JPH0533034B2 - - Google Patents

Info

Publication number
JPH0533034B2
JPH0533034B2 JP61184687A JP18468786A JPH0533034B2 JP H0533034 B2 JPH0533034 B2 JP H0533034B2 JP 61184687 A JP61184687 A JP 61184687A JP 18468786 A JP18468786 A JP 18468786A JP H0533034 B2 JPH0533034 B2 JP H0533034B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
alginate lyase
alginic acid
earth metal
alkaline earth
xanthomonas
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP61184687A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS6339589A (ja
Inventor
Yukinori Nozaki
Yoshitaka Maki
Takenari Ooiwa
Takefumi Kobayashi
Suehiro Pponda
Kyoshi Kusai
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
NAGASE SEIKAGAKU KOGYO KK
Original Assignee
NAGASE SEIKAGAKU KOGYO KK
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by NAGASE SEIKAGAKU KOGYO KK filed Critical NAGASE SEIKAGAKU KOGYO KK
Priority to JP61184687A priority Critical patent/JPS6339589A/ja
Publication of JPS6339589A publication Critical patent/JPS6339589A/ja
Publication of JPH0533034B2 publication Critical patent/JPH0533034B2/ja
Granted legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/52Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts

Landscapes

  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕 本発明はアルギン酸のアルカリ土類金属塩をア
ルギン酸リアーゼの作用により分解する方法、特
に上記方法においてアルカリ土類金属キレート能
物質および/または界面活性剤の存在下に行なう
アルギン酸のアルカリ土類金属塩の分解の改良方
法に関する。 〔従来の技術〕 アルギン酸リアーゼは、アルギン酸およびその
塩に作用してそれらを分解し、低分子化させる酵
素である。 アルギン酸およびその塩は多くの用途に使用さ
れている。例えば経糸剤、食品加工、塗料、歯科
印象材等にその用途が開かれている。そしてこれ
らの用途においてはアルギン酸および/またはそ
の塩は使用後これを除去する必要があることがあ
る。 例えば歯科印象材のアルギン酸カルシウムゲル
は使用後、トレイ等からこれらを除去しなければ
ならない。かかる場合従来はエチレンジアミン四
酢酸(EDTA)などのキレート能物質を主成分
とする溶解液を用い、化学的にアルギン酸およ
び/またはその塩を可溶化させている。しかしな
がらEDTAは金属を腐蝕する作用があり、基材
を損傷することがあるので好ましくない。またク
エン酸またはリン酸の如き酸あるいはそれらの塩
を用いてアルギン酸および/またはその塩のゲル
除去をする方法もあるが、これらはその溶解作用
が弱いため効率的でない。 上述した化学的方法に代るものとしてアルギン
酸リアーゼを使用した例としてはアルギン酸を分
解するアルギン酸リアーゼの力価測定方法が知ら
れている(例えばメソツズ・イン・エンジモロジ
ー第8巻第641頁〜第644頁、1966年、参照)。 アルギン酸リアーゼは上述した化学的方法と異
なり、アルギン酸および/またはその塩にのみ作
用して、これを分解し、低分子化して除去を容易
にすると共に、アルギン酸および/またはその塩
が適用された他の材料を損うことがないので非常
に有利である。 かかるアルギン酸リアーゼを生産する微生物と
してはシユウドモナス属(ジヤーナル・オブ・バ
イオケミストリー、第66巻第503頁〜第512頁、
1969年)、エーロモナス属(科学と工業、第43巻
第213頁〜第218頁、1969年)、クレブシエラ属
(カルボハイドレイド・リサーチ、第59巻、第163
