に行なう方法、常法に
より固定化した微生物を適当な緩衝液に懸濁した
ものに基質を添加する方法などがある。 反応温度は15〜50℃、反応PHは4.0〜10.0の範
囲で行なうことが好ましく、PHを保持する為に適
宜緩衝液などを用いることができる。反応液中の
基質濃度は0.1〜10（Ｗ／Ｖ）％が好ましく、基質
は初期に一括して加えてもよいし分割添加しても
よい。その際、反応液中にSH基含有化合物を添
加する。添加するSH基含有化合物の濃度は0.05
〜10（ｗ／ｖ）％が好ましく、添加方法としては
基質と一緒に初期に一括して加えてもよいし分割
添加してもよい。 反応は通常振盪あるいは撹拌しながら行ない、
反応時間は基質濃度・酵素量その他の反応条件な
どによつて変わるが、72時間以内で終了するよう
に条件を選択するのが好ましい。反応の停止は残
存基質をガスクロマトグラフイーなどで分析し、
基質が約50％消費された付近で止めるのが収率の
面で好ましい。 このようにして得られた光学活性３−ハロゲノ
−１，２−プロパンジオールを反応液から採取す
るには、一般な光学不活性な３−ハロゲノ−１，
２−プロパンジオールを採取する方法を用いるこ
とができる。たとえば反応液から菌体を遠心分離
などで除いた後、上清を適当に濃縮し、酢酸エチ
ルなどの溶媒で抽出する。抽出液を無水硫酸ナト
リウムなどで脱水後、減圧で溶媒を除去すると光
学活性３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオール
のシロツプを得ることができる。また蒸留により
更に精製してもよい。 （実施例） 以下実施例により本発明を具体的に説明する。 実施例 １ グリセロール ４％、（NH4）2HPO4 1.3％、
KH2PO4 0.7％、MgSO4・7H2O 800ppm、
ZnSO4・7H2O 60ppm、FeSO4・7H2O 90ppm、
CuSO4・5H2O 5ppm、MnSO4・4H2O 10ppm、
NaCl 100ppm、イーストエキス 0.3％からなる
培地を脱イオン水で作製し（PH7.0）、500ml坂口
フラスコに50mlずつ分注し、120℃で20分殺菌し
た。 上記培地にサツカロミコプシス・リポリテイカ
IFO 0717を接種し、30℃にて48時間振盪培養し
た。この培養液計150mlを遠心分離して菌体を進
め、水洗後、菌体を0.3Mリン酸緩衝液（PH7.0）
50mlに懸濁した液に（Ｒ，Ｓ）−３−クロロ−１，
２−プロパンジオールを0.5ｇ及び表１に示した
SH基含有化合物を0.15ｇ添加して30℃24時間振
盪しながら反応させた。 基質の分解率は反応液１mlを２mlの酢酸エチル
で抽出後、ガスクロマトグラフイーにて分析し、
測定した。 （条件） カラム長さ：50cm 充填剤：FAL−M6％ 担体：TENAX GC（Shimazu製） キヤリヤーガス：N2（22.5ml／min） カラム温度：175℃ 検出：FID 基質の保持時間：1.8min（３−クロロ−１，２−
プロパンジオール） 基質の保持時間：3.0min（３−ブロモ−１，２
−プロパンジオール）
パンジオールの製造法に関する。 光学活性３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ
ールは種々の医薬品や光学活性な生理活性物質の
合成原料として有用な物質である。たとえば(R)−
３−クロロ−１，２−プロパンジオールはＬ−カ
ルニチンの合成に利用されている（特開昭57−
165352）。 （従来の技術と問題点） (R)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオール
の製法に関しては、Hayden F.Jonesによりメチ
ル−５−クロロ−５−デオキシ−α−Ｌ−アラビ
ノフラノシドより得る方法〔ケミストリー・アン
ド・インダストリー（Chemistry and Industry）
P.538、15July、1978〕、又H.Jacksonらにより
１，２，５，６−ジアセトニル−Ｄ−マンニトー
ルより得る方法〔ケミストリー・アンド・バイオ
ロジカル・インターアクシヨンズ（Chem.−
Biol.Interactions）、13、193（1976）〕、同様にY.
Kawakamiらの方法〔ジヤーナル・オブ・オー
ガニツク・ケミストリー（Journal of Organic
Chemistry、47、3581（1982）〕などが知られてい
る。又(S)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ
ールの製法に関しては、H.F.Jonesによるメチル
−６−クロロ−６−デオキシ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシドより得る方法（西独特許第2743858号）、
Porter K.E.らによる１，２，５，６−ジアセト
ニル−Ｄ−マンニトールより得る方法〔Chem.−
Biol.Interactions.41、95（1982）〕などが知られ
ている。 しかしながらこれらの方法は原料物質が入手し
にくかつたり、工程が複雑であつたりして工業的
製法とはいいがたく、工業的に有利な光学活性３
−ハロゲン−１，２−プロパンジオールの製造が
望まれていた。 本発明者らは従来高価な原料を用い複雑な反応
によつて得ていた光学活性３−ハロゲノ−１，２
−プロパンジオールの工業的生産を目指して研究
した結果、安価な（Ｒ，Ｓ）−３−ハロゲノ−１，
２−プロパンジオールに微生物を作用させること
により(S)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ
ールを選択的に代謝させ、(R)−３−ハロゲノ−
１，２−プロパンジオールを残存させうること
（特願昭60−264568、特願昭61−000409）、又は(R)
−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオールを選
択的に代謝させ、(S)−３−ハロゲノ−１，２−プ
ロパンジオールを残存させうること（特願昭60−
264567）を既に見い出している。 （問題点を解決するための手段） 本発明者らは、微生物反応利用による光学活性
３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオールの生産
性をたかめるため鋭意研究した結果、SH基含有
化合物を反応液中に添加することにより基質濃度
を高め、生産性向上につなぎうることを見い出
し、本発明を完成するに至つた。 本発明に使用しうるSH基含有化合物としては
ジチオスレイトール、ジチオエリトリトール、グ
ルタチオン、システイン、メルカプトエタノー
ル、チオグリセリン、２，３−ジメルカプトプロ
パノール、チオ酢酸、ジメルカプトコハク酸、２
−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロ
ピオン酸、チオグリコール酸、tert−ブチルメル
カプタン、水硫化ナトリウム、水硫化カリウムな
どがある。 光学活性(S)−３−ハロゲノ−１，２−プロパン
ジオールのみを選択的に代謝し、(R)体を蓄積させ
る場合には、微生物としてブレタノミセス
（Brettanomyces）属、キヤンデイダ（Candida）
属、エンドミセス（Endomycea）属、ゲオトリ
カム（Geotrichum）属、ナドソニア
（Nadsonia）属、パシソレン（Pachysolen）属、
ロドスポリデイウム（Rhodosporidium）属、サ
ツカロミコプシス（Saccharomycopsis）属、ス
ポリデイオポラス（Sporidiobolus）属、トルロ
プシス（Torulopsis）属、バチルス（Bacillus）
属、エンテロバクター（Enterobacter）属、エ
シエリキア（Escherichia）属、クレブシエラ
（Klebsiella）属、アースロバクター
（Arthrobacter）属、アスペルギラス
（Aspergillus）属、ポーベリア（Beauveria）
属、カロネクトリア（Calonectoria）属、コニカ
エテイデイウム（Conichaetidium）属、バツク
セラ（Backusella）属、クラドボツリウム
（Cladobotryum）属、クロリデイウム
（Chloridium）属、コルテイシウム（Corticium）
属、カニングハメラ（Cunninghamella）属、シ
リシネラ（Ciricinella）属、グリオクラデイウム
（Gliocladium）属、グリオセフアロトリカム
（Gliocephalotrichum）属、エキノポドスポラ
（Echinopodospora）属、ゲラシノスポラ
（Gelasinospora）属、デイコトモミセス
（Dichotomomyces）属、ピクノポラス
（Pycnoporus）属、ネオサルトリア
（Neosartorya）属、ペニシリウム