頁〜第171頁、1977年)、およびバシラス属(アプ
ライド・エンド・エンビロメンタル・マイクロバ
イオロジイ、第47巻第704頁〜第709頁)等の微生
物が知られている。 〔発明が解決しようとする問題点〕 アルギン酸リアーゼは上述した化学的方法に比
してアルギン酸および/またはその塩を分解する
のに有利なのであるが、その分解能力、特に分解
速度において未だ充分とはいえず、特にアルギン
酸のアルカリ土類金属塩を分解する場合には分解
速度の向上が望まれているのが現状である。 従つて本発明の目的はアルギン酸リアーゼによ
るアルギン酸のアルカリ土類金属塩の分解速度を
向上させる改良法を提供することにある。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明はアルギン酸のアルカリ土類金属塩をア
ルギン酸リアーゼの作用により分解するに当り、
アルカリ土類金属キレート能物質および/または
界面活性剤の存在下に行なうアルギン酸のアルカ
リ土類金属塩を分解する方法にある。 本発明方法で使用するアルギン酸リアーゼはそ
の起源は特に限定されるものではなく、前述した
公知の例えばシユードモナス属、エーロモナス
属、クレブシエラ属およびバシラス属等の微生物
を公知の方法で培養することによつて得られるア
ルギン酸リアーゼを使用できる。 また本発明者によつて新たに見出されたキサン
トモナス属(Xanthomonas)に属するアルギン
酸リアーゼ生産菌を培養し、この培養物より採取
したアルギン酸リアーゼも使用でき、これはその
生産量が大ですぐれているので好ましい。このキ
サントモナス属の微生物からのアルギン酸リアー
ゼを製造する方法は本願と同日付にて出願した特
許出願(特開昭63−39581号)に記載されている。
よつて同特許出願明細書の記載はここに引用して
組入れるものとする。 上記キサントモナス属に属する微生物はアルギ
ン酸リアーゼを培養物中に著量生産することがで
きるので有利である。これについて以下に更に説
明する。 かかる菌株としては、キサントモナス属に属す
るアンギン酸リアーゼ生産能を有する菌株であれ
ばいかなる菌株でもよく、またそれらの変異株で
もよい。そしてキサントモナス属に属し、アルギ
ン酸リアーゼ生産能を有する菌株の具体例として
は、例えばキサントモナス・エスピーN−26
(Xanthomonas spN−26)を挙げることができ
る。本菌株は京都府福知山市内の畑地の土壌より
分離された。本菌株の菌学的性質は次のとおりで
ある。 a 形態的性質 顕微鏡的観察(肉汁液体培地で30℃で培養) (1) 細胞の形および大きさ:通常細胞の大きさは
4〜5μm×0.6〜0.7μm。 (2) 細胞の多形性の有無:なし、単独である。 (3) 運動性の有無:有、極鞭毛を有する。 (4) 胞子の有無:なし。 (5) グラム染色性:陰性。 b 各培地における生育状態 (1) 肉汁寒天平板培養: 30℃48時間の培養で、直径2〜5mmの凸円形コ
ロニーを形成する。表面は滑らかでやや黄色。 (2) 肉汁寒天斜面培養: 30℃の培養で糸状、周縁は滑らかで光沢があ
り、生育は普通。 (3) 肉汁液体培養: 30℃の培養で24時間で生育し、生育は普通。 (4) 肉汁ゼラチン穿刺培養: 30℃の培養で24時間で生育し、生育は普通。液
化は漏斗状。 (5) リトマスミルク培養: 30℃の培養で凝固せず、色調は青紫色で変化な
し。 c 生理学的性質 (1) 硝酸塩の還元:陰性 (2) 脱窒反応:陰性 (3) MRテスト:陽性 (4) VPテスト:陰性 (5) インドールの生成:陰性 (6) 硫化水素の生成:陽性 (7) 澱粉の加水分解:陽性 (8) 栄養要求性:メチオニン (9) クエン酸の利用:陽性 (10) 無機窒素源の利用:陽性 (11) ウレアーゼ:陰性 (12) オキシダーゼ:陰性 (13) カタラーゼ:陽性 (14) 生育PH:5〜10 (15) 生育温度:15〜40℃ (16) 酸素に対する態度:好気的 (17) O−Fテスト:酸化的 (18) 糖類からのガスの生成:陽性 (19) 糖類からの酸の生成: 陽性;マルトース、レブロース、ラクトース、グ
ルコース、セロビオース、フラクトース、シユ
クロース、サリシン 陰性;ソルビトール、キシロース、アラビノー
ス、アントール、ガラクトース、ラムノース、
ラフイノース、イノシトール 以上の諸性質を「バージーズ・マニユアル・オ
ブ・デタミネイテイブ・バクテリオロジイ」第8
版(1974年)より検索するとキサントモナス・キ
ヤンベストリスと類似していることが分かつた
が、糖類からの酸の生成などにおいて異なつてい
るのでキサントモナス属の新種と判断しキサント
モナス・エスビーN−26と命名した。なお本菌株
は工業技術院微生物工業技術研究所に微生物受託
番号微工研菌寄第8800号として寄託されている。 本菌株は微生物の培養に通常用いられる栄養物
たとえば肉エキス、ペプトン、酵母エキス、麦芽
エキス、コーンスチープリカー、カザミノ酸など
にアルギン酸およびアルギン酸の塩を0.01〜2
%、好ましくは0.1%〜1%を加えた培地で20℃