（Penicillium）属、タムノステイラム
（Thamnostylum）属、チゴリンカス
（Zygorhynchus）属、モナスカス（monascus）
属に属する微生物を挙げることができる。更に詳
しくはブレタノミセス・クステリアヌス
（Brettanomyces custerianus）IFO 1585、キヤ
ンデイダ・ユーテイリス（Candida utilis）IFO
0626、エンドミセス・マグヌスイ（Endomyces
magnusii）CBS 164.32、ゲオトリカム・キヤン
デイダム（Geotrichum candidum）CBS
187.67、ナドソニア・エロンガータ（Nadsonia
elongata）IFO 0665、パシソレン、タンノフイ
ラス（Pachysolen tannophilus）IFO 1007、ロ
ドスポリデイウム・トルロイデス
（Rhodosporidium toruloides）IFO 0871、サツ
カロミコプシス・リポリテイカ
（Saccharomycopsis lipolytica）IFO 0717、ス
ポリデイオボラス・ジヨンソニイ
（Sporidiobolus johnsonii）IFO 6903、トルロプ
シス・グロツペンギエセリ（Torulopsis
gropengiesseri）IFO 0659、バチルス・セレウ
ス（Bacillus cereus）IFO 3001、エンテロバク
ター・アエロゲネス（Enterobacter aerogenes）
IFO 13534、エシエリキア・コリ（Escherichia
coli）IFO 12734、クレブシエラ・ニユーモニア
（Klebsiella pneumoniae）IFO 12009、アース
ロバクター・シンプレツクス（Arthrobacter
simplex）IFO 12069、アスペルギラス・フイク
ム（Aspergillus ficuum）IFO 4034、ボーベリ
ア・バシアナ（Beaveria bassiana）IFO 8554、
カロネクトリア・ヘデラ（Calonectria
hederae）、コニカエテイデイウム・サボリ
（Conichaetidium savoryi）IFO 30424、バツク
セラ・サーシナ（Backusella circina）IFO
9231、クラドボツリウム・アピキユラタム
（Cladobotyryum apiculatum）IFO 7795、クロ
リデイウム・クラミドスポリス（Choridium
chlamydosporis）IFO 7070、コルテイシウム・
ロルフシイ（Corticium rolfsii）IFO 30071、カ
ニングハメラ・エキヌラータ（Cunninghamella
echinulata）IFO 4441、シリシネラ・シンプレ
ツクス（Circinella simplex）IFO 6412、グリオ
クラデイウム・デリケセンス（Gliocladium
deliguescens）IFO 6790、グリオセフアロトリ
カム・シリンドロスポラム
（Gliocephalotrichum cylindrosporum）IFO
9326、エキノポドスポラ・ジヤマイセンシス
（Echinopodospora jamaicensis）IFO 30406、
ゲラシノスポラ・セレアリス（Gelasinospora
cerealis）IFO 6759、デイコトモミセス・セジピ
イ（Dichotomomyces cejpii）IFO 8396、ピク
ノポラス・コシニウス（Pynoporus coccineus）
IFO 9768、ネオサルトリア・オウラータ
（Neosartorya aurata）、ベニシリウム・ジヤン
シネラム（Penicillium janthinellum）IFO
4651、タムノステイラム・ピリフオルメ
（Thamnostylum piriforme）IFO 6117、チゴリ
ンカス・チエレリ（Zygorhynchus moelleri）
HUT 1305、モナスカス・アンカ（Monascus
anka）IFO 5965がある。 一方、光学活性(R)−３−ハロゲノ−１，２−プ
ロパンジオールのみを選択的に代謝し、(S)体を蓄
積させる場合には、微生物としてピキア
（Pichia）属、トリコスポロン（Trichosporom）
属、コリネバクテリウム（Corynebacteriun）属
に属する微生物を挙げることができる。更に詳し
くはピキア・フアリノーサ（Pichia farinosa）
IFO 1003、トリコスポロン・フアーメンタンス
（Trichosporon・fermentans）CBS 2264、コリ
ネバクテリウム・アセトアシドフイラム
（Corynebacterium acetoacidophilum）ATCC
21476がある。 上記の如き微生物を培養する為の培地組成とし
ては、通常これらの微生物が生育しうる培地なら
何でも使用しうる。たとえば炭素源としてグルコ
ース、シユークロース、マルトースなどの糖類；
エタノール、グリセロール、１，２−プロパンジ
オールなどのアルコール類；酢酸、乳酸などの有
機酸類、又はこれらの混合物、窒素源として硫酸
アンモニウム、リン酸アンモニウム、尿素、イー
ストエキス、肉エキス、ペプトンなど、他に無機
塩、微量金属塩、ビタミン類など通常の培養に用
いられる栄養源を適宜混合して用いることができ
る。 上記微生物の培養は常法によればよく、例えば
培地PHを4.0〜9.5の範囲とし、培養温度を20〜45
℃の範囲にて好気的に10〜96時間培養するのが好
ましい。 （Ｒ，Ｓ）−３−ハロゲノ−１，２−プロパン
ジオールに微生物を作用させて光学活性３−ハロ
ゲノ−１，２−プロパンジオールを得る方法とし
て、前記の如く培養した培養液あるいはこの培養
液から遠心分離なとによつて得られる菌体の懸濁
液に基質を添加する方法、あるいは培地に基質を
添加し、培養と反応を同時に行なう方法、常法に
より固定化した微生物を適当な緩衝液に懸濁した
ものに基質を添加する方法などがある。 反応温度は15〜50℃、反応PHは4.0〜10.0の範
囲で行なうことが好ましく、PHを保持する為に適
宜緩衝液などを用いることができる。反応液中の
基質濃度は0.1〜10（Ｗ／Ｖ）％が好ましく、基質
は初期に一括して加えてもよいし分割添加しても
よい。その際、反応液中にSH基含有化合物を添
加する。添加するSH基含有化合物の濃度は0.05
〜10（ｗ／ｖ）％が好ましく、添加方法としては
基質と一緒に初期に一括して加えてもよいし分割
添加してもよい。 反応は通常振盪あるいは撹拌しながら行ない、
反応時間は基質濃度・酵素量その他の反応条件な
どによつて変わるが、72時間以内で終了するよう
に条件を選択するのが好ましい。反応の停止は残
存基質をガスクロマトグラフイーなどで分析し、
基質が約50％消費された付近で止めるのが収率の
面で好ましい。 このようにして得られた光学活性３−ハロゲノ
−１，２−プロパンジオールを反応液から採取す
るには、一般な光学不活性な３−ハロゲノ−１，
２−プロパンジオールを採取する方法を用いるこ
とができる。たとえば反応液から菌体を遠心分離
などで除いた後、上清を適当に濃縮し、酢酸エチ
ルなどの溶媒で抽出する。抽出液を無水硫酸ナト
リウムなどで脱水後、減圧で溶媒を除去すると光
学活性３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオール
のシロツプを得ることができる。また蒸留により
更に精製してもよい。 （実施例） 以下実施例により本発明を具体的に説明する。 実施例 １ グリセロール ４％、（NH4）2HPO4 1.3％、
KH2PO4 0.7％、MgSO4・7H2O 800ppm、
ZnSO4・7H2O 60ppm、FeSO4・7H2O 90ppm、
CuSO4・5H2O 5ppm、MnSO4・4H2O 10ppm、
NaCl 100ppm、イーストエキス 0.3％からなる
培地を脱イオン水で作製し（PH7.0）、500ml坂口
フラスコに50mlずつ分注し、120℃で20分殺菌し
た。 上記培地にサツカロミコプシス・リポリテイカ
IFO 0717を接種し、30℃にて48時間振盪培養し
た。この培養液計150mlを遠心分離して菌体を進
め、水洗後、菌体を0.3Mリン酸緩衝液（PH7.0）
50mlに懸濁した液に（Ｒ，Ｓ）−３−クロロ−１，
２−プロパンジオールを0.5ｇ及び表１に示した
SH基含有化合物を0.15ｇ添加して30℃24時間振
盪しながら反応させた。 基質の分解率は反応液１mlを２mlの酢酸エチル
で抽出後、ガスクロマトグラフイーにて分析し、
測定した。 （条件） カラム長さ：50cm 充填剤：FAL−M6％ 担体：TENAX GC（Shimazu製） キヤリヤーガス：N2（22.5ml／min） カラム温度：175℃ 検出：FID 基質の保持時間：1.8min（３−クロロ−１，２−
プロパンジオール） 基質の保持時間：3.0min（３−ブロモ−１，２
−プロパンジオール）
【表】
特に効果のみられたチオグリセリン及び水硫化
カリウム添加区について、以下のフローにて精製
を行つた。 反応液を遠心分離により除菌し、上清を約10ml
まで濃縮し、30mlの酢酸エチルで３回（計90ml）
抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで脱水
し、減圧下で溶媒を除去したところシロツプが得
られた。このものの蒸留後、比旋光度を測定した