〜40℃、好ましくは27℃〜36℃の好気的条件で良
好に増殖し、培養5〜40時間でアルギン酸リアー
ゼを生産する。 本発明の菌によつて生産されたアルギン酸リア
ーゼは菌体内に存在するので菌体からのアルギン
酸リアーゼの抽出はビーズや超音波を用いた細胞
破砕、有機溶媒抽出などが使用できるが好ましく
は以下の方法で行なう。アルギン酸リアーゼを生
産し菌体内に蓄積した菌体を遠心等によつて集め
緩衝液に分散させた液、あるいは菌体を含んだ培
養液に、界面活性剤たとえばトリトンX−100を
0.01%〜5%、好ましくは0.05%〜2%を加え
る。この時リゾチームを0.001〜10mg/ml、好ま
しくは0.01〜1mg/ml加えると抽出効果が良くな
る。処理後、添加量や菌体濃度によつても異なる
が、1分〜5時間放置したのち凝集剤による凝
集、遠心などにより菌体残さを除去すると粗酵素
液を得ることができる。本発明で使用される上記
アルギン酸リアーゼは上記の粗酵素液に限定する
ものではなく粗酵素液の処理物たとえば有機溶媒
沈殿、塩析、クロマトグラフイーなどの公知の方
法で精製した酵素液および、それらの乾燥物、固
定化物さらには細胞懸濁液でもよい。 次に上記のキサントモナス・エスビーN−26よ
り得られるアルギン酸リアーゼの酵素化学的およ
び理化学的性質は次のとおりである。 (1) 作用:アルギン酸を基質として反応させた
時、アルギン酸リアーゼの反応生成物である二
重結合に由来する235nmの特異吸収の増加が確
認された。 (2) 基質特異性:
【表】 (3) 至適PHおよび安定PH範囲: PH6.1付近に至適PHを示す(第1図参照) PH5.5〜6.5にて安定(第2図参照) (4) 至適温度および熱安定性: 至適温度は50℃付近である(第3図参照) 熱安定性は40℃付近まで安定(第4図参照) (5) 阻害、活性化
【表】 (6) 安定化(45℃、30分処理)
〔作用〕
本発明により、理論的には不明であるがアルギ
ン酸リアーゼと共に、アルカリ土類金属キレート
能物質および/または界面活性剤を使用すると、
従来のアルギン酸リアーゼ単独使用の場合に比し
て、アルギン酸のアルカリ土類金属塩の分解反応
速度が大となり、更に他の共存する材料を腐蝕等
により損うことがない。 〔実施例〕 以下に実施例を挙げて本発明を説明する。 実施例 1 歯科用印象剤ブロツク(2.5×2.5×2.5cm19.5
g)を、PH6.3に調整したアルカリ土類金属キレ
ート能物質および/または界面活性剤を含むアル
ギン酸リアーゼ水溶液にて30℃、20時間、静置反
応させた。溶け残つたブロツクの重さを天秤にて
測定し、下記式により溶解した印象剤ブロツクの
割合(溶解率(%))にてその効果を判定した。
ただし、PH調整はNaH2PO4水溶液にて実施し
た。その結果を表2に示す。 溶解率(%)=19.5g−溶け残つたブロツクの重さ
/19.5×100(%)
〔発明の効果〕
アルギン酸のアルカリ土類金属塩を分解する
時、アルギン酸リアーゼとアルカリ土類金属キレ
ート能物質および/または界面活性剤を併用する
ことにより、従来の分解剤に比較して器材の腐蝕
をおこさないばかりでなく、アルギン酸のアルカ
リ土類金属塩を分解する時、分解力の大幅な増
強、効率化が可能になつた。
【図面の簡単な説明】
第1図はキサントモナス・エスピーN−26より
得られたアルギン酸リアーゼの各PHにおける活性
を表わすグラフであり、第2図は各PHにおける30
℃、1時間処理によるPH安定性を表わすグラフで
あり、第3図は各温度における活性を表わすグラ
フであり、第4図は各温度における10分間処理に
よる熱安定性を示すグラフである。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 1 アルギン酸のアルカリ土類金属塩をアルギン
    酸リアーゼの作用により分解するに当り、アルカ
    リ土類金属キレート能物質および/または界面活
    性剤の存在下に行なうことを特徴とするアルギン
    酸のアルカリ土類金属塩を分解する方法。
JP61184687A 1986-08-06 1986-08-06 アルギン酸のアルカリ土類金属塩を分解する方法 Granted JPS6339589A (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP61184687A JPS6339589A (ja) 1986-08-06 1986-08-06 アルギン酸のアルカリ土類金属塩を分解する方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP61184687A JPS6339589A (ja) 1986-08-06 1986-08-06 アルギン酸のアルカリ土類金属塩を分解する方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS6339589A JPS6339589A (ja) 1988-02-20
JPH0533034B2 true JPH0533034B2 (ja) 1993-05-18