ところ以下の値が得られた。 〔ａ〕20 D＝−6.23° （ｃ＝2.0 H2O）……チオグ
リセリン添加区 〔ａ〕20 D＝−5.35° （ｃ＝2.0 H2O）……水硫化
カリウム添加区 (R)−３−クロロ−１，２−プロパンジオールの
文献値 〔ａ〕22 D＝−6.9° （ｃ＝2.0、H2O） このことよりSH基含有化合物を添加しても光
学活性の識別に影響を与えず、無添加系と同様に
(R)体の３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオール
が得られることが分かる。 実施例 ２〜40（ただし、６は欠番） 菌株を表２に示したものに変更した以外は実施
例１と同様の方法で実施し、ただし、17〜37は炭
素源としてグルコースを用いた。表２に示す結果
を得た（但し、SH基含有化合物としてチオグリ
セリンを用いた）。
カリウム添加区について、以下のフローにて精製
を行つた。 反応液を遠心分離により除菌し、上清を約10ml
まで濃縮し、30mlの酢酸エチルで３回（計90ml）
抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで脱水
し、減圧下で溶媒を除去したところシロツプが得
られた。このものの蒸留後、比旋光度を測定した
ところ以下の値が得られた。 〔ａ〕20 D＝−6.23° （ｃ＝2.0 H2O）……チオグ
リセリン添加区 〔ａ〕20 D＝−5.35° （ｃ＝2.0 H2O）……水硫化
カリウム添加区 (R)−３−クロロ−１，２−プロパンジオールの
文献値 〔ａ〕22 D＝−6.9° （ｃ＝2.0、H2O） このことよりSH基含有化合物を添加しても光
学活性の識別に影響を与えず、無添加系と同様に
(R)体の３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオール
が得られることが分かる。 実施例 ２〜40（ただし、６は欠番） 菌株を表２に示したものに変更した以外は実施
例１と同様の方法で実施し、ただし、17〜37は炭
素源としてグルコースを用いた。表２に示す結果
を得た（但し、SH基含有化合物としてチオグリ
セリンを用いた）。
【表】
【表】
【表】
【表】
なお、コニカエテイデイウム・サポリIFO
30424（実施例20）のチオグリセリン添加区の反応
液を用い、実施例１と同様の抽出・精製操作後、
比旋光度を求めたところ次の値が得られた。 〔ａ〕20 D＝−7.28° （ｃ＝2.0、H2O） 実施例 41〜80（ただし、46は欠番） 実施例１〜40と同様の菌株を用い、基質のみを
（Ｒ，Ｓ）−３−ブロモ−１，２−プロパンジオー
ルに変更し、実施例２〜40と同様の方法にて実施
し、表３に示す結果を得た（但し、SH基含有化
合物はチオグリセリンを用いた）。
30424（実施例20）のチオグリセリン添加区の反応
液を用い、実施例１と同様の抽出・精製操作後、
比旋光度を求めたところ次の値が得られた。 〔ａ〕20 D＝−7.28° （ｃ＝2.0、H2O） 実施例 41〜80（ただし、46は欠番） 実施例１〜40と同様の菌株を用い、基質のみを
（Ｒ，Ｓ）−３−ブロモ−１，２−プロパンジオー
ルに変更し、実施例２〜40と同様の方法にて実施
し、表３に示す結果を得た（但し、SH基含有化
合物はチオグリセリンを用いた）。
【表】
【表】
【表】
【表】
（発明の効果）
本発明によれば、光学活性３−ハロゲノ−１，
２−プロパンジオール生産において、仕込み基質
濃度があがり、生産性向上につながるという効果
が得られる。
２−プロパンジオール生産において、仕込み基質
濃度があがり、生産性向上につながるという効果
が得られる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 光学活性な(R)または(S)−３−ハロゲノ−１，
２−プロパンジオールを選択的に代謝する能力を
有するブレタノミセス（Brettanomyces）属、
キヤンデイダ（Candida）属、エンドミセス
（Endomyces）属、ゲオトリカム（Geotrichum）
属、ナドソニア（Nadsonia）属、パシソレン
（Pachysolen）属、ロドスポリデイウム
（Rhodosporidium）属、サツカロミコプシス
（Saccharomycopsis）属、スポリデイオボラス
（Sporidiobolus）属、トルロプシス
（Torulopsis）属、バチルス（Bacillus）属、エ
ンテロバクター（Enterobacter）属、エシエリ
キア（Escherichia）属、クレブシエラ
（Klebsiella）属、アースロバクター
（Arthrobacter）属、アスペルギラス
（Aspergillus）属、ボーベリア（Beauveria）
属、カロネクトリア（Calonectria）属、コニカ
エテイデイウム（Conichaetidium）属、バツク
セラ（Backusella）属、クラドボツリウム
（Cladobotryum）属、クロリデイウム
（Chloridium）属、コルテイシウム（Corticium）
属、カニングハメラ（Cunninghamella）属、シ
リシネラ（Ciricinella）属、グリオクラデイウム
（Gliocladium）属、グリオセフアロトリカム
（Gliocephalotrichum）属、エキノポドスポラ
（Echinopodospora）属、ゲラシノスポラ
（Gelasinospora）属、デイコトモミセス
（Dichotomomyces）属、ピクノポラス
（Pycnoporus）属、ネオサルトリア
（Neosartorya）属、ペニシリウム
（Penicillium）属、タムノステイラム
（Thamnostylum）属、チゴリンカス
（Zygorhynchus）属、モナスカス（Monascus）
属に属する微生物、またはピキア（Pichia）属、
トリコスポロン（Trichosporon）属、コリネバ
クテリウム（Corynebacterium）属に属する微生
物をラセミ体の（Ｒ，Ｓ）−３−ハロゲノ−１，
２−プロパンジオールに作用させ、残存する光学
活性３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオールを
採取するに際し、反応液中にSH基含有化合物を
添加することを特徴とする光学活性３−ハロゲノ
−１，２−プロパンジオールの製造法。 ２ SH基含有化合物が、ジチオスレイトール、
ジチオエリトリトール、グルタチオン、システイ
ン、メルカプトエタノール、チオグリセリン、
２，３−ジメルカプトプロパノール、チオ酢酸、
ジメルカプトコハク酸、２−メルカプトプロピオ
ン酸、３−メルカプトプロピオン酸、チオグリコ
ール酸、tert−ブチルメルカプタン、水硫化ナト
リウム、水硫化カリウムである特許請求の範囲第
１項記載の製造法。 ３ 残存する光学活性３−ハロゲノ−１，２−プ
ロパンジオールが(R)−３−ハロゲノ−１，２−プ
ロパンジオールである特許請求の範囲第１項又は
第２項記載の製造法。 ４ (R)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオー
ルが(R)−３−クロロ−１，２−プロパンジオール
である特許請求の範囲第３項記載の製造法。 ５ (R)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオー
ルが(R)−３−ブロモ−１，２−プロパンジオール
である特許請求の範囲第３項記載の製造法。 ６ 微生物がブレタノミセス・クステリアヌス
（Brettanomyces custerianus）、キヤンデイダ・
ユーテイリス（Candida utilis）、エンドミセ
ス・マグヌスイ（Endomyces magnusii）、ゲオ
トリカム・キヤンデイダム（Geotrichum
candidum）、ナドソニア・エロンガータ
（Nadsonia elongata）、パシソレン、タンノフイ
ラス（Pachysolen tannophilus）、ロドスポリデ
イウム・トルロイデス（Rhodosporidium
toruloides）、サツカロミコプシス・リポリテイ
カ（Saccharomycopsis lipolytica）、スポリデイ
オボラス・ジヨンソニイ（Sporidiobolus
johnsonii）、トルロプシス・グロツペンギエセリ
（Torulopsis gropengiesseri）、バチルス・セレ
ウス（Bacillus cereus）、エンテロバクター・ア
エロゲネス（Enterobacter aerogenes）、エシエ
リキア・コリ（Escherichia coli）、クレブシエ
ラ・ニユーモニア（Klebsiella pneumoniae）、
アースロバクター・シンプレツクス
（Arthrabacter simplex）、アスペルギラス・フ
イクム（Aspergillus ficuum）、ボーベリア・バ
シアナ（Beauveria bassiana）、カロネクトリ
ア・ヘデラ（Calonectria hederae）、コニカエテ
イデイウム・サボリ（Conichaetidium
savoryi）、バツクセラ・サーシナ（Backusella
circina）、クラドボツリウム・アピキユラタム
（Cladobotyryum apiculatum）、クロリデイウ
ム・クラミドスポリス（Chloridium
chlamydosporis）、コルテイシウム・ロルフシイ