Family

ID=16157614

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP61184687A Granted JPS6339589A (ja) 1986-08-06 1986-08-06 アルギン酸のアルカリ土類金属塩を分解する方法

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JPS6339589A (ja)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0634690B2 (ja) * 1989-05-18 1994-05-11 株式会社紀文食品 アルギン酸類飲料及びその製造法
EP2081964A4 (en) * 2006-10-12 2012-07-11 Univ Johns Hopkins ALGINATE AND ALGINATLYASE COMPOSITIONS AND USE METHOD
CN116323936A (zh) * 2020-10-29 2023-06-23 宝洁公司 包含藻酸盐裂解酶的清洁组合物

Also Published As

Publication number Publication date
JPS6339589A (ja) 1988-02-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
IE862776L (en) 2-keto-2-gulonic acid production
JP2001037469A (ja) エピクロロヒドリンの微生物分解
JP2926249B2 (ja) アルギン酸リアーゼの製造法
JP2002233395A (ja) 補酵素nadhの再生方法
JPS6339589A (ja) アルギン酸のアルカリ土類金属塩を分解する方法
JP3514799B2 (ja) リパーゼ及びこれを産生する微生物
EP0206595B1 (en) Thermally stable tryptophanase process for producing the same, and thermally stable tryptophanase-producing microorganism
JP3085783B2 (ja) 光学活性な2−フェニルプロピオン酸および2−フェニルプロピオンアミドの製造法
US5496715A (en) Process for preparing indigo
JPH0440988B2 (ja)
JP3529173B2 (ja) 新規な寒天分解酵素及びそれを用いるネオアガロビオースの製造法
JPS6015312B2 (ja) 新規なリパ−ゼの製造法
JPH0753104B2 (ja) 細菌の培養法
JPH0515387A (ja) 細菌によるアルギン酸の分解法
JP3160384B2 (ja) ピロール−2−カルボン酸脱炭酸酵素およびその製法
JPH0797987B2 (ja) 新規なβ−アガラーゼ及びその製造法
JP4366132B2 (ja) N−置換ホルムアミド類の加水分解酵素
JP3873512B2 (ja) D−3−(2−ナフチル)アラニンの製造方法
JP2901458B2 (ja) ゲンチアノースの製造方法
JP2676741B2 (ja) 新規微生物
JP3858065B2 (ja) 新規n−アセチルキトオリゴ糖デアセチラーゼ及びその製造法
JPS62201571A (ja) 新規キトサナ−ゼ生産菌
KR960007741B1 (ko) 신규 α-1, 6-글루코시다제 및 그의 제조방법
JPH06261776A (ja) 酵素法によるインジゴの製造方法
JPH06261777A (ja) 酵素法によるインジゴの製造方法