（Corticium rolfsii）、カニングハメラ・エキヌラ
ータ（Cunninghamella echinulata）、シリシネ
ラ・シンプレツクス（Ciricinella simplex）、グ
リオクラデイウム・デリケセンス（Gliocladium
deliquescens）、グリオセフアロトリカム・シリ
ンドロスポラム（Gliocephalotrichum
cylindrosporum）、エキノポドスポラ・ジヤマイ
センシス（Echnopodospora jamaicensis）、ゲ
ラシノスポラ・セレアリス（Gelasinospora
cerealis）、デイコトモミセス・セジピイ
（Dichotomomyces cejpii）、ピクノポラス・コシ
ニウム（Pycnoporus coccineus）、ネオサルトリ
ア・オウラータ（Neosartorya aurata）、ペニシ
リウム・ジヤンシネラム（Penicillium
janthinellum）、タムノステイラム・ピリフオル
メ（Thamnostylum piriforme）、チゴリンカ
ス・モエレリ（Zygorhynchus moelleri）、モナ
スカス・アンカ（Monascus anka）である特許
請求の範囲第１項又は第３項記載の製造法。 ７ 残存する光学活性３−ハロゲノ−１，２−プ
ロパンジオールが(S)−３−ハロゲノ−１，２−プ
ロパンジオールである特許請求の範囲第１項又は
第２項記載の製造法。 ８ (S)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオー
ルが(S)−３−クロロ−１，２−プロパンジオール
である特許請求の範囲第７項記載の製造法。 ９ (S)−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオー
ルが(S)−３−ブロモ−１，２−プロパンジオール
である特許請求の範囲第７項記載の製造法。 １０ 微生物がピキア・フアリノーサ（Pichia
farinosa）、トリコスポロン・フアーメンタンス
（Trichosporon fermentans）、コリネバクテリ
ウム・アセトアシドフイラム（Corynebacterium
acetoacidophilum）である特許請求の範囲第１
項又は第７項記載の製造法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18116486A JPS6336798A (ja) | 1986-07-31 | 1986-07-31 | 光学活性３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ−ルの製造法 |
| CA000523224A CA1338723C (en) | 1985-11-25 | 1986-11-18 | Process for preparing 3-chloro-1,2-propanediol |
| US06/933,822 US5017484A (en) | 1985-11-25 | 1986-11-24 | Process for preparing 3-chloro-1,2-propanediol |
| EP86116371A EP0224246B1 (en) | 1985-11-25 | 1986-11-25 | Process for preparing 3-chloro-1, 2-propanediol |
| DE8686116371T DE3680187D1 (de) | 1985-11-25 | 1986-11-25 | Verfahren zur herstellung von 3-chlor-1,2-propandiol. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18116486A JPS6336798A (ja) | 1986-07-31 | 1986-07-31 | 光学活性３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ−ルの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6336798A JPS6336798A (ja) | 1988-02-17 |
| JPH0528117B2 true JPH0528117B2 (ja) | 1993-04-23 |
Family
ID=16096003
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18116486A Granted JPS6336798A (ja) | 1985-11-25 | 1986-07-31 | 光学活性３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ−ルの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6336798A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4197815B2 (ja) | 1999-11-29 | 2008-12-17 | ダイソー株式会社 | 微生物による（ｓ）−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオールの製法 |
-
1986
- 1986-07-31 JP JP18116486A patent/JPS6336798A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6336798A (ja) | 1988-02-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hirschbein et al. | Laboratory-scale enzymic/chemical syntheses of D-and L-. beta.-chlorolactic acid and D-and L-potassium glycidate | |
| JPH0516833B2 (ja) | ||
| EP0193113B1 (en) | Process for optically isomerizing optically active alpha-amino acid amides and process for producing optically active alpha-amino acids | |
| US6777224B2 (en) | Method for producing optically active mandelic acid derivatives | |
| EP0224246B1 (en) | Process for preparing 3-chloro-1, 2-propanediol | |
| US4981796A (en) | Manufacturing method of optically-active 1,2-diols | |
| JPH0528117B2 (ja) | ||
| Lin et al. | Continuous production of L-carnitine with NADH regeneration by a nanofiltration membrane reactor with coimmobilized L-carnitine dehydrogenase and glucose dehydrogenase | |
| JPH0475760B2 (ja) | ||
| Terasawa et al. | Living cell reaction process forl-isoleucine andl-valine production | |
| EP0089039B1 (en) | Process for producing d-beta-hydroxyalkanoic acid | |
| JPH0520072B2 (ja) | ||
| JPH0521557B2 (ja) | ||
| US5783427A (en) | Process for preparing D-amino acids | |
| JPH0669B2 (ja) | 光学活性（ｒ）−４−フエニル−２−ブタノ−ルの製造法 | |
| JP3029329B2 (ja) | 光学活性１，３−ブタンジオールの製造方法 | |
| JPS63237796A (ja) | 光学活性１−メチル−３−フエニルプロピルアミンの製造法 | |
| JPH0569512B2 (ja) | ||
| JP2784578B2 (ja) | 光学活性１，２−ジオール類の製造方法 | |
| JP3003966B2 (ja) | Ｄｌ−アラニンの製造法 | |
| JPH0616714B2 (ja) | 光学活性（ｓ）−４−フエニル−２−ブタノ−ルの製造法 | |
| JPS6332493A (ja) | 酵素法による光学活性α―ヒドロキシ酸の製造法 | |
| JP2670130B2 (ja) | ロドコッカス属細菌の培養方法及び該微生物を用いた２―ケト酪酸の製造方法 | |
| JPS6265687A (ja) | 光学活性（ｒ）−２−ハロ−１−フエニルエタノ−ルの製造法 | |
| JPH0468915B2 (ja) |